鼠抗体

一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素：1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种分析试验验证，如果抗体不适用某些分析试验，则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域：抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来，其中的免疫原包括：全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体（如：细菌）或细胞，抗体说明书一般都有免疫原的描述，如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域，则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS 流式检测活细胞的表面蛋白，则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。(2)样本的提取或处理过程：某些抗体要求样本经过某些特殊处理，例如：许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本，另一方面，某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时，应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织，而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织，这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体，抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应，因其氨基酸序列同源性较高，如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中，并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白，而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过，应通过序列比对的方法来预测交叉反应，可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。4 一抗宿主物种的选择一般说来，在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时，一抗宿主动物的物种选择较为重要，对于免疫组化而言，尽可能选择与样本不同种系物种的一抗，从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应，例如：检测小鼠样本蛋白，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，最好选兔源的一抗，则二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况，除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法，则抗体宿主物种的影响不大，如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测，尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。5 二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用， 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。6 双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一，二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

[font='calibri'][size=13px]人源化抗体和全人源抗体区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]？[/size][/font][font='calibri'][size=13px]义翘[/size][/font][font='calibri'][size=13px]抗体人源化[/size][/font][font='calibri'][size=13px]服务内容[/size][/font][font='宋体']人源化抗体和全人源抗体区别:[/font][font='宋体']根据单克隆抗体的来源不同，可分为鼠源抗体、嵌合体抗体、人源化抗体和全人源抗体。[/font][font='宋体']所谓的全人源单抗，就是基因来源100%都是人源的。不过，事实上全人源单抗也是在小鼠身上产生的，通过把产生抗体相关的人类基因转移到小鼠，此后小鼠体内的抗体结构可以跟人类抗体结构一样。所以全人源抗体直接用人体[/font][font='宋体']细胞制作的抗体，只是抗体结构100%按照人类基因编码而成。[/font][font='宋体']人源化单抗则是大部分来源是人源，同时融合了鼠源成分。近年来，科学家通过基因工程特意将鼠抗的关键有利基因结构保留在人源框架上，起到特殊的作用，就像优化再加工(2l。例如，依奇珠单抗(人源化单抗)中保留了1.8%的鼠源成分，这部分整合了优势有利的基因，成就了依奇珠单抗的高亲和力，其起效速度快可能也和其亲和力高有关。[/font][font='宋体'] [/font][font='宋体'] [/font][font='宋体']义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]：[/font][font='宋体']抗体人源化[/font][font='宋体']非人源性抗体进入人体内会引起严重的机体排异反应，进而影响抗体在临床应用时的安全性和治疗效果。抗体人源化通过基因改造，使鼠源抗体具有与人体内抗体类似的结构，从而逃避免疫系统的识别。抗体人源化经历了从嵌合抗体到CDR移植、SDR移植等技术演变，力求在保持高亲和力、高特异性结合能力的同时克服传统鼠源抗体的免疫原性，在肿瘤治疗等领域具有极为广泛的应用前景。[/font][font='宋体']义翘神州利用CDR置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对鼠源单抗等进行人源化改造，保证人源化程度 95%，为客户提供优质的单克隆抗体人源化服务。[/font]

[font=宋体][font=宋体]目前，用细胞工程制备人单抗在技术上和伦理上都存在一些难题，治疗性抗体的开发就集中在具有治疗前景的鼠源单抗上。但是鼠源单抗对人体具有异源性反应，可诱发人抗鼠抗体效应[/font][font=Calibri](Humananti-mouseantibodies,HAMA[/font][font=宋体]反应[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，使得单抗的治疗效果明显滞后。随着基因重组技术的发展和人们对抗体结构认识的深入，研究者们尝试对鼠源性抗体进行改造，致力于在保留与抗原结合的高亲和力的基础上，减少异源性抗体的免疫原性，推动抗体人源化研发的进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]人源化抗体主要指以用基因克隆及[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术对鼠源单克隆抗体改造，重新表达产生的抗体。其大部分氨基酸序列被人源序列取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据人源化程度不同，单抗又可分为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=Calibri](60%-70%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDR(complementarity-determiningregion)[/font][font=宋体]移植抗体[/font][font=Calibri](90%-95%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体：[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体[/font][font=Calibri](chimericantibody)[/font][font=宋体]：第一代人源化抗体。其是在基因水平上将鼠源单克隆抗体的[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区和人抗体的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](variableregion,[/font][font=宋体]可变区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]连接，在合适的宿主细胞内表达可得到人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体。嵌合抗体用于人体所产生的[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应比鼠源单抗明显减弱[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]另外，人源[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](constantregion[/font][font=宋体]，恒定区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]可更有效地介导人体一些免疫反应，如[/font][font=Calibri]CDC(complement-dependentcytotoxicity,CDC,[/font][font=宋体]依赖补体的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADCC(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,[/font][font=宋体]抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]嵌合抗体虽然可以部分解决异种蛋白的排斥问题，但由于其还含有鼠源[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区，依然有可能会诱发[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应，干扰抗体疗效，诱发超敏反应，在临床上其应用会受到一定限制。因此人们进一步研究鼠源可变区的改造，研发出了[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的人源化抗体，即第二代人源化抗体也是现在普遍所说的人源化抗体[/font][font=Calibri](humanizedantibody)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体是研究者们在嵌合抗体的基础上进一步用人源框架区[/font][font=Calibri](Frameworkregion,FR)[/font][font=宋体]替代鼠源框架区[/font][font=Calibri](FR)[/font][font=宋体]，仅保留了[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个鼠源性[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]，其他全部为人源结构，人源性可达[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]以上。但对于特定的抗原分子，[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]并不能随意替换。多方面研究均证实，具有支持作用的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]不仅为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的构象提供了环境，有时还参与抗体结合。因此简单的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植往往明显降低抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体结合的亲和力，甚至是丧失抗原抗体结合的能力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]针对这种状况，目前主要有四种策略：[/font][font=宋体][font=宋体]①同源替换，使用与鼠源对应部分具有较大同源性的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]进行替换[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]②表面重塑，对鼠源[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]表面氨基酸残基进行重塑，以使其类似于人抗体[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的轮廓或者[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]型式[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]③补偿变化，改编关键位置氨基酸残基，以补偿完全的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]④定位保守，人源化单抗以[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]保守序列为模板进行人源化，但保留鼠源单抗可变区的关键氨基酸残基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、全人源抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]为了彻底消除异源性抗体的不良影响，[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代以后，人们将噬菌体展示技术应用到抗体的表达和克隆上，产生了噬菌体抗体库技术。由此，抗体工程技术进入到了一个新的发展阶段，全人源化抗体的生产和应用也逐渐走向成熟。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术，将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中，使动物表达人类抗体，达到抗体全人源化的目的。目前已建立多种方法生产完全人源性抗体，主要有噬菌体展示技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术和[/font][font=Calibri]RNA-[/font][font=宋体]多肽技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]人源化抗体的应用[/b][/font][font=宋体]目前，人源化抗体在肿瘤，器官移植排斥反应，病毒感染，血液性疾病，自身免疫性疾病等方面的治疗和临床诊断中显示出越来越大的应用前景。[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在肿瘤治疗中的应用[/font][/font][font=宋体]近年来，兴起的分子靶向治疗，是根本意义上的肿瘤特异性治疗手段，是以肿瘤抗原特异性结合的单抗为载体，连接放射性核素，化疗药物等对肿瘤有杀伤作用的负载而成的抗体导向疗法。其靶向性好，毒性小等特点，非常适合肿瘤的内放射治疗。采用该技术用于临床的人源性抗体有治疗转移性乳腺癌的赫赛汀，用于治疗结直肠癌的西妥昔单抗等。[/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、自身免疫性疾病治疗[/font][/font][font=宋体]自身免疫疾病多于自身抗体异常增多有关。很多临床研究发现，一些具有免疫疾病的病毒感染患者，体内病毒水平常伴随某些免疫分子水平的升高而升高，因此很多免疫分子的人源化抗体在此类病毒的治疗中显示出很好的效果。[/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒感染中的应用[/font][/font][font=宋体]病毒感染几乎无特效药，现有的核苷酸类抗病毒药物效果并不理想，且毒副作用大，单抗治疗因其针对性强，和相对比较安全，已越来越多研究者将其应用于抗病毒的治疗中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]，详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体：利用[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将鼠源单抗的轻链、重链可变区插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞进行表达所产生的单克隆抗体。