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合成代谢类固醇

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  • 气相色谱法测定生物柴油中类固醇含量

    类固醇(包括固醇)是在植物油中存在的天然非甘油酯类组分。由于它们在生物柴油中可溶,所以会在产品中出现。它们的存在可能会对生物柴油质量造成影响。 测定类固醇的两种常用方法是GC-FID联用和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-[b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url][/b]联用。 早在20世纪90年代,Plank和Lorbeer就开始进行生物柴油中类固醇分析的工作。zui初他们提出了一种GC-FID法,以测定由菜籽油制得的植物油甲酯中的游离固醇和酯化固醇。在进行分析之前,先用含1%三甲基氯化硅烷的BSTFA将样品硅烷化,随后将样品在含5%苯基的甲基聚硅氧烷柱中进行分析。在由菜籽油制得的生物柴油中检出了菜籽油甾醇、β-谷甾醇、芸苔甾醇、胆固醇、豆甾醇和燕麦甾醇以及它们的酯。 此后该课题组又研发了LC-GC法,以测定菜籽油甲酯中的游离固醇,后来对这种方法又进行了一些改进。 现在人们更倾向于使用LC-GC法,因为该法能够提供更多的样品信息,分析时间较短,结果的可重复性也比较好。LC-GC法无需对样品进行提纯和皂化处理,但必须先用MSTFA将游离固醇硅烷化。运用这种方法,人们已经对一些以大豆、几种油菜籽、葵花籽和餐厨废油为原料的生物柴油进行了成功的分析

  • 【原创】同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮

    [size=4][color=#DC143C][font=黑体]同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮[/font][/color][/size]=========================================在所使用的禁用物质中,类固醇激素是较为普遍使用的一类药物。人体自身能合成与分泌的类固醇激素称为内源性类固醇激素,如攀酮。由于在检测方法上有一定难度,一些运动员选择使用内源性类固醇制剂以逃避兴奋剂检测。目前,兴奋剂检测实验室应用同位素比质谱分析方法检测内源性类固醇来源。13C和12C是碳元素在自然界中的天然同位素。有机化合物的来源不同,其同位素比(如13C与12C的比值)也不同。人体自身分泌的类固醇与相同化学结构的类固醇制剂的同位素比不同。应用同位素比质谱分析技术可以测定化合物13C与12C的比值,同位素比用δ(‰)值表示。根据仪器的分析流程和组成部分,本文方法称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比质谱([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS)方法。该方法在兴奋剂检测中的应用时间较短,文献方法较为繁琐,本文建立了快速灵敏的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析方法。-------------------------------------------------试验材料与方法1. 试剂和对照品试剂:β-葡萄糖醛酸酶,Sigma;其余均为国产分析纯试剂。对照品:睾酮(缩写T)、雄酮(缩写An)、本胆烷醇酮(缩写Etio)、5α-雄烷-3α,17β-二醇(缩写5α-diol)、5β-雄烷-3α,17β-二醇(缩写5β-diol)、孕二醇(缩写PD)购自Sigma公司。2. 样品两名健康志愿者,一名男性40岁,尿样为sample 1;一名女性38岁,尿样为sample 2,均没有服用任何药物。收集其晨尿为阴性对照尿。阳性尿样为世界反兴奋剂机构水平考试所用尿样来自兴奋剂检测中心。3. 仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比值质谱仪(HP6890/DELTA PLUS,Finnigan);高效液相色谱仪(Waters2796,检测器:Waters2996 PAD,自动收集器:Waters Fraction Collector Ⅲ);Anilent 5973i[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪。4. 方法4.I [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS操作条件色谱柱:HP5毛细管色谱柱,25m×0.2mm i.d.×0.3μm;柱流速:1mL/min(室温);升温程序:60 ℃(2min)一50 ℃/min→255℃一2.5℃/min→280℃(6.5min);进样口温度:260℃;燃烧炉温度:960℃;质谱离子源:EI;参考气:CO2,1.8V。4.2 高效液相色谱仪操作条件色谱柱:ZQRBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:水-乙睛,梯度洗脱(0-18min:乙睛从30%→100%);流速1mL/min;柱温:室温。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD操作条件色谱柱:HP-1毛细管色谱柱,25 m×0.2mm i.d.×0.11μm;柱流速:1 mL/min (室温);升温程序:150 ℃(1min一5℃/min→200℃一30℃/min→310℃(10min)。4.4 样品预处理取尿样2mL,加人1Ml0.2mol pH=7.0的磷酸盐缓冲液和10μLβ-葡萄糖醛酸酶(5000 IU)混匀,在55℃恒温水浴中培养3h,取出后加pH=8.8的碳酸盐固体缓冲剂约100mg 和5mL叔丁基甲醚,振荡萃取,离心后,取出上层有机溶液,在加热的情况下,用氮气吹干,加人50μL甲醇溶解残渣,备用。将上述甲醇溶液置HPLC仪上,依前述色谱条件分离,分段收集流出液,确定收集时间程序。分别将流出组分用氮气吹干,加人50μL环己烷,备用。4.5 对照品溶液的制备分别配制对照品睾酮、雄酮、本胆烷醇酮、5α-雄烷-3α,17β-二醇、5β-雄烷-3α,17β-二醇,孕二醇的甲醇溶液,浓度为1mg/mL。4.6 样品测定4.6.1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD 分析依上述[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD仪器操作条件,取样品溶液及对照品溶液进行全扫描,扫描范围m/z 20~450,选择待测物的特征离子,获得SIM图。经对样品中与对照品有相同保留时间的峰进行质谱分析,及与标准品质谱图的对比,确定待测样品的组成。4.6.2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析依上述CC/C/IRMS仪器操作条件,对处理后的样品进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析,测得内源性类固醇激素的δ值。

