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胶体粒子

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  • 胶体及其性质!

    胶体(英语:Colloid)又称胶状分散体(colloidal dispersion)是一种均匀混合物,在胶体中含有两种不同状态的物质,一种分散,另一种连续。分散的一部分是由微小的粒子或液滴所组成,分散质粒子直径在1nm—100nm之间的分散系;胶体是一种分散质粒子直径介于粗分散体系和溶液之间的一类分散体系,这是一种高度分散的多相不均匀体系。按照分散剂状态不同分为:  气溶胶——以气体作为分散介质的分散体系。其分散质可以是气态、液态或固态。:如烟扩散在空气中  液溶胶——以液体作为分散介质的分散体系。其分散质可以是气态、液态或固态。:如Fe(OH)3胶体  固溶胶——以固体作为分散介质的分散体系。其分散质可以是气态、液态或固态。:如有色玻璃、烟水晶  按分散质的不同可分为:粒子胶体、分子胶体  如:1.烟,云,雾是气溶胶,烟水晶,有色玻璃、水晶是固溶胶,蛋白溶液,淀粉溶液是液溶胶;  2.淀粉胶体,蛋白质胶体是分子胶体,土壤是粒子胶体;

  • 胶体测定颗粒含量的方法

    激光粒子计数器能不能测定胶体的颗粒含量?因为胶体有丁达尔现象 这与粒子计数器的原理相悖吗?因为我测了很多组数据 好像不太适合,所以请教各位高手。 仪器型号:cls-700 有知道的麻烦回复或发到我的邮箱:zoufengpingok@163.com 谢谢了

  • 【转帖】胶体溶液简介 !

    胶体化学是研究胶体分散系-物理化学性质的一门科学。它不仅和工农业生产有着密切的关系,而且和生命科学紧密相关。在研究动植物的生命现象时,随处都会遇到胶体体系。从胶体化学的观点来说,人体就是典型的胶体体系。因为细胞、血液、淋巴液、肌肉、脏器、软骨、皮肤、毛发等都属于胶体体系。因此,生物体内发生的许多生理变化和病理变化与胶体的性质有联系。另外,许多药物、消毒剂、杀虫剂等也是以胶体形式生产和使用。因而对于医学工作者来说,学习一些胶体体系的基本知识是很有必要的。 第一节 分散系 一种或几种物质分散在另一种介质中所形成的体系称为散体系。被分散的物质称为分散相,而连续介质称为分散介质。例如食盐水溶液,食盐是分散体系又分为均相分散系和多相分散系。低分子溶液与高分子溶液为均相分散系。溶胶与粗分散系为多相分散系。 分散体系的某些性质常随分散相粒子的大小而改变,因此,按分散相质点的大小不同可将分散系分为三类(表9-1):低分子(或离子)分散系(其粒子的线形大小在1nm以下);胶体分散系(其粒子的线形大小在1-100nm之间);粗分散系(其粒子的线形大小在100nm以上)。三者之间无明显的界限。 一、粗分散系 在粗分散系中,分散相粒子大于100nm,因其粒子较大用肉眼或普通显微镜即可观察到分散相的颗粒。由于其颗粒较大,能阻止光线通过,因而外观上是浑浊的,不透明的。另外,因分散相颗粒大,不能透过滤纸或半透膜。同时易受重力影响而自动沉降,因此不稳定。 粗分散系按分散相状态的不同又 分为悬浊液(固体分散在液体中——如泥浆)和乳浊液(液体分散在液体中——如牛奶)。 二、低分子分散系 分散相粒子小于1nm,因分散相粒子很小,不能阻止光线通过,所以溶液是透明的。这种溶液具有高度稳定性,无论放置多久,分散相颗粒不会因重力作用而下沉,不会从溶液中分离出来。分散相颗粒能透过滤纸或半透膜,在溶液中扩散很快,例如盐水和糖水等。 三、胶体分散系 胶体分散系即胶体溶液,分散相粒子大小在1-100nm之间,属于这一类分散系的有溶胶和高分子化合物溶液。由于此类分散系的胶体粒子比低分子分散系的分散相粒子大,而比粗分散系的分散相粒子小,因而胶体分散系的胶体粒子能透过滤纸,但不能透过半透膜。外观上胶体溶液不浑浊,用肉眼或普通显微镜均不能辨别。 胶体是物质的一种分散状态,不论在任何物质,只要以1-100nm之间的粒子分散于另一物质中时,就成为胶体。例如,氯化钠在水中分散成离子时属低分子分散系。而在苯中则分散成离子的聚集体,聚集体粒子的大小在1-100nm之间,属胶体溶液。许多蛋白质、淀粉、糖原溶液及血液、淋巴液等属于胶体溶液。

