黄芪静脉输液中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量测定摘要:建立黄芪静脉输液中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量测定方法。方法：用高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量，用碘量法测定黄芪多糖的含量。结果：黄芪甲苷和黄芪多糖的平均回收率分别为9751％、9918％，相对标准差分别为248％、191％。结论：本文建立的方法准确可靠、灵敏度高、重现性好，可作为黄芪静脉输[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量控制的有效方法。关键词:黄芪甲苷；黄芪多糖；高效液相色谱法；碘量法； 英文摘要:ToestablishthemethodfordeterminationofastragalosideIVandastragaluspolysaccharidesinRadixAstragaliinjectionMETHODS：AstragalosidewasdeterminedbyHPLCandastragaluspolysaccharidesbyiodometryRESULTS：Therecoveriesofastragalosideandastragaluspolysaccharideswere9751％RSD=248％and9918％（RSD=191％）respectivelyCONCLUSION：Thismethodisaccurate，sensitiveandrepeatable，andcanbeusedforqualitycontrolofthepreparation英文关键词:astragaloside；astragaluspolysaccharide；HPLC；iodometry；contentdetermination黄芪为补气药，性甘温，归肺、脾经，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功效。医疗实践证明，黄芪注射液对心气虚损、血脉瘀阻、病毒性心肌炎、心功能不全、脾虚困湿之肝炎有较好的疗效，也是肿瘤、免疫功能低下等较理想的辅助治疗药物。目前临床所使用的黄芪注射液为小容量针剂，需稀释后滴注，且不含黄芪多糖，所以疗效不够理想。为此，武警四川总队乐山医院和四川省乐山市三民药物研究所共同研制了含黄芪多糖、黄酮、苷类等有效成分的黄芪静脉输液。黄芪注射液的含量检测尽管WS3－β－3335－98执行标准仅要求采用薄层色谱法，但因高效液相色谱法操作更简便，精密度更高，故笔者参照文献以蒸发光散色高效液相色谱法[1]测定黄芪静脉输液中的黄芪甲苷含量；至于黄芪多糖含量的检测则选择采用碘量法。1仪器与试药11仪器美国奥泰公司高效液相色谱仪，包括蒸发光散射（ELSD）500检测器、Alltech426主机泵；电动离心机（江苏金坛公司）；TP－150超声波清洗机（北京天鹏公司）。12试药黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0781－9908）；甲醇、乙醇、正丁醇、氢氧化钠、硫酸、葡萄糖均为分析纯；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水。2方法和结果21黄芪甲苷含量的测定211色谱条件：色谱柱为ODS柱（250mm×40mm），柱温为40℃，流动相为乙腈－水（36∶64），流速为06ml/min，进样量为20μl。212漂移管温度选择：根据ELDS检测使用手册推荐，设置气体流速为300slpm，漂移管温度为75℃，观察流动相（不进样）进入检测器的基线噪音，不断改变漂移管温度（步长为5℃），根据基线随温度的变化情况，选择95℃为试验最优温度。213载气流速选择：设定漂移管温度为95℃，取黄芪甲苷对照液恒量，得相应峰面积，不断改变气体流速（步长为025slpm）观察峰面积和基线的变化情况，最终选择270slpm为试验最优载气流速。214最低检测限试验：精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释成浓度为1mg/ml的溶液作为贮备液，精密量取适量，逐步稀释测定，直到黄芪甲苷主峰信号为检测器噪声水平的3倍为止。得黄芪甲苷最低检测限为153ng。215线性试验：取“214”项黄芪甲苷对照品贮备液适量，精密量取10、20、30、40、50、60分别置于10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度（约相当于黄芪甲苷01、02、03、04、05、06mg）。以对照品峰面积的常用对数值为横坐标（X），以进样量的常用对数值（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为Y=06001X—34896（r=09991），黄芪甲苷进样量在20μg～120μg范围内线性关系良好。216精密度试验：精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释至浓度为025mg/ml的溶液作为对照溶液，注入液相色谱仪，连续重复进样6次，测得黄芪甲苷的相对标准差为179％，精密度符合规定。217重现性试验：精密量取黄芪注射液适量（相当于黄芪甲苷约20mg）5份，按“2110”项下方法制备，测定黄芪甲苷含量。结果黄芪注射液中黄芪甲苷为2390mg，RSD=201％，表明方法重现性良好。218稳定性试验：取“217”项下样品溶液，分别于0、1、2、3、5、8h取样测定峰面积，结果RSD=107％，表明黄芪甲苷溶液在8h内基本稳定。219回收率试验：分别精密量取黄芪注射液适量（约相当于黄芪甲苷10、12、14mg）共3份，每份各精密加入对照溶液（0404mg/ml）25、30、35ml，按“2110”项下方法制备，测定黄芪甲苷含量，结果详见表1。由表1可见，平均回收率为9751％，RSD=248％，符合规定，说明方法具有可行性。2110样品中黄芪甲苷的含量测定：精密量取黄芪注射液100ml，置于烧杯中浓缩至10ml，加无水乙醇40ml沉淀，放置20min，离心，沉淀用80％的乙醇溶液洗涤2次，每次10ml，合并离心液与洗涤液，置水浴上蒸干。残渣加1％NaOH溶液10ml溶解，用饱和的正丁醇水溶液提取3次，每次20ml，合并正丁醇的水溶液，蒸干，残渣再加1％NaOH溶液5ml溶解，通过已处理的D101大孔吸附树脂柱（Φ15×20cm，内装树脂高约10cm）吸附，以1％NaOH溶液50ml洗脱，弃去，用蒸馏水洗至中性，再用30％乙醇溶液50ml洗脱，弃去洗脱液，继续用70％乙醇液50ml洗脱，收集洗脱液并蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml，得供试品溶液。精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释成浓度为01、03mg/ml的溶液作为对照溶液。分别精密量取上述溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，并以峰面积和进样量的对数值按二点法计算，详见图1；3批样品按上述方法制备测定，结果详见表2。22黄芪多糖含量的测定[2，3]221线性试验：精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖适量，加水溶解并稀释成浓度为10mg/ml的标准溶液，分别精密量取此标准溶液100、90、80、70、60ml，置于250ml碘量瓶中，分别加水0、10、20、30、40ml，然后精密加入01mol/L碘滴定液25ml，在不断振摇的情况下缓缓滴加01mol/LNaOH40ml，密塞，在暗处放置10min，然后加入05mol/LH2SO4液6ml，摇匀，立即用01mol/LNa2S2O3滴定液滴定，近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并同时作空白试验校正。以取样量（X）与Na2S2O3的消耗量（Y）进行线性回归，得回归方程为Y=009766X—000244，（r=09999），表明葡萄糖在60mg～100mg的范围内线性关系良好。222重现性试验：精密量取黄芪注射液100ml,按“224”项下方法制备5份，测定黄芪多糖含量，结果为10423mg，RSD=099％，表明方法重现性良好。223回收率试验：分别精密量取黄芪注射液（多糖含量为10423mg/100ml）120、150、180ml，每份各加入葡萄糖标准液（25002mg/ml）50、60、70ml制成80％、100％、120％浓度的溶液。分别浓缩至10ml，加无水乙醇40ml，放置20min，离心。沉淀用80％乙醇洗涤2次，每次10ml，弃去离心液与洗涤液，沉淀加热蒸馏水10ml溶解，并转移至25ml容量瓶中，定容，摇匀。分别精密量取3种不同浓度的溶液80、70、60ml置于250ml碘量瓶中，分别精密加水2、3、4ml，按“224”项方法测定，每个浓度测定3次，共9次，计算得到回收率为9918％，RSD=191％，详见表3。224样品中黄芪多糖的含量测定：精密量取黄芪注射液100ml，浓缩至10ml，加无水乙醇40ml，放置20min，离心。沉淀用80％乙醇洗涤2次，每次10ml，加热蒸馏水3ml使沉淀溶解并定容至10ml，摇匀。移置于250ml碘量瓶中，加入1mol/LH2SO420ml，置于水浴中水解2h，取出，放冷，加入2mol/LNaOH溶液调节pH值=7，冷却至室温。精密加入碘滴定液（01mol/L）25ml，在不断振摇的情况下缓缓滴加01mol/LNaOH40ml，密塞，置暗处放置10min。然后加入05mol/LH2SO46ml，摇匀，立即用Na2S2O3滴定液（01mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并同时作空白试验校正，计算即得（每1ml上述碘滴定液相当于9008mg的C6H12O6）。3批黄芪注射液样品，按上述方法测定多糖含量均符合规定，结果详见表4。3讨论测定黄芪甲苷含量时，如将精密量取的黄芪注射液浓缩后仅采用正丁醇的水饱合液提取制得供试品溶液，则所得的样品杂质峰多，基线略有漂移，因此不宜采用。黄芪多糖主要为葡萄糖，因此，可采用以葡萄糖或葡聚糖作对照品的苯酚－浓硫酸法[4]、蒽酮－浓硫酸法[5]或水解后用碘量法等测定其含量，但一般多采用后两种方法。采用蒽酮－浓硫酸法时，由于其线性试验回归方程为C=98481A＋08314（r=09663），浓度线性范围为35～165μg/ml，线性关系不好，故不宜采用。
黄芪饮片按照中国药典2015年版方法测定黄芪甲苷液相图谱为2个峰，用含黄芪的超微粉制成的颗粒，测定其黄芪甲苷，液相图谱为1个峰，为什么？颗粒不只含有黄芪，含有其他成分，求解答，谢谢
