水解酶

苯并吡喃酮作为一个非常重要的结构内核单元，广泛地存在于很多天然产物中，并且是一些具有生物活性的化合物的特定前导化合物。此外该类化合物也因其具有一些光致变色效应和热致变色性质而受到广泛关注。 生物催化作为一种绿色高效的现代有机合成技术，在医药、能源、材料等领域显示出巨大的潜力。酶作为一种高效，环境友好的催化剂，已经成为传统有机金属和小分子催化剂的有效补充，尤其是酶的非专一性在有机合成方面的应用备受研究者的青睐。近些年，已有一系列关于水解酶催化非专一性的C-C键以及C-杂原子键的形成反应的报道，但是对于单酶催化的多步串联反应的报道较少。基于此，我们设计和发展基于水解酶催化非专一性的domino反应，发现枯草杆菌α-淀粉酶可以有效地催化水杨醛和丁烯酮发生oxa-Michael/aldol缩合反应合成2H-苯并吡喃酮类化合物。2H-苯并吡喃酮的生物合成在25 mL烧瓶中加入水杨醛(2 mmol)，不饱和醛或酮(10 mmol)，50 mg 枯草杆菌α-淀粉酶(BSA)，再加入500μL去离子水和4.5 mL DMSO，将其置于50℃恒温摇床中震荡反应(200 rpm)。TLC跟踪检测反应(紫外灯下观测)，反应完全后，加入20 mL蒸馏水停止反应，然后用乙酸乙酯萃取(3×10 mL)，有机相用无水硫酸钠干燥后，经减压蒸馏除去溶剂，经柱层析分离得目标产物(硅胶：300-400目，流动相：石油醚[font='Times

科技名词定义中文名称：蛋白酶英文名称：protease;proteinase其他名称：蛋白水解酶(proteolytic enzyme)定义：催化蛋白质中肽键水解的酶。根据酶的活性中心起催化作用的基团属性，可分为：丝氨酸/苏氨酸蛋白酶(编号：EC 3.4.21.-/EC 3.4.25.-)、巯基蛋白酶(编号：EC 3.4.22.-).、金属蛋白酶(编号：EC 3.4.24.-)和天冬氨酸蛋白酶(编号：EC 3.4.23.-)等。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；酶（二级学科）

中文名称：蛋白酶英文名称：protease;proteinase其他名称：蛋白水解酶(proteolytic enzyme)定义：催化蛋白质中肽键水解的酶。根据酶的活性中心起催化作用的基团属性，可分为：丝氨酸/苏氨酸蛋白酶(编号：EC 3.4.21.-/EC 3.4.25.-)、巯基蛋白酶(编号：EC 3.4.22.-).、金属蛋白酶(编号：EC 3.4.24.-)和天冬氨酸蛋白酶(编号：EC 3.4.23.-)等。蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。该产品主要由上海斯诺美生物医学技术服务中心提供。

常用酶的配制　　1．溶菌酶　　用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液，分装成小份并保存于-20℃。每一小份一经使用后便予丢弃。　　2．蛋白水解酶类　贮存液贮存温度反应浓度反应缓冲液温度预处理　0.01mol/L Tris(pH7.8)　链霉蛋白酶a20mg/ml-20℃（溶于水）1mg/ml0.01mol/L EDTA37℃自消化b　0.5% SDS　　0.01mol/L Tris(pH7.8)　蛋白酶Kc20mg/ml-20℃（溶于水）50μg/ml0.005mol/L EDTA37～56℃无须预处理　0.5% SDS　　　a：链霉蛋白酶是从链球菌（Streptomyces griseus）中分离到的一种丝氨酸

[size=3][font=宋体]土壤酶活性与土壤肥力的情况密切相关。许多研究资料表明，土壤微生物的数量与酶活性有很好的相关性。脲酶活性较高的羽扇豆。微生物是土壤酶的重要来源。脲酶的活性与土壤全氮、速效氮、速效磷及土壤交换性量有明显相关性，增加土壤湿度，过氧化氢酶活性与土壤[/font][font=Times New Roman]C/N[/font][font=宋体]比、全氮、速效氮、盐基饱和度及物理性沙粒有明显相关性，增加土壤湿度，过氧化氢酶活性液增强，土壤干燥时，活性下降。磷酸酶活性与土壤有效磷含量有关，增加可溶性磷，酶活性逐渐提高，以后便逐渐下降，当大量供给磷肥时（如达[/font][font=Times New Roman]60~80mg/100g[/font][font=宋体]土），则完全察觉不到磷酸盐水解酶的活性。一般认为，富含腐殖质的高肥力土壤，脲酶的活性也最高。总之，许多研究者认为，酶的功能是明显的，土壤酶活性与土壤肥力水平的一项重要指标。[/font][/size]