  • 【分享】残留知识普及一百篇之六【胶体金的神秘面纱】

    胶体金(colloidal gold),又称金溶胶(gold solution),是指分散相粒子直径在l—150nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色。胶体金可以作为标记物用于免疫组织化学,近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术。胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到发展,并越来越受到相关研究领域的重视。胶体金-结构胶体金(colloidal gold)也称金溶胶(gold solution),是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,较小的胶体金颗粒基本是圆球形的,较大的胶体金颗粒(一般指大于30nm以上的)多呈椭圆形。在电子显微镜下可观察胶体金的颗粒形态。

  • 【分享】你知道胶体溶液吗?

    【分享】你知道胶体溶液吗?

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/10/200910142340_175687_1610969_3.jpg[/img] 动物药材中含有各种蛋白质及许多高分子物质,其中有的就是要提取的有效成分,有的虽然不是有效成分,也在提取时常常洛人提取液之中,往往形成胶体溶液。这样在动物药提取制剂这方面工作往往涉及胶体溶液的种类、特性、稳定性及影响因素等。   [color=#DC143C]胶体溶液是指一定大小的固体颗粒药物或高分子化合物分散在溶媒中所形成的溶液。[/color]其质点一般在1~100纳米之间,分散媒大多数为水,少数为非水溶媒。固体颗粒以多分子聚集体(胶体颗粒)分散于溶媒中,构成多相不均匀分散体系(疏液胶)高分子化合物以单分子形式分散于溶媒中,构成单相均匀分散体系[1](亲液胶)。这类溶液具有其特有性质,它既不同于低分子分散系--真溶液(分散相质点小于1纳米),也不同于粗分散系--混悬液(分散相质点大于100纳米)。胶体溶液在药剂学中应用甚广,尤其动、植物药在制剂过程中更与胶体溶液有密切关系。  -胶体溶液的种类  -胶体溶液的特性  -胶体溶液的稳定性 [color=#00008B] 1)胶体溶液的种类[/color]  胶体按胶粒与分散媒之间的亲和力强弱,可分为亲液胶体和疏液胶体、当分散媒为水时,则称为亲水胶体和疏水胶体。胶体分散在分散媒中形成的系统称为胶体溶液,中药药剂学中应用较多的是胶体水溶液。  亲水胶体溶液:胶体化合物(蛋白质及其他高分子化合物)的分子结构中含有许多亲水基团,能与水分子发生作用。质点水化后似分子状态分散于水中,形成亲水胶体溶液。如动物胶汁(阿胶、鹿角胶、明胶及骨胶等)、酶的水溶液(胃蛋白酶、胰蛋白酶、溶菌酶、尿激酶等)及其他含蛋白质的生化制剂,植物中纤维素衍生物,天然的多糖类、粘[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]及树胶等,人工合成的右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮等等遇水后所形成的胶体溶液均属此类。亲水胶体绝大多数为高分子化合物,所以亲水胶体溶液也称高分子水溶液。随着非极性基因数目的增多,胶体的亲水性能降低,而对半极性溶媒及非极性溶媒的亲和力增加,胶体质点分散在这些溶媒中时,形成的溶液称为亲液胶体溶液或高分子非水溶液,如玉米朊乙醇溶液或丙酮溶液。