想问问各位你们都是用什么测黄芪甲苷的，用什么牌子的仪器，感觉怎么样？国家对测黄芪甲苷的仪器有什么灵敏度或者是其他方面的规定吗？我们公司想买蒸发光散射检测器来测黄芪甲苷，大家觉得哪个好些？老板的心理价位就8-10万吧，谢谢各位[em58]
检测黄芪药材中的黄芪甲苷，用elsd检测器，c18柱，雾化管30 漂移管70 药典方法乙腈比水32比68 对照品塔板数11000，但是样品塔板数才2800，含量合格，要求塔板数是4000这是怎么回事，重做了好多次塔板数就是上不去
【作者】 刘近荣；【机构】 山西泰盛制药有限公司；【摘要】 目的建立以高效液相色谱法测定黄芪总皂苷氯化钠注射液中黄芪甲苷含量的方法。方法色谱柱为DiamonsilC18(5μm,4.6×250mm),流动相为乙腈-水(36:64),流速为0.8ml/min,柱温为室温。结果黄芪甲苷进样量在5μg～40μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9993,n=5),平均加样回收率为99.75%(RSD=0.57%)。结论本方法测定结果准确、操作简便、灵敏度高、重复性好,可用于本品的质量控制。 更多还原http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131255_383443_2379123_3.jpg
[align=center][b]HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法测定黄芪醇提物中的黄芪甲苷的含量[/b][/align][b]黄芪甲苷是黄芪皂苷提取物中的特征性成分，也是具有代表性的主要成分，黄芪甲苷可以促进患者心肌细胞的供氧能力，使冠状动脉供血区供血充足，避免因缺血导致的大范围心肌坏死，继而缓解患者心绞痛症状，平稳心跳速率[sup][/sup]。药典中有关于黄芪药材中黄芪甲苷含量的测定方法，但此方法并不完全适用于黄芪醇提物中的黄芪甲苷的含量测定，而且黄芪水提物与黄芪醇提物中化学成分有差异，预实验中发现测定黄芪水提物中黄芪甲苷含量建立的方法也不适应于黄芪醇提物中中黄芪甲苷含量的测定。本章实验利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]建立黄芪醇提物中黄芪甲苷含量测定方法，并利用该方法测定其含量，计算出黄芪甲苷的转移率，用于黄芪醇提最佳提取工艺的优选。同时，本章实验系统地验证所建立的方法的可行性，为选择黄芪甲苷的含量测定方法提供参考。[b]1 材料和仪器1.1 样品 [/b] 收集9组黄芪醇提物样品，所有黄芪药材均由济宁华能制药厂提供。[b]1.2 试剂 [/b]黄芪甲苷对照品（成都瑞芬思生物科技有限公司批号H-013-170117）；乙腈为色谱纯（赛默飞世尔科技有限公司）；D101大孔吸附树脂（廊坊淼阳化工有限公司生产20160310）；盐酸溶液（国药集团化学试剂有限公司生产）；氢氧化钠溶液（国药集团化学试剂有限公司生产20160824）；超纯水。[b]1.3 仪器 [/b]液相色谱仪系统（美国Agligent Technology 公司1260型液相色谱仪，包括G1312B二元泵，G1322A在线脱气机，G1316A柱温箱）；NASCA F5100型自动进样器（日本SHISEIDO公司）；资生堂CAPCELL PAC CN 色谱柱（2.0*150 mm，5 mm，日本SHISEIDO公司）；API 4000型三重四级杆串联离子肼质谱仪（美国Applicated Biosystem Scuex公司）。[b]2 方法学考察2.1 色谱条件[/b]色谱柱为 Synergi C18 80A（250 mm×4.6 mm，4 μm），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（35 : 65）进行等度洗脱；进样量10 μL；检测波长为203 nm；柱温30 ℃，流速为1 mL/min。黄芪甲苷保留时间约为10 min。黄芪醇提物和黄芪甲苷标准品HPLC色谱图见表5-1，表5-2。[/b][align=center][img=,690,365]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711071808_2711_3237657_3.png!w690x365.jpg[/img][/align][align=center]图5-1 黄芪醇提物HPLC色谱图[/align][align=center][img=,690,373]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711240945_4181_3237657_3.png!w690x373.jpg[/img][/align][align=center]图5-2 黄芪甲苷标准品HPLC色谱图[/align][b]2.2 质谱条件 [/b]电喷雾电离，正离子模式（喷雾电压：4.5 kV）；鞘气压力：30 arb；辅助气压力：10 arb；离子传输管温度：550 ℃；扫描模式：全扫描；扫描范围：m/z 100-1000。按“2.1.3”项下色谱条件进样，进样量10 μL。为进一步验证10 min出峰的物质是黄芪甲苷，利用LC/MS技术对黄芪皂苷提取物的化学成分进行研究，采用正离子源ESI检测。黄芪甲苷分子量784.97 Da，由于仪器差异，黄芪甲苷出峰时间后移至12.5 min，此峰的鉴定结果质谱图显示含大量黄芪甲苷。图5-3为黄芪皂苷提取物的正离子模式HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]总离子流图、分离子流图和质谱图。[align=center][img=,690,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711415732_2681_3237657_3.png!w690x426.jpg[/img][/align][align=center]图5-3 黄芪甲苷正离子模式HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url] 总离子流图、分离子流图和质谱图[/align][b]2.3 供试品溶液的制备[/b]对D101大孔吸附树脂预处理：第一步用乙醇或甲醇清洗吸附柱内壁，向柱内加入称量好的树脂体积0.4-0.5倍的乙醇或甲醇，然后将新的D101大孔吸附树脂投入吸附柱中，使乙醇液面高于D101大孔吸附树脂层0.5 m，浸泡过夜。用2 个柱体积的乙醇或甲醇通过D101大孔吸附树脂层，用乙醇缓慢浸泡D101大孔吸附4-5 h，观察洗脱液加水后不呈白色浑浊为止。再用蒸馏水以2 BV洗柱，洗至洗脱液呈中性。用2 BV的5 %盐酸溶液以4-6 BV/h过柱，浸泡2-4 h。用蒸馏水以2 BV/h洗至洗脱液呈中性。用2 BV的2 %氢氧化钠溶液以4-6 BV/h过柱，浸泡2-4 h。最后用蒸馏水洗D101大孔吸附树脂，洗至洗脱液显中性即可。上样：取黄芪醇提物加水溶解至15 mL得黄芪提取液，以1 mL/min过树脂，先以4 BV蒸馏水洗脱，弃去水液，再用4 BV的70 %乙醇溶液洗脱，用烧杯收集吸附柱内的洗脱液，转入蒸发皿，水浴蒸干后，用甲醇溶解并转移至10 mL容量瓶定容。[b]2.4 对照品溶液的制备[/b]用万分之一天平精密称取10.1 mg黄芪甲苷对照品至10 mL容量瓶，加甲醇定容，得1.01mg/mL的对照品溶液，用0.22μm的微孔滤膜过滤，备用。[b]3 结果3.1 线性关系考察[/b]精密量取黄芪甲苷标准品10.1 mg黄芪甲苷，用甲醇10 mL制备成1.01 mg/mL黄芪甲苷储备液，然后吸取相应体积稀释成浓度梯度为150 μg/mL、250 μg/mL、300 μg/mL、400 μg/mL 、500 μg/mL的对照品溶液，上述对照品溶液按“2.3”项下色谱条件分别进样10 μL，利用自动积分功能测定峰面积积分值，以黄芪皂苷提取物中黄芪甲苷的峰面积积分值对标准品浓度进行线性回归，所得回归方程为y = 2821.6x + 12.438（回归系数[i]R[sup]2[/sup][/i]= 0.9989），证明蒙古黄芪中黄芪甲苷在150~500 μg/mL范围内线性关系良好，黄芪甲苷对照品标准曲线如图5-4所示。[align=center][img=,542,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711574358_4557_3237657_3.png!w542x346.jpg[/img][/align][align=center]图5-4 黄芪甲苷标准曲线[/align][b]3.2 精密度试验[/b]在拟定分析条件下，精密吸取供试品溶液10 μL，连续进样 6 次，记录提取离子流图峰面积，测定黄芪甲苷量，计算得相对标准偏差RSD为1.9% ，提示该方法具有较好的精密度。[b]3.3 重复性实验[/b]取同一黄芪样品 6份，按2. 2 项下方法制备供试品溶液，在拟定分析条件下，准确吸取10 μl 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算得 RSD为2.0%，提示该方法重复性良好。[b]3.4 稳定性试验[/b]取黄芪药材供试品溶液，分别在0 h、3 h、6 h、9 h、24 h、48 h后，在拟定分析条件下，准确吸取10 μl 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算得RSD为 4.4% ，提示黄芪供试品溶液稳定性较差。[b]3.5 加样回收率试验[/b]精密称取 6 份黄芪甲苷量已知的黄芪水提物样品，每份折合黄芪药材 0. 5 g，分别准确加入浓度为 0. 0 342 mg /ml 黄芪甲苷溶液1 ml，1 ml，2ml，2ml，3ml，3ml，按 2. 2 项下方法制备供试品溶液，准确吸取 1. 0 μl 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算回收率，结果见表3-1。由表3-1可见，方法平均回收率为 97.92%，表明该方法具有较好的回收率。