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固定化酶

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  • 【原创大赛】固定化酶法的比较

    【原创大赛】固定化酶法的比较

    1 引言南瓜食品是世界上公认的特效保健食品。由于原料来源广泛便宜，生产投资少、见效快，市场前景广阔，具有巨大的经济效益。南瓜粉是一种高钙、高锌、高钾、低钠食品, 特别适合于中老年人、糖尿病和高血压患者食用。南瓜粉防治糖尿病已被国内外所公认。研究证实，绝大部分Ⅱ型糖尿病患者服用南瓜粉后，可以使血糖降低，说明南瓜粉具有降血糖和升胰岛素的作用。南瓜防治糖尿病是在环丙基氨酸、果胶及几种微量元素和维生素等成分共同作用下实现的。因为南瓜粉是一种高钾低钠食品，而钾在人体内起着调节渗透与平衡的作用，高钾低钠饮食对预防心血管疾病、治疗浮肿有明显效果，所以南瓜粉适合于高血压和肾病患者食用。采用酶法水解南瓜中的可溶性糖，可使其降解为寡糖。为了进一步增加产率，提高成本，酶固定化技术应用到了南瓜食品加工工业中。酶的固定化可回收及重复利用。因而固定化酶一般可以被认为是不溶性酶。与水溶性酶相比，固定化酶易于将固定化酶与底物、产物分开, 方便后续的分离和纯化；可以在较长时间内连续生产；酶的稳定性和最适温度提高, 最适pH值改变, 对温度和pH值适应范围增大, 对抑制剂和蛋白酶敏感性降低；酶反应条件容易控制；较水溶性酶更适合于多酶反应；可以增加产物的收率, 提高产物质量；酶的使用效率高,使用成本低；适于产业化、连续化、自动化生产。本文采用3种不同的固定化酶法对α-淀粉酶和低聚糖酶进行固定化，选择最佳固定化方法。2 材料与方法2.1 主要材料南瓜，市售日本南瓜；α-淀粉酶3700U/mL，北京奥博星生物技术有限责任公司；低聚糖酶20000CU/g，武汉鑫华远科技有限公司；海藻酸钠，AR，天津市光复精细化工研究所；3- 氨基丙基三乙氧基硅烷，AR，佛山市道宁化工有限公司。2.2酶的固定化方法的选择本试验首先选用3种固定化酶法，即海藻酸钠包埋法、共价交联法和大孔硅球吸附法对α- 淀粉酶进行固定，通过单因素试验得到了3种固定化方法的最佳方案和最大固定化率，之后选用最佳方法对低聚糖酶进行固定，并通过试验得到低聚糖酶的最佳固定条件。2.2.1包埋法固定α- 淀粉酶的单因素试验包埋法包埋固定化法是把酶定位于聚合物材料的格子结构或微胶囊结构中这样可以防止酶蛋白释放, 但是底物仍能渗人格子内与酶相接触。包埋材料主要有琼脂、琼脂糖、卡拉胶、海藻酸钠、聚丙烯酞胺、纤维素等。因为海藻酸钠具有无毒、安全、价格低廉、材料易得的特点,故本试验采用海藻酸钠作为包埋材料。2.2.1.1 海藻酸钠的浓度的选择分别配制浓度为3%、4%、5%、6%、7%的海藻酸钠溶液，使之在沸水浴中搅拌溶解，加入等体积酶含量为0.45 mg/mL的α-淀粉酶液，搅拌均匀。静置1 h后，滴入至2%的CaCl2溶液中，形成直径为5 mm左右的海藻酸钙凝胶珠，在4℃下静置固化1 h[

  • 固定化酶柱遇到的问题

    在下新手，做的是固定化酶毛细管柱，样品是一种小蛋白，能够在柱上分解同时分离，可是分的峰形不是很理想。想请教下大虾们：1.样品溶液的配置（用缓冲，水。其他）注意什么？2.在电泳的时候遇到过一种情况，条件都相同，可能过了半天样品峰会多出个肩峰，这是为什么？老师说是操作的问题，不是很懂。。。3.如何将两个结构很相似的物质分的开点？谢谢！！！