  • 免疫层析法和胶体金法的区别

    [font=宋体]免疫层析法和胶体金法是两种常用的生物检测技术,它们在原理、应用和优缺点等方面存在显著差异。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]①原理区别:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]免疫层析法是一种基于抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应的生物检测技术,利用标记有荧光物质、酶、胶体金等物质的抗体或抗原,检测样品中是否存在相应的抗原或抗体。当样品中的抗原与标记的抗体结合后,可以通过层析作用将结合物分离并检测。[/font][/font][font=宋体]而胶体金法则是利用胶体金作为标记物,通过免疫学方法检测样品中的生物分子。胶体金是一种由氯金酸水溶液在还原剂作用下形成的金颗粒,这些金颗粒分散在溶液中形成胶体溶液。当生物分子与胶体金结合后,可以通过显色反应判断是否存在该生物分子。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]②应用区别:[/font][/b][font=宋体]免疫层析法主要应用于医学诊断、食品安全、环境监测等领域。例如,用于检测尿液、血液、组织液等生物样品中的病毒、细菌、蛋白质等物质。[/font][font=宋体]胶体金法则主要应用于免疫分析、生物传感器等领域。由于胶体金法操作简便、灵敏度高、[/font][font=宋体]特异性好等特点,被广泛应用于临床诊断、生物制品质量控制等方面。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]③优缺点区别:[/font][/b][font=宋体]免疫层析法和胶体金法在优缺点方面也存在差异。[/font][font=宋体]免疫层析法的优点在于其高特异性、高灵敏度、高重复性等特点,能够快速准确地检测出样品中的目标物质。但是免疫层析法的操作较为繁琐,需要经过多个步骤才能完成检测,而且成本较高。[/font][font=宋体]胶体金法的优点在于其操作简便、快速、无需特殊设备等特点,能够在短时间内完成大量样品的检测。但是胶体金法的缺点在于其灵敏度相对较低,对于低浓度目标物质的检测可能会出现假阳性或假阴性的情况。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总的来说,免疫层析法和胶体金法各有其优缺点,具体应用应根据实际情况选择。在某些情况下,可以将两种方法结合使用,以获得更好的检测效果。例如,在检测病毒抗原时,可以先使用免疫层析法进行初筛,然后再用胶体金法进行确认,以提高检测的准确性和特异性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之,免疫层析法和胶体金法是两种常用的生物检测技术,它们在原理、应用和优缺点等方面存在显著差异。在实际应用中,应根据具体情况选择合适的方法,以达到最佳的检测效果。同时,随着技术的不断发展,相信这两种方法将会在未来的生物检测领域发挥更加重要的作用。[/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/chromatography-purification][b]蛋白层析纯化[/b][/url]详情:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/chromatography-purification[/font][/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 怎样对胶体和农药的进行分离?

    [color=#444444]我的样品中含有农药和胶体的混合物,主要是农药(噻唑类)吸附在胶体上,我需要检测农药含量,但是液相色谱检测前过膜(0.22um)时候会把胶体(粒径0.22)给过掉,这样残留在胶体上的农药也过滤了,有什么办法可以在过膜前把两者分开,或者是有什么好的检测方法吗?[/color]

  • 【讨论】胶体溶液中粒径的测试

    [em08] 大家好!我在研究胶体溶液(SiO2)中粒径分布的时候,发现用Marven Nano ZS测试结果(200nm number%)与TEM观测结果(30nm,粒径分布均匀)差别很大,不知是否是测试方法出了问题?溶剂: 乙醇超声时间:20min我是否应该加入像六偏磷酸钠这样的分散剂呢?如果应该,加入多少合适?请给予指点,谢谢了!

  • 食品药品胶体金分析仪

    食品药品胶体金分析仪是一种先进的科学仪器,主要用于检测食品和药品中的胶体金含量。胶体金是一种微小颗粒的金纳米材料,具有广泛的应用价值。该分析仪通过采用高精度的技术和方法,能够准确测量食品和药品中的胶体金含量,为生产厂商和消费者提供关键的信息和保障。食品药品胶体金分析仪在功能构成上非常全面,主要包括分光光度模块、新型农残检测模块、胶体金检测模块、荧光检测模块、数字化管理模块等,可以快速检测200多种食品安全项目,如兽药残留、农药残留、非法添加剂、细菌数值等指标。  在使用上,该分析仪操作简便。操作人员只需将待测样品放入仪器中,按照指示进行相应操作即可。在仪器运行一段时间后,可以观察屏幕上显示的结果,根据仪器提供的标准曲线,确定目标物质的浓度。同时,该分析仪通常具有连接电脑的功能,可以方便地导出数据进行进一步的分析和处理。  食品药品胶体金分析仪是一款功能强大、操作简便的仪器,为食品和药品行业的质量控制和安全监测提供了强有力的支持。如需了解更多有关食品药品胶体金分析仪的信息,建议查阅相关文献或咨询专业机构。

  • 【讨论】有谁做过胶体滴定吗?

