酶活性

固定化酶的活性（力）如何进行测定？ 其他的酶的 活性呢？怎么测定？

各位老师，求助土壤中亚硝酸还原酶的活性及硝酸还原酶的活性测定的实验方法，有好方法的请跟贴！！ 邮箱：acd1020@126.com

[size=3][font=宋体]土壤酶活性与土壤肥力的情况密切相关。许多研究资料表明，土壤微生物的数量与酶活性有很好的相关性。脲酶活性较高的羽扇豆。微生物是土壤酶的重要来源。脲酶的活性与土壤全氮、速效氮、速效磷及土壤交换性量有明显相关性，增加土壤湿度，过氧化氢酶活性与土壤[/font][font=Times New Roman]C/N[/font][font=宋体]比、全氮、速效氮、盐基饱和度及物理性沙粒有明显相关性，增加土壤湿度，过氧化氢酶活性液增强，土壤干燥时，活性下降。磷酸酶活性与土壤有效磷含量有关，增加可溶性磷，酶活性逐渐提高，以后便逐渐下降，当大量供给磷肥时（如达[/font][font=Times New Roman]60~80mg/100g[/font][font=宋体]土），则完全察觉不到磷酸盐水解酶的活性。一般认为，富含腐殖质的高肥力土壤，脲酶的活性也最高。总之，许多研究者认为，酶的功能是明显的，土壤酶活性与土壤肥力水平的一项重要指标。[/font][/size]

[size=4]土壤酶活性成为近年来的研究热点，希望相关专家来讨论一下各种酶对土壤或环境都有些什么指示作用？测酶活都用到哪些仪器设备[/size]

胞外酶活性如何测定

酶的活性测定或是抗酸剂药物的释放动力监测都需要能迅速调整到预设pH值并长时间保持其恒定不变的滴定仪。当反应过程中产生酸或碱时，仪器自动判断并加入相应的碱或酸，使pH值长期稳定在设定的范围内，这就需要电极有足够的灵敏度和响应速度。实验证明，瑞士METROHM公司的滴定仪能最精确地将pH保持恒定。在此过程中，其pH参数和温度连续地被监测及记录，并有完整的文件记录。这就为酶活性的研究提供翔实的数据支撑。顺序加液功能：顺序加液是一项很重要的功能，为了避免在滴定管重新充液时，加液中断，这样会造成这段时间pH上升或下降，而无法保持恒定，当第一个配液装置在充液时，第二个加液装置启动，开始加液，通过这种方式，可以确保在长时间的反应过程中pH真正保持恒定。

[b][size=4]求助土壤蔗糖酶活性采用3，5二硝基水杨酸比色法的详细步骤；脲酶活性采用苯酚钠比色法测定的详细步骤；磷酸酶活性的测定方法及步骤[/size][/b]

求教：怎样定量检测酶活性前两天听了一个报告，看人家能够定量评价酶的活性，想请教各位版友知道具体的细节操作吗？

我用试管法测定蜂蜜中的淀粉酶活性和用分管光度计法测定蜂蜜中的淀粉酶活性，数值差别在2倍左右。不知为什么？

各位高手，请教下土壤酶活性的测定方法，是鲜样哦！！不胜感激！！

我们在测粉体的活性镁时，发现活性镁的含量大于100%，可能在粉体中掺杂了其它杂质，并且现在怀疑杂质最大的可能性就是硼甘，因为我们是用雾化镁粉还原硼甘生产硼粉，而此粉体是从硼粉车间返回，并且发现里面有亮晶晶类似针状的物质（应该是硼甘），那么在测活性镁时用的是1+4的盐酸，盐酸和硼甘应该不会放出什么气体吧？如果能够那需要在什么条件下，如何发生？还是混有其它杂质？

我现在想土壤中的酶活性，比如过氧化氢酶、脲酶等。有没有人做过，都用的什么方法，要注意些什么问题？希望做过的人能给点帮助。

用乙酰胆碱脂酶作农残快速检测时，出现提示：酶活性低，什么原因造成的？查看说明书，酶和底物配置好后4度可保存6天，一是酶和底物要放冰箱上里保存，二是不要超过6天。除了这两种药品外，还有什么原因会引起酶活性低？