  • 【原创大赛】几丁质固定化猪胰脂肪酶（PPL）的研究

    【原创大赛】几丁质固定化猪胰脂肪酶（PPL）的研究

    固定化酶的性质受酶自身性质和载体材料共同影响。这两者之间的相互作用决定了固定化酶的物理化学和动力学特性。因此，载体材料的选择在整个酶的固定化过程举足轻重。尽管大家都意识到载体的重要性，但是迄今为止，仍然没有一种载体材料是通用的。想成为酶的通用性载体材料，必须拥有一系列的优秀特性：对蛋白质具有高的亲和力，和酶分子有直接可进行反应的功能团，可以进行化学修饰，具有亲水性，化学稳定性，一定的机械强度，比较容易形成不同的几何结构以提供相应的渗透性，其表面对于生物转移合适等等。毋庸置疑的，在药学，医学，食品业以及农业应用中，载体材料还须是无毒的，并且具有生物相容性。考虑到对公共健康和环境的友好性，载体材料还应该可以生物降解，更经济。综合考虑到现在已经被人们用来做固定化的载体材料，包括无机材料和有机材料，天然的和人工合成的，几丁质是众多材料中性质非常优良的载体材料。几丁质是天然的聚多糖，几丁质是世界上数量最多的一类可再生有机资源。几丁质是甲壳类动物的壳以及昆虫的外骨骼的主要成分，在生物圈中，每年都有大量的几丁质被合成和降解。几丁质(chitin)是N-乙酰氨基葡萄糖以β-1,4糖苷键所连接而成的直链多糖，在许多溶剂中都是不溶解的。几丁质的结构与植物纤维素的结构非常相似，只是2号位碳原子上的羟基被乙酰氨基和氨基所取代，因此又称作动物纤维素。值得一提的是，几丁质不是简单的化学物质，在最初以及制造的过程中可呈现出多样化的结构。实验部分实验试剂和仪器实验试剂：猪胰脂肪酶Lipase from porcine pancreas，Type Ⅱ（sigma）；牛血清蛋白（BSA，成都飞克生物试剂有限公司，分析纯）；考马斯亮蓝G-250(沃宏化学品有限公司)；聚乙二醇1500（PEG1500，成都市科龙化工试剂厂，分析纯）；几丁质（sigma);25%戊二醛（成都市科龙化工试剂厂）； 三丁酸甘油酯； 考马斯亮蓝G-250（国产）；分析天平（万分之一级，Sartorius BS 124 S）。其他无机盐试剂均为分析纯。实验仪器：紫外分光光度计（Hitachi,U-1900);恒温振荡器（上海智城科学仪器有限公司 ZHWY-2102-C）；低温冷冻离心机（日立CF15RX）；涡旋混合仪（国产）； pH计（雷磁科学仪器有限公司）双水相纯化PPL 将猪胰脂肪酶400毫克溶解于10毫升1M pH=7.0的磷酸钠缓冲溶液中，4℃搅拌溶解4h，在低温离心机中以8000rpm离心10min

  • 【求助】如何确定酶固定到毛细管柱上的问题

    在下新手，做的固定化酶的毛细管电色谱。做了好久都没有出现好的结果，用固定化酶修饰过的柱子和裸柱子比较在分析蛋白质的时候没什么差别。然后分析了一下，应该是酶还没有固定到毛细管内壁上，或者酶失活，或者其他什么原因。。。主要的是求助下如何确定在将酶固定化到内壁的每一个阶段，如何判定你所修饰的基团有没有结合到内壁？！