糖酶的新近发展摘要：简要介绍了糖酶中淀粉酶、乳糖酶、纤维素酶作用机理和应用前景；详细介绍了α-葡萄糖苷酶的理化性质、作用机理、研究现状以及展望了其应用前景。关键词：糖酶；α-葡萄糖苷酶；研究现状；应用前景酶制剂作为一类绿色食品添加剂，用于改善食品品质和食品制造工艺，其应用已越来越普遍，品种也不断增多。其中，糖酶（carbohydrases）是一种应用相当广泛的酶类。它通过裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成较小的分子；也能催化糖单位结构重排，形成新的糖类化合物，这类反应被称为转糖苷作用；此外，一些酯酶能作用于酯化的糖类，这类反应在改变果胶物质的功能性质上是很重要的。 本文大致介绍了糖酶中淀粉酶（amylase）、乳糖酶(lactase)、纤维素酶(cellulose)。主要介绍了α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)，一种新型的糖苷酶。1.淀粉酶淀粉是由葡萄糖通过α-1 ,4糖苷键和α-1,6糖苷键连接而成的高分子化合物，而糖酶广泛分布于自然界，能裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成为较小的分子，两者具体作用方式如下图所示。 淀粉工业中常用的糖酶有以下四类:（1）α-淀粉酶(液化酶，α-Amylase，α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶，EC3.2.1.1)，主要来自芽胞杆菌和曲霉，它是一种内切型淀粉酶，作用于淀粉是从淀粉分子的内部任意切开α-1,4-糖苷键，使淀粉分子迅速降解，失去粘性和碘的呈色反应，同时使降解物的还原力增强。(2)β-淀粉酶(β-Amylase，α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶，EC3.2.1.2)，在工业上应用的酶制剂主要来自植物(如大麦)和微生物(芽孢杆菌)。作为外切型淀粉酶，它作用于淀粉时从还原端以麦芽糖为单位切断α-1,4-糖苷键，但产物不是α型的麦芽糖，而是[font

食品中氨基酸的定性检验可以采用比色法，加入下面的试剂()。 A、肽键水解酶 B、蛋白水解酶 C、水合茚三酮 D、水合硫酸铜

[em63] 我在做酶水解植物韧皮纤维间果胶类物质的酶解产物的糖类成分分析，所用的酶为碱性果胶酶PＨ8.5,请问这酸度会不会对柱子产生影响,另外,因为水解产物成分比较多,比如有机物和残留酶蛋白的干扰等,我在处理样品时应该怎么做,我用大连依利特的胺基柱,示差检测器.谢!

最近在看国标方法，发现在奶粉检测方面，所有的前处理都使用了淀粉酶水解，问同事说不水解结果不对的，可是为什么不对没有人能说清楚！请问有人知道吗？谢谢！

【序号】：1【作者】：姜绍通 罗蕾蕾 潘牧 聂胜德 【题名】：菜籽粕分步酶解制备水解产物的研究【期刊】：《食品科学》【年、卷、期、起止页码】：2009年10期【全文链接】：http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-SPKX200910010.htm

[color=#444444]请问一下，在[/color][color=#444444]GB/T5009.9-2008[/color][color=#444444]中，第一法酶水解法中有两个公式，第二个公式是关于试样中淀粉含量的计算公式，我始终没弄懂，适中的[/color][color=#444444]A1[/color][color=#444444]和[/color][color=#444444]A2[/color][color=#444444]是怎么求出来的？标准上说，[/color][color=#444444]A1—[/color][color=#444444]测定用试样中葡萄糖的质量[/color][color=#444444] A2—[/color][color=#444444]空白中葡萄糖的质量。难道是通过第一个公式计算得出来的吗，如果是的话不就相当于进行了二次计算，也要进行二次修约了吗，结果会不会不准确啊[/color][color=#444444]......[/color][color=#444444]拜托各位大侠帮忙解释一下[/color][color=#444444].[/color][color=#444444]感激涕零[/color]

