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棘孢小单孢菌

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  • 肯德基汉堡被爆细菌超标7倍
    食用后可能引起腹泻、食物中毒  近日,湖南长沙市第三季度食品安全检验检测情况新鲜出炉,在不合格名单中,有当地媒体发现了长沙肯德基有限公司阿波罗店的香辣鸡腿堡。据报道,长沙市卫生局抽检了8月29日批次的肯德基香辣鸡腿堡,发现大肠菌群含量为230MPN/100g,按照食安糕30MPN/100g的标准,此汉堡超标近 7倍。  对此,肯德基方面不但未表示将对相关批次产品做出复检,以及检查事发门店厨房等处理方式,反而对外称公司认为检测汉堡的标准不对,汉堡不是面包,不能以面包糕点的标准来衡量,要求卫生局重新考量。随后当地卫生局虽然临时撤销了不合格名单,但相关负责人也表示,对于洋快餐汉堡的安全性现在无法判定,因为国家还没有技术层面的检测标准。据悉,吃了大肠菌群超标的食品,易引起肠胃不适、腹泻等症状,严重超标易引发肠道传染病或食物中毒。  KFC辩称不是面包不算不合格  据湖南当地媒体报道,10月19日,长沙市第三季度食品安全检验检测情况出炉,长沙肯德基有限公司阿波罗店的香辣鸡腿堡位列不合格名单。长沙市卫生局抽检8月29日批次的汉堡发现,大肠菌群含量为230MPN/100g(MPN是“最大可能数”的简称,为关于细菌污染的一个单位),按照国家标准糕点、面包卫生标准30MPN/100g的标准,此汉堡超标近7倍。就此,肯德基提出异议,认为汉堡不是面包,不能以面包糕点的检测标准来衡量,要求卫生局重新考量。长沙市卫生局经请示湖南省卫生厅,并咨询省疾控中心专家,临时将肯德基撤出了不合格名单。  尽管肯德基方面表示,因此次检测是以面包的检测标准来进行的,所以不能由检测结果来判定肯德基的这批次汉堡不合格。据悉,2008年5月1日,国家质检总局和国家标准化委员会出台了有关面包的标准,标准对面包进行了分类,有面包、软式面包、硬式面包和调理面包,明确指出不包括加入新鲜水果、蔬菜以及肉制品的食品。肯德基现在虽借这一规定来开脱检测结果中的不合格“罪名”,但同时也令自己陷入另一被质疑的境地,那就是根据汉堡的检测标准来看,肯德基的香辣鸡腿堡又是不是合格产品呢?  国标显示KFC汉堡三大原料恐都超标  “夹层有新鲜蔬菜的汉堡其实不能按照面包的标准来衡量,它(汉堡)其实没有标准。”长沙市卫生局副局长欧志明在接受媒体采访时如此表示。在这种前提条件下,汉堡的安全性检测,是否就完全无据可依,任凭企业自说自话了呢?对此,国内食品卫生专家、国际食品包装协会常务副会长兼秘书长董金狮提出, “馅料不一样汉堡包也就不同,国家不可能对所有产品有强制性的标准”,但卫生部门可对原始的、未组合成汉堡包前的各种原料进行检测。  随后有媒体报道针对这一说法特别指出,若以汉堡的三大原料熟肉、生蔬、面包的检测标准来判定的话,肯德基此次被检出大肠菌群含量超标的汉堡,无论是哪种主要原料的大肠菌群含量均已超标。  汉堡原料一熟肉:熟肉制品大肠菌群含量要求较为严格,根据《GB2726-2005》,烧烤肉、熏煮火腿及其他熟肉制品的大肠菌群含量不能高于90MPN/100g。而肯德基汉堡230MPN/100g的检出量明显高于这一数值。  汉堡原料二生蔬:汉堡中生蔬卫生并无统一标准,据媒体报道参考与之相近的《凉拌菜质量安全要求》(河北省一强制标准),其中关于大肠菌群含量要求是90MPN/100g。肯德基汉堡230MPN/100g的检出量也同样高于这一标准限量。  汉堡原料三面包:在《GB7099-2003》糕点面包卫生标准中,热加工面包大肠菌群含量应30MPN/100g,冷加工面包300MPN /100g。由于肯德基汉堡的检出量是230MPN/100g,如其面包是冷加工的,也就是加热熟后,再添加奶油、黄油等辅料的,那汉堡大肠菌群含量显然没超标 但是如果是以加热熟为最终工艺的面包,汉堡就不合格。而肯德基上述被抽检汉堡到底属于哪种现在还不得而知。  肯德基“一句话声明”惹质疑 无标准未复检却称“符合国标”  抽检的汉堡产品原料归类存在争议,不代表产品就一定没有问题。据《三湘都市报》报道,卫生监管部门认为此事并没有结束,现在只是暂时将肯德基的汉堡从不合格名单里撤销。据报道,长沙卫生部门会要求肯德基提交企业标准,即使暂时没有国家的技术标准,也不代表无法对企业进行监督。  昨日,新快报记者致电肯德基公司所属的百胜餐饮华南区相关负责人,对于肯德基此次被抽检并被指大肠菌群的汉堡,是属于冷加工还是热加工产品,该名负责人表示暂时无法回应。对于这款香辣鸡腿堡生产及检测执行的是什么标准,以及被查出大肠菌群含量超标后是否复检等问题,这名负责人都表示无法回答, “对于这件事公司能回应到的只有一个声明,那就是‘肯德基严格执行国家相关标准。"该负责人表示。  肯德基近年来风波不断  2005年3月肯德基新奥尔良烤翅和新奥尔良烤鸡腿堡调料中发现了微量苏丹红(1号)成分  2005年11月肯德基停售芙蓉天绿香汤,因被指出所用原料“天绿香”有害人体健康  2009年7月中国台北政府报告显示,肯德基炸油含有致癌物质丙烯酰胺  2011年4月肯德基全家桶纸容器被指含增白剂  2012年9月因不满不戴手套做汉堡,男子怒买2000份欲堵肯德基门口
  • 单细胞拉曼光谱揭示氮循环功能菌研究获新进展
    p  氮是维持生命活动最重要的营养元素之一。氮气是氮元素的丰富来源,但由于性质惰性,不能为生物直接利用。氮的生物地球化学循环是将氮转化成生物可利用形式的关键过程。固氮微生物,包括固氮细菌和固氮古菌,可将惰性的氮气转化成生物可利用的氨态氮或硝态氮。据估计,生物可利用氮的半数由生物固氮过程提供。然而,微生物种类和功能丰富多样,超过99%的环境菌目前无法实现纯培养,因而对环境中固氮菌功能和活性的认识仍非常不足。环境微生物的不可纯培养性,带来了方法学上的挑战。从单细胞水平上研究环境微生物可克服纯培养或富集培养的限制,实现在环境介质下的原位研究。拉曼光谱(包括SERS、常规和共振拉曼)可在单细胞水平上对微生物进行无损检测,并提供微生物组成的指纹图谱。拉曼光谱与稳定同位素标记结合(Stable isotope probing, SIP),利用微生物同化SIP标记底物引起蛋白、脂类、色素的特征拉曼谱峰偏移,已实现从单细胞水平上检测环境功能菌。/pp  中国科学院城市环境研究所城市土壤与生物地球化学研究组(朱永官团队),在发展单细胞拉曼-15N2SIP技术用于固氮功能菌的研究上做了开拓性工作。针对土壤中的固氮菌,首次建立单细胞共振拉曼与15N2标记联用技术,发掘出15N2相关的指示固氮菌的特征偏移谱峰,即细胞色素c共振拉曼峰的偏移。利用此指示峰,实现在单细胞水平上检测复杂土壤环境中的固氮菌,并利用指示峰的偏移程度,在单细胞水平上,比较了土壤固氮菌的固氮活性。此外,研究组与牛津大学教授Wei Huang合作,针对包括固氮菌在内的多种氮循环(N2、NH4、NO3)功能菌,率先发展表面增强拉曼光谱(SERS)-15N SIP联用技术,利用SERS对微生物中含氮生物分子腺嘌呤的选择性增强,获得不同15N标记氮源引起的细菌腺嘌呤谱峰的显著线性偏移,并利用SERS-15N SIP研究厦门杏林湾水体中细菌对15N2、15NH4Cl、15NO3不同氮源的选择性代谢。上述工作促进了对大量未知环境菌群的深入认识,尤其是氮循环功能菌及其活性的深入解析。/pp  相关研究成果分别以Functional Single-Cell Approach to Probing Nitrogen-Fixing Bacteria in Soil Communities by Resonance Raman Spectroscopy with15N2Labeling为题,发表在Anal. Chem.上;以Surface-enhanced Raman spectroscopy combined with stable isotope probing to monitor nitrogen assimilation at both bulk and single-cell level为题,发表在Anal. Chem.上。研究工作得到了国家重点研发计划和国家自然科学基金等的资助。/pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/95e9fe92-ccc2-4ded-8e88-bac97919cf0d.jpg" title="W020180807542181390530.jpg"//pp style="text-align: center "城市环境所在发展单细胞拉曼光谱揭示氮循环功能菌研究中取得进展/p
  • 运动发酵单胞菌运动亚种的特点与优势及培养方法!
    运动发酵单胞菌运动亚种的特点与优势及培养方法! 运动发酵单胞菌运动亚种是Zymomonas属的微生物,原产地为美国。G-,细胞具有圆端的短杆状,丛生鞭毛运动,单个或成对排列。主要用途为研究,具体用途为用于细菌发酵酒精的研究。 一、菌种简介平台编号:Bio-66722提供形式:冻干物拉丁属名:Zymomonas Mobilis Subsp. Mobilis中文名称:运动发酵单胞菌运动亚种属名:Zymomonas种名加词:mobilis subsp. mobilis其它中心编号:ATCC 31821来源历史:←北京工商大学化工学院(31821)收藏时间:2008.10.31原始编号:WAY资源归类编码:15131139101模式菌株:非模式菌株主要用途:研究具体用途:用于细菌发酵酒精的研究特征特性:G-,细胞具有圆端的短杆状,丛生鞭毛运动,单个或成对排列。利用葡萄糖、蔗糖或果糖产乙醇和CO2,利用山梨醇,不发酵麦芽糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖。不还原硝酸盐,不液化明胶,接触酶阳性。 生物危害程度:四类致病对象:无培养基:葡萄糖 100.0g,酵母膏 5.0g,(NH4)2SO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4?7H2O 0.5g,琼脂 20.0g,蒸馏水 1.0L, pH7.0。培养温度:30℃资源保藏类型:培养物保存方法:真空冷冻干燥法实物状态:有实物共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:研究;用于细菌发酵酒精的研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、产品特点1、菌种功能明确、品种稳定、应用 2、产品仅限用于科研本品芽孢含量高,稳定性好、耐高温和挤压 3、繁殖能力快、定植能力强、易存活、耐受低pH值环境 4、复活迅速,可在短期内成为优势种群 5、本品安全高效、无抗药性、不污染环境 6、对多数抗生素不敏感,可与低浓度抗革兰氏阴性菌抗生素同时使用。 三、产品优势1、产品质量稳定,是为科研和提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。2、国内首创封闭管包装,冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法,保证菌种的复苏质量。3、严格的质检程序,确保产品质量的稳定性。4、该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业,疾控中心、质检局、出入境、药检局等等,得到广泛好评。 四、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 五、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 如何制备*单细胞悬液,几个小TIPS包教包会
    时下细胞研究很火的科研技术当属单细胞测序,但此技术对细胞悬浮液的总量以及活性都有一定的要求,因此制备高质量的单细胞悬浮液成为实验成功的关键点。单细胞测序涉及的细胞类型多种多样,如肠、肺、PBMC、胚胎、神经、乳腺、干细胞等,而其中样本的处理消化亦是重中之重,样本前处理与后续的分析结果有着莫大的关联。如何在上机前得到最*的悬液呢?这里和大家分享一些制备*单细胞悬液的小tips。1、在样本采集过程中,建议采用无菌样品处理方式,包括使用不含核酸酶的试剂和耗材;2、实体组织需要先处理,传统组织处理方法有机械法,包括网搓法、研磨法。机械法一般适用样本类型为脾脏、淋巴结、胸腺;另外较温和的方法有酶解法(使用胰蛋白酶类、胶原酶、溶菌酶、弹性蛋白酶以及一些商业化包装的组合酶),适用样本类型有肝脏、肾脏、心脏、肺脏、脊髓、脑、肠道、皮肤、肿瘤等。3、如果您使用的是10x Genomics相关仪器和平台,可以从官网查看10x Genomics不同样本单细胞悬液制备官方建议或者利用关键词查询与自己样本类型相同的已发表的单细胞测序文献。对于如何获得高质量的样品,10X公司建议在单细胞悬液制备过程中,细胞重悬的缓冲液选用无Ca2+、Mg2+和EDTA的1× PBS,并用0.04% non-acetylated BSA清洗两次(300rcf,5min),选择其他缓冲液或培养基可能会对结果产生不同程度的影响。4、细胞在处理过程受到外界环境影响,其基因表达谱可能会出现一些变化;有些细胞对环境极为敏感,可能会死亡裂解,造成RNA降解从而造成检测中的背景细胞升高,进而影响所获得的数据质量。实验过程中需要尽量避免细胞死亡,不断优化细胞处理条件,加快实验流程的进度,减小对细胞的影响。5、单细胞悬液制备过程中出现的细胞团、细胞碎片或纤维等杂质会增加微流体芯片的堵塞风险。如果存在细胞碎片和大团块,请将样品通过40 µm Flowmi 细胞过滤器,细胞悬液体积损失小。 图源:10x Genomics 的Protocol《 Fresh Frozen Human Peripheral Blood Mononuclear Cells for Single Cell RNA Sequencing》图源:《10x GenomicsSingle Cell Protocols——Cell Preparation Guide》相关产品Bel-Art Flowmi 40微米 细胞过滤器,适用于1000微升移液管(50个/包)
  • 胰蛋白酶,组织解离、细胞消化的小帮手
    胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,为蛋白酶的一种,EC3.4.4.4,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶,由223个氨基酸残基组成的单链多肽,底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端,当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外,当切割位点任一边紧邻酸性残基,胰酶水解速率也会减缓。在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。以下是absin胰酶部分产品,全部现货供应哦~胰蛋白酶(猪源)1:250 abs47014936本品是由猪胰提取而得的一种肽链内切酶,白色至淡黄色粉末。可用于制备单细胞悬浮液,胰蛋白酶在用于细胞培养时,可用PBS溶解成浓度为0.25%,也可以加入0.02%EDTA ,过滤除菌后使用。溶于水≥10mg/ml,不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。本品具有以下特点:1、对电点pI 10.5。Ca2+对酶活性有稳定作用。 2、重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。 3、可用于制备单细胞悬浮液或贴壁细胞的消化、分离。货号名称abs47014936猪源胰蛋白酶1:250胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) abs47014938本产品含0.25%胰酶,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。货号名称abs47014938胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红 abs47047375本品含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。货号名称abs47047375胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红胰蛋白酶(牛胰) 1:2500 abs9154本品是由牛胰提取而得的一种肽链内切酶,白色或类白色粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。其广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面。是一种专一性催化水解赖氨酸、精氨酸羧基形成的肽键,可用于蛋白质化学研究。货号名称abs9154胰蛋白酶(牛胰) 1:2500更多absin胰蛋白酶相关产品 :货号名称abs47014938胰蛋白酶-EDTA溶液abs9154胰蛋白酶(牛胰腺)abs47047375胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红abs44073474重组牛胰蛋白酶abs47014937Trypsin (0.25%), Phenol Redabs47014936猪源胰蛋白酶1:250abs47014940胰蛋白酶,蛋白测序级abs47014939胰蛋白酶,组织培养级Absin特色产品线(全部现货):WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