[align=center]表5-1 黄芪甲苷加样回收率测定结果[/align] [table][tr][td] [align=center]样号[/align] [/td][td] [align=center]样品中的量/mg[/align] [/td][td] [align=center]加入量/mg[/align] [/td][td] [align=center]测得量/mg[/align] [/td][td] [align=center]回收率/%[/align] [/td][td] [align=center]平均值/%[/align] [/td][td] [align=center]RSD/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]0.96 [/align] [/td][td] [align=center]2.88 [/align] [/td][td] [align=center]97.92 [/align] [/td][td=1,6] [align=center]97.92 [/align] [/td][td=1,6] [align=center]0.7 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]0.96 [/align] [/td][td] [align=center]2.89 [/align] [/td][td] [align=center]98.96 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]1.92 [/align] [/td][td] [align=center]3.83 [/align] [/td][td] [align=center]98.44 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]1.92 [/align] [/td][td] [align=center]3.81 [/align] [/td][td] [align=center]97.40 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]2.88 [/align] [/td][td] [align=center]4.76 [/align] [/td][td] [align=center]97.92 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]2.88 [/align] [/td][td] [align=center]4.73 [/align] [/td][td] [align=center]96.88 [/align] [/td][/tr][/table][b]3.6 黄芪甲苷的含量测定结果[/b]取9组黄芪水提物按照“2.3”项下操作，制备供试品溶液，准确吸取 1 0 μL 进样分析，在拟定的分析条件下，测定黄芪甲苷峰面积积分值，计算相应的黄芪甲苷含量。9组蒙古黄芪中黄芪甲苷含量测定结果如表5-2所示。[align=center]表5-2 9组蒙古黄芪中黄芪甲苷含量测定结果[/align] [table][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]峰面积[/align] [/td][td] [align=center]含量（mg/g）[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]560.07 [/align] [/td][td] [align=center]0.13 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]501.70 [/align] [/td][td] [align=center]0.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]564.61 [/align] [/td][td] [align=center]0.13 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]507.19 [/align] [/td][td] [align=center]0.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]524.05 [/align] [/td][td] [align=center]0.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]477.02 [/align] [/td][td] [align=center]0.11 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]921.07 [/align] [/td][td] [align=center]0.21 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]783.88 [/align] [/td][td] [align=center]0.18 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]924.71 [/align] [/td][td] [align=center]0.22 [/align] [/td][/tr][/table][b]3.7 黄芪甲苷转移率正交试验设计及结果[/b]醇提的黄芪甲苷转移率考察正交试验与醇提的出膏率考察正交试验设计相同，首先以乙醇作为提取溶剂，把影响药材提取效果的提取溶剂乙醇用量（A）、提取次数（B）、提取时间（C）确定为考察因素，以上三个考查因素各分3个水平考察，见表5-3。[align=center]表5-3 实验因素水平表[/align] [table][tr][td=1,2] [align=center]水平[/align] [/td][td=3,1] [align=center]因素[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A（乙醇用量/倍）[/align] [/td][td] [align=center]B（提取次数/次）[/align] [/td][td] [align=center]C（提取时间/h）[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]10[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][/tr][/table]黄芪甲苷转移率=各实验组黄芪提取物中黄芪甲苷含量/原黄芪药材中黄芪甲苷含量×100%。原药材中毛蕊异黄酮苷的含量按照药典的方法测得的结果为0.4042mg/g。跟据实验数据，得到水提实验中设定的不同工艺条件下的毛蕊异黄酮苷的转移率，其中因素D为误差项，作直观分析表和方差分析表，见表5-4，5-5。[align=center]表5-4 黄芪甲苷转移率考察 L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])正交试验表[/align] [table][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]黄芪甲苷 转移率/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]32.01 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]28.60 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]32.28 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]28.92 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]29.91 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]27.16 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]黄芪甲苷 转移率/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]53.11 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]45.09 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]53.33 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K1[/align] [/td][td] [align=center]92.89[/align] [/td][td] [align=center]114.04[/align] [/td][td] [align=center]104.26[/align] [/td][td] [align=center]115.25[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K2[/align] [/td][td] [align=center]85.99[/align] [/td][td] [align=center]103.60[/align] [/td][td] [align=center]110.85[/align] [/td][td] [align=center]108.87[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K3[/align] [/td][td] [align=center]151.53[/align] [/td][td] [align=center]112.77[/align] [/td][td] [align=center]115.30[/align] [/td][td] [align=center]106.29[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]优水平[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]R[/align] [/td][td] [align=center]65.54[/align] [/td][td] [align=center]9.17[/align] [/td][td] [align=center]11.04[/align] [/td][td] [align=center]8.96[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][/table][align=center]表5-5 黄芪甲苷转移率考察方差分析结果[/align] [table][tr][td] [align=center]方差来源[/align] [/td][td] [align=center]离差平方和[/align] [/td][td] [align=center]自由度[/align] [/td][td] [align=center]F[/align] [/td][td] [align=center]显著性[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]864.64[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]46.01[/align] [/td][td] [align=center]*[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]21.63[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]0.07[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]20.57[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]0.07[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]D [/align] [/td][td] [align=center]14.18[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][/table]注：F[sub]0.1[/sub]（2,2）=9，F[sub]0.05[/sub]（2,2）=19，*为有显著性，-为无显著性。