[img=,690,2132]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/01/201901091446105996_1884_3101087_3.png!w690x2132.jpg[/img][img=,690,2132]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/01/201901091446105996_1884_3101087_3.png!w690x2132.jpg[/img]这是用AB4000刚走的四环素类4项物质的MRM及各自提取离子图,进的是流动相配制的纯标200ng/mL,四环素和金霉素的储备母液是刚配制的(但并不是刚刚购买的)四环素和金霉素的峰前一直有奇怪的杂峰,强力霉素和四环素好像也没有完全分开[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif[/img],就土霉素的峰还能看,流动相A:5mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液;B:0.1%甲酸乙腈溶液。有老师能帮忙解释下四环素和金霉素峰形怪异的原因吗,对检测定量有什么影响吗?
用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]MS分析四环素类物质,已经在流动相中加了5mmol的草酸,土霉素物质峰型还比较好,四环素有点前沿峰,金霉素和强力霉素拖尾特别严重,前面有好几个小峰中间一直分不开的。有没有分析过相关物质的大神帮忙分析一下,这种情况要怎么解决呢?
本人是质谱新手。仪器 AB 5500。最近在优化四环素类质谱参数,在第一步找母离子的时候目标质量数的响应值只有3e5,而且还不是响应值最高的,有其他的质量数跟目标质量数的响应值一样。按照工程师的培训的要求母离子响应值应该在1-3e6。 最近一次调谐是在两个星期前。各位老师帮忙分析一下是哪的问题?浓度是100ng/ML,溶剂是1:1甲醇水 标注品是固体 盐酸金霉素、盐酸土霉素、盐酸强力霉素、盐酸四环素。
[B]动物源性食品中四环素、沙星类[/B] 残留量的快速测定方法1 范围本方法规定了动物源性食品中四环素类、沙星类高效液相色谱的快速测定方法。本方法适用于动物源性食品中四环素类、沙星类高效液相色谱的快速测定。2.1 原理试样中的残留物经四环素类、沙星类快速检测前处理试剂盒处理,样液经四环素类专用层析柱净化、浓缩用高效液相色谱检测,外标法定量。2.2 试剂和材料除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。2.2.1 乙腈:色谱纯。2.2.2 甲醇:色谱纯。2.2.3 三乙胺(分析纯)2.2.4 磷酸(85%)(分析纯)2.2.5 磷酸氢二钠:优级纯。2.2.6 乙二胺四乙酸二钠。2.2.7 柠檬酸:分析纯。2.2.8 磷酸氢二钠溶液:0.2mol/L。称取28.41g磷酸氢二钠,用水溶解,定容至1000mL。2.2.9 柠檬酸溶液:0.1mol/L。称取21.01g柠檬酸,用水溶解,定溶至1000mL。2.2.10 Mcllvaine缓冲溶液:将1000mL0.1mol/L柠檬酸溶液与625mL0.2mol/L磷酸氢二钠溶液混合。2.2.11 Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液:0.1mol/L。称取60.5g乙二胺四乙酸二钠放入1625mLMclllvaine缓冲溶液中,使其溶解,摇匀。2.2.12 标准品: 土霉素、四环素、金霉素、强力霉素、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、单诺沙星、恩诺沙星纯度大于98 %。2.2.13 标准贮备溶液:分别称取土霉素、四环素、金霉素、强力霉素、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、单诺沙星、恩诺沙星各10mg,用甲醇溶解并定溶于100 mL棕色容量瓶中,配制成100 µ g/mL的标准贮备液,置于-20℃保存,有效期三个月。2.2.14 混合标准工作溶液:用流动相稀释标准贮备溶液,配制成土霉素、四环素、金霉素、强力霉素、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、单诺沙星、恩诺沙星均为10 µ g/mL的混合标准溶液。0~4℃避光保存。2.2.15 四环素、沙星类快速检测前处理试剂盒*。2.3 仪器和设备2.3.1 高效液相色谱仪:配紫外-可见光波长检测器。2.3.2 匀浆机。2.3.3 固相萃取机2.3.4 离心机:4000 r/min。2.3.5 调速多用振荡器。2.3.6 聚四氟乙烯离心管: 2.5 mL,50 mL,具塞。2.4 样品制备准确称取已捣碎的样品5.00 g于50 mL离心管中,先加入四环素、沙星类快速检测前处理试剂盒中的提取剂 (液体20mL),用调速多用振荡器150 rpm振荡3 min,,4000 r/min离心5 min,收集上清液10mL加入四环素专用层析柱中(使用前依次用5mL甲醇、5mL提取剂、5mL水激活)挤干,用2mL提取剂洗涤,用0.80mL甲醇洗脱,收集洗脱液,用0.2mL流动相定容至1.0mL。