抗原定性

[font=宋体]在免疫学的世界中，抗原的选择是至关重要的。近年来，许多研究者提出了各种不同的抗原类型以供选择，其中最引人注目的两种是蛋白抗原和多肽抗原。这两种抗原各有其独特的优势和特点，那么，如何在这两者之间做出选择呢？本文将为您详细解析两者的差异以及应用场景，帮助您在免疫学研究中做出最佳的选择。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]①为什么选择蛋白抗原免疫？[/font][/b][font=宋体]您需要一种适用于多种应用的抗体[/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低，易于表达和纯化，且无毒[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用于以下应用：[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IP/ChIP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]……[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②为什么选择多肽抗原免疫？[/b][/font][font=宋体][font=宋体]您的预期抗体应用仅包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]或翻译后修饰检测。[/font][/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性，很难或不可能表达和纯化。[/font][font=宋体]适用于以下应用：[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PTM Detection[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。[/font] [font=宋体]当目标蛋白的获取受限时，多肽是一种合适的解决方案。[/font] [font=宋体]它们也是检测靶蛋白翻译后修饰（[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]）位点的理想抗原，因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点，但是当产生[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]抗体时，有限数量的表位使得发现仅针对[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]位点的反应性抗体更易。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]多肽抗原的局限性：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力，但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体，而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如，抗多肽抗体可以应用于[/font][font=Calibri]Western blots[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]。然而，线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位，以确保阳性结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services][b]蛋白抗原和多肽抗原制备服务[/b][/url]，有需求可以直接咨询，详情请看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。当目标蛋白的获取受限时，多肽是一种合适的解决方案。它们也是检测靶蛋白翻译后修饰（[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]）位点的理想抗原，因为它们限制了潜在表位的数量。[/font][/font][font=宋体][b]为什么选择蛋白抗原免疫？[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]您需要一种适用于多种应用的抗体[/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低，易于表达和纯化，且无毒[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用于：[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IP/ChIP[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Sandwich ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IF/Flow cytomety[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Functional Assay[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IHC[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Direct Bind ELISA[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白抗原成功率高，此外多克隆抗体服务保证免疫原蛋白检测[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]阳性，且快至[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]周交付。更重要的是，我们可以从您的目标序列开始，服务包含蛋白抗原生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]为什么选择多肽抗原免疫？[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]您的预期抗体应用仅包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]或翻译后修饰检测。[/font][/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性，很难或不可能表达和纯化。[/font][font=宋体]适用于以下应用：[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]PTM Detection[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。[/font] [font=宋体]当目标蛋白的获取受限时，多肽是一种合适的解决方案。[/font] [font=宋体]它们也是检测靶蛋白翻译后修饰（[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]）位点的理想抗原，因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点，但是当产生[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]抗体时，有限数量的表位使得发现仅针对[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]位点的反应性抗体更易。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]多肽抗原的局限性：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力，但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体，而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如，抗多肽抗体可以应用于[/font][font=Calibri]Western blots[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]。然而，线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位，以确保阳性结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services][b]蛋白抗原和多肽抗原制备服务[/b][/url]，详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services[/font][/font]