从正交试验结果可知：醇提实验中，各因素对黄芪甲苷转移率的影响大小顺序为：A（乙醇用量）B(提取次数)C(提取时间)；每个因素3水平之间的趋势为A[sub]3[/sub]A[sub]1[/sub]A[sub]2[/sub]，B[sub]1[/sub]B[sub]3[/sub]B[sub]2[/sub]，C[sub]3[/sub]C[sub]2[/sub]C[sub]1[/sub]，直观分析得最佳提取工艺为A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]3[/sub]，即加醇10倍量，提取1次，每次3h。表5-5的方差分析结果表明： A因素的影响具有统计学差异(PB(提取次数)C(提取时间)；每个因素3水平之间的趋势为A[sub]3[/sub]A[sub]1[/sub]A[sub]2[/sub]，B[sub]1[/sub]B[sub]3[/sub]B[sub]2[/sub]，C[sub]3[/sub]C[sub]2[/sub]C[sub]1[/sub]，直观分析得最佳提取工艺为A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]3[/sub]，即加醇10倍量，提取1次，每次3h。表5-7的方差分析结果表明： A因素的影响具有统计学差异(P0.05)，即乙醇用量对黄芪甲苷转移率具有显著影响。[b]4 讨论[/b]本章实验利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]技术，测定了黄芪醇提物中黄芪甲苷的含量，并系统地验证所建立的方法的可行性，经过试验条件的摸索，黄芪甲苷的色谱条件为35 %乙腈洗脱，所建立的方法能够较好的将黄芪甲苷与其他成分分开，可用于黄芪皂苷中黄芪甲苷含量测定，黄芪甲苷稳定性试验结果RSD值高于2 %，可能是由于黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ在酸性水解的条件下易转化成黄芪皂苷Ⅳ，即黄芪甲苷，使黄芪水提物中黄芪甲苷在48h内的稳定性不好。根据三个因素水平趋势可知，随着乙醇的用量增加，黄芪甲苷的提取效率越来越高，实验设置中每次10倍量是最大乙醇用量，这是从大工业生产和节能降耗等方面考虑的结果。根据煎煮次数水平趋势，提取1次的黄芪甲苷转移率最大，这有可能是因为黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ在酸性水解的条件下易转化成黄芪皂苷Ⅳ，即黄芪甲苷，而黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ在第一次就较完全的被提取出来，随着时间增加，转换成黄芪皂苷Ⅳ，即黄芪甲苷，第二次时黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ的结构可能被破坏，影响其转化成黄芪甲苷。第三次时可能黄芪甲苷被提取的更彻底，转移率又开始小幅增大。在3h内，当提取时间增加，黄芪甲苷会逐渐增大，原因可能是黄芪甲苷的提取更加彻底，黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ转化成黄芪甲苷最多。实验设置中每次3h是最大提取时间，这也是从综合成本与效率的角度考虑的结果。因此，综合考虑，将加醇10倍量，提取1次，共3h作为最佳醇提实验工艺。由黄芪甲苷转移率结合出膏率的到的综合评分的结果可以看出，不同提取工艺对黄芪醇提物中黄芪甲苷的含量和出膏率的影响不同，其中7、8、9组评分较高，三个组的黄芪甲苷转移率相较于其他组也是最高，但第8组出膏率却相对较低，另外出膏率高低的顺序也不与黄芪醇提物中黄芪甲苷的转移率高低的顺序项一致，这说明出膏率与黄芪醇提物中黄芪甲苷的转移率并无明显的对应关系。[align=center]参考文献[/align] 朱燕辉, 严奉祥. 黄芪甲苷及其生物学活性.现代生物医学进展,2008, 8 ( 4 ) : 781-783.
大茴香酸-硫酸荧光体系测定黄芪甲苷刘养清 杜鸣 徐秉玖关键词: 黄芪甲苷； 大茴香酸； 黄芪； 中药复方补阳还五汤； 荧光分光光度法中图分类号: R927.2 R284.1 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870(2000)07-0544-03黄芪甲苷(astragaloside)是中药膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.和蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao的主要活性成分，有抗炎、降压、镇痛、镇静、升高血浆中cAMP水平、促进小鼠再生肝DNA的含量［1,2］以及促进免疫功能等生理活性。黄芪甲苷的测定方法主要有：紫外分光光度法［3，4］、薄层扫描法［5，6］和HPLC法［7，8］。光度法常用香草醛在浓硫酸作用下与甲苷显色反应，空白值较高，干扰严重；薄层扫描法操作繁琐，准确度相对较差。黄芪甲苷仅在200 nm处有末端吸收，对HPLC法不利。黄芪甲苷的荧光分析尚未见报道。本文首次根据在浓硫酸条件下黄芪甲苷与大茴香酸反应产物具有荧光的特性建立了荧光分光光度法测定黄芪甲苷，方法灵敏度高、选择性好、线性范围宽、检出限低、操作简便。可直接用于黄芪生药、中药复方、黄芪制剂以及含药血清等多种样品的测定，无干扰。材料与方法 仪器 日本岛津RF-540型荧光分光光度计。 试剂 黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所提供)配成1.0 mg.mL-1的甲醇溶液。2％大茴香酸的无水乙醇溶液，72％硫酸溶液，85%磷酸溶液。所用试剂均为分析纯。 样品及处理 黄芪口服液(上海福达制药有限公司生产，批号980502)。取口服液1.00 mL，加入无水乙醇2.00 mL，离心分离沉淀，上清液蒸干，用甲醇1 mL溶解，备用。补阳还五汤复方汤剂煎煮3次，合并水煎液，分别用石油醚、氯仿、正丁醇萃取4次，每次萃取剂用量为水煎液体积的一半。合并正丁醇相，总体积为800 mL。取正丁醇萃取液2 mL，蒸干，用甲醇2 mL溶解，备用。含药猪血清样品(北京医科大学药学院生药研究室提供)：用补阳还五汤复方浸膏连续3 d喂猪，3 d后取血，分离猪血清，取猪血清50 mL，用正丁醇萃取4次，每次萃取剂用量为原血清体积的一半。得含药血清样品100 mL，取正丁醇萃取液4 mL，蒸干，用甲醇2 mL溶解，备用。黄芪生药样品：按文献［3］方法提取分离，甲醇溶样，备用。结果与讨论1 黄芪甲苷反应产物的激发光谱和发射光谱 取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.1 mL，于5 mL量瓶中，加入2％大茴香酸溶液0.6 mL、72% H2SO4溶液0.8 mL，于60℃水浴中反应20 min,迅速冷却后，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，在荧光分光光度计测荧光光谱黄芪甲苷反应产物最大激发波长Ex=320 nm,最大发射波长Em=387 nm。2 大茴香酸用量的影响 取大茴香酸0.1，0.3，0.5，0.6，0.7，0.9 mL按照分析方法操作，选择大茴香酸最佳用量。结果表明大茴香酸用量0.6 mL较合适(图1)。3 稀释液的选择 准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷0.1 mL，按照分析方法操作，体积定容时选无水乙醇、甲醇、冰醋酸和水作稀释液，测得其荧光强度(If)分别为77.6,48.4,35.0,1.3。可见无水乙醇对荧光强度影响最小。本文采用无水乙醇作为稀释液。 Fig 1 Effect of amount of anisic acid4 酸的种类和用量的影响 选72％ H2SO4, 85% H3PO4及浓HClO4进行实验，结果发现选用72％ H2SO4时反应产物的荧光强度最大。对72%硫酸的用量进行选择，结果表明72％ H2SO4取0.8 mL为最佳(图2)。 Fig 2 Effect of amount of sulphuric acid5 反应温度的影响 准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.1 mL，按分析方法内容操作，分别在40，50，60，70，80，90℃和沸水浴中反应20 min，同时做空白。考察荧光强度随温度的变化，结果表明：60℃时反应空白小，荧光强度较高。故实验选择60℃为反应温度较适宜。6 加热时间的影响 将温度控制在60℃，改变加热时间，考察加热时间对反应的影响。结果表明加热时间选20 min为宜。7 反应产物的稳定性 准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.1 mL，按照分析方法操作，测定荧光强度值，每间隔5 min测定1次，对产物稳定性进行考察。结果表明反应产物在90 min内均稳定。8 工作曲线及检出限 分别准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.010，0.025，0.050，0.100，0.150和0.200 mL，在最佳实验条件下，测定工作曲线，得回归方程为：Y＝-0.4201+1.575X，γ＝0.9993。黄芪甲苷浓度在2.0～40 μg.mL-1与荧光强度呈良好的线性关系。检出限为0.02 μg.mL-1。9 干扰考察 为解决基体太浓或基体不一致所造成的影响，在适当稀释溶液后，采用标准加入法测定样品。为考察此反应选择性，利用薄层分离黄芪甲苷［6］后测定样品中其他物质的荧光强度，证明杂质荧光强度与样品总荧光强度的比1.2%。10 样品的测定与回收率实验 取被测样品6份各0.1 mL，依次加入1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.0，0.01，0.02，0.03，0.04和0.05 mL，按照分析方法操作，分别测定了黄芪、复方补阳还五汤、黄芪口服液及猪血清样品中黄芪甲苷的含量，测定结果及回收率实验见表1。SampleContent/%Recovery/%RSD/%HQOL0.210±0.00298.5～101.91.8BYHWT0.280±0.02098.8～102.12.1AMB0.420±0.00498.6～102.02.0PS0.063±0.00198.8～102.41.9黄芪是补阳还五汤的君药，黄芪甲苷定量分析是黄芪中药制剂质量控制的重要指标，本方法灵敏度高，选择性好，操作简便且无干扰，可作为黄芪甲苷的质控方法。基金项目： 九五攀登计划项目杜鸣(北京医科大学药学院分析化学与药物分析研究室，北京 100083 )徐秉玖(北京医科大学药学院分析化学与药物分析研究室，北京 100083 )刘养清(山西师范大学化学系，山西 临汾 041004)收稿日期: 1999-08-03
