酶标试剂

酶标仪使用注意事项 　　1、 工作环境　　酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。A. 仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。B. 仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。C. 为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。D. 操作环境温度应在15°C~40°C之间，环境湿度在15%~85%之间。E. 操作时电压应保持稳定。F. 操作环境空气清洁，避免水汽、烟尘。G. 保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。　　2、 操作注意事项　　许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后操作必须规范。A. 使用移液器加液，移液枪头不能混用。B. 洗板要干净，避免交叉污染。C. 严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。D. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成注意做好清洁工作。E. 不要在测量过程中关闭电源。F. 对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。G. 使用后盖好防尘罩。H. 出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。酶标(ELISA，EIA)诊断试剂盒操作中出现的问题：现象、可能原因和解决办法　注意：1、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.2、 若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。3、 加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。4、 反应时间的误差，做大量标本时，第一孔和最后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器，不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀，是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。6、 阈值附近实际上是个灰区(gray scale),不能截然分为阴性、阳性，国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检，以次数多者为准，如一次阳两次阴最后判为阴，但实际上是否为阴不好说，只有判为可疑，临床上可以让患者过一段时间后再测。7、 肉眼观察稍显色，酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的，肉眼目测结果不可靠，应以酶标仪判读为准。8、 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。9、 临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

求助，不知各位大侠谁清楚酶标仪试剂盒配置的浓缩洗涤剂是怎么配置的，或者谁能告诉我哪里可以单独购买浓缩洗涤剂，急用，希望各位帮帮忙，谢谢大家啦

用酶联免疫试剂盒检测黄曲霉毒素时,试剂盒里面的酶标记物有沉淀,是什么原因？

各位大神，用Elsa试剂盒法检测生物毒素，请问如何检查新买的酶标板的性能？

酶标仪测定蛋白浓度，对于蛋白浓度很低样品，求推荐好用的试剂盒

饲料和食品中三聚氰胺，目前已有中国国家标准，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]联仪测定。但作为快速筛选，利用酶标仪和ELISA试剂盒进行测定，在成本、速度等方面有不少优势。但在检测过程中有假阳性问题，一些试剂盒的质量例如稳定性需要加强。不知朋友们在使用试剂盒时有何问题，如何解决的。

德国拜法生产的氯霉素酶标试剂盒中标准曲线下＂５０％inhibition"表示什么意思？怎样衡量曲线好坏？

试剂盒说明书上写的要在0.5cm光径下用分光光度计测定吸光度，我想用酶标仪代替分光光度计，影响大不大？求各位大神指教！

酶标仪和分光光度计都是实验室常用的分析测量工具，它们的测定原理是相同的，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。 一、酶标仪和分光光度计的三大差别 酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 分光光度计，又称光谱，是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。 同为，实验室内测定吸光度的仪器，酶标仪和分光光度计存在一些不同之处，具体差别体现在以下三个方面： （1）盛装待测溶液的容器： 分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。 （2）光路的方向： 分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。 （3）光路的长度： 由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。 分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm，所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。 而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。 二、酶标仪和分光光度计的优缺点比较 分光光度计： 优点：1、检测波长范围较宽；2、加样量不一致对测量结果没有影响。 缺点：1、工作量大，操作繁琐，耗时；2、耗试剂；3、结果稳定性差，重复性较差，误差较大；4、对于微量物质，难以检测到。 主要应用领域：药品检验、药物分析、环境检测、卫生防疫食品、化工、科研等领域对物质进行定性、定量分析。 酶标仪： 优点：1、一次性处理样品量大，省时；2、样本、试剂用量少；3、操作简单，重复性好，检测速度快、效率高。 缺点：1、酶标仪96孔板在紫外光区有较强的紫外吸收，应尽量避免在300nm以下使用酶标仪进行含量测定；2、必须确保微孔板每个孔加样量严格一致，对实验者的操作技能提出了更高的要求。 主要应用领域：临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学等。