  • 【资料】-农药残留检测生物传感器酶固定技术研究进展

    [size=4][B]农药残留检测生物传感器酶固定技术研究进展[/B][/size][I]罗启枚[/I]摘要：酶生物传感器在农药残留检测方面具有传统检测方法不可比拟的优势，而酶的固定技术将直接影响酶生物传感器的性能。该文就酶的不同固定方法和使用的不同载体材料，对近二十年来农药残留检测生物传感器酶的固定技术的研究进展进行综述，并就不同固定方法，不同固定方法的特点和不同载体材料对生物传感器性能的影响作了简单介绍。关键词：酶生物传感器；酶的固定；酶的固定载体材料[B]0 引言[/B]近几十年来，各种农药相继大量的生产和使用，极大促进了农业、林业的生产和发展。在目前世界范围内大量使用的农药中，大部分是毒性高、残留量大的有机磷农药，对环境和人们的身体健康构成了极大的威胁，对农林业的可持续发展也很不利。为了保护环境，保护人们的身体健康，对农林、水产品实时、快速、成本低廉的农药残留检测方法和技术一直是人类十分关注的焦点。当前，高效液相色谱法（HPLC）与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]X质谱联用方法（GCMS）是实验室常用的农药残留检测方法。虽然这些方法具有高的选择性和灵敏度，但是存在以下缺点：（1）因仪器体积庞大、结构复杂、价格昂贵；（2）农药残留检测时存在过程复杂、费时、费用高；（3）需要熟练的专业技术人员，无法做到实时连续检测。随着人们对环境、食品安全的要求越来越高，同时，世界发达国家对农药残留标准也越来越高，因此，发展新的快速、自动、价廉、方便、实时在线、大批量的检测农药残留的方法和技术，无论是在促进农业、林业的生产和发展，还是对环境和人们的身体健康都有极其重要意义。酶生物传感器自发现以来，因具有高度的选择性、结构简单、自动、价廉而备受研究者的关注。特别是微电子技术、纳米材料制备技术、生物技术的发展为扩展生物传感器的应用范围、批量生产、集成化、微型化打下了坚实的基础，极大地促进了酶生物传感器的研究与应用。农药残留检测生物传感器的原理主要是利用农药（如有机农药等）与酶（如乙酰胆碱酯酶等）结合来抑制酶的活性，农药的浓度与酶被抑制的活性成一定的数学关系，从而实现对农药残留量的检测。作为生物传感器关键组成物! 活性酶在水溶液中一般不太稳定，且酶只能和底物作用一次。因此，使用起来极不方便，最有效的途径是将酶固定制备成生物敏感膜使用。这就须采用合适的固定技术将酶固定在合适的载体上，因此酶的固定技术是制备生物传感器的关键步骤，这将直接影响传感器的稳定性、灵敏度、检测下限、响应时间和酶的活性、存活时间等。酶的固定技术主要包括酶的固定方法和固定酶的载体材料的选择，当前国内外对农药残留检测生物传感器中酶的固定技术进行了广泛的研究，并取得了许多重要进展。该文就农药残留检测生物传感器中酶的各种固定技术和研究应用进展进行了较全面系统的介绍，并对一些影响传感器性能的因素进行了分析讨论。[B]! 酶的固定方法[/B]酶在基体电极上的固定是酶生物传感器制备中的重要环节，它直接影响传感器的检测性能。酶的固定化技术是指通过某些方式将酶和载体相结合，使酶被集中或限制，使之在一定空间范围内进行催化反应。要想使酶作为生物敏感物质使用，就必须研究如何将酶固定在各种载体上。酶的固定方法主要有吸附法、共价键合法、凝胶% 溶胶法、聚合物包埋修饰法、交联法等方法。[color=#DC143C][B]全文附件在3楼[/B][/color]

  • 【原创大赛】壳聚糖为载体固定猪胰脂肪酶（PPL）的方法研究

    之前，小编采用几丁质作为载体固定化PPL，但是固定化后的PPL没有活性，这次换了一种类似的载体，而这次奇迹粗线了，终于测出了酶活，特此在这里跟大家一起分享。1.实验部分壳聚糖可溶于稀的盐酸，稀的醋酸等，实验选用稀的醋酸来溶解壳聚糖。壳聚糖小球的制备称取不同质量的壳聚糖粉末，加入到一定体积的含1.5%（V/V)醋酸溶液中，在40℃下搅拌2小时，使壳聚糖粉末完全溶解，得到澄清透明的像胶水一样的粘稠液体。配制1mol/L的NaOH溶液，其中含30%的甲醇。待壳聚糖溶液冷却至室温时，用注射器吸取壳聚糖溶液，逐滴加入氢氧化钠-甲醇溶液中，同时轻轻搅拌，使壳聚糖小球析出，形成白色半透明的壳聚糖小球。滴完后，倒掉碱液，将壳聚糖小球用大量纯水冲洗，直至洗液呈中性。再将壳聚糖小球浸泡在纯水中，于冰箱上层保存。壳聚糖小球的活化称取1g壳聚糖小球（湿重），用4ml含不同质量浓度的戊二醛，0.02mol/L的pH=8.0的磷酸钾缓冲溶液，在25℃下，于恒温摇床中以200rpm的转速活化4h。将活化好的壳聚糖小球用大量的纯水进行冲洗，直至没有戊二醛残留。洗好后，将小球浸泡在纯水中，置于冰箱上层保存。PPL的固定化 称取1g活化的壳聚糖小球（湿重）于10ml的烧瓶中，加入2ml通过双水相纯化过的PEG层的PPL，于摇床中4℃,200rpm进行固定化。将PPL固定化一定时间后，取出小球，用适量pH=7.0的0.1mol/L磷酸钠缓冲溶液洗去其表面残留的蛋白质，测试洗液的蛋白含量，以及固定化PPL的酶活。2.结果与讨论2.1 壳聚糖浓度的选择通过大量查阅文献以后，决定用1.5%的醋酸溶解壳聚糖。实验考察了不同壳聚糖浓度，对壳聚糖小球成球的影响，以及制作出的小球经过不同戊二醛浓度活化以后固定PPL的能力。壳聚糖含量NaOH-CH3OH成球情况1.0%1M是1.5%1M是2.0%[font='Ti