供仪器测定。2.5 测定2.5.1 液相色谱条件a) 色谱柱: C18柱,250 mm×4 mm(i.d.),粒度5µ m b) 流动相: 0.05 mol/L磷酸/三乙胺缓冲液(pH2.4)+乙腈(80+20,V/V) c) 流速: 1.0mL/min d) 柱温: 室温 e) 检测波长: 四环素类紫外检测器350 nm。沙星类 紫外检测器310nm;荧光检测器激发波长280nm,发射波长450nm。f) 进样量:50 uL。3.5.2 标准工作曲线绘制移取各移取四环素类、沙星类混和标准液,用流动相稀释成20 ng/mL、50 ng/mL、250 ng/mL、500 ng/mL标准工作溶液。按液相色谱条件(3.5.1)进行测定,以色谱峰的峰面积为纵坐标,与其对应的浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线,标准工作曲线范围:20.0~500 ng/mL。 3.5.3 试样测定 用微量进样器准确吸取试样溶液(3.4),按液相色谱条件(3.5.1)进行测定,记录色谱峰的保留时间和峰面积。3.6 结果计算按式(1)分别计算供试样品中的四环素类、沙星类残留量。 2×ci×Vω= …… (1)mω-水产品中四环素、沙星类残留量,μg/kg;ci -标准曲线上查出试样溶液中四环素、沙星类标准工作溶液的浓度,(μg/L);V-最终定容体积数,mL;2-换算常数;m-供试试料样品重量,g。本方法分别计算四环素类、沙星类结果。3.7 检测限本方法土霉素、四环素检测限为20µ g/kg;金霉素、强力霉素的检测限为50µ g/kg,沙星类为:5µ g/kg3.8 回收率 本方法土霉素、四环素、金霉素、强力霉素回收率为:75%~85%;沙星类回收率为:75%~85%相关谱图附件可见联 系 人:王 伦 手 机:13810239506 EMAIL:wwj613@sina.com
[img=,690,532]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103061051370228_8391_3101087_3.png!w690x532.jpg[/img][img=,690,532]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103061051370179_2403_3101087_3.png!w690x532.jpg[/img][img=,690,532]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103061051373177_4714_3101087_3.png!w690x532.jpg[/img][img=,690,532]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103061051371489_6174_3101087_3.png!w690x532.jpg[/img][img=,690,532]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103061051374251_5561_3101087_3.png!w690x532.jpg[/img]我现在在做(2015版)化妆品安全技术规范中36种抗感染类药物检测,其余物质各方面都还不错,昨天[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]进了四环素类中四环素、金霉素、土霉素、多西环素、米诺环素100ng/mL标样,各图谱所示物质见图片右上,流动相A:0.2%甲酸水溶液;B:0.1%甲酸甲醇溶液,溶剂为流动相A:B=1:1,进样量5μL。其中米诺环素出了双峰且响应很差,线性很差;四环素出双峰,金霉素出三个峰,多西环素有拖尾和前沿现象。有没有做过四环素类的老师指导一下,若能上传一下您做的四环素类的图谱参考一下感激不尽。标液是安谱买的36种物质混标。
最近在做蜂王浆中四环素类的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url](GB/T 23409-2009),做的我那个累啊。刚开始按照前面的那个标准方法做,死活回收率上不去,其中土霉素、四环素甚至都不到1%,后来直接把标准品加在提取剂(1%三氯乙酸)里摇匀了直接上固相萃取小柱(安谱的HLB小柱),收集个洗脱部分直接进样,发现土霉素、四环素20%甲醇洗脱部分就能冲下来,难怪土霉素、四环素回收率上不去,都被我扔了。但是奇怪我把各洗脱部分粗略换算下加起来回收率也还是不行。后来我又换了个方法,土霉素、四环素倒是回收率上去了,金霉素、强力霉素还是不行。于是又换方法,这次用的进出口的那个方法(sn/t 2800-2011),就是只过了一个小柱,没过离子交换柱,回收率还是不行。请教各位老师,做蜂王浆中的四环素,怎么把回收率提上去呢,是我哪个细节没注意到吗
请教各位,有谁在做GB21317四环素类样品的,结果的判定GB31650中,土霉素金霉素四环素是合并小于200还是每个都小于200?