[color=#DC143C][size=4][B]酶标仪使用交流有奖调查[/B][/size][B]1、活动内容[/B]：为了迎接五一劳动节，特举办“酶标仪使用交流”系列有奖调查，征集各地实验室酶标仪的使用情况，各个类别可以选择填写，填写内容尽量完整，主要有：[B]A、酶标仪部分[/B]①、您所用酶标仪的品牌与型号 ；②、使用的酶标仪操作软件与版本 ；③、您使用酶标仪主要检测什么？ ④、酶标仪使用中遇到的主要问题及感受；⑤、您对酶标仪论坛今后的建议。[B]B、试剂盒部分[/B]①、您都曾经用过哪些品牌的试剂盒？②、您最喜欢什么品牌的试剂盒？说明理由（试剂盒的使用感受）③、您用什么方法分析计算酶标仪上读出的数据？ [B]2、活动规则[/B]：①、要求发帖内容与“酶标仪使用交流”活动密切相关；②、严禁广告，灌水者，发现立即取消活动资格 ；③、在活动期间，被删除的帖子不计活动积分。④、发帖内容明显虚假，骗取积分者，发帖无效，不计分。 [B]3、活动时间[/B]：4.30—5.30 [B]4、奖励规则[/B]：①、为促进酶标板块交流，对本次活动中积极回帖，提供详细回答和较强可行性建议者，设劳动模范奖，取前六名，在每期活动结束时兑现。②、活动期间视回答交流问题情况可以获得5—10分奖励，并有机会在每期活动结束时获得劳动模范奖。③、在每期活动结束时，颁发劳动模范奖，前1、2、3名各奖励30分，前4、5、6名奖励20分。[/color]

酶标仪的选择、自检和校准 一、酶标仪的选择 面对类型如此众多的酶标仪，实验室在选择时往往有难以适从的感觉。一般来说，用于酶免疫测定比色的酶标仪可分为普通酶标仪，多功能全自动酶标仪和全自动酶免疫分析系统等，普通酶标仪的功能基本上相当于一个微孑L板比色计，而多功能全自动酶标仪除了有微孔板比色功能外，还有酶标动力学，紫外乃至凝集等多种检测功能；全自动酶免疫分析系统则有试剂“开放”和“限定”之分，所谓试剂“开放”是指不同品牌的ELISA试剂均可用于该仪器，而试剂“限定”则必须使用仪器专用的酶免测定试剂。实验室在选择酶标仪时，一般应遵循这样几条原则： 1．根据工作需要去选择。切忌刻意去求功能多，因为一则如果仪器功能过多，易出故障，二则有些功能如酶标动力学或凝集等，可能根本就用不上；如果拟购置的酶标仪主要是用于定性测定，则不必要求完美的定量所需的软件系统。至于全自动酶免疫分析系统则对工作量比较大的血站或大型医院较为适用，对于日常工作量不太大的实验室，就无必要。 2．根据酶标仪的性能去选择。反应酶标仪性能的指标主要有测定波长范围，滤光片配置，检测速度，吸光度范围，线性范围，分辨率，准确度，精密度等。 3．根据自己实验室的财力去选择。酶标仪品种类型多，由于性能不一，价格自然也就相差较大，实验室可根据自己的财力去选择性能／价格比较为合适的酶标仪。 4．根据售后服务去选择。实验室仪器买了以后，就跟我们家里使用的家用电器一样，在使用过程中及使用一段时间之后，很可能就会有保修或维修方面的问题，因此一定要选择售后服务好的公司的酶标仪。 5．根据实验室人员的外语水平去选择。进口酶标仪现有不少已使用中文人机对话，对于英语上有困难的实验室，应尽可能选用此类酶标仪。 确定了选择原则以后，就是怎样去选择了。