当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

他达那非

仪器信息网他达那非专题为您整合他达那非相关的最新文章,在他达那非专题,您不仅可以免费浏览他达那非的资讯, 同时您还可以浏览他达那非的相关资料、解决方案,参与社区他达那非话题讨论。

他达那非相关的论坛

  • 氨基他达那非残留

    各位好!如题,最近在做壮阳药类非添的项目时,发现其中一个物质,氨基他达那非,存在残留。想向各位请教以下是我的排查过程:1、质谱图离子对确认残留物。保留时间与标准品出峰时间一致。2、残留非仪器自带,只有进标准品后,第二针空白才会有。且连续进空白溶剂,残留含量逐渐下降。说明系统内无稳定的污染源。3、更换过色谱柱,重新进标品再进空白,残留依旧存在。应该可以说明非色谱柱原因4、将进样六通阀短路,用两通直接连接混合器管路及色谱柱,残留依然存在。说明非仪器部件导致残留5、更换流动相无效果。6、尝试第一针接色谱柱进标品,第二针用两通替代色谱柱,进空白,未发现残留峰。7、第一针接两通进标准品,第二针接色谱柱,未发现残留峰。以上是我的排查步骤,结果非常奇怪,非进样器,非色谱柱,非流动相原因。请问各位我是否还有其他遗漏?另外,希望大家分享做壮阳药类的色谱方法,或者相关的案例,是否也有遇到残留的问题。希望大家不吝赐教,谢谢!

  • 【原创】FDA紧急授权达菲(Tamiflu)用于不满1岁的婴儿

    FDA紧急授权达菲(Tamiflu)用于不满1岁的婴儿 发布日期:20090930 来源:FDA网站 近日,美国食品药品监督管理局(FDA)批准达菲(Tamiflu)口服混悬液,用于治疗和预防1岁及以上儿童患者的流行性感冒。同时,FDA紧急授权达菲在一定情形下用于不满1岁婴儿的使用。 FDA提示:由于达菲用于病情严重、甲型H1N1流感确诊婴儿患者,或暴露于甲型H1N1流感环境患者治疗的安全性数据和使用剂量数据很有限。所以,婴儿使用达菲时,应严格监测其不良反应。未满3月婴儿使用达菲的药代动力学数据更是极为有限。因此,达菲不用于此类人群的常规性预防。当前达菲以年龄为基准的推荐剂量,不适用于早产儿。由于早产儿的肾功能未发育成熟,药物清除率低,所以当早产儿使用足月儿的推荐剂量时,可能导致过高的药物浓度。目前,FDA正在对早产儿的使用剂量进行评估。 下表为不满1岁婴儿紧急使用达菲时的剂量指标。不满1岁婴儿使用达菲口服混悬液的推荐剂量*年龄剂量(毫克)每剂体积 治疗剂量要求预防剂量要求 (12毫克/毫升) (5天) (10天)6~11月25毫克 2毫升 2毫升,每天2次2毫升,每天1次3~5月20毫克 1.6毫升 1.6毫升,每天2次1.6毫升,每天1次3月12毫克 1.0毫升 1.0毫升,每天2次除非病情严重,不推荐使用 *FDA批准达菲紧急使用权的推荐剂量,是基于当前国立卫生研究院(NIH)正在进行的治疗剂量(3.0 ~3.5 mg/kg,每日2次)评估数据。 FDA指出: 当向不满1岁婴儿配发达菲口服混悬液时,应用适当的测量容器替代产品包装中配备的口服给药器。药剂师或其他医护人员,应提供其能够准确量取处方要求毫升剂量的口服注射管,并提醒护理人员如何按照处方剂量用药。