  • 求教怎样稳定的将胰蛋白酶固定在毛细管内壁上？

    各位大侠，我现在在做将胰蛋白酶固定在毛细管内壁形成一个酶解微反应器，先是用NaOH将毛细管内壁活化，带上负电荷，然后让带正电荷的胰蛋白酶溶液（将酶配在Tris-HCl，同时含有20mM CaCl2 ,pH 8.0，低于酶的等电点）进入毛细管，通过静电吸引固定上酶，发现在做电泳时候酶的活性损失厉害，估计是酶慢慢的都掉下来了，于是我又在上述步骤后再加上进一定浓度的海藻酸钠，想形成海藻酸钙凝胶加固酶在毛细管内壁上的稳定性，但是发现酶的起始活性比不用海藻酸钠时候还要低很多，请问哪位大侠能帮忙给我建议一个好的方法，将酶稳定的固定在毛细管内壁上且活性能够损失比较少。谢谢了！

  • 亚甲蓝法测定水中硫化物，采样时固定剂用的用量怎么判断呢

    亚甲蓝法测定水中硫化物，采样时固定剂用的用量怎么判断呢

    1. 在采样时，每升水样（没稀释的原水样）先加2 mL乙酸锌-乙酸钠，再加水样，再用氢氧化钠调pH至中性；这个2 mL是否足够呢？可以固定多少mg的硫化物呢？2. 在分析时，每60 mL水样（还是稀释后的）要加入20 mL乙酸锌-乙酸钠。3. 为什么分析的时候水样更少，浓度更低，但需要加入的固定剂的量却更多？？4. 是因为分析的时候所加入的对氨基二甲基苯胺溶液和硫酸铁铵溶液，会更容易使得硫化氢逸出吗？[img=,690,397]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111180941478110_5954_5383916_3.png!w690x397.jpg[/img]万分感谢！

