合成与水解工艺

湖南中医药大学药学院和中南大学化学化工学院的研究人员研究了改进的盐酸舍曲林的合成工艺。他们以α-萘酚为起始原料，经烷基化、甲胺胺化、Pd/C催化氢化、D-(-)扁桃酸拆分，成盐而合成盐酸舍曲林。结果发现：以α-萘酚计，总收率由文献的16.2%提高到31.5%；盐酸舍曲林的结构经红外、差热分析、核磁、质谱确证。该方法工艺简单，适合工业化生产。 蚓激酶提取纯化武汉市畜禽饲料工程技术研究中心武汉工业学院的研究人员建立了高效的蚓激酶纯化工艺，并研究其酶学性质。他们以赤子爱胜蚓(Eiseniafoelide)为原料，经过匀浆抽提、硫酸铵分段盐析、色谱分离、电泳等技术对蚓激酶进行分离纯化及鉴定,并研究pH、温度、金属离子与抑制剂对蚓激酶活性的影响以及蚓激酶的作用机理。结果发现，纯化蚓激酶比活达5100U/mg，经SDS-PAGE电泳分析得2条带，相对分子质量为32000和33500；体外溶栓实验表明，蚓激酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用。在中性和略偏碱性环境中稳定且活性高；温度适应范围广；不同种类及浓度的金属离子对蚓激酶活性的影响不尽相同；抑制因子及底物特异性研究发现，蚓激酶属于丝氨酸蛋白酶，不属于金属蛋白酶，同时含有二硫键。该分离方法可以得到较纯的蚓激酶。超声提取法优选枳实中橙皮苷提取辽宁医学院药学院和中国医科大学的研究人员研究了优选枳实中的橙皮苷的最佳提取工艺。他们采用L9(34)正交实验，以橙皮苷的含量为标准筛选最佳提取工艺。结果发现：枳实中橙皮苷的最佳提取工艺为采用8倍量的95%甲醇，超声提取3次，每次20min。优选的提取工艺稳定，提取率高。酒石酸拉索昔芬合成中国医药工业研究总院和上海医药工业研究院的研究人员研究了酒石酸拉索昔芬的合成。他们将6-甲氧基-1-四氢萘酮与1-吡咯烷缩合后，经三溴化吡啶鎓溴代，与苯硼酸进行Suzuki偶合、钯炭催化加氢、48%氢溴酸脱甲基后，经D-酒石酸拆分成盐得酒石酸拉索昔芬，以1-吡咯烷计，总收率约为15%。氯维地平合成南京大学化学化工学院的研究人员研究了氯维地平的合成。他们将3-羟基丙腈和双乙烯酮在三乙胺作用下制得乙酰乙酸(2-氰基乙基)酯(2),再与2,3-二氯苯甲醛和3-氨基巴豆酸甲酯经Hantzsch缩合闭环,接着用硫化钠在常温下选择性水解得4-(2,3-二氯苯基)-1,4-二氢-2,6-二甲基-3,5-吡啶二羧酸单甲酯,最后与正丁酸氯甲酯反应即得抗高血压药氯维地平,总收率约为59%。头孢克肟合成浙江普洛得邦制药有限公司和浙江大学化学系的研究人员研究了用7-氨基-3-乙烯基-3-头孢烯-4-羧酸和(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-甲氧羰基甲氧亚氨基硫代乙酸(S)-2-苯并噻唑酯在三乙胺催化下经酰化、水解反应，“一锅法”制得头孢克肟，收率约为92%。 2票投票

有了解的朋友可以分享一下嘛，主要是做西药合成的，不能用不锈钢反应锅，需要糖瓷材质，但是对于工艺图我不太了解，有谁知道，可以分享一下吗。我的理解是西药是不是叫做有机化学合成工艺呢？

聚合物合成工艺学[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=176460]聚合物合成工艺学.rar[/url]