  • 类固醇或能有效治疗食物中毒引发的痉挛昏睡

    新华社东京1月19日电 (记者蓝建中)肠出血性大肠杆菌导致食物中毒时,重症患者有时会出现痉挛和昏睡等脑部症状,甚至会死亡。东京大学和富山大学的研究小组发现,如果在短时间内给重症患者大量注射类固醇,可能会取得较好效果。 2011年,日本烤肉连锁店“惠比寿烤肉酒家”的生拌牛肉引发集体食物中毒事件,导致5人死亡,食物中毒是由大肠杆菌O111引发的。 研究小组对富山、石川和福井等地的86名患者的治疗记录进行了分析。在这些患者中,有34人出现了伴随着肾功能衰竭的溶血尿毒综合征,有21人出现了痉挛和昏睡等脑部症状。 在最初进行治疗时,医生采用的是血浆交换等治疗手段,但是在开始注射类固醇之后,就不再出现死亡病例,在接受类固醇治疗的12名脑部症状患者中,有11人没有出现后遗症而康复。研究小组指出,这参考了治疗流感病毒导致的脑部症状时使用类固醇的做法。 在大肠杆菌O111导致的食物中毒中,通常有很多患者会出现脑部症状。东京大学教授水口雅指出:“对于食物中毒导致的脑部症状,一直缺乏有效的治疗方法,这个发现有可能促进开发出新的治疗方法。” 这一成果论文已经刊登在最新一期美国《神经病学》杂志网络版上。

  • 鱼体内源性类固醇激素物质的检测(HPLC-Q/TOF,ABSciex 5600+)

    各位前辈大家好: 初来乍到请多多关照!我最近想做监测鱼体内血清中类固醇激素的实验,实验室的仪器和设备都是很齐全的,我打算用HPLC-Q/TOF去做,先定性后定量。现在有一个问题难倒我了,就是标准品因为我做内源性的激素物质的监测,雄激素、雌激素和孕激素的标准品大多是哺乳动物和人的,我有3点疑惑,请懂的人帮忙指点一下:1、有卖的雌激素、雄激素和孕激素是从鱼体内提取的吗?谁知道请帮我提供一个公司的名称被 2、如果标准品都是从人或者哺乳动物体内提取的,我在用飞行时间质谱做鱼体内监测的时候能够扫描出来吗,比如说标准品是雌二醇是从人体内提取后制成标准品的,那么我监测鱼体内的内源性雌二醇能扫描出来吗,是同一种物质吗,分子结构是否相同呢?我看一些标准中检测过外源性性激素,他们所用的标准品是怎么合成的呢,我用这种标准品能够检测我鱼体内的呢?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em34.gif(说的有点麻烦,不知道大家看懂没) 3、用过ABSciex家的5600+的仪器的高手们,请问在没有标准品的情况下是否无法进行监测,不用标准品有没有什么软件或者技术能分析出来物质,没有标准品无法进行定量吧!问题很棘手也很多!请大家给予帮助,初来乍到积分很少,努力攒积分吧!谢谢了!

