菌种培养容器

在自然条件下，微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。为了研究某种微生物的特性，或者大量培养和利用某一种微生物，必须事先从有关的生态环境中分离出所需的菌株，获得纯培养。获得纯培养的方法，称为微生物的纯种分离法，这一过程称为微生物的分离和纯化。欲从含有多种微生物的样品中直接辨认出，并且取得某种所需微生物的个体，进行纯培养，那是困难的。由于微生物可以形成菌落，而每个单一菌落常常很可能是由一种个体繁殖而成。不同微生物的菌落是可以识别和加以鉴定的。因些将样品中不同微生物个体在特定的培养基上培养出不同的单一菌落，再从选定的某一所需菌落中取样，移植到新的培养基中去，就可以达到分离纯种的目的。这也就是常用纯种分离法的原理。在微生物的分离和纯培养过程中，必须使用无菌操作技术。所谓无菌操作，就是在分离、接种、移植等各个操作环节中，必须保证在操作过程中杜绝外界环境中的杂菌进入培养的容器或系统内，从而污染培养物。具体操作方法见本实验有关部分和教师作示范。获得微生物纯培养的常用方法有稀释平板分离法和平板划线分离法等。有条件的单位也可用显微操纵器单细胞分离法。针对不同的分离材料和条件，可以采用不同的分离方法。一、目的要求1. 初步掌握微生物的分离、培养和菌种保藏的基本方法。2. 练习微生物接种、移植和培养的基本技术，掌握无菌操作技术。二、实验材料样品：新鲜土壤。培养基：灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉琼脂培养基、马铃薯蔗糖培养基（10mL装）。无菌水：带有玻璃珠装有45mL无菌水三角瓶、装有9 mL无菌水的试管。其它：无菌培养皿、无菌吸管、无菌三角玻棒、台天平、记号笔、接种环、酒精灯、火柴、标签纸、胶水、水泡锅。试剂：5000U/mL链霉素液0.5％重铅酸钾液。

请教下各位在做菌种生化实验时，菌种一般是培养多久的

各位老师好，我们这里有几种菌种需要传代，用于菌种斜面的培养基都一样吗？是什么培养基？菌种传代用的液体培养基是一样的吗？

我想了解有关菌种培养的相关最新仪器都有哪些,有哪位朋友能否提供?

问：常用菌种及培养基英文对照答：Bacillus subtilis 枯草芽孢杆菌 Bacillus pumilus 短小芽胞杆菌 Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌 Micrococcus luteus藤黄微球菌 Escherichia coli 大肠埃希杆菌 Saccharomyces cerevisiae啤酒酵母菌 Candida albicans 白色念珠菌 Aspergillus niger黑曲霉 Salmonella paratyphi B 乙型副伤寒沙门(氏)菌 Pseudomonas aeruginosa铜绿假单胞菌 Coliform 大肠菌群 Clostridium 梭菌 Nutrient agar 营养琼脂培养基 Rose Bengal agar Sodium 玫瑰红钠琼脂培养基 Nutrient broth medium营养肉汤培养基 Thioglycollate medium 硫乙醇酸盐流体培养基 Martin medium modified 改良马丁培养基 Bile salt lactose enrichment 胆盐乳糖培养基 0.1％ peptone water medium 0.1% 蛋白胨水 pH 7.0 sodium chloride peptone buffer pH 7.0氯化钠－蛋白胨缓冲液 Lactose bile salt fermentation medium 乳糖胆盐发酵培养基[

准备做发酵腐乳，以前有买一支低温毛霉菌种，但不知如何做三角瓶培养，培养基有麸皮，还要加什么，多少的量，培养的温度，培养时三角瓶口密封吗

微生物检测中冷藏菌种培养基的冰箱用校准吗？还是直接校准温度计，每天对其核查就行？

所测的填埋场渗滤液毒性较强，pH约9.5，氯化物 30000mg/L左右，氨氮上百。测试时，由于缺少菌种，BOD5达不到理想测试数据，请教各位，如何培养能适应渗滤液的菌种呢，或者怎样准确测试该渗滤液的BOD5？

滤膜法测水中总大肠菌群。按标准操作，先用滤膜培养，再挑选符合特征的菌种，进行革兰氏染色镜检，然后对结果呈阴性的，还要进行一次再培养。那么就有以下的问题，如果滤膜上有50个菌种都符合特征。那么我是从中随机选一个作为代表，还是这50个都要进行染色镜检再培养。一个样品申请如此，如果一天几十上百个样品，那将是一个天大的工作量。