    我要做胶体滴定,需用到聚乙烯硫酸钾盐(PVSK),滴定阳离子聚合物这个药剂很贵,进口的,1g就要七百多元不知道用量大不大!一般配成多少浓度的溶液?有了解的朋友请指教,谢谢!

  • 【求助】有人有测定表面活性剂胶体溶液粒度的经验吗?

    请教关于表面活性剂胶体溶液粒度的2个问题:1:分散剂中有少量无机盐,对胶体粒度是否有影响?在测试时使用纯水的粘度系数以及在样品需要稀释后测定时用纯水来稀释样品,对结果是否有影响?2:表面活性剂胶体粒径与该胶体溶液中表面活性剂的浓度是否有关系?

  • 专家创新胶体量子点太阳能电池转化效率纪录

    一个国际科研团队撰文指出,他们使用无机配位体替代有机分子来包裹量子点并让其表面钝化,研制出了迄今转化效率最高的胶体量子点太阳能电池。据美国物理学家组织网9月18日报道,一个国际科研团队在最新一期的《自然-材料学》杂志上撰文指出,他们使用无机配位体替代有机分子来包裹量子点并让其表面钝化(不易与其他物质发生化学反应),研制出了迄今转化效率最高(达6%)的胶体量子点(CQD)太阳能电池。吸光纳米粒子量子点是纳米尺度的半导体,其能捕捉光线(既可吸收可见光,也可吸收不可见光)并将其转化为能源。人们可将其喷洒到包括塑料在内的柔性材料表面,制造出比硅基太阳能电池更便宜、更经久耐用的太阳能电池。而且,胶体量子点电池的理论转化效率可高达42%,超过硅基太阳能电池31%的理论转化率。今年7月,多伦多大学的科学家研制出了转化效率为4.2%的胶体量子点太阳能电池。胶体量子点太阳能电池研制领域最大的挑战在于如何使量子点紧密结合在一起,因为量子点之间的距离越大,转化效率越低。然而,量子点通常由多出其1—2纳米的有机分子包裹,在纳米尺度上,这有点大,而有机分子是制造胶体的重要成分。为此,加拿大多伦多大学、沙特阿拉伯阿卜杜拉国王科技大学、美国宾夕法尼亚州立大学的科学家们开始考虑使用无机配位体来让量子点紧紧依附在一起,以尽可能节省空间。结果,科学家们不使用“庞大”的有机分子也获得了胶体的特征。“我们在每个量子点周围包裹了一单层原子,它们将量子点包裹成非常紧密的固体。”该研究的领导者、多伦多大学电子与计算机工程系博士后唐江(音译)表示。研究合作者、宾夕法尼亚州立大学的约翰-艾斯拜瑞说:“最新研究表明,我们能剔除电荷陷阱——电子陷入的位置。量子点紧密地结合在一起以及消除电荷陷阱,双管齐下使电子能快速且平滑地通过太阳能电池。”美国国家可再生能源实验室委派的实验室证实,新研制出的胶体量子点太阳能电池不仅电流达到了最高值,高达6%的整体能量转化效率也创下了纪录。“最新研究表明,无机配位体在构建实用设备方面具有强大的作用。”量子点太阳能电池研制领域的领导者、芝加哥大学教授德米特里·塔拉品说,“新的表面化学为我们制造高效且稳定的量子点太阳能电池铺平了道路,也将对其他利用胶体纳米晶体制造的电子和光电耦合设备产生影响。全无机方法的好处包括能显著改善电子的运输速度,让设备更加稳定等。”