  • COTO标准品|达拉非杂质研究

    他达拉非杂质是一种化学物质,它是他达拉非的同分异构体或相关化合物。他达拉非是一种磷酸酯酶抑制剂,用于治疗男性勃起功能障碍。COTO标准品是一种高纯度的标准物质,用于测定他达拉非及其杂质的纯度、含量和化学性质。通过与COTO标准品进行对比和分析,可以确定他达拉非及其杂质的结构、组成和含量,从而保证他达拉非的质量和安全性。在药物研发和生产过程中,COTO标准品的使用非常重要。它可以提供可靠的参照物,用于质量控制、药物分析和化学计量学研究。通过使用COTO标准品,可以确保他达拉非及其杂质的准确性和可靠性,为药物的安全性和有效性提供保障。总的来说,COTO标准品在他达拉非杂质的研究和控制中具有重要作用。通过使用COTO标准品,可以更好地了解他达拉非及其杂质的性质和含量,从而确保药物的安全和有效性。同时,也需要加强生产过程中的管理和监督,加强质量标准和监管措施的执行力度,确保药物质量和安全。

  • Tenax-TA 吸附管的快速活化方法探讨

    Tenax-TA 吸附管的快速活化方法探讨

    150℃)。戊烷作为非极性有机物,沸点仅 36 ℃, 可见在室温下, 戊烷是不易被Tenax-TA 吸附剂保留的物质在室温下, 分次注入戊烷 1.5 μ L, 洗脱气按不同时间段吹扫, 然后进行热解吸。从图 1 中看出: 室温下, 随着吹扫时间增长, 戊烷的峰高值逐渐降低。说明戊烷在活化过程中不被 Tenax-TA 吸附剂保留,而是通过缓慢释放而起作用的。戊烷分子在高温汽化后, 分子的热运动可能使高温下释放出的气体在戊烷分子和吸附剂之间建立了瞬间的气固相平衡。由于戊烷分子的不断流出, 平衡不断被打破, 而将其它杂质气体快速带出。戊烷分子由于自身的非极性和不被保留的性质, 而又逐渐被释放出来。3 结语利用气相色谱 - 热解吸仪器的吹扫功能, 选择戊烷作为 Tenax-TA 吸附管的洗脱剂, 在戊烷加入量为 1.5 μ L, 氮气流量为 80ml/min 时, 对吸附管活化 1h, 完全能够满足生产的要求, 本方法已应用于生产,成倍的提高了工作效率. 活化成本降低 50%以上。参考文献 室内空气质量标准.实施指南.中国标准出版社,112-120. 民用建筑工程室内环境污染控制规范.辅导教材. 中国计划出版社,281. 刘虎威. 气相色谱方法及应用. 化学工业出版社,167-168.

