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酶解产物

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    酶催化在手性拆分方面有着极大的优势,但是关于酶及基产物的检测,目前是个盲区。本来想用质谱进行检测,工程师建议用C18 300A的HPLC检测。大家有什么好的建议?

  • 裂解产物的鉴定

    裂解产物的鉴定其实与常规[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]的定性分析是相同的,只不过在Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]中,当裂解产物很复杂时,采用标准样品对照或保留值对照定性就不太现实了,因为这样做既费时,分析成本又高。对合成高分子(特别是均聚物)裂解产物的鉴定则可以用常规色谱方法。 1.Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]和MS联用(Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/Ms) 我们己经知道,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS是一种强有力的定性分析工具,但当Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]采用填充柱时,相对大的载气流量与MS的高真空要求有矛盾,所以,色谱柱流出物在进入MS之前必须除去大部分载气,而且要保持裂解产物的量不能损失太多。为此目的,在既与入侣的接口处要用一个分离器。一般分离器对扩散系数大的气体更为有效,故Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS常用氦气作载气。鉴定裂解产物时,往往采用电子轰击(EI)和化学电离(CI)源,有时也采用场解吸等方法。 根据数据处理方式的不同,Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS得到的可能是总离子流色谱图(TIC)或重建离子流色谱图(RIC)。对于前者,应考虑木底问题。如果本底离子流太大,有可能会掩盖某些含量小的裂解产物峰,因此必须扣除本底,以得到更加可靠的谱图解析结果。如果是后者,则基本不存在这一问题。还需要指出,同一化合物在MS上的响应值可能与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]检测器如FID的响应值不同,故不能简单地按照峰的相对大小来推断 FID 色谱图上峰的归属。 近年来,串联MS也己用于Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]分析,形成了强有力的Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/MS 系统。当裂解产物十分复杂时,即使用高效毛细管柱也不能实现完全分离,这样,仅用Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS很难确证每一种裂解产物的结构。例如人的头发的分析在司法检验和临床诊断上有重要意义,有人先用Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS分析人发的裂解产物,但有些产物无法确证。后来采用Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/MS 技术,获得了较好的结果。 2.Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]与傅里叶红外光谱(FTIR)联用(Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/FTIR) FTIR在有机化合物的结构鉴定方面有极为重要的作用。Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/FTIR虽然不像Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/MS那样使用普遍,但由于FTIR可提供分子结构信息,特别是近年来FTIR技术的发展,灵敏度大为提高还不及效补充,Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/FTIR己越来越多地用于分析裂解。尽管这一技术的检测灵敏度和定量精度Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS,但它能提供诸如官能团方面的分子结构信息,因而成为Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS的有效补充。 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/FTIR己有商品化仪器,在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]和FTIR之间用一个未涂固定液的空石英管作为接口,置于一个加热保温套中。根据样品裂解产物情况控制接口的温度,以防止高沸点裂解产物的冷凝。通常接口的温度应高于或等于色谱柱最高操作温度,而低于 FTIR 的光管温度,这样可保证光管不被污染。由于目前光管的使用温度一般不超过300℃,因此限制了它在高沸点裂解产物鉴定上的应用。相比之下,在挥发性物质的热分解研究方面,Py-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS/FTIR的应用更为广泛一些。 3.其他仪器方法 除了上述联用方法外,还可将裂解产物收集起来,然后用紫外光谱(UV)和核磁共振(NMR)技术鉴定。也可用化学方法鉴定,当然,操作要复杂一些。综上所述,裂解产物的鉴定有多种方法,实际应用中往往是用两种或多种方法互相配合才能确认色谱峰的归属。这与普通[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]的定性道理是一样的。