微生物菌种是决定发酵产品工业价值的重要因素， 是决定发酵工程成败的核心关键技术之一。只有具备良好的菌种基础，才能通过优化发酵工艺和改进设备获得理想的发酵产品。同时，培养基作为生物工程领域中的基础载体，占据举足轻重的位置。培养基的优劣与生物工程菌体的筛选、工业生产中大规模培养等方面有着密切直接的关系，好的培养基是一个生物制品工业化成功中非常重要的一步。为切实提高工业生产菌种选育水平和培养基优化策略，以解决实际问题为导向，以服务产学研为宗旨。我们特邀请各领域资深实战型专家召开本次交流会；并特别设立专家答疑指导专场，诚邀各有关单位带着您所关心的问题出席本次交流活动，我们力求有问必答，让您不虚此行。相关事项通知如下：[b]一、时间地点[/b] 2019年8月2日-4日（2日代表报到） 杭州市[b]二、组织机构[/b][color=#252525]主办单位：中国食品医药产业研究院　　[/color][color=#252525] 中国微生物产业服务联盟(筹)[/color][color=#252525]支持单位：河南省生物工程学会[/color][color=#252525]华中农业大学生命科学技术学院[/color][color=#252525]工业微生物发酵技术国家工程研究中心[/color][b]三、主题内容[/b]㈠发酵菌种选育与培养基的优化方法和策略㈡培养基配方筛选依据、优化途径及其效果判定标准㈢诱变育种关键技术和新型诱变剂的介绍㈣诱变效果的评价方案设计（即如何剔除伪效果）㈤基因育种与传统育种方法的优势互补方案设计㈥特定突变菌株的诱变筛选方案设计原理及其技术㈦菌种退化的原因分析、预防措施及其复壮技术㈧高通量菌株筛选技术的最新进展及其应用案例㈨生物发酵系统染菌类型分析及有效预防措施㈩膜技术在发酵行业中的应用[b]四、部分拟邀嘉宾张嗣良[/b] 华东理工大学生物工程学院教授国家生化工程技术研究中心（上海）[b]吴松刚[/b] 福建师范大学微生物工程研究所所长工业微生物发酵技术国家工程研究中心首席科学家[b]赵文杰[/b] 中国医药工业研究总院研究员科技部海洋生物技术863专家[b]郭美锦[/b] 华东理工大学生物工程学院教授[b]李江华[/b] 江南大学生物工程学院教授江南大学生物系统与生物加工工程研究室主任。[b]周希贵[/b] 中科院天津工业生物技术研究所研究员[b]刘仲敏[/b] 河南省生物工程学会副理事长兼秘书长发酵工程专业委员会主任委员[b]陈振民[/b] 华中农业大学生命科学技术学院教授 农业农村部微生物产品质量监督检验测试中心总工[b]蔡邦肖[/b] 浙江工商大学教授，膜科学与工程研究所所长……[b]五、参会对象[/b]各相关企事业单位技术部门负责人；各类生物工程企业负责人、生产技术副总、技术骨干、一线工程师、菌种实验室科研人员；大专院校、科研院所的相关专家、学者；氨基酸、乳酸、酶制剂、功能发酵制品、有机酸、酵母等生物发酵企业技术科研人员；生物医药、抗生素和培养基生产企业相关负责人[b]六、相关费用[/b]会务费2000元/人，单位报名三人以上1800元/人。费用包含：专家、资料及交流研讨、会场等。食宿可由会务组统一安排，费用自理。[b]七、其他说明[/b]1、中国食品医药产业研究院官网（www.cfpii.org）可为参会企业免费提供企业展示专栏一页；为科研专家老师提供专家学者专栏，可用于发布论文及成果。2、[color=#252525]企业推广宣传：[/color][color=#252525]①会议协办（赞助金额：2万元）；[/color][color=#252525]②会议背景板（赞助金额：1.5万元）；[/color][color=#252525]③会场展位：8000元（2m*2m）含1个免费代表名额； [/color][color=#252525]资料袋、会议记录本/各5000元（自备、可加印公司名称及LOGO）；[/color][color=#252525]④会刊广告：封面/4000元；封底/3000元；封二或扉页/2000元；封三/1500元；彩色内页/1000元； [/color][color=#252525]⑤大会晚宴、礼品及其他形式赞助，具体事宜协商沟通。[/color][b]八、联系方式[/b]联 系 人：赵妍 手 机：18810543196（同微信）邮箱：[email=878013699@qq.com][u][color=#0000ff]878013699@qq.com[/color][/u][/email]中国食品医药产业研究院[align=center] 中国微生物产业服务联盟[/align][align=center] 2019年6月[/align]

