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色谱与 NMR的对接
结合质谱法与色谱法的联用分析技术是一种成熟的实验室工具。 色谱法与 NMR 相结合也成了一种有力的实验室分析工具。它们的进一步发展甚至是将所有三种技术融入到一个 LC-NMR/NMR-MS 系统中,同时将固相萃取作为色谱法与 NMR 的有效对接引入。两种不同的主工作流有望相结合。
色谱系统可以直接连接到 NMR 波谱仪。样品按“原样”转移到 NMR,保持着色谱系统提供的浓度和溶剂。样品可以在色谱分离过程中转移,随后 NMR 图谱可以通过流动模式(持续不断,当色谱仪在运行时)或停止流动模式(选定峰在NMR 探头中暂停,色谱仪亦暂停)获得。
在一个更复杂的程序中,在色谱分离结束后,选定的样品将在样品池中立即暂停,然后转移到 NMR。在此程序中,对样品的处理已降至最低。这意味着在注入混合物后,分离的化合物将转移到 NMR,不需要接触空气或光,也不需要对样品进行任何手动处理。此外,分离与 NMR 测量开始之间的间隔可缩短至 10 秒。
布鲁克公司的 LC-NMR 系统是追求灵敏度和检测不稳定化合物的理想之选,可以进行全面自动化的分析,亦可简单地为从 LC 分离到 NMR 结果提供一个十分便捷的方法。
在 LC-NMR 的最新发展中,固相萃取柱被用于在色谱分离后固定选定的峰。色谱溶剂被清除,样品被全氚代溶剂洗脱,从固相萃取柱中转移到 NMR 流动探头或转移到标准 NMR 样品管中。
固相萃取柱上的标准捕获∕洗脱过程提供的样品浓度,相对于 LC-NMR,其灵敏度可以提升 100%。此外,色谱仪可以在样品进入 NMR 之前多次进样,在固相萃取柱上进行反复富集。这样可就以更容易地进行要求更苛刻的反向实验,亦可为超低浓度的化合物检测提供足够的实验。
布鲁克公司的 LC-SPE-NMR系统可通过富集样品,大幅增加 NMR谱图的信噪比。这使得其在更加严苛的反向实验或研究低浓度杂质时,可以进行非常完整的结构鉴定。此外,全氚代溶剂为 NMR 图谱的获取提供了标准条件。
与 NMR 探头相结合 - 流动探头和 CryoFit
对于直接连接的 LC-(SPE)-NMR/MS 系统的 NMR 实验,流动探头是必须的。布鲁克拜厄斯宾公司已经开发了一系列高分辨率流动 NMR 探针,具有独一无二的灵敏度,而 NMR 配置就像正常的 5 毫米 NMR 探头一样(包括反向模式、 TXI、 Z方向梯度、ATMA 等)。它们有一个内置流动池,可提供不同尺寸。
CryoProbes™ 在样品管操作模式下可将灵敏度大幅提高 3-4 倍。布鲁克公司提供一种 CryoFit™,可将任何标准的 5 毫米 CryoProbe 转变成流动探头。转换仅需几分钟,并且是在 CryoProbes 在磁体中和冷却的状态下进行的。预热∕冷却时不需要停机。
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