您好,欢迎访问仪器信息网
注册
赛默飞色谱与质谱

关注

已关注

钻石23年 钻石

已认证

粉丝量 0

400-611-9236

仪器信息网认证电话,请放心拨打

当前位置: 赛默飞色谱与质谱 > 解决方案 > 氨基酸直接分析法原理及应用

氨基酸直接分析法原理及应用

2005/12/08 12:11

阅读:7018

分享:
应用领域:
发布时间:
2005/12/08
检测样品:
检测项目:
浏览次数:
7018
下载次数:
参考标准:

方案摘要:

提 要 本文介绍一种新型氨基酸分析方法—离子交换色谱-积分脉冲安培法(HPIC-IPAD),详细讨论方法的原理和应用,该方法与传统方法比较,无须进行柱后或柱前衍生反应,对氨基酸可以直接进行分析,灵敏度高,大多数氨基酸的最小检测限均小于1pmol,线性范围可以达到3个数量级以上。 关键词:氨基酸,离子交换色谱-积分脉冲安培法 1 前言 较为经典的氨基酸分析方法是阳离子交换分离, 柱后衍生反应,紫外分光或荧光检测[1]。常用的衍生试剂有茚三酮(Ninhydrin)和邻苯二甲醛(OPA)。此外还有柱前衍生-反相分离,衍生试剂有AQC(6-aminoquinolyl-N-hydroxy-succinimidyl-carbamate),FMOC(9-fluorenylmethylchloroformate),Dabsyl(4-di-methylamino-azobenzene sulfonylchloride),Dansyl等。这些方法的缺点是操作复杂和影响因素多,如柱后衍生需要柱后衍生反应的附加装置和衍生试剂;柱前衍生虽然克服了柱后衍生的一些缺点,但存在氨基酸衍生物的不稳定,衍生反应的副产物和试剂本身干扰等缺点[2]。本文将讨论的美国Dionex公司新近推出的氨基酸直接分析方法是基于阴离子交换分离,积分脉冲安培法检测,无需将待测氨基酸转变成可被检测的化合物的衍生反应。 2 方法原理 2.1 阴离子交换分离 迄今为止,自然界中已发现180多种氨基酸,其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种,称为基本氨基酸。这些氨基酸的基本结构通式如下: H R—C—COO - NH3+ 氨基酸具有两性离子结构,在酸性介质中,以氨基阳离子状态存在;在碱性介质中,以羧基阴离子状态存在,这也是氨基酸分离分析方法的基础。氨基酸直接分析用疏水性薄壳型阴离子交换树脂为固定相,碱性溶液为流动相,阴离子交换分离,积分脉冲安培法直接检测。流动相由水、氢氧化钠和醋酸钠溶液组成。其中氢氧化钠不仅提供淋洗离子OH-,而且碱性pH条件也是氨基酸在金电极表面进行氧化反应,实现积分脉冲安培检测的必须条件。醋酸根离子(Ac-)对固定相的亲和力大于OH-,它对于极性较小,保留较强的氨基酸起“推”的作用。表1列出了分析氨基酸的典型梯度淋洗条件[3]。图1是常见氨基酸混合标准溶液的色谱图[3]。 2.2脉冲积分安培检测 在高pH溶液中,含有脂肪氨基(-NH3)的化合物可在金电极上被氧化,因此可用电化学法检测,然而由于金电极吸附待测成分的氧化产物以及金电极表面形成氧化层,金电极会很快失效。为了解决这一问题,发展的电化学检测醇类和含氨基化合物的脉冲电化学检测器,由三个不同的脉冲电位代替直流安培检测器中的加于工作电极上的恒定电位。较工作电位高的正电位用来除去金电极上被测成分的氧化产物。由于金电极本身会部分被氧化成氧化金,再加一个大的负电位,使氧化金还原到还原状态。该脉冲每0.5~1秒循环1次。Polta等[4]首次报道了氨基酸的脉冲电化学检测。在金电极上得到氨基的最大氧化电流所需的电位超过金表面氧化的电位,金电极表面氧化所产生的电流无疑会增加背景和基线噪音以及基线的不稳定性。为了增加氨基氧化时所产生的检测信号,抑制金电极氧化所产生的背景信号,1989年Johnson等人[5]引入了一个新的技术—脉冲积分安培。与脉冲安培相似,积分安培法中加到工作电极上的也是一种自动重复的电位对时间的脉冲电位波形,其不同之处是采样时的电位不是恒定的,而是在高-低值之间扫描。在高电位时,氨基和金的氧化同时发生。在高电位时所形成的氧化金在低电位时被还原。因为在低电位时金的氧化是可逆的,而氨基的氧化是不可逆的,因而来自金电极氧化的信号被大大抵消,由积分整个高-低循环的电流所得到的信号仅仅是被分析成分的信号。 检测氨基酸和氨基糖的积分安培波形与早期的波形相似,但首先用负电位为清洗电位,这样可较好地保持电极的清洁和活性,不会引起电极和信号的损失。在前述的脉冲安培法中,首先用高的电位为清洗电位,金电极的过量氧化会导致检测响应值的逐渐降低。经过对检测氨基酸和氨基糖的施加电位波形的优化克服了基线漂移,改进了线性、信噪比和长时间的重复性,而且不损坏金工作电极。(节选) 该文发表在《现代科学仪器》2001年第二期