[font=宋体]在生物学和医学领域，抗原与抗体之间的结合反应是极为重要且复杂的过程。这种反应不仅关乎免疫系统的正常运作，而且在诊断、治疗等多个领域具有广泛的应用。本文将详细探讨抗原抗体结合反应的原理及其背后的生物学意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、抗原与抗体的基本概念[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原，通常是指能够刺激机体产生特异性免疫应答的物质。它们可能是外来的微生物、毒素，也可能是机体自身的异常成分。抗体，则是免疫系统在受到抗原刺激后产生的特异性免疫球蛋白，能够与抗原发生特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、抗原抗体结合的结构基础[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体之间的结合，依赖于它们分子间的结构互补性和亲和性。这种互补性主要源于抗原的表位和抗体的结合部位之间的匹配。抗原的表位，即其表面能够与抗体结合的区域，通常是特定的化学基团或空间构象。而抗体的结合部位，即其能够与抗原结合的区域，由重链和轻链上的可变区组成，形成了特定的空间结构，能够与抗原表位进行精确的结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、抗原抗体结合的动力学过程[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应通常可以分为两个阶段。第一阶段是抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应速度极快，仅需几秒钟即可完成。这是因为抗原抗体之间的结合是高度特异性的，一旦找到合适的配对，它们会迅速结合形成抗原抗体复合物。第二阶段是可见反应阶段，此时抗原抗体复合物在环境因素的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应。这一阶段的反应速度较慢，往往需要数分钟至数小时。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、抗原抗体结合反应的意义[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应在生物学和医学领域具有广泛的应用。在免疫学中，它是机体免疫系统识别和清除外来抗原的基础。在医学诊断中，利用抗原抗体反应可以进行疾病的快速、准确诊断。例如，利用单克隆抗体技术可以检测乙型肝炎等病毒。此外，抗原抗体反应还被广泛应用于治疗领域，如利用载药单克隆抗体进行肿瘤的靶向治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]五、总结[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应是生物学和医学领域的重要反应之一，其原理涉及到分子间的结构互补性和亲和性、反应动力学等多个方面。对这一反应的研究不仅有助于我们深入理解免疫系统的运作机制，也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法和手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面，一是反应物自身的因素；二是反应环境条件。　　　　（一）反应物自身的因素　　　　1.抗体：不同来源的抗体，反应性各有差异，抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应，为提高试验的可靠性，应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成，单克隆抗体不适用于沉淀反应。　　　　2.抗原：抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应，可溶性抗原出现沉淀反应，单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。　　　　（二）反应环境条件　　　　1.电解质：抗原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。　　　　2.酸碱度：抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6～9进行，有补体参与的反应pH为7.2～7.4，pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。　　　　3.温度：在一定范围内，温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。一般为15℃～40℃，常用的抗原抗体反应温度为37℃，温度如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏。此外，适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。

实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体，也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1) 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。

一、为什么要进行抗原修复？ 组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。在免疫组化染色后的镜下观察中，有发现这样的结果，阳性物反应不强，时隐时现，表达不均匀，有时可出现假阴性，这是因为：1. 组织在用甲醛固定的过程中所形成的醛键可封闭抗原的决定族。甲醛与组织蛋白质类的反应是多样而复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键8。这也是甲醛的一个作用，因为它是一种聚合固定剂，因而能在相邻的蛋白质键间形成桥键的作用。2. 甲醛在保存进程中会形成羟甲基，也可封闭抗原决定族。据French和Edsall的研究认为，最常遇到的甲醇反应，就是加到一个含反应性氢原子的化合物中，形成一个羟甲基化合物。3. 在组织固定过程中，甲醛与蛋白质发生交联，形成醛交联蛋白，这种化合物封闭了抗原，使之无法表达出来。为了解决上述存在的问题，更好地暴露出抗原，将其很好地显示出来，目前世界上公认的方法就是必须进行抗原修复。二、用什么方法进行抗原修复？至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行，我们则对每种病例每项检测，都要求必须进行抗原修复，以达到抗原全面表达的最佳状态。1. 真空负压抗原修复法：① 切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，真空负压干燥箱预先调至95 ℃，真空负压处理10分钟。⑤待修复注降至室温的一，PBS洗3次，随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。2. 微波辐射抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④ 0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，于微波炉内微波辐射10分钟，如检测Er和Pr则需要20辐射分钟左右。⑤待修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学的染色方法进行染色。3. 高压抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④切片放入抗原修复液中，边同容器放入高压锅中加热至沸腾。盖上压力阀至喷汽后持续1-4分钟。⑤待修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。4. 隔水热抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④切片放入0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH0.6)中，边同容器一起放入水溶锅中加热，其间应不断用温度计测其温度，待抗原修复液的温度达到有效温度后(92 ℃)。即开始计时，持续40分钟。⑤待抗原修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选定好的免疫组化染色方法进行染色。5. 电炉加热抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④ 将切片放入抗原修复液中于电炉上加热，不时用温度计测量温度，当达92 ℃后，即可拔离电源，当温度低于92℃时，再插上电源，如此反复持续至10分钟左右。⑤待抗原修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选定的免疫组化染色方法进行染色。