使用蒸发光检测器做黄芪甲苷含量不出峰怎么办？使用的液相是伍丰手动的
建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷含量的方法。方法：采用一种新的检测器-蒸发光散射检测器（ELSD）以黄芪甲苷为对照品对黄芪中的黄芪甲苷进行HPLC分析，色谱柱：Phenomenex-ODS；流动相：乙腈-水（37∶63）；流速：0.85mL/min；ELSD参数；漂移管温度：100℃；载气流速：2.7L/min。结果：黄芪甲苷在0.396～3.564μg范围内呈线性，回收率为97~94%（RSD=0.68%）。结论：本法具有良好的精密度和重现性，结果准确可靠，可作为原料的质量控制方法。
高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷含量的计算方法
活血通络颗粒是由黄芪、丹参、当归、赤芍、地龙、川芎等多味中药组成的复方制剂，具有益气活血、抗凝、降脂等功效。主要用于中风后遗症、脑血栓、脑动脉硬化及高血压、高血脂、心绞痛等心脑血管疾病。黄芪为方中君药，黄芪甲苷为其指标成分，中药复方中黄芪甲苷含量测定已有文献报道。本研究参考文献方法，建立测定活血通络颗粒中黄芪甲苷含量的方法，为控制本品质量打下基础。 1 仪器与试药 薄层扫描仪(日本岛津CS一9000)，硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂，10cm×10cm)，定样毛细管(美国Drumond公司)，电子分析天平(梅特勒一托利多仪器上海有限公司)，黄芪、丹参、当归等原料药(医药公司)，黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所)，活血通络颗粒剂(本院自制，批号20020326，20020410，20020419)。所用试剂均为分析纯。
[align=center][b]UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法测定黄芪水提物中的黄芪甲苷含量[/b][/align][b] 传统中药的煎煮，大多是用水作为溶剂，因此研究药材的水提物中有效成分的含量对药材的工业生产和实际应用具有不可忽视的指导意义。据文献报道[sup][/sup]，黄芪水提物中主要为糖类和皂苷类成分,而水提物药渣中则是提取后剩余的淀粉、纤维素、木质素等原药材的基体成分和一些不易溶于水的酯类、酮类和芳香类成分。黄芪甲苷作为黄芪皂苷中一类重要的物质，已被药典收录为黄芪含量测定的指标成分。为了保证临床应用制剂的质量和进一步开发利用中药黄芪，研究黄芪水提物中黄芪甲苷的含量显得格外重要。在预实验中，笔者发现药典中测定黄芪中黄芪甲苷含量的方法并不完全适用于黄芪水提物中黄芪甲苷含量的测定，预处理时出现乳化现象导致萃取不完全，另外利用药典中规定的蒸发光检测器液相色谱仪测定无法得到理想的线性方程。因此，笔者结合黄芪水提物的性质和仪器灵敏性等特点，利用UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法考察黄芪水提物中的黄芪甲苷含量测定的方法学和并利用该方法测定黄芪水提物中黄芪甲苷的含量。[b]1 材料和仪器1.1 样品 [/b] 收集9组黄芪水提取物样品，黄芪饮片为济南济成堂中药饮片有限公司提供（批号18033101）。[b]1.2 试剂 [/b]黄芪甲苷对照品（成都瑞芬思生物科技有限公司批号H-013-170117），乙腈为色谱纯（天津市科密欧化学试剂有限公司）；超纯水。[b]1.3 仪器 [/b]Waters XevoTQ-S三重四级杆质谱仪（美国Waters公司）。ACQUITY UPLC H-CLass超高效液相色谱仪（美国Waters公司）；超声波清洗机KS-300E（宁波科生仪器厂）；电子天平MS205DU（梅特勒/瑞士）。[b]2 方法学考察2.1 色谱与质谱条件[/b]色谱条件：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱（2.1*50 mm，1.7 mm）。流动相为乙腈-水（A∶B）系统。梯度洗脱，A相：0→1 min A保持30%；1→2 min A为30→60%；2→3 min A为60→70%；3→4 min A保持70%；4→4.5 min A为70→30%；A相：4.5→5.5 min A保持30%。流速 0. 2 mL/min，柱温为40 ℃，进样体积 1. 0 μL。质谱条件：电喷雾正离子检测模式，毛细管电压；3.0 kV；脱溶剂气流：N2，流速800 L h[sup]-1[/sup]，脱溶剂温度400 ℃；锥孔电压：40 V，锥孔气流：N2，流速150 Lh[sup]-1[/sup]；离子源温度: 400 ℃；雾化气压力为7.0 bar碰撞气体: 氩气。采用MRM 定量模式，质量扫描范围为100～1 000 amu。该条件下，获得黄芪甲苷的分子离子峰 m /z 785. 42，子离子峰m /z 143.08。黄芪甲苷提取总离子流图和一级质谱图分别见图3-1和图3-2。[/b][align=center][img=,690,322]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131701299261_9069_3237657_3.png!w690x322.jpg[/img][/align][align=center]图3-1 黄芪甲苷的总离子流图[/align][align=center][img=,690,331]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131701493040_8991_3237657_3.png!w690x331.jpg[/img][/align][align=center]图3-2 黄芪甲苷的一级质谱图[/align][b]2.2 供试品溶液的制备[/b]精密称定1/200重量的黄芪水提物样品（折合黄芪药材0.5g）置于锥形瓶中，精密加入4%氨水溶液100 mL，称定重量，超声30 min，取出放至室温，用4%氨水溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，精密吸取续滤液10 mL过Dikma ProElut C18-U-SPE柱（先以甲醇20 mL活化，再以水20 mL平衡），上样后用10 mL水淋洗，弃去，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，定容至10 mL容量瓶中，摇匀，用0.22 μm的微孔滤膜过滤，即得。[b]2.3 对照品储备溶液的制备[/b]精密称取黄芪甲苷标品1.01mg至10 mL容量瓶中，用甲醇溶解后定容，吸取1 mL至100 mL容量瓶中，用甲醇定容，制成浓度为1.01 μg/mL的对照品储备溶液。[b]3 结果3.1 线性关系考察[/b]精密吸取 2. 3 项下对照品储备溶液 1，3，5 mL，用甲醇稀释并定容到 10mL 容量瓶中，制备0.1，0.3，0.5 mgmL[sup]-1[/sup]质量浓度对照品溶液。另吸取0.1，0.3 mg/mL质量浓度对照品溶液5 mL至10 mL容量瓶，用甲醇定容，得到0.05，0.15 mg/mL质量浓度对照品溶液。在拟定分析条件下，准确吸取 10. 0 μL 进样分析。黄芪甲苷离子选择 m/z 785. 42 为母离子，143.08 为子离子，准确吸取1 0 μL 进样分析。以质量浓度为横坐标，以提取离子流图峰面积为纵坐标进行线性回归，如图3，得回归方程为：Y=46.135X + 1938.8（r[sup]2[/sup]= 0. 9984），提示黄芪甲苷在0. 05～0.5 mg/m L 范围内线性关系良好。黄芪甲苷对照品标准曲线如图3-3所示。[align=center][img=,690,423]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131702057366_9110_3237657_3.png!w690x423.jpg[/img][/align][align=center]图3-3 黄芪甲苷标准曲线[/align][b]3.2 精密度实验[/b]在拟定分析条件下，精密吸取供试品溶液1.0 μL，连续进样 6 次，记录提取离子流图峰面积，测定黄芪甲苷量，计算得相对标准偏差RSD为1.1% ，提示该方法具有较好的精密度。[b]3.3 重复性实验[/b]取同一黄芪样品 6份，按2. 2 项下方法制备供试品溶液，在拟定分析条件下，准确吸取 1. 0 μL 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算得 RSD为2.0%，提示该方法重复性良好。[b]3.4 稳定性实验[/b]取黄芪药材供试品溶液，分别在0 h、3 h、6 h、9 h、24 h、48 h后，在拟定分析条件下，准确吸取 1. 0 μL 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算得 RSD 为 4.7% ，提示黄芪供试品溶液稳定性较差。[b]3.5 加样回收率实验[/b]精密称取 6 份黄芪甲苷量已知的黄芪水提物样品，每份折合黄芪药材 0. 5 g，分别准确加入浓度为 0. 