二氯甲烷残留

柱子是岛津的弱极性柱，用二氯甲烷作溶剂进了几针样，进样量1微升，分流比20。刚开始没发现有问题，后面换了顶空，不用溶剂直接进样，进了十几针后开始出现二氯甲烷。为了排除样品里含有二氯甲烷，直接空的顶空瓶进样，色谱程序从50度升到250度，还是每针都出现大量二氯甲烷。这些二氯甲烷是残留在色谱柱里的吗？二氯甲烷沸点这么低，为什么残留这么多？[img=,690,1093]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/07/202207251642123688_4307_4096081_3.png[/img]

[font=宋体]荧光素钠为橙红色粉末，无臭，几乎无味；有引湿性，在水中易溶在乙醇中略溶，是一种化合物染料[/font],[font=宋体]具有荧光特性。其分子式为[/font](C[sub]20[/sub]H[sub]10[/sub]O[sub]5[/sub]Na[sub]2[/sub]),[font=宋体]相对分子质量为[/font]376.27[font=宋体]，在[/font]pH[font=宋体]为[/font]8[font=宋体]时荧光最强。熔点[/font]328 [font=宋体]℃。其荧光素钠结构见[/font]Fig.1[font=宋体]。[/font][align=center][img=,293,199]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011412550524_4770_3528941_3.gif!w293x199.jpg[/img][/align][align=center]Fig.1 the Structure of sodiumfluorescein[/align][font=宋体]本品为诊断用药，是一种染料，对正常角膜等上皮不能染色，但能对损伤的角膜上皮染成绿色，从而可显示出角膜损伤、溃疡等病变。本品流经小血管时，能在紫外线或蓝色光激发下透过较薄的血管壁和黏膜呈现绿色荧光，从而显示小血管行经和形态等，据此可供眼底血管造影和循环时间测定。[/font][align=left][font=宋体]荧光素钠原料药在工艺中使用了二氯甲烷，采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法对其进行了测定。[/font][/align]1 [font=黑体]残留溶剂二氯甲烷的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]测定[/font][font=宋体]色谱柱：[/font]DB[font=宋体]-[/font]WAX[font=宋体]毛细管柱（[/font]30.0 m×0.25 mm×0.25 μm[font=宋体]）[/font](Agilent[font=宋体]科技有限公司[/font])[align=left][font=宋体]升温程序[/font][font=宋体]：[/font]60 [font=宋体]℃[/font][font=宋体]，保持[/font]3 min[font=宋体]，以[/font]100 [font=宋体]℃[/font]min[sup]-1[/sup][font=宋体]的速率升温至[/font]200 [font=宋体]℃[/font][font=宋体]，保持[/font]1 min[font=宋体]。[/font][/align][align=left][font=宋体]流[/font] [font=宋体]速：[/font]1.0 mLmin[sup]-1[/sup][/align][align=left][font=宋体]进样口温度：[/font]230 [font=宋体]℃[/font][/align][align=left][font=宋体]检测器温度：[/font]250 [font=宋体]℃[/font][/align][align=left][font=宋体]载气流速为[/font]1.0 mLmin[sup]-1[/sup][/align][font=宋体]分流比为[/font]10[font=宋体]：[/font]1[font=宋体]进样量：[/font]1 μL[font=宋体]取对照品溶液，在上述色谱条件下测定。二氯甲烷理论塔板数为[/font]87819[font=宋体]，色谱峰与内标峰分离度大于[/font]1.5[font=宋体]，拖尾因子符合要求。[/font][font=黑体]溶液配制[/font][align=left][font=宋体]内标溶液的配制：取正丙醇适量，精密称定，置于[/font]50 mL[font=宋体]量瓶中，以重蒸水稀释并定容至刻度，摇匀，得浓度为[/font][color=black]0.539[/color]mgmL[sup]-1[/sup][font=宋体]的内标溶液。[/font][/align][align=left][font=宋体]对照品溶液的配制：取二氯甲烷适量，精密称定，置于[/font]100mL[font=宋体]量瓶中，以重蒸水稀释并定容至刻度，摇匀。精密量取[/font]1.25 mL[font=宋体]，置于[/font]10 mL[font=宋体]量瓶中，以重蒸水稀释并定容至刻度，[/font][/align][align=left][font=宋体]摇匀，得浓度为[/font]305μgmL[sup]-1[/sup][font=宋体]对照品溶液。[/font][/align][align=left][font=宋体]供试品溶液的配制：称取荧光素钠原料药适量，精密称定，置于[/font]10 mL[font=宋体]量瓶中；精密量取内标溶液[/font]0.2 mL[font=宋体]，以重蒸水稀释并定容至刻度，摇匀，得到浓度约为[/font]0.2gmL [sup]-1[/sup][font=宋体]的供试品溶液。[/font][/align][font=黑体]专属性考察[/font][font=宋体]分别取水，对照品溶液及供试品溶液，[/font][font=宋体]在上述色谱条件下[/font][font=宋体]进样[/font][font=宋体]分析[/font][font=宋体]，结果表明水及内标对二氯甲烷的测定无干扰，方法专属性良好。[/font][font=宋体]标准品及供试品色谱图见[/font]Fig.2~ Fig.3[font=宋体]。[/font][align=center][img=,512,244]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011413184658_1833_3528941_3.jpg!w512x244.jpg[/img][/align][align=center]1[font=宋体]—[/font]Dichlormethane 2[font=宋体]—[/font]N-propanol[/align][align=center]Fig.2GC chromatogram of standards [/align][align=center][b][img=,501,232]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011413283280_2812_3528941_3.jpg!w501x232.jpg[/img][/b][/align][align=center]2[font=宋体]—[/font]N-propanol[/align][align=center]Fig.3GC chromatogram of sample [/align][font=黑体]检测限和定量限[/font][align=left][font=宋体]取对照品溶液，逐级稀释至对照品色谱峰峰高分别达到[/font]3[font=宋体]倍和[/font]10[font=宋体]倍信噪比。得到二氯甲烷的检测限和定量限分别为[/font]10.2 ng[font=宋体]和[/font]30.5 ng[font=宋体]。 [/font][/align][font=黑体]线性关系考察[/font][font=宋体]精密量取对照品溶液[/font]1[font=宋体]、[/font]2[font=宋体]、[/font]4[font=宋体]、[/font]5[font=宋体]、[/font]7[font=宋体]、[/font]9 mL[font=宋体]分别置于[/font]10 mL[font=宋体]量瓶中，精密加入内标溶液[/font]0.2mL[font=宋体]，以重蒸水稀释并定容至刻度，摇匀，在上述色谱条件下进样分析。以对照品的质量浓度([/font]C , μgmL[sup] -1[/sup][font=宋体])[/font][font=宋体]为横坐标，二氯甲烷峰面积与内标峰面积的比值（[/font][i]A[/i][font=宋体]）为纵坐标，线性回归方程为：[/font][i]A[/i] = 8.618 6C -0.021 6[font=宋体]，[/font][i]r[/i] =0.994 5 [font=宋体]结果表明二氯甲烷在[/font]30.5 μgmL[sup]-1[/sup]~ 274.5 μgmL[sup]-1[/sup][font=宋体]内与峰面积呈良好线性关系。[/font][font=黑体]仪器精密度试验[/font][font=宋体]取[/font][font=宋体]同一对照品溶液在上述色谱条件下[/font][font=宋体]，重复进样[/font]5[font=宋体]次，计算二氯甲烷峰面积与内标比值的[/font]RSD[font=宋体]为[/font]2.6%[font=宋体]，结果表明仪器精密度良好。[/font][font=黑体]加样回收率试验[/font][font=宋体]分别精密称取荧光素钠[/font]9[font=宋体]份，每份约[/font]2.0 g[font=宋体]于[/font]10 mL[font=宋体]量瓶中。分别精密加入对照品溶液[/font]4[font=宋体]、[/font]5[font=宋体]、[/font]6 mL[font=宋体]，各加入内标溶液[/font]0.2mL[font=宋体]，按“溶液制备”项制备低、中、高[/font]3[font=宋体]个质量浓度的供试品溶液。在上述色谱条件下进样分析。测到二氯甲烷平均回收率为[/font]102.4%[font=宋体]，[/font]RSD[font=宋体]为[/font]3.4%[font=宋体]。[/font][font=黑体]样品测定[/font][font=宋体]取荧光素钠原料药约[/font]2 g[font=宋体]，精密称定，按[/font][font=宋体]“[/font][font=宋体]溶液制备”项制备供试品溶液，在上述色谱条件下进行分析，以内标法计算，二氯甲烷残留量小于[/font]10μgmL[sup]-1[/sup][font=宋体]。结果见[/font]Tab.1[font=宋体]。[/font][align=center]Tab.1 the Determination results of dichlormethane[font=宋体]（[/font]n = 5, [font=宋体]标示量[/font] %[font=宋体]）[/font][/align] [table][tr][td] [align=center]No.[/align] [/td][td] [align=center]Dichlormethane[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [align=center]2[/align] [align=center]3[/align] [align=center]4[/align] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]ND.[/align] [align=center]ND.[/align] [align=center]ND.[/align] [align=center]ND.[/align] [align=center]ND.[/align] [/td][/tr][/table]