人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体的人源化程度可达到[/font][font=Calibri]70%[/font][font=宋体]，完整的保留了鼠源单抗的可变区及亲本活性，人抗体恒定区的引入则降低了免疫原性。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]人鼠嵌合抗体基本原理[/font][/b][font=宋体][font=宋体]是从分泌某种鼠单抗的杂交瘤细胞基因组中分离并鉴定出重排的功能性鼠[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]（轻链可变区）和[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]（重链可变区），经过基因重组分别与人的[/font][font=Calibri]CL[/font][font=宋体]（轻链恒定区）和[/font][font=Calibri]CH[/font][font=宋体]（重链恒定区）区基因按照一定的方式相拼接，克隆到表达载体中构建鼠[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]人轻重链基因表达载体，并转入适当的宿主细胞表达来制备特异性嵌合抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]对于其他类型的人源化抗体，其优势在于，技术路线简单，易于操作；抗体完整性好，在体内滞留时间长；鼠源抗体的亲和力和特异性都得到保留，在临床上得到了良好的反应。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]构建人鼠嵌合抗体主要包括：克隆鼠抗体可变区基因，钓取人抗体恒定区基因，拼接鼠抗体可变区基因与人抗体恒定区基因以及构建载体和宿主细胞。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]人鼠嵌合型单克隆抗体制备优点：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①不仅保留了亲本鼠抗体的高特异性和亲和力，而且使鼠源性成分减少 [/font][font=Calibri]70%[/font][font=宋体]左右；[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②其人源[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能有效介导生物学效应功能，如抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（[/font][font=Calibri]Antibody dependent cell-mediated cytotoxicity[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）、补体依赖性细胞毒作用（[/font][font=Calibri]Complement dependent cytotoxicity[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）等；[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③能自由地选择抗体的型、亚型、类、亚类、大小、结构域及添加糖基化位点等，以利用其不同的生物学特点及理化特性；[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④由高效真核表达载体和人抗体恒定区组成的嵌合抗体表达“盒子”可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区，缩短操作和研制周期；[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤操作相对简单。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody]嵌合抗体[/url]主要有三种类型：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、嵌合[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前嵌合抗体的研究主要集中在嵌合[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Immunoglobulin G[/font][font=宋体]）抗体。其构建基本原理是从生产某种鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞中得到目的抗体[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区（[/font][font=Calibri]variable region[/font][font=宋体]）基因，再与人类的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区（[/font][font=Calibri]constant region[/font][font=宋体]）基因重组并克隆到合适载体中，然后转入受体细胞表达（如图[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在构建嵌合抗体时应根据不同目的选择不同的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]片段。这是因为不同类型的人抗体[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区与补体和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]fragment crystallizable,Fc[/font][font=宋体]）相互作用的能力以及引发细胞溶解的功能不尽相同。在体内免疫系统中，抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段和效应细胞相互作用，发挥特异的生物学功能。例如[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Immunoglobulin E[/font][font=宋体]）可介导炎症反应等，[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]活化补体的能力强，[/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体]的补体活化能力比[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体]强，且在[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]作用（[/font][font=Calibri]antibody dependent cell mediated cytotoxicity[/font][font=宋体]）触发能力上也比[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体]强。在与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体的结合能力上[/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体]比较强，[/font][font=Calibri]IgG4[/font][font=宋体]次之，而[/font][font=Calibri]IgG2[/font][font=宋体]几乎检测不到。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、嵌合[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]F(ab')2[/font][font=宋体]抗体[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]嵌合[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]antigen-binding fragment, Fab[/font][font=宋体]）和[/font][font=Calibri]F(ab')2[/font][font=宋体]（具有两个抗原结合表位的片段）抗体的优势就是渗透力强。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]嵌合抗体制备原理为：将功能性抗体[/font][font=Calibri]L,H[/font][font=宋体]链的[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区基因与人的轻链[/font][font=Calibri]k[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]H[/font][font=宋体]链[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]进行重组，克隆到表达载体中，在转入宿主细胞表达。不过对于大多数该类型的抗体来说，由于亲和力较低，分子量小，容易被肾小球过滤而从血液中消失，因此大多数不适合单独使用于临床治疗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/services/chimeric-antibody-production-service][b]嵌合抗体生产服务[/b][/url]详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/chimeric-antibody-production-service[/font][/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对羊驼纳米抗体、鼠源单抗进行人源化改造，保证人源化程度 [/font][font=Calibri]95%[/font][font=宋体]，为客户提供优质的[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]单克隆抗体人源化服务[/b][/url]。详情可关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[font=宋体]抗体亲和力成熟是抗体药物研发的重要环节，旨在提高抗体的特异性和效力，降低毒副作用，提高治疗效果。本文将介绍抗体亲和力成熟的方法、机制和意义。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟的方法有哪些[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]各自有什么优点：[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随机突变：通过随机突变引入随机突变，在基因水平上对抗体进行改造，以获得亲和力更高的抗体。该方法的优点是能够快速获得亲和力较高的抗体，但需要大量的筛选工作。[/font][font=宋体][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组：通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组技术对抗体基因进行改造，以获得亲和力更高的抗体。该方法的优点是能够快速获得大量突变体，并且可以通过表面展示技术进行筛选，但需要掌握相应的技术。[/font][/font][font=宋体]抗体亲和力成熟质粒库的构建及筛选：通过构建抗体亲和力成熟质粒库，筛选出亲和力较高的抗体。该方法的优点是能够获得亲和力较高的抗体，但需要掌握相应的技术。[/font][font=宋体]噬菌体表面展示技术：将抗体基因与噬菌体表面展示技术结合，筛选出亲和力较高的抗体。该方法的优点是能够快速获得亲和力较高的抗体，且可以结合其他表面展示技术进行筛选。[/font][font=宋体][font=宋体]总之，抗体亲和力成熟的方法包括随机突变、[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组、抗体亲和力成熟质粒库的构建及筛选和噬菌体表面展示技术。这些方法各有优缺点，需要根据具体情况选择合适的方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体亲和力成熟的主要机制：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟的主要机制是通过体内的亲和力成熟中心（[/font][font=Calibri]germinal center[/font][font=宋体]）发生。亲和力成熟中心是淋巴结和脾脏等淋巴器官中[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞活化和分化的特定区域。在亲和力成熟中心内，[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞经历多轮突变和选择，使其产生高亲和力的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]高亲和力的抗体是由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞受体基因的突变引起的。突变是指[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞受体基因中特定区域的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]序列发生随机突变，这些突变导致了抗体亲和力的变化。突变是一个非常高效的过程，每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞大约会经历一到两次突变。这样的高度选择性突变能够增加亲和力较高的抗体的产生概率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择是亲和力成熟过程中的关键步骤。选择性地扩增亲和力较高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞是由[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞辅助完成的。在这个过程中，抗原与[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞表面的抗原受体结合，形成抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体复合物。这些复合物将被[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞辅助细胞识别，并提供刺激信号，使得亲和力较高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞得到更多的刺激和扩增。通过这种选择性扩增的过程，亲和力较高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞将占据免疫反应中的主导地位。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体亲和力成熟的意义：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①抗体亲和力成熟的意义在于提高抗体的特异性和效力，有助于减少用药剂量，降低毒副作用等。在抗体亲和力成熟的过程中，通过[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞受体基因的突变和选择性扩增，使得机体能够产生高亲和力的抗体，提高了抗体与抗原的结合能力和特异性识别能力。这有助于提高抗体的效价和减少交叉反应，使得抗体更具有针对性和有效性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗体亲和力成熟还有助于人们更好地理解抗体与靶点相互作用的机理，更好地认识靶点的功能。通过研究抗体亲和力成熟的过程和机制，可以进一步优化抗体药物的研发和质量改善，为临床治疗提供更安全、有效的治疗手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③抗体亲和力成熟在免疫应答和抗体药物研发中具有重要意义，有助于提高抗体的特异性和效力，减少用药剂量，降低毒副作用等，为临床治疗提供更安全、有效的治疗手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service]抗体亲和力成熟服务[/url]，其优势：[/b][/font][font=宋体]①丰富的经验及多例成功案例[/font][font=宋体]②专业的抗体数据库分析系统[/font][font=宋体]③计算机建模结构模拟优化[/font][font=宋体]④随机突变、定点突变技术[/font][font=宋体]⑤快速、高通量哺乳动物细胞抗体表达与筛选技术平台[/font][font=宋体][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]OCTET Affinity, Kinetics, off-rate, ranking[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service[/font][/font]