选择的步骤首先是要获取有关酶标仪的信息资料，一般有这样几条途径： ①向已购不同酶标仪的多家实验室同行咨询访问，获取最直接的使用效果的信息； ②酶标仪销售商的信息广告及介绍； ③权威机构的仪器评估报告。 获取了尽可能多的酶标仪信息资料后，就是对不同类型的酶标仪的性能指标进行比较，选择较为适合本实验室的一种或二，三种再向销售商作进一步的详细咨询了解，以决定选择哪一种进行自检。二、酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料，基本上可以说是间接的，有了目标以后，如果还想获得对某一酶标仪的感性认识，可以对其进行自检，主要有下述几个方面。 (一)外观 酶标仪上应有仪器名称，型号，编号，生产厂家，出厂日期和电源电压；各调节旋钮，按键和开关均能正常工作，外表面无明显机械损伤；显示文字应清楚完整。 (二)酶标仪的稳定性(漂移) 选用492nm波长，在吸光度o．0A处，测定标称值为1．0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行)，记录仪器示值或均值，10min后再次记录仪器示值或均值，前后两次测定值之差不应超过±0．005A。 (三)吸光度测定的准确度 选用405，492和620 nm波长，以空气为参比，分别测定标称值为0．5和1．0A的光谱中性玻璃滤光片，用专用测试板代替酶标板，按仪器说明连续测定3次，按下式计算准确度：AA＝1／3(A、+A。+A3)—A：(A：为标准值)。 (四)吸光度测定的重复性 波长选择同(3)，在酶标板第一排加注空白溶液，第二排加入浓度为200rig／ml的重铬酸钾溶液，重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性： （五）酶标仪的线性选用540nm波长，将标称值o．5，1．0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中，以空气为参比，各重复测定3次；然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中，重复测定3次。线性误差： 式中A1为第一片中性滤光片吸光度均值，A：为第二片中性滤光片吸光度均值，A1，2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。 (六)测定速度的检定 ． 选用492nm波长，放人96孔酶标板进行测定，用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。 酶标仪除了在选购时，应尽可能自检外，在使用中也应定期检定，以保证酶标仪测定的有效性。 附：200ttg／ml重铬酸钾溶液的配制 将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器内冷却30min，在分析天平上准确称取o．2829g，置于100ml烧杯中，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o．05mol／L稀硫酸洗烧杯3次，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀释至刻度线，摇匀。