  • 青年才俊上演计算蛋白质组学头脑风暴——记CNCP 2016新技术
    记第四届中国计算蛋白质组学研讨会(CNCP-2016)新技术  仪器信息网讯 2016年8月10日-11日,第四届中国计算蛋白质组学研讨会(CNCP-2016)在中国科学院大连化学物理研究所盛大召开。(相关新闻:第四届中国计算蛋白质组学研讨会(CNCP-2016)在大连开幕)。本届研讨会邀请了26个大会报告,报告嘉宾是来自国内外的计算蛋白组学领域专家和奋战在第一线的青年科研工作者,嘉宾中的绝大多数是首次登上CNCP讲坛。报名参加本届会议的人员首次超过了200人。CNCP2016C参会代表合影张丽华研究员为研讨会致开幕辞  本届会议的开幕式只有简短的5分钟,没有领导讲话,没有任何仪式,充分体现了会议的简洁办会特色。开幕式由中国科学院大连化学物理研究所的张丽华研究员致欢迎词,她提到:“中国计算蛋白质组学研讨会在业界享有很高盛誉。每次会议的演讲嘉宾都是由会议发起者和主办方——中国科学院计算技术研究所贺思敏研究员、北京蛋白质组研究中心徐平研究员、北京生命科学研究所董梦秋研究员等资深学者以及往届会议报告人鼎力推荐的。本次研讨会的26个报告将由来自国内外相关领域的顶级专家和奋战在科研第一线的青年才俊精彩呈现。相信在这两天的会议中,大家不仅能够收获知识,也能收获友谊。”研讨现场  CNCP-2016会议邀请的26个报告多数都是最近一两年的研究成果,部分还没有发表,新技术频繁现身,特别是在交联质谱技术与蛋白质复合体,蛋白质相互作用、翻译后修饰技术、蛋白质鉴定数据处理、定量蛋白质组技术等领域报告较多,下面对这26个报告的内容逐一进行简介总结。  UCI(美国加利福尼亚大学尔湾分校)黄岚博士 报告题目《Developing Cross-Linking Mass Spectrometry (XL-MS) Strategies to Define Interaction and Structural Dynamics of Protein Complexes》  了解蛋白质复合物的相互作用和结构动力学对于揭示病理的分子学细节非常有帮助。交联质谱(XL-MS) 是目前研究大量多亚基蛋白复合物PPIs的重要技术,而精确的肽段鉴别是XL-MS分析一直以来面临的挑战。为了促进这方面的研究,黄岚博士研究组研发了DSSO 及一系列含亚砜(sulfoxide-containing)可分裂质谱交联剂以揭示蛋白质复合物表面相互作用机理。研究者通过这些(MS-cleavable reagents)质谱可分裂试剂在多级串联质谱上建立了实用的XL-MS工作流,快速、准确的鉴别交联肽段去研究体内和体外的PPIs。同时,研究者也研发了新的定量XL-MS途径,用以分析多种生理条件下蛋白质间的相互作用和蛋白质复合体的结构动态变化。据介绍,该课题组最近研发了新的羧基交联剂DHSO主要用来与酸性氨基酸反应,反应中需要DMTMM共同作用。 这样可以得到更广的蛋白相互作用信息。北京生命科学研究所 谭丹博士 报告题目《Trifunctional Cross-Linker for Mapping Protein-Protein Interaction Networks and Comparing Protein Conformational States》  该研究组最近有一项研究工作围绕一种含生物素标签的赖氨酸富集交剂Leiker,谭丹博士在报告中详细展示了课题组的相关研究,研究表明Leiker能够有效改进蛋白质化学交联质谱技术(CXMS)。研究组将以Leiker为交联剂的CXMS用于E.coli全细胞裂解液的分析,发现了3656种相互作用,是之前已有研究方法的10倍。Leiker CXMS比BS3得到的信息要立体很多,能得到更全面的蛋白质相互作用网络。研究者还将Leiker为基础的CXMS用于RNA结合位点鉴定与定量,该方法能够深入揭示蛋白质构象变化。在将Leiker CXMS用于大肠杆菌和秀丽线虫裂解液中的研究中,分别鉴定出3130和893个互补赖氨酸对,并各自发现了677和121种PPIs。Utrecht University (荷兰乌德勒支大学) 刘凡博士 报告题目《Charting the Cellular Interactome by Proteome-Wide Cross-Linking Mass Spectrometry》  据刘凡博士介绍,针对交联数据分析的n-square和交联肽段低效裂解这两大难题,该研究组建立了一种新XL-MS工作流-质谱可分裂交联剂法。该法是一种混合MS2-MS3裂解途径与专用的交联搜索数据库结合的方法。研究者将质谱裂解交联剂DSSO应用于测定每个交联肽段的前体质量,解决了n-square问题。交联裂解前体离子可通过质量差异确定数据的MS3采集方向,这些工作都可以在Oribitrap Fusion 和 Lumos Tribrid质谱上完成。这种采集途径提高了MS3实验的成功率,能够解决低效裂解问题和显著改善数据质量。与先前方法相比,报告中介绍的新方法包含以下三个优势。1)能够完成整体蛋白组数据库的交联鉴别 2)包括多种翻译后修饰的交联鉴别 3)在MS2和 MS3水平都有高质量范围。该研究组将此新XL-MS方法用于多种复杂样本,包括大肠杆菌裂解物、HeLa裂解物、排阻色谱分馏的HeLa细胞核提取物与细胞器。采用这种方法能够从每种样本得到成千上万个交联点。中国科学院计算技术研究所 刘超博士 报告题目《Development of the Cross-Linked Peptides Identification in Large Scales》  由于检索空间过于庞大,蛋白组范围内交联肽段(双肽)的鉴定一直都是一项挑战。刘超博士和其团队考察了用于大范围交联肽段鉴定的普通搜索工具的应用效果,并开发了一种新的计算软件技术pLink 2.0。此技术比先前技术有三方面的改进:1)提高了双肽中单同位素鉴定的精度 2)由肽段索引升级为离子索引 3)引入机器学习(SVM在线训练)。该团队研究表明,通过使用离子索引pLink2.0检索人类数据库,在一小时以内可以完成5000张谱图的检索。干湿结合方法在人库检索1万张二级谱图仅用时不到2分钟。将pLink 2.0与美国西雅图研究人员研发的Kojak相比较,pLink2.0的分析速度约为Kojak的6倍,在精度方面也有一定优势。pLink2.0支持可碎裂交联,可减少可搜索空间和减少谱图数目。华中师范大学 万翠红博士 报告题目《Mapping Conserved Metazoan Protein Complexes with Biochemical Fractionationand LC/MS/MS》  对多蛋白复合物的了解对于生理进程探索非常重要。然而,对多蛋白复合物种类的分布特别是大规模网状图的发现比较困难。万翠红博士研究组通过高分辨生化分离与定量质谱直接分析了可溶性多蛋白复合物的组成,分析C.elegans、D.melanogaster、M.musculus、S.purpuratus和人类的可溶性细胞提取物。研究组采用以人类为中心的综合计算分析,鉴别出2153种蛋白,并新鉴定出7699种成对相互作用和981种共复合作用。这些相互作用能够反映后生动物生理过程相关的核心生理基础。重建的生理作用网有助于深入了解特殊的分子生物机理以及动物细胞的进化。国家蛋白质科学中心 郑勇博士 报告题目《Scaffold Protein-Mediated Dynamic Assembly of Protein Complexes in Normal and Cancer Cells》  很多细胞表面受体通过催化多组分蛋白复合物的形成开始信号传导过程。这个过程通过与受体结合的scaffold蛋白来传导。然而,目前这种scaffold的生物学基本原理仍不明晰。针对这个问题,郑勇博士研究组通过以IP-MRM为基础的方法,根据Shc1复合信号跟踪其空间和实时变化。研究人员进一步将这种方法与生化和基因技术结合,研究组发现Shc1以特殊的方式对EGF有即时的反应,包括明显的磷酸化和蛋白质相互作用。研究人员成功发现Shc1与一种抑制蛋白产生相互作用,是一种快速绑定蛋白基团能够激活促有丝分裂/存活通路,蛋白复合物围绕Shc1的装配变化在细胞间非常显著。对EGFR/Shc1复合物蛋白组分析能为以pTyr为基础的致肿瘤信号导致的乳腺癌提供诊断依据。暨南大学 张弓博士 报告题目《High-Throughput De Novo Proteome Identification Aided by Translatome Sequencing》  De novo肽段序列鉴定能够避免依赖数据库的检索法的缺点,但由于由于没有背景库,无法评估FDR,且极易受到干扰信号误导,因此长期以来无法应用于复杂样品的大规模鉴定。张弓教授介绍了研究团队研发的利用翻译组测序数据作为蛋白质de novo鉴定质量控制新方法,使肽段de novo鉴定能首次应用在蛋白质组复杂样品的实用化鉴定。研究人员在HCD质谱上应用此方法检测三种肝癌细胞(Hep3B, MHCC97H, MHCCLM3),单次实验鉴定出12000-13000种蛋白质,其灵敏度几乎达到了翻译组测序的水平 而用6种搜库软件鉴定到的真阳性蛋白并集也才7000-8000种。只能用新策略鉴定的4000余蛋白中随机挑选几十个进行MRM验证,几乎都能验证成功。这证明翻译组指导的de novo鉴定效能很高,能鉴定到大量搜索库法无法鉴定到的肽段和蛋白。De novo鉴定的大规模化可引致一系列新的蛋白质组应用。上海生命科学院 李辰博士 报告题目《De Novo Identification and Quantification of Single Amino-Acid Variants in Human Hepatocellular Carcinoma Tissues》  肿瘤蛋白质组-基因组学研究非常关注变异的发现。单核苷酸的多变性(SNPs) 数据库能够给单个氨基酸变体(SAVs)的检测提供依据。李辰博士在报告中介绍了一种在蛋白组水平发现SAVs的新方法。该法基于de novo算法,肽段的可能候选者可被鉴别并与理论蛋白数据库比较。在人类肝癌(HCC)组织中,研究者成功的应用此方法鉴别和定量已知和新的突变蛋白。在肝组织当中,在细胞核内的突变比较低,突变在内质网和线粒体的富集比例较高。这种新方法为病人提供了高通量的定制检测途径,可能为潜在临床生物标志物发现和机理研究提供帮助。中山大学 肖传乐博士 报告题目《Improving Peptide Identification for Tandem Mass Spectrometry by Incorporating Translatomics Informatio》  目前很多数据库检索方法是利用谱学数据而忽略能用于肽段鉴定的生物系统的其他信息。最近,转录物组RNA-seq的界面信息能提高肽段鉴别的灵敏度已经证实。与转录物组信息相比,翻译物组体现出与蛋白质的关系更为紧密,所以其可能对肽段鉴别更有效。在此报告中,肖传乐博士介绍了该研究组设计的高灵敏度肽段鉴定手段IPomics,其以翻译组学信息为主要蛋白鉴定参考。方法得到的推荐蛋白质优先性整合进了新的评分功能。与Mascot和pFind相比,IPomics方法蛋白质鉴定准确度更高,并能够增加整体肽段的鉴定率、谱学信息利用率,并已经利用LC-MS/MS数据集在人类和小鼠蛋白鉴定取得了显著效果。华大基因(BGI-Shenzhen) 闻博 报告题目《Protein Identification and Quantification based on Multiple Search Engines》  闻博在报告中介绍了团队有关以多搜索引擎为基础的蛋白鉴定和定量软件的研究进展。目前,串联质谱技术产生的质谱数据解析率往往不高,不同蛋白质鉴定软件由于谱图预处理、打分算法不同等原因导致对同一个数据的解析结果往往存在一定的互补性。虽然有一些开源的软件可以通过精巧的运算将多个鉴定引擎的鉴定结果整合起来取得与单引擎相比更好的鉴定效果,但由于操作往往较为复杂、下游软件比较缺乏等原因,故没有在蛋白鉴定与定量中推广开来。为了促进多引擎整合方法在蛋白鉴定和定量中的应用,该研究组研发了一种多引擎综合鉴定的开源软件IPeak和同重同位素(如iTRAQ、TMT)标记定量软件IQuant,并将IQuant升级到IQuant2。IQuant2采用精妙的算法和mzIdentML标准,整合多引擎搜索结果进行蛋白质定量。在分析水稻蛋白样品(用Q-Exactive分析)和人细胞系蛋白(用TripleTOF 5600分析)样本时,与单个引擎定量结果相比,IQuant2定量的蛋白能提高28.8%,检测的差异蛋白数量能提高多大40%。多引擎搜索不但能够提高蛋白鉴定效果,也能提高蛋白定量效果。中国科学院水生生物研究所 葛峰博士 报告题目《GAPP: a Proteogenomic Software for Genome Annotation and Global Profiling of Posttranslational Modifications in Prokaryotes》  葛峰博士在前期蓝细菌的蛋白基因组学研究工作的基础上,开发了一种用于原核生物的基因组注释和翻译后修饰全局发现的蛋白基因组分析软件GAPP。该软件最大的特点就是简单高效,具备初步生物信息学知识的研究者就能应用该软件进行原核生物的蛋白基因组数据的深度分析,利用该软件可以高效完成原核生物的全蛋白质组解析和翻译后修饰的全局发现的工作,该软件的开发和应用将有助于原核生物的基因组的精准鉴定,并有望成为原核生物基因组注释的一项标准流程。今后研究组还将根据用户的要求和体验继续对该软件进一步升级。复旦大学 周峰博士 报告题目《Genome-Wide Quantitative Proteomic and Transcriptomic Analysis Reveals Post-Transcriptional Regulation of Mitochondrial Biogenesis in Human Hematopoiesis》  蛋白质组学样品分析需要高分辨分离平台,周峰博士研究组搭建了一种长色谱柱三维蛋白组学定量分析平台(GWPQ), 整套系统完全在线和实现操作自动化。研究者将在此平台建立的蛋白质组学方法与Ribosome profiling相比较,水平相当,在分析模型样品时有80%的重叠。研究者还用此方法开展了人体造血相关细胞的研究,二代测序与应用该平台的蛋白质组方法重叠率达到92%。研究团队利用此方法比较了人体最重要的造血干细胞和红细胞发育中14502个基因蛋白表达变化和17127个基因mRNA表达变化。