聚集体分析

如图，这幅图到底那个地方暗示具有胶体非均质聚集体？特别是红色线，说是因为聚集发生了散射。求紫外相关大佬帮忙解答一下疑惑？这幅图是测的液紫。

使用水相的GPC已经有一段时间了，但目前还是有问题没有完全解决。最近得到了一个聚丙烯酸（PAA）的测试结果，但是峰形很不好，想请教一下我下一步该如何调节测试参数呢？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205221446_368081_1811392_3.jpg测试使用的仪器为Waters公司的1525型HPLC泵，使用的水柱子为Ultrahydrogel 1000, 250, 120，流动相为0.1 M NaNO3溶液，测试温度为35℃，流动相流动速率为1 mL/min，进样体积为50 μL。得到的结果是这样的：Mw=6172, Mn=1606, Mp=3921,PDI=5.82改样品为Acros公司的产品，分子量为5000左右，但是分布不可能是这么宽的。我根据其它样品的峰形，大概从理论上手动调试了一下曲线，变为下面的形状：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205221454_368085_1811392_3.jpg这样的话，得出的结果为：Mw=4808, Mn=2696, Mp=3921,PDI=1.78这样的结果就很接近真实值了。于是我又把实验的谱峰和手动调制的谱峰放在一块，成为这样子：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205221456_368086_1811392_3.jpg也就是说可能存在聚集体和小分子吸附柱内的情况（我自己的分析），那么是不是说明我加入的0.1 M NaNO3不够呢？出现聚集体和小分子滞留柱内的情况时，应该如何有效地来对测试条件进行调节呢？静静等候各位的宝贵意见和建议啦！！！

炭黑吸油计是德国Brabender仪器公司生产的标准炭黑吸油值检测仪器设备，其可以进行炭黑吸油值数据处理，数据分析及收集等检测功能。[align=center][img=,520,435]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912171736460699_9014_2766_3.jpg!w520x435.jpg[/img][/align][b]炭黑吸油值标准[/b]炭黑吸油值是在规定的试验条件中，100克的炭黑吸收邻苯二甲酸二丁酯的体积数。用来表征炭黑的聚集程度。炭黑吸油值能计算出炭黑聚集体间的空隙体积-炭黑聚集和附聚程度的量度。炭黑用作橡胶填充剂时，其粒子聚集程度影响炭黑硫化胶的使用性能。当和表面积或者粒度指标一起使用时，炭黑吸油值具有很大价值。完全不同的炭黑等级可具有极为相似的炭黑吸油值。将具有相似表面积的炭黑进行比较时，炭黑吸油值可用于预测某些化合物性质。德国BrabenderC型炭黑吸油计国际标准炭黑橡塑分析仪，它可以直接检测炭黑样品的吸油值，不需要做标准值，软件系统可以自动的校准标准值。

原子光谱分析仪器，包括AAS、CVAAS、AFS、ICP-AES和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICP-MS[/color][/url]，它的使用，需要一些附件设备配合，通常有空调机、除湿机、冷却循环水机、空压机等等，其中能产生积尘聚集的部件或地方有哪些，请大家一起来细看：1、空调机的过滤网[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203071949_353119_1766615_3.jpg[/img]2、除湿机过滤网[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203071951_353120_1766615_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203071952_353121_1766615_3.jpg[/img]3、冷却循环水机的过滤网[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203071954_353122_1766615_3.jpg[/img]