我在做免疫分析的时候想通过聚电解质静电吸附方法来固定单克隆抗体，想请教一下小鼠抗人单克隆IgG等电点一般多少？邮箱： lgs005@126.com谢谢，望不吝指教！

[font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟[/font][font=Calibri](antibodyaffinitymaturation)[/font][font=宋体]是指机体正常存在的一种免疫功能状态。在体液免疫中，再次应答所产生抗体的平均亲和力高于初次免疫应答。这种现象称为抗体亲和力成熟。机体的这种功能状态是长期进化和对外界环境不断适应的结果，对机体防御和维持自身免疫监控有着十分重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]体内亲和力成熟[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟形成的原因，是抗体形成细胞本身的基因突变和抗原对[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆的选择性激活。机体在接受抗原刺激后，体细胞发生高频突变，突变产生的各种亲和力不同的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆，经过滤泡树突细胞捕获，使得后代[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞及其产生的抗体对抗原的平均亲和力得到了提升，从而实现了亲和力的体内成熟。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在机体体液免疫系统中，[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞应对抗原刺激诱导，产生抗体。在反复暴露于抗原的过程中，产生高亲和力的抗体。这涉及两个相互关联的过程：首先在骨髓抗体轻重链的胚系基因片段经[/font][font=Calibri]V-(D)-J[/font][font=宋体]随机重排产生超过[/font][font=Calibri]106[/font][font=宋体]的组合，这是抗体特异性免疫反应的分子基础；其次，机体接受抗原刺激后，在二级淋巴器官的生发中心，抗体基因尤其是互补决定区（[/font][font=Calibri]complementaritydeterminingregion[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）发生高频突变，突变导致抗体结合特性改变。经过滤泡树突状细胞提呈抗原，只有抗原亲和力最高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞将选择生存进一步分化为浆细胞和记忆细胞。对于高频突变，近期研究表明：活化的胞嘧啶核苷脱氨酶（[/font][font=Calibri]activation-inducedcytidinedeaminase[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]AID[/font][font=宋体]）将胞嘧啶脱氨基转化为尿嘧啶，突变后的尿嘧啶引发错配和碱基剪切并引发[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]修复，而不正确修复进一步加剧突变产生，导致抗体基因高频突变诱发高亲和力抗体产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]体外抗体亲和力成熟[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体制备技术的发展，经历了多克隆技术、单克隆技术和抗体库技术[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个发展阶段。与单、多克隆技术相比，抗体库技术在基因水平上的操作非常灵活，可对基因序列进行分析、修饰和加工以改进抗体特性或赋予抗体新特性，突破了以往仅局限于抗抗原分子设计的限制。然而，抗体库来源的抗体与传统的单、多克隆抗体相比，实际应用非常少见，主要是因为库来源抗体与天然抗体相比，亲和力偏低，难以满足多种实际需求。特别是来自于未经免疫的天然抗体库中的抗体，抗体的亲和力通常在微摩尔水平，这仅与动物在初次免疫应答后获得的抗体亲和力水平相当。因此人们依据体内抗体亲和力成熟原理，模拟体内亲和力成熟过程、采取各种策略对抗体基因进行相应突变，进行体外亲和力成熟研究。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]常用的抗体体外亲和力成熟技术[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]根据体内抗体亲和力成熟原理，在体外抗体亲和力成熟过程中，选择突变区域以及如何引入突变是一个关键问题，目前的突变策略主要分为三大类，随机突变、置换和定向突变。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①易错[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]易错[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]是目前最常用的抗体突变技术，可以在抗体基因的全长或部分区域随机引入突变。在聚合酶对目的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]基因扩增[/color][/url]时，通过应用错配率高的聚合酶或调整反应条件等，以一定的频率向目的基因中随机引入突变，并通过多轮[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]反复进行随机诱变，累计突变效应，最终获得目的蛋白的随机突变体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②链置换[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]链置换是保留某个特定抗体的重链或轻链，另一条链与一个随机化的互补链进行组合，从中筛选更高活性的突变株。通过固定抗体两条链中的一条链，对另一条链构建具有足够多样性的置换文库，随机组合有可能产生最佳链组合，经过噬菌体抗体库筛选可获得高亲和力的新抗体。链置换策略常采用轻链替换。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③定点突变[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于天然抗体在亲和力成熟过程中，体细胞高频突变发生区域并非均匀分布，而是主要集中在与抗原直接接触的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区。在抗体的亲和力体外成熟过程中，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区是最常选用的定点突变区域，这样既可以获得足够的序列多样性，又不会破坏蛋白质结构。对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]进行定点突变时，可以对多个[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]进行平行突变或进行逐步优化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组技术是对同源的抗体基因，采用脱氧核糖核酸酶Ⅰ将其切割成不超过[/font][font=Calibri]50bp[/font][font=宋体]的片段，再随机组合后进行[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增成完成的抗体基因的技术。它包含了抗体片段随机化切割、重组和筛选的过程，一定程度上模拟了天然抗体的亲和力成熟过程，并加快了体外定向进化速度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Tips:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在链置换中为什么通常替换的都是轻链？[/font][/font][font=宋体]答：因为抗体重链在抗结合活性和结构方面比较重要，所以链置换策略常采用轻链替换，以尽量避免链替换后抗体结合特异性发生变化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、抗体库技术与单、多抗技术相比，有何优劣？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]答：优势：抗体库技术筛选范围大、实验周期短、操作简单、不许进行免疫操作、可应用于大规模生产劣势：亲和力弱，不易激发人体的抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应。临床应用受限较大。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州会为大家提供抗体亲和力成熟服务，同时义翘神州优势：[/font][font=宋体]①丰富的经验及多例成功案例[/font][font=宋体]②专业的抗体数据库分析系统[/font][font=宋体]③计算机建模结构模拟优化[/font][font=宋体]④随机突变、定点突变技术[/font][font=宋体]⑤快速、高通量哺乳动物细胞抗体表达与筛选技术平台[/font][font=宋体][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]OCTET Affinity, Kinetics, off-rate, ranking[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]同时[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service][b]抗体亲和力成熟服务[/b][/url]内容及流程详解可以参看抗体亲和力成熟[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体]抗体是体液免疫应答的主要效应因子，存在与血液和组织中，它们能特异性的结合或识别入侵的病原体，一次构成机体预防系统的重要组成部分。抗体具有相似的结构，由两条相同的重链和和轻链组成的对称结构。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体的生产目前最常用的两种方式是利用哺乳动物细胞生产的重组抗体和免疫动物生产的普通抗体。传统的免疫动物生产的抗体，是获取动物血清纯化得到的，如果用于药用人体往往会产生排异反应。利用重组技术生产抗体不仅能够满足抗体的大规模生产需求，同时，重组抗体药物的发展已成为目前生物制药的主流。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组抗体的发展经历了鼠源单抗（[/font][font=Calibri]McAb[/font][font=宋体]），人鼠嵌合抗体，人源化抗体和全人抗体四个阶段。下面从抗体生产和抗体技术两方面入手，系统的阐述重组抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组抗体技术：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]Fab[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b]Fab[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b]片段[/b][/url]（[/font][font=Calibri]Fragment of antigen binding[/font][font=宋体]）也叫做抗原结合片段，是抗体结构中可以与抗原结合的区域。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段由一条完整的轻链与重链的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]结构域（[/font][font=Calibri]Fd[/font][font=宋体]段）组成，分子量约[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]104[/font][font=宋体]。轻链与重链均存在一个恒定区与一个可变区，轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]scFv[/font][/font][font=宋体][font=宋体]单链抗体（[/font][font=Calibri]single-chain variable fragment[/font][font=宋体]， [/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]）是由抗体重链的下载可变区与轻链的可变区在一段肽链的连接下构成的小分子，是具有抗体活性的最小功能结构单位。单链抗体可以由表达系统进行表达，也可以用噬菌体展示技术进行制备。由于其分子质量小，穿透力强，半衰期短，免疫原性低等特点，在疾病临床诊断、治疗、预防等方面具有重要作用和广阔的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③双特异性抗体[/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体（[/font][font=Calibri]bispecific monoclonal antibody, BsAb[/font][font=宋体]）是一种人工制作出来的可以同时结合两种不同抗原的特殊抗体。双特异性抗体在自然状态下不存在，只能通过人工制备。研究双特异性抗体，对于癌症的免疫治疗有着重大的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白是指利用基因工程技术将免疫球蛋白（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等）的下载[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与某种具有生物学活性的功能蛋白分子融合而产生的新型蛋白。具有生物学活性的功能蛋白可以是细胞因子、毒素、受体、酶、抗原肽等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白不仅可发挥所融合蛋白的生物学活性，还具有一些抗体的性质，如可引起抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）、补体依赖的细胞毒作用（ [/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）与抗体依赖细胞介导的吞噬作用（[/font][font=Calibri]ADCP[/font][font=宋体]）等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]蛋白类药物在血浆内半衰期较短，为了达到治疗效果需要大剂量给药，这样会造成严重的副作用，给患者造成巨大的负担。将功能蛋白与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段融合，可以延长药物在血浆内的半衰期，降低药物的免疫原性，在疾病的诊断与治疗方面有重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]抗体人源化的发展经过三个阶段，从人鼠嵌合[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]人源化抗体和全人抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service][b]抗体亲和力成熟[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟[/font][font=Calibri](antibody affinity maturation)[/font][font=宋体]下载是指机体正常存在的一种免疫功能状态。在体液免疫中，再次应答所产生抗体的平均亲和力高于初次免疫应答。这种现象称为抗体亲和力成熟。机体的这种功能状态是长期进化和对外界环境不断适应的结果，对机体防御和维持自身免疫监控有着十分重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑦抗体亲和力测定[/font][font=宋体]抗体与抗原表位或抗原决定簇之间的结合力称为抗体亲和力，下载其本质是一种非共价作用力，包括对氨基酸之间的吸引力，氢键，疏水性作用力等。抗体亲和力体现了一个抗体分子和一个半抗原分子或抗原分子的一个决定簇起反应的能力。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑧[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display][b]噬菌体展示技术[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]噬菌体展示技术[/font][font=Calibri](phage display technology)[/font][font=宋体]的本质是一种筛选技术。下载将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中，随着噬菌体的传代，外源蛋白会展现在噬菌体表面，形成噬菌体文库。随后用特定蛋白对噬菌体文库进行筛选，便可快速的得到与该蛋白具有高度亲和力的抗体。筛选出的抗体可以进一步用于生物学功能研究。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务详情。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font]