分光光度计和酶标仪区别分光光度计：利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品，比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区,(2)400～760nm的可见光区,(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm～400cm）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或（或原子吸收分光光度计）。酶标仪：实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为（1）光吸收酶标仪（可见酶标仪，紫外/可见酶标仪）（2）荧光酶标仪（3）化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处，具体差别体现在以下几个方面：（1）盛装待测溶液的容器：分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。（2）光路的方向：分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。（3）光路的长度：由于光密度（OD值）与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm，所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。[font=宋体

是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光， 400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 　　检测单位：　　光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。　　检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。 　　OD值由下述公式计算：　　E＝OD=C×D×E　　C为检测物的浓度　　D为检测物的厚度　　E为摩尔因子 　　在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。　　但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 　　Anthos 酶标仪检测值计算　　仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值的计算如下：　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）　　其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0％的情况下检测的二进位数值， Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下：　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552 　　Anthos 酶标仪的中心定位　　仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。 　　光源的参照通道　　参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。　　酶标仪的用途和其它提示　　用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。　　质量控制　　质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。　　空白校正　　有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的　　说明书要求进行。　　检测结果的解释　　由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会造成OD值的不同，因此，　　只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。

用试剂盒，请问配什么标准的酶标仪会好些？国产进口都给说说？谢谢！

一、酶标仪的选择面对类型如此众多的酶标仪，实验室在选择时往往有难以适从的感觉。一般来说，用于酶免疫测定比色的酶标仪可分为普通酶标仪，多功能全自动酶标仪和全自动酶免疫分析系统等，普通酶标仪的功能基本上相当于一个微孑L板比色计，而多功能全自动酶标仪除了有微孔板比色功能外，还有酶标动力学，紫外乃至凝集等多种检测功能；全自动酶免疫分析系统则有试剂“开放”和“限定”之分，所谓试剂“开放”是指不同品牌的ELISA试剂均可用于该仪器，而试剂“限定”则必须使用仪器专用的酶免测定试剂。实验室在选择酶标仪时，一般应遵循这样几条原则：1．根据工作需要去选择。切忌刻意去求功能多，因为一则如果仪器功能过多，易出故障，二则有些功能如酶标动力学或凝集等，可能根本就用不上；如果拟购置的酶标仪主要是用于定性测定，则不必要求完美的定量所需的软件系统。至于全自动酶免疫分析系统则对工作量比较大的血站或大型医院较为适用，对于日常工作量不太大的实验室，就无必要。2．根据酶标仪的性能去选择。反应酶标仪性能的指标主要有测定波长范围，滤光片配置，检测速度，吸光度范围，线性范围，分辨率，准确度，精密度等。3．根据自己实验室的财力去选择。酶标仪品种类型多，由于性能不一，价格自然也就相差较大，实验室可根据自己的财力去选择性能／价格比较为合适的酶标仪。4．根据售后服务去选择。实验室仪器买了以后，就跟我们家里使用的家用电器一样，在使用过程中及使用一段时间之后，很可能就会有保修或维修方面的问题，因此一定要选择售后服务好的公司的酶标仪。5．根据实验室人员的外语水平去选择。进口酶标仪现有不少已使用中文人机对话，对于英语上有困难的实验室，应尽可能选用此类酶标仪。确定了选择原则以后，就是怎样去选择了。选择的步骤首先是要获取有关酶标仪的信息资料，一般有这样几条途径：①向已购不同酶标仪的多家实验室同行咨询访问，获取最直接的使用效果的信息；②酶标仪销售商的信息广告及介绍；③权威机构的仪器评估报告。获取了尽可能多的酶标仪信息资料后，就是对不同类型的酶标仪的性能指标进行比较，选择较为适合本实验室的一种或二，三种再向销售商作进一步的详细咨询了解，以决定选择哪一种进行自检。二、酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料，基本上可以说是间接的，有了目标以后，如果还想获得对某一酶标仪的感性认识，可以对其进行自检，主要有下述几个方面。(一)外观酶标仪上应有仪器名称，型号，编号，生产厂家，出厂日期和电源电压；各调节旋钮，按键和开关均能正常工作，外表面无明显机械损伤；显示文字应清楚完整。(二)酶标仪的稳定性(漂移) 选用492nm波长，在吸光度o．0A处，测定标称值为1．0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行)，记录仪器示值或均值，10min后再次记录仪器示值或均值，前后两次测定值之差不应超过±0．005A。(三)吸光度测定的准确度选用405，492和620 nm波长，以空气为参比，分别测定标称值为0．5和1．0A的光谱中性玻璃滤光片，用专用测试板代替酶标板，按仪器说明连续测定3次，按下式计算准确度：AA＝1／3(A、+A。+A3)—A：(A：为标准值)。(四)吸光度测定的重复性波长选择同(3)，在酶标板第一排加注空白溶液，第二排加入浓度为200rig／ml的重铬酸钾溶液，重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性：（五）酶标仪的线性选用540nm波长，将标称值o．5，1．0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中，以空气为参比，各重复测定3次；然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中，重复测定3次。线性误差：式中A1为第一片中性滤光片吸光度均值，A：为第二片中性滤光片吸光度均值，A1，2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。(六)测定速度的检定 ．选用492nm波长，放人96孔酶标板进行测定，用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。酶标仪除了在选购时，应尽可能自检外，在使用中也应定期检定，以保证酶标仪测定的有效性。附：200ttg／ml重铬酸钾溶液的配制将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器内冷却30min，在分析天平上准确称取o．2829g，置于100ml烧杯中，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o．05mol／L稀硫酸洗烧杯3次，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀释至刻度线，摇匀。

