2022/11/05 21:11
阅读:152
分享:方案摘要:
产品配置单:
赛多利斯 Incucyte® S3 活细胞分析仪
型号: Incucyte S3
产地: 美国
品牌: 赛多利斯
面议
参考报价
联系电话
赛多利斯 Octet® R4 生物分子相互作用分析系统
型号: Octet® R4
产地: 美国
品牌: 赛多利斯
面议
参考报价
联系电话
方案详情:
Sotorasib
发现新抗体
与其他肿瘤药物一样,Sotorasib也会产生药物耐受性!为了解决耐药性问题,Sotorasib发明人之一加州大学旧金山分校Kevan Shokat博士,又找到了另外一个针对K-Ras突变的小分子ARS1620。ARS1620同样可以靶向K-Ras(G12C),阻止肿瘤的生长。除此之外,ARS1620与突变的K-Ras蛋白结合的一段多肽会被癌细胞呈递到细胞表面。所以,该课题组找到了另外一个针对该多肽的抗体P1A4,用于和ARS1620的联合疗法,该成果也被发表在近期的Cancer Cell杂志上(IF=31.7)[1]。
顶尖的实验室必定需要顶尖设备的加持 ,这篇成果同时使用到了Sartorius的Octet® 非标记分子互作系统和Incucyte® 实时活细胞分析系统。
联合疗法示意图:ARS1620可以共价结合K-Ras突变体的G12C位点,被溶酶体降解后,小分子和多肽的复合物可以被MHC I递呈,并被抗体结合。
抗体-递呈多肽亲和力检测
Octet® 非标记分子互作系统因为其使用的便捷性和数据准确性,是被美国药典认可的亲和力检测标准(点击了解更多)。用其筛选出一个Fab,与药物多肽二重复合物的亲和力和与药物多肽MHC分子三重复合物的亲和力类似,都可以与两者比较强的结合。基于该Fab做出了抗CD3和抗该小分子/多肽的双特异性抗体P1A4。
Octet® Red 384(现为Octet® RH16)数据,用链霉亲和素传感器固化多肽,或者多肽MHC复合物,与抗体进行结合解离。
该文中有大量候选抗体与多肽,多肽/MHC复合物的Octet® 亲和力检测数据,在此不一一罗列。Octet® 提供多种通量的仪器,本文使用的是16通道高通量仪器,非常适合用于基于亲和力的药物筛选。
细胞增殖与免疫细胞杀伤实验
双特异性抗体P1A4抗体同时结合效应细胞上的CD3和K-Ras突变的肿瘤细胞,达到精确免疫治疗的目的。K-Ras突变的SW1573细胞系耐受单独的小分子药物,但是用双特异抗体/小分子联合疗法后,仍然对其有良好的杀伤作用。使用Incucyte® 进行实时活细胞成像分析,并计算药物的IC50以及免疫细胞的杀伤效果。查看Incucyte® 介绍。
Incucyte® 计算72小时的细胞增殖,每2个小时拍摄一次,使用Incucyte® Nuclight 慢病毒转染试剂盒转染靶细胞,使其带有红色荧光。计算红色荧光细胞数量。
使用Incucyte® Nuclight 慢病毒转染试剂盒转染靶细胞,使其带有红色荧光。然后加入免疫细胞PBMC,加入小分子/抗体,或者只加入小分子。用Incucyte®计算72小时的细胞增殖,每2个小时拍摄一次,计算红色荧光细胞数量。
Incucyte® 进行活细胞成像后的培养完毕的细胞,进行处理然后用流式细胞仪检测T细胞的活化。发现联合疗法的T细胞明显发生了活化。
Summary
为何选择Incucyte® 实时活细胞分析系统?
培养箱内可长达数周的连续观察,最短几分钟间隔拍摄,减少人力,防止过多操作对细胞的伤害;本文做了共计3天杀伤实验,每隔2小时自动拍摄。而且克服了终点法(比如流式)的细胞处理过程带来的繁琐操作和细胞活性丧失等问题。
6个板位,分别独立设置检测程序,可以兼容各种孔板和培养皿,通量高;这篇文章有各种免疫抑制剂、效靶比等实验组,Incucyte® 一次可以完成所有实验组实验。
高效简便的模块化软件设置和数据分析,输出图片、视频、生长曲线等多指标多参数;本文主要用IC50计算等功能。
大于100种优化过的荧光试剂和耗材及详尽的Protocol,本文用了Incucyte® 配套的慢病毒转染试剂。
如果您也不想再把细胞拿进拿出的拍摄,来试试Incucyte® 实时活细胞分析系统吧!
如果想在短时间内获得更精确的亲和力结果,来试试Octet® 非标记分子互作系统吧!
下载文档
《实时活细胞分析开启免疫细胞杀伤实验新格局》
-参考文献-
[1] A covalent inhibitor of f(G12C) induces MHC class I presentation of haptenated peptide neoepitopes targetable by immunotherapy. 2022, Cancer Cell 40, 1060–1069
下载本篇解决方案:
更多
生物干涉层技术应用文集
Octet采用无流路,实时检测的方式,实现了高通量,高精度,低成本的检测,更好的支持了研究人员的基础研究与成果转化。反过来研究人员基于Octet?的灵活性,也不断开发出新的检测应用和方法,更加快速和深入的研究分子作用的机理,探索生命的奥秘!
生物产业
2022/11/14
为医疗器械量身打造的质量控制解决方案
赛多利斯拥有超过150年值得信赖的服务,并经过验证具有创新、高质量和可靠性,精密称量、超纯水、过滤等多个系统的协力合同,可在工艺开发、原料测试等多个环节实现简单可靠的质量控制。
医疗/卫生
2022/11/05