[font=宋体][b]什么是纳米抗体？[/b][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody][b]纳米抗体[/b][/url]（[/font][font=Calibri]nanobody, Nb[/font][font=宋体]）是一种人工设计的抗体分子，又称为单域抗体（[/font][font=Calibri]single-domain antibodies, sdAbs[/font][font=宋体]）、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体或[/font][font=Calibri]camelid[/font][font=宋体]抗体，是发现于羊驼、单峰驼等驼科以及鲨鱼、鳐鱼等软骨鱼中的一种天然缺失轻链的重链抗体（[/font][font=Calibri]heavy-chain antibodies, HCAbs)[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]1993[/font][font=宋体]年，比利时的科学家在骆驼的血清中发现了一种天然轻链缺失的重链抗体，分子量约[/font][font=Calibri]95 kDa[/font][font=宋体]，其中包括两个恒定区（[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]）、一个铰链区和一个重链可变区（[/font][font=Calibri]variable heavy chain domain, VHH[/font][font=宋体]），接着克隆得到只包含一个重链可变区的单域抗体，即[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体。[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体的晶体结构为[/font][font=Calibri]4 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]2.5 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]3 nm[/font][font=宋体]的椭圆形，分子量大小仅普通抗体的[/font][font=Calibri]1/10[/font][font=宋体]，约[/font][font=Calibri]12-14 kDa[/font][font=宋体]，是最小的完整抗原结合片段，因此又被称为纳米抗体。纳米抗体可用于肿瘤等疾病的治疗、疾病的检测、疫苗的研发等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体特性：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]高耐热性和稳定性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]将不同的纳米抗体在[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃放置[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周，结果其抗原结合活性均在[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]以上，表明纳米抗体在室温下保存相当稳定，这使其比常规抗体更易于储藏和运输。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]比较了鼠单抗和纳米抗体在高达[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃高温长时间处理的抗原结合活性，发现纳米抗体都保持了较高的活性仍能重新获得抗原结合能力，而所有常规抗体在[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃处理后都丧失了活性，发生了不可逆的聚合。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在恶劣条件，如在高热、离液剂、存在蛋白酶和极度[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值变性的条件下（如胃液和内脏中），正常抗体会失效或分解，而纳米抗体仍具有高度的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]高抗原结合性：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体独特的结构决定了其高抗原结合特性：纳米抗体较长的[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]，可形成一稳定的暴露的凸环结构（凸环中具有稳定结构的二硫键），能够深入抗原内部以更好的结合抗原从而提高了其抗原特异性和亲和力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]而传统抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段及单链抗体[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]的抗原结合表面常形成凹形拓扑结构[/font][font=Calibri], [/font][font=宋体]通常只能识别位于抗原表面的位点，因此纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]单域具有更加广泛的抗原结合力，甚至当靶蛋白紧密包裹隐藏了普通抗体识别的位点时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]纳米抗体也可以对其进行表位识别。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]较强的组织穿透力：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]纳米抗体具有强而快的组织穿透能力，可以进入致密的组织如实体瘤发挥作用；并且多余未结合的纳米抗体能够很快的被清除，这相对于单克隆抗体组织穿透力差，不易被清除的不足，更有利于疾病的诊断。另外，纳米抗体能够有效的穿透血脑屏障，这样的特性为脑部给药提供了新方法，有望成为治疗老年痴呆症的新药。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]高水溶性、高表达性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]正常抗体[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]结构域单独表达时通常形成包涵体，或者暴露的疏水域相互黏附；而纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]由于其[/font][font=Calibri]FR2[/font][font=宋体]中的疏水残基被亲水残基所取代，使得纳米抗体的水溶性增加，聚合性减少；而且即使以包涵体形式表达，也很容易复性，这样可以大大提高作为药物的利用率。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]因纳米抗体分子量小、结构简单，由单一的基因编码，所以它很容易在微生物中合成，能在噬菌体、酵母等微生物中大量的表达，而且其相对价格低廉、可进行大规模生产，易于普及和应用。有报道，可通过酵母反应器酿造将纳米抗体的产量提高，每公升可达[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]克的产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体的应用优势[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①用于生物医药研发（基因工程药物研发、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]药物研发）；[/font][/font][font=宋体]②用于临床体外诊断（胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法）；[/font][font=宋体]③用于肿瘤研究、免疫学研究等基础研究；申请具有自主知识产权的发明专利及科研奖项；[/font][font=宋体]④拓展研究思路、发表国际知名学术刊物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体是一种非常有前景的下一代治疗性抗体技术，受到越来越多的研究机构和制药公司的关注。为支持纳米抗体药物的早期发现，义翘神州利用噬菌体抗体库技术自主研发了纳米抗体开发平台，已成功开发了多个纳米抗体候选分子。另外，我们的高通量纳米抗体表达平台，已成功表达和生产了多种纳米抗体形式，包括单价、多价或多特异性[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]，满足客户的各种定制需求。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody[/font][/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟[/font][font=Calibri](antibody affinity maturation)[/font][font=宋体]是指机体正常存在的一种免疫功能状态。在体液免疫中，再次应答所产生抗体的平均亲和力高于初次免疫应答。这种现象称为抗体亲和力成熟。机体的这种功能状态是长期进化和对外界环境不断适应的结果，对机体防御和维持自身免疫监控有着十分重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]体内亲和力成熟[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟形成的原因，是抗体形成细胞本身的基因突变和抗原对[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆的选择性激活。机体在接受抗原刺激后，体细胞发生高频突变，突变产生的各种亲和力不同的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆，经过滤泡树突细胞捕获，使得后代[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞及其产生的抗体对抗原的平均亲和力得到了提升，从而实现了亲和力的体内成熟。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在机体体液免疫系统中，[/font][font=Calibri]B [/font][font=宋体]淋巴细胞应对抗原刺激诱导，产生抗体。在反复暴露于抗原的过程中，产生高亲和力的抗体。这涉及两个相互关联的过程：首先在骨髓抗体轻重链的胚系基因片段经[/font][font=Calibri]V-(D)-J [/font][font=宋体]随机重排产生超过[/font][font=Calibri]106[/font][font=宋体]的组合，这是抗体特异性免疫反应的分子基础；其次，机体接受抗原刺激后，在二级淋巴器官的生发中心，抗体基因尤其是互补决定区（[/font][font=Calibri]complementarity determining region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）发生高频突变，突变导致抗体结合特性改变。经过滤泡树突状细胞提呈抗原，只有抗原亲和力最高的[/font][font=Calibri]B [/font][font=宋体]细胞将选择生存进一步分化为浆细胞和记忆细胞。对于高频突变，近期研究表明：活化的胞嘧啶核苷脱氨酶（[/font][font=Calibri]activation-induced cytidine deaminase[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]AID[/font][font=宋体]）将胞嘧啶脱氨基转化为尿嘧啶，突变后的尿嘧啶引发错配和碱基剪切并引发[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]修复，而不正确修复进一步加剧突变产生，导致抗体基因高频突变诱发高亲和力抗体产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]体外抗体亲和力成熟[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体制备技术的发展，经历了多克隆技术、单克隆技术和抗体库技术[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个发展阶段。与单、多克隆技术相比，抗体库技术在基因水平上的操作非常灵活，可对基因序列进行分析、修饰和加工以改进抗体特性或赋予抗体新特性，突破了以往仅局限于抗抗原分子设计的限制。然而，抗体库来源的抗体与传统的单、多克隆抗体相比，实际应用非常少见，主要是因为库来源抗体与天然抗体相比，亲和力偏低，难以满足多种实际需求。特别是来自于未经免疫的天然抗体库中的抗体，抗体的亲和力通常在微摩尔水平，这仅与动物在初次免疫应答后获得的抗体亲和力水平相当。因此人们依据体内抗体亲和力成熟原理，模拟体内亲和力成熟过程、采取各种策略对抗体基因进行相应突变，进行体外亲和力成熟研究。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]常用的抗体体外亲和力成熟技术[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]根据体内抗体亲和力成熟原理，在体外抗体亲和力成熟过程中，选择突变区域以及如何引入突变是一个关键问题，目前的突变策略主要分为三大类，随机突变、置换和定向突变。[/font][font=宋体][font=宋体]易错[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]易错[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]是目前最常用的抗体突变技术，可以在抗体基因的全长或部分区域随机引入突变。在聚合酶对目的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]基因扩增[/color][/url]时，通过应用错配率高的聚合酶或调整反应条件等，以一定的频率向目的基因中随机引入突变，并通过多轮[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]反复进行随机诱变，累计突变效应，最终获得目的蛋白的随机突变体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①[/font][font=宋体]链置换[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]链置换是保留某个特定抗体的重链或轻链，另一条链与一个随机化的互补链进行组合，从中筛选更高活性的突变株。通过固定抗体两条链中的一条链，对另一条链构建具有足够多样性的置换文库，随机组合有可能产生最佳链组合，经过噬菌体抗体库筛选可获得高亲和力的新抗体。链置换策略常采用轻链替换。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②[/font][font=宋体]定点突变[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于天然抗体在亲和力成熟过程中，体细胞高频突变发生区域并非均匀分布，而是主要集中在与抗原直接接触的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区。在抗体的亲和力体外成熟过程中，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区是最常选用的定点突变区域，这样既可以获得足够的序列多样性，又不会破坏蛋白质结构。对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]进行定点突变时，可以对多个[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]进行平行突变或进行逐步优化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③[/font][font=宋体][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组技术是对同源的抗体基因，采用脱氧核糖核酸酶Ⅰ将其切割成不超过[/font][font=Calibri]50bp[/font][font=宋体]的片段，再随机组合后进行[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增成完成的抗体基因的技术。它包含了抗体片段随机化切割、重组和筛选的过程，一定程度上模拟了天然抗体的亲和力成熟过程，并加快了体外定向进化速度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service][b]抗体亲和力成熟服务[/b][/url]，有需求可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service[/font][/font]

[font=宋体]抗体标记是一种生物技术，通过将标记物（如酶、荧光素、生物素等）共价连接到抗体上，使其与待检测物（如特定抗原）特异性反应，形成多元复合物。随后，借助相关仪器，可以直接观察试验结果或进行自动化测定，从而对抗原、抗体反应进行定性和定位研究，或进行定性和定量测定。下面为大家介绍几种高质量的标记抗体：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①荧光色素标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]这种标记方法是将荧光素与相应的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]结合，将荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]与标本中相应的抗原形成荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原复合物，用荧光显微镜观察。在显微镜若存在荧光则意味着存在抗原抗体复合物，因此可根据已知的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]推断出另一种未知抗原[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②[/b][url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记抗体[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高！这种方法可使抗体或其它蛋白质的[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基与酰化的生物素共价结合，生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③放射性碘标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质的碘标记方法有很多种，比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体是指将[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料与特定抗体结合而成的复合物，这种技术常用于生物医学研究中的荧光标记。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料是从红藻属藻类中提取得到的一种特殊色素，具有较高的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体主要应用在流式细胞术和免疫组化等实验中。在流式细胞术中，[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞表面标记物的表达情况，如[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD8[/font][font=宋体]等，可以实现对免疫细胞亚群的研究。在免疫组化和免疫组织化学等实验中，[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞内标记物的表达，如细胞因子、转录因子等，可以深入研究细胞内信号传导通路及相关的生物学功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体是一种荧光标记的二抗，通常是在单抗上进行标记，具有很强的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体可以与细胞或细胞组分中的特定抗原结合，用于细胞表面标记、蛋白质定量分析、细胞周期和细胞凋亡研究等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体是将[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]（异硫氰酸荧光素）与特异性抗体经适当方法连接而成的复合物。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是一种荧光染料，能够与各种抗体蛋白结合，并产生强烈的荧光信号。这种标记技术常用于生物医学研究中的荧光标记，特别是在免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州除了为客户提供抗体开发，还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url]，可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。更多关于抗体标记及抗体标记方法详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候，如何选择适合我们实验需要的抗体，并恰当保存使用，是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多，品牌众多，技术参数不一，价格和质量更是相差甚大，如何购买到高质量价格合适的抗体，并准确地做出我们想要的结果，其中有很多细节需要注意。一、怎样选择适合你实验需要的抗体1. 一抗选择要点（1）确定抗体的名字，注意中英文名字、它名、亚型等信息。（2）确定你的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种实验验证，请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。（3）确定实验样本的种属，Human，Mouse，还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验，请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。（4）样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免疫亲和反应。（5）单多克隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。2. 二抗选择要点（1）种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗，以与后面的SP结合反应，而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗，如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。二、抗体的稳定性1. 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果。抗体是免疫系统中最重要的分子之一，其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构。2. 抗体分子的高Tm值。在室温下，甚至短时间温度达到50-60℃，抗体分子都能维持正确折叠，保持应有的活性。3. 抗体的纯度。采用先进的抗体纯化技术，确保抗体产品的高纯度，保障其抗体产品的稳定性。4. 抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失，高浓度的抗体稳定性更好，抗体产品中93%的浓度大于0.5mg/ml。三、怎样确定抗体购买渠道和品牌国外著名抗体品牌的质量一般没问题，但价格较贵，而且很多抗体品牌本身不生产抗体，所以能找到OEM抗体生产商生产的原装进口抗体，如美国的ProSci公司，大部分常用抗体都可以在ProSci网站上查找到，同样一支抗体能少花费1000元，对于一个普通实验室来说，那将节约非常多的科研经费，而且ProSci会提供信号通路的小包装抗体作为一个试剂盒，这样极大方便了用户，特别是经费不是很充足的用户。随着网络技术的越来越普及，我们自己就可以通过国内外的相关网站来检索，国外最大的生物试剂查询网站：biocompare，国内最大的生物试剂查询网站：丁香通，来查找我们所需要的产品资料。四、怎样保存已获得的抗体

