孔雀石绿残留

近期在进行一些水产品中孔雀石绿残留量的检测，采用的是GB/T 19857-2005水产品中孔雀石绿和结晶紫的测定。采用鲜活水产品那个前处理方法，称取5g样品，加入内标，用11mL乙腈匀浆提取，残渣再用11mL乙腈提取，合并后定容至25mL。取5mL过中性氧化铝柱，再用4mL乙腈洗柱，吹干，定容。同时进行空白实验。1、为什么此方法孔雀石绿-D5同位素内标的损失非常大，进行数十次实验，损失都在95%以上。而隐色孔雀石绿-D6损失略低，约70%。而空白实验却是正常的。2、同一样品前后两次连续进样，响应相差很大，什么原因？3、孔雀石绿在仪器中的残留是不是比较明显？4、许多样品中检出孔雀石绿，这个正常吗？

[color=#dc143c][size=2]维权声明：本文为rogersw原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/size][/color][align=center][b][size=5][font=宋体]水产品中孔雀石绿[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]隐色孔雀石绿残留量[/font][/size][/b][/align][align=center][b][size=5][font=宋体]测定方法验证报告[/font][/size][/b][/align][size=3][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体].[/font][font=宋体]目的[/font][font=宋体]验证水产品中孔雀石绿残留量测定的方法（[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]）在本试验室的适用性。[/font][font=宋体]2.[/font][font=宋体]方法内容[/font][font=宋体]2.1 [/font][font=宋体]范围[/font][font=宋体]本方法规定了[/font][font=宋体]水产品中孔雀石绿[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]隐色孔雀石绿残留量测定的方法[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]2.2[/font][font=宋体]试剂[/font][font=宋体]同[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]方法中3.2中试剂。[/font][font=宋体]2.3[/font][font=宋体]仪器[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]高效液相色谱仪：WATERS2695带2996二极管阵列检测器。[/font][font=宋体]2.4 [/font][font=宋体]分析步骤[/font][font=宋体]同[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]方法中[/font][font=Times New Roman]3.4[/font][font=宋体]中分析步骤[/font][font=Times New Roman]2.5[/font][font=宋体]色谱条件：[/font][font=宋体]色谱柱：NovapakC-18 3.9mm(i.d)×150mm,5um加柱后氧化柱[/font][font=宋体]留动相：乙腈+乙酸铵（0.05mol/L,PH=4.5）=65+35[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]流量：1.0ml/min[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]进样量：50ul[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二极管阵列检测器，波长扫描范围：200nm～650nm，定量波长618nm。[/font][font=宋体]3. [/font][font=宋体]验证结果[/font][font=宋体]3.1[/font][font=宋体]线性范围[/font][font=宋体]吸取1000.0ug/ml的孔雀石绿，隐色孔雀石绿储备液,分别配制0.01ug/ml，0.04ug/ml，0.1ug/ml，0.4ug/ml，1.0ug/ml，5个浓度系列的标准工作液。按照方法仪器条件,注入高效液相色谱仪，以峰面积比较进行定量，作绘制成标准曲线。[/font][/size][size=3][font=宋体]表1：孔雀石绿标准回归[img=700,400]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007161645_231077_1627713_3.gif[/img][/font][/size]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]测定水产品中孔雀石绿残留量流动相， GB/T19857-2005水产品中孔雀石绿残留量测定中的流动相为：乙腈 +5mmol/L 乙酸铵 = 75+25(v/v)，请问一下这种情况流动相是要1个瓶子装两种溶液和混合液，还是用2个瓶子分开装两种不同的溶液？