目前要做四环素类及代谢的检测,看了很多文献,发现四环素类比较难检测。用的色谱柱也五花八门,不知道选哪一个了,下面是我看文献找到的柱子类型,请大侠指点。Waters Symmetry column C18 (150 ×2.1 mm, 3.5 μm)Xbridge C18 column, 2.1 × 150 mm id,5.0 μm particle sizeLuna C18 (150 × 2.0 mm, 3 m)Agilent EclipseXDB-C18 (150 mm ×2.1mm, 3.5 μm)waters T3ZORBAXSB-C18(100 mm×2. 1 mm 3. 5 μm)
各位老师好,现在在实验室做检测四环素类的工作,之前没有人做过,液相条件一直摸索不出来,请问有没有老师做过,四环素土霉素金霉素强力霉素,4种分不开,0.01的草酸和乙腈做流动相[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112201052053455_7056_5031348_3.png[/img]
大家有用液相做过鸡蛋中四环素类 磺胺类的么 有什么经验或文献指导下哈
请问各位老师同行,蜂蜜中四环素类的限量是多少,用什么标准来判定?
四环素类兽药残留检测重点、难点解读摘要:本文从四环素类化合物的结构式讲述了其在pH<2时,以脱水四环素类的形式存在于溶液中,在2<pH<6时,以差向四环素类的形式存在于溶液中,在pH>9时,四环素类化合物会发生内酯化的现象,因此检测时要注意控制溶液的pH值;并以几个具体的标准方法标准(GB/T 21317-2007、GB 31658.6-2021、GB/T 18932.23-2003、GB/T 22961-2008、SC/T 3015-2002、GB/T 31656.11-2021)为例分别从适用范围、提取、净化、仪器设备、定量方式、检测限与定量限进行讲述;总结了检测四环素类化合物时须注意的事项。关键词:[font=calibri]四环素类;[/font]相关标准;提取溶剂;净化方法1四环素类药物结构解析[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709317213_9799_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709320700_4239_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709322018_9804_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709327335_7158_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709331085_5576_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709332521_7603_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709333957_9631_2166779_3.png[/img] [font=宋体][size=16px]以上从pH值的变化对四环素类化合物的存在形式影响,与金属离子的螯合方面进行了结构的解析。[/size][/font]1四环素类化合物检测相关标准解读[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709335314_8942_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709334069_4747_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709335035_1376_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709336012_5471_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709337037_331_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709338043_5929_2166779_3.png[/img]备注: 艾杰尔的pep小柱等效于沃特世的HLB小柱。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709339283_4003_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709342824_553_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709344299_6326_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709342701_7969_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709343971_2771_2166779_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210011709345221_3087_2166779_3.png[/img]1四环素类化合物检测注意事项提取:四环素类抗生素在酸性和碱性条件下均不稳定,其含有许多羟基、烯醇羟基及羰基,在中性条件下能与多种金属离子形成不溶性螯合物,由于生物基质中富含有钙元素、镁元素等,所以在检测四环素类药物时,通常会用含有EDTA的提取溶剂,用来克服因痕量金属离子存在而引起的重现性差的问题。因此提取剂要采用含有EDTA络合剂的柠檬酸-磷酸盐组成的缓冲液体系(pH=4.0)。样品前处理:四环素类化合物易降解,做实验前要合理安排实验的流程及准备好实验的材料,检测的时间要控制再2个小时内完成。净化:建议使用常规的HLB、C18柱,使用阴离子交换柱及阳离子交换柱要特别注意,不建议使用。四环素类化合物:母液浓度建议配成10ug/mL,避光,高浓度的母液在保存过程中会出现结晶析出的现象。堵柱子的问题:建议大家再前处理时多下功夫,低温高速离心,多离心几次。总结:本文从四环素类化合物的结构式讲述了其在pH<2时,以脱水四环素类的形式存在于溶液中,在2<pH<6时,以差向四环素类的形式存在于溶液中,在pH>9时,四环素类化合物会发生内酯化的现象,因此检测时要注意控制溶液的pH值;并以几个具体的标准方法标准为例分别从适用范围、提取、净化、仪器设备、定量方式、检测限与定量限进行讲述;总结了检测四环素类化合物时须注意的事项。