有个问题一直想不通，请各位帮帮我啊！就是在连续几天测定胁迫下SOD酶的比活力后，发现比活性一直平稳，但后来急剧上升之后下降。但是下降时测得的蛋白质含量与上升时差不多。 为什么酶的比活性下降了（或者说），但是蛋白质含量还是如此高？SOD比活性上升了，是因为酶量增加了还是酶结构的变化？还是说，SOD比活性降低，只是酶的活性部分被抑制，其酶的蛋白质性质未发生改变？ 向各位高手求救！[em0715]

α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标，为此提出了对小麦α-淀粉酶活性的快速测定方法的研究。α-淀粉酶活性的测定方法有多种，本文仅探讨了常用的3，5-二硝基水杨酸法和凝胶扩散法。结果表明，两种方法的测定结果差异不显著，而且两者呈显著正相关；从变异系数上看，后者的变异程度较低，其精度较高；从误差来源上看，前者引起误差的因素较后者多；后者较为简便快速，准确度较高，重复性较好，可用于大批量样品的分析。关键词: 小麦, α-淀粉酶活性, 3，5-二硝基水杨酸法，凝胶扩散法1 材料和方法1.1 材料和试剂(1)萌芽的小麦：取当年小麦种子，按小麦萌发试验培养，两天后用于测验.(2)1%淀粉溶液.(3)0.4N NaOH.(4)pH5.6的柠檬酸缓冲液：A. 称取柠檬酸20.01克，溶解后稀释至1升；B.称取柠檬酸钠29.41克，溶解后稀释至1升。取A液13.7毫升与B液26.3毫升混匀，即为pH5.6的缓冲液.(5)3,5-二硝基水杨酸: 精确称取3,5-二硝基水杨酸1克溶于20毫升1N氢氧化钠中，加入50毫升蒸馏水，再加入30克酒石酸钾钠，待溶解后，用蒸馏水稀释至100毫升，盖紧瓶塞，勿使二氧化碳进入.(6)麦芽糖标准液：称取麦芽糖0.100克溶于少量蒸馏水中，仔细移入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度.(7)α_淀粉酶提取缓冲液:20mmol/L醋酸钠（2.7216g/L）,1mmol/L氯化钙（0.11099g/L）,pH 5.5.(8)%5（V/V）碘—碘化钾溶液：1.95gKI+0.65gI2溶解在100毫升蒸馏水中.(9)α_淀粉酶36.18u/mg (Sigma公司)：逐级稀释10, 2.5，0.625 ,0.15625,0.03906, 0.009765mg/mL系列标准液.(10)20%冰乙酸，琼脂糖，可溶性淀粉.1.2 方法1.2.1 3.5一二硝基水杨酸测定法酶液提取从五个培养皿的发芽小麦中，各随机称取1克于研钵中，加少许α_淀粉酶提取缓冲液，研磨至匀浆，倒入离心杯中，于4000rpm离心10分钟,取上清液并并定容至25ml，即为酶提取液，备用。α_淀粉酶活性测定(1)取试管，注明对照管，测定器，每样品三个重复.(2)于每试管中各加酶液1ml，加70℃恒温水浴中加热15分钟，此期间β_淀粉酶受热钝化(3)每管中各加入1毫升pH5.06的柠檬酸缓冲液.(4)对照管中加入4毫升0.4NnaOH.(5)测定管与对照管置40℃水浴中保温10分钟，再向各管加入40℃下预热的淀粉溶液2毫升摇匀，立即放入40℃水浴中准确保温5分钟取出，向各测定管迅速加入4毫升0.4N的氢氧化钠，以终止酶活动.麦芽糖测定取以上各管中酶作用后的溶液及对照管中溶液各2毫升，分别放入25毫升试管中，再加2毫升3，5-二硝基水杨酸，混匀，置水浴中5分钟，冷却后定容至25毫升，混匀，用分光光度计在520nm波长下进行比色记录消光值，取麦芽糖标准液(1ml/mg)0，0.2，0.6 ，1.0，1.4，1.8，2.0ml。