（现行有效）GB/T19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定（现行有效）GB/T20361-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定 高效液相色谱荧光检测法（现行有效）NY/T1756-2012 饲料中孔雀石绿的测定（现行有效）SN/T1768-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢产物的快速测定方法（现行有效）SN/T3540-2013 出口食品中多种禁用着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法（现行有效）SC/T3021-2004 水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法（现行有效）DB13/T1358-2011 养殖用水中孔雀石绿快速测定方法 激光拉曼光谱法（现行有效）DB21/T2288-2014 养殖水体中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱串联质谱法（现行有效）DB22/T1617-2012 饲料中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫的测定液相色谱-质谱/质谱法（暂无文本）（现行有效）DB34/T1421-2011 水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的快速筛选测定 酶联免疫法（现行有效）DB37/T1780-2011 水产苗种中孔雀石绿、结晶紫、亚甲基蓝及其代谢物残留量的测定 液相色谱法（暂无文本）（已作废）NY/T1756-2009 饲料中孔雀石绿的测定（已废止）SN/T1479-2004 进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法（已废止）DB33/T598-2006 水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的测定——液相色谱-串联质谱法（已废止）DB44/T526-2008 水产种苗中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T539-2008 水产品中孔雀石绿残留量的快速测定 液相色谱法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T570-2008 水体中孔雀石绿残留量的测定—液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T573-2008 底泥中孔雀石绿残留量的测定—液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）

有这样一个问题请教各位老师。孔雀石绿（包括显性及阴性孔雀石绿和结晶紫）在水产品中的残留，除了养殖和运输过程中用药导致有残留，还有没有可能在加工生产过程中有污染？如果有，一般是什么途径？大家是否遇到过此类问题？查一些资料，说是，记号笔等都有可能污染，不知道大家的情况怎样？

由于孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿均为脂溶性化合物,在鱼体内和环境中残留时间长,并有致突变、致畸和致癌的危险性,因此其是否可作为水产养殖业中使用的兽药在国际上引起了争论。加拿大于1992 年就禁止其作为鱼场杀菌剂使用,且加拿大和美国均规定在食用鱼等水产品中禁止检出孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿。欧盟于2002 年6 月颁布法令禁止其在作为食品鱼的鱼场中使用, 我国也于2002 年5 月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。但是,事实上,包括我国和英国在内的许多禁用孔雀石绿的国家,从对市场上销售的鱼类等水产品中孔雀石绿的监测情况来看,仍有在鱼场中非法使用孔雀石绿的现象。 基于这些在水产养殖业中非法使用孔雀石绿的现象,各国政府和消费者密切关注，由此引发各国加大力度进行孔雀石绿的监督检查,同时形成一些标准的检测体系。(一)我国的检测标准【 标准编号 】GB/T 19857—2005 【 标准名称 】水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定【 英文名称 】 Determination of malachite green and crystal violet residues in aquatic product【 起草单位 】上海出入境检验检疫局；厦门出入境检验检疫局；广东出入境检验检疫局；福建出入境检验检疫局；江苏出入境检验检疫局；北京出入境检验检疫局；宁波出入境检验检疫局。【 发布日期 】 2005-09-05【 实施日期 】 2005-09-05 【 标准编号 】 SC/T 3021-2004【 标准名称 】 水产品中孔雀石绿残留量的测定.液相色谱法【 英文名称 】 Determination of malachite green residues in fishery products High-performance of liquid chromatography【 起草单位 】 中国海洋大学 国家水产品质量监督检验中心【 发布日期 】 2004-01-17【 实施日期 】 2004-03-01 【 标准编号 】SN/T 1479-2004【 标准名称 】进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法【 发布日期 】2004-11-17【 实施日期 】2005-04-01【 发布单位 】国家质量监督检验检疫总局（二）美国的检测标准1.美国FDA规定的孔雀石绿及其代谢产物实验室检测标准 【 标准编号 】 LIB4363【 标准名称 】鱼和虾中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的LC-VIS法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]n法【 英文名称 】 Quantitative and Confirmatory Analyses of Malachite Green and Leucomalachite Green Residues in Fish and Shrimp【 起草单位 】U.S. Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center, Denver, CO【 发布日期 】 2005-11 【 标准编号 】LIB4333【 标准名称 】测定和确认鲑鱼中隐性孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]方法【 英文名称 】Determination and Confirmation of Leucomalachite Green in Salmon: Laboratory Information Bulletin 4333【 起草单位 】Animal Drugs Research Center, Food and Drug Administration, Denver, CO【 发布日期 】2004-11 【 标准编号 】LIB4334【 标准名称 】快速液相色谱法测定鲑鱼中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的方法【 英文名称 】Determination of Malachite Green and Leucomalachite Green in Salmon with In-Situ Oxidation and Liquid Chromatography with Visible Detection【 起草单位 】Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center Denver Federal Center, P.O. Box 25087 Denver, CO 80225-0087【 发布日期 】2004-11 【 标准名称 】美国FDA关于孔雀石绿检测方法4333和4334的补充【 英文名称 】Amendment: Application of Laboratory Information Bulletins 4333 and 4334 for the Determination of Leucomalachite Green and Malachite Green Residues in Catfish, Basa, Tilapia, Trout, and Shrimp 【 发布日期 】 2005-10 2. 美国AOAC协会期刊规定的液相色谱检测方法（J.AOAC Int.1995,78(6):1388-1393 ） 该方法常被等同采用。（三）日本修订孔雀石绿限量标准2006年5月30日，日本厚生劳动省发布食安发第0530002号通知，根据食品卫生法（1947年第233号法律）第11条第1项的规定，规定动物用医药品孔雀石绿是一种食品中不得含有的成分，并制定了孔雀石绿的试验方法，且试验方法的分析对象为孔雀石绿及隐性孔雀石绿。 该修订公布六个月后生效，即2006年11月30日起生效。 此次修订重新制定了孔雀石绿的试验方法，同时向《修订后食品卫生法第11条第3项的相关法令的调整》（2005年11月29日食安发第1129001号当职通知）的附表3中追加如下内容，自2006年11月30日起生效。 农药名称 检出界限（ppm） 孔雀石绿* 0.002 *孔雀石绿的分析对象包括：孔雀石绿及无色孔雀石绿（孔雀石绿的代谢物） 此次修订生效前，暂且施行厚生劳动省制订的一项标准，限量0.01ppm（2005年厚省劳动省告知第497号）。