0 342 mg /mL 黄芪甲苷溶液1 ml，1 ml，2 ml，2 ml，3 ml，3 ml，按 “2. 2 ”项下方法制备供试品溶液，准确吸取 1. 0 μL 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算回收率，结果见表3-1。由表3-1可见，方法平均回收率为 102.35% ，表明该方法具有较好的回收率。[align=center] [/align][align=center]表3-1 黄芪甲苷加样回收率测定结果[/align] [table][tr][td] [align=center]样号[/align] [/td][td] [align=center]样品中的量/mg[/align] [/td][td] [align=center]加入量/mg[/align] [/td][td] [align=center]测得量/mg[/align] [/td][td] [align=center]回收率/%[/align] [/td][td] [align=center]平均值/%[/align] [/td][td] [align=center]RSD/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]0.069[/align] [/td][td] [align=center]0.034[/align] [/td][td] [align=center]0.1[/align] [/td][td] [align=center]101.68[/align] [/td][td=1,6] [align=center]102.35[/align] [/td][td=1,6] [align=center]2.8[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]0.069[/align] [/td][td] [align=center]0.034[/align] [/td][td] [align=center]0.11[/align] [/td][td] [align=center]104.44[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]0.069[/align] [/td][td] [align=center]0.068[/align] [/td][td] [align=center]0.14[/align] [/td][td] [align=center]104.17[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]0.069[/align] [/td][td] [align=center]0.068[/align] [/td][td] [align=center]0.13[/align] [/td][td] [align=center]96.42[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]0.069[/align] [/td][td] [align=center]0.10 [/align] [/td][td] [align=center]0.17[/align] [/td][td] [align=center]102.78[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]0.069[/align] [/td][td] [align=center]0.10 [/align] [/td][td] [align=center]0.18[/align] [/td][td] [align=center]104.63[/align] [/td][/tr][/table][align=center] [/align][b]3.6 黄芪甲苷的含量测定结果[/b]取9组黄芪水提物按照“2.2”项下操作，制备供试品溶液，准确吸取 1. 0 μL 进样分析，测定黄芪甲苷的含量。黄芪甲苷对照品和黄芪水提物样品的MRM 离子流图见图3-4、图3-5。供试品黄芪甲苷含量测定结果见表3-2。[align=center][img=,690,348]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131702286759_7988_3237657_3.png!w690x348.jpg[/img][/align][align=center]图3-4 黄芪甲苷对照品的 MRM 离子流图[/align][align=center][img=,690,344]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131702391650_7279_3237657_3.png!w690x344.jpg[/img][/align][align=center]图3-5 黄芪水提物样品的 MRM 离子流图[/align][align=center] [/align][align=center]表3-2 9组黄芪水提物中黄芪甲苷含量测定结果[/align] [table][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]峰面积[/align] [/td][td] [align=center]含量(mg/g)[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]5120.00 [/align] [/td][td] [align=center]0.14 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]6744.00 [/align] [/td][td] [align=center]0.21 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]10275.67 [/align] [/td][td] [align=center]0.36 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]26955.00 [/align] [/td][td] [align=center]1.08 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]10599.00 [/align] [/td][td] [align=center]0.38 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]7212.33 [/align] [/td][td] [align=center]0.23 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]11247.33 [/align] [/td][td] [align=center]0.40 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]8008.33 [/align] [/td][td] [align=center]0.26 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]9171.00 [/align] [/td][td] [align=center]0.31 [/align] [/td][/tr][/table][align=center] [/align][b]3.7 正交试验设计及结果[/b]水提的黄芪甲苷转移率考察正交试验与水提的出膏率考察正交试验设计相同，即以水作为提取溶剂，把影响药材提取效果的用水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）确定为考察因素，以上三个考查因素各分3个水平考察，见表3-3。[align=center]表3-3水提实验因素水平表[/align] [table][tr][td=1,2] [align=center]水平[/align] [/td][td=3,1] [align=center]因素[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A（用水量/倍）[/align] [/td][td] [align=center]B（提取时间/h）[/align] [/td][td] [align=center]C（提取次数/次）[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]10[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][/tr][/table][b] [/b]黄芪甲苷转移率=各实验组黄芪提取物中黄芪甲苷含量/原黄芪药材中黄芪甲苷含量×100%。原药材中毛蕊异黄酮苷的含量按照药典的方法测得的结果为0.4042mg/g。跟据实验数据，得到水提实验中设定的不同工艺条件下的毛蕊异黄酮苷的转移率，其中因素D为误差项，作直观分析表和方差分析表，见表3-4，表3-5。[align=center]表3-4 黄芪甲苷转移率考察L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])正交试验表[/align] [table][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]黄芪甲苷 转移率/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]34.