【序号】：1【作者】：宋超【题名】：氨基硫脲合成工艺路线【期刊】：百度一下？【年、卷、期、起止页码】：2012年

哪位版友可以分享一份标准：QB/T 4671-2014人造革合成革试验方法 耐水解的测定。谢谢！

苯并吡喃酮作为一个非常重要的结构内核单元，广泛地存在于很多天然产物中，并且是一些具有生物活性的化合物的特定前导化合物。此外该类化合物也因其具有一些光致变色效应和热致变色性质而受到广泛关注。 生物催化作为一种绿色高效的现代有机合成技术，在医药、能源、材料等领域显示出巨大的潜力。酶作为一种高效，环境友好的催化剂，已经成为传统有机金属和小分子催化剂的有效补充，尤其是酶的非专一性在有机合成方面的应用备受研究者的青睐。近些年，已有一系列关于水解酶催化非专一性的C-C键以及C-杂原子键的形成反应的报道，但是对于单酶催化的多步串联反应的报道较少。基于此，我们设计和发展基于水解酶催化非专一性的domino反应，发现枯草杆菌α-淀粉酶可以有效地催化水杨醛和丁烯酮发生oxa-Michael/aldol缩合反应合成2H-苯并吡喃酮类化合物。2H-苯并吡喃酮的生物合成在25 mL烧瓶中加入水杨醛(2 mmol)，不饱和醛或酮(10 mmol)，50 mg 枯草杆菌α-淀粉酶(BSA)，再加入500μL去离子水和4.5 mL DMSO，将其置于50℃恒温摇床中震荡反应(200 rpm)。TLC跟踪检测反应(紫外灯下观测)，反应完全后，加入20 mL蒸馏水停止反应，然后用乙酸乙酯萃取(3×10 mL)，有机相用无水硫酸钠干燥后，经减压蒸馏除去溶剂，经柱层析分离得目标产物(硅胶：300-400目，流动相：石油醚[font='Times

好东西与大家分享！[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=22571]药物中间体合成工艺[/url]

《药物合成方法大全》这本书包含常用药物，经典药物合成工艺按用途分为八个部分，里面介绍的都是老药的制备工艺，有详细的操作常做横向的朋友还是值得参考的~~[em09511][em09511][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=188680]药物合成方法大全第一卷.rar[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=188684]药物合成方法大全第二卷.rar[/url]

求助－新型吡咯类杀虫剂溴虫腈10％EC 的合成工艺图有效应助者，重金酬谢..

化工行业做有机合成、分析、化工设计、化工工艺这几个行业哪个行业的发展前途更大啊？本人认为有机合成毒性比较大，分析是在没有前途，其他两个不太了解，前辈们来指导一下啊!

目前国内通过各种媒体报道和宣传的生物柴油技术种类很多，专利申请已经333项（截止2007年12月23日），论文更不计其数，其中，绝大多数是为“创新”而发表的文章或申请的专利，而实际的产业化工艺也各有千秋。但总的来说都是预处理、酯化、酯交换的不同组合并辅助以不同的催化剂，基本的工艺单元是酸催化酯化和碱催化酯交换；本人经过一段时间归纳总结，把目前国内真正产业化的生物柴油技术做了大致的分类，初步归纳目前的投入实际生产且正在使用的工艺流程有如下四种：一、酸—碱两步法：这是最传统的工艺也是目前自主研制技术的一般企业常用的工艺流程；其优点是能耗低，掌握的好可以真正“免蒸馏”，技术参考资料也比较多；缺点是要经过酸—碱的转化，对于酯化后物料的酸价、杂质、水等要求比较严，容易发生皂化，废水量较大。二、分离反应法：这也是许多企业在不自觉的情况下采用的，主要思路是采用先蒸馏（汽提）分离脂肪酸的办法，先实现脂肪酸与中性油的物理分离，而后针对脂肪酸和中性油分别采用酯化和碱催化酯交换的办法进行反应，得到统一的甲酯。此法的优点是工艺简单，容易掌握，产品的销售比较灵活；缺点是能耗大，设备要求高（尤其是耐腐蚀）。三、水解—酯化法：这实际上属于“分离反应法”的一种特例，但由于适合于原有的脂肪酸企业，所以单独列出。该法的工艺流程是：将油脂原料先通过水解（高、中压），完成了原料的预处理，用水解代替了酯交换，使所有的不同品质的原料经过水解后能“齐步走”，统一了原料性质，从而降低了后续工艺的技术难度。目前采用这种工艺的有两种实施技术，其一是水解后酯化而后蒸馏，这是我在山西永济和山东广饶设计的工艺路线；其二是水解后蒸馏，馏分采用专一性催化剂完成酯化的工艺路线。总的来说，这种工艺的优点是流程简单，原料利用率较高，中控方便（只需检测酸价），可以实现连续化生产；不足是设备投资较大，废水治理难度高，甘油回收困难。四、完全酸催化法：这是本人自有技术也是一些企业采用的办法，优点是对于原料要求低，可以处理所有油脂原料，甘油沉降迅速且含酸甘油比较适合于甘油衍生物的合成，从而避免了部分硫酸污染排放；采用了非水洗工艺，避免了大量废水排放；缺点是能耗高（三种方法中第二），酯化设备的耐腐蚀要求高。需要补充的是，完全酸催化法尤其适合于植物毛油，对于目前处于热门开发的麻疯树等产油作物，所榨得的毛油不必经过精制，直接进入酸催化。而传统的碱催化则需要经过严格的精制才能进入催化工艺流程。