  • 食品药品胶体金分析仪是什么

    食品药品胶体金分析仪是一种先进的科学仪器,专门用于检测食品和药品中的胶体金含量。该分析仪通过高精度的技术和方法,能够准确测量食品和药品中的胶体金含量,为生产厂商和消费者提供关键的信息和保障。  胶体金分析仪的工作原理基于胶体溶液中纳米颗粒的光学性质,通过测量光的散射强度来得到颗粒的浓度信息。当光与金纳米颗粒相互作用时,根据散射光的洛仑兹-米耳斯理论,可以得到散射强度与颗粒的浓度之间的关系。仪器中的光源会照射到样品中的金纳米颗粒上,部分光会被颗粒散射并检测到。然后,光学传感器,如光电二极管或光散射仪,会测量散射光的强度,并将其转化为电信号。最后,分析仪会处理这些电信号,进而计算出颗粒的浓度。  这种分析仪具有多种功能模块,如分光光度模块、新型农残检测模块、胶体金检测模块、荧光检测模块以及数字化管理模块等,可以快速检测200多种食品安全项目,包括兽药残留、农药残留、非法添加剂、细菌数值等指标。此外,它还具有15.6英寸液晶触摸屏显,搭配运行安卓智能操作系统,使得操作更为方便且性能更强。  食品药品胶体金分析仪在多个领域都有广泛的应用,如食药监局、卫生部门、高教院校、科研院所、农业农村局、食品深加工企业及检验检疫部门等。其高灵敏度、高准确度和高效率的特点,使得它成为食品安全和质量检测的重要工具。  总的来说,食品药品胶体金分析仪是一款集多功能于一体的先进检测设备,为食品和药品行业的质量控制和安全监测提供了强有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404231526532789_7703_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 食品药品胶体金分析仪有什么作用

    食品药品胶体金分析仪是一种先进的科学仪器,主要用于检测食品和药品中的胶体金含量。胶体金是一种微小颗粒的金纳米材料,其在食品和药品中的含量是一个关键的指标,对产品的质量和安全性具有决定性的影响。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404261526428439_4734_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]  该分析仪的工作原理基于胶体溶液中纳米颗粒的光学性质,通过测量光的散射强度来得到颗粒的浓度信息。当光与金纳米颗粒相互作用时,根据散射光的洛仑兹-米耳斯理论,可以得到散射强度与颗粒的浓度之间的关系。因此,胶体金分析仪可以精确、高效地测量食品和药品中的胶体金含量。  此外,食品药品胶体金分析仪还有便携式及台式两种款式,利用免疫层析胶体金原理及干式化学原理,可以对畜禽产品中瘦肉精、抗生素残留,水产品中非法化学品、抗生素药物残留、罂壳成分等进行快速检测。这种分析仪现已广泛应用于各级食药环侦快检实验室,成为实验室常规检测的有益补充。  使用食品药品胶体金分析仪时,用户需要按照以下步骤操作:首先,根据实际需求,准备好需要检测的样品和相应的试剂 其次,将准备好的样品和试剂分别装载到胶体金免疫层析分析仪的样品槽和试剂槽中 然后,启动仪器,仪器会自动进行样品混合和分析 最后,观察屏幕上显示的结果,并根据仪器提供的标准曲线,确定目标物质的浓度。  总的来说,食品药品胶体金分析仪为食品和药品行业的质量控制和安全监测提供了强有力的支持,是一种具有广泛应用前景的科学仪器。

  • 关于超速离心机测胶体溶液沉降系数

    各位大侠,请问超速离心机测胶体溶液的沉降系数对胶体溶液有要求吗?胶体的溶质分子应该是在1~100nm,1nm左右的溶质分子能测吗?对溶剂有要求吗?北京有接外样的地方吗? 在此,先谢谢各位啦!

  • 【求助】急需胶体磨(北京)

    本人现做一乳膏剂,出现粒度不合格(过大)问题,需解决粒度问题,请高人执教.另想通过胶体磨进行乳化,求北京可提供胶体磨加工地点.

  • 【求助】求助几本关于胶体化学的书

    那位大侠有以下几本书的电子版。《胶体与界面化学》 陈宗淇 等编著 高等教育出版社《应用胶体化学》 候万国等编著 科学出版社《界面与胶体的物理化学》 李葵英等编著 哈尔滨工业大学出版社《应用胶体化学》 郑树亮 等编著 华东理工大学出版社《胶体与界面化学实验》 北京大学出版社《应用表面化学与技术》 哈尔滨工业大学出版社