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    裂解色谱裂解产物的定量分析

    1、裂解产物的定量分析 在Py-GC发展早期,由于使用各种各样实验室自制的裂解器,所以,同一样品在不同实验室的分析数据常常有很大的偏差。这使得很多人认为Py-GC的定量分析是不可靠的。经过几十年的发展,现在Py-GC的分析重现性己今非昔比,定量分析的重现性可以达到小于3%(相对标准偏差)。裂解产物的定量分析是Py-GC研究的基本要求,也是解析谱图的原始数据。具体的定量方法与常规GC是相同的,即基于峰高或峰面积的归一化法、内标法和外标法。但这些 方法用于Py-GC时应注意如下几个问题:(1)裂解产物的良好分离是准确定量的前提。这意味着要尽可能完全地分离裂解产物,而且色谱峰形要对称。故在裂解产物的定量测定之前必须更仔细地优化色谱分离条件。(2)在定量分析时还必须对实验重复性进行评价。如果误差太大,说明仪器系统的存在条件未能严格重复。若色谱峰分离良好,那么造成重复性差的原因可能有:①样品量太大;②样品在裂解器中的位置不重复;③裂解器加热特性变化;④仪器系统被污染;⑤残留溶剂的影响。这时应逐项检查,找到问题加以解决。直到获得满意的重复性,方可进行可靠的定量分析。(3)通过裂解谱图上某一碎片峰的定量来估算样品中某一组分的含量(如测定共聚物的组成)。这时所选的特征碎片峰应该是完全分离的和峰形对称的,而且这一碎片还应是通过单分子反应得到的初级反应产物,这样才能保证所测的峰高或峰面积与样品的组成呈线性关系。在这种情况下,更要严格控制裂解条件,抑制二次反应的发生。减少样品量有利于防止二次反应。(4)正如在常规GC中那样,内标法定量的精度是最高的。在裂解样品中定量加入另一种物质,只要其裂解产物不干扰样品的裂解和色谱分离,就可用该裂解产物作为内标物,从而大大提高定量结果的可靠性。2、数据处理基本方法 数据处理是Py-GC系的最后一步,也是分析成功的关键性一步。比如作样品鉴定时,在裂解产物较少的情况下,谱图比较简单,仅凭直观就能判断两张谱图是否相同,但在大多数情况下,裂解谱图相当复杂,色谱峰多达几十甚至上百,这时仅靠直观就不能解决问题了,而必须用定量的方法来描述两张谱图的相似程度。但Py-GC还需要一些特殊的数据处理方法,特别是化学计量学的应用,如模式识别、因子分析、多元曲线和相似指数等方法可以揭示谱图间的微小差异。(1).保留时间标准化 在Py-GC中,由于色谱柱效和操作参数会逐渐有所变化,故同一裂解产物的保留时间不可能在每次分析中都严格重复。这样在计算机进行谱图自动比较时,为保证准确识别相应的色谱峰,就必须设定一个保留时间范围而不是一个特定值。解决这一问题的方法就是保留时间的标准化。 所谓保留时间标准化就是选择一些参照色谱峰对裂解产物的保留时间进行校正,这与GC中的保留指数有相似之处。所不同的是保留指数采用正构烷烃作参照峰,而Py-GC所保留值标准化则是选择谱图上的色谱峰作参照。具体方法如图所示。其中裂解产物A和C是选定的参照峰,t[sub]r[/sub]和t[sub]s[/sub]分别为组分的原始保留时间和标准化的保留时间。 [img=,426,226]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712151555_10_2384346_3.png!w426x226.jpg[/img] 在理想情况下,所选择的参照峰应存在与所有被比较的谱图上,且是完全分离的、峰高值较大的,容易识别的。此外,在所比较的谱图上这些参照峰的相对大小还应大致相同。如果这些条件不能满足,还可以在裂解样品中加入内标物,如脂肪酸甲酷或烃类化合物。就参照峰的个数而言,最少需要两个。(2).响应值归一化 样品量的不同会引起裂解产物色谱峰响应值的明显变化,因此,每一张裂解色谱图都应作归一化处理,以消除样品量的影响。归一化方法一般有两种,一是将谱图上每个峰的峰高或峰面积(用I[sub]i[/sub]表示)表示为总峰高或总峰面积(∑I[sub]i[/sub])的分数,即为该色谱峰的归一化值(I[sub]i[/sub][sup]n[/sup]):[img=,145,53]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712151555_2187_2384346_3.png!w145x53.jpg[/img]二是将每个峰的峰高或峰而积(用I[sub]i[/sub]表示)表示为谱图上最高或峰而积最大的峰(I[sub]B[/sub])百分数:[img=,154,79]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712151555_7492_2384346_3.png!w154x79.jpg[/img] 两种归一化值的关系为:[img=,168,46]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712151556_1047_2384346_3.png!w168x46.jpg[/img] 对于谱图比较来说,第一种方法给出的结果更为可靠,因为前者可以消除峰高或峰面积波动的影响,而后者仅是相对于一个瞬时测定值的归一化。对于非常相似的样品,有人还提出一种更适合的归一化方法,即假定标准谱图上7个指定参照峰的总峰面积(∑I[sub]s[/sub])与未知样品相应的色谱峰总峰面积(∑I[sub]i[/sub][sup]n[/sup])是相当的,故可用下式计算未知样品的色谱峰响应值(峰高或峰面积)的归一化值:[img=,183,71]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712151557_4284_2384346_3.png!w183x71.jpg[/img](3).特征峰的选择 经过归一化的裂解谱图通常包括一组选定的色谱峰,即所谓特征峰。谱图的比较就是比较特征峰,而不是比较所有的峰。在Py-GC中,特征峰是指那些同样品的化学组成和结构有着确定对应关系的碎片峰。在进行谱图比较时,应选择那些响应值大的、完全分离的、且能重现的色谱峰。对于共聚物的鉴定,只比较三个特征峰就可以了,而在鉴定微生物时则要比较多达13个峰。 经过上述数据处理后,便可对裂解谱图进行比较。比较的方法有多种,从简单的峰计数到复杂的模式识别技术,其目的就是要描述谱图间的相似程度,从而对未知样品进行分类鉴定。常用的参数有相似系数、相似值、匹配因子、T测试、多变量预计方法等。

