几种抗生素的高效阴离子交换色谱分离和积分脉冲安培检测分析方法

硫酸庆大霉素、硫酸新霉素和硫酸奈替米星是用途广泛的广谱抗生素。该类药 品的质量及其用药安全与人民群众的身体健康密切相关，因此该类产品在生产 过程中的质量控制及其后的质量检验极为重要。目前各国药典普遍采用的分析 检验方法大多是生物法，但是该方法难以得到药物成分含量的准确值，也无法 测定药物中的杂质含量，因而不利于药物的毒性评价。因此色谱法在药物分析 中的应用逐渐增多，也逐渐为欧盟等地区及国家的药典所接受。但由于硫酸庆 大霉素、硫酸新霉素和硫酸奈替米星这三种药物及其杂质在紫外和可见光区无 明显的光吸收，因而直接采用液相色谱分离和紫外检测进行分析具有一定的困 难，进行这样的测定大多需要进行柱前或柱后衍生，因而色谱操作麻烦费时。 在我国也一直没有合适的分析测定这三种药物及其杂质的色谱分析方法，有关 公司为了将这三种药物出口到欧盟国家，不得不将药物样品送到欧盟有关国家 进行检测分析，这样既费时费力，又提高了药物的生产成本。因此开展对这三 种药物的液相色谱分析研究具有重要意义。高效阴离子交换色谱分离和积分脉 冲安培检测分析方法的出现为这类物质的分析开辟了新的途径，此方法采用高 效阴离子交换色谱分离这些抗生素及其杂质，然后采用积分脉冲安培检测进行 直接测定，方法不用衍生，方便快速，所以深受欢迎。因此高效阴离子交换色 谱分离和积分脉冲安培检测分析方法已经为欧盟药典接受，用于硫酸庆大霉 素、硫酸新霉素和硫酸奈替米星主成分和杂质的分析测定。但该方法仍然存在 一定的不足，如检测器的灵敏度对药物中的微量杂质仍显不足，金电极易于损 坏，重现性较差；体系的分离能力仍显不足，对有些组分的分离不尽理想等 等。 针对上述情况，戴安中国有限公司应用研究中心在欧盟药典方法Ph. Eur. 4.5 07/2003: 0331、Ph. Eur. 4 01/2002: 0197和Ph. Eur. 4 01/2002: 135 1方法的基础上，开展了较全面的研究工作，研究着重解决的问题主要是：优 选色谱柱和流动相，提高分离度，减少干扰：优化检测条件，提高灵敏度和重 现性，并设法减少金工作电极的毁损。研究结果表明对于硫酸庆大霉素、硫酸 新霉素和硫酸奈替米星三种药物的分析，可分别选用英国聚合物实验室的PLR P-S柱、Dionex公司AcclaimTM 120 C18柱和Dionex公司Dionex PA/5柱或英国 聚合物实验室的PLRP-S柱作为分析柱，选择这样的分析柱，再加上对流动相的 优化，就可获得对这三种药物及其杂质成分的满意分离。我们还用新型的四电 位检测波型代替欧盟方法中的三电位波型，该改进极大地提高了方法的灵敏度 和重现性，也减少了金工作电极的毁损，提高了电极的使用寿命。该研究所建 立的三种药物的分析方法已经从灵敏度、分辨率、重现性等诸方面满足或超过 了欧盟药典的要求，并已经应用于上述药品的检验分析。