上周五灭菌的营养琼脂培养基一周天后一瓶长菌了？咋回事？请教高手帮忙。 我按照厂家说明书上要求配置和灭菌，115℃灭菌30分钟，灭菌完后等待冷凝了，放在4℃的冰箱中，每次微波炉加热熔化后使用都废弃，这几次实验时，偶尔出现异常现象，查找污染原因，稀释剂没问题，最后拿剩下的两瓶未使用的培养基直接培养，其中一瓶长菌了，我真不晓得咋回事？ 配制培养基那一周做过菌液配制，但是所有的玻璃容器都灭菌的，除了装营养琼脂培养基的瓶子，觉得只是倒培养基，应该不会被菌种污染，所以没有灭菌。一直配营养琼脂培养基的锥形瓶都是这几个瓶子。一直以来我们都是我按照厂家说明书上要求配置和灭菌，115℃灭菌30分钟，灭菌完后等待冷凝了，放在4℃的冰箱中，都没有发生过培养基长菌。

无菌操作技术不仅在微生物学研究和应用上起着举足轻重的作用，在许多生物技术中也被广泛应用，例如转基因技术、单克隆抗体技术等。 无菌室，微生物实验室内专辟的一个小房间，室外设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭，无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢、便于清洗，室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。工作台的台面应该处于水平状态，无菌室和缓冲间都装有紫外线灯（距离工作台面1米），工作人员进入无菌室应穿戴灭过菌的服装、帽子。 超净台，主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃，通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。在条件较困难的地方，也可以用木制无菌箱代替超净台（正面开有两个洞，不操作时用推拉式小门挡住，操作时可以将双臂伸进去；正面上部装有玻璃，便于在内部操作，箱内部装有紫外线灯，从侧面小门可以放进去器具和菌种、细胞株等）。 微生物的培养 在微生物的培养过程中，要保持培养物纯净性；培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。 （一）培养基1.认识培养基的基本组成成分，从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。2.培养基的用途和种类：液体和固体两大类。3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方；尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。4.培养基是否合格（无菌试验）：培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长（液体不变浑浊），说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）无菌技术 1. 无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。日常的生活环境中，每时每刻每处都存在着微生物，任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后，还要始终保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术：彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到外界环境中去（生物安全）。无菌操作非常重要，无论是倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 2. 消毒与灭菌的概念（1）培养细菌用的培养基与培养皿（需要灭菌）（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（需要灭菌）（3）实验操作者的双手（需要消毒）（4）接种环、针、涂布棒：灼烧灭菌（外焰）。 3.倒平板（1）灭菌后，培养基冷却到55 [font='宋

在土壤灭菌实验中，锥形瓶口用这个“无菌培养容器封口膜”封口，有人知道这个东西用英文怎么说吗？

培养基的制备方法 以下为常规方法，如配方中有特殊规定或要求，以配方为第一依据。1.根据配方，计算各种营养成分用量。一般药品可用普通药物天平称量，用量少的药品，可按比例配成高浓度溶液，再按所需量用移液管吸取。称好的药品放入玻璃烧杯或搪瓷杯中。2.在另一容器中将所需量的水(一般可用自来水，有特殊要求时需用蒸馏水)加热，取全量的1/3左右倒入放药品的容器中，用玻璃棒搅拌，待药品全溶后，再将其余热水全部倒入。3.若配制固体培养基，则称取1.5～2％的琼脂放入已溶化的营养液中，继续加热至琼脂全部溶解。加热中随时搅拌，防止溢出或糊底。烧糊的培养基营养物质破坏，并产生有毒物质，不宜再用。4.待溶化的培养基稍冷却后，按配方要求调整pH值。先取10毫升培养基装入试管中，用pH试纸测其自然pH，再用1％NaOH(或1％HCl)调至所需pH，根据用量计算，换用10％NaOH(或10％HCl)调整所配全量培养基的pH。加碱(或酸)溶液时，应边滴加边搅拌，至应加量将近用完时，再次测试，最后调至要求的pH值。5.配好的培养基，根据需要趁热分装至试管或锥形瓶中。分装需用漏斗，以免琼脂粘在管口或瓶口上。装瓶量一般为瓶容量的1/3～1/2；装试管一般为试管高度的1/5～1/4，以免灭菌时培养基上溢，粘湿棉塞。6.用预先制好的棉塞塞住管口或瓶口。棉塞既有利于通气，又有滤菌作用，故松紧、大小应适当，以免使用时影响操作(如图)。最后用牛皮纸或报纸包住棉塞，扎紧在瓶颈或试管上方，以免灭菌时水蒸汽沾湿棉塞或脱落。7.灭菌后取出的固体培养基，根据需要可将试管立即斜放，冷凝后即成斜面培养基，用于菌种扩大培养及保藏；锥形瓶中的培养基，倒入无菌培养皿中，冷凝后即制成平板培养基，可用于菌种的分离、鉴定等。液体培养基冷却后可直接根据需要接入菌种