一、在护肤美容用品中的应用　　各种护肤美容用品是由油脂、水与表面活性剂组成的油包水或水包油的分散体系。有膏、霜、奶、乳、液等多种形式。对皮肤有着保湿、清洁、美容、润肤等多种作用，目前经常在化妆品中加入诸如维生素、氨基酸、激素、酶等营养剂，对皮肤进行滋润营养保健，有时也加入防晒剂，保护皮肤免受过量紫外线的侵害。在护肤美容用品中，使用的微胶囊主要有以下几种形式：1.酶微胶囊　　加在护肤化妆品中能对皮肤起着营养、保健作用的酶主要有以下几种：　　⑴木瓜蛋白酶：是一种从热带水果番木瓜中提炼出来的植物性肽链水解酶，它对皮肤有增加柔软、弹性和滋润作用。　　⑵胃蛋白酶：是存在于胃液中的肽链水解酶，对皮肤有美容保健作用。　　⑶凝乳酶：是从动物胃液中分离制得的一种蛋白酶。它可以改进人体肌肉的韧性，加强皮肤的柔软及光滑感，是一种很好的皮肤柔软剂。　　⑷溶菌酶：是从鸡蛋清中分离制取的。加在化妆品中有很好的清疮、抗炎、杀菌作用。也可以作化妆品的防腐剂。　　⑸超氧化物歧化酶(SOD)：这种酶一般是从动物血细胞中分离纯化而制得。具有很强的抗氧化能力，是活性氧自由基的有效清除剂。而活性氧自由基在体内引起多种有害的反应，将它及时清除有益于人体健康。超氧化物歧化酶具有抗辐射污染和消炎作用，且极易透过皮肤被吸收，它对酪氨酸酶诱发的黑色素有重要的抑制作用，因此，对老年斑和雀斑、面部黄褐斑等皮肤色素沉淀症有显著疗效。超氧化物歧化酶是目前化妆品行业中研究最多、应用最广的一种生物酶。　　⑹蛋白水解酶：它能使皮肤表面的细胞蛋白质分子肽键断裂水解，有利于除去皮肤表面老化的组织。如与解脂酶合用，其作用则更强烈、快速。蛋白水解酶有利于消除由于风吹、日晒、体力劳动或其它因素所造成的皮肤伤害。　　⑺谷光甘肽过氧化酶(GSH-Px)：它可在不同条件下防止脂质量过氧化物产生。硒元素是谷光甘肽过氧化酶中活性组分，含有这种酶的化妆品，在治疗脂质过氧化物引起的皮肤炎症及抗皮肤衰老方面有着重要作用。　　⑻鞘磷脂酶：它存在于配糖鞘磷脂中，是一种能平衡皮肤保湿性能的酶。如将其包敷在脂质体微胶囊中，则能渗透到皮肤的深层，有很好的滋润作用。　　⑼脂肪酶：它能促使脂肪水解。在化妆品中添加脂肪酶，有益于粉刺等含脂肪物质的消除。　　⑽胶原酶：是一种对防止皮肤疤痕生成有特殊作用的酶。　　另外，在化妆品中使用的酶，还有α-淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋白酶、尿素酶、尿酸酶、α-糜蛋白酶等。它们对皮肤的抗炎、清疮都有一定功效。　　由于酶这种生物催化剂的活性很易受到外界环境的影响，利用微胶囊技术把酶保护起来就可以保持其活性。应指出的是，近年来用脂质体做皮肤化妆品中各种酶的包覆材料的研究正在不断深入，实践证明做成脂质体微胶囊形式，更有利于酶在皮肤上的吸收利用，有利于更好发挥酶的护肤保健功能。

我想观察溶液中多糖的构象，有研究用AFM能够看到多糖的三螺旋结构，我现在想在多糖溶液中加入一种水解酶，观察水解过程中多糖三螺旋结构的变化情况。请熟悉或了解的朋友多指导，留下测定的联系方式，非常感谢。15901565760，ysq9926@163.com.