按上述同样方法比色后，将测得的消光值与麦芽糖标准液进行直线回归后，代入求得样品的麦芽糖含量，并换算成每克种子α_淀粉酶的活力单位。1.2.2 凝胶扩散测定法凝胶板制备取一长方形优质玻璃，除一宽边外，其余三边边缘各边一条透明胶片，再在上面盖一同等大小玻璃，两块玻璃两侧用夹子固定，放温箱中预热50-60℃，取三角烧杯，加30毫升α-淀粉酶提取缓冲液，0.36克琼脂糖和0.30克可溶性淀粉（作反应底物），在电炉上加热煮沸至透明后，冷却至70℃左右，将预热的玻璃胶片框架斜放在桌面上30℃，用预热的移液管吸取凝胶液，从玻璃架高一端空隙中均匀注入，直至其流遍整个胶片表面为止，不能有气泡。用量约25毫升冷却后形成凝胶板，贮存在4℃冰箱备用。α_淀粉酶活性测定取出预制冷藏的凝胶板，揭开上面一块玻璃，用塑料打孔器在凝胶板上每隔一定距离打一个1.33毫米的孔，用微量移释管向每孔内注入提取液。上述1.2.1制得的酶液于70℃水浴加热15分钟后钝化β-淀粉酶后备用。同时，在每块凝胶板孔中加入淀粉酶系列标准液（重复两次）。将凝胶板置10℃恒温箱中反应24小时后，取出，将胶板浸入I-KI溶液中染色5min,加入冰乙酸酸化终止反应。用蒸馏水淋洗3min，洗净染色液，由于加α_淀粉酶孔周围淀粉被分解，因而染色后出现未能染色的圆。未与α-淀粉酶反应的呈蓝色，用直径测量仪测圆直径。用α_淀粉酶标准液浓度对数与褪色圈直径直线回归，计算每克样品含α-淀粉酶活力单位数。2 结果和分析2.1 两种方法标准曲线2.1.1 麦芽糖标准曲线麦芽糖标准液含量越高，比色后记录的OD值越大，麦芽糖标准液比色后，测得的OD值（ｘ）与麦芽糖浓度（ｙ）进行直线回归，结果为：ｙ=1.0240ｘ+0.0897，r=0.9998，相关系数极显著，表明麦芽糖标准液含量与消光值呈直线关系，通过此直线方程可进一步测得酶活性；即将各样品的消光值代入回归方程，求得样品麦芽糖含量，然后计算可得每克种子的α_淀粉酶活力。2.1.2 α-淀粉酶标准曲线α_淀粉酶标准液浓度越高，其褪色圈直径越大，5个样品的褪色圈直径也有明显差异。将α-淀粉酶标样所测得褪色圈直径（ｘ）与α-淀粉酶浓度对数（ｙ）进行直线回归。结果为：ｙ=2.4659x-3.8994， r=0.9860，相关系数极显著，表明褪色圈直径与淀粉酶标准液的浓度对数呈直线关系，通过此直线方程可进一步测得酶活性，即将各样品的褪色圈直径代入回归方程，求得各样品的α_淀粉酶浓度，然后换算成每克种子中α_淀粉酶的活力单位。2.2 两种方法测定结果比较对5个样品的淀粉酶活性，用两种方法测定，并记录了测定结果（表1）。表1 3，5-二硝基水杨酸法和凝胶扩散法结果 样品 3，5-二硝基水杨酸法 凝胶扩散法 消光值 酶活性 （u/g） 直径 酶活性(cm) （u/g） 1 0.1010 2.191.20 4.03 2 0.1580 6.701.35 6.72 3 0.1460 5.241.27 5.06 4 0.1667 6.961.45 7.14 5 0.1477 5.481.28 5.86对两组样本进行t测验，测定结果为：t=1.2855, t0.05=2.0776,｜t｜r0.05,表明两种结果相关系数显著,即两种方法从其中之一测定结果可以推算出另一方法的测定结果。2.3 两种方法的精度比较表2 两种方法变异数分析结果 方法 平均数（u/g） 标准差(u/g) 变异系数CV(%) 3，5-二硝基水杨酸法 5.314 [