  • 维生素C能增加“好”胆固醇水平

    维生素C能增加“好”胆固醇的水平,促进胆固醇代谢,并可抑制胆固醇合成酶的活性,降低胆固醇合成速率,从而达到控制血脂的目的。新鲜果蔬富含维生素C,比如猕猴桃、鲜枣、青椒、绿叶菜等。

  • 气质或者液质联用检测血清或细胞培养上清中的胆固醇中间代谢产物

    想检测血清或细胞培养上清中的胆固醇中间代谢产物,是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]的好,还是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]的好! 样品需要经过怎么处理呀! 非常感谢! 以前完全没接触过这方面的技术。谢谢回答!

  • 美国咋又不限制胆固醇啦?胆固醇有啥用

    300mg)的两倍。这些研究结果提示,不应过分限制或降低胆固醇的摄入量。  我国2000年版《中国居民膳食营养素推荐摄入量》中对膳食胆固醇摄入量的推荐值是每天小于300毫克。在2013年版《中国居民膳食营养素推荐摄入量》中提出,每天从膳食中摄入的胆固醇为300-500毫克,对胆固醇的限制也有所降低。从我个人观点来说,为了健康,还是适量而可为好。  哪些食物中的胆固醇含量比较高?  1、猪脑、羊脑:每100克中含胆固醇在2000毫克以上。  2、动物的内脏:肝、肾、肺、心、舌、肚、大肠,蟹黄、鱼籽、墨斗鱼。 3、肥肉:猪、羊、牛、鸡、鸭等动物性食物的肥肉中。

  • 如何预防胆固醇水平超标

    预防胆固醇水平超标,建议少吃动物内脏、肥肉等胆固醇含量较高的食物,多吃新鲜水果和蔬菜、杂粮、豆类等。

  • 预防血管变硬 少吃含高胆固醇食物

    [color=#3e3e3e]预防血管变硬,少吃含高胆固醇食物。例如肥肉、动物油、动物内脏等,可适当吃些深海鱼油。这种饮食方式能在一定程度上降低总胆固醇及“坏胆固醇”,维护血管弹性,降低脑卒中、心梗等风险,但不能代替药物。[/color]

  • 胆固醇酯类物质 如 油酸胆固醇酯等 的GC-MS检测

    大家好,我现在在做 纸浆中的 胆固醇酯类和甘油三酯类 物质的GC-MS 检测,用的柱子是安捷伦公司的 DB-5HT,目前一直很苦恼如何对纸浆样品进行预处理,直接跑好像样品无法完全气化?。。还有同学老师们帮忙解答,感激不尽 Thank you so much!!(另外,像胆固醇标样和油酸胆固醇酯类标样可以直接检测吗?酯的沸点有六百多度,好像很困难,不知道有什么衍生化的方法。。)

  • 鸡爪含胆固醇吗,如何吃更健康?

    鸡爪子,广东人美名曰“凤爪”,是广东人不可缺少的食品,节前与同学聚会时听闻也有胆固醇。其实鸡爪主要是鸡皮和肌腱,以胶原组织为主,真正的胆固醇含量应该是不高,网上的资料也是众说纷纭。现在有很多是人是用油来烹饪,估计更多的胆固醇是来自用油,而不是鸡爪本身。建议大家参照以下这个方法去做,吃得更放心。先用开水煮8分钟,捞起,用干净冷水(最好是冰水)泡三次,每次水暖就换掉。然后根据自己的口味,加调味料(盐焗鸡粉、醋、辣椒等),既爽又不油腻。