【序号】：4【作者】： 凌梦晨【题名】：壳寡糖接枝Gemini季铵盐的合成及工艺优化【期刊】：重庆大学【年、卷、期、起止页码】：2021【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD202101&filename=1019906042.nh&uniplatform=NZKPT&v=J0kmIRT7N-eul4VEamhW8H_xeDDfM1uYm3SK95eegDXBd8LRSaD3PAhv6LhvZXsM

1　引　　言　　聚乙二醇二甲醚，系优良的气体净化剂，越来越多地用于合成气及天然气中硫化氢，二氧化碳等杂质的去除。南京化学工业公司于1984年成功地开发了基于该溶剂的气体净化技术，并首先在国内化肥行业大力推广。作为气体净化溶剂，其平均分子量和分布特征是非常重要的质量指标。化学端基分析方法不能得到分布信息因而难以满足工业控制的需要。本文介绍了一种[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](GC)分析方法及其在合成工艺改进中的应用。2　实验部分2.1　仪器和条件　3420[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]附FID检测器(北京分析仪器厂)，HP3394积分仪(惠普公司)，实验室自改装柱上进样器，氢气为载气，进样温度290℃，检测器温度280℃。22 m×0.53 mm ID。交联FFAP大口径FSOT柱，最高使用温度250℃(兰州化学物理研究所)。生产线上直接采样，用微量注射器取0.1 μL直接进样进行GC分析。2.2　定性和定量　利用部分标准和同系物保留规律定性，有效碳数响应规则定量。3　结果与讨论3.1　聚乙二醇的合成　聚乙二醇作为中间合成产物，其平均分子量及分布将决定甲基封端产物的分子分布特征，是保证产品质量的关键。由于物料投放和反应程度控制方面的问题，经常导致平均分子量偏小。我们用耐高温大口径极性毛细管色谱柱实现了高醇的快速分析，20 min内即可得到分析结果，从而为聚乙二醇合成条件的控制提供了直观的依据。3.2　甲醚化封端　甲醚化封端是制备二甲醚产物的第二关键步骤。控制的关键是反应进行的程度。色谱分析表明，甲醚化产物的分布与聚乙二醇的分布特征非常相似。可见GC在此关键步骤也可以有效地对反应程度进行快速及时的检测，得到组成分布，产率等丰富的信息，从而为封端反应的控制提供依据。3.3　产物的精制　精制步骤主要通过真空蒸馏的方法将较轻和较重的组分去掉，进一步改善产品的色泽和分布等指标。色谱分析表明，真空蒸馏对主要产物的分布影响较小，而单甲醚和聚乙二醇的分布变化较明显。是因为，相同聚合单元数时聚乙二醇和单甲醚沸点分别比二甲醚高出约50℃和100℃，高沸点组分在蒸馏中作为残液被部分除去，从而使分布重心向单元数小的方向偏移。有趣的是，有时封端产物经真空蒸馏后出现多的峰，经部分标准品和同系物保留规律证明为冠醚类。这可能是在真空和加热条件下，残留的高醇自身脱水环化形成。而在高醇的封端步骤未检测出冠醚的存在。3.4　工艺的综合优化　对合成过程的监测分析表明，精制在改善产品色泽和去除部分重组分副产物是有作用的，但不能用于明显提高主产物的含量和分布。最终主产物分布和产率主要取决于聚乙二醇的合成和对其甲醇化封端反应程度的控制。通过对封断步骤的有效控制，单甲醚以及高醇的残留均可得到有效的控制，二甲醚的转化率大大提高。

怎样让帖子出现在最新200上呢？我现在正在合成乙草胺，所用方法为甲亚胺法。可我遇到个难题，欲请各位高手指教。氯乙酰氯与甲亚胺的反应条件是什么呢？实际问题就是如何对碳氮双键进行酰化反应？小弟在此洗耳恭听！我愿与各位高手共同交流。