  • 【讨论】奶粉中雌二醇的免疫胶体金试纸法检测

    雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体〔1,2〕。本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定在硝酸纤维膜上的雌二醇结合物相结合,固定有雌二醇结合物的检测线处就显现明显的颜色〔3,4〕。本法具有灵敏度高、特异性强、简便快速、成本较低、结果轻易判读等优点,适用于样品的初步筛选。[b]1材料与方法[/b]11试剂与仪器氯金酸(上海化学试剂厂);牛血清白蛋白、卵清白蛋白、兔抗鼠多抗(天津联星生物公司);雌二醇标准品、雌二醇单抗、17β-Estradiol-6-one6-(o-carboxymethvyoxime)美国Sigma公司);其他试剂均为国产分析纯。硝酸纤维膜、玻璃纤维膜(美国Millipore公司);BeckmanDu530分光光度计(德国Beckman公司);低温高速离心机(军事医学科学院);点膜机(美国Bio-Dot公司)。12方法121胶体金的制备用三蒸水溶解氯金酸,使其终浓度为01g/L。先进行沸水浴,待氯金酸溶液煮沸后,每100ml加入1%柠檬酸三钠25ml,再沸水浴下快速搅拌,直到氯金酸溶液的颜色稳定,继续沸水浴10min〔5〕,冷却至室温后,用透射电镜镜检并用分光光度计检测颗粒均匀度及粒度。最后置于4℃冰箱保存备用。122最适标记蛋白量的确定用02mol/LK2CO3将胶体金溶液调至pH为82,然后取试管9支,分别加入10ml胶体金溶液。将雌二醇抗体逐级稀释后,各取等体积稀释液顺序加入上述试管中,混匀,另设一不加抗体的对照管。放置10min,在各管中加入01ml的10%NaCl,混匀后静置2h。观察各管中胶体金溶液变化,未加蛋白及加入量不足的溶液颜色由红变蓝,而加入蛋白量达到或超过时的溶液则保持不变。标记蛋白量即为最低稳定胶体金溶液不变色的蛋白量基础上再加20%。123胶体金探针的标记将抗体用0005molNaCl溶液透析过夜,离心除去蛋白沉淀,调至05mg/ml。取胶体金100ml,用0,2mol/LK2CO3将胶体金溶液调至pH为90,磁力快速搅拌下缓慢加入24ml稀释的雌二醇抗体,继续搅拌10min,加入牛血清白蛋白(BSA),使其最终浓度为1%,再搅拌10min。将初步制得的胶体金探针以4000r/mm离心20min;弃沉淀,上清以10000r/min离心60min;弃上清,沉淀用001mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)(含1%牛血清白蛋白)重新悬浮;同前离心洗涤2次,将沉淀用001mol/L的PBS(pH82,含1%BSA,002%NaN3)悬浮,4℃保存备用。124抗原的合成小分子物质难以固定在硝酸纤维膜上,只有使它连上大分子物质才能较好地固定。本实验采用混合酸酐法制备完全抗原。雌二醇-6-肟43mg,加入三正丁胺50μl,二氧六环4ml,冰浴冷却到10℃以下,加入氯甲酸乙酯15μl〔6〕。4~10℃下反应30min。配制卵清白蛋白(OVA)溶液(OVA10mg,3ml水,3ml二氧六环,1mol/L氢氧化钠03ml)。将配制好的OVA溶液加入反应液,4℃冰浴搅拌6h,反应过程中,用氢氧化钠维持pH值为8。反应完毕后,将反应液加入透析袋,透析2d。将透析液调至pH45,冰箱4℃,放置4天,有黄色沉淀出现。离心收集沉淀,冷冻干燥,4℃冰箱保存。将OVA溶于透析液内作为参比,用紫外光谱法对雌二醇-6肟-OVA进行定性检验。经紫外测定证实蛋白质已与雌二醇衍生物结合。125胶体金免疫层析试纸条制备测试条由玻璃纤维膜、硝酸纤维膜、加样纸、吸水纸4部分组成。将玻璃纤维膜裁成6mm的细条,然后放入含1%BSA、1%Tween-20的PB液中浸泡30min,37℃烘干,最后将胶体金探针灌注已处理好的玻璃纤维膜上,真空干燥备用。在硝酸纤维膜上用点膜机将上述抗原和兔抗鼠IgG喷成2条线,分别为检测线和对照线,经真空干燥后,用1%BSA、001mol/LPBS(pH90)封闭2h,以001mol/LPBS洗涤,再真空干燥。