[color=#DC143C][B]申请标题：【活动申请】酶标仪使用交流有奖调查[/B][/color][B]申请版面[/B]：酶标仪版[B]申请基金[/B]：活动一共需要1000积分[B]申请内容[/B]：[B]1、活动内容[/B]：为了迎接五一劳动节，特举办“酶标仪使用交流”系列有奖调查，征集各地实验室酶标仪的使用情况，各个类别可以选择填写，填写内容尽量完整，主要有：[B]A、酶标仪部分[/B]①、您所用酶标仪的品牌与型号 ；②、使用的酶标仪操作软件与版本 ；③、您使用酶标仪主要检测什么？ ④、酶标仪使用中遇到的主要问题及感受；⑤、您对酶标仪论坛今后的建议。[B]B、试剂盒部分[/B]①、您都曾经用过哪些品牌的试剂盒？②、您最喜欢什么品牌的试剂盒？说明理由（试剂盒的使用感受）③、您用什么方法分析计算酶标仪上读出的数据？ [B]2、活动规则[/B]：①、要求发帖内容与“酶标仪使用交流”活动密切相关；②、严禁广告，灌水者，发现立即取消活动资格 ；③、在活动期间，被删除的帖子不计活动积分。④、发帖内容明显虚假，骗取积分者，发帖无效，不计分。 [B]3、活动时间：4.30—5.30 6.1—6.30[/B][B]奖励规则[/B]：①、为促进酶标板块交流，对本次活动中积极回帖，提供详细回答和较强可行性建议者，设劳动模范奖，取前六名，在每期活动结束时兑现。②、活动期间视回答交流问题情况可以获得2—5分奖励，并有机会在每期活动结束时获得劳动模范奖。③、在每期活动结束时，颁发劳动模范奖，前1、2、3名各奖励30分，前4、5、6名奖励20分。[B]申 请 人：xiangming策 划 人：xiangming[/B]

酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计。

今天使用了一下酶标仪，光知道操作，但是不知道原理，所以从网上查了查，正好和大家分享下^_^ 酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 　特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 　　检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系： E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。 　　OD值由下述公式计算： 　　E＝OD=C×D×E 　　C为检测物的浓度 　　D为检测物的厚度 　　E为摩尔因子 　　在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 　　但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 　　Anthos 酶标仪检测值计算 　　仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值 的计算如下： 　　T＝（Meas―Min）／（Max―Min） 　　其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0％的情况下检测的二进位数值， Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下： 　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30 　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028 　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552 　　Anthos 酶标仪的中心定位 　　仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。 　　光源的参照通道 　　参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。 　　酶标仪的用途和其它提示 　　用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。 　　质量控制 　　质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。 　　空白校正 　　有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的说明书要求进行。 　　检测结果的解释 　　由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会造成OD值的不，因此，只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。 酶标仪的使用注意事项 1、工作环境 　　酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。根据DIN VDE 0871条例，仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN 45 635 －19条例： 　　仪器应放置在低于40分贝的环境下。 　　为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。 　　操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间。 　　操作电压应保持稳定。 　　操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘。 　　保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。 2、操作注意事项 　　酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果，因此要得到准确结果，试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯，会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项： 　　使用加液器加液，加液头不能混用。 　　洗板要洗干净。如果条件允许，使用洗板机洗板，避免交叉污染。 　　严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。 　　在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。 　　请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手。 　　如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格按照试 　　剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。 　　如果仪器接触过污染性或传染性物品，请进行清洗和消毒。 　　不要在测量过程中关闭电源。 　　对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。 　　使用后盖好防尘罩。 　　出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。