  • 【原创大赛】破译鸡蛋中胆固醇的真相

    破译鸡蛋中胆固醇的真相1. 前言鸡蛋营养丰富,含有蛋白质、脂肪、胆固醇、卵磷脂、维生素、铁、钙、钾等人体需要的矿物质。然而有研究人员提出,鸡蛋胆固醇含量相对较高,过多摄入鸡蛋会导致人体血清胆固醇增高,引发心血管疾病。由此我们对鸡蛋中胆固醇含量进行研究,探索快速检测鸡蛋中胆固醇含量的方法。2. 实验部分2.1 仪器与试剂 仪器: HanonLC7000四元低压高效液相色谱系统(配置高压泵,紫外检测器),万分之一电子天平,涡旋混合仪,离心机,超声波清洗器 试剂: 胆固醇标准品,甲醇(色谱纯),异丙醇(分析纯),乙醚(分析纯),石油醚(分析纯),无水乙醇(分析纯),市售普通鸡蛋2.2 色谱条件色谱柱:C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm;流动相:甲醇-异丙醇(4:1,v/v);流速:1.0mL/min;温度:25℃; 进样量:20μL;检测波长:205nm。2.3 标准溶液配制准确称取胆固醇标准品25mg,于25ml容量瓶中,用无水乙醇溶解稀释至刻度,得胆固醇储备液(1.0g/L)。取胆固醇储备液0.0,0.5, 1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,1.0ml于10ml容量瓶中,无水乙醇稀释定容,的浓度为0,0.05 ,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0g/L 胆固醇标准溶液。2.4 样品前处理取鸡蛋称重,除去蛋清,准确称取蛋黄重量。取蛋黄样品2.0g,用20ml高纯水溶解稀释混匀,得蛋黄稀释液(0.1g/ml)。取蛋黄稀释液1.0ml于具塞离心管中,加无水乙醇1.0ml,涡旋混匀,加乙醚3.0ml,石油醚3.0ml,涡旋混合,将混合液离心(4000r/min),使液体分层,取上层有机相;下层再加入2.0ml乙醚和2.0ml石油醚进行萃取,合并上层萃取液,氮吹仪吹干(温度30℃),0.5ml乙醇溶解,经0.45μm有机微孔滤膜过滤后,上机检测。3. 结果与讨论3.1 标准工作曲线 配制好的系列胆固醇标准溶液,在设定好的色谱条件下进行色谱分析,进样量为20μL,保留时间为6.72min,每个浓度标准溶液重复进样三次,以峰高H(mAU)为纵坐标,胆固醇标准溶液浓度C(g/L)为横坐标,绘制标准工作曲线,线性回归方程为H=76.45C-0.052,相关系数r=0.9991。3.2 蛋黄中胆固醇含量将处理好的蛋黄样品取样测试,进样量20μL,在6.72min胆固醇被洗脱出来,蛋黄其他组分能与胆固醇有效分离,不干扰胆固醇的测定。由胆固醇标准曲线回归方程计算胆固醇含量。(液相图谱件见图1,结果见表1)图1 蛋黄胆固醇液相图谱http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/2017011916

  • 实验室分析仪器--气质联用在医学检验中的应用

    [b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]([/font][font=微软雅黑]1)遗传代谢性疾病的检测[/font][/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]遗传代谢性疾病的单一病种的发病率较低,但其种类繁多,总体发病率仍然较高。目前,[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]可同时筛查氨基酸、有机酸、糖代谢异常及脂肪代谢紊乱等共100余种疾病。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]方法在日本等发达国家已广泛应用于婴幼儿及新生儿遗传性代谢疾病的筛查和诊断,取得了良好效果。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]可以检测血液、尿液、脑脊液、唾液、汗液等,而且所需样本量较少,尿液一般需要10mL左右,血滤纸片只需直径16mm血片,约相当于80μL左右全血,实现了“一种方法检测多种疾病”,大大提高了检测效率。[/font][/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]样品的前处理是一个繁琐而耗时的过程。传统的衍生方法所需时间较长(大于30min),Deng等提出利用微波辅助进行甲基硅烷化,认为给予700W能量好和照射60s是最佳条件,较传统方法缩短近30倍。[/font][font=微软雅黑] [/font][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]([/font][font=微软雅黑]2)尿液类固醇激素的谱分析[/font][/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]用[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]进行尿液类固醇激素的谱分析对诊断新生儿和成人的类固醇激素合成和代谢异常有非常重要的作用。早在1986年,Shackleton等就提出用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]进行尿液类固醇激素谱分析应遵循以下原则:1)精确收集24h尿样;2)从尿液中提取所有结合型类固醇激素;3)完全水解所有结合型类固醇激素;4)高游离类固醇激素的回收率;5)转化所有激素为挥发性衍生物;6)调整所测组分的色谱分辨率;7)在较广泛的浓度梯度范围内有良好的线性反应;8)反应因素确定:只与纯化的待测定的类固醇激素反应;9)每个激素的再现性好;10)无杂质干扰。类固醇激素的谱分析可用于鉴别不同种类的先天性肾上腺皮质增生、Cushing综合症、肾上腺功能不全或抑制状态。Homma等在日本建立了足月新生儿尿液类固醇激素的参考值。他们通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]选择性离子扫描方式成功界定了50种尿液类固醇激素的参考值。其实验结果显示,脱氢表雄酮、孕烯醇酮、17-羟孕酮、皮质醇的主要代谢产物在白天(06:00-14:00)和晚上(21:00-24:00)无显著性差异。[/font][/font][font=微软雅黑] [/font][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]([/font][font=微软雅黑]3)产前诊断[/font][/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]产前诊断又称宫内诊断或出生前诊断,是指直接或间接地对孕期胎儿情况进行检测,继而采取一些必要的措施防止严重遗传病、先天性畸形和智力障碍患儿的出生,提高人口素质。目前,文献中报道的能用[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]进行产前诊断的疾病包括甲级丙二酸血症、丙酸血症、酪氨酸血症及其他一些有机酸血症。检测的样本可来自羊水、母亲尿液等。[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 【求助】关于使用GB/T 5009.128-2003 测量胆固醇的问题