[center]脑蛋白水解物注射液药品标准不完善[/center] 据国家药监局网站消息，为确保公众用药安全，国家药监局日前通知要求各地进一步加强对脑蛋白水解物注射液的监督检查。 通知称，在全国开展注射剂类药品生产工艺和处方核查工作中，发现脑蛋白水解物注射液品种在药品标准和执行工艺处方等方面存在着较为突出的问题，主要是企业选用猪脑原料的质量标准不完善；企业之间现行生产工艺差别较大；猪脑水解所用的蛋白酶种类、酶量及水解温度、时间等不一致，甚至有补加氨基酸的行为。针对上述突出问题，部分地区已采取了控制措施。 通知指出，一、要充分认识到脑蛋白水解物注射液在产品质量方面存在的安全风险，各地应在注射剂类药品生产工艺和处方核查工作的基础上，积极组织力量认真做好监督检查工作。要建议辖区内脑蛋白水解物注射液生产企业主动停止该品种的生产，并要求脑蛋白水解物注射液生产企业按相关技术要求，组织开展改进工艺和质量控制方法的研究工作，在相关工艺改进和质量标准未经批准前，暂不宜恢复生产。 二、对于生产企业认为其脑蛋白水解物注射液生产工艺合理、质量可控，继续进行生产的，所在地省级食品药品监督管理局应对其生产全过程予以跟踪检查，并对监督生产的产品进行现场抽样，由省级药品检验所检验。 凡生产企业存在未按批准变更生产处方工艺生产，或在制成品中补加氨基酸等违法违规行为，以及现场抽样检验不合格的，应依法予以严厉查处。 三、国家局将组织有关专家开展脑蛋白水解物注射液有效性、安全性评价工作，组织对脑蛋白水解物注射液生产工艺的改进、质量控制标准的提高工作，并在此基础上提出监管措施和改进意见。信息来源:中国新闻网

想请教三个问题，第一：对于一个生产啤酒麦芽的厂，废水处理能力是2100立方米每天，CODcr约为2000mg/L，BOD5约为1000mg/L的废水，究竟采用什么工艺设计方案呢？第二：很多人推荐水解酸化加生物接触氧化，可我觉得它的可生化性很好，有必要用水解酸化池代替初沉池吗？第三：就是UASB工艺是水解酸化池的一种吗？

由于历史沿革和语言习惯，我国皮革业界长期以来将合成革翻译为Synthetic Leather或PU Leather或Artifical Leather。然而，此种译法却引发了国际上的误解。近日，中国皮革协会陆续接到国际皮革工艺师和化学家协会(IULTCS)和欧洲制革联盟等国际组织和机构的信函，就此译法引起的误解进行了说明。根据国际皮革工艺师和化学家协会和欧洲制革联盟的反馈，Synthetic Leather或PU Leather或Artifical Leather的说法长期出现在中国媒体和企业的相关报道和产品说明中，使他们误解为是一种“真皮”产品，但事实上这些只是合成革材料。为此，国际皮革工艺师和化学家协会和欧洲制革联盟呼吁中国皮革业界尊重英文的语言用法和习惯，统一使用新译法Synthetic Material、PU Material。“合成革过去的译法符合中国人的语言习惯，非常生动，但是考虑到英文的应用环境以及在国际贸易中出现的误解，我们建议业界尊重国际上的呼声，统一使用新译法Synthetic Material、PU Material。”中国皮革协会常务副理事长兼秘书长苏超英表示。

由于历史沿革和语言习惯，我国皮革业界长期以来将合成革翻译为Synthetic Leather或PU Leather或Artifical Leather。然而，此种译法却引发了国际上的误解。近日，中国皮革协会陆续接到国际皮革工艺师和化学家协会(IULTCS)和欧洲制革联盟等国际组织和机构的信函，就此译法引起的误解进行了说明。根据国际皮革工艺师和化学家协会和欧洲制革联盟的反馈，Synthetic Leather或PU Leather或Artifical Leather的说法长期出现在中国媒体和企业的相关报道和产品说明中，使他们误解为是一种“真皮”产品，但事实上这些只是合成革材料。为此，国际皮革工艺师和化学家协会和欧洲制革联盟呼吁中国皮革业界尊重英文的语言用法和习惯，统一使用新译法Synthetic Material、PU Material。“合成革过去的译法符合中国人的语言习惯，非常生动，但是考虑到英文的应用环境以及在国际贸易中出现的误解，我们建议业界尊重国际上的呼声，统一使用新译法Synthetic Material、PU Material。”中国皮革协会常务副理事长兼秘书长苏超英表示。