mTORC1信号极大的促进了红细胞进化中线粒体蛋白的翻译,线粒体和mTORC1的遗传和药理学干扰削弱了体内和体外的红细胞生成。该研究支持了线粒体理论机理,可能与线粒体疾病和老化相关的血液缺陷有关。研究者用模式生物小鼠实验验证了线粒体在血红细胞发育中起到关键作用,找到了全新控制血红细胞发育的通路。Johns Hopkins University(美国约翰霍普金斯大学) 张会博士 报告题目《Comprehensive Analyses of Glycoproteins》  已有不少实验证明,糖蛋白的变化与很多疾病相关。张会博士介绍了糖蛋白的生物合成、结构和功能以及分析糖蛋白的最新方法。糖蛋白的分析是蛋白质分析中最复杂的一种。研究者常把糖和蛋白分开分析,如已有的SPEG(固相提取糖基位点肽)法。该研究组建立了N-糖蛋白数据库,该库可用于检索已鉴定蛋白、通过精确质量数检索候选肽段、鉴定糖蛋白源等。该研究组最近还建立了分析N-linked糖链,糖基化位点,糖基化位点特异糖链,及O-linked糖链分析方法和软件,并探索了用糖基化酶推测多糖的方法。中国科学院大连化学物理研究所 于龙博士 报告题目《Isolation and Structural Analysisof N-Linked Glycansby Using Two-dimensional Chromatography, Mass Spectrometry and Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy》  糖蛋白糖链的纯化合物对糖链的结构分析、精准检测以及功能研究都具有十分重要的意义。然而,目前糖链纯化合物仍处于严重匮乏的状态。来自大连化物所的于龙博士介绍了该团队根据自身优势,采用纯化制备方法来获取N-糖链纯化合物并对其结构进行解析的相关研究进展。研究者首先介绍了糖链的结构特点并对其分离分析中存在的难点问题进行了阐述。针对这些难点问题,研究者结合课题组的材料优势,构建了以二维亲水作用色谱分离体系为核心的糖链纯化制备流程,该流程包括糖蛋白糖链的释放、富集、二维分离、质谱表征以及核磁结构分析等技术单元。在二维色谱分离体系中,第一维度主要根据糖链的羟基数量而实现不同聚合度糖链的分离,第二维度主要用于同分异构体的分离。由于串联质谱技术并不能得到糖链准确的结构信息,因此,研究者目前正在探索核磁共振技术进行准确结构的分析。以现有的糖链纯化合物为基础,研究者接下来将分别在功能、结构和定量三方面开展相关研究以拓展糖链样品库的应用。青岛大学 李磊博士 报告题目《Ultra-Deep Tyrosine Phosphoproteomics Enabled by a Phosphotyrosine Superbinder》  酪氨酸磷酸化网络应用在蛋白组学中不容忽视,如何找到pY尤为重要,但之前方法需要大量抗体才能富集pY。为解决业内这一问题,李磊博士研究组做了不少相关研究,团队研发的Superbinder(超亲体)易于制备,能够有效减轻实验室经济负担。研究者合成了pTyr1和pTyr2两个肽段,比较了SH2 superbinder法与其他几种方法的效果,又增加了Ti4+IMAX的去噪功能,证明其能有效富集pY。与抗体相比,src和grb2超亲体都能有效发现更多pTyr位点。研究者还应用superbinder富集方法进行了Tyr 磷酸化蛋白组学研究。如探索人细胞磷酸化蛋白不同功能分类和Tyrosine kinase (TK)的生物活性等。该项研究是与中科院大连化学物理研究所邹汉法团队、加拿大西安大略大学李顺成团队多方合作完成的。University of Minnesota (美国明尼苏达大学) 陈悦博士 报告题目《Discovery and Characterization of Short-chain Lysine Acylations with Mass Spectrometry and Quantitative Proteomics》  赖氨酸是细胞内蛋白质翻译后修饰的重要靶点。最近,除了赖氨酸乙酰化以外还有一些短链酰基化修饰逐渐被发现。在陈悦博士的早期研究工作中,他从细致的质谱分析中发现了组蛋白赖氨酸丙酰化和丁酰化,两种新的短链酰基化修饰。进一步的研究表明,这两类短链酰基化修饰都是广泛存在的,并可以被特定的酶所调控。最近最新的研究表明赖氨酸丁酰化在Bromo domain识别和精子发育过程中起到重要的调控作用。为了进一步探索质谱信息中隐藏的其他新的修饰,研究者设计了PTMap软件,用来分析非限定性搜索,得到了一些可靠的新蛋白质修饰鉴定,包括琥珀酰化,巴豆酰化,羟基丁酰化等。在定量研究方面,该团队比较关心蛋白质修饰丰度,因为普遍使用的相对定量的分析方法对解释蛋白质修饰的生物学意义有一定的局限性,但是质谱分析得到的离子峰强度并不能直接比较来计算蛋白质修饰的丰度。研究者针对此问题开发了稳定同位素标记为主的新的蛋白质修饰丰度定量方法,可以直接比较离子峰强度,通缩计算得到每个位点上赖氨酸位点丰度,准确性和重现性都很好。中国科学院昆明动物研究所 赖仞博士 报告题目《Mite Allergen Diversity Identification by Proteomics Coupling with Pharmacological Testing》  螨虫、马蜂、牛虻和蟑螂等带有很多种过敏原,一些过敏甚至会导致死亡。过敏的标准治疗方式就是利用过敏原进行脱敏治疗,现在很多机构希望把过敏原纯化出来进行过敏治疗,因此对过敏原发现和提取纯化都有更多要求。屋尘螨(HDM) 是最常见的室内过敏原。赖仞博士希望结合蛋白质组学、药理和病理学手段来进行过敏原的多样性研究。过敏原蛋白组学研究一般是将分离提取出的过敏原与病人血清进行IgE反应。赖仞研究组将蛋白组学技术和二维免疫印迹法结合,从粉尘螨提取物中鉴定出分属于12个组群的17种过敏原,由Edman降解、质谱分析和cDNA克隆等技术鉴定出其一级结构。通过酶联免疫吸附试验抑制测试、免疫印迹、粒细胞活化试验、皮肤点刺试验测定,该研究组发现了8种新的尘螨过敏原。中国医学科学院基础医学研究所 邵晨博士 报告题目《Opportunities and Challenges for Urinary Biomarker Discovery Using Proteomic Approaches》  邵晨博士对业内目前围绕尿蛋白质组生物标志物的发现研究进展进行了综述。据介绍,现在很多科研和医疗开始倾向于做尿液,因其具有易得性和稳定性,且含有丰富蛋白信息。邵晨博士研究组曾通过二维液相与串联质谱鉴定做了一些尿中蛋白质组的研究,尿液蛋白质组可以包括其他体液70%的蛋白质。研究组也通过3DLC-MS/MS鉴定出尿液中的6400多种蛋白,并发现与尿蛋白重合率最高的是脑组织中的高表达蛋白。尿蛋白能够反映很多远端的变化,如帕金森症和脑肿瘤等脑部疾病。在肾脏病中,肾小球损伤病人的肾小球会失去过滤功能而造成尿蛋白显著上升。目前很多研究发现尿蛋白中的生物标记物与一些疾病相关,主要集中在泌尿系统疾病的发现,如膀胱癌和急性肾损伤的标志物已获FDA批准,也有在消化系统疾病、肿瘤等疾病中的相关发现。其中,肺癌的研究比较成熟且已进入临床阶段。厦门大学 钟传奇博士 报告题目《Investigation of Signaling Pathway Using Data-Independent Acquisition Proteomics》  研究组希望用质谱鉴定动态相互作用蛋白,而实际上这种蛋白随着时间变化非常快,很难用常规质谱方法做到定量。最近出现的蛋白定量新技术SWATH-MS(DIA的一种)具有可以进行多个样品之间的定量且定量精度很高的优点。DIA与DDA不同之处在于,DIA是把所有的母离子都打碎,而DDA只是随机地选择母离子进行二级分析。虽然SWATH-MS有众多的优点,但是其数据分析是领域内难点。钟传奇博士介绍了其课题组开发的Group-DIA软件,可以同时对SWATH-MS数据进行定性和定量分析。研究者利用SWATH-MS分析TNFR1复合物,以及后续利用Group-DIA进行数据分析,发现了一个TNFR1复合体上的新蛋白。钟传奇博士还在报告中举研究实例介绍了DIA的应用效果,证明了SWATH-MS是在信号通路中鉴定动态蛋白的有效方法。中国科学院遗传与发育生物学研究所 王秀杰博士 报告题目《Ubiquitously Expressed Genes Participate in Cell Specific Functions via Alternative Promoter Usage》  王秀杰博士通过生物信息方法比较了小鼠胚胎干细胞和分化的体细胞的转录组差异,发现104个在胚胎干细胞和体细胞中普遍表达的基因可以产生110个在胚胎干细胞中特异表达的转录本(SATS转录本)。这些SATS转录本在胚胎干细胞中的表达受到Oct4, Sox2,Nanog等关键多能因子的调控,其中61.8%SATS蛋白以不同的ORF编码蛋白。干扰SATS转录本的表达可以影响小鼠胚胎干细胞的多能性水平,提示SATS转录本在决定胚胎干细胞特性方面的重要功能,也表明广谱表达的基因可以通过SATS转录本参与细胞类型特性的功能调节。王秀杰博士还介绍了发生在RNA的6位N原子甲基化修饰m6A修饰)的形成机制研究及对mRNA的稳定性与翻译的影响,RNAm6A修饰也是影响转录组进而导致蛋白质组动态变化的一个重要因素。南方科技大学 田瑞军博士 报告题目《Proteomics toolbox for profiling intercellular signaling》  田瑞军博士研究团队做了很多体系中特定环境细胞-细胞相互作用的研究。也在不断探索如何用尽量少的样品做出更多的功能分析。为此,团队建立了SISPROT样品前处理方法,用于蛋白质组学样品前处理,样品经过SISPROT前处理可直接用质谱进行分析。此方法的优化过的消化时间仅需15min,其与质谱联用在分析10万个细胞耗时22小时,能够定量近90000个肽段,近8000个蛋白。另外,研究者还进行了免疫刺激的两种信号模型的研究。  中国科学院大连化学物理研究所 王方军博士 报告题目《New Chemical Isotope Labeling and Electrospray Ionization Strategies for Intact Proteins Analyses》  整体蛋白质分析可以区分不同蛋白质异构体,但是与Bottom-up相比难度较大,国际上进行相关研究的团队也相对较少。王方军博士研究团队不断探索整体蛋白高效色谱分离和质谱表征新技术新方法,目前对30K以下整体蛋白的分析表征已经有相对完善的解决方案。该研究团队利用浙江好创生物的密闭性可调气氛离子源,消除了三氟乙酸(TFA)的离子抑制效应,同时实现了高效色谱分离和高灵敏度质谱检测,在对大肠杆菌提取蛋白质样品进行分析时有效质谱信号提高了95%。另外,他们以二甲基化同位素标记原理对整体蛋白进行高效同位素标记和定量分析,目前已经能够在一次实验中实现约3000个蛋白质异构体的准确定量分析。中国科学院大连化学物理研究所 赵群博士 报告题目《Ionic Liquid Based Sample Preparation Strategy for Efficient Proteome Analysis》  膜蛋白在细胞内外的物质运输、信号传导等过程发挥着重要生物学功能。但由于具有组成复杂、疏水性强和丰度低等特点,不易分析。目前很多研究者致力于探索能更有效分析膜蛋白的溶解体系。膜蛋白溶解体系需要具备强溶解能力、较好的酶活兼容性和容易去除等特点。该研究组发现了离子液体体系非常适合膜蛋白分析,在探讨了离子液体结构对膜蛋白质的增溶机理之后,筛选出C12离子液体,并与目前主流增溶体系(SDS、尿素、Rapigest、SDC等)分析效果进行了比较。发现相同浓度下的C12比SDS有更加优秀的溶解能力,更保持了更好的酶活兼容性。研究组在C12离子液体基础上进行HeLa细胞膜蛋白的蛋白组学分析,鉴定出12234个蛋白,包含3785个膜蛋白和1916个跨膜蛋白质。研究者还建立了以C12离子液体为基础的i-FASP前处理方法,能够有效扩大蛋白质组鉴定及定量的覆盖度、准确度和精密度。上海交通大学陶生策博士报告题目《Protein Microarrays for Systems Biology: Construction, Application and Technology Development》  陶生策和他的团队长期致力于蛋白质芯片技术的研究和应用。蛋白质芯片具有通量高、样品用量少、高灵敏度等优势,目前该实验室有酵母、大肠杆菌和人类的蛋白质芯片。陶生策博士以结核菌蛋白芯片为例介绍了高密度蛋白芯片的构建,目前全国很多机构都在使用这种芯片。该研究组将蛋白质芯片应用于砷蛋白的鉴定,发现了360个ATO,为指导ATO在肿瘤治疗上的应用提供指引,建立的流程也可用于其他药物靶标蛋白的全局性发现。研究者利用蛋白芯片寻找胃癌的生物标记物,研究过程中采用1400个医学样品,找到了7个胃癌生物标质物。  尹沛源 中国科学院大连化学物理研究所 报告题目《Liquid Chromatography-Mass Spectrometry based Metabolomics Strategies Towards Clinical Applications》  目前的代谢组学研究正在从样品走向临床诊断应用。针对LC/MS代谢组学在临床中的应用难题,大连化物所代谢组学中心建立完善了新一代的代谢组分析技术,即样本导向的拟靶向方法。该分析法具有线性范围比较宽,重复性好,数据处理简单等优点,适用于大规模临床样本的研究。围绕拟靶向代谢组技术,研究组开发了系列数据处理软件,实现自动化的离子融合,离子对筛选等过程,简化了拟靶向方法建立的流程,使之更易于推广。同时,研究组发展了QC校正算法,使得拟靶向代谢组方法能够一次性实现多批次样本分析,每批次样本容量近300例,一次性完成千例以上样本的分析,同时多批次样本间数据稳定性,重复性均符合代谢组研究需要,为大批量代谢组临床研究提供了稳定可靠的工具。  ThermoFisher Scientific(赛默飞世尔科技)李静博士 报告题目《Orbitrap based Clinical Proteomics for Precision Medicine and Translational Research》  本报告中李静围绕如何实现和推动蛋白质组学的临床转化与应用这一热点问题进行了综述。每年文献报道的通过蛋白质组学发现的潜在癌症标志物均超过千种,但是通过最终验证、审批、并用于临床的仅仅只有卵巢癌标志物OVA1一个。为了跨越蛋白质组学从研究到临床的巨大鸿沟,多个实验室都开始致力于简单易用、高自动化、高重复性的蛋白质组分析流程的建立,比如Matthias Mann、Hanno Steen等研究组就分别针对血浆、唾液和尿液临床样本建立了快速的蛋白质组分析流程,为蛋白质组学临床转化指明方向。同时,在下游临床检测方面,李静介绍了美国针对临床检验新技术采用的兼顾监管和鼓励创新的LDT模式,以及一系列基于质谱检测的生物标志物LDT项目,包括Xpresys Lung、TG等,并针对生物标志物临床检测,指出了质谱取代免疫学方法的四个方向,全面展示了蛋白质组学和质谱技术的临床应用潜力。中国科学院计算技术研究所副研究员孙瑞祥致闭幕辞  在为期两天的26位邀请嘉宾的精彩报告之后,中科院计算所的孙瑞祥博士为本届研讨会致闭幕辞。孙瑞祥博士首先代表所有参会者感谢中科院大连化物所张丽华老师团队为会议提供的精心安排与服务。孙瑞祥博士将会议的简短开幕和闭幕仪式比作会议报告的“假阳性时间”,本届会议的“FDR(错误检出率)”极低,CNCP今后也将延续这一风格。另外,孙瑞祥博士还表示,第五届CNCP计划在2018年的下半年召开,并向大家发出报告嘉宾推荐邀请。最后,孙瑞祥博士祝愿我国的科研人员在国际计算蛋白组学领域能做出更出色的成绩。编辑:郭浩楠
  • 新加坡爆出感染超级细菌病例 专家担忧蔓延全球