[font=宋体]根据体内抗体亲和力成熟原理，在体外抗体亲和力成熟过程中，选择突变区域以及如何引入突变是一个关键问题，目前的突变策略主要分为三大类，随机突变、置换和定向突变。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]①易错[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]易错[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]是目前最常用的抗体突变技术，可以在抗体基因的全长或部分区域随机引入突变。在聚合酶对目的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]基因扩增[/color][/url]时，通过应用错配率高的聚合酶或调整反应条件等，以一定的频率向目的基因中随机引入突变，并通过多轮[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]反复进行随机诱变，累计突变效应，最终获得目的蛋白的随机突变体。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]②链置换[/font][/b][font=宋体]链置换是保留某个特定抗体的重链或轻链，另一条链与一个随机化的互补链进行组合，从中筛选更高活性的突变株。通过固定抗体两条链中的一条链，对另一条链构建具有足够多样性的置换文库，随机组合有可能产生最佳链组合，经过噬菌体抗体库筛选可获得高亲和力的新抗体。链置换策略常采用轻链替换。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③定点突变[/b][/font][font=宋体][font=宋体]由于天然抗体在亲和力成熟过程中，体细胞高频突变发生区域并非均匀分布，而是主要集中在与抗原直接接触的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区。在抗体的亲和力体外成熟过程中，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区是最常选用的定点突变区域，这样既可以获得足够的序列多样性，又不会破坏蛋白质结构。对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]进行定点突变时，可以对多个[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]进行平行突变或进行逐步优化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组技术是对同源的抗体基因，采用脱氧核糖核酸酶Ⅰ将其切割成不超过[/font][font=Calibri]50bp[/font][font=宋体]的片段，再随机组合后进行[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增成完成的抗体基因的技术。它包含了抗体片段随机化切割、重组和筛选的过程，一定程度上模拟了天然抗体的亲和力成熟过程，并加快了体外定向进化速度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Tips:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在链置换中为什么通常替换的都是轻链？[/font][/font][font=宋体]答：因为抗体重链在抗结合活性和结构方面比较重要，所以链置换策略常采用轻链替换，以尽量避免链替换后抗体结合特异性发生变化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、抗体库技术与单、多抗技术相比，有何优劣？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]答：优势：抗体库技术筛选范围大、实验周期短、操作简单、不许进行免疫操作、可应用于大规模生产劣势：亲和力弱，不易激发人体的抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应。临床应用受限较大。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service][b]抗体亲和力成熟服务[/b][/url]，服务内容及流程可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service[/font][/font]

[align=left][font='calibri'][size=13px]抗体的类型有哪些？不同类型的抗体结构和功能介绍[/size][/font][/align]抗体的类型有哪些？不同类型的抗体结构和功能有什么不同，[url=https://cn.sinobiological.com/]义翘神州[/url]为您细细讲解：五种不同类型的抗体分别是什么？血清中发现的抗体分子存在五种免疫球蛋白：IgG、IgM、IgA、IgE和IgD，通过重链类型进行区分。IgG抗体结构和功能免疫球蛋白G（IgG）抗体是一种大分子球蛋白，分子量约为150kDa，由四条肽链组成。它包含两条相同的γ（伽马）重链，约50kDa，以及两条相同的轻链，约25kDa，因此属于四聚体结构。IgG提供长效的保护作用，持续存在数月或数年。IgG可阻止细菌、病毒的侵害，中和细菌毒素，触发补体蛋白系统，结合抗原提高吞噬作用的效果。IgM抗体结构和功能免疫球蛋白M（IgM）由五个或六个单体构成（即大多数为五聚体，但也有六聚体），由两条重链（μ-链）和两条轻链构成，通过二硫键和J链结合在一起。IgM与红细胞（RBC）表面的ABO血型抗原有关。IgM通过吞噬作用增强细胞的摄取。IgA抗体结构和功能免疫球蛋白A（IgA）抗体由重链（H）和轻链（L）构成。每条H链由恒定区（Cα1、Cα2、Cα3）、铰链区和可变区（V）构成。轻链由CL和Vκ或Vλ构成。IgA的主要功能是在微生物入侵组织之前将抗原与微生物相结合。它聚集抗原并将其保存在分泌物中，因此当分泌物被排出时，抗原也会被排出。IgA也是黏膜表面（例如肠、鼻和肺）的第一道屏障。IgE抗体结构和功能免疫球蛋白E（IgE）抗体仅存在于哺乳动物体内。IgE由浆细胞合成。IgE单体由两条重链（ε链）和两条轻链构成，ε链包含4种类Ig恒定区（Cε1-Cε4）。IgE与参与免疫应答的肥大细胞和嗜碱性粒细胞相结合。一些科学家认为IgE能够阻止寄生虫的侵入。IgD抗体结构和功能免疫球蛋白D（IgD）抗体可在未成熟的B淋巴细胞的质膜上表达。IgD同样以分泌体形式产生，少量存在于血清中。IgD在诱导抗体产生中起重要作用。更多抗体定制服务尽在：https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services

[font=宋体]主流的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发平台[/b][/url]有多个，其中最常用的是基于杂交瘤技术的平台。该技术通过将免疫细胞与肿瘤细胞融合，产生能够产生抗体的杂交瘤细胞，从而制备出单克隆抗体。随着技术的发展，基于噬菌体展示技术的平台也逐渐成为主流。该技术通过将抗体片段与噬菌体蛋白融合，展示在噬菌体表面，从而筛选出具有所需特性的抗体。此外，基于转基因小鼠技术的平台也是常用的抗体开发平台之一。这些平台为抗体开发提供了强大的技术支持，使得研究人员能够快速、高效地开发出针对特定抗原的抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的[url=https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services][b]定制抗体开发服务[/b][/url]，包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发，以及针对特定应用的抗体开发，例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来，从抗原设计到抗体纯化和鉴定，我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势，为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。下面是义翘神州抗体开发平台：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制，开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质，可线上购买，作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术，极大程度提高抗体质量和成功率。因此，义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台，该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品，还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品，并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体，作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已建立四种抗体生产平台，可用于快速[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量抗体生产[/b][/url]和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术，极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里，我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率，生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台，包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）检测平台、流式（[/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体]）检测平台、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）检测平台以及免疫沉淀（[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]）检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font]

[font=宋体]什么是抗体开发？抗体开发包含了抗体生成和表征的全过程。首先，将目的抗原注射入实验动物体内，使其免疫系统生成大量抗体。[/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发[/b][/url]的方法各有不同。例如，多克隆抗体可直接从血清中纯化，而单克隆抗体则需要先培养杂交瘤或先构建噬菌体展示抗体库。[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州作为行业领先的抗体研发公司，提供从抗原合成、研发和生产的一站式[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务。通过我们的抗体制备平台，我们随时准备帮助您应对研究中遇到的严峻挑战。[/font][/font][b][font=宋体]义翘神州提供抗体定制开发服务：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]快速单克隆抗体开发、[url=https://cn.sinobiological.com/services/fast-antibody-service][b]快速多克隆抗体开发[/b][/url]、磷酸化抗体定制服务、[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体服务[/b][/url][/font][b][font=宋体]抗体开发技术平台：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的定制抗体开发服务，包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发，以及针对特定应用的抗体开发，例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来，从抗原设计到抗体纯化和鉴定，我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势，为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制，开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质，可线上购买，作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术，极大程度提高抗体质量和成功率。因此，义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台，该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品，还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品，并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体，作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已建立四种抗体生产平台，可用于快速高通量抗体生产和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术，极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里，我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率，生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台，包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）检测平台、流式（[/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体]）检测平台、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）检测平台以及免疫沉淀（[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]）检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]详情可以关注义翘神州抗体开发页面。[/font][font=宋体][font=宋体]文章来源：抗体开发[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font][font=Calibri] [/font]

1891年10月，抗体（antibody）一词首次出现在保罗·埃尔利希公布的《免疫力的试验性研究》这篇文章中，德语的抗体"Antikörper"出现在该文章的结论部分。从此，科学家们开始了对抗体的探索和研究。二十世纪三四十年代，人们已经认识到抗体是一种蛋白质，并且可以识别抗原的空间结构。六十年代，罗德尼·罗伯特·波特和杰拉尔德·埃德尔曼揭示了抗体的化学结构，并因此获得1972年的诺贝尔生理学或医学奖。同一时期，人们发现了IgA, IgD, IgE等亚型的抗体。1975年，分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦建立杂交瘤技术，这是第一代单克隆抗体技术。他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合，成为杂交细胞系，既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性，又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。基于杂交瘤的单克隆抗体技术一经问世，迅速被应用于疾病诊断，治疗等用途中，使用中人们发现，鼠源的单克隆抗体很容易在人体内产生免疫反应，随后，1988年，Greg Winter等人率先提出了人源化抗体的方法，解决了这一问题。这是第二代单克隆抗体技术。而近来流行的兔单克隆抗体，是一种新型的技术，它基于杂交瘤或者噬菌体展示技术，这种方法产生的抗体在保持特异性的同时，具有更高的亲和力和灵敏度，实际使用时，工作浓度更低，背景更低，用作免疫组化等用途时，有时甚至可以免去抗原修复的步骤。时至今日，抗体的生产技术已经非常成熟。单克隆抗体已经应用于临床诊断，肿瘤治疗，自身免疫病治疗等诸多方面，日渐成为治疗各种顽疾的终极武器。