结构生物学是用物理学方法在原子水平阐明生物大分子的三维结构，进而诠释生物大分子的生物学功能及其分子机制的科学。近几年，冷冻电镜在生物物理，特别是结构生物学领域掀起了一轮新的革命。冷冻电镜技术包括单颗粒技术和原位冷冻电镜技术，2017年单颗粒技术已获得诺贝尔奖，放眼未来，冷冻电镜更多的是要应用于获取细胞和组织样品的原位信息，尤其是利用冷冻电镜电子断层扫描成像技术（Cryo-ET）获得三维图像，将细胞内的生命过程可视化，在原位对生物大分子的结构进行解析，并进一步分析其与所处周围环境之间的相互作用关系，进而阐明其发挥功能的分子机制。蛋白质聚集是许多神经退行性疾病的典型症状，包括帕金森病（Parkinson’sdisease）、亨廷顿病（Huntington’sdisease）、以及肌萎缩侧索硬化症（amyotrophiclateral sclerosis）等，至今为止还没有针对这类疾病的有效治疗方案，因此了解这类疾病的致病机理尤为重要。在细胞内表达这些疾病相关的蛋白会导致细胞毒性以及形成大的胞内包涵体，然而这些包涵体的具体致病机理还不清楚，而且这些包涵体的组成以及其精细的细胞原位结构信息也无人知晓。为了回答这一科学问题，德国马克斯普朗克生物化学研究所Baumeister教授组的研究人员利用先进的冷冻电镜光电关联技术（Cryo-CLEM）、冷冻聚焦离子束切割技术（Cryo-FIB）、以及冷冻电子断层扫描三维重构技术（Cryo-ET），在小鼠原代神经细胞原位解析了亨廷顿基因1号外显子中衍生的多聚谷氨酰胺（polyQ）所形成的包涵体及其微环境的原位精细结构，相关结果发表在2017年9月的Cell杂志。他们发现polyQ包涵体是由淀粉样肽的纤维构成，与细胞的内膜系统特别是内质网相互作用，使内质网膜发生形变并扰乱其组成，还改变了包涵体周围的内质网膜的动态性。该研究结果暗示淀粉样肽的纤维和内质网的异常相互作用导致了蛋白质聚集物所产生的细胞毒性。[align=center][img=,690,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271518599236_8463_3224499_3.jpg!w690x424.jpg[/img][/align]2018年3月，该研究组在PNAS杂志发表在酵母系统内的polyQ原位分子的结构解析，他们发现在酵母细胞内polyQ蛋白聚集体形成了无定形的包涵体以及少量的纤维丝，并使线粒体和脂滴的形态发生变形。对比这两种不同的机体系统下的差异，我们可以看到同样的polyQ蛋白聚集体在不同的环境中采用了不同的构像并利用特定的机制来靶向不同的细胞结构，从而产生细胞毒性。[align=center][img=,690,770]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519325828_4209_3224499_3.jpg!w690x770.jpg[/img][/align]另外，2018年2月的Cell杂志报道了该研究组在大鼠神经细胞原位解析了一种重复短肽（poly-GA）蛋白聚集体及其微环境的结构，不同于polyQ形成的纤维状结构，poly-GA聚集体是由平面扭曲的长短不一的丝带状结构组成。poly-GA聚集体大量募集了26S蛋白酶体复合物，而其他生物大分子如核糖体或分子伴侣却被排除在聚集体外部。与poly-GA的直接相互作用使蛋白酶体处于失活状态，虽然在整体水平上细胞内的蛋白酶体表达量没有变化，但有功能的蛋白酶体的数量大幅减少，揭示了蛋白质聚集物所产生细胞毒性的另一原因。[align=center][img=,690,378]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519469883_8555_3224499_3.jpg!w690x378.jpg[/img][/align]Baumeister教授组是Cryo-CLEM、Cryo-FIB以及Cryo-ET等关键技术方法发展的开拓者和领航者。Cryo-CLEM-FIB-ET即是在整个细胞内定位荧光标记的特定目标分子，观察其动态变化并在感兴趣的时刻进行快速冷冻，然后转移到冷冻扫描电镜利用冷冻聚焦离子束进行光电关联匹配，精确定位目标分子位置并进行聚焦离子束切割产生一层100-200nm厚的切片，最后利用冷冻电子断层扫描成像从原子分辨率上解析其未被破坏的天然原位结构信息。