请教：水产品中孔雀石绿、结晶紫残留检测前处理，可以用氮吹取代旋转蒸发吧？我们用氮吹吹了好久，溶剂不能蒸发至近干是怎么回事啊？瓶底有乳状的液体，约5ml。

在做水产品兽药残留检测中，孔雀石绿检测很容易污染，问下最主要污染源是什么，如何清除污染？

我们最近一段时间水产品里的孔雀石绿及结晶紫的检测时发现了很多问题,采用的是19857液质方法 采用鲜活水产品前处理方法，称取5g样品，加入内标，用11mL乙腈匀浆提取，残渣再用11mL乙腈提取，合并后定容至25mL。取5mL过中性氧化铝柱，再用4mL乙腈洗柱，吹干，定容。同时进行空白实验。 结果发现每次D5-孔雀石绿的内标损失很大,损失都在80%以上,而隐性的内标要稍微好一些,这个 有改进的 办法吗,大家做的时候有这个问题吗? 同时,我们发现每个样品结晶紫的地方都有峰而且很高,后来 加了空白后,空白中也有结晶紫的峰,比如空白的峰结晶紫是3000,但是空白第一个内标很高有3*10e5，这样算下来基本就没有，在样品中结晶紫的峰和内标的高度就差不多了，都是3000左右，这样算出来浓度就很高，就是检出了。现在完全不明白这个结晶紫到底是哪里污染的，还是说这个方法本身就有影响吗？作了很多次，除了第二次没有出现结晶紫的峰，第一次和剩下的都有结晶紫的峰，我们用的是50ml的那种离心管，会有影响吗？作的时候也很小心了，不知道是哪里的问题？ 最后有个问题是孔雀石绿和结晶紫残留有限量标准吗？还是检出就不行？

可能是因为购买使用的鱼饲料中含有孔雀石绿，从而导致产品中含有这一违禁成分。如何用肉眼辨别“孔雀石绿鱼”？❥　看鱼鳞的创伤是否着色。由于“孔雀石绿” 具有高残留的特性。使用过“孔雀石绿”的鱼体表颜色呈浅蓝色，有些经浓度较大的“孔雀石绿”溶液浸泡过的鱼，甚至会呈青草绿色。一般情况下，鱼鳃是鲜红色的且不会附有脏物，用药后的鱼鳃因失血过多而发白，或因出血而带有淤血、呈紫红色。❥　一般来说，鱼体表面有一层起保护作用的透明黏液，相当于鱼的“润滑剂”，摸起来感觉很滑。使用了“孔雀石绿”的鱼，浓度低时，体表会产生过多的黏液，浓度过高时，保护膜被药物破坏掉。黏液从体表脱落，鳞片摸起来会感到很粗糙、刮手。❥　不要买通体色泽发亮的鱼。

