2020/07/31 11:48
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产品配置单:
微芯片电泳系统
型号: MCE-202 MultiNA
产地: 日本
品牌: 岛津
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方案详情:
随着基因组编辑技术的出现,对靶基因进行特异性破坏或者引入靶基因已经很容易。
确认基因组编辑结果时,需要确认靶基因上是否存在突变。最可靠的方法是直接分析序列,但是当对多个样本进行验证时这种方法成本很高。有一种简易方法是,通过电泳分析野生型和突变型的异源双链体,并利用同源双链体与异源双链体之间的迁移率差异进行确认(异源双链体迁移率分析:HMA法)。该方法作为一种可以通过使用全自动电泳装置轻松确认基因组编辑结果的工具得到了普及。
但是,使用HMA法时,如果多碱基(1~5 bp)存在差异,则会抵消同源双链体和异源双链体的立体结构形成的迁移率差异,存在无法确认编辑结果的情况。在这种情况下可以使用的是一种被称为T7 Endonuclease I或Cel1酶的方法。上述酶具有识别和切割双链DNA错配的活性。普遍认为还可以识别多碱基的错配,对检测使用HMA等无法检测的突变是有效的。在这里为您介绍使用微芯片电泳系统简便、快速地检测T7 Endonuclease I导致错配的切割实例。
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