  • 有机物降解过程的产物的确定

    [color=#444444]我在间苯氧基苯甲酸(3-PBA)降解过程中,发现了一个中间产物,但是根据分子量无法确定产物的化学结构,请各位大侠帮忙。质谱图是负离子。[/color][color=#444444]3-pba 的分子量为214,各个离子峰为93,169,213,[/color][color=#444444]产物的分子量为466,离子峰为213,169,93[/color]

  • 降解产物分析

    利用LC/MSMS进行药物降解产物分析,发现相同同种物质,在SRM模式下,可以出峰,但是在全扫模式下利用相同流动相却不出峰。,为什么啊,,,,????????

  • 【求助】GC-MS测定PCB热解产物

    大家好,我是新手。最近在使用GC-MS测定4-chlorobiphenyl高温热解产物。做了500度的热解,O2/N2为6%,用活性炭吸附后用CS2洗脱,然后把样品注射到GC-MS。产物发现了biphenyl,原以为会看到benzene,可是没有于是调节柱温,最开始60-265°,改后为35-265度,但仍没有看到benzene。请问各位,column oven的温度,测不同的物质应该不用,但具体怎么设定呢?还有就是,在我换了分析参数(温度,保留时间等等)之后,是否应该先进标样,查看在此分析方法下,出峰时间,位置,以便后续进样的时候快速找到自己的产物?另外,如果有人对我做的方向 PCB热解后产物分析 熟悉的,能否留名,方便以后讨论?