  • MYC0409-NA非隔离DC-DC转换器Murata村田

    MYC0409-NA是Murata(村田)公司生产的一款高性能非隔离DC-DC转换器模块。这款转换器以其超薄的设计和高效的性能而著称,是专为需要紧凑电源解决方案的应用而设计的。[align=center][img=图片7.png]https://www.ldteq.com/public/ueditor/upload/image/20240530/1717031611308148.png[/img][/align][table=100%][tr][td=1,1,87][b]PART NUMBER[/b][/td][td=1,1,59][b]OUTVour[M[/b][/td][td=1,1,49][b]PUT lbur(max.) [A][/b][/td][td=1,1,71][b]Vn(typ.)[M[/b][/td][td=1,1,47][b]NPUTRANGE[V[/b][/td][td=1,1,78][b]lnfull loadA][/b][/td][td=1,1,87][b]Efficiency[%][/b][/td][td=1,1,75][b]EN[/b][/td][td=1,1,85][b]Package[mm][/b][/td][td=1,1,56][b]Making[/b][/td][td=1,1,39][b]MSL[/b][/td][td=1,1,65][b]Quantity[/b][/td][/tr][tr][td=1,1,87]MYC0409-NA[/td][td=1,1,59]Viw/DIV4[/td][td=1,1,49]6.0[/td][td=1,1,71]48[/td][td=1,1,47]20-60[/td][td=1,1,78]1.5[/td][td=1,1,87]95[/td][td=1,1,75]Yes(Positive)[/td][td=1,1,85]11.5x9.5x2.0LGA[/td][td=1,1,56]C409NA[/td][td=1,1,39]3[/td][td=1,1,65]400 units/Tape&Reel[/td][/tr][tr][td=1,1,87]MYC0409-NA-D[/td][td=1,1,59]Vw/DIV4[/td][td=1,1,49]6.0[/td][td=1,1,71]48[/td][td=1,1,47]20-60[/td][td=1,1,78]1.5[/td][td=1,1,87]95[/td][td=1,1,75]Yes(Positive)[/td][td=1,1,85]11.5x9.5x2.0LGA[/td][td=1,1,56]C409NA[/td][td=1,1,39]3[/td][td=1,1,65]100 units/Tape&Reel[/td][/tr][/table][b][b][size=14px][b][b][b][size=14px][color=#ff0000][b]注:[/b][/color][/size][size=24px][color=#222222][url=https://www.ldteq.com/brand/98.html]Murata村田[/url][/color][/size][size=14px]DC/DC[b][b]电源[/b][/b]模块型号产品可用[/size][/b][size=14px][b][url=https://www.ldteq.com/article/3154.html]Cyntec电源模块[/url][/b][/size][size=14px][/size][b][size=14px]进行替代,具体替代方案可咨询[/size][size=14px][url=https://www.ldteq.com/]立维创展[/url]。[/size][/b][/b][/b][/size][/b]  主要特性:[/b]  高效能:MYC0409-NA提供高达96.5%的转换效率,在48V输入电压和6A输出电流的情况下,效率可达95.0%。  紧凑尺寸:采用11.5 x 9.5 x 2.0mm的LGA封装,非常适合空间受限的应用场景。  宽输入电压范围:支持20V至60V的输入电压范围,适用于48V总线系统。  固定转换比:提供固定的4:1转换比,即输入电压除以4得到输出电压。  保护功能:具备过流和过温保护机制,确保系统的安全运行。  开路漏极电源输出良好:提供电源输出状态的指示。  无回路补偿电荷泵:适用于没有环路补偿的系统。  外部时钟同步:可以与外部时钟信号同步,以满足特定应用的需求。  模块堆叠能力:最多可以堆叠4个模块,以满足更高的功率需求。[b]  应用领域:[/b]  MYC0409-NA适用于多种需要高效、紧凑电源解决方案的应用,包括:  - 数据中心和服务器  - 网络设备  - 通信基站  - 光学设备  - 测试和测量设备  - LED标牌和显示系统[b][size=14px]相关推荐:[/size][/b][url=https://www.ldteq.com/article/3156.html]Murata村田非隔离电源模块替代方案[/url][color=#0070c0] [/color][url=https://www.ldteq.com/article/3114.html]用于PoE的隔离式DC-DC转换器[/url]更多[url=https://www.ldteq.com/brand/98.html][size=15px][color=#333333]Murata[/color][/size][size=14px]村田[/size][/url][size=14px]相关产品信息可咨询[url=https://www.ldteq.com/]立维创展[/url]。[/size]

  • 【转帖】FDA就减肥药Orlistat(奥利司他)的安全性审查与公众先期交流

    这样的爱美就等于慢性自杀~~~~ 2009年08月24日美国食品药品管理局(FDA)发布的新闻表示,他们正在对患者服用减肥药Orlistat(奥利司他)导致肝损伤的不良反应报告进行审查。 1999~2008年,FDA共接到32例Orlistat导致的严重肝损伤报告,包括6例肝衰竭病例,27例需接受住院治疗。其中的30例发生在美国以外的地区。报告的不良反应事件中大多数为皮肤发黄或眼发白(黄疸)、虚弱及胃部不适。 此外,Orlistat生产商提供的肝损伤疑似病例等其他信息也正在审查中,目前尚不能确定Orlistat是否会导致肝损伤。接受Xenical(处方药)及Alli(OTC)治疗的患者应继续按照处方要求或用药指南要求服用。 FDA提醒消费者:若在服用Orlistat时出现一些可能为肝损伤的症状,尤其是虚弱乏力、高烧、黄疸或尿黄,应及时咨询医务人员。还可能出现的其他不良反应症状包括腹痛、恶心、呕吐、大便颜色变浅、瘙痒、或食欲不振。 FDA表示,提早通告相关药品的风险信息是FDA控制公众用药安全性风险的重要交流方式。对收集到的相关不良信息一旦审查结束,FDA将及时向公众公布评估结果。

  • 废次钠含乙炔

    清净塔废次钠水中乙炔含量的测定方法,谁有?能告之一下吗,谢谢!