    据新加坡媒体今晨报道,新加坡最近出现了两例超级细菌感染病例,成为东南亚地区第一个传出超级细菌病例的国家。  目前,这两名患者已经痊愈,但有新加坡专家担忧,病菌突变的速度会快于抗生素的研发速度。被冠名为"末日细菌"的超级细菌已在英、美、加等近二十个国家和地区传播,造成数百人感染,俨然出现蔓延全球的趋势。  世界卫生组织驻华新闻发言人表示,由于许多国家存在不报或瞒报情况,超级细菌的蔓延程度要比表面上看到的严重,世界卫生组织特此向中国提出防范四大建议。  袭东南亚:超级细菌染指新加坡爆出两例感染病例  新加坡国立大学微生物学系副教授李元昆指出,由于病菌不断发生基因突变,甚至出现一些能抵抗现有抗生素的新病菌,因此需不断研发新的抗生素对付新病菌。  “从开始研发新的抗生素,一直到抗生素上市,一般需要至少10年时间,如果病菌突变的速度快于抗生素的研发速度,就大有问题了。”李元昆对此表示了担忧。  刀枪不入:有专家担忧蔓延全球只是时间问题  与此同时,美国境内近日也发现了3名感染了超级细菌变种的病例。美国疾控中心专家称,他们体内变异了的“超级细菌”几乎对所有抗生素都“刀枪不入”。“超级细菌”危机愈演愈烈,医学界目前还没有研究出根本性的治疗方法,有专家担忧感染蔓延全球只是时间问题。  根据世界卫生组织统计,目前宣称出现超级细菌感染病例的国家有印度、巴基斯坦、孟加拉、日本、英国、美国、加拿大、澳大利亚、比利时、瑞典、新加坡、荷兰、奥地利、法国、德国等国。  形势严峻:病例数不准感染者应还有很多  “我们现在不知道超级细菌在全球蔓延和变种的速度有多快。”世界卫生组织驻华新闻发言人陈蔚云今晨告诉记者,虽然大多数国家截止到目前都通报了病例和病情,但形势现在并不乐观。  她解释说,因为还有许多国家并没有上报超级细菌病例,甚至都没有开始筛查它是否存在,因此世卫组织如今掌握的病例数存在不准的情况,预计超级细菌的感染者远不止现在通报的数目。
  • "双乐"橙汁杀菌门暴露中国检测标准低 国内仍在销售
    一位业界律师认为,据以往的经验,除了企业进行澄清声明外,还需要由政府机构或第三方机构进行检测,以最终确定相关产品是否会损害消费者的利益  1月16日,记者走访多家便利店和超市发现,可口可乐和百事可乐旗下的橙汁产品(美汁源和纯果乐)继续在市场中热销,部分超市甚至与碳酸饮料捆绑销售,打折促销。同时,超市工作人员对近期的“杀菌剂”事件也不知情。  1月14日,百事可乐公司宣布检测结果,该公司旗下的“纯果乐”橙汁含有痕量(即极少量)多菌灵(一种广谱性杀菌剂,对多种作物由真菌引起的病害有防治效果)。此前,百事可乐的最主要竞争对手可口可乐也发表声明,“经自我检测,发现有巴西种植户在橙子树上喷洒了美国禁止的杀菌剂。”  目前,两家公司坚称,产品不会导致健康安全问题。不过,对于企业的声明,有专家公开表示,相关的声明是单方面声明,属于企业行为,科学依据和可信度都有待提高。一位业界律师则认为,据以往的经验,除了企业进行澄清声明外,还需要由政府机构或第三方机构进行检测,以最终确定相关产品是否会损害消费者的利益。  曝出杀菌剂事件  最先曝出“杀菌剂”的实际上是美国食品药品管理局(FDA)。当地时间1月12日《纽约时报》援引FDA的话称,“当局接到一家果汁公司的报告,后者称在自己及竞争对手的果汁产品中发现了少量真菌剂。”  随后,可口可乐总公司主动“揽责”,并发表声明称,“作为一家负责任的公司,当发现巴西种植者给果树喷洒的一种杀真菌剂在美国并未经过注册时,公司就迅速通报了FDA。”  百事可乐总部的声明则称,对纯果乐的最新检测显示,从进口巴西橙汁中检出的多菌灵低于FDA提出的导致危险性浓度。百事还表示,将继续进行检测,严肃对待该事件。  据目前披露的最新资料,该杀菌剂是多菌灵,主要用于治理植物真菌。巴西农业部上周亦证实,其柑橘果园过去21年中一直使用杀真菌剂,来对抗常见的黑斑病。而在巴西,多菌灵并不被视为有害产品。值得注意的是,在百度百科的词条中,多菌灵被定义为“对人畜低毒,对鱼类毒性也低”。  但国际食品包装协会副会长兼秘书长、环保专家董金狮公开表示,“多菌灵对人们的肝脏系统是有破坏作用的。严重的话,甚至可能会导致肝癌。”  “联想到中国市场,一旦相关产品真的对中国消费者健康产生问题,就可能涉嫌侵害消费者的生命权、健康权等民事权益,即违反了中国的《侵权责任法》,也违背了《消费者权益保护法》。”昨日,江苏明弘律师事务所吴俊锋律师对《国际金融报》记者分析,“当然,作出上述判断的前提是要有充足的证据。”  中国市场不受影响?  尽管专家认为多菌灵可能会对人的身体健康造成影响,但可口可乐和百事可乐均表示,“不会导致健康安全问题。”可口可乐还强调,“在中国使用的橙汁均安全可靠,符合国家严格的原材料质量标准。”  “在世界各地产品中使用的橙汁都是安全可靠的。”可口可乐中国区新闻发言人王雷在接受媒体采访时表示,“请广大中国消费者放心,这个事件对中国的产品不会有任何影响。”  对于上述声明,董金狮并不认同。“如要真正进行声明,必须讲清,在中国销售的橙汁里面,有没有使用巴西橙,同时要提供检测数据,这种声明,更多只是为了照顾市场销售。”他表示。据了解,目前中国是巴西第四大橙汁进口国,数据显示,2011年,巴西向中国出口橙汁(66°糖度)5.3952万吨,占整个出口份额的4.67%。  新华社早前表示,多菌灵在巴西已使用超过20年,主要用于应对植物黑斑病,在巴西并不被视为有害。而在美国,多菌灵被限制用于颜料、纺织品或装饰性树种等非食物产品。  “虽然不能否认企业的诚意和声明的可信度,但站在消费者的角度,中国消费者需要有知情权,来对产品作出正确的判断。”吴俊锋说,“中国《消费者权益保护法》第八条规定,消费者享有知悉其购买、使用的商品或者接受的服务的真实情况的权利。同时,消费者有权根据商品或者服务的不同情况,要求经营者提供商品的价格、产地、主要成分、生产日期、有效期限、检验合格证明、售后服务等有关情况。”  吴俊锋认为,保险起见,可由官方部门或权威的第三方检测机构对产品进行监测,这样既能保证公司名誉,也能保证消费者的利益。  与此同时,两家公司出现的杀菌剂事件似乎并没有影响到产品的销售情况。记者昨日发现,在家乐福、联华等超市或大卖场,两家公司旗下的果汁产品继续被摆在了显眼位置进行促销。  中国检测标准待提高  在专家看来,此次事件还暴露了中国多菌灵检测标准有待提高的问题。根据美国环境保护局的标准,在美国市场,橙汁残渣里多菌灵的含量标准为80ppb(十亿分率)以下,欧盟的标准是200ppb,澳大利亚的标准甚至不超过10ppb。  而中国于2011年4月1日实施的《食品中多菌灵最大残留限量标准》显示,柑橘最大残留限量为5mg/kg,西瓜0.5mg/kg,韭菜2mg/kg。换算之后,柑橘残留量标准是5000ppb,高出欧美标准数百倍。  董金狮对此呼吁,应尽快完善中国的检测标准。他还建议提出备案制度,即确定有哪些果农到底使用了哪些杀菌剂或杀虫剂,同时,产业链中的食品生产企业本身,也需要对上游的原料提供企业进行考核。“这些举措都将从源头上保证消费者的利益。”吴俊锋表示。
  • Science | 细菌中Gasdermins蛋白揭开细胞死亡的进化起源
    Gasdermin蛋白是人类细胞中在细胞膜上打孔,释放免疫因子并诱导细胞死亡的关键因子。Gasdermin打孔的机制是由caspase介导的,在炎性小体信号传导过程中触发,对防御病原体和癌症至关重要【1】。人类中Gasdermins家族由六个成员组成,GSDMA–GSDME以及pejvakin。但是各种各样的Gasdermin蛋白在进化上的起源以及生物学作用仍然不甚清楚。为此,美国哈佛大学医学院Philip J. Kranzusch研究组与以色列魏茨曼研究所Rotem Sorek研究组合作在Science发文题为Bacterial gasdermins reveal an ancient mechanism of cell death,揭开了细胞焦亡作为细菌以及动物中共有的一种古老的、调节细胞程序性死亡的方式。通过序列分析,作者们发现与哺乳动物Gasdermin蛋白相似不同50个细菌来源的蛋白,其中作者们测定了来自慢生根瘤菌嗜热菌(Bradyrhizobium tropiciagri)和Vitiosangium sp的bGSDMs的晶体结构,结果显示bGSDMs的总体结构都是共享的,与哺乳动物Gasdermin N末端结构具有显著的同源性(图1)。晶体结构分析同时也显示在哺乳动物Gasdermin蛋白中C末端结构,会维持该蛋白处于一种自我抑制的状态;虽然bGSDMs中没有与哺乳动物中Gasdermin蛋白C末端结构相似结构,但是仍然具有自我抑制结构特征(图1)。图1 对细菌来源的Gasdermin蛋白进化保守型以及结构分析随后,作者们想知道bGSDMs在细菌系统中是否有抗噬菌体的功能,作者们发现bGSDMs对大肠杆菌噬菌体具有显著的抵抗性。因此,bGSDMs是细菌“防御工事”中的关键组分。另外,作者们发现bGSDM的激活会诱导细菌细胞膜的破坏,而且在其激活过程中需要蛋白酶的参与,因为引入蛋白酶靶向位点的突变会废除bGSDM的细胞毒性(图2)。图2 蛋白酶参与bGSDM的激活进一步的,作者们对bGSDM的切割过程进行探究。作者们发现bGSDM的切割需要蛋白酶的催化,但是并不需要棕榈酰化修饰。另外,通过质谱分析作者们鉴定到了古字状菌属的Runella中bGSDM的具体切割位点以及处于自我抑制状态的结构生物学基础。通过构建绿色荧光蛋白的融合蛋白,作者们对bGSDM激活的动态过程进行的监测。作者们发现在激活过程中会由弥散分布的形式变成与膜结构存在联系的点状结构,通过透射电镜的检测可以观测到bGSDM切割后会导致细胞膜完整性的破坏,并导致细胞内容物的快速释放。图3 工作模型总的来说,该工作的建立了细菌与哺乳动物中Gasdermin蛋白打孔从而导致的细胞程序性死亡的具体模型(图3),证明了细菌中bGSDM系统可以发挥防御作用,并且该作用依赖于蛋白酶的参与,该工作将有助于深入了解细胞焦亡的具体作用机制以及在进化上的起源。原文链接:https://www.science.org/doi/10.1126/science.abj8432
  • 首次发现!细胞竟能自产“洗涤剂”,让细菌无处遁逃
    现如今,各类杀菌清洗剂逐渐走进寻常百姓家,因去污快、使用方便备受人们的青睐。近日,霍华德休斯医学研究所的科研人员发现细胞,像很多人一样,竟然也会用“洗涤剂”来抵御细菌。  这是人类首次发现了人体细胞内具有“洗涤剂”功效的保护性蛋白。相关研究以A human apolipoprotein L with detergent-like activity kills intracellular pathogens为题发表在顶级期刊《Science》杂志。文章指出,科研人员发现了一种名为“ APOL3 ”蛋白质,可以通过溶解细菌膜阻止细胞感染,从而实现细胞自主免疫。  人体的免疫系统是由特化细胞组成的复杂网络,它们就像一群“保镖”,可以保护人体健康,抵御外来病原微生物,如各种细菌、病毒、寄生虫等,甚至可以预防癌症的形成。但当这些特化细胞被动员的同时,警报信号也会惊扰到正常细胞,身为正义的一方,面对外来入侵者,正常细胞固然不会坐以待毙,可它们到底是如何抵抗病原菌的呢?  众所周知,沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。而干扰素是时当机体感染病毒时, 宿主细胞通过抗病毒应答产生的一组结构类似、功能相近的低分子糖蛋白, 是抗病毒感染最重要的一种免疫因子。沙门氏菌(绿色)等微生物感染人类细胞  因此,研究人员利用沙门氏菌菌株感染了人体内的非免疫细胞,发现警报信号“干扰素 γ(IFN-γ)”会促进非免疫细胞分泌一种蛋白质,以阻止沙门氏菌“接管”人体细胞,为了揭开这种蛋白质的神秘面纱,该研究团队基于CRISPR-Cas9技术筛选了19000多种人类细胞基因,最终锁定了“ APOL3 ”!  人载脂蛋白L3(APOL3)是一种关键的效应蛋白,遍布于人体的全身,其杀菌机理与清洗剂中的表面活性剂使油性污垢乳化类似,一部分被水吸引,一部分被油脂吸引。APOL3的负染色电子显微镜检查  当然,APOL3去除的不是衣物上的污垢,而是由脂质分子组成的细菌内膜,当 APOL3 靶向 IFN-γ激活细胞内的病原体时,APOL3会对细菌内膜 (IM) 造成致命的伤害。  研究指出,当APOL3与干扰素刺激基因 (ISG)编码的蛋白质协同作用时,鸟苷酸结合蛋白 1 (GBP1)会扰乱外膜(OM)抗原的通透性屏障,使APOL3进入细菌内膜,并对细菌进行致命一击。APOL3 通过外膜 (OM) 到达内膜 (IM)  该研究的通讯作者之一、John D. MacMicking博士表示:“整个除菌过程是高度选择性的,APOL3 避开了细胞膜的主要成分胆固醇,而是针对细菌喜爱的独特脂质。”  面对外来入侵者,免疫系统变得日渐强大,逐渐进化出了多种途径抵御外敌,未来,期待这项研究会为人类细胞抵御感染提供新的见解。
  • ATS高压均质机细胞破碎机 本年度产品促销优惠新老顾客活动
    脂质体挤出器脂质体挤出器主要应用于药剂产品粒径均一化,去除产品中的颗粒和沉淀,减小脂质体及乳剂粒径以便于无菌过滤,分子生物动力学研究!每次样品量:0-10ml最大工作压力:1000psi带夹套控温设计标配100nm微孔滤膜净重:4kg1.所有密封件均通过FDA认证 2.使用PC滤膜,操作简单,可重复使用 3.所有接触物料管道均为316L材质 4.装卸便捷,便于清洗及灭菌 5.可用于高粘度产品处理.采用高规格不锈钢制造,可信赖的挤出器部件易拆卸,卫生无死角,易清洗和转配颗粒大小均匀,并可随意控制高收集效率可适用于各种脂质成份没用物料量限制使用成本低,设备易于使用关于ATS---技术支持服务ATS一直坚持以客户服务为中心,自进入中国以来,已经和许多国内著名的研发机构建立了友好的合作关系,并完成的众多项目的建设工作。ATS拥有一支经验丰富,技术出众的工程师队伍,可以提供设备的安装、调试、使用培训、年检、维修、维护等服务。ATS于2006年底在上海建立的技术支持中心,配置了高压均质机,高速剪切机,激光粒度分析仪,低温恒温水泵,显微镜等仪器。可以为客户提供:乳剂制备及检测服务脂质体制备及检测服务纳米混悬液制备及检测服务各类生物细胞破壁及检测服务果汁,饮料,蔬菜汁的制备及检测服务各类实验型高压均质机的维修保养服务各类中试型高压均质机的维修保养服务TEL:021-54467588,54467688EMAIL:duanling@atshph.comhttp://www.atshph.com
  • 高产抗菌脂肽 Fengycin 芽孢杆菌的诱变育种和发酵条件优化
    本期为您推荐广西大学刘小玲教授研究团队发表在《食品工业科技》上的一篇文章:高产抗菌脂肽 Fengycin 芽孢杆菌的诱变育种和发酵条件优化。该研究以枯草芽孢杆菌 YA-215 为出发菌,通过复合诱变(紫外诱变、ARTP-LiCl 诱变)育种来获取高产 Fengycin 突变体,并优化发酵工艺,突变株暹罗芽孢杆菌 UA-397 的 Fengycin 产量为 517.09 mg/L[1]。文章摘要内容如下: Fengycin 是一种由芽孢杆菌产生的环状脂肽分子,同时具有亲水性和亲脂性,这也导致其具有出色的生物表面活性剂活性和多种生物活性,亦具有抗菌范围广、安全降解性高和溶血性低等特点,在食品、医药和生物防治等方面拥有广阔的应用前景。Fengycin 的低产量和昂贵的生产成本,是其进一步商业化和产业化的瓶颈。紫外诱变、常压室温等离子体(ARTP)诱变、化学诱变是用于提高微生物脂肽类次级代谢产物产量简单且经济有效的方法。 为了提高 Fengycin 产量,以枯草芽孢杆菌 YA-215 为出发菌,通过复合诱变(紫外诱变、ARTP-LiCl 诱变)育种来获取高产 Fengycin 突变体。通过单因素实验和响应面试验等确定最佳发酵工艺优化。结果表明:复合诱变选育获得一株高产 Fengycin 突变株 UA397,全基因组测序结合 16 S 进化样本分析显示为暹罗芽孢杆菌。其最佳发酵工艺条件为:蔗糖25 g/L、蛋白胨 30 g/L、发酵温度 37.7 ℃、发酵时间 37.8 h、接种量 5.01%。在此发酵条件下,暹罗芽孢杆菌 UA-397 的 Fengycin 产量为 517.09 mg/L,是野生型在未进行发酵条件优化时 Fengycin 产量 113.02 mg/L 的 4.575 倍。研究结果为抗菌脂肽 Fengycin 应用于食品、医药和生物防治等领域奠定了产量基础。文章精彩内容如下:[1]陈尚里,于福田,沈圆圆等.高产抗菌脂肽Fengycin芽孢杆菌的诱变育种和发酵条件优化[J/OL].食品工业科技:1-16[2023-06-21].