请问各位，腊肉制品中，那几种蛋白酶比较活跃，对风味影响较大？活性容易测定吗？

求关于抗氧化和酶活性方面的资料啊，书。谢谢啦想系统的知道下抗氧化跟酶活性还有酶活性的影响因素，具体到分子水平，细胞水平。这方面的专家希望能联系讨论，请教下，我的msn是[email]mio_1115@hotmail.com[/email]谢谢哟

请问测定酶活性一定需要用保护柱吗？请高手指点，谢谢！

试剂标签上写的1:10000 1:3000和酶活性 u/mg u/g unit/g u/mg啥关系，求助

请问谁知道钙离子ATP酶活性测定的详细步骤？分享分享，非常感谢！

请问各位，腊肉制品中，那几种蛋白酶比较活跃，对风味影响较大？活性容易测定吗？

请问一下各位同行，各位前辈，在做农药残留快速检测的时候，酶活性要求大于0.4小于0.8，但是我们做的酶活性大于1.0，这是什么原因导致的呢？如何解决这样的问题呢？谢谢！！

RT，测膳食纤维需要三种酶，活性应该是多少啊，什么范围比较好啊，国标上没有说啊，急啊

各位前辈，高手们，在些先向各位问声好！请问各位有谁知道菠萝中蛋白酶活性的测定方法？请不吝赐教啊！万分感谢！！！

GB/T5009。88-2008酶重量法测膳食纤维用的淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶的活性怎么测？

在做体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。具体的实验操作如下，110μLpbs（Ph6.8），各样品梯度100-200-400-800-1600-3200μg/mL各20μL，还原型谷胱甘肽（1mg/mL）10μL，20μL酶溶液，37℃反应15min后，加20μLPnpg（2.5mmol/L），继续37℃反应15min，80μL碳酸钠（0.2moL/L）终止反应。每次加完试剂后，谷胱甘肽、酶、pnpg保存在-4°的冰箱。样品组：样品+pbs+酶+底物+碳酸钠+谷胱甘肽 样品空白：不加底物 对照组：无样品 空白对照：无样品无底物。最终实验结果：大多数100-200-400分子比分母大，1减去后是一个负数，没抑制率。后面做了阿卡波糖阳性药物，在100-200-400也很难有抑制率，目前已经做了30次。认为操作没问题，是浓度太低没活性吗？