定期移植法（也称传代培养保藏法）将菌种接种于适宜的培养基中，待生长充分后，于4℃-6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。液体石蜡法（也称矿物油保藏法）是定期移植保藏法的辅助方法。将菌种接种到适宜的斜面培养基上，在最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于4℃-6℃保存的一种保藏方法。瓷珠保藏法将培养好的微生物细胞或孢子制成悬浮液，转入装有无菌多孔玻璃珠（或瓷珠）的无菌瓶中，使其吸附于玻璃珠表面，去除多余的悬浮液，低温冷冻保存的一种菌种保藏方法。-80℃低温保藏将菌种保藏在-80℃冰箱的一种保藏方法。原理是低温条件可减缓微生物的新陈代谢，以达到长期有效的保藏微生物。

工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过5代（从菌种保藏机构获得的标准菌株为第0代），以防止过度的传代增加菌种变异的风险。1代是指将活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养基中培养，任何亚培养的形式均被认为是转种或传代1次。必要时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。工作菌株不可替代标准菌株，标准菌株的商业衍生物仅可用作工作菌株。实验室必须建立和保存其所有菌种的进出、收集、贮藏、确认试验以及销毁的iE录,,应有菌种管理的程序文件（从标准菌株到工作菌株），该程序包括:标准菌种的申购记录；从标准菌株到工作菌株操作及记录；菌种必须定期转种传代，并做纯度、特性等实验室所需关键指标的确认，并记录；每支菌种都应注明其名称、标准号、接种日期、传代数；菌种生长的培养基和培养条件；菌种保藏的位置和条件;其他需要的程序。

作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段.2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个重要组成部分同步启动.作为该项8的一个重要组成部分,微生物菌种资源整理、整合工作同期启动,在此项工作中,中国兽医药品监察所承担了兽医微生物资源整理、整合工作.本所在行业内发展了数家加盟单位,在整理、整合菌种资源的过程中遇到了一些实验室细菌鉴定结果出现偏差的问题.经分析调查,多是由于实验室人员结构以及实验室的硬件水平差别较大等原因,造成实验室间鉴定能力的参差不齐,致使鉴定项目完成情况不尽相同,细菌鉴定结果出现偏差. 细菌鉴定是指将分离培养获得的病原菌,通过纯化培养使其达到不含有其他微生物的纯培养程度,继而进行系统鉴定.而菌种保藏机构在收集一些已经冻干的菌种时,应在开启后经过两代的适应性培养方可进行复核性的系统鉴定.系统鉴定是通过细菌的形态结构、生长特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸测定方法等检测,并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型(群).目前菌种保藏机构通常使用的细菌鉴定方法大致有以下几种:

大家好，我是微生物的新手，我知道菌种的保存方法有很多种，然后我觉得液体石蜡覆盖的保藏法比较适合我公司使用，方法如下：液体石蜡覆盖保藏法：是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。 有点不知道的是，斜面培养物的试管放在培养箱培养一段时间后，拿出来是把石蜡什么覆盖在试管上呢，是把试管上端的棉花上覆盖石蜡还是怎么弄呢？谢谢了！