一、在护肤美容用品中的应用 　　各种护肤美容用品是由油脂、水与表面活性剂组成的油包水或水包油的分散体系。有膏、霜、奶、乳、液等多种形式。对皮肤有着保湿、清洁、美容、润肤等多种作用，目前经常在化妆品中加入诸如维生素、氨基酸、激素、酶等营养剂，对皮肤进行滋润营养保健，有时也加入防晒剂，保护皮肤免受过量紫外线的侵害。在护肤美容用品中，使用的微胶囊主要有以下几种形式：1.酶微胶囊 　　加在护肤化妆品中能对皮肤起着营养、保健作用的酶主要有以下几种： 　　⑴木瓜蛋白酶：是一种从热带水果番木瓜中提炼出来的植物性肽链水解酶，它对皮肤有增加柔软、弹性和滋润作用。 　　⑵胃蛋白酶：是存在于胃液中的肽链水解酶，对皮肤有美容保健作用。 　　⑶凝乳酶：是从动物胃液中分离制得的一种蛋白酶。它可以改进人体肌肉的韧性，加强皮肤的柔软及光滑感，是一种很好的皮肤柔软剂。 　　⑷溶菌酶：是从鸡蛋清中分离制取的。加在化妆品中有很好的清疮、抗炎、杀菌作用。也可以作化妆品的防腐剂。 　　⑸超氧化物歧化酶(SOD)：这种酶一般是从动物血细胞中分离纯化而制得。具有很强的抗氧化能力，是活性氧自由基的有效清除剂。而活性氧自由基在体内引起多种有害的反应，将它及时清除有益于人体健康。超氧化物歧化酶具有抗辐射污染和消炎作用，且极易透过皮肤被吸收，它对酪氨酸酶诱发的黑色素有重要的抑制作用，因此，对老年斑和雀斑、面部黄褐斑等皮肤色素沉淀症有显著疗效。超氧化物歧化酶是目前化妆品行业中研究最多、应用最广的一种生物酶。 　　⑹蛋白水解酶：它能使皮肤表面的细胞蛋白质分子肽键断裂水解，有利于除去皮肤表面老化的组织。如与解脂酶合用，其作用则更强烈、快速。蛋白水解酶有利于消除由于风吹、日晒、体力劳动或其它因素所造成的皮肤伤害。 　　⑺谷光甘肽过氧化酶(GSH-Px)：它可在不同条件下防止脂质量过氧化物产生。硒元素是谷光甘肽过氧化酶中活性组分，含有这种酶的化妆品，在治疗脂质过氧化物引起的皮肤炎症及抗皮肤衰老方面有着重要作用。 　　⑻鞘磷脂酶：它存在于配糖鞘磷脂中，是一种能平衡皮肤保湿性能的酶。如将其包敷在脂质体微胶囊中，则能渗透到皮肤的深层，有很好的滋润作用。 　　⑼脂肪酶：它能促使脂肪水解。在化妆品中添加脂肪酶，有益于粉刺等含脂肪物质的消除。 　　⑽胶原酶：是一种对防止皮肤疤痕生成有特殊作用的酶。 　　另外，在化妆品中使用的酶，还有α-淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋白酶、尿素酶、尿酸酶、α-糜蛋白酶等。它们对皮肤的抗炎、清疮都有一定功效。 　　由于酶这种生物催化剂的活性很易受到外界环境的影响，利用微胶囊技术把酶保护起来就可以保持其活性。应指出的是，近年来用脂质体做皮肤化妆品中各种酶的包覆材料的研究正在不断深入，实践证明做成脂质体微胶囊形式，更有利于酶在皮肤上的吸收利用，有利于更好发挥酶的护肤保健功能。2.药物微胶囊(略)3.功能性颜料微胶囊4.香料微胶囊

WS/T 88-1996 煤及土壤中总氟测定方法 燃烧水解-离子选择电极法1997-01-11发布，1997-09-01实施，现行有效。本标准适用于各类煤及土壤中总氟含量的测定，也适用于煤飞灰、底泥、岩石及其他具有类似成分样品中总氟含量的测定。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=144348]WS/T 88-1996 煤及土壤中总氟测定方法 燃烧水解-离子选择电极法[/url]