产品配置单:

分析仪器

AAA-Direct氨基酸直接分析仪

型号: AAA-Direct

产地: 美国

品牌: 赛默飞

面议

参考报价

联系电话

下载本篇解决方案:

资料文件名:
资料大小
下载
氨基酸直接分析法原理及应用
279KB
相关仪器

更多

AAA-Direct氨基酸直接分析仪

型号:AAA-Direct

面议

Orbitrap Ascend Editions Tribrid系列超高分辨质谱仪

型号:Orbitrap Ascend Editions Tribrid系列超高分辨质谱仪

面议

Thermo Scientific™ Stellar™质谱仪

型号:Thermo Scientific™ Stellar™质谱仪

面议

Vanquish™ Access HPLC系统

型号:Vanquish Access HPLC 系统

面议

相关方案

高压离子色谱Inuvion快速测定自来水中的常见阴离子

水中常见阴离子如氟离子、氯离子、亚硝酸根、硝酸根、溴离子、硫酸根、磷酸根等的含量,与水质密切相关。在《GB5749-2022 生活饮用水卫生标准》中,氟化物、硝酸盐、氯化物、硫酸盐作为生活饮用水水质常规指标,并给定了限值。在《GB8537-2018 食品安全国家标准 饮用天然矿泉水》中,对氟化物、硝酸盐、亚硝酸盐给与了限度要求。与传统离子检测方法,如分光光度法、电位滴定法、容量法和离子选择电极法等方法相比,离子色谱具有分析速度快、操作方便、选择性好、灵敏度高、性能稳定等优势,在水质分析中得到了广泛应用[1-20]。涉及到阴离子检测的标准及检验方法,大多使用离子色谱对多个阴离子进行同时测定,如《GBT 5750.5-2023 生活饮用水检验方法》、《GB 8538-2022 食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》、《GBT 39305-2020 再生水水质氟、氯、亚硝酸根、硝酸根、硫酸根的测定离子色谱法》、《GBT14642-2009 工业循环冷却水及锅炉水中氟、氯、磷酸根、亚硝酸根、硝酸根和硫酸根的测定 离子色谱法》、《GB 13580.5-1992 大气降水中氟、氯、亚硝酸盐、硝酸盐、硫酸盐的测定离子色谱法》等国标方法,以及大量行业标准和地方标准。 在常规条件下,7种不同的阴离子,需要在10-30分钟内完成分离。近10年来,多款高压离子色谱产品及多种小粒径阴离子色谱柱相继推出,使离子色谱进入了新时代,也使高效、快速的阴、阳离子分离方法有了实现的可能。本篇AN使用赛默飞2023年发布的高压离子色谱新品Inuvion,开发出了一种快速分离的方法,搭配4 m的IonPac AS18小粒径柱,7分钟内完成7种阴离子的分析,灵敏度高,分离度好。