    最近接到一个检测任务,就是用GB/T 5009.128-2003 测量猪里脊肉中的胆固醇,这个试验是第一次做,而且项目也没有认证,想问问各位有没有熟悉这个项目的,试验主要注意什么呢。1 我已经买了一瓶分析纯的胆固醇按要求配了储备液,分析纯的行不行,需不需要从国家标物中心购买标物?2 标准中是硫酸铁铵一个结晶水的,可是我购买到的以及咨询的都是12个结晶水的,因为没联系上标准制定者,想问问是不是标准里写错了?3 我的第一次工作曲线结果:微克 0 40 80 120 160 200 吸光值 0.0957 0.1641 0.2733 0.4076 0.5195 0.6451大家看看我的曲线数值怎么样,第一个点偏高我已经找到原因了。谢谢,希望能得到帮助。

  • 了解鸡蛋里的胆固醇

    鸡蛋里虽有胆固醇,但也有卵磷脂、叶黄素等多种心血管保健成分,以及对降低同半胱氨酸水平有利的多种B族维生素和甜菜碱。

  • 请教下做胆固醇的问题

    做胆固醇时前处理需要皂化,皂化的目的是什么,皂化装置是一个烧瓶和冷凝装置吗?提取过程为何说三次有机溶剂合并一起,意思是包含皂化过程中的有机溶剂吗?望路过的指点。

  • 【转帖】整合代谢工程和合成生物学大肠杆菌合成紫杉醇重要前体

    众所周知,紫杉醇是重要的抗癌药物,其作用机制是抑制癌细胞的有丝分裂。紫杉醇对包括乳腺癌在内的多种癌症有很好的治疗效果,其最高销售额曾超过10亿美元。虽然随着专利的到期,其售价有了较大幅度的降低,但是其价格仍然相当昂贵,一个疗程的价格超过1万美元。 紫杉醇是植物来源的抗癌药物,最初治疗一个病人需要4-5棵太平洋红豆杉的树皮。由于太平洋红豆杉数量非常有限,生长周期很长,并且剥去红豆杉树皮后回导致红豆杉的死亡,因此使用红豆杉树皮来提取紫杉醇治疗癌症病人面临很强的伦理困境。面对此两难境地,科学家发挥科学创新精神,开发出了红豆杉植物细胞培养技术来获取紫杉醇,随着研究是深入,科学家发现可将使用decorative yew的树叶提取紫杉醇的前体,使用化学合成的方法合成紫杉醇。由于decorative yew树叶来源很广,使用树叶也不会杀死树木本身,加之后续合成的高效性,这种提取加合成的方法称为紫杉醇的主要来源。化学全合成是获得化合物的主要手段之一,科学家经过努力也成功地合成了紫杉醇,由于紫杉醇结构复杂,化学合成需要35-50步,得率很低,因此紫杉醇的化学全合成科学意义很大,实际应用的价值不大。  微生物具有底物利用广泛,生长速度快,研究深入,大规模生产容易等优点,非常适合药物的生产,与紫杉醇同为萜类化合物的青蒿素已经通过精确的途径改造和优化,已经实现了工业化生产,这表明通过代谢工程和合成生物学手段在微生物中合成宿主本身不产生的复杂小分子是可行的,也为后续的相关研究提供可供借鉴的策略和经验。 美国麻省理工大学和Tufts大学科学家沿着这个思路,合成紫杉醇的前体taxadiene和 taxadiene-5-alpha-ol。虽然大肠杆菌并不能够产生这两种物质,但是合成他们的前体IPP是大肠杆菌生理代谢过程中的一个中间产物,IPP能够通过两部的酶促反应合成taxadiene。催化后续两部反应的酶类已经从植物中克隆出来。  美国科学家首先优化了IPP的生物合成,以大量生成IPP为后续的酶促反应提供底物。 IPP的生物合成有8个步骤,研究发现其中的四个步骤是限速步骤,通过提高限速步骤的酶量,控制整个催化的效率,大量的合成了IPP。接着讲植物的催化酶引入到工程菌株中,优化催化酶的密码子和表达水平,产生了大量的taxadiene。与只加入催化酶没有进行相关优化相比,其产量提高了1500倍,也比已有的文献报道的产量提高了1000倍。接着科学家有加入能够催化taxadiene合成 taxadiene-5-alpha-ol的酶类,将合成紫杉醇的途径有往前迈了一步。  虽然离合成能够化学转化的前体浆果赤霉素(baccatin III)还有比较远的距离,但是本研究表明在弄清楚紫杉醇的合成途径后,使用大肠杆菌合成紫杉醇很有潜力。 本研究中使用的平台技术和手段对合成其他化合物具有通用性,因此使用代谢工程结合合成生物学手段将开启动植物来源的活性小分子微生物表达的大门。  Source: “Isoprenoid Pathway Optimization for Taxol Precursor Overproduction in Escherichia coli” by Parayil Kumaran Ajikumar, Wen-Hai Xiao, Keith E. J. Tyo, Yong Wang, Fritz Simeon, Effendi Leonard, Oliver Mucha, Too Heng Phon, Blaine Pfeifer, Gregory Stephanopoulos. Science, 1 October, 2010. Funding: Singapore-MIT Alliance, National Institutes of Health and a Milheim Foundation Grant for Cancer Research