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]51.54 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]89.41 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]268.30 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]92.88 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]56.56 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]99.83 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]黄芪甲苷 转移率/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]65.10 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]77.56 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K1[/align] [/td][td] [align=center]175.07 [/align] [/td][td] [align=center]402.25 [/align] [/td][td] [align=center]155.78 [/align] [/td][td] [align=center]204.56 [/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K2[/align] [/td][td] [align=center]417.74 [/align] [/td][td] [align=center]144.42 [/align] [/td][td] [align=center]397.40 [/align] [/td][td] [align=center]207.93 [/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K3[/align] [/td][td] [align=center]242.49 [/align] [/td][td] [align=center]223.53 [/align] [/td][td] [align=center]282.12 [/align] [/td][td] [align=center]422.81 [/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]优水平[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]R[/align] [/td][td] [align=center]242.67 [/align] [/td][td] [align=center]257.83 [/align] [/td][td] [align=center]241.62 [/align] [/td][td] [align=center]218.25 [/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][/table][align=center] [/align][align=center]表3-5 黄芪甲苷转移率考察方差分析结果[/align] [table][tr][td] [align=center]方差来源[/align] [/td][td] [align=center]离差平方和[/align] [/td][td] [align=center]自由度[/align] [/td][td] [align=center]F[/align] [/td][td] [align=center]显著性[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]10460.75[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1.13[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]7698.00[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]0.75[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]9736.83[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1.02[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]10424.20[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][/table]注：F[sub]0.1[/sub]（2,2）=9，F[sub]0.05[/sub]（2,2）=19，*为有显著性，-为无显著性。从正交试验结果可知，水提实验中，各因素对黄芪甲苷转移率的影响大小顺序为：A（用水量）C(提取次数)B(提取时间)；每个因素3水平之间的趋势为A[sub]2[/sub]A[sub]3[/sub]A[sub]1[/sub]，B[sub]1[/sub]B[sub]3[/sub]B[sub]2[/sub]，C[sub]2[/sub]C[sub]3[/sub]C[sub]1[/sub]，直观分析得最佳提取工艺为A[sub]2[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]2[/sub]，即加水8倍量，提取2次，每次1h。表3-5的方差分析结果表明： A、B、C三因素对黄芪甲苷转移率的影响都无统计学差异(P0.05)。[b]4 讨论[/b]本章实验利用超高效液相串联三重四级杆质谱仪测定黄芪水提物中黄芪甲苷的含量，相比药典中测定黄芪药材中黄芪甲苷的方法，此方法预处理步骤更少，用时更短，目标峰与其他相邻峰的分离度也更大，适合于黄芪水提物中黄芪甲苷含量的测定。但美中不足的是，供试品的预处理需要过SPE柱，仪器的使用和维护费用更高，实验者在测定样品的含量前需要综合考虑。从测定结果来看，设置的三个因素中，用水量对黄芪甲苷的转移率影响最大，但仍无统计学差异(P0.05)，说明用水量、提取次数、提取时间三种工艺的改变对黄芪水提物中黄芪甲苷的含量无显著性影响。第4、5、7组的黄芪甲苷转移率相比其他组的更高，尤其是第4组测得的黄芪甲苷的含量远高于用药典方法测得的药材中黄芪甲苷的含量，正交实验分析结果也说明加水8倍量，提取2次，每次1h是最佳提取工艺。这一结果与水提实验中第3、4、7组测得的出膏率较高有些差异，第4组实验的出膏率也不算低，但不是最高，而出膏率最高的第3组黄芪甲苷的转移率却不高，这说明出膏率与黄芪水提物中黄芪甲苷的转移率并无明显的对应关系。合乎标准要求的有效成分含量是保证药物疗效稳定可靠的硬性指标，实现有效成分提取的最大化是优化工艺条件的重要目标。本章关于不同提取工艺条件下黄芪甲苷转移率的考察研究，对芪龙胶囊和黄芪配方颗粒工艺的优化具有指导性意义。[align=center]参考文献[/align] 黄冬兰,徐永群,陈小康. 黄芪药材及其水提物的红外光谱分析. 光谱实验室，2012，29（5）：2823-2826.
HPLC-ELSD测定芪桂消癓颗粒中的黄芪甲苷 张梦云，冯俭* ，张煜华，李煌，朱晗 (成都中医药大学附属医院，四川成都610072)摘要: 目的建立测定芪桂消癥颗粒中黄芪甲苷含量的方法。方法采用HPLC － ELSD 法，色谱柱为Diamonsil C18柱(150mm × 4. 6 mm，5. 0 μm)，流动相为乙腈－ 水(32∶68)，流速为1. 0 mL·min － 1 ，柱温为35℃;检测器漂移管温度为80℃，氮气压力为45 psi。结果黄芪甲苷7. 72 ～ 23. 16 μg 与峰面积的线性关系良好( r = 0. 9993)，平均回收率为97. 49%，RSD = 2. 08%(n = 6)。结论所建方法简便、准确、重复性好，可有效地控制芪桂消癥颗粒的质量。关键词: 高效液相色谱－ 蒸发光散射检测器法;芪桂消癥颗粒;黄芪甲苷http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207242113_379515_2432394_3.jpg
液相质谱方法优化了很长时间，样品处理办法由开始的沉淀蛋白换成了液液萃取，还是在血浆中没有检测到。该化合物分子量为785.6，我的MRM是+,即807.6-627.5我看到文献有做成功的，可含量也很低Cmax=16ng，请问是黄芪甲苷在大鼠胃内被酸化了吗？还是有别的原因？灌胃液中含黄芪甲苷大于1mg/mL。[img=,555,239]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903211951256531_6859_3255306_3.jpg!w555x239.jpg[/img]
10，抽取5个版友）；中奖名单：莫名其妙(注册ID：moyueqiu)捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）夏天的雪（注册ID：bingwang228）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702171503_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702171503_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================HPLC-ELSD法测定祝艾康胶囊中黄芪甲苷的含量方法：HPLC基质：动物提取物应用编号：102891化合物：黄芪甲苷固定相：Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱：Diamonsil 5μm C18(2), 250 x 4.6mm色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99603) 流动相: 乙腈-水(33∶67) 流速: 1.0 mL/min 柱温: 35℃ 进样量: 20 μL 检测器: ELSDS文章出处：中国实验方剂学杂志 2010, 16(4):60-62关键字：祝艾康胶囊; 黄芪甲苷; 高效液相-蒸发光散射检测法, Diamonsil C18, 钻石二代,含量测定谱图：摘要：目的:建立中药复方祝艾康胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),乙腈-水(33∶67)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱温35℃,漂移管温度105℃,空气流速2.7 L.min-1。结果:黄芪甲苷在1.515～7.575μg具良好的线性关系(r=0.999 96),平均回收率98.83,RSD 1.8%。结论:该法准确、可靠、重复性好,可用于控制祝艾康胶囊的质量。http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/106-7.JPG
咳嗽喝黄芪陈皮饮。取黄芪15克、陈皮5克、红枣（去核）2—4枚，将所有原料放入锅中，加适量清水煎煮30分钟即可。该茶饮有助补肺、固表、健脾，适用于疲倦乏力、咳嗽不止者。??皮饮。取黄芪15克、陈皮5克、红枣（去核）2—4枚，将所有原料放入锅中，加适量清水煎煮30分钟即可。该茶饮有助补肺、固表、健脾，适用于疲倦乏力、咳嗽不止者。??
