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  • 色谱柱能否用纯水冲洗?冲洗后会有什么样的影响?

    用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量90%不会对色谱柱造成任何影响。原因分析: 首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。 其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱,这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。* 第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于缓冲盐用后清洗的情况,

  • 纯水冲洗柱子 对柱子有伤害!!

    色谱柱一般固定相的极性都比较小,C18或者其他的键合相可以自由的伸展在有机相中,但是在纯水就只能贴在硅胶上啦,因此不仅冲不净,而且可能会使C链断裂。 可以将流动相中的缓冲液换成水,配制成与流动相相同比例的水-甲醇(水-乙腈),冲洗30-40min左右,如果盐的浓度比较高,可以延长冲洗的时间,然后再用甲醇(乙腈)保护就可以了。我们试验室有时候比较偷懒,会使用甲醇-水(10:90)or水-乙腈(85:15) 的溶液在洗柱子,效果也不错

  • 【第三届原创参赛】色谱柱 之 用纯水冲洗???

    【第三届原创参赛】色谱柱 之 用纯水冲洗???

    维权声明:本文为gl19860312原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191652_629298_2019107_3.jpg色谱柱 之 用纯水冲洗??? 使用色谱柱经常遇到柱子堵了、分离效果不好等情况。有的网友提议:可以用纯水来冲洗一下色谱柱子。真的可以用100%的纯水来冲洗流路吗(⊙_⊙)? 现在就这个问题探讨一下:用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失、固定相塌陷等现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈(或者其他的有机溶剂)进行冲洗,通常水的含量90%不会对色谱柱造成任何影响(即:有机相的百分比≧10%)!!其原因分析: 第一,随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但值得注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。 由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。 其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱,这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。 第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。

  • 【原创】请教:纯水冲洗色谱柱,柱效降低,如何恢复?

    昨天用HPLC进样以后才发现拖尾很严重(进样为标准品),后来找到问题的原因是本人前天晚上冲洗柱子是将流动相(水和甲醇)搞反了,不小心用纯水冲洗色谱柱20min,流速为1ml/mim,柱子型号是:Alltima C18(4.6mm×250mm,5µm)担心我是不是把柱子冲塌陷导致拖尾使柱效降低呢?还是别的什么原因?有没有大侠有过这样用纯水冲洗柱子后出现问题的呢,希望不惜赐教,教教我怎样将柱效恢复。或者是大家有过类似经验的也欢迎交流

  • 【原创】问:超纯水机中的RO膜系统多长时间冲洗一次?

    问:超纯水机中的RO膜系统多长时间冲洗一次? 1、每星期一早上上班之后,应手动冲洗一次,以防止水中的大分子量杂质堵塞。2、每次冲洗顺序是:先冲洗RO膜、再冲洗系统。3、每次冲洗时间各为30-45秒。4、 RO膜每次在开机时会自动冲洗,但因RO膜始终有存水,且经过休息日的沉淀,大分子量的杂质会附着在膜表面,会造成堵塞,因此,仍需手动冲洗。

  • 关于液相色谱柱可不可以用纯水冲洗的科普

    用纯水短时间内冲洗[b][u]色谱柱[/u][/b],通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量90%不会对色谱柱造成任何影响。原因[u][b]分析[/b][/u]:首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。 其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱,这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。 第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。

  • 【讨论】系统冲洗问题

    做完实验后,如何对管路进行清洗?我们这里一个自称牛人的牛人说不要用比例太高的水冲洗,否则会造成柱效降低。我有次做完实验,用的是80%的缓冲液进样,然后把水的比例提高到50%冲洗管路,牛人看见了冲我好一顿嚷嚷。没办法,我换成20%的水冲洗,因为进样的盐浓度太高,第二天一看,六通阀白花花一大片,没办法我用自己的法子又冲洗了一阵子才搞好。根据我看的一些资料,用95%的水冲洗20倍柱体积也没问题,是不是这样?另外,为了提高冲洗的效率,我减少甲醇比例,加大溶解能力更高的乙腈,是不是更好一些?另外,我们这里一个德高望重的老前辈告诉我,流动相改变时一定要梯度改变,否则也很容易造成盐析出,而且对柱子不好,这点和大家共享.