TGA，DSC应用于工艺安全？是检查反应等是否放热吗？那TGA，DSC等怎么样才说明工艺安全呢？

美国亚利桑那大学的科学家首次成功地将金属原子插进了甲烷气体分子中，并精确地测定了所得到的“金属-甲烷化合物”分子的结构，为有机化合物的合成特别是新药研制开创了新的制造工艺，新发现也能让人们更好地理解金属在活性生物体内的工作模式。研究发表在《美国化学学会杂志》上。　　有机物衰败会产生甲烷，科学家一直希望利用丰富的甲烷来生产其他化学产品。但是作为最简单的碳氢化合物，甲烷在和其他分子相互作用时会有点“内向”，需要各种方法来“激活”。领导这项研究的亚利桑那大学化学家露西·兹瑞斯表示，金属插入会让甲烷分子更活跃，即将金属插入甲烷分子中激活甲烷，使其更容易和其他物质发生化学反应，比如利用被激活的甲烷分子制造乙醇。　　兹瑞斯研究团队将锌加热成气态，让其蒸发进一个真空室，接着再向真空室添加甲烷气体。在一个放电设备提供的能量下，锌和甲烷组成的气体混合物变成发光的等离子体，金属-甲烷化合物分子瞬间形成。

[b]【序号】：1【作者】：[font=宋体][color=#414141]马超[/color][/font]【题名】：[font=宋体][size=12px]异佛尔酮均相催化芳构化合成3，5-二甲基苯酚及衍生物的工艺研究与4-氨基-3，5-二甲基苯酚的合成方法[/size][/font]【期刊】：[font=宋体][color=#414141]西北大学 硕士论文 [/color][/font]【年、卷、期、起止页码】：[b][font=宋体][color=#414141]2012年[/color][/font][/b]【全文链接】：https://xuewen.cnki.net/ArticleCatalog.aspx?filename=1013136376.nh&dbtype=CMFD&dbname=CMFD201301[/b]

[font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术在制药领域主要应用于以下方面：[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]原辅料理化性质检测、[/font]API[font=宋体]合成[/font][/font][font=宋体]及分离纯化[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]工艺[/font][/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]带式干燥工艺、流化床（喷雾干燥）工艺、生物发酵工艺[/font][/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]混料[/font][/font][font=宋体]过程[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]均匀度检测、[/font][/font][font=宋体]制粒工艺、[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]压片工艺、包衣工艺[/font][/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]提取浓缩工艺、[/font][/font][font=宋体]柱层析[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]工艺、醇沉工艺、逆流萃取工艺、中药材质量控制等。[/font][/font]

合成肽技术用化学手段将氨基酸依次定向地缩合成多肽或蛋白质的技术。大多数天然多肽和蛋白质都由a-氨基酸构成。氨基酸分子内可有3个化学活泼的基团即侧链、氨基及羧基，与a-碳原子共价连接。请移步百度搜“[b]合肥国肽生物[/b]”即可化学合成肽有两类基本方法液相法即反应物在完全溶解状态下作均相缩合。由于每步缩合产物都可经结晶或洗涤过程去除副产物，故液相合成肽的质量较高，但耗时多，手续繁，产率较低。1965年中国科学家以此法合成了结晶牛胰岛素。目甑助产药物——催产素(一个九肽)的工厂生产流程仍采取液相法工艺。固相法反应物之一取固相状态。反应产物因共价连接于树脂而可被过滤法回收并洗涤除去未反应物，故操作简单，易于规范化和机械化，事实上，固相多肽合成仪已被广泛采用。此法缺点在于副反应物会在树脂上不断积累，难以去除。且反应次数越多即目标肽越长则副产物积累越多，最后至造成主产物被淹没在杂质中无法被分离出来。所以这个方法的创立虽然促使迈利菲尔特(R.B.Merrifield)获得了诺贝尔化学奖，但实用中仍限于30肽左右的合成水平上。为了克服这一缺点，有人利用液相法合成高纯度的小肽进行固相缩合，使总的固相缩合次数减少，这就成为固相片段缩合法。中国利用此法已成功地合成了结晶胰岛高血糖素和蛇毒膜毒素等大肽和蛋白质。除化学方法外，利用蛋白水解酶的逆反应也可酶促合成某些特定的肽键。