  • 关于气质检测降解产物的问题

    [color=#444444]我想用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用仪[/color][/url]检测一个农药在土壤里面的降解产物,药在土壤里面的浓度足够高,但是为什么一直都检测不到降解产物呢,降解的第1、3、7、14、21、30天一直在检测,但是总是检测不到,恳请各位大侠能够帮帮忙,分析一下原因![/color]

  • 煤中有害微量元素分布储存机制及燃煤产物淋滤实验研究

    煤是中国的第一能源,占到全国能源消费总量的75%。然而,燃煤已经并正继续在对环境和人类健康产生严重危害,这已引起世界许多国家的高度重视。发展新的燃烧技术(如流化床)是减少燃煤污染的最好方法,随着新的燃烧工艺的开发,需要了解煤中微量元素的分布特征和它们的燃烧行为。所以,迫切需要关于煤和燃煤产物中微量元素的分布特征、赋存状态和其淋滤行为的知识,世界上许多国家对此都非常重视,这对于原煤产量和消费量最大的中国显得尤为重要。因此,论文以国家自然科学基金项目“煤中显微组分伴生元素分布赋存规律研究(编号:49372124)”为依托,确立了博士论文的主攻方向:煤中有害微量元素分布赋存机制及燃煤产物淋滤实验研究。 论文综合运用地质学、地球化学、矿物学、煤岩学、环境化学等学科的原理和方法,研究了中国煤中特别是山西石炭二叠纪煤和贵州晚二叠世煤中有害微量元素的分布赋存机制;研究了山西神头电厂燃煤产物中有害微量元素的淋滤行为及其对水环境的影响。论文取得的主要成果如下。 (1)研究了中国137个全层煤样中45中元素的分布特征,并与世界和美国煤进行了对比,第一次报道了中国主要聚煤期煤中微量元素的分布特征。指出了煤中微量元素的富集具有多因素、多期次的特点,并首次创造性地提出了我国煤中有害微量元素异常富集的五种成因类型。这为我国煤炭资源的合理利用和环境治理提供了重要的理论依据,也具有潜在的实用价值。 对比研究表明中国煤大多数元素含量高于世界和美国煤的平均值,中国煤中明显富集的有害元素为Se、Hg、As、U、Sb、Mo、Cd、Pb、F等。资源量很大的中生代煤和华北石炭二叠纪煤中绝大多数煤中有害微量元素含量低,而南方晚二叠纪煤中有害微量元素含量较高。As、Sb、Ni、Ba、Cr等有害元素在新生代煤中含量较高,U、Zn在晚古生代和中生代煤中较高,Se、Th在晚古生代煤中较高。就新生代煤而言,老第三纪煤中Ni、Co、Cr、Se、Ba、Zn、Th等有害元素高于新第三纪煤,Sb、U、As在新第三纪煤中较高;就中生代煤而言,晚三叠世煤中U、Cr、Sb、Ni、As、Th、Se、Zn、Co等有害元素含量较高,早中侏罗世煤中大多数微量元素含量较低;就晚古生代煤而言,华南晚二叠世龙潭组煤中大多数元素含量较高,如Cd、As、Sb、Co、Ni、Mo、Se、Cr、Cu,华北早二叠世煤中Pb、Cl、Br、Th等含量较高,华北晚石炭世太原组煤中Hg、U含量较高。 中国煤中微量元素富集的5种成因类型为:①陆源富集型:一般在中、小型断陷盆地最为特征,物源区近,盆地沉降速率及充填速率大,陆源区母岩高含量元素能在煤中富集,煤中异常高含量的元素种类与母岩中该元素的高含量是一致的。如我国辽宁第三纪沈北煤田和侏罗纪北票煤田煤中Cr、Zn、Ni等元素/./含量高与其盆地基底玄武岩母岩有关。