  • 【求助】能不能用带有缓冲盐的水相冲洗柱子中的残留

    现在有一个疑问想请教老师们,仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url],分别是安捷伦1100,AB 3200,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]。做的是药代动力学,因为样品前期处理是用的简单的乙腈沉淀蛋白后进样,洗脱梯度是乙腈:1mM甲酸铵(60:40),现在走完一条标曲(8个点)、一套指控(4个点)之后,走一个人的样品(13个点),再走质控合格。继续再走一个人的样品后,质控就无法合格了。只能用水比例较大的流动相冲洗半小时到一小时,之后质控就能合格了。我想问在用水比例较大的流动相冲洗时,能不能直接用带有缓冲盐的水相,也就是用乙腈:1mM甲酸铵(10:90)冲洗,这样可以节省很多的平衡时间。我还没有试,望高手指点

  • 【讨论】冲洗色谱柱时是选择水还是选择乙腈?

    我们在做完含有缓冲盐的试验后,怎么冲洗C18色谱柱呢?是选择主要用水(低浓度的乙腈)来冲洗,最后保存在100%乙腈中呢?还是仅仅用水(低浓度的乙腈)来置换出内部的流动相,主要靠100%乙腈冲洗呢?若是无缓冲盐时,也这样冲洗吗?

  • 水可以冲洗掉铜柱上的咪唑吗?

    各位老师,我是做金属螯合层析生产,采用的是铜柱,再生采用的是咪唑的盐溶液,最后使用注射用水冲洗,请问各位老师,用注射用水冲洗后,咪唑是从柱上冲洗下来了,还是继续结合在柱上?谢谢了

  • 【讨论】冲洗对色谱柱的影响

    冲洗对色谱柱的影响   用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量90%不会对色谱柱造成任何影响。  原因分析:  首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。  其次,对于常规的C18柱而言,由于C18长链与水是不互溶的,C18长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的 UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。

  • 【求助】关于冲洗柱子问题

    做过有盐份的流动相后用水冲洗柱子,因盐份量有点大,就用纯水冲洗,我看资料上说用水冲洗柱子时间不能太长,冲洗是时间长了会将炭链冲倒,为什么会将炭链冲倒呢?

  • 冲洗阀关闭时漏液

    昨天上午师弟开机器准备做实验发现,冲洗阀关着的时候会漏液,而且压力为零。等过一阵,我跑过去看时,流速1ml/min冲洗时,冲洗阀已经不漏了。我怀疑是哪个地方堵住了,冲一冲就重开了。另外发现,盛水的过滤头外面脏了,有很多黑色的小点。仔细检查了,虽然脏,但没堵。欢迎大家踊跃讨论,问题有可能出在哪?后来,等到师姐药用液相时,发现单开盛水管道,在冲洗阀开着的情况下压力能达5左右。换成单开乙腈管路时,压力是正常的。把水的过滤头放到乙腈瓶中使用,压力还是正常。就怀疑水脏了,仔细观察确实出现了絮状物。换成干净的水后再试,压力还是高。此时就怀疑是冲洗阀的滤芯堵了,拆出来一看确实黑不行了,换个新的以后就没事了。但是有一点奇怪,既然是滤芯堵了,走干净的水堵,为什么走已腈的不堵?难道滤芯的空隙大小在起作用?

  • 色谱柱冲洗

    关于色谱柱冲洗问题,想请教一下各位大神有什么好的建议? 首先采用流动相为有机相和水相,其中有机相中有四氢呋喃只占5%,色谱柱为C8柱,我们在长期使用过程中发现,此色谱柱使用寿命有限,通常一个月左右(基本每天使用10小时左右),平时我们都是采用高低比例的甲醇或乙腈冲洗;想请教各位有没有什么办法延长该色谱柱的使用寿命(尤其是通过色谱柱冲洗来实现)

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