方法：取本品约1.0g,精密称定，置顶空瓶中，精密加水5ml使溶解，密封，作为供试品溶液。精密称取乙腈、丙酮、二氯甲烷适量，用水定量稀释制成每1ml约含乙腈0.41mg、含丙酮5mg、含二氯甲烷0.6mg的混合溶液，精密量取5ml,置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液，照残留溶剂测定法（中国药典2005年版二部附录Ⅷ P)测定。以5%苯基-95%二甲基聚硅氧烷（SE-54）（或极性相近）为固定液的毛细管柱为色谱柱，柱温为400C，维持12分钟，进样口温度为2000C，检测器温度为2500C；顶空瓶平衡温度为800C，平衡时间为30分钟。取对照溶液顶空进样，计算数次结果，其相对标准偏差不得过5%。取供试品溶液与对对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含二氯甲烷不得过0.06%,含乙腈量不得过0.041%。含丙酮不得过0.5%。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111011450_327697_2209208_3.jpg检测器用的是FID检测器，出峰顺序为：乙腈，丙酮、二氧甲烷。请各位版友分析一下这是什么原因？1． 在1分钟前出的怪峰，是不是因为顶空瓶压力跟载气上的压力调节得不一致的原因。混合对照时出怪峰，单独进水时不出怪峰？2． 为什么浓度相同的二氯甲烷和乙腈，反倒用顶空进样时，乙脯的峰比二氯甲烷小10倍左右？