培养结核杆菌的培养基，从性状上分主要有固体培养基、液体培养基、半流体培养基、固液双相培养基等类型，这些培养基各有特点。　　1.1 固体培养基 最常用的是罗氏（Lownstein-Jenson，L-J）培养基，也是最具代表性的一种，其他的还有小川辰次（Tatsujiogawa）鸡蛋培养基和Middle brook 7H10、7H11等琼脂培养基等。在固体培养基中，由于可以直接观察菌落的形态并可做鉴别用，因此常用于临床标本的分离培养、鉴别、保存菌种及对抗结核药物的敏感性测定等方面，缺点是结核菌生长缓慢。　　1.2 液体培养基 常用的有苏通（Sauton）培养基、Middle brook 7H9等液体培养基。结核杆菌在液体培养基中能够更广泛的接触营养成分，因此在液体中生长相对较快,主要在液体表面生长，搅动时下沉至管底，可获得大量的结核杆菌。主要缺点是：在对临床标本的收集、采样、运输方面有不利的一面；不能根据肉眼观察菌落形态；培养基污染机会多，影响结核杆菌的生长，污染时不易与结核杆菌鉴别，需涂片染色镜检判断结核杆菌是否生长。　　1.3 半流体培养基 改良苏通半流体琼脂培养基是一种人工综合培养基，基质透明，呈半流体状态，生长的结核杆菌形成白色颗粒状菌落悬浮于培养基中段，便于观察。　　1.4 固液双向培养基 Septi-Check AFB双相培养基是国外应用较早的一种培养基，采用BD专利式封闭式固液双相一体化培养基设计。液相为Middle brook 7H9分枝杆菌专用增菌培养基，可迅速繁殖分枝杆菌，固相为3种固体培养基平面：Middle brook 7H11和改良的L-J培养基用于及时将增菌肉汤内分枝杆菌进行分离纯化以获得单个菌落，巧克力琼脂用于早期发现污染菌，避免时间浪费。由于有液相作为基础，因此结核杆菌生长较快，也是一种非常有效的培养基。国内有用平菇制备的平菇双相培养基是利用平菇浸出液为基础，加小牛血清、琼脂等成分而配制的一种培养基，根据琼脂的量不同制成液相、固相培养基。在国内应用较少，主要特点是成本低，制备简单，适合于基层使用，有一定的研究价值。

请教各位前辈菌种传代使用的问题1.菌种必须要第3代开始才能作为工作菌种吗？2.一定要储备标准工作菌株吗？3.菌种传代必须要到期才能传下一代吗？还是培养好后直接可以传下一代？

1、简述菌种的传代系装菌种在使用一段时间后，菌种数量减少，将菌种进行传代培养，增加数量经多次传代后，菌种有衰退、变异现象，对菌种进行复壮，得到纯化菌种。2、菌种传代2.1 仪器及培养基酒精灯、接种环、营养琼脂培养基。2.2 操作步骤2.2.1 将新鲜的无菌斜面琼脂养基、酒精灯、接种环和将要传代的菌种管均放置于洁净工作台上，备用。2.2.2 点燃酒精灯，以左手持菌种管，右手持接种环，将接种环通过火焰消毒俟冷后，从菌种管中挑取菌落。2.2.3 左手立即换取斜面培养基管，以右手无名指和小指拔取棉塞（先转动棉塞后拔去），夹持于手指间。2.2.4 立即将管口通过火焰灭菌后将接种环伸入斜面管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒涂布。2.2.5 轻轻取出接种环，用棉塞塞住管口，立即将接种环通过火焰消毒。2.2.6 将接种好的管口用牛皮纸包位，置于35±2℃恒温箱中培养18-24小时，取出置4-6℃冰箱中保存。3、菌种复壮3.1 仪器及培养基酒精灯、接种环、曙红亚甲蓝琼脂培养。3.2.1 菌种在经过几次传代之后，对其进行革兰氏染色、镜检。3.2.2 染色、镜检后若发现菌种有退化、变异现象，则将其划线接种在相应的培养基平板上，于35±2℃培养18-24小时后，观察生长菌的形态特征。3.2.3 挑取具有典型特征的菌落再次进行划线接种培养后进行革兰氏染色、镜检。3.2.4 选择特征明显，生长良好的菌种，将其接种于营养琼脂培养基斜面，培养后置冰箱中保存。

菌种的超低温冷藏一般选择什么容器？望老师不吝赐教

培养箱是培养微生物的主要设备，可用于细菌、细胞的培养繁殖。原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境，如控制一定的温度、湿度、气体等。霉菌培养箱的运用范围： 霉菌培养箱一般应用于医疗卫生、生物制药、农业科研、环境保护等研究应用领域, 是水体分析、BOD测定，细菌、菌种、微生物的培养、保存和植物栽培、育种实验生物培养的专用设备。 日常维护办法： 1、用霉菌培养箱底部调节螺钉调节高度，使箱体安置平稳。 2、插上电源插座(电源应有良好接地)，按下电源开关，显示屏亮，此时显示屏所显示的是培养箱室内的实际温度和湿度。 3、加湿器的安装：将加湿器的电源插头插在仪器背面的电源插座上，再将仪器的加湿管与加湿器相连，相连处一定要紧密连接。加湿器水箱里加水一定要按说明书上正确操作。 4、温度调节：按下温度设定按钮，数字显示即为设定值，旋转温度调节电位器到所需温度值，松开按钮，数字显示即为培养室内的实际温度。此时如培养箱内的实际温度比设定温度小，加热指示灯亮，加热器开始加热；如培养箱内的实际温度比设定温度大，制冷指示灯亮，制冷系统开始制冷；如加热指示灯与制冷指示灯均暗，则培养箱处于恒温状态。