请问：用SC/T3021--2004方法检测鱼中孔雀石绿残留，为何标准品色谱图与方法中的保留时间不一样？谢谢！

DB21/T2288-2014 养殖水体中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱串联质谱法

请问：1 孔雀石绿的标准品有两种，一种是孔雀石绿，分子量是927.01，分子式是C52H54N4O12；另一种是孔雀石绿草酸盐，分子量是463.50，分子式是 C23H25N2 C2HO4 0.5C2HO4。现在我要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]做水产品中的残留，我应该选用上述标准品中的哪一种？有什么差别？2 孔雀石绿标准品原样有固体的，也有用乙腈等溶剂溶的，我应该选择哪一种好些？好多文献中都没有交代详细的标准品的性质，所有比较迷惑，请做过的版油指导一下！

水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15011]SC/T 3021—2004[/url]说明一下：柱后氧化柱好象安谱有得卖，没有柱后氧化柱可以做孔雀石绿，但是不能做隐色孔雀石绿。

在测水产品中孔雀石绿的残留的实验中，加入二氯甲烷分层效果很差，不知道大家在做的时候有没有遇到这样的问题，怎么解决的？

中国检验检疫科学院推出的新型水产品消毒剂日前通过专家的一期论证，这种产品的出现将有望解决水产养殖中的孔雀石绿问题。 这种新型水产品消毒剂是运用氧化电位原理研制而成，在适当的水温条件下，能有效防控不同水生动物的水霉病等病原和寄生虫。 论证专家组专家、中国国家兽药典委员会委员陈昌福说，新型水产品消毒剂最大的优点是使用后没有像氯制剂那样造成一些残留的污染。 孔雀石绿作为一种化工染料，曾被广泛用于水产养殖业，它可以防止霉菌感染，使鱼看起来更光鲜。但由于研究表明孔雀石绿在水产品上的残留对人体有害，国家禁止在水产养殖业中使用。 今年以来，中国淡水养殖非法使用禁用药物孔雀石绿的问题出现很多。 陈昌福说，这种名为“检科一号”的消毒剂，目前已在北京、山东等地投入试用。

做水产品中孔雀石绿残留量的试验时，加入二氯甲烷的时候，震荡后出现了乳化现象，没有分层，怎么回事啊？

最近发现的，跑氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标时（里面不含孔雀石绿和隐色孔雀石绿）竟然出现了孔雀石绿和隐色孔雀石绿本底，响应值还不低，这是怎么回事？？[font=&]配置了一个乙腈+水+2种内标混标，内标能打出来的同时，也能打出不低响应值的孔雀石绿和隐色孔雀石绿，但是乙腈+水进样，就没有任何本底了。[/font][font=&]之前怀疑是标的问题，可是换了另一家的还是一样啊。[/font][font=&]只要加了氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标，就能出孔雀石绿、隐色孔雀石绿的峰。求救！[/font]

用GBT19857-2005《水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的测定》里的液质部分方法提取，就是没加盐酸羟胺、对甲苯磺酸、乙酸盐缓冲盐。提取的一点都不好，回收率太差了，这是怎么回事？鲜鱼肉和加工过的有什么区别难道应该都用加工过的方法处理？