在生乳中的大部分嗜冷菌属于假单胞菌科，包括革兰氏阴性无芽孢的非发酵假单胞菌属。荧光假单胞菌是乳中最长分离的假单胞菌。草莓假单胞菌和恶臭假单胞菌重要性稍差。动物、种植物、水、土壤是乳中发现假单胞菌的主要来源。被污染的设备和空气提供了另外一个的污染来源。特别是在加工后，乳中只需要很少的菌量就能使冷藏设备中的乳在5天内腐败变质。这些微生物在乳中的生长繁殖导致的缺陷包括苦味和水果异味。虽然革兰氏阴性嗜冷菌对热没有抵抗力，但他们产生的热稳定的胞外蛋白水解酶和脂肪水解酶，能破坏热处理后的乳制品。其他的腐败革兰氏阴性杆菌包括不动杆菌、黄杆菌、嗜冷杆菌、产碱杆菌和腐败希瓦氏菌。1. 莫拉氏菌家族莫拉氏菌属于革兰氏阴性嗜冷菌，不能运动，无色素，为需氧球杆菌。他们有三类，不动杆菌属氧化酶阴性菌，莫拉氏菌属于氧化酶阳性菌，第三种为嗜冷杆菌。莫拉氏菌很少破坏乳，主要是因为它们缺乏充足的生化活性，不能发生蛋白水解和脂肪水解以产生异味。此外，它们在冷藏过程中会被假单胞菌的繁殖而超越。2. 产碱杆菌属产碱杆菌属于革兰氏阴性需氧短杆菌，不能代谢乳糖，可在水、土壤和乳中被发现。粪产碱菌可产生胞外多糖，是乳制品潜在的污染。产碱杆菌能够在冰箱温度下生长，产生不愉快的气味并降低乳制品的货架期。3. 腐败希瓦氏菌腐败希瓦氏菌属于革兰氏阴性杆菌，先前被认为是腐败假单胞菌属或腐败互生单胞菌。可在水、土壤和被污染的乳与乳制品中被发现，是导致污染奶油表面污斑的原因。4. 黄杆菌属黄杆菌是在水、土壤和乳中发现的革兰氏阴性微生物。它们可以水解酪蛋白并导致冷藏期中乳与乳制品的腐败变质。

各位老师， 您好，我们单位生产功能性饮料， 需要检测维生素B2，当然里面还有其他维生素B1，B3，B5，B6等。我们使用过的是GB5009.85，仪器是岛津的2030PLUS，荧光检测器。现在我们在检测过程中，发现检测值和实际添加值相差很大，比如实际添加1.0，检测值才0.2。不知道哪里出问题了样品前处理大致流程是：称样液5ml，加60ml0.1盐酸水解，121℃高压灭菌30Min。取出冷却后调PH至6.0-6.5，加2ml混合酶溶液，培养过夜，第二天拿出定容100ml，离心去上清液过滤上机。检测添加剂稀释后的含量值和标准相符。产品不水解酶解直接稀释检测，结果0.44疑惑：水解和酶解的主要作用是？

最近打算做氨基酸的水解实验，需要用到水解瓶，在网上找了一下没找着，不知有谁用过水解瓶，如果用过的话，能否给个链接或者联系方式？谢谢拉！

各位好，我想请教一下有谁知道头孢氨苄（头孢立新）加碱后在470nm处有吸收的特殊颜色反应的原理是什么，是头孢氨苄与碱发生了化学反应还是其他的因素导致在470nm处有吸收？碱的量对吸收度有影响吗？我是在《铜绿假单胞菌完整细胞α-氨基酸酯水解酶的性质》（寇秀芬、王祯祥）这篇文献上看到的，具体的原理我不清楚，还请大家赐教。谢谢！

[em09509] 小妹今年刚刚开始做实验 无奈老师出国求救无门 本人实验是用胃蛋白酶对乳铁蛋白进行水解得到抑菌肽 但是几次抑菌试验都没有成功 水解液无法抑制大肠杆菌的生长 故来跪求专家 是否可以指点一二 水解液到底如何才能浓缩 非常感谢