公司买的是二代大肠埃希菌的冻干粉珠，配有一瓶水剂，没有说明书。用作微生物控制菌检查。请问大家：1.水剂是不是溶菌液？把这个水剂倒入冻干粉里溶解接种，接种至营养琼脂里就是复苏吧？培养出的是二代么还是3代？之前看有些人是要同时接种至营养肉汤和营养琼脂，有什么区别么？那个是不是适用于0代菌种。2.在32.5度培养箱，以前说培养一天，培养2-3天也可以吧。最多可以培养多久？3.培养好怎么保存呢？保存冰箱里？牛皮纸包裹还是甘油混合液？4.培养出的菌种，放冰箱可以放2-3个月么？2-3个月后就灭菌处理了？

[font=仿宋][size=16.0000pt]微生物菌种只有具备良好的性能，才能应用于工业化生产，取得良好的生产效率和经济效益。培养基作为发酵工业的物质基础，也具有举足轻重的地位。培养基的适宜与否与优良菌株筛选、发酵生产具有直接的关系。因此，优良生产菌株选育和培养基优化是发酵工业生产中的核心关键技术。[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt]为切实提高工业生产菌种选育水平和培养基优化策略，以解决实际问题为导向，以服务产学研为宗旨。我们特邀请各领域资深实战专家召开本次交流会；并特别设立专家答疑指导专场，诚邀各有关单位带着您所关心的问题出席本次交流活动，我们做到有问必答，让您不虚此行。现将会议有关事项通知如下：[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt]一、[/size][/font][b][font=仿宋][size=16pt]时间地点[/size][/font][/b][font=仿宋][size=16.0000pt] 20[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt]20[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt]年[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt]1[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt][font=仿宋]月[/font]9日-11日（9日代表报到） [/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt]郑州市[/size][/font][font=仿宋][size=16.0000pt] [font=仿宋]（具体见第二轮通知）[/font][/size][/font][b][font=仿宋][size=16pt]二、组织机构[/size][/font][/b][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]主办单位：中国食品医药产业研究院　　[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525] 中国微生物产业服务联盟[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]协办单位：河南省生物工程学会[/color][/size][/font][font=华文仿宋][size=16pt][color=#252525]华中农业大学生命科学技术学院[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]工业微生物发酵技术国家工程研究中心[/color][/size][/font][b][font=仿宋][size=16pt]三、主题内容[/size][/font][/b][font=华文仿宋][size=16.0000pt]1、发酵菌种选育与培养基的优化方法和策略[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]2、培养基配方筛选依据、优化途径及其效果判定标准[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]3、诱变育种关键技术和新型诱变剂的介绍[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]4、诱变效果的评价方案设计（即如何剔除伪效果）[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]5、基因育种与传统育种方法的优势互补方案设计[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]6、特定突变菌株的诱变筛选方案设计原理及其技术[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]7、菌种退化的原因分析、预防措施及其复壮技术[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]8、高通量菌株筛选技术的最新进展及其应用案例[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]9、生物发酵系统染菌类型分析及有效预防措施[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]10、发酵菌渣再利用、无害化处理及综合利用等技术[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]11、微生物菌种发酵工艺流程优化[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]12、微生物纯粹培养技术、发酵培养基设计与优化及生 [/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]产实践中的应用[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]13、发酵实验、中试与放大过程的优化[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]14、[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]发酵新产品、新工艺、新装备及其应用[/size][/font][b][font=华文仿宋][size=16pt]四、部分嘉宾介绍[/size][/font][/b][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]吴松刚[/font] [font=华文仿宋]国家级专家[/font][/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt]工业微生物发酵技术国家工程研究中心首席科学家[/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt]工业微生物教育部工程研究中心首席科学家[/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]徐亲民[/font] [/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]河北科技大学教授，长期从事生物制药和发酵工程研究，前国家医药管理局发酵工程专家组组长，国家[/font]1035工程项目负责人[/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]赵文杰[/font] [font=华文仿宋]中国医药工业研究总院研究员，从事发酵菌种选育工作[/font]30余年，[/size][/font][font=仿宋][size=15.0000pt]资深[/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt]经验丰富[/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]刘仲敏[/font] [font=华文仿宋]河南省生物工程学会副理事长兼秘书长、发酵工程专业委员会主任委员[/font][/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]武临专[/font] [/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt]中国医学科学院医药生物技术研究所研究员[/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]吉武科[/font] [/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]山东省食品发酵工业研究设计院研究员[/font] [/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt][font=华文仿宋]陈振民[/font] [font=华文仿宋]华中农业大学生命科学技术学院教授[/font][/size][/font][font=华文仿宋][size=15.0000pt]农业微生物国家重点实验室[/size][/font][b][font=华文仿宋][size=16pt]五、参会对象[/size][/font][/b][font=华文仿宋][size=16.0000pt]各相关事业单位部门领导、行业协会、重点实验室科研人员，各大专院校、科研院所的专家、学者，生物发酵、生物制药及食品等行业企业的总经理、生产副总、技术总工，以及发酵工程领域生产、研究、分析、检测、及设备等企业总经理和研发技术人员[/size][/font][b][font=华文仿宋][size=16pt]六、相关费用[/size][/font][/b][font=华文仿宋][size=16.0000pt][font=华文仿宋]会务费[/font]1600元/人，单位报名三人以上1400元/人，河南省生物工程学会会员1200元/人。含培训、研讨、资料及专家、会场等费用。食宿统一安排费用自理。[/size][/font][b][font=华文仿宋][size=16pt]七、企业推广宣传[/size][/font][/b][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]1、会议协办赞助金额 2万元[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]2、会议背景板赞助金额1.5万元[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]3、会场展位（2m*2m）：8000元（含1位代表名额） [/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]4、会议资料袋、记录本、笔（自备）5000元[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]5、会刊广告：封面/4000元 封底/3000元 封二或扉页/2000元[/color][/size][/font][font=仿宋][size=16pt][color=#252525]6、大会晚宴、礼品及其他形式赞助，具体事宜请与会务组协商沟通[/color][/size][/font][b][font=华文仿宋][size=16pt]八、联系方式[/size][/font][/b][font=华文仿宋][size=16.0000pt][font=华文仿宋]联[/font] [font=华文仿宋]系[/font] [font=华文仿宋]人：[/font][/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]赵妍[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt] [font=华文仿宋]手[/font] [font=华文仿宋]机：[/font][/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]18810543196[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]（同微信）[/size][/font][font=华文仿宋][size=16.0000pt]邮箱：[/size][/font][email=878013699@qq.com][font=华文仿宋][size=16pt][color=#0000ff]878013699@qq.com[/color][/size][/font][/email][font=华文仿宋][size=16.0000pt]中国食品医药产业研究院[/size][/font][align=center][font=华文仿宋][size=16.0000pt] [font=华文仿宋]中国微生物产业服务联盟[/font][/size][/font][/align][align=center][font=华文仿宋][size=16.0000pt] 2019年12月[/size][/font][/align]