[align=center][b]水产品中孔雀石绿荧光检测法优化[/b][/align] 摘要：水产品中孔雀石绿应用广泛、危害性大。GB/T20361-2006荧光检测法检测成本低，但是前处理复杂、繁琐、耗时，且回收率不稳定。本文通过优化提取方式、浓缩条件、检测条件等，建立高效液相色谱荧光法检测水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的方法。优化后的方法样品前处理时间、样品出峰时间比GB/T20361-2006大大缩短，且分析结果回收率高、重复性好。关键词：水产品 孔雀石绿 检测[b] 一、孔雀石绿的危害性[/b] 孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体，既是杀真菌剂，又是染料。具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，已被列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。我国农业部公告第235号《动物性食品中兽药最高残留限量》和我国《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单(第四批)通知》明确规定所有食品禁止使用孔雀石绿。但是由于孔雀石绿价格低廉，效果显著，在水产养殖中广泛应用。养殖户用它来预防鱼类的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等；不法商贩用它提高运输过程中鱼的存活率。并且使用孔雀石绿后的鱼死亡后，鱼鳞闪闪发光，颜色较为鲜亮，仿佛刚死一般，这又大大增加了死鱼出售的概率。[b] 二、检测材料与方法[/b] （一）主要仪器设备与试剂 1、主要仪器设备 电子分析天平（感量0.0001）、电子分析天平（感量0.01）、高速冷冻离心机、PH计、氮吹仪、超声波清洗机、涡旋混合器、固相萃取装置、安捷伦1260高效液相色谱仪配荧光检测器。 2、试剂 乙腈（色谱纯）、二氯甲烷（色谱纯）、无水乙酸铵（分析纯）、冰乙酸（优级纯）、氨水（分析纯）、硼氢化钾（分析纯）、盐酸羟铵（分析纯）、对-甲苯磺酸（分析纯）、酸性氧化铝（分析纯）。 3、标准品 孔雀石绿标准溶液（100Uug/mL）[color=#FF6600]。[/color] 4、其他耗材 酸性氧化铝固相萃取柱（500mg、3 mL）、Varian PRS柱（500mg、3mL）、0.45um有机滤膜、一次性注射器。 （二）液相色谱条件 色谱柱：安捷伦C18柱4.6mm×100mm,粒度3.5um；流动相：乙腈＋乙酸铵缓冲溶液（0.125mol/L,PH4.5）；流速1.3mL/min；柱温：35℃；激发波长：265nm,发射波长：360nm；进样量：5uL。 （三）样品前处理 参照GB/T20361-2006中的样品前处理进行取样、提取、净化，但将样品前处理的匀浆提取改为样品涡动和离心；用离心的方法代替分液漏斗分液；旋转蒸发温度调整为35℃。 具体优化方法如下： 1、样品提取优化：本方法将GB/T20361-2006方法中的10000r/ min匀浆提取30s改为加标后样品手摇振荡2 min，加入酸性氧化铝后手摇振荡2 min ，再4000r/ min离心10min，再静置10 min。手摇振荡既减少了匀浆过程中加标损失，影响回收率；又增加孔雀石绿的溶出效果。静置确保了分离效果，使它提取完全，提高实验回收效果。 2、样品浓缩温度优化：GB/T20361-2006方法中要求45℃旋转蒸发至近干，改为35℃旋转蒸发近干。实验过程中发现45℃旋转蒸发时孔雀石绿会被带出、25℃旋转蒸发速度太慢，都会影响回收率。对比显示35℃旋转蒸发回收率最为满意。 （四）校准曲线与加标回收情况 1、校准曲线以孔雀石绿中间溶液配成标准的工作曲线浓度分别为1.00 ng/mL、2.00ng/mL、5.00 ng/mL、7.00 ng/mL、10.00 ng/mL。以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标做校准曲线，做一校准曲线，相关系数为0.9999。孔雀石绿在1-10ng/mL范围内线性良好。 2、加标回收 取10份样品加入浓度为20ng/mL的孔雀石绿标准溶液200uL，做九个重复，做一个空白。按上述方法进行前处理和检测，测得回收率范围在85%-105%。[b] 三、注意事项[/b] 1、称样、加标、振荡后要静置5分钟，确保溶出效果。 2、离心后的上清液转移至125mL分液漏斗中时要注意，不可吸入油脂、酸性氧化铝。 3、弃去酸性氧化铝柱后以及定容前要用剪平头的吸耳球吹PRS柱近干，保证平行和回收率。 4、旋转蒸发时，转速要由慢到快，保持转速200左右，水滴成滴滴下，不可成线，过快时要关掉真空泵。旋转蒸发近干要严格控制好，蒸发太快、蒸发温度太高都会导致回收率降低。 5、尽量减少溶液转移次数，转移次数影响回收率。 6、样品过柱和洗脱时，流速不能太快，否则样品或洗脱液不能与柱子充分接触，导致回收率降低。[b] 四、结论[/b] 综上所述本文探索改进的水产品中孔雀石绿检测方法，样品前处理时间、样品出峰时间比GB/T20361-2006缩短，节省了人力物力，且孔雀石绿在1-500ng/mL范围内线性良好，相关系数为0.9999，回收率范围85%-105%。