  • 厦门大学颜晓梅团队通过纳米流式细胞仪在单囊泡水平上分析细胞外囊泡DNA
    2022年4月4日,厦门大学颜晓梅团队在Journal of Extracellular Vesicles(IF=26)在线发表题为“Analysis of extracellular vesicle DNA at the single-vesicle level by nano-flow cytometry”的研究论文,该研究通过纳米流式细胞仪 (nFCM) 可以检测直径小至 40 nm 的单个 EV 和 SYTO 16 染色后 200 bp 的单个 DNA 片段,用于研究单个囊泡处的 EV-DNA。通过同时对单个颗粒进行侧向散射和荧光 (FL) 检测并结合酶处理,本研究表明:(1) 裸 DNA 或与非囊泡实体相关的 DNA 大量存在于由细胞培养物制备的 EV 样品中(超速离心培养基);(2) 单个 EVs 中 EV-DNA 的数量表现出很大的异质性,DNA 阳性 (DNA+) EVs 的数量在 30% 到 80% 之间变化,具体取决于细胞类型;(3) 外部 EV-DNA 主要定位在相对较小的 EVs 上(例如,HCT-15 细胞系100 nm),外部 DNA+ EVs 的分泌可以通过抑制外泌体分泌途径显著减少;(4) 内部 EV-DNA 主要封装在相对较大的 EV 的管腔内(例如 HCT-15 细胞系为 80-200 nm);(5) 双链 DNA (dsDNA) 是外部和内部 EV-DNA 的主要形式;(6) EVs 中未发现组蛋白 (H3),EV-DNA 与组蛋白不相关,(7) 基因毒性药物诱导 DNA+ EVs 的释放增加,外部DNA+ EVs和内部DNA+ EVs的数量以及单个EVs中的DNA含量均显着增加。这项研究为深入了解 DNA 与EV的关联提供了直接和确凿的实验证据。细胞外囊泡 (EVs) 是由几乎所有细胞类型分泌的纳米级膜囊泡,通过将蛋白质、核酸和脂质从供体细胞转移到受体细胞来介导细胞间通讯。最近的研究表明,EV中存在基因组 DNA、线粒体 DNA 甚至病毒 DNA。通过 DNA 的包装和水平转移,EV 在维持细胞稳态、调节免疫反应和调节肿瘤进展方面发挥着至关重要的作用。最近,基于 EV 中的 DNA (EV-DNA) 开发了用于肿瘤诊断的液体活检测试。尽管已经认识到 EV-DNA 的生物学意义,但对 EV-DNA 的探索较少,许多基本特征仍存在争议,例如 DNA 是否与所有或部分 EV 亚群相关?EV-DNA 是否位于内腔和/或 EV 表面?DNA含量和EV大小之间有什么关系?EV-DNA 是单链 DNA (ssDNA) 还是双链 DNA (dsDNA)?对 EV-DNA 的研究通常通过从 EV 分离物中提取 DNA,然后进行丰度、片段长度和序列评估来进行。通过将 DNase 酶消化与 Fragment Analyzer 系统相结合,研究了 DNA 的相对丰度和定位(管腔内或与 EV 表面相关)。为了阐明 EV-DNA 在 EV 亚群之间的异质性,对分离的 EV 进行 DNA 分析通过密度梯度离心或不对称流场-流分馏已经进行。尽管批量分析能够识别不同 EV 亚群中的 DNA,但结果可能存在争议,因为 EV-DNA 无法与无细胞 DNA 区分开来。由于 EV 的大小和货物含量差异很大,因此迫切需要单粒子技术来破译 EV-DNA 的巨大内在异质性,并将 EV-DNA 与游离 DNA 或其他污染物区分开来。然而,EV 的纳米级粒径(大多数大小100 nm)和 EV-DNA 的低含量使其成为一个巨大的挑战。细胞外囊泡 (Evs) 的分离和表征(图源自Journal of Extracellular Vesicles )在过去的十年中,研究人员一直致力于开发一种高灵敏度的纳米流式细胞仪(nFCM)。它已实现对单个 EV、病毒、二氧化硅纳米粒子和金纳米粒子的光散射检测,分别小至 40、27、24 和 7 nm。对于荧光 (FL) 检测,检测到单个 R-藻红蛋白分子的信噪比为 17,有机染料的检测限确定为三个 Alexa Fluor 532 分子。在本研究中,尝试通过将酶消化与 nFCM 相结合,在单囊泡水平上分析外部和内部 EV-DNA。研究了 DNA+ EV 的百分比以及 DNA 含量分布与 EV 大小、ssDNA 和 dsDNA 之间的区别、EV-DNA 和组蛋白的关联以及抗癌药物治疗后 DNA 含量的改变。通过同时对单个颗粒进行侧向散射和荧光 (FL) 检测并结合酶处理,本研究表明:(1) 裸 DNA 或与非囊泡实体相关的 DNA 大量存在于由细胞培养物制备的 EV 样品中(超速离心培养基); (2) 单个 EVs 中 EV-DNA 的数量表现出很大的异质性,DNA 阳性 (DNA+) EVs 的数量在 30% 到 80% 之间变化,具体取决于细胞类型; (3) 外部 EV-DNA 主要定位在相对较小的 EVs 上(例如,HCT-15 细胞系 100 nm),外部 DNA+ EVs 的分泌可以通过抑制外泌体分泌途径显著减少; (4) 内部 EV-DNA 主要封装在相对较大的 EV 的管腔内(例如 HCT-15 细胞系为 80-200 nm); (5) 双链 DNA (dsDNA) 是外部和内部 EV-DNA 的主要形式; (6) EVs 中未发现组蛋白 (H3),EV-DNA 与组蛋白不相关,(7) 基因毒性药物诱导 DNA+ EVs 的释放增加,外部DNA+ EVs和内部DNA+ EVs的数量以及单个EVs中的DNA含量均显着增加。这项研究为深入了解 DNA 与EV的关联提供了直接和确凿的实验证据。论文链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jev2.12206
  • 不可思议的显微世界:微笑细菌、心形细胞...
    p style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="1.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/36395aef-7d77-4424-9b4e-8dc3342e043d.jpg" width="500" height="281"/ /pp  从“微笑”的细菌,到凶猛的微小捕食者,显微摄影向我们展示了微观世界中许多令人匪夷所思的细节。a href="http://www.instrument.com.cn/zc/1139.html" target="_self" title=""透射电子显微镜/a拍摄的蓝细菌图像。科学家在意大利罗马的圣女多米蒂拉地下坟墓中采集了生物膜样品,图中的蓝细菌便是在这些样品中发现的。/pp style="text-align: center " img style="width: 500px height: 281px " title="2.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/1c6c0ac7-c979-4b0a-80e6-eae9c8f75af4.jpg" width="500" height="281"//pp  在这个肉眼看不到的细微世界中,存在着许多令人惊奇的现象。技术的进步使我们有了一睹为快的机会。一个血红细胞(又称为红血球)在毛细血管里组成了心形的爱情符号。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="3.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/716b8ca6-a555-4dbb-9f3e-f7efb9e83f7d.jpg" width="500" height="281"//pp  这组图片选自2015年科学成像大赛的获奖作品和一些入围决赛的作品。该比赛由英国皇家显微镜学会主办,每两年举行一次。采用彩色扫描电子显微镜(SEM)拍摄的捕食性螨虫。螨虫是无脊椎动物中最为多样和成功的类别之一。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="4.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/ed3bb8c8-a70a-409b-a12e-93509d864510.jpg" width="500" height="281"//pp  大赛评委说:“看到如此多的参选作品感觉很棒,不仅是显微镜的倍数范围跨度很广,而且作品也来自世界各地。能把这些图片选为今年的获奖作品,我们感到十分激动。”假彩色扫描电子显微镜拍摄的鳞壳虫。这种动物的外壳由自身分泌的硅质板和棘刺组成。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="5.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/812c6c48-25de-48a7-bdc3-dbbef9f7b835.jpg" width="500" height="281"//pp  本月,皇家显微镜学会在英国曼彻斯特举行了旗舰活动——微观科学显微镜大会。2015年科学成像大赛的获奖作品也在这次大会上正式公布。这是一只被偏振光照亮的活体幽蚊幼虫。该图片是由54张图片通过电脑软件“缝接”而成的。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="6.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/3ca48d50-42bb-4a07-b694-61db1b13acd2.jpg" width="500" height="281"//pp  色彩加强的扫描电子显微镜图像,拍摄的是连翘属植物的花粉。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="7.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/df241fba-c619-468a-9206-08262887f007.jpg" width="500" height="281"//pp  碳酸钙具有许多晶体形式。在显微镜下,球霰石的多层六边形板状结构组成了玫瑰花的形状。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="8.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/ba895057-3add-4ae8-acb9-c0ba9b0ac29f.jpg" width="500" height="281"//pp  采用扫描探针显微镜拍摄的胶原质细纤维图像,这些胶原质采集自人类皮肤。/pp style="text-align: center " img style="width: 500px height: 281px " title="9.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/c3eba239-bfcc-4dbc-af16-5c604c2d0780.jpg" width="500" height="281"//pp  利用改进的莱因伯格照明法拍摄的柄翅卵蜂图像。在光学显微镜技术中,莱因伯格照明法常被用来进行光学着色。/pp style="text-align: center " img style="width: 500px height: 281px " title="10.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/6b1efdd2-4197-458f-8bab-b290f2b8e72d.jpg" width="500" height="281"//pp  这张图片很好地展现了家幽灵蛛(Pholcus phalangioides)的形态细节,可以清晰地看到类似骷髅的头部。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="11.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/faa647ae-e211-48c7-bfad-457376e28a4e.jpg" width="500" height="281"//pp  一堆已经孵化的盾蝽卵,看起来就像是游戏“愤怒的小鸟”里面的角色。图片采用假彩色扫描电子显微镜拍摄。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="12.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/31ed6b4c-90d6-45fc-a43e-63372b8e0e66.jpg" width="500" height="281"//pp  碳酸钙晶体的电子显微镜图像,显示了其内部块状连接的形成。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="W020150723522521647321.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/04c93376-dd29-4dbd-97ff-6734c36057ac.jpg" width="500" height="281"//pp  扫描电子显微镜下的花药,即花的雄蕊上装着花粉的部分。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="14.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/6e157e18-8498-4bcd-9b7e-99995535d8ae.jpg" width="500" height="281"//pp  你有没有想过为什么猫的舌头那么粗糙?这张图片会告诉你原因,注意舌头的肌肉组织和一根向后的倒刺。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="W020150723522523227595.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/a993ff6d-779c-4735-8812-b691086f215a.jpg" width="500" height="281"//pp  一张不可思议的轮虫图片,由6张焦点不同的图片利用计算机软件叠加而成。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="16.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/14f084bd-7bbd-4415-a510-476a84b36a0d.jpg" width="500" height="281"//pp  单个硫化银晶体的显微图像,接近完美。/pp style="text-align: center " img style="width: 500px height: 281px " title="17.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/28aa7dee-ffe1-4ee9-9b4d-903ff5bce740.jpg" width="500" height="281"//pp  海洋细菌Simiduia agarivorans SA1T似乎想要与台湾的科学家进行交流。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="18.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/0d5d19a3-be21-4180-aedc-632d380c3ee9.jpg" width="500" height="281"//pp  钙板金藻又称为颗石藻,是一种单细胞的海洋植物,大量分布在海洋表层。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="19.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/5fc05a0b-cca2-422a-8b40-a772c1a48e3c.jpg" width="500" height="281"//pp  一种著名的意大利酒精饮料液滴在结晶过程中,形成了蔗糖的辐射状晶体。/pp style="text-align: center "img style="width: 500px height: 281px " title="20.jpg" border="0" hspace="0" vspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201507/uepic/301d2253-72cb-482d-8a02-2c00cf8307ac.jpg" width="500" height="281"//pp  这张果蝇头部的显微图像源自一张已经有30年历史的病理切片。/pp/pp/pp/pp/pp/pp/p
  • Nature | 菌群代谢物激活自然杀伤性T细胞的机制
    机体与共生微生物相互作用,共同进化,在机体的免疫系统发育和稳态维持发挥关键作用。微生物代谢物多样性水平很高,宿主已经进化出复杂的机制来区分病原体和共生体衍生而来的分子。但是在一个物种中,微生物代谢物仍然会存在结构变异。以结构为基础探究化学异构体的生物学作用极具挑战性。在人肠道微生物中,脆弱拟杆菌经常用于研究共生菌衍生物活性的分子机制。目前已经鉴定出α-半乳糖神经酰胺(α-Galactosylceramide BfaGCs)是由脆弱拟杆菌产生的可用做免疫调节分子的衍生物。新生小鼠脆弱拟杆菌单菌定植或者新生小鼠口服BfaGCs可以调节肠道NKT细胞数量。而给与小鼠BfaGCs突变的脆弱拟杆菌,小鼠的表现类似于无菌小鼠。也有报道发现鞘氨醇单胞菌可以调控肠道NKT(natural killer T)细胞功能。但是菌群衍生物在调控宿主免疫系统中的分子机制尚不清楚。2021年11月10日,来自哈佛大学的Dennis L. Kasper 团队在Nature 上发表题为Host immunomodulatory lipids created by symbionts from dietary amino acids 的文章。本研究从结构水平上证实BfaGCs可以直接作用于NKT细胞,与CD1d和TCR结合激活NKT。作者首先利用LC-MS/MS技术分析脆弱拟杆菌鞘脂发现BfaGCs是同源酰基链的混合物。其中C34丰度最高。鉴于共生菌来源鞘脂的结构多样性,作者系统构建了16个BfaGCs类似物,7个异构体。支链BfaGCs在真核生物中相对少见,原核生物中更常见。于是作者评估了支链氨基酸对于BfaGCs生物合成的影响。分析后发现支链氨基酸可以直接渗入脂质决定BfaGCs的结构,而不含氨基酸时BfaGCs倾向于单支和非支化结构。进一步研究发现宿主饮食中补充或者去除支链氨基酸直接影响单支和分支型鞘脂的比例。这些结果在分子水平证实了宿主膳食对于肠道菌群衍生物合成的影响。接下来作者开始通过靶向脆弱杆菌支链氨基酸代谢途径来探究支链BfaGCs对于肠道NKT的调控作用。支链氨基酸转氨酶BCAT将支链氨基酸脱氨基为a-酮羧酸,进一步再转化为支链脂肪酸。作者构建了目标基因敲除菌株(BF9343-Δ3671)。对比发现野生菌株与敲除菌株在小鼠肠道定植水平相当,敲除菌株产生不含分支的BfaGCs水平更高。分析结果显示敲除菌株定植的小鼠成年后结肠NKT细胞数量较高。作者又利用BMDC(小鼠骨髓来源树突状细胞)和NKT共培养体系评估21种合成BfaGCs对NKT的作用。检测IL2的产生水平,作者把21中合成物分成了两组:强刺激物和弱刺激物。10个属于强刺激物都是分支结构,11个弱刺激物没有这些结构。作者又直接挑选了支链和不含支链的代表合成分子SB2222和SB2223,浓度梯度实验发现支链长度与刺激强度无关。作者用脆弱拟杆菌主要合成的SB2217 和SB2219进行体内实验。对比与KRN7000诱导的IFNr产生和CD1d配体OCH诱导的IL4,含支链的SB2217则只能较弱的产生IFNr和IL4,不含支链的SB2219则几乎不能产生IFNr和IL4。预防性给与小鼠SB2217可以保护小鼠免受炎症,减少小鼠体重减轻和组织损伤。为了细致分析SB2217的体内效应,作者分析了SB2217处理后脾脏NKT细胞的转录组特征。分析发现SB2217可以促进NKT相关细胞因子表达以及免疫信号的激活。这表明SB2217是CD1d的功能性配体和NKT细胞的激动剂。最后作者分析了BfaGC和CD1d、TCR相互作用的晶体结构,从结构水平上证明了BfaGC是由CD1d呈递的配体,并被NKT细胞受体以保守方式识别。亲和力比较支链BfaGC SB2217大于非支链 SB2219。本研究证实BfaGCs的分支结构是激活NKT细胞的关键决定因素,从而诱导特定的免疫调节基因表达特征,并从结构水平和亲和力分析证实了BfaGCs与CD1d和TCR相互作用方式。本文为菌群、饮食以及免疫系统相互作用提供了分子机制范式。原文链接:https://doi.org/10.1038/s41586-021-04083-0
  • 商机抢单宝&账号分级,两大营销管理工具强势上线!