酶标仪的优点：可以高通量同时测得多个样品的紫外吸收信号；可以用于直接有紫外吸收的样品；也可以用于试剂盒反应后或者加标签以后有紫外吸收的样品。

酶标仪在临床实验方面应用广泛，可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。任何仪器在使用时往往都会出现一些小故障，酶标仪仪器也一样，酶标仪在使用的过程中出现故障后如何解决呢?酶标仪的常见故障　　1、酶标仪开机后无反应　　故障分析：出现这种情况请检查酶标仪电源线是否接好，保险丝是否烧断。　　2、酶标仪开机电源指示灯亮，液晶显示屏能显示字符，但显示时间较短　　故障分析：导致此种现象有两种可能，一是液晶显示器驱动、控制电路出现故障 二是供给液晶显示器的电源电压不正常。　　故障排除：打开酶标仪上盖，通电观察，散热片是否发热，若发热，则用数字万用表直流电压档测三端集成稳压块输出端，观察有无电压输出 若没有，说明电源有故障。由于三端集成稳压块内含过流限制和过热保护电路，为了判断是三端集成稳压块的故障还是后级负载短路引起的故障，可将酶标仪母板上三块电路板逐一拔出，通电再测量三端集成稳压块输出端电压，若拔出液晶显示驱动—控制这块电路块时，三端集成稳压块的输出端电压恢复正常，则可初步判断是电路板上的负载有短路现象。检查该电路板直流供电系统的各个元器件，可能为以树脂壳包装的铝固体电解电容器已击穿造成短路等原因。换上相同规格的电解电容器，即可排除故障。酶标仪的常见故障.jpg　　3、酶标仪测量的结果重现性不好，即使用空板测量误差也在允许的范围之外　　故障分析：检查试剂、判定公式以及光路是否被污染。排除这些问题后，检查微板的卡簧是否卡到位，没有卡到位会造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。　　4、酶标仪测量结果OD值偏低　　故障分析：可能是酶标仪灯的能量值偏低，在排除完灯的能量值偏低后，可能是滤光片上有灰尘，用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。　　5、酶标仪调不出所编程序　　故障分析：程序必须在相应程序模块下调出，如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。　　6、肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大　　故障分析：出现这种情况是由于滤光片参数错误，测量滤光片没有正确的进入光路，测量光的波长与正确测量光的波长相差大致使结果失真，可以在“参数”中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。还可能由于电源或其它原因，有时会造成酶标仪存储的滤光片参数丢失或错误，此时应进行检查并重置参数。

[align=center][font='calibri'][size=13px]酶标仪的使用[/size][/font][/align]1、 [size=18px]酶标仪[/size][size=18px]酶标仪是一种用于测量酶活性的仪器，主要应用于生物学、医学、生化和环境科学等领域。它可以通过测量酶催化反应产生的光、色、荧光等信号来定量分析样品中的酶活性或酶底物的浓度。[/size]2、 [size=18px]检测原理[/size][size=18px]与主要结构和光电比色计基本相同，在特定波长下检测被测物的吸光值，称为光吸收检测（Absorbance，Abs）。[/size]3、 [size=18px]应用场景[/size][size=18px]核酸和蛋白质定量、ELISA、酶学检测、细菌生长OD600测定、内毒素检测、MMT/CCK8等细胞活力分析。[/size]4、 [size=18px]操作步骤[/size][align=left][font='calibri'][size=13px]1. [/size][/font][font='calibri'][size=13px]准备样品和试剂：准备待测样品和相应的试剂，包括酶底物、底物转化产物、标准品等。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px]　　2. 设置实验参数：根据实验需求，设置酶标仪的相应参数，如测量波长、反应时间、温度等。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px]　　3. 加样：将待测样品和试剂加入酶标仪的反应孔中，确保每个孔中的样品和试剂配比准确。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]　　4. 启动测量：按照酶标仪的操作指南，启动测量程序，开始催化反应。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]　　5. 数据记录与分析：酶标仪会测量并记录催化反应产生的信号强度，可以通过软件或仪器本身的显示屏查看数据。根据实验需求，对数据进行分析和解读。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]6. 结果评估：根据测量结果，评估样品中酶活性、酶底物浓度或其他相关参数。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]五、注意事项[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]1.[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222]使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p]移液器[/url]加液，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p]移液枪[/url]头不能混用。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]2.[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222]洗板要干净，避免交叉污染。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]3[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222].严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]4[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222].请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成注意做好清洁工作。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]5[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222].不要在测量过程中关闭电源。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]6.[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222]对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]7[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#222222].使用后盖好防尘罩。[/color][/size][/font][/align]

大家好！我目前在酶标检测氯霉素和呋喃唑酮，试剂盒的检测下限是0.1PPb 灵敏度是0.025PPb ，然后我最终的检测结果是 0.1PPb（已经乘以其稀释倍数2）和0.2PPb（同1），这样的结果应该怎么判定呢？多多指教，谢谢。（有标准样品做曲线：0.0 0.025 0.075 0.225 0.675 2.025 PPb）0.1和0.2算样品有含量的吗，如何报告？ 本来判断标准是：不得检出。 平时我经常做酶标检测，对于如何判定阴阳性，一直没有掌握。请大家帮帮忙