最近在做兽药残留的液质方法,四环素类的做了四环素,土霉素,金霉素和强力霉素,四环素经基质加标后处理上机,四环素有40%左右已转化为差向四环素,不知大家有没遇到此类情况?我在提取时有超声10分钟/次×3次,感觉是因为超声的关系。有过相关经验的请麻烦指教
最近在做四环素类药物,开始液相做的,磷酸盐缓冲液流动相不行,某一个国标的,后来换草酸,出峰和响应均能达到要求,不过实际样品处理的时候回收率不好,前处理是1%高氯酸提取,重复,过C18小柱,也是国标处理方法,纯标准品过柱回收率还可以。液质目前问题是响应不好,仪器是安的6410,只能到50ppb,流动相是0.3%甲酸水和0.3%甲酸甲醇。做的好的达人请指点,多谢
最近在用高液做四环素类;我参考文献用乙腈:甲醇:0.01mol/l的草酸水溶液=2:1:7 等度洗脱,金霉素和多西环素出峰响应值很低而且不成一个尖锐的峰型,拖尾。我加的标准品是4ug/ml的浓度。想参考一下你们使用的条件
按照21317的方法做土霉素和四环素,为什么土霉素的回收率能达到90左右,而四环素的回收率只有70左右?操作完全按照标准做的,如果哪一步有问题,应该土霉素的回收率也低才对吧?
四环素族配了贮备液,然后再稀释成中间混标1000ng/ml其中金霉素特别易降解 配置中甲醇做为容剂 。冷藏保存中间液。20几天就降解了。谁有好的办法,让四环素族降解的慢点。
近期用液相测四环素类抗生素,按照师门师姐的方法,同样的条件就是分不开峰。条件,紫外检测,波长265,流动相甲醇:甲酸,35:65。出来的峰全在一个时间,根本分不开,求液相大神指教[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909271606175146_1268_3442204_3.png[/img]
你们实验室用的四环素类标准品是固体的还是液体的呢
10,抽取5个版友);中奖名单:馨语(注册ID:huangdm)WUYUWUQIU(注册ID:wulin321)玲儿响叮当(注册ID:jshbhh)梧桐(注册ID:mengzhou)zengzhengce163(注册ID:zengzhengce163)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/05/201605161505_593531_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/05/201605161506_593532_1610895_3.png积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================动物组织中四环素类的测定方法:SPE基质:奶及奶制品应用编号:101080化合物:土霉素; 四环素;金霉素固定相:ProElut PLS色谱柱/前处理小柱:ProElut PLS 60mg / 3ml 50/pkg样品前处理:1 样品准备/提取(1)称取5 克样品于塑料离心管中,加入20 mL Mcllvaine缓冲液;(2)涡旋混合2min,然后超声 10min,4000 rpm下离心1 min,收集上清液;(3)将下层残留物分别再用20mL、10mL Mcllvaine缓冲液再提取两次,重复上述操作,将三次提取的上清液并入离心管中,4000rpm下,离心10min; (4)*将上清液用快速滤纸过滤,留下滤液,待净化。 注:该步骤仅供参考,使用者可根据实验室现有过滤设备进行调整。 2 SPE柱净化——ProElut PLS 60mg/3mL(Cat.#68003) (1)活 化:依次加入3mL甲醇,3mL水,流出液弃去。(2)上 样:将待净化的滤液加入柱中,流出液弃去。(3)淋 洗:依次用3mL水,3mL5%的甲醇水溶液淋洗,流出液弃去,然后将PLS柱抽干。 (4)洗 脱:3mL甲醇洗脱,流出液收集。(5)重新溶解:*将洗脱液在40℃减压浓缩至近干,然后用流动相重新定容至1mL。色谱条件:色谱柱: Spursil C18 150×4.6mm ID,5μm(Cat.#82001) 流 速: 1.0 mL/min 检测器: UV 365 nm 柱 温: 30 ℃ 进样量: 20 μL 流动相A: 0.01mol/L草酸水溶液 流动相B: 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 时间0min-10.0min 流动相B从30%到50%;10.0min~10.5min 流动相B从50%到30%;10.5min~20min流动相B为30%。文章出处:P096关键字:猪肉,四环素类,SPE,ProElut PLS,土霉素; 四环素;金霉素摘要:适用于禽、畜、水产品组织中四环素类药物的检测。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/05/201605161007_593475_1610895_3.jpg图例:1. 土霉素;2. 四环素;3. 金霉素
动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法,供各位版友参考!!!