    2021年是掌上仪信通迅速成长的一年,做为科学仪器厂商们的智能高效移动工作台,掌上仪信通在基础功能上又陆续新增了:商机订阅、行业洞察、服务商城等功能模块,会员厂商可自主订阅所需商机,实时提醒;获取行业重要资讯、仪器内参;了解更多线上营销推广服务… … 现在众多厂商期待的两大功能:“商机抢单宝”和“账号分级”已正式上线!仪信通付费会员将掌上仪信通App更新到新版本2.1.2,登录并绑定公司会员展位,即可体验!(App绑定公司展位的方法可点击此处获取)商机抢单宝仪器厂商:想获得更多的用户询盘吗?想成功抢购更多商机吗?采购用户:还担心没有厂商及时对接并反馈您的采购需求吗?“商机抢单宝”为仪器厂商和采购用户双向解忧,实现买卖双方的高效对接!开通“商机抢单宝”后可享双重权益:1、高速抢单:自动抢购指定品类商机,抢购的商机实时通知提醒,不再遗漏重要商机。抢单名额有限,先到先得!(如需了解抢单名额剩余情况,可联系掌上仪信通App小助手微信进行咨询:zsyxtapp)2、额外查看权:可额外查看被查看次数已达标准上限的商机,不怕错过重要商机。商机抢单宝的注意事项、开通方法以及操作手册,详见掌上仪信通App—工作台—点击专属客服—常见问题—商机抢单宝开通须知中进行查看获取。账号分级想给不同部门、不同职位的员工分配不同权限?想实现多账号分级管理?账号分级功能帮您实现!PC端会员后台配置角色权限—管理员向员工发送邀请链接—员工接收邀请并登录掌上仪信通App,即可使用已配置好的权限功能。具体操作说明详见PC会员后台—右侧帮助中心—账号分级功能操作说明。近期还将开展掌上仪信通App装机活动,价值近百万礼品等你拿,详情请关注后续活动通知。如需帮助可添加掌上仪信通App小助手微信:zsyxtapp 或者拨打电话:4008010231进行咨询。手机下载掌上仪信通App体验最新功能:
  • 三全水饺被曝细菌超标
    上海家乐福超市紧急下架问题批次产品  “思念”未了 三全“水饺”也被曝细菌超标  “思念”水饺被检出金黄色葡萄球菌事件余波未了,三全水饺却也跟着传来“不安全”的信息。日前,三全水饺被广州市工商局查出细菌超标,有意思的是这种细菌和“思念”如出一辙,也是金黄色葡萄球菌。虽然三全方面表示已经追溯召回问题产品,但部分超市采购人员表示并没接到企业通知。上海家乐福表示第一时间已要求对问题批次产品撤柜。  不久前,北京市工商局在对思念牌一批次水饺的抽检中,检测出了金黄色葡萄球菌 而根据现行的国家标准规定,速冻水饺“不得检出”该菌种。这批水饺也立即被下架召回。思念方面在接受记者采访时则表示,查出细菌的原因主要是天气较热,在物流环节出了问题导致这一批次产品不合格,并对此表示道歉,上海方面家乐福等超市第一时间对问题批次产品予以下架。  想不到,该事件余波未了,三全水饺日前也被广州市工商局查出含有金黄色葡萄球菌,这两款问题产品分别是“三全灌汤水饺(猪肉玉米蔬菜)”、“三全灌汤水饺(三鲜)”。同时,被查出细菌超标的还有“海霸王经典包心鱼丸”。消息一出,三全食品方面回应称,问题产品系今年8月工商局一次例行超市抽检的样品,三全食品获悉抽检结果的当天就将该批次产品全部下架、封存,随即启动产品回溯机制,并将同批次全部产品统一追回并销毁。对方在表达歉意的同时,也强调公司自从8月开始就进一步加强了质量管控力度,尤其在原料采购、制作工序等重要环节大幅增加抽检频次和抽样数量。  虽然三全方面表示已经及时追溯召回这些问题产品,但沪上部分超市采购人员表示并未接到相关的通知。前次对思念问题水饺第一时间采取下架措施的上海家乐福昨天告诉记者,三全的相关召回通知是否送达收悉还需进一步确认。不过,根据此次监测结果,家乐福方面已于第一时间发布全国撤架通知,要求所有相关门店将涉及品牌的问题批次下架,包括三全,海霸王等产品。  这么多知名品牌连续被曝所生产的食品含有金黄色葡萄球菌,无疑让消费者担心不已。对此,有关专家指出,无需对“金黄色葡萄球菌”过度恐慌,只要在70℃以上温度的水里煮熟,即可将其杀死,所以对于生制的速冻食品,买回后应按照包装上的说明进行保存和蒸煮,因此市民不必过度担心。
  • 宝莱脱脂奶细菌超标近千倍 在香港被叫停销售
    中国经济网北京5月24日讯 香港食物安全中心(Centre for Food Safety)周五发表声明说,来自澳大利亚乳制品生产商宝莱(Pura)的一个批次的脱脂牛奶被检测出细菌含量超标,几乎达到规定数量的1000倍。声明中说,这个批次的脱脂牛奶已经在香港的几个连锁超市中出售。  宝莱是一个广受香港民众欢迎的乳制品品牌,因其奶源主要来自澳大利亚信誉度一直很好。进口宝莱的商家Nowaday International Development Ltd。表示,已经停售问题产品并开始召回,但没有透露有关问题牛奶总数量等细节。  香港的两个最大连锁超市百佳(ParknShop)和惠康(Wellcome)说,已于本周早些时候接到Nowaday International的通知,停售问题牛奶,但没有具体提及已售数量。  香港食物安全中心建议民众不要饮用保质期截止到5月26日的一升装宝莱脱脂牛奶。目前尚不清楚该批次脱脂牛奶是否有在内地销售。  香港食物安全中心发言人在声明中说:总含菌量超出法例标准,显示产品的卫生情况欠理想,但并不表示饮用后会引致食物中毒的情况。声明中说,已通知澳洲当局,会监察受影响产品的召回情况,采取适当跟进行动。
  • MALDImini-1迷你数字离子阱质谱仪快速鉴定芽孢杆菌
    近年来,使用MALDI-TOF飞行时间质谱进行微生物鉴定的方法已经普及,并广泛用于临床微生物鉴定、食品和药品工业领域质量控制以及微生物研究领域。然而这种常规方法,也有个别菌种鉴定起来有局限性,例如鉴定混合菌或孢子形成的细菌。我们尝试换种方法来进行微生物的鉴定。通过MS/MS检测胰蛋白酶消化的细菌蛋白和数据库检索的肽段来鉴定蛋白,锁定菌种种类,且可以从多个峰中选择特定的峰,用于蛋白混合物鉴定。我们使用胰蛋白酶珠进行蛋白质的快速酶解,使用岛津MALDImini-1数字离子阱MS/MS功能来鉴定芽孢杆菌。 MALDImini-1基质辅助激光解吸电离数字离子阱质谱仪。数字离子阱(DIT)技术是岛津独有的原创技术,紧凑迷你的体积,仅占用A3纸大小面积,即可实现MS多级的检测。数字离子阱是由数字信号驱动的四极离子阱,使用矩形波RF捕获离子,更容易调谐频率,无需使用高压即可捕获高质量离子。质量范围上限可达70000m/z,可拓展更广泛的应用。 将已形成芽孢的枯草芽孢杆菌取样,按上图工作流程制备样品。胰蛋白酶珠2ul,在湿润环境和37℃温度下,30分钟,对芽孢蛋白进行酶解。通过使用胰蛋白酶珠可缩短通常需要数小时以上的酶解时间。酶解完成后,添加基质溶液1ul,干燥后MALDImini-1即可开始MS,MS/MS检测。 MS/MS离子数据库检索结果 通过MALDImini-1的MS/MS功能与能够快速酶切的胰蛋白酶珠消化芽孢蛋白质方法组合,特异性多肽序列可以对芽孢杆菌进行快速鉴定。也有报道对食物中毒菌蜡状芽孢杆菌和高传染性炭疽芽孢杆菌进行了相同的研究。 新闻稿内容来源:岛津应用新闻NO.B112 应用文献下载
  • 低价孜然被曝掺疑似鸡饲料 或含致病细菌(图)
    低价孜然被曝掺疑似“鸡饲料”  近日,有读者向本报报料,称在顺义区顺鑫石门农产品批发市场,有商铺出售疑被染色的孜然。记者调查发现,该店还出售另一种被掺入其他物质的孜然,比正常市场价格便宜一半。业内人士称,该种孜然里可能被掺入了俗称“料子”的人工合成物,其成分与鸡饲料极为接近。   疑被染色的孜然(左)  正常孜然(右)     顺鑫石门农产品批发市场一商铺内,执法人员正在包装疑似被染色的孜然,准备送检。  27日下午,北京顺义区工商局对该店出售的孜然进行查封,并将样品送往相关部门检验。  商户  加该种孜然的肉串牙碜  经营烤羊肉串生意的刘先生回忆,6月21日,他以每斤15元的价格,在顺鑫石门农产品批发市场的一店铺购买了6斤孜然。但回到店里,发现烤出来的羊肉串味道不对。  “我烤了三年羊肉串,味道不对能吃出来。”刘先生说,他发觉烤出来的羊肉串“吃了牙碜”。  刘先生表示,他觉得可能是新买的孜然出了问题,便决定用水洗一下。“一洗就出事了。”刘先生称,洗过孜然的水变成了浑浊的绿色,并出现白色的粉末状沉淀物。为此,他怀疑这种孜然经过了染色和加工。  业内人士  添加成分接近鸡饲料  随后,记者来到这家店铺,发现除了刘先生所买的那种15元一斤的孜然外,该店还出售另一种孜然,每斤只需7.5元,购买需提前预约。用肉眼仔细看这种孜然,可见里面掺有其他物质。该物质呈圆柱状,两头不像普通孜然那样尖,大小与正常孜然相仿,颜色略深。  多名业内人士表示,正规的孜然不会出现泡水变绿和白色沉淀物现象。至于另一种孜然,可能是被掺入了人工合成物。这种合成物业内俗称“料子”,由玉米、麸皮、豆粕等合成,其成分与鸡饲料极为接近。  工商  泡水出现绿色肯定异常  27日下午,接到记者举报后,顺义区工商局食品科负责人与当地仁和工商所执法人员一起,对该店铺进行了现场检查,对店内孜然全部封存,并将样品送往相关部门检验。  现场一位执法负责人表示,目前还不能确定是什么物质导致水变绿,“但孜然泡到水里,出现这种绿色肯定是异常的,具体要等有关部门的检测结果,而另一种劣质孜然,里面的掺杂物肉眼可辨,明显涉嫌掺假。”  劣质、正常孜然浸泡对比  A 疑被染色的孜然  大部分沉在水底,水变成浑浊的绿色,已不透明,刚才略带绿色的孜然完全变成了枯黄色。  B 正常孜然  大部分漂在水面上。水只是变成淡黄色,仍然透明。  ■ 记者调查  6月23日,记者来到顺义区“顺鑫石门农产品批发市场”进行调查。  一进市场内的调料大厅,便能看到过道两侧集中着数十家卖调料的商铺,每一家均有孜然出售,售价均为2元一两,买一斤15元。  【劣质孜然一】 浸泡1小时 瓶底现沉淀  在刘先生举报的该家商铺内,孜然颗粒同样是2元一两,但与市场其他店铺的孜然相比,该店的孜然颜色更绿,棱角不分明,用手指搓一下,明显感觉到有粉末粘手。  记者将在该店购买的孜然(下称A),与其他店内销售的孜然(下称B)进行浸泡对比实验。  取出相同分量的孜然,泡入同样大小的清水瓶中,此时,A大部分沉在了水底,B则大部分漂在水面上。略加搅拌,十秒钟后,浸泡了A的水变成了浑浊的绿色,已不透明,刚才略带绿色的孜然完全变成了枯黄色 而浸泡了B的水只是变成了淡黄色,仍然透明。  静置约1小时后,A的水依旧是绿色,并且底部出现一层乳白色的粉末状沉淀物。  【劣质孜然二】 掺入小颗粒 手捏成粉末  在调查中,该店老板史女士提到,店内还销售一种价格更低的孜然,“里面掺了东西,只要7块5一斤,但放在库里,需要提前一天订货,这种货不敢摆到店里面卖。”  前天,记者联系该店,要求购买5斤“便宜孜然”,店老板表示可以第二天来店内取货。  昨日,记者再次来到该店,老板从店门口堆放的调料角落里拎出来一个塑料袋,“已经称好了,7块5一斤,5斤算你37块钱。”  打开塑料袋,记者发现,这种孜然中掺入了一种肉眼可辨的圆柱状细小颗粒物,大小和颜色均与孜然相似,闻起来也有一种略淡的孜然香气,但用手一捏便成为粉末。放入嘴中咀嚼,没有任何味道。  “我们也不知道掺入的是什么东西,单独卖估计不好卖,你可以把这些东西掺杂在好孜然里面卖就行了。”店老板说,她保证这种东西对人没有危害。  市场内多家店铺经营者表示,的确可以进到价格便宜的劣质孜然,“但现在查得太紧,不敢卖。”  【发帖售假者】 “料子”由玉米麸皮制成  在百度贴吧的“孜然吧”里,有多人专门发帖贩卖造假孜然,并称自己是“专业掺孜然的”。记者谎称要买掺假孜然,根据帖子上留下的电话联系到其中一人。  电话中,该人自称姓王,山东人。王先生说,他们当地管掺入孜然的东西叫“料子”,成分由玉米、麸皮、面团等物制成,做成孜然大小的圆柱形,并染成孜然的颜色。“其实就跟鸡饲料原料差不多,人吃不出味儿来,但是也没有害处。”  “料子一块五一斤,多买可以优惠到一块钱,你买了回去自己掺,掺多掺少自己定。”王先生说。  他同时表示,曾听说有地方对孜然进行二次加工,使劣质孜然看起来品质更好,但他觉得“比较麻烦,懒得学”。  ■ 业内说法  正常孜然收购最低一斤11元  孜然,一种调味品,在我国的主要产地为新疆和甘肃部分地区。  在新疆喀什地区种植了21年孜然的依拉木介绍,孜然的品质分为三种,顶级的孜然为淡绿色,气味浓郁 品质稍次一些的略黄,颗粒较小 而品质最一般的就是普通的土黄色,味道不正,价格也相对便宜,这种孜然在甘肃种得比较多。  “但无论哪一种孜然,泡到水里水都不会变绿,更不会有白色的沉淀物。”依拉木表示,每年7月孜然成熟时,会有人上门收购,“我们卖给这些收购者的孜然都是100%的纯孜然。”  甘肃省民勤县的奥鑫商贸有限公司专门从事孜然的采购与销售工作。该公司聂经理说,由于今年国内孜然种植者减少,导致价格大幅上涨。“现在,新疆孜然收购价约27元一公斤,甘肃孜然收购价约22元一公斤。”  “泡水之后水变绿的孜然,肯定被二次加工过,染点绿色是为了以次充好,掺入白色粉末和人工合成物都是为了增加重量。”聂经理说。  ■ 专家说法  “人工孜然”或含致病细菌  中国农业大学食品学院营养与食品安全系副教授范志红表示,孜然泡水水变成绿色,并且水还不褪色,的确不正常,但具体是什么成分还需要经过相关部门的检测。  范教授同时表示,对于由玉米、麸皮、面团等物制成的“人工孜然”,仅从成分上看,人吃了肯定没有害处。  “但这种类似鸡饲料的东西,在制作中是否经过消毒以及含有多少细菌便不知道了。鸡的肠胃跟人不同,许多细菌鸡吃了没事,但能够使人致病,所以这种东西还是能不吃就别吃。”范教授说。  【采购孜然小贴士】  看 有无明显掺杂,颜色、大小是否一致。  闻 味道是否香醇。  搓 手上是否有粉末残留。  泡 搅拌后,观察水的颜色和浑浊程度。
  • 单细胞ICP-MS应用:测定单个细菌细胞的铁含量
    细菌是一种单细胞生物体,个体非常小,目前已知最小的细菌只有0.2微米长,因此大多只能在显微镜下被看到。细菌广泛分布于土壤和水中,或者与其他生物共生。人体身上也带有相当多的细菌。据估计,人体内及表皮上的细菌细胞总数约是人体细胞总数的十倍。铁是细菌细胞内部进行各种生物过程所必须的金属辅助因子。通常,铁作为一种可抑制细菌生长的营养元素,细胞中的总铁含量限额取决于细胞的生长状态和代谢需要。细菌的生长和繁殖必须有铁的供给才能得以进行。但细胞内多余的可溶性铁是有毒的。在确定细胞生长条件和应激反应的影响时,实时地测定细菌细胞中的铁含量可提供关于细菌中铁耐受限值的信息。监测单个细胞内的铁含量还可了解细胞中铁的分布情况,从而确定细胞群的同质性。在本次实验中,我们利用单细胞电感耦合等离子体质谱 SC-ICP-MS法分别测定了三种菌株的单个细胞的铁含量。这三个菌株分别是大肠杆菌B株(Eco)、枯草芽孢杆菌168株(BAC) 和红球菌RHA1株(RHA)。样品大肠杆菌B株(Eco),枯草芽孢杆菌168株(BAC) 和红球菌RHA1株(RHA),其菌株的细胞尺寸分别约为2μm、4μm和10μm±2。经过培养后,被等分成1mL样本,并储存在50%的甘油中于-20℃保存。SC-ICP-MS分析的细菌细胞样品实验将细菌细胞样品放入35℃水浴中解冻1min,然后将样品置于冰袋,使用1%磷酸盐缓冲液(PBS) 将样品稀释至含有100,000个细胞/mL的样品稀释液后立即上机SC-ICP-MS分析。NexION 2000 ICP-MS及实验条件通过采用纯氨气通入反应池的模式(反应模式),消除ArO+对56Fe+的干扰。实验结果细胞浓度为50,000个细胞/mL时,大肠杆菌B株、枯草芽孢杆菌168株和红球菌RHA1株的56Fe的信号扫描图。横坐标单位为ag,表明了单个细胞中铁含量的分布情况。其中大肠杆菌B株的单个细胞平均铁含量最低,而红球菌RHA1株的单个细胞平均铁含量最高。为测试细胞重叠现象,将细菌细胞经系列稀释后进行测定。上图表明,将细菌细胞稀释至100,000、75,000和50,000个细胞/mL浓度时,单个细胞的铁平均含量并没有发生变化,反而每次稀释后,细胞数量呈线性变化,结果表明,细胞浓度对细胞重叠无显著影响。结论单细胞ICP-MS法可以准确定量单个细菌细胞中的铁含量,可以提供细菌培养物中的单个细胞内铁分布信息。所建立的分析方法可以为严格控制细菌细胞的总铁含量提供支持。单细胞ICP-MS法还可用于在不同应激条件下生长的细菌细胞中铁含量分布的测定。了解更多应用资料,扫描下方二维码,下载利用SC-ICP-MS法测定单个细菌细胞中的铁含量相关资料。