[font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview][b]重组抗体[/b][/url]，也被称为重组免疫球蛋白，是通过基因工程技术将抗体的基因在合适的宿主细胞中表达并生产出来的一类抗体。与传统的多克隆抗体和单克隆抗体相比，重组抗体具有更高的特异性和亲和力，并且可以针对特定的抗原表位进行设计和优化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组抗体的类型包括嵌合抗体、双特异性抗体、抗体片段和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白等。下面一起来看一下他们各种的应用：[/font][/font][font=宋体]①[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]1975[/font][font=宋体]年，杂交瘤技术的发现彻底改变了抗体研究和临床开发。然而，鼠源性抗体的疗效受到人抗鼠抗体（[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]）效应的限制，鼠源性单抗对人体具有异种蛋白的免疫原性 [/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]在人体内半衰期较短。[/font][font=Calibri]1984[/font][font=宋体]年，研究人员通过基因工程构建了第一个嵌合抗体，也是公认的第一种重组抗体，以降低鼠源抗体在人体内的免疫原性。其中，约[/font][font=Calibri]30%-35%[/font][font=宋体]的分子来源于小鼠的抗体序列，约[/font][font=Calibri]65%-70%[/font][font=宋体]来源于人的抗体序列。所得嵌合抗体保留了亲代小鼠抗体的抗原结合能力。抗体嵌合是开发治疗性人源化抗体的第一步。义翘神州采用[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植技术和计算机辅助分子建模，提供高质量的单克隆抗体人源化服务，成功率高，人源化程度[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗体片段[/font][font=宋体][font=宋体]每一个完整的免疫球蛋白（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]）分子包含通过二硫键连接的两条重链和两条轻链。抗体片段（如[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]）体积小，比其全长抗体具有更好的组织或肿瘤穿透力。因此，它们在免疫治疗方面具有巨大的前景，尤其是在实体瘤方面。此外，它们的半衰期也较短，可用作放射性显像剂。然而，由于缺乏[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区，它们不能引起[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]介导的抗体效应功能，如抗体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）和补体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]起初采用酶解法对[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体进行片段化。胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端，水解产生被称为[/font][font=Calibri]F(ab[/font][font=宋体]’[/font][font=Calibri])2[/font][font=宋体]的二价[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段。然后，通过木瓜蛋白酶将该片段裂解为两个相同的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段。然而，酶解法限制了可制备的抗体片段类型，而且不适合工业化大规模生产和纯化。随着抗体工程技术的进步，这些问题可以通过重组生产抗体片段来解决。抗体基因克隆测序成功后，可通过瞬时转染在原核表达系统（如大肠杆菌）和哺乳动物系统（[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]细胞）中表达抗体片段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]凭借丰富的重组生产经验，义翘神州建立了高通量[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]表达平台，交付了多个[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体生产项目，总体成功率超过[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]。除了常见的[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]形式，我们还可以表达双特异和多特异[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]。此外，义翘神州还可以表达其他各种高特异性和亲和力的抗体片段，如[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]与常规单克隆抗体不同，双特异性抗体（[/font][font=Calibri]bsAb[/font][font=宋体]）具有两个结合位点，可识别同一抗原上两个不同抗原或表位。由于这一特性，双特异性抗体备受研究者和制药业的关注。截止目前，美国食品药品监督管理局（[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]）已批准了[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]种双抗药物，而且[/font][font=Calibri]160[/font][font=宋体]多种双抗正在进行临床试验，用于治疗癌症、糖尿病、阿尔茨海默病和其他疾病。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]起初，双特异性抗体通过四源杂交瘤技术制备，但这对下游抗体生产和纯化构成了巨大的挑战。随着过去[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]年重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术的发展，出现了几种双特异性抗体形式，以适应所需的靶标[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]产品特征。为了解决重链错配问题，[/font][font=Calibri]Genentech[/font][font=宋体]首先提出了“[/font][font=Calibri]knob-into-hole[/font][font=宋体]”（[/font][font=Calibri]KiH[/font][font=宋体]）技术，该技术通过对[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]结构域进行改造，在每条重链中创建一个“[/font][font=Calibri]knob[/font][font=宋体]”或一个“[/font][font=Calibri]hole[/font][font=宋体]”，以诱导异源二聚化。同样地，研究人员也采用了[/font][font=Calibri]common light chain [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CrossMab[/font][font=宋体]等其他技术来解决轻链错配问题。表达双特异性抗体主要在哺乳动物细胞中进行。由于单克隆抗体和双特异性抗体之间的各种结构相似性，许多已建立的常规单抗纯化工艺也可适用于双特异性抗体。（参见另一篇文章：“双特异性抗体：抗体治疗中的新星”）[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白（又称[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]嵌合融合蛋白、[/font][font=Calibri]Fc-Ig[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]标签蛋白）是一种同源二聚体，由免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与具有生物学活性的蛋白分子组成。虽然单克隆抗体是治疗性生物制剂开发的重点，但[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白也是一类成功的生物制药产品，至少有[/font][font=Calibri]13[/font][font=宋体]种药物获得了欧洲药品管理局（[/font][font=Calibri]EMA[/font][font=宋体]）和美国[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的批准。除治疗应用外，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白还是基础研究中的检测试剂，包括流式细胞术、免疫组织化学和蛋白结合试验。事实上，与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的连接可以提高一些结合蛋白的溶解度和稳定性。鉴于其大小和对糖基化的需求（大多数是糖蛋白），[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白主要在哺乳动物表达系统中产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前，抗体工程技术取得了一定的进步，这极大地促进了各种形式重组抗体的开发，用于疾病治疗。[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]已批准了[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]多种抗体药物，目前有多种抗体处于临床后期开发阶段。此外，重组抗体还可用于许多研究应用：蛋白免疫印迹（[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]）、免疫组织化学（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）、流式细胞术（[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]）和表面等离子体共振（[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之，重组抗体是基因工程技术的重要应用之一，其类型多样，具有广泛的应用前景。随着基因工程技术的发展，重组抗体的生产成本和安全性问题也将得到进一步优化，为临床治疗和科学研究提供更多有效的工具。同时，我们也应该认识到重组抗体的潜在风险和挑战，加强对其安全性和有效性的评估和监管，以确保其能够更好地服务于人类的健康事业。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多重组抗体详情关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/news/recombinant-antibodies-formats[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

随着生命科学的发展，围绕蛋白进行的研究越来越多，抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。面临着纷呈复杂的抗体试剂市场，如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。一、关于特异性的选择：特异性的选择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。1、蛋白特异性：针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达，则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免疫原序列，查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点，不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在，不宜一概而论。2、种属特异性：同种蛋白不同物种，有着或大或小的差异。目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的，根据蛋白的同源性情况与其他种属发生交叉反应。需要参照说明书注明的可反应种属信息。一些稀有种属很难找到抗体，可以通过蛋白的序列比对，选择同源序列免疫的抗体，不过一般这种情况生产商不会受理其关于质量的申诉，如果可以申请到免费的抗体样品，则利于抗体选择。3、实验方法特异性：目前使用抗体的实验方法有很多，不同的使用方法过程中，因为对蛋白样品的处理方式不一样，蛋白的含量有差异，对抗体的识别表位和效价要求都是不一样的。具体的根据说明书注明的产品应用方法进行选择。但是生产商一般不会将每个抗体都进行各种实验的检测，目前检测比较多的只是WB、IHC、IF等，如果针对具体的实验方法没有找到合适的抗体的，可以结合蛋白序列分析和抗体的抗原信息，选择尽可能有效果的抗体。同样，申请到免费的抗体样品是个很好的途径。4、标记物的特异性一般基于实验操作的实验方法不会使用带有标记的一抗，比如WB、IHC等，都是通过二抗类的试剂标记达到结果呈现的目的。但是基于仪器分析的一些实验，可能就会使用到直接标记的一抗，比如流式实验。那么需要了解到自己将要使用的仪器能检测到的荧光范围，针对不通的参数要求选择对应的标记物。在免疫荧光双标实验中，需要选配不同的荧光标记物。

[font=宋体]在生物医药领域，抗体作为一类重要的生物分子，被广泛应用于疾病诊断、治疗以及基础研究中。其中，单克隆抗体和单链抗体是两种常见的抗体类型，尽管它们都是从杂交瘤或基因工程方法中获得，但在结构、功能和制备方法等方面存在显著差异。本文将对单克隆抗体和单链抗体的区别进行深入解析。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、结构差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-development][b]单克隆抗体[/b][/url]是由一个单一的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生，具有高度的均一性和特异性。其结构包括重链和轻链，通过二硫键连接在一起，形成一个完整的抗体分子。而单链抗体则是由一段柔性连接肽把抗体重链可变区（[/font][font=Calibri]V~H[/font][font=宋体]）和轻链可变区（[/font][font=Calibri]V~L[/font][font=宋体]）连接而成，是具有亲代抗体全部抗原结合位点的最小功能结构单位。单链抗体的结构相对简单，没有重链和轻链的连接，分子量也较小。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、功能差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]单克隆抗体具有高度的特异性，可以用于疾病的诊断和治疗。由于其结构均一，单克隆抗体的生产和质量控制相对容易，因此在临床应用中具有较高的可靠性。而单链抗体则具有特异的抗原结合活性，能够较好地保持亲本抗体的抗原亲和活性，同时分子量小、结构简单，更适于抗体结构与功能的分析。此外，单链抗体还具有较好的组织穿透能力和低免疫原性等优点，使其在药物研发以及导向治疗等方面具有广泛的应用前景。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]三、制备方法差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体的制备通常采用[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology][b]杂交瘤技术[/b][/url]，将能够产生特异性抗体的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，再通过筛选和克隆化培养获得能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。这种方法需要经过多次筛选和克隆化培养，制备过程相对复杂。而单链抗体的制备则多采用基因工程方法，通过设计和构建基因表达载体，在体外表达单链抗体基因，然后进行分离和纯化得到单链抗体。这种方法相对简单快捷，但需要设计和构建基因表达载体，对技术要求较高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述，单克隆抗体和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体[/b][/url]在结构、功能和制备方法等方面存在显著差异。在实际应用中，应根据具体需求选择合适的抗体类型。单克隆抗体具有高度的特异性和可靠性，适用于疾病的诊断和治疗；而单链抗体则具有特异的抗原结合活性、分子量小、结构简单等特点，适用于抗体结构与功能的分析、药物研发以及导向治疗等领域。随着生物技术的不断发展，相信单克隆抗体和单链抗体的应用前景将更加广阔。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体制备服务[/b][/url]和[url=https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service][b]抗体片段生产服务[/b][/url]，同时拥有一整套的抗体开发解决方案，包括免疫原制备、动物免疫、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体库构建和筛选等步骤。此外，我们在[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体表达纯化方面具有丰富的经验，已成功为客户表达[/font][font=Calibri]di-scFvs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]tri-scFvs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Diabody[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv-(H)IgG[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]scFv-(L)IgG[/font][font=宋体]等多种[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]形式。详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[font=宋体]在生物学和医学领域，抗原与抗体之间的结合反应是极为重要且复杂的过程。这种反应不仅关乎免疫系统的正常运作，而且在诊断、治疗等多个领域具有广泛的应用。本文将详细探讨抗原抗体结合反应的原理及其背后的生物学意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、抗原与抗体的基本概念[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原，通常是指能够刺激机体产生特异性免疫应答的物质。它们可能是外来的微生物、毒素，也可能是机体自身的异常成分。抗体，则是免疫系统在受到抗原刺激后产生的特异性免疫球蛋白，能够与抗原发生特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、抗原抗体结合的结构基础[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体之间的结合，依赖于它们分子间的结构互补性和亲和性。这种互补性主要源于抗原的表位和抗体的结合部位之间的匹配。抗原的表位，即其表面能够与抗体结合的区域，通常是特定的化学基团或空间构象。而抗体的结合部位，即其能够与抗原结合的区域，由重链和轻链上的可变区组成，形成了特定的空间结构，能够与抗原表位进行精确的结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、抗原抗体结合的动力学过程[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应通常可以分为两个阶段。第一阶段是抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应速度极快，仅需几秒钟即可完成。这是因为抗原抗体之间的结合是高度特异性的，一旦找到合适的配对，它们会迅速结合形成抗原抗体复合物。第二阶段是可见反应阶段，此时抗原抗体复合物在环境因素的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应。这一阶段的反应速度较慢，往往需要数分钟至数小时。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、抗原抗体结合反应的意义[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应在生物学和医学领域具有广泛的应用。在免疫学中，它是机体免疫系统识别和清除外来抗原的基础。在医学诊断中，利用抗原抗体反应可以进行疾病的快速、准确诊断。例如，利用单克隆抗体技术可以检测乙型肝炎等病毒。此外，抗原抗体反应还被广泛应用于治疗领域，如利用载药单克隆抗体进行肿瘤的靶向治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]五、总结[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应是生物学和医学领域的重要反应之一，其原理涉及到分子间的结构互补性和亲和性、反应动力学等多个方面。对这一反应的研究不仅有助于我们深入理解免疫系统的运作机制，也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法和手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