  • 【资料】几种常用的固定剂

    【资料】几种常用的固定剂

    几种常用的固定剂固定剂最先应用在光学显微技术中，但光学显微镜中使用的沉淀凝集蛋白性的固定剂对电镜并不特别适用。于是人们引入四氧化锇和中性甲醛进行固定。早期的电镜生物样品化学固定法都采用四氧化锇单一固定，但四氧化锇不能很好地保存糖原和其它碳水化合物，而且四氧化锇在组织中的渗透速度比较慢（约2mm/h）。而早期使用的中性甲醛也令人很不满意，因为早期使用的甲醛很不纯，含有甲酸和甲醇的残留（一般有10-15％），甲醇的存在对样品的保存很不利，于是后来人们改进了甲醛的制备方法，使用多聚甲醛新鲜配制甲醛，提高了它的纯度。1963年Sabatini、Bensch和Barrnett推荐使用醛类（特别是戊二醛）作为初级固定剂。使用戊二醛或戊二醛-多聚甲醛初步固定后再使用四氧化锇后固定的双重化学固定对大多数动物和植物组织都十分有效，因而成为目前大多数实验室常规的固定方法。 电镜中使用的固定剂都有毒性，操作时都要很小心，尽可能在通风橱中完成操作。如果实验室中发生固定剂泄漏，必须立即用大量奶粉覆盖泄漏出来的溶液，待反应充分后收集处理。 四氧化锇（Osmium tetroxide） 四氧化锇是一种很强的氧化剂，呈浅黄色结晶，分子量254，饱和水溶液的浓度为7.24％，它的水溶液为中性，有极大毒性。市售有密封的四氧化锇晶体和四氧化锇水溶液两种。四氧化锇晶体溶于水的速度很慢，必要时可以使用超声波设备来加速溶解。市面上也有已经配制好的2％四氧化锇水溶液出售，使用相当方便。但要特别注意的是无论是四氧化锇晶体还是水溶液都会挥发出四氧化锇气体，因此应将四氧化锇置于密闭容器（玻璃容器）中保存。四氧化锇气体对呼吸系统有刺激，对眼睛有严重的破坏作用，因此在使用时应特别小心，尽可能在通风橱中进行，并且严格控制用量。废弃的四氧化锇溶液应加入酒精水溶液或硫酸亚铁溶液，使四氧化锇转化为黑色沉淀，以降低毒性方便收集处理。 四氧化锇作为固定剂有如下优点： 1,四氧化锇可以与脂类、糖类和蛋白质反应。其对脂类的固定作用可以补充醛类固定剂对脂类固定不足的缺点。其反应方程式如下： [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/12/200612021950_34195_1634962_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/12/200612021950_34196_1634962_3.jpg[/img]2,能增加膜的反差，起到"电子染色"作用。用四氧化锇固定的材料，往往细胞膜结构比较清晰。这是由于被还原的锇沉积在细胞膜结构上，而锇是一种原子序数较高的元素，能加强它们的电子散射（质量密度大），所以四氧化锇作为固定剂的同时，又可作为电子染料，使被固定的样品图像有较好的反差。 3,四氧化锇会破坏大部分细胞膜的半透膜特性，配制四氧化锇固定液不用考虑渗透压。四氧化锇虽然具有以上优点，但它也存在不少缺点： 四氧化锇渗透力弱，所以组织块要小。否则，将从组织块表面到中间形成一个固定梯度，致使内部自溶过程继续进行引起组织块内部固定不好。 不能保存糖原也不能有效固定核酸，而且对微管固定效果也不理想。 固定的时间不宜太长。时间过长，会使组织变脆，给切片带来困难。此外四氧化锇与蛋白质、不饱和脂肪酸交联形成的复合体都是易溶于水的物质，特别是在长时间的固定后，更易溶解。因此，使用四氧化锇固定样品，时间控制在12小时较为适宜。 四氧化锇能与乙醇或醛类起氧化－还原反应，生成沉淀。所以，醛类处理过的样品转入四氧化锇固定之前或四氧化锇固定之后转入乙醇溶液脱水之前都必须用相应的缓冲液充分漂洗干净。 四氧化锇是酶的钝化剂，不能用于细胞化学的研究。醛类固定剂 甲醛（formaldehyde） 甲醛分子中只有一个碳原子，含有一个醛基，分子式为$CH_2O$，分子量为30。市面上虽然有多种形式的甲醛溶液出售，但它们含有少量的甲酸和甲醇，对被固定的样品产生不良影响，适合电镜固定使用的只有通过由多聚甲醛(paraformaldehyde)新鲜制备的甲醛溶液。甲醛溶液的毒性很大，即使是稀释液也要格外小心操作。甲醛溶液对皮肤有硬化作用，长时间接触可能导致皮肤破裂、皮炎或是过敏症状；甲醛极易挥发，它对呼吸道也有影响，长时间暴露在甲醛气体中会使嗅觉敏感度降低；此外甲醛对眼睛也有影响，而且还被认为是致癌物质。因此在操作甲醛粉末或溶液时都必须很小心，带上手套并在通风橱中进行。少量废弃的醛类试剂（甲醛、戊二醛和丙稀醛等）可以直接在大量流水冲稀的情况下倒进水池内（但要注意有关部门的有关规定），当然少量的醛类试剂与过量的1M甘氨酸混合后，再在大量流水冲稀的情况下倒进水池，会更安全。通常100ml的甲醛(1％)需要50ml的1M甘氨酸，100ml1％戊二醛则需要35ml，而丙稀醛需要40ml。大量的醛类试剂必须集中回收处理。 甲醛作为固定剂有如下特点： 由于甲醛的分子量小，它的穿透能力比戊二醛强，反应温和，可用于细胞组织化学研究的前固定。而且它不象戊二醛有两个醛基，引入较少的游离醛基到组织细胞中，因而在一些细胞组织化学研究中更有利。但它的反应是部分可逆的，对细胞基质保存差，脱水后大部分基质丢失，所以不少实验室不单独使用甲醛来固定样品，而将它与戊二醛配制成混合固定液使用。 甲醛对生物样品的作用与戊二醛相似，主要引起蛋白质交联。在水溶液中，单个的甲醛分子以HO − CH2 − OH的形式存在。反应如下： [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/12/200612021952_34197_1634962_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/12/200612021953_34198_1634962_3.jpg[/img]与戊二醛不同，甲醛既与DNA又与核蛋白反应，但这些反应都是部分可逆的。另外，甲醛固定脂类的能力不强，可以与脂类相连的蛋白质作用。 戊二醛（glutaraldehyde） 戊二醛是一种五碳醛，含有两个醛基。分子式为$C_5H_8O_2$，分子量为100。电镜固定通常用市售的25％的戊二醛水溶液稀释成需要的浓度。其pH为4.0$\sim$5.0。氧气、高温、中性或碱性pH均能使戊二醛发生聚合失去醛基，并降低交联效力，所以平时这种原液应保存在低温处。此外戊二醛存放时间过长时，pH值会降低，颜色变黄，固定效力也大大降低，若戊二醛pH值降至3.5以下或含有其它杂质时，必须纯化后才能使用。戊二醛对皮肤有硬化作用，但它的挥发性较甲醛弱，最好能在通风橱中操作。 戊二醛作为固定剂有如下特点： 它的反应速度快，是优良的前固定剂。但它的渗透速度较慢，必要时配合甲醛使用效果更佳。 它是蛋白质的强固定剂。它能快速而不可逆地与氨基反应，和甲醛相似，戊二醛的一个醛基与氨基反应，脱水后生成不稳定的Schiff键化合物。其反应的可能途径如下： [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/12/200612021954_34199_1634962_3.jpg[/img]

  • 固定污染源排气中氮氧化物

    HJ/T 43—1999《固定污染源排气中氮氧化物的测定 盐酸萘乙二胺分光光度法》亚硝酸钠标准色列管号01234567标准溶液,ml00.200.400.600.801.001.201.50吸收原液,ml20.020.020.020.020.020.020.020.0水,ml5.004.804.604.404.204.003.803.50亚硝酸根含量,ug02.004.006.008.0010.012.015.0亚硝酸根浓度，ug/ml00.0800.160.240.32[td=1,1,48