  • "乐怡"纯净水被爆菌落超900倍
    中秋、国庆即将来临,省质监局昨天通报了节日食品、宾馆饭店旅游用品及学生用品质量抽检情况。其中,74家企业因产品抽检质量不合格被曝光,南京企业有8家。而在被曝光的74家企业中,又有71家是食品企业。目前相关企业均已被责令停止生产、销售,并限期整改。    月饼合格率99.7%创新高    【数据】抽查月饼356批次,合格率99.7%,较去年上升0.8个百分点。抽查月饼馅料37批次,合格率97.3%。    【分析】省质监局已连续13年开展月饼质量抽检,产品质量水平从82%上升到了今年的99.7%,合格率创新高,表明我省加强食品监管的各项措施成效显著。月饼存在的主要问题是,有1种产品过量使用防腐剂,即常州金喜鹊食品有限公司生产的金喜鹊牌五仁月饼。月饼馅料抽检发现的问题是,吴江市震泽广盛食品生产的腾胜牌纯豆沙,菌落总数超标173倍。    44种纯净水菌落总数超标    【数据】抽查纯净水694批次,合格率仅92.4%。    【分析】纯净水是此次所有被抽检食品中合格率最低的。其中,有44种纯净水的菌落总数超标、2种产品的霉菌和酵母含量超标。比如,昆山市玉山镇乐怡饮用水厂生产的乐怡饮用纯净水、连云港市竹林饮用水有限公司生产的桶装饮用纯净水,菌落总数分别超标900倍、295倍。另外还有11种纯净水的电导率(衡量水纯净度的指标)超标。    南京“雅荷”长爪防腐剂超标5.6倍    【数据】抽查肉制品263批次,合格率98.5%。    【分析】肉制品存在的主要问题有:南京凯远食品有限公司生产的雅荷牌野山椒长爪产品,菌落总数、山梨酸及其钾盐(防腐剂)含量分别达到标准规定的3.8、5.6倍。苏州市诚鼎食品有限公司生产的咸猪手,亚硝酸盐含量达到标准规定的2倍。    南京“诚品”蛋糕大肠菌群超标8倍    【数据】抽查糕点307批次,合格率99.3%,较去年上升1个百分点。    【分析】糕点存在的主要问题有:南京诚品食品有限公司生产的原味麻薯蛋糕,大肠菌群含量超标8倍 扬州市宝利来食品有限公司生产的桃酥铝含量达到标准规定的1.8倍。    此外,葡萄酒及果酒、饮料、代用茶、乳制品、食用油脂制品、冷冻饮品、啤酒等7类食品的合格率均为100%。白酒、茶叶、蜂产品、食用植物油等8类食品的合格率均超过95%。
  • DQ等品牌冰淇淋被曝“大肠菌群超10倍”
    夏令时节是各类冷饮产品的销售旺季,上海市消保委近期对上海流通领域的冰淇淋进行了比较试验。检测显示,22件样品中,有10件不符合标准。其中,冰雪皇后(DQ)、酷圣石、多乐星等多个知名品牌因大肠菌群超标等原因上了“黑榜”。  据专家分析,大肠菌群超标的主要原因是二次污染。如加工器具没有定期清洗消毒,操作人员在上完卫生间后洗手不彻底,个人卫生状况未达标,直接影响最终产品的卫生状况。  不合格率近五成  据了解,此次受检的冰淇淋分为两大类:普通冰淇淋和软冰淇淋。普通冰淇淋是经过相关工艺制成的体积膨胀的冷冻食品。一般是由工厂生产的工业化预包装产品,直接销售给顾客或者在售卖现场重新分装销售给顾客的产品。软冰淇淋是指在制作售卖现场,用冰淇淋浆料或冰淇淋粉加水调和后,经凝冻成半流态状,无需硬化,体积膨胀,有一定堆起性的产品。  本次受检的22件样品从本市22家各类零售点中随机购买,其中普通冰淇淋9件、软冰淇淋13件。检测显示,22件样品中,有10件样品不符合标准,不符合率为45.5%。其中,普通冰淇淋9件中有4件样品不符合标准,不符合率为44.4% 软冰淇淋类13件中有6件不符合标准,不符合率为46.2% 不符合指标主要为菌落总数与大肠菌群。  酷圣石菌落总数超标  菌落总数是食品中常见的卫生指标,本次比较试验中有2件样品超标,占受检样品的9.1%,分别为上海酷圣石冰淇淋有限公司太平洋 [5.40-2.88%股吧研报]店销售的“酷圣石(COLD STONE)”原味冰淇淋,实测值:32000CFU/ml(国家标准要求≤25000CFU/ml) 上海松庆餐饮管理有限公司静安店的“巴斯罗缤 (Baskin Robbins)”冻奶酪冰淇淋,实测值:51000CFU/ml(国家标准要求≤25000CFU/ml)。  据专家分析,菌落总数超标有以下几点原因:一是冷链环节。部分食品原料富含营养物质(例如乳制品),特别容易造成微生物的生长,尽管冰淇淋的制作与销售都在较低的温度下完成,但由于制售过程中涉及较多冷链环节,如工作人员操作不到位,容易使得最终产品中含有较大数量的细菌。二是环境的影响。许多现制现售冰淇淋零售店都设立在商场内,且柜台都是敞开式的,使得环境中的细菌能够轻易进入到产品中。  部分企业食安意识淡薄  在本次试验结果中,大肠菌群超标现象尤为突出,共有8件产品该项指标不符合标准,占受检样品的36.4%。  上海麦科餐饮管理有限公司丰和路店销售的“多乐星(DOUNT KING)”香草圣代冰淇淋,实测值≥24000MPN/100g(行业标准要求1000MPN/100g) 上海明古连食品贸易有限公司销售的“安徒生[Andersen’s(OF DENMARK) Ice Cream]”原味香草冰淇淋,实测值4600MPN/100ml(国家标准要求≤450MPN/100ml) 上海适达餐饮管理有限公司徐家汇 [9.02-0.88%股吧研报]路店销售的“冰雪皇后(DQ)”暴风雪白杯,实测值4600MPN/100ml)(国家标准要求≤450MPN /100ml) 统一多拿滋(上海)食品有限公司美罗城店销售的“美仕多(MisterDonut)”香草冰淇淋,实测值2400MPN/100g(国家标准要求1000MPN/100g)。 在本次比较试验中,发现部分企业食品安全意识淡薄,这也是造成本次卫生指标严重超标的原因之一。这些企业仅对冰淇淋的浆料进行管控,而最终产品的卫生质量没有加以控制。因此,市消保委建议相关部门和行业组织应加强对企业的监管培训力度,督促企业建立和实施严格的食品安全管理制度。
  • 曝知名鸭脖细菌超标 数据爆表仪器无法显示
    继9月8日央视曝光北京的绝味、久久丫鸭脖大肠杆菌超标之后,华西都市报也爆料称,&ldquo 吃鸭脖等于吃细菌&rdquo ,绝味鸭脖大肠杆菌数量没有人知道,因为数据爆表,检测仪器无法显示,而久久丫鸭脖大肠杆菌数量超标160倍。  华西都市报报道原文:  吃鸭脖等于吃细菌  @华西都市报:  央视财经透露,很多人爱吃绝味鸭脖或者久久丫的产品,可是,它们卖的已经不是食物了,而是细菌。绝味鸭脖大肠杆菌数量没有人知道,因为数据爆表,检测仪器无法显示,而久久丫鸭脖大肠杆菌数量超标160倍!吃它们等于吃细菌!你还敢吃吗?  网友回应:  @兰-小影:我最爱的绝味啊!现在不敢再去吃了  @自由與公正:连锁店都这样了,那流动摊贩卖的卤味还能吃吗?  @梦魇如画:我们早已练就金刚不坏之身,这点细菌算个啥  @杨光给你正能量:亏我这么爱它们!不过,买的时候就想不到了,吃货的嘴挡不住!
  • 实验室达人的秘密武器|高压均质机与单细胞悬液制备仪实用指南
    实验室中的科研人就如同探索未知的勇士,他们借助着各种精密仪器,探寻着各种神奇奥秘。当我们在追求科研的精准与效率时,两款设备不容忽视—那就是高压均质机和单细胞悬液制备仪。它们如同实验室中的得力助手,以其独特的功能为实验工作提供了极大的便利性,同时也解决了部分操作时的难题。想要获取更多的研究思路和手段吗?那就让我们一起走近这两款设备,感受它们为科研带来的无限可能。一、高压均质机:高压均质机这一看似普通的设备,实则蕴含着巨大的能量。利用高压和剪切力,将物料进行均质化处理,使得原本不均匀的混合物变得细腻均匀。在食品、化工、医药等领域,高压均质机都发挥着不可替代的作用。在实验室中,科研人员可以利用高压均质机对样品进行预处理,提高实验的准确性和可靠性。 高压均质机 JXNANO-5高压均质机应用领域:制药行业中制备脂肪粒、载药型乳液均质、脂质体、纳米混悬剂和微胶囊等 生物工程产品的细胞破碎、胞内外物质的提取和均质 精细化工、碳纳米管、石墨烯、导电浆料、电阻浆料的生产和制备 个人护理品-脂质纳米的均质分散 食品和工业产品的均质和乳化,提高产品稳定性 高压均质机产品优势:①结构特点:单支陶瓷柱塞驱动,出料流量精准控制。可选配柱塞润滑装置,密封使用寿命更长。②均质压力:最大设计压力2000bar/200MPa/29000psi,选用卫生级数字隔膜压力表。③均质流量:最小样品量15ml,特别适合昂贵的药剂生产。自动吸料,无需进料设备。④部件技术:均质阀座组件可采用氧化锆、钨钢、金刚石、司太立等材质,单/双面加工,双面使用,使用寿命加倍。二级阀分散乳化,使物料分布更加均匀一致。⑤节能技术:设备变频控制,接入220V市电即可使用,进口品牌部件设备更稳定,更低的能耗,更高的能效比。二、单细胞悬液制备仪:单细胞悬液制备仪是实验室中另一款不可或缺的设备。应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验。另外单细胞悬液制备仪在肿瘤研究 心血管研究 干细胞研究 免疫研究 神经科学研究等研究领域的应用也很广泛,主要目的时为科研人员提供了更多实验便利。单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK样品范围:人类及小鼠肿瘤组织/正常组织,哺乳动物软组织,植物愈伤及根尖组织。产品应用:单细胞测序(Single-Cell RNASeq)多色流式分析(Multicolor Flow Cytometry)质谱流式细胞计数(Mass Cytometry)原代细胞分离培养(Primary Cell Isolation And Culture)细胞治疗CAR-T组织高利用率、单细胞化过程高效、单细胞高产出1、操作简易,制备流程全自动,仅需30min即可获取大量单细胞悬液2、自动控温,保护样品活力,细胞活性可达85%以上3、多种消化方案,针对不同样品选择不同程序,针对不同组织均有配套试剂盒4、针对临床穿刺样本,使组织的利用率达到100%,细胞产量可达10万个以上5、针对原代细胞培养样本,在15min内完成组织到单细胞过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率6、针对组织单细胞测序,快速完成单细胞化处理,获得高产且活率在85%以上的单细胞,以小鼠组织为例:在实验室的日常工作中,高压均质机和单细胞悬液制备仪的使用频率很高。科研人员通过操作这些设备,不仅能够提高实验效率,还能够减少人为误差,保证实验结果的准确性。同时,这些设备还具有操作简便、性能稳定、便于清洁等优点,使得科研人员能够更加专注于实验本身,而不是被繁琐的清洗和操作所困扰。净信小贴士:目前任何设备都不是万能的。在使用高压均质机和单细胞悬液制备仪时,科研人员也需要注意一些细节问题。例如,要定期对设备进行维护和保养,确保设备的正常运行;在操作过程中,要严格按照操作规程进行,避免因为操作不当而导致设备损坏或实验结果失真。
  • 夏季限时 | 维保服务合约促销
    促销详情PerkinElmer分析仪器新装机1年内首次购买白金全保服务合约,可享受买一年送一年的特殊优惠,购买多年合约还可获得精美礼品赠送PerkinElmer分析仪器新装机3年内首次购买白金全保服务合约,可享受买一年送半年的特殊优惠,购买多年合约还可获得精美礼品赠送装机3年以上仪器购买服务合约也有大幅优惠。促销时间:从2020年8月1日至12月31日请扫描下方二维码参加促销,也可拨打热线电话4008205046或联系所在区域服务销售了解详细内容。可以提升实验室效率的仪器服务合约促销啦!请选择适合您实验室的服务方案白金全保服务:合约期内提供客户完善的仪器维修及维护服务方案,客户无需操心仪器使用的问题,所有配件及工程师上门费用全部由我们免费提供(不包括外购件及耗材)。随着仪器使用时间的增长和不断消耗,运行费用将逐年增长,长期选用白金全保服务可有效地延长仪器使用寿命。适合仪器使用频率较高的实验室。黄金优享服务:合约期内为客户提供日常维修及年度保养服务,客户无需对不定时产生的仪器故障以及维修人工成本感到烦恼。我们会在合约期内提供无限次的快速上门维修服务,仪器日常维修检查的人工费用均由我们承担。适合预算有限,但注重仪器运行状态的实验室。可选定制服务:服务内容可根据您的实际需求灵活调整和优化,为您定制与实验室状况相匹配的服务解决方案。
  • BLT小课堂|水母发光蛋白检测法在细胞钙离子含量测定中的应用
    Ca2+作为普遍的第二信使在细胞信号转导过程中起着非常重要的作用,是单个细胞生存和死亡的信号。它参与了神经传导、血液凝固、肌肉收缩、心脏收缩、大脑功能、酶功能以及内分泌腺的激素分泌等各种生理机能。而人们对Ca2+在信号转导中作用的认识,则很大程度上取决于Ca2+测定技术。目前常用的Ca2+检测方法主要有:Ca2+选择性微电极测定法、同位素示踪法、核磁共振法和水母发光蛋白检测法等。01Ca2+选择性微电极测定法:Ca2+选择性微电极一种电化学敏感器。利用内充液和组织或细胞之间产生电位差,理想情况下,该电位差是Ca2+对数的线性函数,遵循Nernst方程。优点:直接、敏感地测定组织或细胞内的Ca2+,不需使用指示剂,不影响结合钙和游离钙的平衡。缺点:反应速度慢而无法测定Ca2+的快速变化,而且穿刺损伤细胞可引起渗漏,且不适用于太小的细胞。02同位素示踪法:用放射性核素45Ca2+对Ca2+进行示踪,可测量出通过细胞膜转运到细胞内Ca2+增加的速度及浓度的大小,揭示Ca2+泵的作用,目前主要用于测定跨膜Ca2+的流动。优点:测量方法简单易行,比普通化学分析法的灵敏度高。确定放射性示踪剂在组织器官内的定量分布,可以达到细胞、亚细胞乃至分子水平。缺点:静态效果差,需要特定的同位素测定仪,并且要注意示踪剂的同位素效应和放射效应问题。03核磁共振法:是一种新的、非光学技术的Ca2+检测方法。由于正常生物体内氟含量很少,为了得到足够的响应,在检测时需要使用含氟指示剂。该指示剂经过化学修饰后进入细胞,进而被水解成游离状态,然后与Ca2+结合,根据获得的波谱图计算出Ca2+的浓度。优点:具有非破坏性和无损伤性,能够在接近生物样本生理状态下连续动态地进行检测,准确反应Ca2+浓度。缺点:需要核磁共振仪,成本较高。04荧光探针法:目前常用的Ca2+荧光探针有Fluo-3、Fluo-4、Fluo-8等。这类探针本身无法进入细胞,但它的亲脂性衍生物却可以透过细胞膜进入细胞。一旦进入细胞,这类亲脂性衍生物的亲脂性封闭基团在细胞非特异性酯酶的作用下被分裂除去,在细胞内便会形成一种带负电荷的荧光染料。与胞内Ca2+结合时,其荧光强度显著增加。优点:指示剂易导入细胞,空间分辨率高,反应速度快,而且可同时检测多重离子。缺点:需要有荧光显微镜或激光共聚焦显微镜,成本较高。05水母发光蛋白检测法:最近十几年来,水母发光蛋白(Aequorin)很受人们的关注。水母发光蛋白由189个氨基酸组成,具有3个Ca2+结合的EFhand结构,所以水母发光蛋白可作为检测Ca2+的新型探针。优点:Ca2+/水母蛋白复合物能检测~0.1μm到>100μm范围内的钙离子浓度,且复合物不会从细胞内泄露出来,可检测几小时至数十天内Ca2+浓度的变化。比荧光探针法的背景低,样本本身不会发生自荧光。腔肠素的性质腔肠素(Coelenterazine)作为海洋动物体内贮存光能的分子,它广泛存在于海洋生物体内,比如海肾、海蜇、水螅等。腔肠素是天然荧光素中最普遍的,它可作为很多荧光素酶的底物。目前研究得最透彻的以腔肠素为底物的荧光素酶来源于海肾(Renilla),即海肾荧光素酶(Renilla reniformis,简称Rluc)。