各位好，我想请教一下有谁知道头孢氨苄（头孢立新）加碱后在470nm处有吸收的特殊颜色反应的原理是什么，是头孢氨苄与碱发生了化学反应还是其他的因素导致在470nm处有吸收？碱的量对吸收度有影响吗？我是在《铜绿假单胞菌完整细胞α-氨基酸酯水解酶的性质》（寇秀芬、王祯祥）这篇文献上看到的，具体的原理我不清楚，还请大家赐教。谢谢！

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外，对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化，都需要事先将细胞和组织破碎，使生物大分子充分释放到溶液中，并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁，要采取专门的细胞破碎方法。1.机械破碎(1)研磨研磨是将剪碎的动物组织置于研钵或匀浆器中，加入少量石英砂研磨或匀浆，即可将动物细胞破碎，这种方法比较温和，适宜实验室使用。工业生产中可用电磨研磨。细菌和植物组织细胞的破碎也可用此法。(2)匀浆匀浆这是一种较剧烈的破碎细胞的方法，通常可先用家用食品加工机将组织打碎，然后再用10000r/min-20000r/min 的内刀式组织捣碎机(即高速分散器)将组织的细胞打碎，为了防止发热和升温过高，通常是转10秒-20秒，停10秒-20秒，可反复多次。(3)胶体磨胶体磨的基本原理是流体或半流体物料在离心力的作用下，强制通过高速相对运动的定齿与动齿之间，使物料受到强大的剪切力，磨擦力、高频振动和高速旋涡等复杂力等作用，有效地被粉碎、乳化、均质、混合，从而达到精细超微的效果。定转子间的高速相对运动是使胶体磨工作获得物理微细度的主要条件，只有提高磨盘的精密度与线速度，才能达到良好的加工效果。2. 物理破碎(1)压榨压榨是一种温和的、彻底破碎细胞的方法。在1000×105Pa-2000×105Pa 的高压下使几十毫升的细胞悬液通过一个小孔突然释放至常压，细胞将彻底破碎。这是一种较理想的破碎细胞的方法，但仪器费用较高。(2)冷热交替冷热交替是在90℃左右维持数分钟，立即放入冰浴中使之冷却，如此反复多次，绝大部分细胞可以被破碎，细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可用此技术。(3)反复冻融反复冻融是将待破碎的细胞冷至15℃-20℃，然后放于室温(或40℃)迅速融化，如此反复冻融多次，由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增高而引起细胞破碎。(4)超声波超声波是借助超声波的振动力破碎细胞壁和细胞器。破碎微生物细菌和酵母菌时，时间要长一些，处理的效果与样品浓度和使用频率有关。使用时注意降温，防止过热。3.化学与生物化学破碎(1)有机溶剂有机溶剂是利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶剂或SDS(十二烷基硫酸钠)等表面活性剂处理细胞，可将细胞膜溶解，从而使细胞破裂，此技术也可以与研磨法联合使用。(2)自溶自溶是将新鲜的生物材料存放于一定的pH 和适当的温度下，细胞结构在自身所具有的各种水解酶(如蛋白酶和酯酶等)的作用下发生溶解，使细胞内含物释放出来，此法称为自溶法。该法使用时要特别小心操作，因为水解酶不仅可以使细胞壁和膜破坏，同时也有可能会把某些要提取的有效成分分解。(3)溶胀溶胀是在低渗溶液和低浓度的稀盐溶液中，由于存在渗透压差，溶剂分子大量进入细胞，将细胞膜胀破释放出细胞内含物。(4)酶解酶解是利用各种水解酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶和酯酶等，于37℃，pH8，处理15分钟，可以专一性地将细胞壁分解，释放出细胞内含物，酶解破碎适用于多种微生物。例如从某些细菌细胞提取质粒DNA 时，可采用溶菌酶(来自蛋清)破细胞壁，而在破酵母细胞时，常采用蜗牛酶(来自蜗牛)，将酵母细胞悬于0.1mmol/L 柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液(pH=5.4)中，加1%蜗牛酶，在30℃处理30分钟，即可使大部分细胞壁破裂，如同时加入0.2%疏基乙醇效果会更好。此法可以与研磨联合使用

现想检测血粉蛋白经过蛋白酶水解产物，目标产物是10肽以下水解物，10肽的平均分子量红1200左右，设备只有液相+紫外检测器。需要知道产物里面，不周大小的肽所占的比例（如2肽的，4肽的。10肽）。因为不知道肽的结构，无法用反相色谱定量，不知道用凝胶色谱是否可以得到理想的数据，GPC在相差一个肽的分子量（120）时，是否可以完全分开，什么规格型号的色谱柱较好？