一、菌种的退化现象 随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转接传代，菌种本身所具有的优良的遗传性状可能得到延续，也可能发生变异。变异有正变(自发突变)和负变两种，其中负变即菌株生产性状的劣化或有些遗传标记的丢失均称为菌种的退化。但是在生产实践中，必须将由于培养条件的改变导致菌种形态和生理上的变异与菌种退化区别开来。因为优良菌株的生产性能是和发酵工艺条件紧密相关的。如果培养条件发生变化，如培养基中缺乏某些元素，会导致产孢子数量减少，也会引起孢子颜色的改变；温度、pH值的变化也会使发酵产量发生波动等。所有这些，只要条件恢复正常，菌种原有性能就能恢复正常，因此这些原因引起的菌种变化不能称为菌种退化。常见的菌种退化现象中，最易觉察到的是菌落形态、细胞形态和生理等多方面的改变，如菌落颜色的改变，畸形细胞的出现等；菌株生长变得缓慢，产孢子越来越少直至产孢子能力丧失，例如放线菌、霉菌在斜面上多次传代后产生“光秃”现象等，从而造成生产上用孢子接种的困难；还有菌种的代谢活动，代谢产物的生产能力或其对寄主的寄生能力明显下降，例如黑曲霉糖化能力的下降，抗菌素发酵单位的减少，枯草杆菌产淀粉酶能力的衰退等。所有这些都对发酵生产均不利。因此，为了使菌种的优良性状持久延续下去，必须做好菌种的复壮工作。即在各菌种的优良性状没有退化之前，定期进行纯种分离和性能测定。 二、菌种退化的原因 菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。当控制产量的基因发生负突变，就会引起产量下降；当控制孢子生成的基因发生负突变，则使菌种产孢子性能下降。一般而言，菌种的退化是一个从量变到质变的逐步演变过程。开始时，在群体中只有个别细胞发生负突变，这时如不及时发现并采用有效措施而一味移种传代，就会造成群体中负突变个体的比例逐渐增高，最后占优势，从而使整个群体表现出严重的退化现象。因此，突变在数量上的表现依赖于传代，即菌株处于一定条件下，群体多次繁殖，可使退化细胞在数量上逐渐占优势，于是退化性状的表现就更加明显，逐渐成为一株退化了的菌体。同时，对某一菌株的特定基因来讲，突变频率比较低，因此群体中个体发生生产性能的突变不是很容易的，但就一个经常处于旺盛生长状态的细胞而言，发生突变的机率比处于休眠状态的细胞大得多，因此，细胞的代谢水平与基因突变关系密切，应设法控制细胞保藏的环境，使细胞处于休眠状态，从而减少菌种的退化

本人刚刚接触菌种，有好多不明白，想请教各位老师1.菌种从冻干粉激活后，转接培养基液体石蜡保存，-20℃可以保存多久？这个应该算第几代？2.以后从这个液体石蜡中挑取部分菌苔出来做传代，其余部分是否可以继续保存？3.甘油保存法和液体石蜡保存法那个更好？保存期更长？

[img=,690,112]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404091628166498_4458_5519762_3.png!w690x112.jpg[/img]1、给定一个洁净室，对其进行浮游菌采样，采样后TSA平皿按上述标准培养，请问培养后菌落里是否可能有致病菌？因为采样器是不分辨空气中细菌种类（全量采集），谁也不知道空气中是否有致病菌，是不是培养后有可能有致病菌。2.还有TSA培养基限制致病菌繁殖吗？3.还有菌落计数后的样品，是否不管其是否潜在涉及致病菌，都要高温灭菌后，当危险废物处理，还是确认不涉及致病菌后，计数后不高温灭菌，当危废处理？不太懂微生物，求教。

大家好，请问有谁做过菌种纯化、菌种保存以及使用方面的工作，如果有的话，能否将工作中的知识分享一下，我主要想知道如大肠杆菌、金葡、沙门氏、李斯特氏、蜡样芽孢杆菌等致病菌常规保存用培养基、条件、注意事项等。如果有同仁在做的过程中有什么问题也都可以拿出来大家讨论一下！我的邮箱为ssling165@126.com，如果那位同仁有资料的话也可以发至我邮箱！

一、菌种的退化现象 随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转接传代，菌种本身所具有的优良的遗传性状可能得到延续，也可能发生变异。变异有正变(自发突变)和负变两种，其中负变即菌株生产性状的劣化或有些遗传标记的丢失均称为菌种的退化。但是在生产实践中，必须将由于培养条件的改变导致菌种形态和生理上的变异与菌种退化区别开来。因为优良菌株的生产性能是和发酵工艺条件紧密相关的。如果培养条件发生变化，如培养基中缺乏某些元素，会导致产孢子数量减少，也会引起孢子颜色的改变；温度、pH值的变化也会使发酵产量发生波动等。所有这些，只要条件恢复正常，菌种原有性能就能恢复正常，因此这些原因引起的菌种变化不能称为菌种退化。常见的菌种退化现象中，最易觉察到的是菌落形态、细胞形态和生理等多方面的改变，如菌落颜色的改变，畸形细胞的出现等；菌株生长变得缓慢，产孢子越来越少直至产孢子能力丧失，例如放线菌、霉菌在斜面上多次传代后产生“光秃”现象等，从而造成生产上用孢子接种的困难；还有菌种的代谢活动，代谢产物的生产能力或其对寄主的寄生能力明显下降，例如黑曲霉糖化能力的下降，抗菌素发酵单位的减少，枯草杆菌产淀粉酶能力的衰退等。所有这些都对发酵生产均不利。因此，为了使菌种的优良性状持久延续下去，必须做好菌种的复壮工作。即在各菌种的优良性状没有退化之前，定期进行纯种分离和性能测定。