黄芪有促雌激素样作用，可使小鼠动情期（通常为一日）延续达10日之久。黄芪对小鼠的发育亦有良好影响。另有报告谓黄芪浸膏、黄芪内酯和黄芪固醇对大鼠和小鼠体重、提肛肌或肾脏等重量均无明显影响，表明无同化激素或雄激素样作用。红芪（多序岩黄芪）为黄芪的同科不同属植物，其多糖可明显升高老年大鼠血清睾酮含量。注:摘自《医学中央杂志》、《新医药学杂志》、《北京生理科学会1964年学术年会论文摘要》、《甘肃中医学院学报》
食疗方--【黄芪补气茶】【食材】黄芪10克、西洋参10克、枸杞子10克。【做法】煎水服用。【效果】益气滋阴、清热降火、消除疲劳、增强大脑记忆力。
作者：朱军;李志浩;李鹏;陈银华; (郧阳医学院附属东风医院药剂部;十堰市药品检验所;)摘要：目的:采用HPLC-ELSD测定三两半药酒中黄芪甲苷的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱,以乙腈-水(28:72)为流动相,流速1.0ml·min~(-1),柱温30℃,漂移管温度45℃,载气为N_2,流速3.5 ml·min~(-1)。采用外标两点法计算含量。结果:黄芪甲苷在(0.56-11.20)mg·L~(-1)浓度范围内有良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.4%,RSD为0.95%。结论:本方法快速简便,结果准确,可用于该制剂中黄芪甲苷的定量分析。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208201114_384573_1606903_3.jpg
有没有哪位大神用紫外或者示差测过黄芪甲苷啊，我们这边没有蒸发光散射，只能用紫外和示差，但是跟着文献上搜出来的资料完全没有走出来的迹象啊。仪器条件如下：1：紫外：流动相30%乙腈水，色谱柱150mm的C18柱子走，检测波长203。2：示差 流动相：67%甲醇水，色谱柱：150mm C18。以上，标都是用甲醇配的，最大浓度是500ppm。
用奥泰的ELSD2000做黄芪甲苷一直没有峰，流动相乙腈－水32：68（药典），标准品一直没峰？加大有机相到40：60还没有，用乙腈冲出来的峰不知道是不是黄芪甲苷请各位高人指点！！！不胜感谢！！！
作者：曹敏; 武斌; 刘树民;（黑龙江中医药大学中医药研究院;）摘要：目的建立苍耳子配伍黄芪的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,研究配伍对各单味药主要特征峰的影响。方法采用HPLC分析苍耳子、黄芪单煎及苍耳子配伍黄芪合煎样品,选用Diamonsil C18色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行线性梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm。结果建立了苍耳子配伍黄芪的HPLC指纹图谱,基本为两单味药特征峰的加和,无明显新特征峰的增加,但配伍合煎对某些成分的溶出有明显的相互抑制作用。结论本方法简便、快捷,为临床类方的配伍应用以及制定复方质量标准提供了参考。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061420_381877_1606903_3.jpg
在做黄芪甲苷的时候，蒸发光散射检测器参数如何设
【作者】 龙旭阳； 刘长发； 段富津；【机构】 黑龙江中医药大学； 黑龙江中医药大学 黑龙江哈尔滨150040； 黑龙江哈尔滨150040；【摘要】 目的:建立HPLC-ELSD法测定冠心康胶囊中黄芪甲苷的含量方法。方法:Diamonsil(钻石)C18色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(36:64),柱温30℃;ELSD漂移管温度105℃;氮气流速2.7l/min。结果:黄芪甲苷在3.06~15.30μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均回收率98.58%,RSD为1.22%。结论:该法准确可靠,可作为冠心康胶囊的质量控制标准。 更多还原【关键词】 HPLC-ELSD； 质量标准； 冠心康胶囊； 黄芪甲苷； 【基金】 黑龙江省科技攻关课题(编号:5030177)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061730_381982_2352694_3.jpg
现在黄芪农残做9种的还是22种？有版友知道的吗？
黄芪多糖提取用水提，还是醇提出膏率跟纯度哪个好一点
【作者】 徐小利； 陈晓虎； 谢静；【Author】 Xu Xiaoli,Chen Xiaohu,Xie Jing(Chongqing Institute for Drug Control,Chongqing,China 401121)【机构】 重庆市药品检验所；【摘要】 目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定补中益气丸(浓缩丸)的黄芪甲苷含量。方法色谱柱为Diamonsil(钻石)C18柱(200mm×4.6mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-水(38:62),流速为0.8mL/min,ELSD条件为漂移管温度110℃,气体流速3.0L/min。结果黄芪甲苷进样量在2.494～39.904μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为97.26%,RSD=1.94%(n=6)。结论所用方法简便快捷,测定结果可靠,可用于补中益气丸的质量控制。 更多还原【Abstract】 Objective To establish a HPLC-ELSD method to determination of astragaloside Ⅳ in Buzhongyiqi Wan.Methods Diamonsil-C18 column(200 mm× 4.6 mm,5 μ m) was employed,and its temperature was 30 ℃.Axetonitrile-water(38:62) was as the mobile phase at the flow rate of 0.8 mL/min.ELSD inlet heater was set at 110 ℃,and N2 flow rate of 3.0 L/min.Results The calibration curve of astragaloside Ⅳ was linear in the range of 2.494-39.904 μg(r=0.999 9).The average recovery was 97.26%,RSD=1.94%(n=6).Conclusion The... 更多还原【关键词】 高效液相色谱-蒸发光散射法； 补中益气丸； 黄芪甲苷； 含量测定； 【Key words】 HPLC-ELSD； Buzhongyiqi Wan； astragaloside Ⅳ； content determination； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271543_386438_2352694_3.jpg
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=102809]HPLC—ELSD法测定复方养心片中黄芪甲苷的含量[/url]
[align=center][color=#333333]黄芪含量测定[/color][/align]1 材料与试剂 乙腈（色谱级）、正丁醇、氨水、甲醇（分析纯）、黄芪甲苷（购自中检院）、血竭样品（送检样品）。2 色谱条件 LC-20AT液相色谱仪（日本岛津），色谱柱：Zorbax SB C18(250mm*4.6μm*5μm)（安捷伦），流动相：以乙腈-水（30：70）；蒸发光检测器（奥泰）；柱温35℃。3 样品制备（参照2015年版药典） 3.1 标准品溶液的制备 取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，即得。[align=center][img=,555,177]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121553061421_926_1858223_3.jpg!w555x177.jpg[/img][/align]3.2 样品溶液的制备 取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。[align=center][img=,583,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121553295651_9515_1858223_3.jpg!w583x180.jpg[/img][/align]3.3 计算方法 分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。小结：每次接到黄芪样品大家都会来一句怎么又有黄芪，大概黄芪是比较受嫌弃的中药材之一了，药典上的方法过程比较繁琐，一般需要2-3天才能把前处理处理完。检测简述流程：浸泡过夜——索氏提取4h——旋干——萃取 （4次+2次）——蒸干（这个正丁醇不太好旋干比较耗时）——过大孔树脂柱（上样之前要洗至无醇味，然后上样后用3种溶剂洗脱）——旋干——定容待测。为了减少误差及节省时间，我们考察了正丁醇的萃取次数对含量的影响，我们用2次80ml和4次40ml进行对比发现结果相当，实验操作过程中萃取次数越多反而容易引起操作误差，值得大家注意的是大孔树脂上样前要洗至无醇味，这个对结果影响还是有的，保证数据的平行性，用同体积的水进行洗至无醇味。
作者：张杰;张凌艳;李贺一; (哈药集团三精制药股份有限公司;三精艾富西药业有限公司;三精英美药业有限公司;)摘要：目的:建立高效液相色谱法测定生血康口服液的含量。方法:采用迪马(钻石)C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(35-65),流速1.0ml/min,蒸发光散射检测器。结果:黄芪甲苷与其它杂质能达到有效分离,在0.03021mg/ml~0.19206mg/ml范围内,浓度同峰面积呈良好的线形关系,r=0.999698,仪器精密度RSD为2.81%,方法的重复性RSD为3.78%。结论:该方法简便、准确、可行。可用于生血康口服液的质量控制。谱图：无
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