SH0301液压油水解安定性测定仪，本仪器依照SH/T0301《液压液水解安定性测定法（酒瓶法）》及ASTM D2619制造，本仪器适用于测定矿油型和合成型液压液。[b]性能特点：[/b] 本仪器采用进口数显PID程序升温温控器，采用了特殊高速16位A/D转换器，自动温漂，零漂修正技术，保证该仪器的控温精确度。本仪器温控器采用了专用的无超调PID算法及PID自整定技术，保证仪表不超调，不欠调，控温精度可达±0.5℃。 温度的测量是通过Pt100传感器进行的。本传感器反应灵敏，工作可靠，能迅速及时的反映温度的变化，通过数显PID温控器的控制，能完全保证标准要求的控温精度。 本仪器外形采用整体式框架结构，内部空间大。外壳采用优质冷轧钢板制作，表面经喷涂工艺处理，造型新颖、美观大方。 内胆采用不锈钢板经防腐处理、加工成型。 箱门中间装有双层玻璃观察窗，可随时观察工作室内被加热物体的情况。 箱门口镶嵌耐高温胶条，密封性好，防止热量流失。 工作室后侧设置排风口，工作过程中可随时将被加热器释放的潮气排出箱外。 箱内温度使用风机强制循环，保证温度的均匀性控制在±2.5%。[b]技术参数：[/b] 加热方式 不锈钢电热管加热 加热功率 1.2KW 控温范围 室温～93℃ 控温精度 ±0.5℃ 控温方式 进口数显PID温温控器 转动速率 5r/min 试验单元 8枚试验瓶 工作室尺寸 （长×宽×高） 450×450×350mm 温度均匀 风机循环 试验时间 数显计时 做样提示 声音提示 工作电源 AC220V±10% 50HZ 工作环境 相对湿度：〈80% 温度：0～45℃

【序号】：1【作者】： 张雅伦【题名】：聚乙二醇的N-羟基琥珀酰亚胺琥珀酸酯的合成工艺、苏氨酸负载及催化应用【期刊】：兰州大学【年、卷、期、起止页码】：2017【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C475KOm_zrgu4lQARvep2SAkOTSE1G1uB0_um8HHdEYmZhkBIZJEK02VaOdneXeYijuWwpOfpIhlJTd0mjIpAyz7&uniplatform=NZKPT

[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79358.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]酶催化生物分子合成工艺研究员[b]职位描述/要求：[/b]职责描述：在技术负责人指导下，参与酶催化生物分子合成相关的研发项目，具备分子生物学经验的候选人优先；候选人应当熟悉酶催化反应的1）条件设计，2）优化策略，3）酶性质及动力学研究等方面的具体研究思路和策略，熟悉酶催化反应相关的常规操作；能够严格按照标准流程，准确、独立地完成各项相关实验操作；定期汇报实验和工作进程；本科学位或以上，硕士优先，具备1-2年工作经验者优先，生物化学，化工或工程，化学生物学，发酵工程，生物技术，及其它相关专业；具有团队合作精神，善于沟通，做事踏实认真，责任心强；具备良好的英文文献搜索及阅读能力。[b]公司介绍：[/b] 楷拓生物科技(苏州)有限公司位于中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区裕新路108号A栋3楼312室，注册资本为1668万人民币，成立于2021-06-17，目前公司的主要经营范围是一般项目：技术服务、技术开发、技术咨询、技术交流、技术转让、技术推广；技术进出口；货物进出口；科技推广和应用服务；医学研究和试验发展（除人体干细胞、基因诊断与治疗技术开发和应用）；企业管理；信息咨询服务（不含许...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79358.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