环保

2024/07/25

高压离子色谱Inuvion快速测定生活饮用水中的亚氯酸 盐、溴酸盐、氯酸盐、二氯乙酸和三氯乙酸

生活饮用水消毒过程中,消毒剂(如氯、氯胺、二氧化氯和臭氧)与无机物或有机物发生反应时,会产生消毒副产物(Disinfection by-products,DBPs)。一些消毒副产物已经被证实具有致癌性、生殖和发育毒性等,对人群健康构成潜在威胁[1]。在《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》中,有5种消毒副产物作为生活饮用水水质常规指标,并给定了限值。其中,溴酸盐的最高含量不允许超过10 g/L,亚氯酸及氯酸盐含量均不得超过0.7 mg /L,二氯乙酸和三氯乙酸的最高含量分别不允许超过50 g/L和100 g/L。 饮用水中除含有消毒副产物外,还含有多种常规离子,如氯离子、硝酸根离子、碳酸根离子、硫酸根离子等,含量可达数百ppm,对消毒副产物的分离和检测有一定干扰。《GBT5750.10-2023 生活饮用水标准检验方法第10部:消毒副产物指标》中,给出了推荐的色谱条件,使用KOH作为淋洗液,梯度洗脱,分析方法时长约为40 min。 近10年来,多款高压离子色谱产品及多种小粒径阴离子色谱柱相继推出,使离子色谱进入了新时代,也使高效、快速的分离方法有了实现的可能。本篇AN使用赛默飞2023年发布的高压离子色谱新品Inuvion,开发出了一种快速分离的方法,借助于4m的IonPac AS19小粒径柱,21分钟内完成生活饮用水中亚氯酸盐、溴酸盐、氯酸盐、二氯乙酸及三氯乙酸,与国标推荐方法相比,效率提升100%。Inuvion的卓越性能,使该方法在分离度、准确度、稳定性均符合要求的前提下,检出限远低于国标限度要求,可满足用户对于生活饮用水中的消毒副产物快速、高通量的检测需求。

环保

2024/07/25

Thermo Fisher Scientific iCAP TQe ICP-MS/MS测定土壤和沉积物多种元素

本应用指南重点介绍了根据第三次全国土壤普查和环境监测方法 HJ766 和 HJ803 进行的土壤样品分析1,2。特别是,证明了Thermo Scientific™ iCAP™ TQe 三重四极杆 ICP-MS/MS 具有可靠的性能保证,提供了一种简单直接的分析方法,该方法仅使用氧气作为反应气体,具有出色的干扰消除能力和更高的灵敏度,达到了以单碰撞模式为主的SQ ICP-MS工作效率。

环保

2024/02/27

赛默飞色谱质谱土壤污染物分析解决方案-助力全国第三次土壤普查

万物土中生,土壤是人类赖以生存的物质基础。近年来频发的土壤污染事件频发,对食品安全、人居环境和人体健康都构成严重威胁,土壤污染防治工作迫在眉睫。 在“土十条”、“土壤环境质量标准”基础上,2022 年2 月,国务院印发了《关于开展第三次全国土壤普查的通知》,决定自今年起开展第三次全国土壤普查,全面深入推进耕地质量监测、评价、建设和保护等工作。 土壤环境监测作为检测土壤质量的有效手段,通过对土壤中重金属、有机污染物等污染物监测,能为土壤环境污染治理和预防提供参考依据。赛默飞土壤污染物解决方案,紧贴国家标准,涵盖仪器、软件、色谱柱、耗材和应用,我们采用行业前沿方案帮助解决您所面临的棘手的土壤污染物分析挑战。

环保

2024/02/27

推荐产品
供应产品

赛默飞色谱与质谱

查看电话

沟通底价

提交后,商家将派代表为您专人服务

获取验证码

{{maxedution}}s后重新发送

获取多家报价,选型效率提升30%
提交留言
点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》 且同意关注厂商展位
联系方式:

公司名称: 赛默飞色谱与质谱

公司地址: 上海市浦东新区新金桥路27号3& 6& 7号楼 联系人: 赛默飞 邮编: 201206 联系电话: 400-611-9236

仪器信息网APP

展位手机站