一、为什么要进行抗原修复？ 组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。在免疫组化染色后的镜下观察中，有发现这样的结果，阳性物反应不强，时隐时现，表达不均匀，有时可出现假阴性，这是因为：1. 组织在用甲醛固定的过程中所形成的醛键可封闭抗原的决定族。甲醛与组织蛋白质类的反应是多样而复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键8。这也是甲醛的一个作用，因为它是一种聚合固定剂，因而能在相邻的蛋白质键间形成桥键的作用。2. 甲醛在保存进程中会形成羟甲基，也可封闭抗原决定族。据French和Edsall的研究认为，最常遇到的甲醇反应，就是加到一个含反应性氢原子的化合物中，形成一个羟甲基化合物。3. 在组织固定过程中，甲醛与蛋白质发生交联，形成醛交联蛋白，这种化合物封闭了抗原，使之无法表达出来。为了解决上述存在的问题，更好地暴露出抗原，将其很好地显示出来，目前世界上公认的方法就是必须进行抗原修复。二、用什么方法进行抗原修复？至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行，我们则对每种病例每项检测，都要求必须进行抗原修复，以达到抗原全面表达的最佳状态。1. 真空负压抗原修复法：① 切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，真空负压干燥箱预先调至95 ℃，真空负压处理10分钟。⑤待修复注降至室温的一，PBS洗3次，随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。2. 微波辐射抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④ 0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，于微波炉内微波辐射10分钟，如检测Er和Pr则需要20辐射分钟左右。⑤待修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学的染色方法进行染色。3. 高压抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④切片放入抗原修复液中，边同容器放入高压锅中加热至沸腾。盖上压力阀至喷汽后持续1-4分钟。⑤待修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。4. 隔水热抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④切片放入0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH0.6)中，边同容器一起放入水溶锅中加热，其间应不断用温度计测其温度，待抗原修复液的温度达到有效温度后(92 ℃)。即开始计时，持续40分钟。⑤待抗原修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选定好的免疫组化染色方法进行染色。5. 电炉加热抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④ 将切片放入抗原修复液中于电炉上加热，不时用温度计测量温度，当达92 ℃后，即可拔离电源，当温度低于92℃时，再插上电源，如此反复持续至10分钟左右。⑤待抗原修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选定的免疫组化染色方法进行染色。

现在不管 国外 还是国内，在生物原料方面，成品的抗原抗体以及定制的抗原抗体等都发展得越来越好。抗体抗原种类可谓是五花八门，琳琅满目，而且非技术人员选择采购也很麻烦。这里列举少数最热门的一部分