本文引用自发酵《在发酵工艺角度看蛋白表达》引用发酵 的 在发酵工艺角度看蛋白表达在分子生物学角度讲，找到或合成外源蛋白基因，构建质粒，并导入细胞以表达具有生物活性的折叠正确的蛋白，是一种成熟的常规技术。目前，包括酶，抗原，抗体，激素，其他小分子调节蛋白在内的很多蛋白，都已经用这种技术实现了工业化生产。在具体的工艺选择上，历史沿袭习惯和表达体系的选择，对工艺稳定性，成本，有巨大的影响。 目前，常用的蛋白表达系，有3个类别：1，大肠杆菌表达系。大肠杆菌的遗传背景十分清楚，代谢相对简单，发酵副产物少，在不是很严格的情况下，是表达蛋白的首选。通过按经验选择合适的菌株及合适的质粒，既可以以包涵体的形式得到大量的目标蛋白，又可以在细胞外得到可溶性蛋白，是常见的一种表达系。2，酵母菌表达系。用酵母做表达系，理由之一，也是遗传背景清楚，而且，当蛋白分子量过小，不能形成包涵体时，或蛋白的二硫键过多，不易体外复性时，酵母菌就成了合适的选择。另外，酵母对蛋白也会有一个简单的修饰，近似于高等动物的蛋白糖基化过程。这样，在合成在体液中发挥作用的蛋白，而且，又不能（技术水平限制）用动物细胞时，就可以退而求其次的选用酵母菌表达。一般是用信号肽把蛋白导出细胞，在发酵液中以可溶性蛋白的形式存在。这也是一个常见的表达系。3，动物（或说，人的）细胞表达系。这种情况，在纯度或毒性方面有较高要求的产品应用。一般国外产品应用较多，国内还没有用动物细胞表达蛋白实现商业化生产的报道。由于技术限制，国内工业化生产用这个方法目前还有较大难度。这3种表达系，各自有自己的优缺点。首先，在潜在的毒性影像方面讲，由于和真核生物亲缘关系太远，大肠杆菌就最不合适。其次是酵母菌。而在表达量和代谢控制成本上来讲，酵母菌和动物细胞又是差强人意的。现在，很多蛋白习惯性的选用酵母菌做表达系，就是因为早期提取蛋白技术低下，而动物细胞培养技术又不过关的原因所致。目前，虽然提取工艺提高了，但作为蛋白这种高附加值产品，运作成本集中在销售而不是生产，所以，降低生产成本的诉求很低。站在降低开发难度的角度讲，一方面，质粒构建和质粒与菌株的匹配方面依赖大量经验，另一方面，发酵工艺策略选择与发酵工艺优化又需要很大的投入，所以，技术开发部门沿用自己熟悉的，已经积累了大量经验的表达系，是合理的。不过，随着分子技术进一步的发展，分子技术进入低附加值的产品领域又是必然的，降低生产成本就变的越来越必要了。 大肠杆菌表达系有两种得到外源蛋白的方法：1，缓慢的表达，得到可溶性蛋白，这种方法产量和酵母菌表达类似，与酵母菌比，不具有明显的优势，一般是有做大肠杆菌传统的研究机构生产小分子蛋白的一种沿袭性做法。2，使用T7启动子表达蛋白，这样，高速的蛋白表达速率使蛋白来不及折叠，在细胞内形成非水溶性的包涵体。最后目标蛋白可以达到总细胞质量的15%-25%，这样，就为降低成本提供了一种可能。不过，在使用T7启动子表达时，也存在两个难点：1，蛋白的复性技术，如果形成可溶性蛋白，那利用（使用分子技术加载在目标蛋白上）信号肽，只要过一遍柱子就能分离得到纯度非常高的，具有生物活性的产品，而形成包涵体，对提取，复性就有较高的要求，特别是二硫键的存在，会对复性产生很大的影响。在目前国内和国际流行技术看，并不是所有的蛋白都能在预定成本下复性的。2，任何情况下，高产都是代谢网络互相依赖与作用的结果。在如此高的表达量下，甚至细胞的形态都已经发生很大变化，正常代谢受到严重干扰，以至于放大时，摇瓶工艺对发酵工艺几乎没有任何参考价值。发酵工艺策略的选择将直接依赖于工程人员在生化，生理水平对菌株的理解，而匮乏可资参考的数据资料。发酵工艺的优化要离开摇瓶经验在发酵罐上逐步进行，这样，整个发酵工艺的确立就需要比想象中要大得多的人员与时间的投入。另外，再说一下糖基化的问题。在动物细胞内合成的折叠正确的蛋白，在分泌入体液前会有一个糖基化的过程，加上一个糖链就不会很快被蛋白酶当做折叠错误的蛋白水解掉。