人肺动脉内皮细胞 HPAEC细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生人肺动脉内皮细胞 HPAEC细胞学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光人肺动脉内皮细胞 HPAEC细胞扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人肺动脉内皮细胞 HPAEC细胞
Type, Alpha 1E Subunit (CACNa1E)
HZF243Mu 小鼠T-型电压依赖钙离子通道α1H亚基(CACNα1H)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, T-Type, Alpha 1H Subunit (CACNa1H)
HZF756Mu 小鼠过氧化还原酶6(PRDX6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxiredoxin 6 (PRDX6)
HZG575Mu 小鼠溶质载体家族30成员3(SLC30A3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 3 (SLC30A3)
HZG576Mu 小鼠溶质载体家族30成员5(SLC30A5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 5 (SLC30A5)
HZG577Mu 小鼠溶质载体家族30成员6(SLC30A6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 6 (SLC30A6)
HZH006Mu 小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1)
HZH139Mu 小鼠墨蝶呤还原酶(SPR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sepiapterin Reductase (SPR)
HZL523Mu 小鼠FK506结合蛋白样蛋白(FKBPL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)
HZA446Mu 小鼠抑制素βC(INHβC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC)
HZB243Mu 小鼠心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle And Heart (FABP3)
HZB428Mu 小鼠腺苷酸环化酶10(ADCY10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adenylate Cyclase 10, Soluble (ADCY10)
HZC041Mu 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta (PPARd)
HZC206Mu 小鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1)
HZD020Mu 小鼠轻肽铁蛋白(FTL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferritin, Light Polypeptide (FTL)