  • 【讨论】水质采样保存固定

    很多水质检测项目对水样保存有作出要求，比如COD加入硫酸固定，石油类加入盐酸固定，但是没有阐明固定剂浓度，一般理解肯定是浓溶液对结果影响较小，但是如果用弄溶液的话，一个是现场操作和运输的安全性，一个是现场固定如果用到浓盐酸、浓硝酸这类液体的话那肯定是有烟而且又呛，所以我们现在都是配置50%浓度的溶液，但是感觉这样子对结果还是有一点点影响，虽然很小，不知道有没更好的解决办法，想请问各位同行是怎么做的

  • 【资料】固定污染源排气中氮氧化物的测定

    1．1 本标准适用于固定污染源有组织排放的氮氧化物测定。1．2 当采样体积为1 L时，本方法的定性检出浓度为0．7 mg／m3，定量测定的浓度范围为2．4～208 mg／m3。更高浓度的样品，可以用稀释的方法进行测定。1．3 在臭氧浓度大于氮氧化物浓度5倍，二氧化硫浓度大于氮氧化物浓度100倍条件下，对氮氧化物测定有干扰。

  • 色谱柱的固定

    第一次换柱子，FPD检测器。结果进样口和检测器都接不上，按上螺母柱子就滑下来，重新按完后还是滑下来。。要崩溃了。怎么办呢，是不是要固定那个石墨垫圈啊，怎么固定？非常感谢

  • 附图的探头在实验的时候如何固定？！

    附图的探头在实验的时候如何固定？！

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206061004_370636_1740894_3.jpg这个探头我们准备用来测不同配比制备的某材料的光谱变化。发现探头没固定，没发评价。所以来讨教一下如何固定这个探头。请海洋专家支招！！！紧急

  • 固定源废气中二氧化硫和氮氧化物 紫外法

    即将于8月15日实施的固定源废气中二氧化硫/氮氧化物 紫外法在检测机构原有红外法的基础上，是否有扩项的必要？求助，给个比较固定污染源废气 二氧化硫的测定 便携式紫外吸收法http://www.mee.gov.cn/ywgz/fgbz/bz/bzwb/jcffbz/202005/t20200518_779715.shtml固定污染源废气 氮氧化物的测定 便携式紫外吸收法http://www.mee.gov.cn/ywgz/fgbz/bz/bzwb/jcffbz/202005/t20200518_779716.shtml

  • 【分享】固定污染源排气中氮氧化物监测的有关技术规定(wangliqian)

    固定污染源排气中氮氧化物监测的有关技术规定根据国家环保总局（环函[2004]389号）和（环函[2004]394号）要求各地在2005年开展氮氧化物排放量的监测和统计工作（为期一年）的要求，中国环境监测总站制定了《全国污染源氮氧化物监测工作方案》和《固定源氮氧化物监测技术要求（暂行）》，其内容如下：1工作方案NOx固定源监测只限于各种工业炉窑，如电力热力的生产和供应业、化学原料及化学制品业（制酸、氮肥等）、非金属矿物制品业（水泥、玻璃等）、石油加工炼焦及核燃料加工业、黑色（有色）金属冶炼业等行业，不包括民用灶具在内的生活源和移动源NOx排放监测。各地可根据实际情况，结合原有污染源监测计划，如月、季度例行监测、“三同时”竣工验收监测、企业委托监测以及其他对污染源的监测开展本项工作，监测频次不低于2次（按季度监测）。2监测技术要求和质量保证(1) 按总站统字[2004]137号文规定，根据NOx监测计算方法相关规定和要求， NOx监测采样仪器应同时具有NO、NO2传感器。例如：km9106、testo350xl、testo360等型号，一般NOx测试仪只装有NO传感器，应通过加装NO2传感器来解决。(2)生产设施应处于正常的运行工况：a.燃煤锅炉其生产运行负荷不能低于额定负荷的70%；b.工艺废气监测，不能低于75%；c.工业炉窑监测在最大热负荷下（即在燃料耗量较大稳定加温阶段）进行；d.正常生产但长期低负荷运转设备，采样期间的工况应与平时运行工况相同；e.有污染治理设施的污染源，应在其治理设施处于正常稳定运行状态时监测。(3)采样频次和采样时间：a.对连续稳定的排放源，每次监测采样次数不得少于3次。对排气筒中氮氧化物采样每次采样时间视氮氧化物浓度而定，一般不得少于10min。b.对生产稳定且周期性排放的污染源，每次监测采样周期不得少于2个，每一周期不少于3次，采样时间要求与1）相同。c.对间断性排放的污染源，执行GB16297-1996《大气污染物综合排放标准》。 (4) 尽量避免被测排放物中共存污染物因子对仪器分析的交叉干扰；被测排放物的浓度应在仪器测试量程的有效范围，即仪器量程的30％～70%之间。(5)采样管材质可选用不锈钢、硬质玻璃、石英、陶瓷、氟树脂（氟橡胶）或硅橡胶，滤料材质为无碱玻璃棉或硅酸铝纤维，有滤尘、加热装置和保温措施，加热温度的范围为140℃～160℃。其它质量保证要求见本文相关章节。(6)烟气监测仪器在测试前按监测因子分别用标准气体和流量计对其进行校准（标定），在测试时应保证其采样流量。 (7)当采用连续监测系统对NOx进行监测时，采样枪进入测点2分钟后开始读数（打印），每2分钟打印一次，5次打印为一个测量周期。然后将采样枪取出在空气中清洁至零，再开始第二个周期测量。将每个周期的5个值求平均，作为一次的测量结果，每次监测作3个测量周期。连续监测系统应至少半年进行一次标定和参比测试，参比测试和实测值的误差应满足（HJ/T76-2001）要求。(8)NOx排放浓度按国家环保总局环函[2004]273号和总站总工字[2004]117号文规定，以折算后的NO2排放浓度计。a.当监测仪器读数以质量体积比浓度表示时，将应NO实测值按NO2与NO分子量之比折算为NO2当量，再加NO2实测值，即NOX浓度：CNOx=(NO×46/30)+ NO2式中：C——污染物的标准状态下干排[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量体积比浓度：mg/m3(或μg/m3)；b.当监测仪器读数以体积比浓度表示时，应按下式进行换算：CNOx=(XNO+ XNO2)×2.05式中：C——污染物的标准状态下干排[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量体积比浓度：mg/m3(或μg/m3)；X——污染物的体积比浓度：μmol/mol。