但是以微生物为表达系表达的蛋白，不具有动物细胞的修饰过程，用大肠杆菌表达的目标蛋白，很快会在血液中被降解。解决或回避这个问题，有两种方法：1，用动物细胞表达，一般，是用癌化的人类细胞。由于动物细胞培养技术要求过高，在国外比较昂贵的医药中有应用，国内不常见。2，由于酵母菌也有一个对蛋白的粗略的修饰过程，可以用酵母菌表达目标蛋白。这个技术，国内国外都在用，可以是一个权宜之计。主要难点集中在对合适菌株的分子水平的改造，以达到尽可能接近满意的修饰效果。这样，就可以在不同目标蛋白上表达系和发酵工艺上做出选择。如果是小分子，无糖基化修饰或不在体液中发挥作用的蛋白，可以选择大肠杆菌和酵母菌表达系，得到可溶性蛋白，然后提取。如果分子量合适，并对生产成本有诉求，而且可以比较方便的复性，则选用大肠杆菌表达系，得到包涵体，然后复性。如果是需要在体液中发挥活性并有糖基化要求的 蛋白，则选用经过分子生物学改造的酵母菌表达系。当然，并不是任何一个实验室都同时拥有或擅长所有的方向的。而难点，往往集中在以下3个方面：1，大肠杆菌蛋白包涵体复性。2，糖基化修饰。3，发酵工艺（工程菌株的工业水平）的确定。做工程一般是理科实验室的弱项，而工科实验室做基础又很少，在把工科和理科结合方面，我们实验室还是有经验和成功先例的。下面，以溶菌酶为例，阐述一下蛋白表达系的选择和工艺的确定。溶菌酶是一类具有种属差异的非特异性免疫物质，在动物界中普遍存在，种类繁多，其实，在植物和微生物中也有发现。但研究最多的还是动物。开发兽用溶菌酶，主要是想作为抗生素的替代物，作为添加剂使用。因此是一个低附加值的产品。下面一切的工作，都会围绕“兽用”和“低附加值”展开。首先，比较几种常见和认为有效的溶菌酶，杀菌效果最好的是人的溶菌酶，但考虑到潜在的危险（具有对人溶菌酶产生抗性，并使抗性基因扩散），舍尔求其次，用了鸟类蛋清溶菌酶，作为表达对象。然后，在得到溶菌酶蛋白的一级结构后，对此进行了分析。此蛋白不会用于体液内，故没有糖链修饰的问题。分子量不是很大，但也不太小，130左右的氨基酸构成，足以形成包涵体，这就为用大肠杆菌表达系高效表达提供了可能。讨厌的是有4个二硫键，其中有两个在结构复杂区域，折叠正确有一定的困难。但是，如果用酵母菌做，可能没法解决成本问题，即便优化工艺现在过去了，也不会是最终版本----肯定会有人用大肠杆菌做。所以，结论就是必须知难而进，拿下复性工艺。另外，由于是低附加值产品，发酵吨位就不能太小。以往分子生物学流行的50升，100升小罐发酵，肯定是不行的。发酵罐的放大，除了溶氧，剪切力发生变化，更重要的是搅拌线速度改变了胞外酶以及包括细胞本身的代谢方式和速度。在胞内体现就是氧化还原电势的改变，这在工艺上会带来很多麻烦。虽然说，一般是放大后产量往往提高，但放大过程中，小罐的经验就不能照搬了。同时，也因为是低附加值产品，发酵过程中诸如质粒丢失等稳定性要求，就很高了，应为只有稳定，才能控制成本。这样，工艺就成了第二个难点。明白这些之后，按照大肠杆菌的喜好，合成了溶菌酶的基因。然后构建质粒，导入细胞。在摇瓶水平表达溶菌酶。在筛选复性条件的同时，就同时在发酵罐水平对工艺稳定性进行了优化。首先，为了进一步提高质粒稳定性，对初始培养基进行了重新设计。并改动发酵工艺策略，由于是胞内产物，我们应用高细胞密度发酵控制法延长限制性生长时间（不能用经典发酵的延长对数期生长时间的办法，对工程菌不适合，会造成质粒丢失，代谢紊乱等一系列问题），提高细胞量，并改变了诱导时机，得到了稳定的高产，具体数据比较枯燥，就不在此展开了。提取方面，经过不懈的努力，我们也掌握了比较成功的复性条件（具体由另外人员负责，也不做详细介绍了）。这样，工艺才基本拼凑好。进一步优化，在试生产多次重复时在进行。以上，是外源蛋白表达的粗略的技术和工艺的过程。