内容很全很细，有工作与抗原抗体相关的同仁们都可以看看

用途： 本试剂盒采用ELISA法可定性、定量检测HIV-1p24抗原，适用于血清、血浆及HIV培养上清标本，仅限于HIV辅助诊断和实验室研究。测定原理：本试剂盒采用双抗体夹心法测定HIV-1p24抗原，即将抗HIV-1p24的单克隆抗体包被于微孔板，待测样本加入已包被的反应孔内孵育，若标本中含有HIV-1p24抗原，则该抗原与孔内的抗体形成抗原抗体复合物，加入酶标抗HIV-1p24单抗，孵育后，酶标抗体与抗原抗体复合物上的抗原结合，再与底物反应显色。最后用硫酸终止反应，用酶标仪测定OD值，确定反应的阴阳性。试剂盒组成：1、微孔反应板 8孔×12 3、阴性对照 6ml 5、酶结合物 13 ml 7、显色剂 7ml 9、终止液 6ml2、裂解液 3.5ml 4、阳性对照 1ml 6、20倍浓缩洗涤液 50ml 8、底物液 7ml 测定步骤：1、配液：将50 ml浓缩洗涤液（20倍）用蒸馏水稀释至1000 ml。2、定量HIV-1p24系列稀释：阳性对照（PC）含有320pg/ml的重组HIV-1p24抗原，用阴性对照(NC)倍比系列稀释五个浓度的阳性对照（稀释方法见下表），如果定量测定的样品为细胞培养上清液，则需用未感染的细胞培养上清液进行系列稀释抗原，每个稀释浓度做两个复孔。表1http://www.gene-bio.com/images/cp/HIV-1p24.jpg3、编号：将样品对应孔按序编号，每板应设阴性对照3孔、阳性对照两孔、空白 1孔，如果测定样品为细胞培养上清液 ，则需用未感染的细胞培养上清液做阴性对照3孔。4、每个反应孔中加入25μl裂解液。5、将100μl待测样品或对照品加入到有裂解液的反应孔中，振荡30-60秒混匀，置37℃孵育1小时。6、洗板5次，拍干后每孔加入酶结合物125μl/孔（空白孔不加），置37℃孵育45分钟。7、洗板5次，拍干后每孔加入底物（底物液：显色液=1：1混合）125μl/孔。置37℃孵育15—30分钟。8、加入终止液50μl/孔。9、用酶标仪读数，波长450nm(建议使用双波长酶标仪，参考波长630nm)。结果判定：1、阴性对照的正常范围：正常情况下，阴性对照OD值应≤0.150。2、阳性对照的正常范围：正常情况下定性测定(160pg/ml) 阳性对照OD值≥1.000；定量测定80 pg/ml阳性对照OD值≥0.6503、临界值计算：测定样品为血清或血浆时临界值=阴性对照平均值+0.071；测定样品为细胞培养上清液则临界值=细胞培养上清液阴性对照平均值+0.0714、阳性定性判定：测试标本的OD值小于临界值则为阴性；测试标本的OD值大于或等于临界值则为阳性。5、阳性定量判定：参照如下图表的方法，绘出标准曲线并进行定量判定。http://www.gene-bio.com/images/cp/HIV-1p24_1.jpg表2http://www.gene-bio.com/images/cp/HIV-1p24_2.jpgNC1=0.033 NC2=0.032 NC3=0.034 NCx=0.033Cut off=0.033+0.071=0.103注意事项：1、从冷藏环境取出的试剂盒内全部成份及待测标本应在室温平衡30分钟后方可使用，余者应及时密封保存于冰箱中，已备后用（一般不超过3天）。2、洗涤液若出现结晶，可置37℃使之溶解后方可使用。3、结果判定必须以酶标仪读数为准，建议使用双波长450nm/630nm检测，并在反应终止后20分钟内完成。4、本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室 。5、检测必须符合HIV实验室管理规范和生物安全守则的规定，严格防止交叉污染。操作时须带手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染务处理，终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。6、加液时必须用加液器，并经常校对加液器的准确性。7、洗涤时 各孔均需加满洗液，防止孔口内有游离酶存在。使用洗板机洗涤应设定30-60秒的浸泡时间。8、操作应严格按说明书进行，不同批次试剂不得混用，封板膜为一次性用品，不能重复使用。储存条件：2-8℃避光保存。 有效期：12个月。

[font=宋体]抗体和抗原是生物学中重要的概念，它们在免疫学、医学和生物学等领域都有广泛的应用。抗体和抗原具有一些显著的区别，这些区别主要体现在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面。本文将对这些差异进行详细的阐述。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先，让我们了解一下抗体的化学结构。抗体是一种免疫球蛋白，具有两条相同的抗原结合簇。抗原决定簇是抗体与抗原结合的关键部位，它们在空间结构上呈现出一定的形状和大小，能够与抗原的特定部位精确结合。然而，抗原通常具有多个抗原决定簇，这使得抗原能够与多种抗体结合，从而在免疫反应中发挥重要作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]接下来，让我们了解一下抗原的产生方式。抗原是能够诱发免疫应答的分子，通常是由病原微生物产生的一种外源物质。例如，细菌的细胞壁、病毒的包膜蛋白等都可以作为抗原。与此相反，抗体是由淋巴细胞产生的，特别是浆细胞。在接受抗原的刺激后，浆细胞会分化为能够产生抗体的浆细胞，从而在体内产生大量的抗体，以应对抗原的侵袭。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]此外，抗体和抗原在溶解性上也存在显著差异。抗原的溶解性通常受到[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]和电解质浓度的 影响，而抗体的溶解性则与抗原无关。这一差异在生物学和医学领域具有重要的意义。例如，在疫苗研发中，科学家需要了解抗原的溶解性，以确保疫苗的有效性。而在抗体治疗中，医生需要了解抗体的溶解性，以确保抗体能够有效地发挥作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]另外，抗体和抗原的特异性也存在明显的差异。抗原的特异性取决于抗原决定簇的立体构型和间距，这意味着不同的抗原决定簇可以激发不同的免疫应答。与此相反，抗体的特异性取决于抗体的独特型。独特型是指抗体的抗原结合部位的空间结构，它决定了抗体与抗原的特异性结合。因此，不同的抗体可以与不同的抗原结合，这使得抗体在免疫应答中具有多种不同的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最后，抗体和抗原在效应功能上也存在显著的差异。抗原主要是刺激免疫系统产生抗体，从而在体内产生免疫应答。然而，抗体在与抗原结合后，能够激活补体系统，促进吞噬细胞对病原微生物的吞噬，从而发挥效应功能。此外，抗体还可以通过调理作用促进吞噬细胞的吞噬，以及通过[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]作用（抗体依赖的细胞毒性作用）诱导细胞对靶细胞的杀伤作用。这些效应功能使得抗体在免疫防御和免疫治疗中具有广泛的应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述，抗体和抗原在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面存在显著的区别。这些区别决定了抗体和抗原在免疫应答中的不同作用和应用。在生物学、医学和免疫学等领域中，了解抗体和抗原的区别对于理解免疫应答的机制、疫苗研发、抗体治疗等方面都具有重要的意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着抗体制备技术的发展，现在已有多种方法可用于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production][b]抗体制备[/b][/url]。可使用体外杂交瘤细胞制备单克隆抗体。一般在兔体内[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-production][b]制备多克隆抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已成为行业领先的抗体制备公司。我们可提供克级数量的定制抗体生产，交货迅速，价格优惠。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，成品产品即可送到您家门口。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