[font=宋体]抗体，作为一类特殊的蛋白质，在免疫系统中发挥着至关重要的作用，它们能够特异性地识别并中和外来病原体，如细菌和病毒。而蛋白质，作为生命活动的基础分子，具有多种多样的功能，从酶催化到结构支撑，无所不包。抗体与蛋白的区别在于，抗体是一类具有特定功能的蛋白质，而蛋白质则是更广泛的一类生物分子。本文将深入探讨抗体与蛋白的具体区别，并详细解析抗体蛋白的结构与功能，为读者提供一个全面而深入的理解。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体与蛋白的区别？[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]定义：[/font][font=宋体][font=宋体]抗体（[/font][font=Calibri]antibody[/font][font=宋体]）是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它（免疫球蛋白不仅仅只是抗体）是一种由浆细胞（效应[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体（天然抗体），如血型[/font][font=Calibri]ABO[/font][font=宋体]型中的抗[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]和抗[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]的抗体，和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体，异嗜性抗体，同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]和不完全抗体[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]等。抗体在医疗实践中应用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等，国际上用抗[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]免疫球蛋白预防因[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎，抗核抗体（[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]）、抗[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]抗体用于系统性红斑狼疮，抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等；治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical][b]抗体相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白：[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白质是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的[/font][font=Calibri]16%~20%[/font][font=宋体]，即一个[/font][font=Calibri]60kg[/font][font=宋体]重的成年人其体内约有蛋白质[/font][font=Calibri]9.6~12kg[/font][font=宋体]。人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]多种氨基酸（[/font][font=Calibri]Amino acid[/font][font=宋体]）按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。点击查看：[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]区别与联系：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]蛋白质还是有一定的区别以及关联性的，虽然说抗体是蛋白质，但是蛋白质不一定是抗体。[/font] [font=宋体]主要是因为抗体是通过人体内的浆细胞所产生的，而且还可以喝相应的抗原特异性相互结合，这样在一定程度上就能发挥出蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体[/font][font=宋体]蛋白[/font][font=宋体]结构[/font][font=宋体]解析[/font][font=宋体]：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]抗体是一种免疫球蛋白，由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞产生。抗体的单体是一个[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形的分子，有[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]条多肽链组成。其中包括两条相同的重链，以及两条相同的轻链，之间由双硫键连接在一起。每条重链[/font][font=Calibri]50kDa[/font][font=宋体]，每条轻链[/font][font=Calibri]25kDa[/font][font=宋体]，轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]轻链[/font][font=宋体][font=宋体]轻链包括可变区和恒定区，可变区约占轻链的[/font][font=Calibri]1/2[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重链[/font][font=宋体][font=宋体]重链包括可变区和恒定区。根据重链的不同，可以将抗体分为不同的种类，例如哺乳动物[/font] [font=Calibri]Ig [/font][font=宋体]的重链有α、δ、ε、γ和 μ 五种[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]相对应可以将哺乳动物[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]分为 [/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]五类。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]可变区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端存在一段氨基酸序列变化较大的区域，该区域称为可变区。可变区中存在可以与抗原特结合的部位，即抗原结合位点。一个抗体有两个抗原结合位点，可以同时结合两个抗原分子。在可变区中有三个区域的序列高度变化，成为高变区（[/font][font=Calibri]hypervariable region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]HVR[/font][font=宋体]）又称为抗原互补决定区（[/font][font=Calibri]complementarity determining region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）。可变区主要通过其[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]CHR[/font][font=宋体]区形成[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个环状结构与抗原特异性结合。可变区中非[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]部分成为骨架区（[/font][font=Calibri]framework region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]），其氨基酸组成和排列变化相对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]较少。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]恒定区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端氨基酸序列相对稳定，该区域称为恒定区。同一种抗体的恒定区是相同的。抗体轻链的恒定区由一个[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域构成；重链的恒定区由[/font][font=Calibri]3-4[/font][font=宋体]个串联的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域及一个用于增加灵活性的铰链区构成。[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]有三个结构域（[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]），[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]有四个结构域（[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH4[/font][font=宋体]）。不同种类抗体的铰链区存在一定的差异，[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]的铰链区较短，[/font][font=Calibri]IgD [/font][font=宋体]的铰链区较长，[/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgE [/font][font=宋体]无铰链区。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]分子在木瓜蛋白酶的作用下可以被降解为两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段及一个[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段由抗体轻链的可变区、轻链的恒定区、重链的可变区及重链恒定区构成。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段包含了所有抗体分子共有的蛋白质序列以及各个类别独有的决定簇。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段有多种生物学活性，具有结合补体、结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体、通过胎盘等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]详情：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[font=宋体][font=宋体]抗体已成为治疗和诊断人类疾病的有效工具。非人源抗体会诱导人类免疫反应，使用非人源抗体产生的中和反应会限制此类抗体在治疗人类疾病的应用。为了克服这个问题，抗体人源化技术应运而生。抗体人源化经历了从嵌合抗体到[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植、[/font][font=Calibri]SDR[/font][font=宋体]移植等技术演变，力求在保持高亲和力、高特异性结合能力的同时克服传统鼠源抗体的免疫原性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]现阶段，常用抗体人源化方法包括以下几种：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①基于框架区同源性的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植与回复突变[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]非人源化抗体人源化的常用方法是互补决定区（[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）移植，即非人源抗体的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区移植到人源抗体框架区上。通常，会选择与非人源抗体框架区同源性最高的人源抗体框架区作为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的受体。这种方法最主要问题是与特定靶标结合的亲和力会降低乃至丧失。将小鼠抗体的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]环直接移植到人源抗体框架上在某些情况下不会影响抗体亲和力，然而在多数情况下，它会显著降低亲和力。鼠源抗体框架区的一些残基已被证明会影响[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]环的构象以及抗体的亲和力，我们称其为游标区残基。这些残基位于靠近[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区的β折叠。因此，在选择所需的人源抗体框架区后，需要对这些残基进行回复突变，使其保留在人源化抗体中。除此之外，可变区外氨基酸残基的突变也已被用于赋予人源化抗体新的特性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②基于胚系基因的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]人类胚系基因可作为鼠源抗体人源化框架区的替代来源。与来源于[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]的框架区相比，胚系基因具有较少的克隆内体细胞超突变。因此，人们认为利用胚系框架的人源化抗体比[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]框架的人源化抗体表现出更低的免疫原性。尽管胚系基因的免疫原性可能较低，但事实上[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]的衍生框架有时更有利。复数研究反映，人源化抗体[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的变化会影响抗体活性与亲和力。如有研究证实，将鼠抗可变区融合到[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]恒定区构建的嵌合抗体对黄热病感染的预防和治疗有效，而具有[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]恒定区的嵌合抗体则不然。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③抗体表面重塑[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体表面重塑是非人源抗体人源化的另一种策略。表面重塑是指对非人源抗体的表面氨基酸残基进行抗体人源化改造。该策略的原则是确定鼠源抗体表面残基的位置，在维持抗体活性并兼顾减少抗体免疫原性的基础上，选用与人源抗体表面残基相似的氨基酸进行替换。通过这种方法人源化的抗体通常表现出稳定性和亲和力的变化很小。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④基于[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]同源性的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]以往的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植通常会选择与非人源抗体框架区同源性最高的人源抗体框架区作为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的受体。[/font][font=Calibri]Hwang[/font][font=宋体]及其同事首次设计了一种基于[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]区域同源性的抗体人源化新方法。该方法不使用框架区的同源性来选择人源化抗体框架，关键的鼠源残基也不进行回复突变。使用这种方法可以减少被识别为外源物质的可能性。比起基于框架区同源性的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植，通过该方法改造的抗体亲和力维持更好。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]SDR[/font][font=宋体]移植[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植获得的人源化抗体仍可能在患者中引发免疫性抗独特型（[/font][font=Calibri]anti-Id[/font][font=宋体]）反应。为了最大限度地减少抗[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区免疫反应，可以通过仅将[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]序列中抗原结合活性所必需的特异性决定残基（[/font][font=Calibri]SDR[/font][font=宋体]）移植到人源抗体框架区上来实现抗体人源化。[/font][font=Calibri]SDR[/font][font=宋体]移植的方法更进一步地提升了抗体人源化程度，并尽可能地减少了鼠源[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]中效应[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞表位的数量，从而将抗体可变区潜在的免疫原性风险做到最小化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥其他抗体人源化方法[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]定向筛选或链替换抗体库技术，是利用噬菌体展示的方法，将鼠源抗体重轻链[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区结构域分别顺序或平行地替换为人源化的。该方法为人源化提供了一个强大的工具，可以最大限度地减少人体的免疫原性。值得注意的是，通过噬菌体展示技术产生人源化抗体，即使是全人源抗体，也无法消除全部的免疫原性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对羊驼纳米抗体、鼠源单抗进行人源化改造，保证人源化程度 [/font][font=Calibri]95%[/font][font=宋体]，为客户提供优质的单克隆[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]。更多抗体人源化改造详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]单克隆抗体是由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤[/font][font=Calibri](hybridoma)[/font][font=宋体]抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞杂交瘤。[b]下面为大家讲解[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production]制备单克隆抗体[/url]药物的工艺流程步骤[/b]：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、抗原提纯与动物免疫[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原，可取[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]107[/font][font=宋体]个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化，如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用以动物免疫。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择与所用骨髓瘤细胞同源的[/font][font=Calibri]BALB/c[/font][font=宋体]健康小鼠，鼠龄在[/font][font=Calibri]8[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]12[/font][font=宋体]周，雌雄不限。为避免小鼠反应而不佳或免疫过程中死亡，可同时免疫[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]只小鼠。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫过程和方法与多克隆抗血清制备基本相同，因动物、抗原形式、免疫途径不同而异，以获得高效价抗体为最终目的。免疫间隔一般[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]周。一般被免疫动物的血清抗体效价越高，融合后细胞产生高效价特异抗体的可能性越大，而且单克隆抗体的质量（如抗体的浓度和亲和力）也与免疫过程中小鼠血清抗体的效价和亲和力密切相关。末次免疫后[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]天，分离脾细胞融合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择瘤细胞株的最重要的一点是与待融合的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞同源。如待融合的是脾细胞，各种骨髓瘤细胞株均可应用，但应用最多的是[/font][font=Calibri]Sp2/0[/font][font=宋体]细胞株。该细胞株生长及融合效率均佳，此外，该细胞株本身不分泌任何免疫球蛋白重链或轻链。细胞的最高生长刻度为[/font][font=Calibri]9[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/ml[/font][font=宋体]，倍增时间通常为[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]15h[/font][font=宋体]。融合细胞应选择处于对数生长期、细胞形态和活性佳的细胞（活性应大于[/font][font=Calibri]95[/font][font=宋体]％）。骨髓瘤细胞株在融合前应先用含[/font][font=Calibri]8-[/font][font=宋体]氮鸟嘌呤的培养基作适应培养，在细胞融合的前一天用新鲜培养基调细胞浓度为[/font][font=Calibri]2 [/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/ml[/font][font=宋体]，次日一般即为对数生长期细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在体外培养条件下，细胞的生长依赖适当的细胞密度，因而，在培养融合细胞或细胞克隆化培养时，还需加入其他饲养细胞（[/font][font=Calibri]feeder cell[/font][font=宋体]）。常用的饲养细胞为小鼠的腹腔细胞，制备方法为用冷冻果糖液注入小鼠腹腔，轻揉腹部数次，吸出后的液体中即含小鼠腹腔细胞，其中在巨噬细胞和其他细胞。亦有用小鼠的脾细胞、大鼠或豚鼠的腹腔细胞作为饲养细胞的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在制备饲养细胞时，切忌针头刺破动物的消化器官，否则所获细胞会有严重污染。饲养细胞调至[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/ml[/font][font=宋体]，提前一天或当天置板孔中培养。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、细胞融合[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞融合是杂交瘤技术的中心环节，基本步骤是将两种细胞混合后加入[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]使细胞彼此融合。其后吧培养液稀释[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]，消除[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]的作用。将融合后的细胞适当稀释，分置培养板孔中培养。融合过程中有几个问题应特别注意。①细胞比例：骨髓瘤细胞与脾细胞的比值可从[/font][font=Calibri]1:2[/font][font=宋体]到[/font][font=Calibri]1:10[/font][font=宋体]不等，常用[/font][font=Calibri]1:4[/font][font=宋体]的比例。应保证两种细胞在融合前都具有较高活性。②反应时间：在两种细胞的混合细胞悬液中，第[/font][font=Calibri]1min[/font][font=宋体]滴加[/font][font=Calibri]4.5ml[/font][font=宋体]培养液；间隔[/font][font=Calibri]2min[/font][font=宋体]滴加[/font][font=Calibri]5ml[/font][font=宋体]培养液，尔后加培养液[/font][font=Calibri]50ml[/font][font=宋体]。③培养液的成分：对融合细胞，良好的培养液尤其重要，其中的小牛血清、各种离子和营养成分均需严格配制。如融合效率降低，应随时核查培养基情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、有限稀释法[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]筛选阳性株一般选用的骨髓瘤细胞为[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]敏感细胞株，所以只有融合的细胞才能待续存活一周以上。融合细胞呈克隆生长，经有限稀释后（一般稀释至[/font][font=Calibri]0.8[/font][font=宋体]个细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]孔），按[/font][font=Calibri]Poisson[/font][font=宋体]法计算，应有[/font][font=Calibri]36[/font][font=宋体]％的孔为[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]个细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]孔。细胞培养至覆盖[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]％～[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]％孔底时，吸取培养上清用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测抗体含量。首先依抗体的分泌情况筛选出高抗体分泌孔，将孔中细胞再行克隆化，尔后进行抗原特异的[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测定，选高分泌特异性细胞株扩大培养或冻存。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、单克隆抗体的制备和冻存[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]筛选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备，因为融合细胞随培养时间延长，发生污染、染包体丢失和细胞死亡的机率增加。抗体制备有两种方法。一是增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。选用[/font][font=Calibri]BALB/c[/font][font=宋体]小鼠或其亲代小鼠，先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射，一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去。通常在接种一周后即有明显的腹水产生，每只小鼠可收集[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]10ml[/font][font=宋体]的腹水，有时甚至超过[/font][font=Calibri]40ml[/font][font=宋体]。该法制备的腹水抗体含量高，每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平。此外，腹水中的杂蛋白也较少，便于抗体的纯化。接种细胞的数量应适当，一般为[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/[/font][font=宋体]鼠，可根据腹水生长情况适当增减。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选出的阳性细胞株应及早冻存。冻存的温度越低越好，冻存于液氮的细胞株活性仅有轻微的降低，而冻存在－[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]℃冰箱则活性改变较快。细胞不同于菌种，冻存过程中需格外小心。二甲亚砜（[/font][font=Calibri]DMSO[/font][font=宋体]）是普遍应用的冻存保护剂。冻存细胞复苏后的活性多在[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]％～[/font][font=Calibri]95[/font][font=宋体]％之间。如果低于[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]％，则说明冻存复苏过程有问题[/font][font=Calibri].[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、单克隆抗体的纯化[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体的纯化方法同多克隆抗体的纯化，腹水特异性抗体的浓度较抗血清中的多克隆抗体高，纯化效果好。按所要求的纯度不同采用相应的纯化方法。一般采用盐析、凝胶过滤和离子交换层析等步骤达到纯化目的，也有采用较简单的酸沉淀方法。目前最有效的单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法，多用葡萄球菌[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]蛋白或抗小鼠球蛋白抗体与载体（最常用[/font][font=Calibri]Sepharose[/font][font=宋体]）交联，制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱，回收率可达[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]％以上。蛋白可与[/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG2a[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG2b[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体]结合，同时还结合少量的[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]。洗脱液中的抗体浓度可用紫外光吸收法粗测，小鼠[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]单克隆抗体溶液在[/font][font=Calibri]A280nm[/font][font=宋体]时，[/font][font=Calibri]1.44[/font][font=宋体]（吸光单位）相当于[/font][font=Calibri]1mg/ml[/font][font=宋体]。经低[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]洗脱后在收集管内预置中和液或速加中和液对保持纯化抗体的活性至关重要。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-purification][b]单克隆抗体纯化[/b][/url][/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-purification[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font]