[align=center][size=29px]孔雀石绿及其代谢物残留量的[/size][size=29px]测定[/size][/align][font='仿宋'][size=21px]摘要：建立了水产品中孔雀石绿[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]隐色孔雀石绿的测定方法。采用[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]中性氧化铝[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]固相萃取小柱对[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]鲤[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]鱼样品进行净化，Shim-pack [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]Scepter[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] C18 色谱柱进行分离，岛津 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]-8050 串联质谱检测分析，内标法定量。对空白样品 0.5μg/kg [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]三个水平[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]6[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]份样品考察回收率和[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]精密度[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]RSD，结果显示[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]：①孔雀石绿：[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]0.5μg/kg 加标浓度的加标回收率为84.1%-[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]92.0[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%，RSD为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]3.6[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg加标浓度的加标回收率为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]95.0[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%-[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]104.2[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%，RSD为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]3.9[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg 加标浓度的加标回收率为 [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]103.0[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%-[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]106.6[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%，RSD为 [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]2.7[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]；②隐色孔雀石绿：[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]0.5μg/kg 加标浓度的加标回收率为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]78.8[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%-[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]113.2[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%，RSD为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]13.8[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg加标浓度的加标回收率为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]78.8[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%-[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]89.1[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%，RSD为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5.4[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg加标浓度的加标回收率为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]72.4[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%-[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]84.0[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%，RSD为[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5.0[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]；该方法[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]回收率高，重现性好[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]，[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]适用于水产品中孔雀石绿及其代谢物的测定。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1. 实验部分[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.1 实验仪器及耗材[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]-8050 联用系统；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]色谱柱：Shim-pack [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]Scepter[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] C18，50×2.1 mm，[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.9[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μm；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]固相萃取小柱：[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]中性氧化铝柱[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] 1g/6mL；[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.2 分析条件[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]UHPLC 条件[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]色谱柱：Shim-pack [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]Scepter[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] C18，50×2.1 mm，[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.9[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μm[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]流 速：0.4 mL/min [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]进样量：5μL [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]柱 温：40 ℃[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]流动相： A：0.1%甲酸水 B：乙腈[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]梯度洗脱程序如下：[/size][/font][font='仿宋'][size=16px] [/size][/font][table][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]时间[/size][/font][font='仿宋'][size=20px](min)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]2.5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]3.2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]3.21[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]4.5[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]A(%)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]60[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]60[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]60[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]B(%)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]40[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]100[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]100[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]40[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]40[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][font='仿宋'][size=21px]质谱条件[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]离子化模式：ESI，正离子扫描 [/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]扫描模式：多反应监测(MRM)[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]碰撞气：氩气 [/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]加热气：氮气 10 L/min[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]雾化气：氮气 3 L/min[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]干燥气：氮气 10 L/min[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]接口温度： 300℃ [/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]DL 温度：250 ℃ [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]加热模块温度：400 ℃ [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]化合物参数见下表[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]：[/size][/font][table][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]名称[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]前体离子[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]产物离子[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]Q1 Pre Bias(V)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]CE(V)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]Q1 Pre Bias(V)[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,2][align=center][font='仿宋'][size=16px]孔雀石绿[/size][/font][/align][/td][td=1,2][align=center][font='仿宋'][size=16px]329.20[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]313.10[/size][/font][font='仿宋'][sup][size=16px]*[/size][/sup][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-12.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-36.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-23.0[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]208.10[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-12.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-37.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-23.0[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,2][align=center][font='仿宋'][size=13px]隐色孔雀石绿[/size][/font][/align][/td][td=1,2][align=center][font='仿宋'][size=16px]331.20[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]239.10[/size][/font][font='仿宋'][sup][size=16px]*[/size][/sup][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-12.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-31.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-17.0[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]316.10[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-12.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-21.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-23.0[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=12px]隐色孔雀石绿[/size][/font][font='仿宋'][size=12px]-D6[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]337.20[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]240.10[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-12.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-33.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-17.0[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]孔雀石绿-D5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]334.10[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]318.10[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-16.