因实验原因，需要买一对抗原/抗体，什么抗原/抗体都可以，效价要高一些，抗体要纯一些，谁那里有在下面电子邮件发个信息吧happybsky@163.com

本公司因发展需要考虑研发生产抗原、抗体，想问一下这样公司需要先拥有何种资质才可以顺利进行生产？

下列哪种方法可测定细菌的结构抗原()。 A、免疫化学 B、放射免疫 C、免疫血清学 D、电子显微镜

[em14] 证明抗原与抗体特异性结合的常用方法是什么？

请教：国标 GB 4789.4-2010的抗原表中，H抗原表中的 第1相、第2相是什么意思？

HLA-肽复合物，想检测这个抗原肽，样本没有完全纯化，有好心人帮忙吗？??实验停滞不前了

求助：如何用反相柱分离检测乙肝表面抗原？不知道有没有哪位大大做过用反相分析乙肝表面抗原纯度，如有，希望给点经验，呵呵。

来源：中国化学制药协会 中国第一个超级抗原抗癌生物制剂今天在北京宣告研制成功。 这一享有独立知识产权的制剂的临床试验显示，它可以使癌瘤缩小或消失，总有效率达百分之四十二点五。 专家称，目前国际上对超级抗原研究已进入二期临床试验阶段，但尚无正式药物出现。而该项目的成功使中国在利用超级抗原治疗癌症领域至少领先国外同行三年，同时丰富了超级抗原理论，并纠正了对超级抗原的部分错误认识。 在此间举行的“中国知识产权---超级抗原科技成果学术论坛暨国际合作项目签约仪式”上，研制企业沈阳协和集团与美国、日本、加拿大、马来西亚等国的相关机构签订合作协议，以期共同开发国际市场。 超级抗原是瑞典科学家怀特于一九八九年首次推出的新免疫学名词，是目前世界上已知最强大的免疫细胞激活剂。其用量微小，却能以普通抗原三至五万倍的速度极活细胞。根据十年超万例的观察，抗癌总有效率达百分之九十七点四，抑癌率达百分之四十二点五。

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px]国家药监局13日批准5家新冠抗原产品的注册申请，目前共有10款新冠抗原自测产品正式上市。[/size][/font]

今天中午，在虹口区北外滩街道，居委工作人员和志愿者通过楼宇对讲机通知居民分批下楼，领取新冠病毒抗原检测试剂。在居民领取同时，志愿者提醒该试剂采用鼻拭子采样，并提醒今天下午4点返回试剂。新冠病毒抗原检测.你了解吗？