将30mm吸水纸、25mm硝酸纤维膜、6mm玻璃纤维膜、15mm加样纸,由顶部依次粘于PVC板上,裁成细条备用。126检测与判读样品:含已知浓度雌二醇样品的乙醇溶液分为3组,第1组不加雌二醇,第2组为02μg/ml雌二醇,第3组为04μg/ml雌二醇。将加样纸一端插入待测液,湿润后取出,水平放置,约3~5min,观察结果。如试纸条硝酸纤维膜上仅对照线呈一条紫红色带为阳性;如出现2条紫红色带为阴性;如质控线不出现紫红色带,无论检测线是否出现,测试结果均无效。[b]2结果与分析[/b]21胶体金颗粒大小选择胶体金颗粒吸附蛋白并显示检测结果,其大小是重要影响因素之一。胶体金颗粒的大小,由制备胶体金时加入的柠檬酸三钠量决定,当柠檬酸三钠加入越多,胶体金颗粒也越多,但颗粒直径越小,反之胶体金颗粒越大。胶体金颗粒小,结合蛋白量少,反应结合率低,另外难以显示明亮清楚的颜色,影响显色效果;胶体金颗粒大,其结合蛋白后不稳定,不易保存,另外其结合蛋白后难以通过膜〔7〕。本实验选用的胶体金颗粒直径约为15min,既可以通过膜,反应彻底,又易保存,反应结果显色清楚。22胶体金颗粒鉴定胶体金颗粒大小及均一程度是检测结果可靠的基础,制备完毕后须经质量鉴定才能应用。用BeckmanDu530分光光度计对胶体金进行扫描,发现其主峰宽度较小,表明制备的胶体金颗粒较均匀,λmax为520nm(图1),表明其粒度约为15nm〔8〕。用电镜观测结果(图2)与分光光度计测定结果一致。电镜观测是鉴定胶体金颗粒粒径及分布的标准,但这种方法不便用于日常工作使用,而用分光光度计测定操作简便,更适合实验室日常使用。图1胶体金的可见光谱图(略)23最适蛋白量阴性对照为未加抗体管,1~7管抗体浓度分别为10,12,14,16,18,20,22μg/ml,阳性对照为胶体金溶液。可见,本实验最适标记蛋白量为20μg/ml(图3)。24E2-OVA浓度用PBS(pH74)溶解E2-OVA浓度为005~10mg/ml,喷在硝酸纤维膜上作检测线,发现E2-OVA浓度越高,检测液中也需要越高浓度的E2与之竞争,检测灵敏度也就越低。但是,E2-OVA浓度低于05mg/ml,检测线颜色太弱,难用肉眼分辨。图2胶体金电镜图(略)阴性对照为未加抗体管;阳性对照为胶体金溶液图3胶体金与雌二醇抗体结合浓度确定实验(略)25检测限本实验的检测限是以完全看不见检测线为最低检测限〔9〕。将雌二醇标准品用甲醇配制成04,02,01,005μg/ml4个标准溶液,用上述检测方法进行检测(图4)。由图可见,最低检测线为100ng/ml。图4试纸条检测样品(略)26对比实验取30份样品,检测分为3组,第1组不加雌二醇,第2组加02μg/ml雌二醇,第3组加04μg/ml雌二醇,分别用GICA法与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]法(GC/MS)检测。实验结果显示,第1组2种方法均未检出;第2组GICA法阳性9粒,阴性1粒,GC/MS法阳性10粒;第3组2种方法均检测阳性。由此可见,与标准检测方法相比,GICA法准确度为9667%。27交叉反应试验实验结果显示,与己烯雌酚、炔雌酚、壬基酚、阿特拉津及双酚A等环境内分泌干扰物中的环境雌激素无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。[b]3小结[/b]目前,关于雌二醇的检测有气、液相色谱和光谱、质谱等方法,但其仪器昂贵、操作复杂、检测时间较长。本文建立的免疫胶体金层析法具有灵敏度高、特异性强、简便快速、成本较低、结果轻易判读等优点,且无需任何仪器,操作简单,适用于样品的初步筛选。[list][/list]

  • 如何用紫外可见分光光度计测二氧化硅胶体浓度

    用紫外可见分光光度计扫描硅溶胶原液的最大吸收波长打给在240nm左右,然后用蒸馏水稀释为各个浓度,测出来的硅胶标线相关性很差,高浓度的吸光度还不如低浓度的吸光度好,而且吸光度很低,280ppm的吸光度还不足0.2,稀释后的最大吸收波长会发生偏移。希望做过胶体测量方面研究的能给些建议。

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