  • 【讨论】Tenax-TA能不能替代活性炭用于空气中苯采样的吸附剂??

    Tenax-TA能不能替代活性炭用于空气中苯采样的吸附剂??[em45] [em45]我这里传了有两个资料,大家有兴趣的可以看下,感觉有点矛盾[em06] [em06] [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=52585]Tenax-TA不能替代活性炭用于空气中苯采样的吸附剂[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=52586]室内空气中苯系物和TVOC检测中有结论说能替代[/url]

  • imOmics精华速递—渗透调节的非Na+方式和机制

    imOmics精华速递—渗透调节的非Na+方式和机制

    [align=center][img=,640,302]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705231343_01_3037344_3.jpg[/img][/align][align=center][/align][align=center][b]海洋原生生物破囊壶菌的渗透调节和对Na[sup]+[/sup]的需求[/b][/align][align=center][b][/b][/align]破囊壶菌是低等的真菌,生长在大量的Na[sup]+[/sup]环境中。Na[sup]+[/sup]参与细胞渗透调节和细胞代谢。渗透调节通过从环境中吸收无机离子,或者改变细胞质中可溶性物质的浓度来完成。通过质膜的渗透调节在转运过程中非常重要。但是在海洋原生生物中如何通过质膜进行渗透调节还不清楚。澳大利亚的科学家Shabala等人用非损伤微测技术揭示了海洋原生生物破囊壶菌渗透调节的离子机制。发现低渗引起了破囊壶菌显著的Na[sup]+[/sup]、Cl[sup]-[/sup]和K[sup]+[/sup]的外流,胁迫初始的30min内完成了渗透调节。就这个细菌来说,Na[sup]+[/sup]是主要的贡献者,在渗透调节中超过一半,Cl[sup]-[/sup]是第二个贡献者。K[sup]+[/sup] 在渗透调节过程中的作用相对较小。Ca[sup]2+[/sup]和H[sup]+[/sup]流速的变化主要归功于胞内的信号转导。通过生长实验整理了离子流的数据,即使当生长在一个没有Na[sup]+[/sup]的环境中,只要维持合适的渗透势,即通过甘露醇调节到和海水一样的渗透势时,破囊壶菌细胞也能正常生长。这说明Na[sup]+[/sup]对破囊壶菌的生长不是必需的,因为Na[sup]+[/sup]主要参与细胞代谢。这项工作为细菌如何进行渗透调节提供了证据,发现破囊壶菌细胞在没有Na[sup]+[/sup]的环境中也能够正常生长,证明了细胞的渗透/膨压也能通过其他方式进行调节以及调节的机制。[align=center][img=,386,566]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705231344_01_3037344_3.jpg[/img][/align][align=center][color=#888888]图注:A. H[sup]+[/sup]流速对低渗反应的动力学;[/color][/align][align=center][color=#888888]B. 不同浓度的NaCl引起了H[sup]+[/sup]流速的不同反应。[/color][/align][align=center][color=#888888][/color][/align][align=left]关键词:非损伤微测技术(MIFE) H[sup]+[/sup] flux Na[sup]+[/sup] flux K[sup]+[/sup] flux Cl[sup]- [/sup]flux 破囊壶菌(thraustochytrid).[/align]参考文献:Shabala L., [i]et al[/i]. Environmental Microbiology, 2009,11: 1835-1843.([color=#0052ff]NISC文献编号:F2009-012 [color=#ff2941]长按[/color][/color][color=#ff2941]扫码下载[/color])[align=center][/align] [img=,280,280]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705231347_01_3037344_3.png[/img][align=center][color=#888888][color=#c00000]注:非损伤微测技术(NMT)包括:SIET、SVET、SPET、SERIS、SERP、SERE、SRET、MIFE等。[/color][/color][/align][align=left][color=#888888][/color][/align]