自上海封控以来，累计做了五十几次核酸，五十几次抗原，早饭核酸，晚饭抗原，有时候一天几次抗原，真的是魔怔了，有必要吗？

为获得某蛋白（A）的特异性抗体，你用该蛋白免疫家兔，你将如何监控针对蛋白（A）抗原产生抗体的动态过程？（简述所选择方法的原理及步骤）期待您的解答，非常感谢。

目前我们公司已经开发出兽药残留方面的小分子抗原抗体，但是远远不能满足市场需求，请问各位同行大侠，哪里能买到相关的抗原抗体。

有用CE做抗原和抗体分离分析的吗？大家可以交流讨论我的QQ是441874556

哪个品牌的抗原检测准确度高？

核酸检测和抗原检测哪个更准确？

谁知道量子点荧光微球偶连BSA完全抗原的方法？有没有相关文章推荐一下吗？

3、 取血蓝蛋白(lemocyanin) 25mg, 溶于10mmol/L PBS （pH8.0）液中（III液） 4、 将II液与III液混合，在磁力搅拌下逐滴加入I液（余下0.5ml） 5、 室温下避光搅拌1小时，逐滴加入余下的I液 6、 4度搅拌12小时 ;7、 静置10小时（4度） 8、 有蒸馏水使之充分透析（约48小时），得免疫原。 3、孕酮与与β-半乳糖苷酶偶联的N-羟琥珀酰亚胺酯法 1、 用二垩烷(dioxane)溶解孕酮-11-半琥珀酸酯，配成浓度为100m mol/L的溶液。 2、 加羟琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide) 100 m mol/L 和 DCC（二环已基碳化二亚胺），200 m mol/L, 4度反应16小时。 3、 用簿层扫描方法纯化(氯仿：水=9：1) 4、 按孕酮/酶摩尔浓度比约为10的比例，将上述溶液加入到酶液（用pH7.4，浓度50 m mol/L的磷酸缓冲液溶解）中。 5、 （二）含有氨基或可还原硝基半抗原的偶联 1、芳香胺类半抗原与蛋白质重氮化偶联的操作步骤 6g1、 用0.1 mol/L HCl溶液配制 4 m mol/L浓度的半抗原。 2、 滴加1％NaNO2(过量)，4度持续搅拌。NaNO2的加入量可用淀粉-碘化物试纸或在白色磁砖上加1％淀粉和50m mol/L KI进行监控。游离亚硝酸可将氧化物氧化成碘，碘再与淀粉反应变成蓝黑色。 3、 溶液变成蓝黑色后，继续反应15分钟。4、 用pH9.0、浓度为200m mol/L的硼酸或碳酸缓冲液溶解蛋白。 5、 边搅拌，边加入重氮化的半抗原（防止局部发生酸过量现象），调节pH到9.5。 6、 冰箱中搅拌反应2小时，不断调节pH到9.0。 7、 用PBS透析2天 8、 -20度保存（浓度为20mg/mL） 双功能的酰亚胺酯(imidate esters)可以氨基反应，形成脒。例如：用二甲基已二酰亚胺酯(dimethyladipimide)将去甲基三正喋呤(desmethylmortriptyline)与β-半乳糖苷酶偶联。2、、应用双功能酰亚胺酯（imidate esters）制备去甲基三正喋呤-与β-半乳糖苷酶标记特的操作步骤1、 用含5％（W/V）N-乙基吗啉的无水甲醇0.4ml,在室温下溶解570ug去甲基三正喋呤和488ug 二甲基已二酰亚胺酯(dimethyladipimide)(A液) 2、 取与β-半乳糖苷酶 100 ug, 溶于pH9.9的100 m mol/L碳酸缓冲液（含MgCl2 10m mol/L,2-巯基乙醇 10 m mol/L 0.1ml(B液)3、 将A液倒入B液。4、 20度反应90分钟后，加含NaCl 100 m mol/L, MgCl2 10 m mol/L和2-巯基乙醇 10 m mol/L、pH7.5的Tris-醋酸缓冲液(50m mol/L) 1ml, 终止反应。 5、 过sephadex G-25, 去除小分子物质，得酶标记物（约75％的酶与半抗原结合，但用三正喋呤代替去甲三正喋呤(demethylmortriptyline )进行偶联，则只有15％的酶与之结合。 （三）含巯基半抗原的偶联 可用马来酰亚胺方法与蛋白偶联。此外，将载体蛋白用溴乙酰胺(bromoacetamide)激活。或将载体蛋白与半抗原在pH4.0的醋酸缓冲液中，通过过氧化氢的作用形成二硫键，也可以将半抗原连接到蛋白质分子上。 （四）含羟基的半抗原偶联 醇类羟基通过形成半琥珀酸酯转化为羧基的操作步骤 1、 15g 2,2,2-三氯乙醇（2,2,2-trichloroethanol）,12g 琥珀酸酐(succinic anhydride)和8.7ml 三乙基胺(triethylamime)用100 ml乙酰乙酯溶解。 2、 加热回流1小时。 3、 减压蒸馏去溶剂，,残余物用5% NaHCO3水溶液溶解。4、 用乙醚洗涤两次，然后用H2SO4进行s酸化（pH到2.0）. 5、 用水洗涤固形物（为三氯乙基半琥珀酸酯）两次，用氯仿-已烷使其结晶（产量约75％，熔点88-89度） 6、 取2.5g 半琥珀酸酯溶于6.5ml 亚硫酰氯(thionyl chloride)中，65度加热30分钟。 7、 减压蒸发，干燥1小时（高度真空条件下）。 8、 将上述产生（2，2，2-三氯忆基琥珀酰氯）溶于15ml N,N-二甲基-乙酸乙酰胺(N,N-dimethylethylacetamide)中，室温搅拌反应2小时。 9、 65度真空蒸发后，用异丙醇使结晶析出来（得盐酸化的结晶---5`-酯约84％，熔点160度）。 10、用溶于二甲基甲酰胺中的锌和醋酸解离三氯乙酯，得f半抗原-半琥珀酸酯，这样引和的羧基可与蛋白质偶联（如用碳化二亚胺化）。 半抗原用NaIO4氧化其中的糖苷醇后再与蛋白质偶联的操作步骤 1、 20mg 腺苷溶于1ml 100m mol/L NaIO4溶液中，4度避光反应30分钟。2、 加1滴乙二醇(得A液) 3、 将A液加入到β-半乳糖苷酶液（20mg/ml,用150m mol/L NaCl,10m mol/L MgCl2水溶液溶解，用3％K2CO3调节pH至9.0）中 4、 4度反应2小时，期间不断调节pH9.0 5、 加入临时配制的50 mg/ml NaBO4溶液，用量为反应体积的1/10。 4度反应过夜。 6、 用含有MgCl2 10m mol/L,2-巯基乙醇 10 m mol/L、 NaCl 100 m mol/L的50 m mol/L磷酸缓冲液(pH7.4)透析(更换透析液数次) （五）含酮基或酮基半抗原的偶联是将酮基经羟胺类化合物处理变成肟类化合物，再进一步将肟类化合物中的羟基，衍变成羧基化合物，再进一步进行含羧基半抗原的偶联操作。这类羟胺类化合物主要有：氨氧乙酸aminoxy acetic acid 或羧甲氧胺carboxymethoxyl amine 或者盐酸羟胺酮基的类固醇分子中引入羧基的操作步骤 1、 在200ml 乙醇中，加入O-(羧甲基)羟胺 （O-(carboxyl)hydroxylamine）和酮基半抗原，使其浓度分别为10m mol/L 和4m mol/L H 2、 加热回流90分钟 3、 旋转蒸发，减少容积，然后加水至40ml，用乙醚抽提 4、 用水洗涤乙醚抽提物，用Na2SO4干燥成白色粉末。（六）、其他半抗原的偶联 虽含有游离基团，但因这些基团对于维其生物活性十分重要，因些不能直接用来与载体蛋白 偶联8制备雌二醇-6-肟的操作步骤 a、 雌二醇二醋酸盐的制备 1、 1g雌二醇溶于14ml 吡啶及3.5ml 醋酐中2、 加热回流1小时，冷却后倾入冰水中。 3、 收集白色晶体，得产物约1.1g（熔点126到127度）b、 雌二醇-6-酮-二醋酸盐的制备 4、雌二醇二醋酸盐1.1g，滴加冰醋酸3.8ml 溶解后加含0.93g CrO3的含水冰醋酸6.35ml (H2O:Hac=0.75:5.6) 5、室温搅拌1小时，静置24小时 6、用水稀释，用乙醚提取4次 7、用蒸馏水洗2次8、减压蒸馏，得结晶油状渣物。 9、用90度烘干20分钟，得粗制品约500mg 10、用11ml 无水乙醇溶解粗制品，再加1.1ml 冰醋酸及1.5g吉纳你特T试剂(Girad T)，回流1小时。 11、冷却后，用冰致冷的蒸馏水稀释，用2.5mol/LNaOH调节pH至6.0-6.2. 12、用乙醚抽提3次，弃去乙醚。 13、水层用浓盐酸酸化15、用乙醚抽提3次。16、合并乙醚抽提液，用0.125mol/L碳酸钠溶液洗1次，用蒸馏水洗3次。

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