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即插即用超滤“神器”!抗体、递送载体和病毒全搞定

赛多利斯

2024/09/12 18:39

阅读:6

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在生物医药研究和生产领域,超滤技术一直扮演着举足轻重的角色。它在抗体、递送载体和病毒等生物大分子的浓缩、纯化和缓冲液置换中起着关键作用。然而,传统的超滤方法常常让人头疼,不仅操作复杂、耗时,而且样品回收率也不理想。



为了解决这些问题,设计独特的切向流超滤神器Vivaflow® 应运而生,为研究者们带来了福音,让超滤过程变得前所未有的简单、快速,并且回收率和浓缩倍数都显著提高!

Vivaflow®超滤膜包的设计独具匠心,即插即用、安装简便,与标准蠕动泵完美兼容。不到一分钟,您就可以轻松完成安装,开始享受超滤的高效与便捷。

Vivaflow®以其卓越的超滤效果和高回收率在业界享有盛誉。它在抗体浓缩、病毒研究以及热门递送载体研究等领域取得了广泛的成功应用。

Vivaflow®


抗体浓缩方面的应用

英国Bioserv公司创新中心的科学家们使用30kd Vivaflow® 200对杂交瘤细胞培养上清液进行浓缩,回收率可达98%以上,并能在2小时内将3,000ml细胞上清样品浓缩10倍。他们已将Vivaflow®作为SOP的一部分整合入Workflow,并建立了系统的方法,使其对不同的IgG亚群(如小鼠IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3等)均能达到98%以上的回收率1

     

图1: 超滤体积和超滤速度随时间变化的函数示例

Vivaflow®


药物递送载体方面的应用

在药物递送载体的制备中,Vivaflow®同样大放异彩。无论是石墨烯、纳米颗粒、细胞外囊泡、脂质体还是胶束,Vivaflow®都能提供高效的超滤解决方案。

由于具有超高表面积和功能,石墨烯非常适用于基因和药物递送。在氧化石墨烯(GO)生产之后需要洗涤以中和并去除杂质。传统的离心方法既费力又费时。采用Vivaflow® 50(100 kDa MWCO)洗涤氧化石墨烯分散体可以快速中和pH值。与常规离心相比,采用TFF时所需的时间显著缩短且氧化石墨烯回收率最高达到97%7

       
       

图2. 

图3.

使用Vivaflow®对纳米颗粒、细胞外囊泡、脂质体及胶束等递送载体进行超滤,以实现浓缩和纯化,效果显著。优质的纯化过程能够获得适合体内应用的等渗条件,防止聚集或凝聚,并去除游离毒性药物、配体或其他可能引发副作用的基质。而高效的浓缩则有助于调整药物中的药用活性成分含量,从而达到预期治疗或诊断效果。

载体类型

Vivaflow®

MWCO

超滤用途

参考文献

细菌外膜囊泡

Vivaflow® 200

100 kDa

缓冲液置换和浓缩

2,3

脂质体

Vivaflow® 50

100 kDa

去除游离药物

4

固体脂质纳米颗粒

Vivaflow® 50

100 kDa

纯化

5

基于聚合物的疏水性药物胶束

Vivaflow®

未披露

去除表面活性剂

6

Vivaflow®


病毒浓缩方面的应用

Vivaflow®在病毒浓缩方面的应用同样令人瞩目。其超滤浓缩效果几乎不受病毒颗粒的化学性质和结构影响。由于病毒的大小约为20nm至数百纳米,远大于最大的蛋白复合物,因此大多数病毒均可稳定地被高达1000kDa的大孔径MWCO膜所保留。当然,理想的超滤膜规格取决于具体应用目的。以下几个案例显示Vivaflow®膜包在不同研究领域、不同应用目的及不同病毒样品中都取得了显著的成功。

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研究目的

病毒类型

宿主

过滤目的
(缓冲液系统)

Vivaflow®装置
(MWCO)

后续步骤

参考文献

基因治疗

5型腺病毒,VLP

缓冲液置换(20 mM Tris盐水缓冲液)

Vivaflow®(100 kDa)

色谱分析(FPLC):Sartobind STIC膜层析

8

感染期间中和抗体的潜在靶点研究

人冠状病毒HCoV-NL63刺突糖蛋白三聚体

浓缩果蝇S2澄清细胞培养上清液中的重组HCoV-NL63病毒

Vivaflow®, PES(10 kDa)

亲和纯化

9

研究宿主基因组整合

噬病毒体(virophage mavirus)

咖啡厅洛博金斯虫(Cafeteriaroenbergensis)

使用0.2 μm膜包澄清,100 kDa膜包浓缩(咖啡厅洛博金斯虫, f/2 培养基)

Vivaflow® 200(0.2 μm and 100 kDa)

CsCl梯度,电子显微镜

10

进行病毒分类

MpRNAV-01B

细小微胞藻

收获和浓缩全细胞裂解物

Vivaflow® 200, Vivaspin®(30 kDa)

对新病毒进行分类:基因组、蛋白质、稳定性等

11

分析地下水中的病毒含量

一组致病性病毒

浓缩饮用水样品(饮用水)

Vivaflow® 200(10 kDa)

采用RT-巢式PCR和微量滴定中和试验进行定性分析(肠道病毒)

12

最后,让我们一起来看看Vivaflow®热销型号,它们各具特色,满足您不同的实验需求。Vivaflow®超滤家族提供从一次性超滤膜包到重复型超滤膜包,规格范围从2,000 MWCO到1000,000 MWCO、以及0.22μm,确保为您的各种应用提供最合适的选择。

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货号

系列

描述

包装规格

VF05P2

Vivaflow50

一次性超滤膜包50cm2 30,000 MWCO PES

2 块

VF05P4

Vivaflow50

一次性超滤膜包50cm2 100,000 MWCO PES

2 块

VF20H4

Vivaflow200

重复型超滤膜包200cm2 100,000 MWCO HYDROSART

1 块

VF20H2

Vivaflow200

重复型超滤膜包200 cm2 30,000 MWCO HYDROSART

1 块

VF20P2

Vivaflow200

重复型超滤膜包200 cm2 30,000 MWCO PES

1 块

VF20P4

Vivaflow200

重复型超滤膜包200 cm2 100,000 MWCO PES

1 块

VF05H2

Vivaflow50R

重复型超滤膜包50 cm2 30,000 MWCO Hydrosart

1 块

VF05H4

Vivaflow50R

重复型超滤膜包50 cm2 100,000 MWCO Hydrosart

1 块

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-参考文献-

Mike Brownleader*, Ian Phillips, Andy Wright,: Vivaflow® 200: A critical sample preparation tool for concentrating hybridoma supernatants. Sartorius application note, September 21, 2017

Bogomolny, E. et al.:Analysis of bacteria-derived outer membrane vesicles

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Prado, J. M. D., Antoranz, J. R. C., Barroeta, M. Á. E.,Barroeta, B. E. & Diaz, M. C.:Liposomal formulations. (2009).

Neves, A. R., Queiroz, J. F. & Reis, S.:Brain-targeted delivery of resveratrol using solid lipid nanoparticles functionalized with apolipoprotein E. J. Nanobiotechnology 14, 27 (2016).

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Fischer, M. G. & Hackl, T. Host genome integration and giant virus-induced reactivation of the virophage mavirus. Nature 540, 288–291 (2016).

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Masciopinto, C. et al. Unsafe tap water in households supplied from groundwater in the Salento Region of Southern Italy. J. Water Health 5, 129–148 (2007).

   

 

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