有个mRNA，觉得自己很孤单，就拉个核糖体过来翻译个蛋白给自己作伴，翻译好之后对蛋白说：“你好，我是你的模板。”蛋白说：“你好，我是 RNase（即RNA水解酶）。” 　　mRNA沉默了一下，说：“没关系,反正我本来也活不了多久.你就陪陪我吧。” 　　蛋白说：“好”。 　　于是两个人就手拉手默默地站在一起。 　　过了一会儿蛋白忽然说：“其实我现在还不是RNase。” 　　mRNA：“嗯。” 　　蛋白：“我现在只是多肽。” 　　mRNA笑了。 　　蛋白：“可是我很快就会变成真的RNase了。” 　　mRNA：“没有关系。我总是要死的。” 　　于是蛋白依旧和mRNA靠在一起，他慢慢地转圈，折叠，开始修饰自己。他越来越像真的RNase，而mRNA慢慢地开始降解。 　　蛋白说：“我走吧，离开了我你也许能活得久一些呢。”

目的蛋白质条带模糊电泳凝胶浓度选择不当。低于10Kd的小分子蛋白质要用Tricine胶。靠近前沿的电泳带分辨率不佳。根据分子量与凝胶孔径的关系，选择适当浓度的凝胶。蛋白质样品水解。注意除去蛋白质样品的内源性的水解酶，不要反复冻融。电泳时间过长或过短。溴酚蓝达到分离胶的底部即应该关闭电泳电源。缓冲溶液、SDS都要新鲜配制。避免加样过多，提高分辨率。小体积样品可给出窄带，加样体积根据样品浓度和凝胶厚度灵活掌握。一般上样体积为10-15uL（即2-10ug蛋白质）。加热变性后的蛋白质样品要放置到室温即电泳，不要久放，因为蛋白质的二硫键在高温下可能是会断开，但是暴露于空气中温度降低会重新形成二硫键，而且可能在过久放置过程中蛋白质可能会再折叠，更不要扔到冰箱里保存。

食品国标里有酸水解法，也没尝试过，适用于狗粮猫粮的脂肪测定嘛，有没有经验丰富的大佬啊，回收率可以的那种，感谢！！

[center]脑蛋白水解物注射液药品标准不完善[/center] 据国家药监局网站消息，为确保公众用药安全，国家药监局日前通知要求各地进一步加强对脑蛋白水解物注射液的监督检查。 通知称，在全国开展注射剂类药品生产工艺和处方核查工作中，发现脑蛋白水解物注射液品种在药品标准和执行工艺处方等方面存在着较为突出的问题，主要是企业选用猪脑原料的质量标准不完善；企业之间现行生产工艺差别较大；猪脑水解所用的蛋白酶种类、酶量及水解温度、时间等不一致，甚至有补加氨基酸的行为。针对上述突出问题，部分地区已采取了控制措施。 通知指出，一、要充分认识到脑蛋白水解物注射液在产品质量方面存在的安全风险，各地应在注射剂类药品生产工艺和处方核查工作的基础上，积极组织力量认真做好监督检查工作。要建议辖区内脑蛋白水解物注射液生产企业主动停止该品种的生产，并要求脑蛋白水解物注射液生产企业按相关技术要求，组织开展改进工艺和质量控制方法的研究工作，在相关工艺改进和质量标准未经批准前，暂不宜恢复生产。 二、对于生产企业认为其脑蛋白水解物注射液生产工艺合理、质量可控，继续进行生产的，所在地省级食品药品监督管理局应对其生产全过程予以跟踪检查，并对监督生产的产品进行现场抽样，由省级药品检验所检验。 凡生产企业存在未按批准变更生产处方工艺生产，或在制成品中补加氨基酸等违法违规行为，以及现场抽样检验不合格的，应依法予以严厉查处。 三、国家局将组织有关专家开展脑蛋白水解物注射液有效性、安全性评价工作，组织对脑蛋白水解物注射液生产工艺的改进、质量控制标准的提高工作，并在此基础上提出监管措施和改进意见。信息来源:中国新闻网