②沉积-生物作用富集型:在碳酸盐台地潮坪环境形成的煤层中最为特征,某些在海水中含量较高的元素的背景值高,同时碳酸盐台地往往有利于低等植物(如菌藻类)的发育,低等植物对大多数元素富集能力较强,因此这种类型属于沉积环境-生物复合作用。如贵州贵定、紫云、云南砚山干河晚二叠世煤中U、Mo、V等元素含量高就属于这种类型。③岩浆-热液作用富集型:我国中新生代岩浆活动频繁对煤的变质作用影响很大,因此,这种类型在我国广泛存在,煤中富集元素种类与岩浆、热液的性质有关,如山西古交矿区西部燕山期碱性、偏碱性岩浆热液作用造成煤层中Cl、Br、Se、Pb、Zn等元素含量增高,湖南梅田矿区黑云母花岗岩侵入体使煤中Hg、Cd、Mo、Cu等元素含量增加。资兴矿区煤中U、Th、As、Sb的高含量可能与燕山期花岗岩岩浆热液作用有关。④深大断裂富集型:这种类型一般在位于深大断裂附近的聚煤盆地中较为典型,煤中异常高含量元素种类与断裂带内部的挥发分、热液的性质有关。周义平(1992,1993)、顾登杰等(1990)研究云南第三纪褐煤中As的异常富集时认为煤中As的富集与西部三江断裂带有关。 ⑤地下水作用富集型:这种类型在各个盆地广泛存在,煤中富集元素种类与地下水化学性质以及水位与煤层的相对关系有关,也与煤层围岩的性质有关。如,前苏联顿涅茨石炭纪煤中富含Na 、Cl等元素即与上覆二叠系盐矿床受地下水淋滤作用下渗至煤层有关。 (2)对山西石炭二叠纪煤中微量元素的详细研究表明,大多数微量元素含量如As、Cd、V、Fe、Sb、Co、Mo、Cr、Ni、Mn等低于全国平均水平,Br、Hg、F、Th、Se、Pb、U、Zn等微量元素含量高于全国平均水平。控制山西石炭二叠纪煤中微量元素分布的主要因素是沉积环境和中生代燕山期岩浆热液活动。 太原组沉积相主要是潮坪、陆表海和三角洲环境,其中潮坪和陆表海占有一定优势,山西组沉积相以三角洲为主。显然,太原组煤层聚积时受海水影响明显比山西组大,导致太原组煤中V、Mn、U、Mo、Se、Cd、Ni、及Fe、Ca、B等元素的含量比山西组煤。 就太原组而言,其煤中微量元素的富集主要受沉积环境的控制。从北到南太原组沉积相依次为河流相、三角洲相、碳酸盐台地潮坪相,沉积相表现出南北分异、东西展布的特点;受此沉积环境分异的控制,太原组煤中大部分微量元素如U 、V、Fe、Na、Mg、As、Cd、Pb、Ni、Zn、Cr、Ba、Th、Mo、Se等表现出从北到南逐渐增加的趋势。南部的晋城矿区15号煤层沉积在碳酸盐台地潮坪环境上,其上部腐植腐泥煤分层中U、As、Fe、Se、Sr 、Na、Mo等元素含量明显高于同一煤层镜质体,这与该分层中以藻类体及其降解产物为主,且黄铁矿含量较高有关。阳泉矿区14号煤层沉积在潮间带环境,煤中U、V、Cd、Mo、Cr、Mn、Ni、Sb、Fe、Ba、Ca、Hg、Co等元素含量较高。 就山西组而言,其煤层的聚积环境相似,煤中微量元素的富集主要与燕山期碱性-偏碱性岩浆热液活动有关。如,岩浆热液活动使煤中Cl、Br、Se、Hg、Zn、Pb等元素含量明显高于阳泉和晋城煤,其中东塔矿区岩体直接侵入煤层使距离岩体5000m的煤中Cl含量高达1865ppm;临县紫金山中生代燕山期碱性、偏碱性岩浆热液活动使三交矿区煤中Cl、Br、Se、Hg、Sb等元素含量明显增加。 (3)运用同步辐射扩展X射线吸收精细结构谱方法(EXAFS)首次创造性地发现贵州高砷煤(砷含量为86.1ppm-32000ppm)中砷以砷酸盐或亚砷酸盐形式存在,它的意义在于改变了人们长期以来认为高砷煤中砷主要是以硫化物矿物态存在的观点,同时也表明EXAFS可有效地研究煤中元素赋存状态。 (4)运用逐级化学提取方法对12种有害微量元素的赋存状态进行了直接定量研究的,特别是对国际上认为赋存状态置信度较低的Cr、Ni、Co等有害元素的赋存状态进行了详细的研究。发现煤中大多数有害微量元素有多种赋存状态,而不同煤又常常以某种赋存状态为主;研究的煤样品中Cr主要与粘土等硅酸盐矿物结合,Co也主要与粘土矿物结合,但次生腐殖酸可结合部分Co,而不同样品中Ni具有不同的赋存状态,这些成果为国际上认为赋存状态置信度较低的Cr、Ni、Co等有害元素的赋存状态提供了新资料。 (5)率先运用柱淋滤实验方法研究了山西神头电厂炉前煤及燃煤产物中12种有害元素在4种pH条件(pH=2.0, 4.0, 6.0, 7.5)下连续80小时内的淋滤行为。 研究表明,煤及燃煤产物中的Hg、Cr、Cd的淋出浓度高于国家的水质标准,其对水体的污染应引起高度重视。Mn、Zn、Cl的总淋出浓度都明显低于地面水和饮用水国家标准;本次实验样品中Pb、Cu、Ni、Co等有害元素含量低,且主要是与粘土矿物或煤大分子结合,因此没有被淋滤出来。所以,Mn、Cl、Zn、Pb、Cu、Co、Ni等元素在浓度较低或主要与粘土矿物及煤大分子结合的情况下,淋出浓度低或不能淋出,因此对环境影响不大。这些成果对于预测、预防煤及燃煤产物中有害元素的环境污染具有实际指导意义。 (6)对脱矿镜煤和丝炭中微量元素的分布研究表明,有害元素Co、Cr、Sb、U、Th、V等主要富集在镜煤中,Hg、Zn等主要与丝炭有关,而As等其它有害元素的含量与丝炭和镜煤的关系不明显;镜煤由于凝胶化作用强烈而富集了水溶性较强的V、U、Th、Cr、Fe、Br等元素;未脱矿镜煤和丝炭中的元素可通过酸处理而脱出,这为制备高纯煤提供了依据。 (7)对中国煤中氯,特别是山西平朔煤中氯的分布特征研究表明,绝大多数中国煤不是高氯煤,且中国北方煤中的氯含量比南方煤高,这可能与气候有关;平朔煤中的氯主要以无机态形式赋存在镜质组和惰质组中,而壳质组中氯含量较低。

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  • 【求助】测土壤脱氢酶时TTC还原产物TPF标准曲线绘制问题

    我采用关松荫主编的《土壤酶及其研究方法》书中所述方法测量土壤中的脱氢酶,在绘制TTC还原产物TPF标准曲线的过程中遇到了难题。书中的方法是:“加NaHSO3(亚硫酸氢钠)还原TTC。”我加NaHSO3后溶液不显色。 试了几次仍然是不显色。 后来又查了些资料,用保险粉可以使TTC还原但是要用乙酸乙酯定容。试了一下保险粉果然可以显色,但是,当向显色后的溶液里加甲醇定容的时候,颜色又都消失了。现在这个很麻烦,向各位求助。

  • 对Cu-EDTA的降解产物分析

    [table=100%][tr][td]大家好!有个问题需要请教一下各位大神,我目前要对Cu-EDTA的降解产物做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url],检测中间产物,请问样品怎样预处理呢?是做衍生化还是别的方法?具体该怎么做? 期待大家的回答,谢谢![/td][/tr][/table]

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