影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面，一是反应物自身的因素；二是反应环境条件。　　　　（一）反应物自身的因素　　　　1.抗体：不同来源的抗体，反应性各有差异，抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应，为提高试验的可靠性，应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成，单克隆抗体不适用于沉淀反应。　　　　2.抗原：抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应，可溶性抗原出现沉淀反应，单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。　　　　（二）反应环境条件　　　　1.电解质：抗原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。　　　　2.酸碱度：抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6～9进行，有补体参与的反应pH为7.2～7.4，pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。　　　　3.温度：在一定范围内，温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。一般为15℃～40℃，常用的抗原抗体反应温度为37℃，温度如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏。此外，适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。

实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体，也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1) 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。

[font=宋体]抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体，是免疫电镜样品制备的一种方法，用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的定位分析，在某些情况下，也可以对混杂有大量其他分子的样本中的抗原进行定量检测。由于抗体与其相应抗原具有很高的亲和力，因此带有易识别标记物的抗体可以定位分析抗原，并且是一种理想的快速价廉的定量测定方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]荧光素标记[/b][/font][font=宋体]荧光色素是最常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光，从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]酶标记[/b][/font][font=宋体]酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成，其应用范围非常广泛，结果即时可见、敏感性高，但较难应用于定量分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]生物素标记[/b][/font][font=宋体]生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性，将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州开发了丰富的[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url]产品，拥有[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]定点标记和化学标记两种类型的生物素标记蛋白，覆盖细胞治疗、抗体药、疫苗等热门靶点。产品具有高批间一致性、高活性等优势，适用于[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biopanning[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR / BLI[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发，义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url]，可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体][font=宋体]传统意义上，抗核抗体（[/font][font=Calibri]antinuclear antibodies[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]）是所有抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称，包括一大类抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]然而，随着[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]检测技术的改进、尤其是培养细胞抗原基质（如[/font][font=Calibri]HEp-2[/font][font=宋体]细胞，即人喉癌上皮样细胞系）的广泛运用，[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]针对的靶抗原成分已由细胞核扩展到整个细胞成分，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架及细胞分裂周期蛋白等。目前对[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]的定义为：以真核细胞的各种成分为靶抗原的自身抗体的总称。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]的检测方法，目前国际及国内指南或共识推荐的均是间接免疫荧光法（[/font][font=Calibri]indirect immunofluorescence[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]），而且是以[/font][font=Calibri]HEp-2[/font][font=宋体]细胞为实验基质的[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]。此外还有[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、线性免疫印迹法、化学发光免疫分析法等，各有优缺点。瑞金医院检验科实验室、皮肤科实验室均采用[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]法检测[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]IIF-ANA[/font][font=宋体]规范的结果报告内容应包括：检测方法、定性结果（阳性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]阴性）、荧光模型、滴度、临床建议。[/font][font=Calibri]IIF-ANA[/font][font=宋体]荧光模型分[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]类：细胞核荧光模型（[/font][font=Calibri]14[/font][font=宋体]种）、细胞浆荧光模型（[/font][font=Calibri]9[/font][font=宋体]种）、细胞有丝分裂荧光模型（[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]种）；国内共识建议必报的荧光模型有[/font][font=Calibri]13[/font][font=宋体]种，细胞核类的有均质型、斑点型（需区分致密斑点型）、着丝点型、核点型、核仁型、核膜型，细胞浆类的有胞浆纤维型、胞浆颗粒型、胞浆网状[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]线粒体型、胞浆极型[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]高尔基体型、胞浆棒状环状型、胞浆线性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]肌动蛋白型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]抗核抗体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性通常指的是抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性，它可能意味着身体存在结缔组织疾病，尤其是系统性红斑狼疮（[/font][font=Calibri]SLE[/font][font=宋体]）。[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]包括类风湿关节炎、干燥综合征的患者等，阳性率并不是很高，特异性也不是很好。系统性红斑狼疮是一种自身免疫性疾病，可能会对皮肤黏膜、肝功能、中枢神经系统等造成损伤。抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体对系统性红斑狼疮具有高度特异性，尤其是在伴有典型神经系统症状的中枢神经系统损害型红斑狼疮中，出现抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性的几率比较高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]所以出现抗体阳性后，一定要到医院请专科大夫来进行诊断，并来进行合理的解释，再进行其他实验室检查，包括血沉、[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]反应蛋白 、血尿常规、肝肾功能、类风湿因子，以及相关其他，如[/font][font=Calibri]SM[/font][font=宋体]抗体、核小体抗体、[/font][font=Calibri]SSA[/font][font=宋体]抗体、[/font][font=Calibri]SSB[/font][font=宋体]抗体等自身抗体检查。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url]，可向全球客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]细胞抗体制备服务[/b][/url]，整个过程涉及单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分离、测序、克隆和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体筛选等步骤。更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]