1.概述四环素酶联免疫反应测试盒利用竞争性酶联免疫反应原理,对蜂蜜、黄油、鸡蛋、奶酪、牛奶、血清、尿液、鱼、虾和肉类等中四环素残留进行定量检测。该试剂盒有以下特点:Ø 高回收率(80-105%),快速(30分钟),低成本;Ø 高灵敏度(0.05ppb),低检测下限(蜂蜜2.5ppb);Ø 高重现性;Ø 检测过程只需要不到2小时。2.试剂盒原理四环素酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有四环素的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争一抗,抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗,形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。
在动物组织兽药残留检测过程中,本人认为四环素类药物相对比较难做,因为水溶性大(溶剂提取不能采用),相对不稳定,前处理要求高。目前国家标准、农业部、商检等部门采用磷酸、EDTA、三氯乙酸溶液或者Na2EDTA—Mc11vaine缓冲溶液提取,提取液过C18、或者HLB、或者HLB+Carboxylicacid阴离子交换柱等等。 本人很想跟大家探讨一下四环素类药物检测过程,大家是用那种固相萃取柱的。如果样品加标0.05~0.1mg/kg,回收率在70%以上的,请将经验跟大家共享一下。 如果谁有问题,请大家提出来,我也会帮助大家。
用液相色谱做四环素的标液时,出现了土霉素的峰。本人同时做土霉素、四环素、金霉素和强力霉素。单标进样只有四环素中有土霉素的峰,而且土霉素峰还比四环素的高,其他标物单标均十分干净,包括土霉素单标,也未见杂峰。不是进样针头污染问题,也不是进样瓶污染的问题。难道是标物的问题?我同时做了盐酸四环素和液体四环素标物两种,均有土霉素的峰。请问到底是怎么回事?请大家给个意见。
(求助)这两天做四环素一直不出结果,我想请教以下有好的检测方法没有,\急用谢谢
0.0M草酸和乙腈作为流动相,含20%乙酸的甲醇做溶剂,紫外检测器,做液相,分不开乙酸甲醇和四环素的峰。尝试过降低流速和调整草酸乙腈比例。结果都不行,请问有做过四环素液相检测的朋友,帮忙给些建议。谢谢!
问题: 请教各位老师,做四环素类,用什么做流动相比较好?回复: 就用乙腈和甲酸乙酸胺水就好了,四环素在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的灵敏度不高,梯度配大一点
想用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]测四环素,但是手头没有EDTA,无法按照国标做前处理。请问各位小伙伴有没有其他的前处理方法,现在实验室有盐酸,硫酸,偏磷酸,乙酸,还有HLB的小柱。
问题: 求[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]做四环素类的色谱条件,国标用三氟乙酸,质谱工程师不让进,自己用甲酸水,峰型总拖尾回复: 水和甲酸,,基质标,我们没有脱尾
您好,我昨天说的是四环素残留,但不是试剂盒,对不起.我说的是用液相做的步骤,希望有人可以告诉我,急用,谢谢我的邮件是:chaoshan2004@126.com