[size=4]我们用的是Thermo的MK3型酶标仪，试剂用的是上海捷门保林迈生物工程有限公司的氯霉素酶联免疫定量检测试剂盒，酶标仪直接连着打印机，数据是直接打印的，数据处理系统是捷门保林迈给的，可是我不会用，捷门的人交往设置好了之后，我输入数据打印了一次，等我第二次输入数据打印时就不行了，问捷门的人，他说是因为我输数据部对，吸光度应该是从大到小的顺序，可是为什么我第一遍时可以，他说你要这样输我也没办法，可是吸光度第一个不是空白吗？应该是比下面几个小的吧，我把我们去年老师傅做的数据拿出来也是这样啊，第一个数据是比下面的小，那现在问题到底在哪呢，请各位大虾帮帮忙，非常感谢！！！[/size]

酶联反应试剂盒上机用酶标仪检测恩诺沙星时，样品的吸光值比0标准品的吸光值还高，这是什么原因

课题组有一同学苦于某个实验样品量太多，想用酶标仪代替分光光度计测定OD值。毕竟比色皿一个个测多辛苦，哪有酶标板来得顺畅。我虽然觉得这个想法有点crazy，但一时也找不到太多反驳的理由。毕竟两者原理几乎一样，而且酶标仪似乎功能更加全面；可是如果真的可以完全通用，为什么那些方法和标准里为什么只字不提仪器可以是“紫外-可见分光光度计或连续波长酶标仪”呢？思来想去还是决定先在网上查个意见于是我在本坛挖出了06年的一个帖子 [url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060414/393995/[/url]这里面某些说法就不必再提了，肯定不是答案。比如一个测的是光密度一个测的是吸光度的说法。其实OD和absorbance根本就是一回事（见[url]http://en.wikipedia.org/wiki/Absorbance[/url]）又比如酶标仪用的是滤光片的说法。现在在科研领域，连续波长的酶标仪早就普及了，相对而言医用酶标仪还常有使用滤光片的。我还见过一种说法，说一个是垂直光路一个是水平光路。此话倒是不假，可这种说法无法解决我的疑虑。作为终端用户，关注的只是准不准，符合不符合检测要求，至于实现的技术手段那是黑猫白猫的事情了。不过，在那个帖子的最后一层，我看到这么一种说法[b]“分光光度计测量的是以空白溶液为参比，在约定厚度（一般为1cm）的量池中的相对吸光值。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪测定时其光路长度不确定，也无空白参比，得出的是特定条件下的绝对值，因此即使是同一台仪器，不同测量批次之间也其数据不具备直接的可比性。”[/b]我觉得这种解释很有新意，而且似乎也颇有道理。但遗憾的是，话题直到这里就终结了，于是我想把这个话题继续，大家不妨来讨论一下，到底酶标仪和分光光度计有什么重要差别使得至今没有完全通用呢？

1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl（在使用前15分钟内配制），酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。4.每孔加HRP Conjugate工作液（临用前15分钟内配制）100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右（根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止）。7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（OD值）。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

如何知道酶标板孔中固化的是抗原还是抗体？定量分析中是每个加入的试剂量都要准确还是只要板上固化的量和样品的加入准确就行？

酶标仪即酶联免疫检测仪,是酶联免疫吸附试验的专用仪器.可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量.ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250u l以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求.酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.酶标仪操作规程1．开启仪器电源开关，预热5分钟，同时启动电脑。 　　2．启动Magellan.exe程序，加入程序主界面，仪器微孔板架同时自动打开。 　　3．将待测微孔板在板架上放好。 　　4．根据不同的测量要求，设置好测定波长和测量模式后，进行检测。 　　5．保存检测结果或进行打印。 　　6．关闭计算机和主机电源，登记使用记录。