  • 富含对降胆固醇更有意义

    富含对降胆固醇更有意义的纤维食物是有黏性的水溶性纤维食物,如燕麦、豆类、大麦、亚麻籽、豌豆、胡萝卜和多种水果等富含的纤维。

  • 胆固醇酯高温气相色谱易分解

    我用的是安捷伦7890B连接质谱,采用的是一根最高温度430℃的高温柱,进样口温度设置在280℃,按照文献的进样口温度设置的。标准物为胆固醇酯,就是一个胆固醇在羟基上连接一个十六碳的脂肪酸,沸点651.5摄氏度。我每次进样的时候样品都会分解,不知道大家有没有遇到过这样的情况,一般遇到这种物质对于进样方式上会有什么要求?我也看得有的文献采用冷柱头进样,冷柱头进样又有什么作用呢?

  • 麦角固醇如何用ESI 源来测

    之前查的很多资料都是用APPI或APCI来做麦角固醇,但我这里只有ESI源,请问像是这种小极性或弱极性的化合物,如何能充分利用ESI源来做,请大家集思广益,多多帮助。向标准品中引入H或Na是怎么引入呢???

  • 【原创】固相萃取(SPE)应用实例汇集(16)---每天一例

    [font=黑体]尿液中的合成代谢类固醇类药物固相萃取净化方法[/font]1.样品预处理在尿液中加入内标物和2mLβ-葡萄糖醛酸酶( 5000F单位/mL)充分混合,在65℃条件下水解3h,处理前冷却,用1.0mol/L的KOH溶液调节pH值至6.0±0.5;2. SPE净化a. 活化:分别用3mL甲醇,3mL去离子水和1mL 100mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH6.0);在上样前保持柱床湿润;b. 上样:以1~2 mL/min的流速将样品载入SPE柱;c. 淋洗:用3mL10%(v/v)甲醇去离子水溶液淋洗,通空气5min干燥柱床;再用1mL的正己烷或者正己烷/乙酸乙酯( 50/ 500,v/v)淋洗SPE柱;d. 洗脱:可以选择如下四种方法,收集洗脱液;1) 3mL二氯甲烷/异丙醇/NH4OH( 78/ 80/ 2, v/v),溶剂流速控制1~ 2mL/min,收集洗脱液;洗脱液必须为当天制备的新鲜溶液 2)3mL二氯甲烷/异丙醇(80/20) 3)3mL乙酸乙酯 4)3mL甲醇。3.蒸发干燥4.衍生化加入50μL MSTFA(含有3%的碘化三甲基甲硅烷基),充分混合,70℃条件下反应 20min,冷却。5. Varian Saturn 2200 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-MS检测6. 样品成分睾丸激素19-noretiocholanon16-A-hydroxyetiocholanone康复龙普拉睾酮10-去甲睾酮康复龙代谢物1康复龙代谢物211-B-羟基睾丸激素去氢甲基睾丸素19-norandosterone16-A-表睾(甾)酮司坦唑醇方法中使用的SPE柱:Bond Elut Certify(130mg, 3mL,PN.12102051)。

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