腔肠素的工作原理腔肠荧光素是一个分子量约400 Da 的疏水基团,它可以自由穿越细胞膜。在一个以荧光素/荧光素酶为基础的系统中,腔肠素作为以水母发光蛋白为代表的海洋发光蛋白的辅助因子,与水母发光蛋白进行稳定的结合,引起脱辅基水母发光蛋白和腔肠荧光素之间的共价键破裂,腔肠荧光素(Coelenterazine)被氧化脱羧,形成腔肠酰胺(Coelenteramide),释放出CO2,同时发出波长为469nm的蓝色生物荧光,该荧光可用博鹭腾高灵敏度管式/板式发光检测仪进行测定。图1.腔肠素/水母发光蛋白检测Ca2+机制水母发光蛋白一旦和Ca2+反应即丧失发光功能,因此当一部分水母发光蛋白与Ca2+反应时,被消耗水母发光蛋白的发光强度能反映出Ca2+浓度变化,而且被消耗的水母发光蛋白的发光强度与Ca2+浓度之间存在线形关系。如同萤火虫荧光素酶,海肾荧光素酶的活性也不需要翻译后修饰,一旦翻译完成即可行使遗传报告基因的功能。但是与萤火虫荧光素酶又有差异,即腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更利于生物荧光的研究。技术小结由于Ca2+在生命活动的各种生理生化反应、疾病的发生和发展中都扮演着极其重要的角色,而游离的Ca2+浓度变化又与细胞的功能、信号转导乃至细胞的凋亡有密不可分的联系,因此,研究如何检测细胞内游离Ca2+浓度显得尤为重要。Ca2+选择性微电极测定法不需要使用指示剂,但是穿刺过程会损伤细胞,进而引起渗漏。同位素示踪法简单,但是静态效果差,还需要注意同位素效应和放射效应问题。核磁共振法和荧光探针法都需要特定的仪器,成本较高。水母发光蛋白检测法不需要激发光源,因而消除了细胞自发荧光的干扰,背景荧光远低于使用钙离子指示剂的荧光。另外腔肠素具有疏水性,易于通过细胞膜,适于全细胞的研究。 腔肠素/水母发光蛋白的生物荧光反应对Ca2+浓度的变化非常敏感,但是这种发光相对较弱,因此需要使用高灵敏度的发光检测仪进行检测。 图2.Lux-T020高灵敏度管式发光检测仪 图3.Lux-P110高灵敏度板式发光检测仪博鹭腾公司的管式/板式发光检测仪采用超高灵敏度的低噪音单光子PMT,同时通过计数电子记录和分化脉冲 的单脉冲输出的能力来定义高数量级,从而实现更宽的动力学范围。高灵敏度板式发光检测仪设计了2个独立的喷射式自动进样器,精度高于97%。两款产品都适用于以水母发光蛋白为载体的 Ca2+ 浓度测定,极其微小的浓度变化也可以轻松检测。除了检测上述Ca2+ 浓度以外,博鹭腾高灵敏度管式/板式发光检测仪还可以测定活细胞内报告基因、ATP、活性氧、半胱天冬酶等指标。
  • 饮用水中铜绿假单胞菌快速检测解决方案
    饮用水中铜绿假单胞菌快速检测解决方案饮用水微生物铜绿假单胞菌检测仪深芬仪器厂家生产的铜绿假单胞菌/绿脓杆菌检测仪能快速测定矿泉水、包装饮用水、等水体中铜绿假单胞菌;微生物致病菌检测仪广泛应用于天然矿泉水行业、饮用水行业、制药行业、饮料行业、研究单位、检验检疫机构、质量监控机构等部门。在致病菌微生物检测领域,测量准确性和测量速度之间的矛盾一直没有解决,针对这一现状深圳市芬析仪器制造有限公司研制了一款集温控技术、生物技术、光谱分析技术于一体的微生物致病菌检测仪,CSY-WSW饮用水中铜绿假单胞菌快速检测仪操作简单,无需增菌,缩短了检测时间,测试时间不超过1小时,是一种新型快速检测微生物致病菌含量的仪器。饮用水中铜绿假单胞菌快速检测仪检测项目:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、志贺氏菌、李斯特菌、副溶血性弧菌、溶藻性弧菌、阪崎肠杆菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的定量检测。(支持检测项目定制)对于铜绿假单胞菌,我国最新的饮用水标准 GB19298-2014《包装饮用水》明确规定:水样中铜绿假单胞菌不得检出。另外,按照食品安全相关法律法规的要求:出厂前应对每批次成品进行铜绿假单胞菌检测,如果检出,则为不合格产品,应该立即停止销售和召回。饮用了含有铜绿假单胞菌的饮用水,是否会损害健康呢?主要取决于两个因素:第一,铜绿假单胞菌含量情况,第二,不合格饮用水的饮用量情况。因为人体免疫系统能有效地抵抗该细菌的感染,因此,正常情况下,如果铜绿假单胞菌在水中的含量不高,并且饮用量也不多,一般不会出现什么不良反应。但是,像刚出生不久的婴儿或是受到大面积烧伤的病人这类情况,由于其免疫系统不健全或是出现免疫缺陷时,则极易受到铜绿假单胞菌的感染。受感染的病人通常会出现发热、黄疸、脾大、伤口溃烂,并产生肺炎、泌尿系感染、脑膜炎、败血症等继发性疾病。所以,铜绿假单胞菌对抵抗力较弱的人群存在较大健康风险,容易引起急性肠道炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病。饮用水中铜绿假单胞菌快速检测仪技术参数:1、显示屏幕:7寸彩色中文液晶触摸显示屏2、操作系统:Android 9.0操作系统,芯片A53 联发科 2G+16G(外置TF内存支持扩展128G)3、样品信息:检测通道可独立设置样品名称、样品来源单位名称、单位地址(三级联动)、责任人、联**式、信用代码等信息4、智能检测:无需增菌,兼容单通道独立检测或多通道同时检测测试时间(前处理+测试)不超过1小时5、用户信息:可设置检测单位名称、单位地址(三级联动)、联**话、责任人、检测人员、审核员等,可多账户设置6、数据分析:对检测结果进行圆饼图、柱状图、折线图进行统计、汇总、分析;7、数据导出:支持USB数据导出,格式可选(TXT、Excel)8、GPS定位:支持卫星定位功能9、系统更新:支持远程更新、新版本自动更新10、通讯接口:外置SIM卡插口(支持2G/3G/4G全网通)、外置存储TF内存插口、RS232、USB A型、USB B型、网口、wifi、蓝牙11、打印功能:内置热敏打印机,可通过USB B型外链打印机,单条或多条数据合并打印,可打印检测结果检测报告可打印检测项目、样品名称、检测结果、结果判断、检测日期 、检测单位、检验人员、被检测单位等信息;USB B型接口可连接A4打印机打印结果。12、数据上传:支持SIM(2G/3G/4G全网通)、网口、wifi进行数据传输及对接各地监管平台13、检测通道:16通道检测14、检测结果:定性定量分析15、检测时间:60分钟16、样品类别:可检测固体、液体、表面17、饮用水中铜绿假单胞菌快速检测仪尺寸:385mm*330mm*170mm深圳市芬析仪器制造有限公司主营业务:农药残留检测仪、ATP荧光检测仪、食品安全检测仪、水质检测仪、土壤肥料养分检测仪、农产品质量安全检测仪、免疫层胶体金/荧光分析仪、兽药残留检测仪、重金属检测仪、水分测定仪/固含量检测仪、检测试剂检测卡检测箱定制等,OEM代工/ODM贴牌等项目合作,详细内容可咨询夏经理。
  • 小贝倾情助力细胞外囊泡研究 ——贝克曼库尔特“细胞外囊泡专题研讨班”纪实
    最近,小贝家分别在北京和广州举办了“细胞外囊泡专题研讨班”,获得老师和同学们空前热情的参与,有的甚至千里迢迢、不远万里专程参加。是什么引起大家如此高涨的参与热情呢?当前研究的热点——外泌体。对于外泌体(又称细胞外囊泡,Extracellular Vesicles),相信大家都不陌生,它是指细胞膜上脱落或由细胞分泌的,具有双层膜结构囊泡状异质性群体,包括外泌体(Exs)、膜微粒(MP)和微囊泡(EVs)。细胞外囊泡和细胞内囊泡,有着相似的磷脂双分子层结构,包含有蛋白和核酸等生物大分子,大小在40nm-1000nm,是细胞进行物质运输、信号转导、实现生理功能的重要工具。细胞外囊泡广泛存在于细胞培养上清及各种体液,参与细胞间通讯、细胞迁移和免疫调节等多种反应。囊泡水平升高与糖尿病、艾滋病以及癌症等疾病相关,有望成为这类疾病的诊断及评估疾病预后标志物。如今,越来越多的研究者开始着眼于对细胞外囊泡进行准确的定型和定量研究。2013年10月7日,诺贝尔生理学或医学奖授予了发现细胞囊泡运输调控机制的三位科学家。外周血中有着大量的外泌体,来自不同的细胞。另外,外泌体和肿瘤微环境、肿瘤细胞迁移有着神秘联系。对于这些未知的领域,目前还缺乏研究,主要原因在于对于这种200nm以下颗粒的检测,显微镜显得力不从心,电镜又高不可及。因此强大的工具和完美的解决方案的显得尤其重要。有鉴于此,我们有幸邀请到了来自 Beth Israel Deaconess Medical Center and Harvard Medical School的Vasilis Toxavidis和John Tigges——两位有着丰富的流式细胞术和外泌体研究经验的学者,请他们和国内的学者进行外泌体研究的交流,分享经验。8月24日,首都北京,骄阳似火,然而参加“贝克曼库尔特细胞外囊泡专题研讨班-北京站”活动的老师和同学,有着胜似骄阳的热情,有图为证。现场不得不临时加座,才能满足大家学习和交流的热情。8月29日,羊城广州,骤雨初歇,寒潮来袭,公路上随处可见台风肆略的痕迹,这些却丝毫没有阻挡来自全国各地的40多位老师的脚步。大家齐聚中山大学,热情参与我们广州站的活动。两场研讨班,早上均为报告部分。Vasilis Toxavidis和John Tigges从理论角度讲述了外泌体检测的问题、误区和解决方案;从散射光检测原理、流式细胞仪硬件、再到样本制备,系统的阐述了外泌体的检测,并以实例讲述了心肌细胞源外泌体和红细胞源外泌体的研究结果,提出了Nano Flow Cytometry(NanoFACS)的概念。首先,来自美国哈佛干细胞研究所资源总监、哈佛医学院贝斯以色列女执事医疗中心流式技术平台负责人Vasilis Toxavidis先为大家做了流式分析EVs的技术原理、硬件可行性等方面的报告。Vasilis以MoFloXDP和CytoFLEX为教学案例,深入浅出地讲解,时时博得与会者的掌声,给大家提供了流式在微颗粒检测研究的新思路。随后,美国哈佛医学院贝斯以色列女执事医疗中心外囊泡检测中心主任John Tigges进一步介绍了利用流式细胞术研究细胞外囊泡, 并结合HF患者EVs检测案例,抽丝剥茧,逐一分析如何解决细胞外囊泡检测中问题、缺陷,阐述EVs在疾病研究中的实际意义,使大家茅塞顿开。其幽默的演讲风格也深受老师们喜爱,引得台下提问连连,将整个研讨会推上了小高潮。接着,来自贝克曼库尔特生命科学部的霍德华,讲述了贝克曼库尔特的超高速离心机——Optima XPN在样本制备和外泌体获取方面的完整工作流程。超速离心分离,是从生物体液和细胞培养样品中分离纯化外泌体的黄金标准,可以准确地重复获取外泌体,同时最大限度减少蛋白质聚集体和其他膜离子的共纯化。上午的理论部分结束后,大家对细胞外囊泡检测,超离技术助力样本采集和精准流式技术助力囊泡研究有了全面、清晰、深刻的认识。北京站的实验操作部分,在中科院过程工程研究所的、阵容强大的三台CytoFLEX流式细胞分析仪旁展开。John Tigges和Vasilis Toxavidis现场演示了如何在CytoFLEX上进行外泌体的检测。利用CytoFLEX的WDM技术和灵活的滤光片调整特点,John Tigges轻松实现200nm以下的颗粒检测,并找到外周血中神秘的外泌体。CytoFLEX使用VSSC检测Megamix-Plus微球结果及线性表现:CytoFLEX检测血液中的细胞外囊泡结果:由于FAPD的优势CytoFLEX对颗粒大小的检测保持很好的线性。出众的分辨率不仅能将噪音与细胞外囊泡很好的分开,而且还可以对外囊泡群体进行细分,分别研究其抗体表达情况。广州站的实践操作部分在中山大学北校区医学院实验室进行。大家在两位美国专家的指导下,领略了MoFlo Astrios EQ和CytoFLEX精准检测细胞外囊泡的神奇魅力。EVs的大小通常只有40nm-100nm,超出传统流式的检测范围。但MoFlo Astrios EQ的增强型双前向角设计和CytoFLEX的雪崩光电二极管以超高的分辨率和灵敏度,有效地区分噪音信号和检测囊泡。连续五轮操作培训,让操作者切身感受了一把迅速快捷、多参数细胞外囊泡检测。两场培训班内容丰富、实用,而又易于理解。到会的老师和同学纷纷表示获益匪浅。贝克曼库尔特的超高速离心机(Optima XPN)和超灵敏流式细胞仪(CytoFLEX)实现了双剑合璧,为科研工作者提供了完美且可行的外泌体检测解决方案。* 本产品仅用于科研,不用于临床诊断。(此项活动得到中国科学院过程工程所和中山大学的大力协助,特此表示感谢!)
  • 环保部征集2015环保标准计划项目承担单位
    日前,环保部发文称将开展2015年度国家环境保护标准计划项目承担单位征集工作。该通知中称,标准项目承担单位采用公开征集、自愿申报、择优选取的方式确定。关于征集2015年度国家环境保护标准计划项目承担单位的通知  各省、自治区、直辖市环境保护厅(局),新疆生产建设兵团环境保护局,辽河保护区管理局,各直属单位,各国家环境保护重点实验室和工程技术中心,有关高校和科研院所:  为适应国家经济社会发展和环境保护工作需要,进一步完善国家环境保护标准体系,做好&ldquo 十二五&rdquo 期间环保标准工作,根据《国家环境保护标准制修订项目计划管理办法》(环办〔2010〕86号)和财政资金管理有关规定,我部决定开展2015年度国家环境保护标准计划项目承担单位征集工作。现将有关事项通知如下:  一、申报要求  (一)申报单位具有与申报项目相关的技术能力,项目参与人员熟悉国家环境保护政策、法律、法规和标准体系。  (二)申报单位具备独立法人资格、独立银行账户和健全的财务制度。  (三)承担过国家环保标准项目工作的单位及拟担任标准项目负责人的人员,没有出现过在未办理项目变更、调整事宜的情况下,擅自拖延或中止项目,无故不按时完成工作任务的情况。  (四)保证高质量完成标准项目任务和项目相关材料(如编制说明、评估报告、体系设计报告等)的编写工作,标准文本和编制说明能达到出版要求。  (五)承担监测方法标准的单位应通过计量认证或获得国家实验室认可,已经建立并实行了较为完备的监测工作质量保证和质量控制制度,具备开展标准验证工作所必需的条件,包括技术人员和仪器、设备、试剂等实验条件,能够按时、按要求完成标准验证工作,保证验证结果客观、真实。  (六)项目执行期限一般为2-3年,经费预算根据项目任务实事求是申报。  (七)同一单位不得有多个团队申报同一项目。  不符合上述规定的申请视为无效申请,不参与评审。目前承担我部标准项目数量较多且没有完成的单位,2015年原则上不再安排新项目。  二、承担单位征集和确定方式  标准项目承担单位采用公开征集、自愿申报、择优选取的方式确定。请项目申报单位对照2015年度国家环境保护标准计划项目指南(见附件1),填写申报表(见附件2),并于2014年6月15日前将申报表的纸质文件(一式两份)和电子文件反馈我部科技标准司。科技标准司将组织申报单位答辩,经专家质询和论证,择优确定项目承担单位(时间、地点另行通知)。若某项目所有申报单位均不能达到承担该项目的要求,根据专家评审结果,可撤销该项目。  三、申报材料的编制与报送  (一)申报材料的电子件请发送到指定的电子邮箱,纸质文件请邮寄至指定的联系地址,不接受当面报送材料。  (二)电子邮件和信件名称统一为&ldquo 2015年度国家环境保护标准项目申报&rdquo ,电子文件名称统一为&ldquo 项目序号-项目名称-单位名称&rdquo 。  四、联系方式  联系人:环境保护部科技标准司 范真真 李晓弢  通信地址:北京市西直门南小街115号 环境保护部科技标准司  邮政编码:100035  联系电话:(010)66556216,66556215  电子邮箱:biaozhun@mep.gov.cn  附件:1.2015年度国家环境保护标准计划项目指南  2.国家环境保护标准项目申报表  环境保护部办公厅  2014年5月29日
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