目前冷冻光电关联的一大瓶颈是光镜的分辨率较低，虽然超分辨光电关联技术在飞速发展，但是其缺点如高强度激光照射可能使样品升温，成像速度慢等还需要一一克服。超分辨光电关联令人振奋的一大潜在应用是来精确指导冷冻聚焦离子束切割，使得大的细胞样品中的任何感兴趣目标分子都能被精确定位切割，进而进行高分辨率数据收集。另外，随着技术进一步发展，用高电子密度标签来标记目标分子并在电镜下直接成像也将会成为可能。结构生物学的终极目标是了解细胞生命过程中每一个分子的结构、功能以及它们之间的相互作用，Cryo-CLEM-FIB-ET则是在结构生物学与细胞生物学之间架起的一座桥梁，让细胞内的微观生命动态过程可视化！[b]参考文献[/b]1. Bauerlein,F. J. B., et al. 2017. In Situ Architecture and Cellular Interactions of PolyQInclusions. Cell 171(1): 179-187.2. Guo, Q., etal. 2018. In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates RevealsProteasome Recruitment. Cell 172(4): 696-705.3. Gruber, A.,et al. 2018. Molecular and structural architecture of polyQ aggregates inyeast. Proc Natl Acad Sci U S A. .4. Wolff, G.,et al. 2016. Towards correlative super-resolution fluorescence and electroncryo-microscopy. Biol Cell 108(9): 245-258.Oikonomou, C. M. 2017. Cellular ElectronCryotomography: Toward Structural Biology In Situ. Annu Rev Biochem 20(86):873-896.来源：【生物成像中心】

专业的炭黑吸油值检测需要专业的技术人员来操作，在不同的环境下，产生的结果也会出现变化，如：温度，空气湿度等自然条件往往成为了限制实验结果的唯一标准。那么，在标准炭黑吸油计检测仪前面，不同温度下的炭黑吸油值，又会出现什么样的变化呢？今天，我们以稳定为标准，在其他环境条件特定下，进行白炭黑吸油值检测实验，看看白炭黑在不同稳定下回出现什么样的变化！1、[b]不同温度下白炭黑的等温吸月兑附曲线[/b]ｔ＝９０℃图１不同温度下白炭黑５０００倍ＳＥＭ观测图由图１可以看出，随着温度升高，得到的白炭黑产品结构更加疏松，其平均粒径较小。高温使得反应器内溶液的黏度降低，分子间布朗运动加剧，此时刚生成的粒子很难聚集成为较大的聚集体，因此制得的产品粒径较小。当反应温度低时，刚生成的粒子易动性较差，容易结合成为较大的聚集体，进而得到的产品粒径偏大。２．２温度对白炭黑比表面积及孔结构的影响氮气吸附法测得的比表面积是指单位质量物料所具有的总面积，是评价白炭黑的重要指标之一，根据ＢＥＴ理论进而可以得到比表面积、孔体积、孔径等指标。[img=炭黑吸油计不同温度下白炭黑的等温吸月兑附曲线,256,156]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903291040514872_9822_3557318_3.jpg!w256x156.jpg[/img]不同温度下白炭黑试样的ＢＪＨ测试结果见表２。表２不同温度下白炭黑的比表面积、孔径及孔体积温度／℃３０５０７０９０比表面积／（ｍ２ｇ－１）３５４．３２１３２６．８７４１１４．４８４４２．３８１平均孔径／ｎｍ２３．８７３３２０．６０７０１５．７８４１１５．１３８８孔体积／（ｍＬｇ－１）２．１１５１．６８４０．４３３０．１６７由表２可以看出，随着温度的升高，比表面积由３５４．３２１ｍ２／ｇ降低至４２．