淀粉酶活性代表了蜂蜜的哪些特性？对人体有何益处？望老师不吝赐教

哪里可以购买到TTC-脱氢酶活性测定仪

与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?谢谢！

[align=center]板栗叶水浸液对商洛丹参幼苗酶活性的影响[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]食品事业部：魏娜[/align][b]摘要：[/b]本实验以商洛丹参种子为材料，以板栗叶为供体，研究不用浓度板栗叶水浸液对商洛丹参幼苗酶活性的影响。采用生物测定法测定丹参幼苗酶活性的状况。关键词：丹参，板栗叶水浸液，酶活性植物化感作用(Allelopathy)是指植物(含微生物)向环境释放特殊的化学物质而对其他植物或微生物产生直接或间接的有害或有益的作用,这些特殊的化学物质叫做化感物质。化感物质一方面通过植物体释放产生,另一方面通过植物地上和地下部分的残体分解产生。化感作用广泛存在于自然界中,它涵盖了各种植物之间、包括微生物间的相生相克关系,对解释植物个体及种间的相互作用机制和构建可持续的植物群落都起着重要的作用,并对农、林业生产有重要的影响,如农作物的连作障碍、森林更新失败以及生物入侵等现象都与化感作用密切相关。 化感物质进入土壤后,植物根际微生态系统将发生复杂的变化。化感物质对土壤微生物区系及酶活性的研究,包括根系分泌物数量和成分的变化与土壤微生物类群的关系、土壤酶活性与土壤微生物种类及数量的关系等,这为研究化感作用对土壤根际微生态系统的影响,特别是为根际微生物区系的变化提供了有益的参考。目前,有关植物某一部位水浸液以及纯化感物质对土壤酶活性、土壤养分和微生物数量影响的相关研究相对较少,已有研究主要包括:黄益宗等研究发现化感物质阿魏酸对土壤硝化反应的抑制作用最强,其次是对叔丁基苯甲酸 吕可等通过用花椒叶水浸液浇灌盆栽花椒幼苗研究水浸液对土壤酶和微生物的影响,结果表明:花椒叶水浸液使根际土中的细菌、真菌和放线菌数量以及微生物总数均有不同程度的减少,使根际土蛋白酶、蔗糖酶和酸性磷酸酶活性明显低于非根际土相应的酶活性,而过氧化氢酶和多酚氧化酶活性则显著升高 印楝种子壳的酒精水浸液显著抑制了土壤中放线菌的数量,显著增加了土壤中自由固氮细菌的数量,显著抑制了土壤中反硝化细菌的数量,土壤脱氢酶活性未受到影响,而磷酸酶活性受到了严重的抑制 2,4二叔丁基苯甲酸(PEDT)和香草酸两种化感物质均在低浓度下提高而在高浓度下抑制了微生物生物量及其活力。板栗（Castanea mollissima Blume）,有较高的药用价值，有健脾胃、益气、补肾、强心的功用。其中所含的丰富的不饱和脂肪酸和维生素，能防治高血压病、冠心病和动脉硬化等疾病。板栗在商洛地区大面积种植,是商洛主要经济林品种之一、五大商药之一、也是商洛的主要经济作物之一。丹参(Salvia miltiorrhiza Bge. )为唇形科鼠尾草属多年生草本植物,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功能。 其根及根茎是常用的重要中药[sup][color=#3366cc][/color][/sup]，有活血化瘀、消肿止痛、养血安神的功能[sup][color=#3366cc][/color][/sup]。丹参根中含有丹参素、丹参酮等生物活性物质[sup][color=#3366cc][/color][/sup]，对治疗冠心病、心绞痛和脑血管疾病有很好的疗效，同时还具有抗菌消炎、保肝和改善肾功能的作用[sup][color=#3366cc][/color][/sup]。研究不同浓度板栗叶水浸液对商洛丹参幼苗酶活性的影响，对科学构建林药复合系统，合理选择林下中药材品种，提高土地利用率，增加农民收入，促进地方经济发展，不仅具有理论指导作用，还具有非常重要的现实意义。化感作用的研究对农林（林药）复合系统中物种的配置、耕作制度和栽培措施的优化，农田病虫害的控制、复合系统的经营管理，以及保持生物多样性和农业可持续发展有重要意义。在农林（林药）复合系统中，林木会通过淋溶、挥发、残体分解和根系分泌向林下植物释放有益或有害的化学物质，促进或抑制植物的生长和生产，那么合理选择林下作物品种直接影响整个复合系统的总产量和农民的经济收入。研究板栗和丹参之间的化感作用，对林药复合生态系统的构建、管理、经营有着十分重要的意义。[b]1．材料与方法1.1 实验材料[/b]1.1.1实验材料[b] [/b] 供体材料为板栗叶，采自商州区。受体种子为商洛地道中药材丹参。1.1.2实验仪器 人工气候培养箱、分光光度计、水浴锅、冷冻离心机、制冰机、天枰、真空干燥器1.1.3实验试剂[b] 1.2 实验方法1.2.1 板栗叶水浸液的制备[/b]。取风干的板栗叶样品，剪成1cm长的小段，按30g/600mL的比例用蒸馏水浸泡，在振荡器上震荡48h（25℃），过滤后即得浓度为0.05g/mL的水浸液(母液)，用蒸馏水将水浸液分别稀释至0.01、0.02、0.03、0.04、0.05mol/L，置于4℃冰箱备用。 表 1 制作不同浓度的板栗叶水浸液[table][tr][td] 板栗叶水的浓度（mol/L）[/td][td] 母液(mL)[/td][td=1,6]分别用蒸馏水定容至500mL。[/td][/tr][tr][td] 0.01[/td][td] 10[/td][/tr][tr][td] 0.02[/td][td] 20[/td][/tr][tr][td] 0.03[/td][td] 30[/td][/tr][tr][td] 0.04[/td][td] 40[/td][/tr][tr][td] 0.05[/td][td] 50[/td][/tr][/table][b]1.2.2 丹参种子萌发及幼苗培养。 [/b]取丹参种子先用0.1%HgCL[sub]2 [/sub]消毒10min，浸泡24h。蒸馏水冲洗数次，滤干后均匀排列放至培养皿中，于人工气候培养箱（温度25℃，湿度62°）中培养。从培养的第二天起及时补充等量水浸液和蒸馏水，使滤纸始终保持湿润。