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-40.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]-23.0[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][font='仿宋'][size=16px]*定量离子对[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.3 样品前处理[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.3.1 样品提取[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]称取5.00g已捣碎样品于50mL离心管中，加入200μL混合内标标准溶液（[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]100ng/mL[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]），[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]加入[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]11mL乙腈，[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]超声振荡提取2min，8000r/min匀浆提取30s，4000r/min离心5min，上清液转移至25mL的比色管中；另取一只50mL离心管加入11mL乙腈,洗涤匀浆刀头10 s，洗涤液转入前一离心管中，用玻棒捣碎离心管中沉淀，涡旋混匀器上振荡30s，超声振荡5min，4000r/min离心5min，上清液合并至25mL比色管中，用乙腈定容至25.0mL，摇匀备用。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.3.2 样品净化[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]移取5.00mL样品溶液加至已活化的中性氧化铝柱上，[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]用[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]KD浓缩瓶[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]接收流出液，4mL[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]乙腈[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]洗涤中性氧化铝柱，收集全部流出液，45℃旋转蒸发至约1mL，残液用乙腈定容至1.00mL，超声波振荡5min，加入1.0mL5mmol/L乙酸铵，超声波振荡1min，样液经0.2μm滤膜过滤后供[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱测定。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.4 标准溶液的配制[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.4.1混合标准储备液：分别准确吸取10μL孔雀石绿和隐色孔雀石绿标准品至1mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为1μg/mL的标准储备液。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.4.2混合标准储备液：准确吸取10μL孔雀石绿和隐色孔雀石绿混合标准储备液（1.4.1）至1mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.01μg/mL的标准储备液。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.4.3混合内标标准溶液：用乙腈稀释内标标准品，配制成0.1μg/mL的内标标准溶液。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1.4.4精确吸取一定量的混合标准储备液（1.4.2）和混合内标标准溶液（1.4.3），用乙腈+0.1%甲酸溶液（1+1）稀释成质量浓度为0.1μg/L、0.5μg/L、1μg/L、2μg/L、5μg/L的标准工作溶液，每毫升中含有氘代孔雀石绿和氘代隐色孔雀石绿各2ng。[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]2. 结果[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]2.1 标准品的 MRM 色谱图[/size][/font][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][align=center][font='仿宋'][size=21px]1.0 μg/L 标准溶液的 MRM 色谱图[/size][/font][/align][font='仿宋'][size=21px]（1. 孔雀石绿；孔雀石绿-D5[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]2[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]. 隐色孔雀石绿；隐色孔雀石绿-D6）[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]2.2 [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]线性关系[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]将浓度为 0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0μg/L的混合标准工作液按1.2中的分析条件进行测定，孔雀石绿以氘代孔雀石绿为内标物质计算，隐色孔雀石绿以氘代隐色孔雀石绿为内标物质计算；以浓度比为横坐标，峰面积比为纵坐标，绘制校准曲线如[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]下图[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]所示[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]：[/size][/font][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][align=center]孔雀石绿的标准工作曲线[/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center]隐色孔雀石绿的标准工作曲线[/align][align=center][/align][align=center][/align][font='仿宋'][size=21px]所得校准曲线线性关系良好，线性方程及相关系数见[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]下表[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]。[/size][/font][table][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]序号[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]名称[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]校准曲线[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]线性范围（[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/L[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]）[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]相关系数[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]r[/size][/font][font='仿宋'][sup][size=21px]2[/size][/sup][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]孔雀石绿[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]Y=0.436507X+0.0156128[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]0.1-5.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]0.9998455[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=18px]隐色孔雀石绿[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=20px]Y=0.403218X-0.00873880[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]0.1-5.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=21px]0.9993515[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][font='仿宋'][size=21px]2.3[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]孔雀石绿及其代谢物的[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]回收率和精密度[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]RSD[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]将[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]鲤[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]鱼空白样品进行 0.5μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg 浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]6[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]份样品考察回收率和[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]精密度[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]RSD，具体结果如下：[/size][/font][table][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]目标物[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]加标浓度（[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]）[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]回收率范围（[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]%[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]）[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]RSD（%）[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,3][align=center][font='仿宋'][size=16px]孔雀石绿[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]0.5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]84.1-92.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]3.6[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]95.0-104.2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]3.9[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]103.0[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]-[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]106.6[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]2.7[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,3][align=center][font='仿宋'][size=16px]隐色孔雀石绿[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]0.5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]78.8[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]-[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]113.2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]13.8[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]78.8[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]-[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]89.1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]5.4[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]72.4[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]-[/size][/font][font='仿宋'][size=16px]84.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='仿宋'][size=16px]5.0[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][font='仿宋'][size=21px]3. 结论[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]参照国标 GB/T[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]19857-2005，建立了水产品中孔雀石绿、隐色孔雀石绿的测定方法。采用[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]中性氧化铝[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]固相萃取小柱对[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]鲤[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]鱼样品进行净化，Shim-pack [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]Scepter[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] C18 色谱柱进行分离，岛津 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]-8050串联质谱检测分析，内标法定量。对空白样品0.5μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]1[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]5[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]6[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]份样品考察回收率和[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]精密度[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]RSD，结果显示[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]本方法[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]回收率高，重现性好[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]，完全符合[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]GB/T[/size][/font][font='仿宋'][size=21px] [/size][/font][font='仿宋'][size=21px]19857-2005[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]、[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]GB/T 27404-2008标准要求，[/size][/font][font='仿宋'][size=21px]该方法适用于水产品中孔雀石绿及其代谢物的测定。[/size][/font]