  • 固定式压力容器的计量检定周期如何界定？

    固定式压力容器：有固定安装和使用地点，工艺条件和操作人员也较固定的压力容器。常见的如场站内的球罐、卧式罐、立式罐、储气井以及过滤器等。检定周期按照《固定式压力容器安全技术监察规程》TSG 21-2016的8.1.6条要求：1)、 金属压力容器检验周期金属压力容器一般于投用后3 年内进行首次定期检验。以后的检验周期由检验机构根据压力容器的安全状况等级，按照以下要求确定：(1)安全状况等级为1、2 级的，一般每6 年检验一次；(2)安全状况等级为3 级的，一般每3 年至6 年检验一次；(3)安全状况等级为4 级的，监控使用，其检验周期由检验机构确定，累计监控使用时间不得超过3 年，在监控使用期间，使用单位应当采取有效的监控措施；(4)安全状况等级为5 级的，应当对缺陷进行处理，否则不得继续使用。2 ）、非金属压力容器检验周期。。。。。。规程中的条文8.1.7检验周期的特殊规定，符合其中的8.1.7.1检验周期的缩短和8.1.7.2 检验周期的延长情况的，检验周期做相应的调整。9.2.1.2 压力表检定压力表的检定和维护应当符合国家计量部门的有关规定，压力表安装前应当进行检定，在刻度盘上应当划出指示工作压力的红线，注明下次检定日期。压力表检定后应当加铅封。此处引用了一条，适合固定式压力容器安全附件的压力表的检定条文，其中提到了“压力表安装前应当进行检定，在刻度盘上应当划出指示工作压力的红线，这是我唯一知道的要求对压力表进行红线标识工作压力的要求，却被一些检查者演变成对燃气工程所有压力表的要求，我不知道是我孤陋寡闻，还是某些朋友张冠李戴，希望知道的朋友留言讨论。压力容器具体的安全状况等级按照TSG 21-2016的8.5和8.6进行判断。

  • 固定污染源采样记录表

    请问固定污染源烟气和烟尘的采样记录表分开编制还是编制在一起呢？需要在原始记录记录哪些参数呢？大家能给我截个图看看这个采样表怎么做吗？谢谢啦。（想申请固定污染源氯化氢 氯气 硫化氢 二氧化硫 氮氧化物 一氧化碳 颗粒物 沥青烟）