[b]1.2.3 [/b]超氧化物歧化酶活性的测定 取丹参种子0.20g，加5ml的mmol/L的磷酸缓冲液，研磨成匀浆，匀浆液以5000r/min离心15min，按谁谁的比色法（愈创木酚法），测定各组丹参幼苗SOD酶活性，最后以OD470/ming表示超氧化物歧化酶的活性[align=center][b]实验一 氮蓝四唑（NBT）法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力[][/b][/align]一、原理 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）普遍存在于动、植物体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除超氧阴离子自由基，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：植物叶片。（二）仪器设备：高速台式离心机，分光光度计，微量进样器，荧光灯（反应试管处照度为4000lx），试管或指形管数支，黑色硬纸套。（三）试剂（1）0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）。A母液：0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液：取Na[sub]2[/sub]HPO[sub]4[/sub]12H[sub]2[/sub]O （分子量358.14） 71.7gB母液: 0.2mol/L 磷酸二氢钠溶液：取NaH[sub]2 [/sub]PO[sub]4[/sub]2H[sub]2[/sub]O （ 分子量156.01） 31.2g分别用蒸馏水定容至1000mL；0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）的配制：分别取A母液（Na[sub]2[/sub]HPO[sub]4[/sub]）228.75mL,B母液（NaH[sub]2 [/sub]PO[sub]4[/sub]）21.25mL，用蒸馏水定容至1000mL。（2）130mmol/L甲硫氨酸（Met）溶液：称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100ml。（3）750μmol/L氮蓝四唑溶液（NBT）：称取0.06133gNBT用磷酸缓冲液定容至100ml，避光保存。（4）100μmol/L EDTA-Na[sub]2[/sub]溶液：称取0.03721g EDTA-Na[sub]2[/sub]，用磷酸缓冲液定容至1000ml。（5）20 μmol/L核黄素溶液：称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容至1000ml，避光保存。三、实验步骤1.酶液提取 取丹参幼苗0.5g于研钵中研磨成粉末，加2ml预冷的提取介质在冰浴上研磨成浆，加入提取介质冲洗研钵，提取介质终体积为5ml。取1.5-2ml于4℃下10000r/min下离心20min，上清液即为SOD粗提液。2.显色反应 取5ml指形管或试管（要求透明度好）4支，2支为测定管，另2支为对照管，按下表加入各种溶液： 表2 制作[table][tr][td][align=center]试剂名称[/align][/td][td][align=center]用量（mL）[/align][/td][td][align=center]终浓度（比色时）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.05mol/L磷酸缓冲液[/align][/td][td][align=center]1.5[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]130mmol/L Met溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]13mmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]750μmol/L NBT溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]75μmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]100μmol/L EDTA-Na[sub]2[/sub]溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]10μmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]20 μmol/L核黄素溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]2.0μmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]酶液[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]2支对照管以缓冲液代替酶液[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]蒸馏水[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]总体积[/align][/td][td][align=center]3.0[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][/table]混匀后将1支对照管罩上比试管稍长的双层黑色硬纸套遮光或置暗处，其他各管于4000lx日光下反应20min 至反应结束后，用黑布罩盖上试管，以不照光的对照管作空白，分别测定其他各管在560nm下的吸光度。