测定水产补品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿时，只出一个峰，帮帮忙出点主意

最近最孔雀石绿实验，是用乙腈提取，过酸式氧化铝柱，液质分析，分别加孔雀石绿、隐性孔雀石绿各20ppb，最终结果孔雀石绿6ppb，隐性孔雀石绿26ppb，这个结果怎么解释？是孔雀石绿转化了吗。在第二天又单独加一个孔雀石绿回收，孔雀石绿4ppb，隐性孔雀石绿几乎没有，这个又怎么解释呢。

一般做水产品检测兽药残留时，会用到一些标准品如孔雀石绿、沙星类等，如果过了有效期，还没用完，怎么处理呢？基本上按照CNAS认证规定还是只有销毁一条路了。标准品过期这个问题，很有必要讨论一下，因为一些标准品过期了，但有可能还有效，可以用来做其他有意义的研究，比如，可以用来做内部质量控制，就是在不通知人员样品含量的情况下，给他们送盲样，让他们来做人员间对比性试验，再根据相关检测标准判定对比性试验的结果，对内部质量控制起到帮助作用。但是，标准品的有效期规定也有一定的参照性，比如说，过了两年或5年，一些标准品的性质会发生变化，对定量分析会有影响等情况都有可能发生。举例，你的孔雀石绿和结晶紫标准品用了２年了，再重新配标准溶液时，也许显性还可以，但保留时间可能会提前，隐性的也有可能会差太多，比如，２ppb基本做不出来了，而且隐性孔雀石绿和隐性结晶紫都分不开了。。。。。来源：实验与分析

最近做孔雀石绿等项目，发现孔雀石绿、隐色孔雀石绿都不存在空白干扰问题，但这两者的内标，空白干扰太高了。用全新的乙腈，直接装入进样小瓶，也会出很高的峰。考虑过仪器污染的问题，但孔雀石绿和隐色孔雀石绿反而没有干扰，所以目前还找不到原因。有版友遇到过吗？

今天做孔雀石绿 有些关于质谱的问题 想请教一下流动相是 乙腈：5mM乙酸铵 混标包括：孔雀石绿 银色孔雀石绿 结晶紫 隐色孔雀石绿-d55ppb是出峰正常，基线很平但做到0.5ppb或者更低时出现问题：1. 结晶紫 372-356 出峰后基线一路往上漂 飘得很高（杂峰很多）2.隐色孔雀石绿 331-316 基线及噪音很高 把峰给抬高很多求解答 谢谢