  • 固定污染源监测监督管理 ? 解读③ | 加强固定污染源执法监测 助力环境监管效能再提升

    固定污染源监测监督管理是深入打好污染防治攻坚战的基石，是精准治污、科学治污、依法治污的重要抓手，是排污许可制度的重要支撑。《“十四五”生态环境监测规划》也明确提出要坚持国家指导、省级统筹、市县承担，深入推进执法监测机制优化增效。　　生态环境部近日印发了《关于进一步加强固定污染源监测监督管理的通知》（以下简称《通知》），从压实生态环境部门执法监测责任、强化环境监测和执法联动两个方面对固定污染源执法监测工作提出了具体要求，擘画了固定污染源执法监测的蓝图，为进一步规范和强化执法监测明确了方向，为深入打好污染防治攻坚战提供了坚实保障。　　在生态环境部的悉心指导和关心下，上海市积极探索固定污染源执法监测工作，创新工作方式方法，形成了一些有效的做法和制度。《通知》印发后，上海市紧紧围绕《通知》的落地实施，进一步优化执法监测工作机制，推动固定污染源监测监督管理上新台阶，推进生态环境治理能力和治理体系现代化，为提升环境监管效能提供坚强有力的支撑保障。　　强化质控，固本培元。质量控制是保证固定污染源监测数据的真实性、准确性和可比性的关键环节，是固定污染源监测工作的生命线。上海市高度重视固定污染源监测质量控制工作，苦练“内功”，在认真执行固定污染源相关监测技术规范的基础上，针对现场监测监管难点及薄弱环节，制定固定污染源现场监测移动端使用技术要求，会同浙江省和江苏省联合发布《长三角生态绿色一体化发展示范区固定污染源废气现场监测技术规范》，切实加强现场监测质量控制；明确环境监测报告技术复核流程，确保监测全过程的合规性、监测数据的准确性和监测报告的有效性。发布《上海市生态环境监测社会化服务机构管理办法》，从“事前”备案管理、“事中”分级分类监管、“事后”信用评价和激励惩戒机制等方面规范社会化监测服务行为，提高监测数据质量；试点开展固定污染源自动监控运维机构信用评价工作，有序推进运维机构的分级分类监管。　　测管协同，联动增效。《通知》提出强化环境监测和执法联动。上海市印发《固定污染源生态环境监督管理办法（试行）》，明确市、区、乡镇（街道）固定污染源监管范围，厘清生态环境部门内部监管、监测、执法“三监联动”工作职责，建立“三监联动”工作机制，强化部门协作和市区协同，对固定污染源监督管理实施全流程和闭环管理，提升监管效能；印发《上海市环境执法监测暂行规定》，进一步明确执法监测定义、回避处理原则和现场监测、执法联动流程，优化执法、监测协作配合机制，提高监测数据在执法中的有效运用；规范污染源自动监控设施运行监管和自动监测数据执法应用，明确固定污染源自动监控设施的运行及数据审核机制，进一步规范了自动监测数据的执法应用。组织监测机构及执法机构开展自动监控专项执法检查及练兵比武活动，严厉打击数据弄虚作假和自动监控设施不正常运行等行为。　　科技引领，智慧赋能。上海市重视信息化技术在固定污染源监测管理中的应用，印发《上海市固定污染源信息库建设及动态管理规定（试行）》，建立了固定污染源信息库，根据建设项目环境影响评价、排污许可证发证和登记情况、生态环境监管需求和监管结果、环境信用评价结果等实施动态更新，并与执法部门执法对象库实现了统一；编制上海市现代化生态环境智慧监测体系建设方案，依托上海市污染源综合管理信息系统，汇集自行监测、执法监测、自动监测数据，加强走航监测、遥感监测、预警监测等技术业务化应用，支撑非现场监管和执法，利用大数据、人工智能等手段提升监管效能。　　在上海市固定污染源监测监督管理各条线同志的努力下，上海市初步构建了职责明确、协同联动的执法监测管理机制。下一步，上海市生态环境系统将继续以习近平生态文明思想为指引，进一步加强固定污染源执法监测管理，服务深入打好污染防治攻坚战。　　[b]一是持续完善环境执法监测机制。[/b]确保执法监测工作有法可依、程序规范、留痕溯源、数据精准，细化环境监测和环境执法的责任及工作任务。强化自动监测数据的日常审核和执法应用，加强对异常数据的原因分析，继续开展自动监测设备比对抽测，对比对不合格且经核实未按相关标准规范运维的排污单位严格执法。　　[b]二是不断提高执法监测监管效能。[/b]加强便携快速现场原位走航监测、无人机/船监测、遥感监测等新技术应用，推进大数据融合智慧监测。利用大数据、人工智能技术充分进行数据挖掘和异常行为分析，提高执法精准性。实现监测技术基础数据的信息化和现场监测的智能化，持续提升固定污染源非现场监管智能分析和监管能力。　　[b]三是建设高质量的监测技术人才队伍。[/b]加强对监测人员的培训，重点培养专业人才队伍。继续开展监测人员和执法人员的大练兵大比武，积极做好应急监测演练工作，不断提高监测技术人员的专业能力，不断强化技术人才资源储备，持续满足对执法监测工作的新要求。

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