３８１ｍ２／ｇ，孔体积明显减小，孔径也略有减小，对比前面提到的温度对粒径和吸油值的影响，可以看出粒径减小，吸油值增加，但其比表面积减小，吸油值与比表面积呈负相关性。这是由于测定吸油值所用到的邻苯二甲酸二丁酯渗透不到孔道内部，仅包裹在颗粒表面，其仅与颗粒的外表面积相关，因此粒径越小，颗粒外表面积越大。2、[b]不同温度下白炭黑的孔径引J体积分布曲线[/b]ｔ＝９０℃图１不同温度下白炭黑５０００倍ＳＥＭ观测图由图１可以看出，随着温度升高，得到的白炭黑产品结构更加疏松，其平均粒径较小。高温使得反应器内溶液的黏度降低，分子间布朗运动加剧，此时刚生成的粒子很难聚集成为较大的聚集体，因此制得的产品粒径较小。当反应温度低时，刚生成的粒子易动性较差，容易结合成为较大的聚集体，进而得到的产品粒径偏大。２．２温度对白炭黑比表面积及孔结构的影响氮气吸附法测得的比表面积是指单位质量物料所具有的总面积，是评价白炭黑的重要指标之一，根据ＢＥＴ理论进而可以得到比表面积、孔体积、孔径等指标。[img=炭黑吸油计不同温度下白炭黑的孔径引J体积分布曲线,256,135]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903291041428162_7615_3557318_3.jpg!w256x135.jpg[/img]不同温度下白炭黑试样的ＢＪＨ测试结果见表２。表２不同温度下白炭黑的比表面积、孔径及孔体积温度／℃３０５０７０９０比表面积／（ｍ２ｇ－１）３５４．３２１３２６．８７４１１４．４８４４２．３８１平均孔径／ｎｍ２３．８７３３２０．６０７０１５．７８４１１５．１３８８孔体积／（ｍＬｇ－１）２．１１５１．６８４０．４３３０．１６７由表２可以看出，随着温度的升高，比表面积由３５４．３２１ｍ２／ｇ降低至４２．３８１ｍ２／ｇ，孔体积明显减小，孔径也略有减小，对比前面提到的温度对粒径和吸油值的影响，可以看出粒径减小，吸油值增加，但其比表面积减小，吸油值与比表面积呈负相关性。这是由于测定吸油值所用到的邻苯二甲酸二丁酯渗透不到孔道内部，仅包裹在颗粒表面，其仅与颗粒的外表面积相关，因此粒径越小，颗粒外表面积越大，3、[b]不同温度下白炭黑的FTIF谱图[/b]ｔ／℃图４不同温度下白炭黑的热重分析图由图４可以看出，四个不同温度下白炭黑产品热重分析的质量损失分别为１７．８６％，１３．３２％，９．７３％和８．０１％。造成这些质量损失是吸附水分脱离与Ｓｉ—ＯＨ受热分解引起的。ＬＴＺｈｕｒａｖ－ｌｅｖ［１２］得出的结论是表面羟基开始脱除的温度约为１８０℃，因此可将热重区间分为两个阶段：第一阶段（３０～１８０℃）为表面及孔道内部物理吸附水脱除阶段，第二阶段（１８０～１２００℃）为Ｓｉ—ＯＨ受热分解阶段。四个样品Ｓｉ—ＯＨ受热分解阶段的质量损失分别为１３．８１％、１０．０７％、７．９１％和６．４６％。因此可以看出，随着温度的提高，白炭黑表面羟基的含量逐渐减少。[img=炭黑吸油计不同温度下白炭黑的FTIF谱图,256,153]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903291042103782_5387_3557318_3.jpg!w256x153.jpg[/img]不同温度下所得产物的ＦＴＩＲ图见图５。σ／ｃｍ－１图５不同温度下白炭黑的ＦＴＩＲ谱图由图５可以看出，红外光谱曲线上出现了三个明显的特征峰：８００、１１０２和４７２ｃｍ－１，分别是Ｓｉ—ＯＨ的伸缩振动峰，硅氧烷键不对称振动峰和Ｓｉ—Ｏ—Ｓｉ氧桥振动峰。此外，９５８ｃｍ－１处是Ｓｉ—Ｏ—（Ｈ…Ｈ２Ｏ）氧桥弯曲振动峰，３６３０和１６３５ｃｍ－１处是粉末骨架处微孔和颗粒之间毛细作用吸附的自由水分子特征峰。比较四条红外曲线可以看出随着反应温度的升高，８００ｃｍ－１的Ｓｉ—ＯＨ伸缩振动峰和３６３０及１６３５ｃｍ－１的自由水分子特征峰的峰强度趋于减弱，即随着温度升高其Ｓｉ—ＯＨ密度逐渐减少，藏于骨架处及颗粒间的水分4、[b]不同温度下白炭黑的热重分析图[/b]ｔ／℃图４不同温度下白炭黑的热重分析图由图４可以看出，四个不同温度下白炭黑产品热重分析的质量损失分别为１７．８６％，１３．３２％，９．７３％和８．０１％。造成这些质量损失是吸附水分脱离与Ｓｉ—ＯＨ受热分解引起的。ＬＴＺｈｕｒａｖ－ｌｅｖ［１２］得出的结论是表面羟基开始脱除的温度约为１８０℃，因此可将热重区间分为两个阶段：第一阶段（３０～１８０℃）为表面及孔道内部物理吸附水脱除阶段，第二阶段（１８０～１２００℃）为Ｓｉ—ＯＨ受热分解阶段。[img=炭黑吸油计不同温度下白炭黑的热重分析图,256,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903291042422522_2828_3557318_3.jpg!w256x180.jpg[/img]四个样品Ｓｉ—ＯＨ受热分解阶段的质量损失分别为１３．８１％、１０．０７％、７．９１％和６．４６％。因此可以看出，随着温度的提高，白炭黑表面羟基的含量逐渐减少。不同温度下所得产物的ＦＴＩＲ图见图５。σ／ｃｍ－１图５不同温度下白炭黑的ＦＴＩＲ谱图由图５可以看出，红外光谱曲线上出现了三个明显的特征峰：８００、１１０２和４７２ｃｍ－１，分别是Ｓｉ—ＯＨ的伸缩振动峰，硅氧烷键不对称振动峰和Ｓｉ—Ｏ—Ｓｉ氧桥振动峰。此外，９５８ｃｍ－１处是Ｓｉ—Ｏ—（Ｈ…Ｈ２Ｏ）氧桥弯曲振动峰，３６３０和１６３５ｃｍ－１处是粉末骨架处微孔和颗粒之间毛细作用吸附的自由水分子特征峰。比较四条红外曲线可以看出随着反应温度的升高，８００ｃｍ－１的Ｓｉ—ＯＨ伸缩振动峰和３６３０及１６３５ｃｍ－１的自由水分子特征峰的峰强度趋于减弱，即随着温度升高其Ｓｉ—ＯＨ密度逐渐减少，藏于骨架处及颗粒间的水分为了更加了解相关炭黑吸油值检测知识，北京市冠远科技有限公司利用[url=http://www.crowningtech.com/nav/33.html][b]德国brabender仪器公司Absorptometer C型炭黑吸油计[/b][/url]对整体白炭黑在不同温度下所呈现出的不同现状进行分析，形成最终说明文件，帮助更多人了解在实验过程中，不同的因素条件，不同的环境影响，都可能让整个实验的测试毁于一旦，所以，白炭黑吸油值检测对于实验室的环境计环境条件的优化尤为重要。联系电话：13691365936联系人：刘先生地址：北京市朝阳区南沙滩35号科华商务大厦516室

恶性肿瘤是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一，其早期检测及诊断对于降低患者死亡率与改善治疗效果有重大意义。而在众多检测靶点中，对于癌变细胞DNA变化的检测，是最直接、可靠、早期的检测方式之一。 G-四链体是由富含鸟嘌呤的DNA序列形成的一种特殊二级结构，其形成、解聚以及不同结构之间的转变涉及到体内一系列与肿瘤发生发展密切相关的过程的调控。在科技部、国家自然科学基金委和中国科学院的支持下，中科院化学研究所分子动态与稳态结构国家重点实验室唐亚林研究员课题组多年来致力于菁染料超分子聚集体识别和标记肿瘤相关DNA结构的研究工作，在识别特定结构DNA G-四链体方面取得了系列进展（J. Phys. Chem. B., 2008, 112, 8783-8787; Chem. Comm., 2009, 1103-1105）。韦顿-赫德克大学的Hans J. Lipps教授和剑桥大学的Daniela Rhodes教授在其综述中评述了这一成果，“为进一步认识人体端粒序列中的G4结构提供了新的证据和方法”(Trends in Cell Biology, 2009, 19(8), 414-422)。 课题组研究人员将这一检测技术成功应用于实际生理条件，在溶液体系和界面体系实现了对特定DNA G-四链体结构的识别（Anal. Chem., 2010, DOI: 10.1021/ac1017716），在上述工作基础上，该课题组通过对染料分子的结构设计，实现了在分子水平上对平行/混合结构的DNA G-四链体的高特异性、高灵敏性识别。该成果发表在在国际核酸领域最重要期刊之一Nucleic Acids Research（2010, 38, 1022-1033）（IF 7.479）上，受到国内外同行的关注。 这一技术为特定DNA结构的识别与标记提供了新的思路，有望应用于临床肿瘤早期预警与诊断。目前课题组正在与医院合作，将这一技术用于临床样本的检测及相关试验，已取得进展。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011272158_262379_1606681_3.jpg菁染料聚集体在溶液和界面识别特定DNA G-四链体结构示意图