  • 【求助】如何标定EDTA-2Na

    最近买回两瓶国产0.01mol/l的EDTA-2Na标准溶液,用于滴定水的硬度,怀疑浓度是错误的,请问如何标定EDTA-2Na.谢谢

  • MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达

    MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达

    MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达细胞模型的构建实验方法与步骤 细胞的复苏 1.复苏前的准备:打开水浴锅,设置温度37℃;紫外线将超净台消毒30 min;配置完全培养基。 2.将要复苏的H69、H446细胞从液氮取出,用一次性PE手套包裹冻存管,迅速放入水浴锅中震荡,使其快速融化。 3.在15 mL离心管中加入5 mL完全培养基及融化的细胞悬液,900 r/min离心8分钟,弃去上清,得到细胞沉淀。 4.在25 cm2的培养瓶中加入5 mL完全培养基,并用1 mL培养基将沉淀的细胞重悬并加入准备好的培养瓶中,放入CO2恒温培养箱中继续培养。 细胞的传代 1.选取在悬浮培养瓶中生长至90%的H69细胞,用移液枪将细胞悬液移入15 mL离心管中,选取在贴壁培养瓶中生长至90%的H446细胞,用PBS溶液将细胞吹至漂浮,并移入15 mL离心管中,两种细胞均900 r/min离心8分钟,弃掉上清。 2.分别在3个25 cm2培养瓶中加入5 mL完全培养基,在细胞沉淀中加入3 mL培养基并充分吹打混匀,将3 mL细胞悬液平均放入3个培养瓶中并混匀,放入培养箱中继续培养。 MSI1低表达细胞模型的构建1.从-80℃冰箱取出慢病毒载体冰上融化,将慢病毒用空白培养基稀释为滴度2×108,充分混匀,准备好病毒感染增强液。2.将25 cm2悬浮培养瓶中H69细胞移入15 mL离心管中并用移液枪充分吹打混匀,取其中500 μL放入细胞计数仪中计数,取出1.2×106个细胞置入新的离心管中,加入空白培养基至6 mL。3.在12孔板中以MOI=10的病毒滴度进行感染,培养16 h。4.16 h后将细胞悬液离心,换成不加双抗的完全培养基继续培养,72 h后观察荧光。5.待细胞生长至状态良好,加入1 μg/mL嘌呤霉素筛选至90%以上细胞均产生荧光。荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测MSI1在mRNA水平的表达 总RNA的提取分别将细胞离心,PBS缓冲液清洗2次,900 r/min离心8 min,得到细胞沉淀。分别加入1 mL Trizol,用移液枪吸打至细胞完全破裂,加入200 μL氯仿,震荡30 s,室温静置10 min,以有效分离无机相和有机相,随后4℃,12,000 g/min离心15 min。将上清移至高压过的1.5 mL离心管中,加入与上清等体积的异丙醇,轻柔颠倒震荡数次,室温静置10 min,随后4℃,12,000 g/min离心10 min。弃去上清,加入75%无水乙醇,4℃,12,000 g/min离心5 min。弃去上清,沉淀置于冰上自然干燥,但不可完全干燥。用30 μL DEPC水溶解总RNA。用NanoDrop One超微量分光光度计进行定量和纯度检测,用1%琼脂糖凝胶电泳进行完整性检测。 cDNA的合成逆转录体系试剂名称使用量模板RNAMonScriptTM 5*RT111 All-in-One MixMonScriptTM dsDNaseNuclease-Free Water1 μg4 μL1 μLup to 20 μL将混合液轻柔吹打混匀,瞬时离心,37℃ 2 min,55℃ 15 min,85℃ 5 min,得到cDNA。 Q-PCR检测MSI1 mRNA的表达GAPDH引物序列:Forward primer:Reverse primer:5’-GGTCGGAGTCAACGGATTTG-3’5’-ATGAGCCCCAGCCTTCTCCAT-3’MSI1引物序列:Forward primer:Reverse primer:5’-GAACCATCCCGTCCTGTATCA-3’5’-GAAACCATGAAGCCCCAACC-3’Q- PCR反应体系:Q-PCR反应体系试剂名称使用量cDNAForward primerReverse primerMonAmpTM Chemhs qPCR MixLow ROXNuclease-Free Water50 ng0.2 μL0.2 μL5 μL0.1μLup to 10 μLQ-PCR反应程序: Q-PCR反应程序反应步骤反应温度反应时间循环次数预变性95℃10 min1变性95℃10 s40退火55-65℃10 s延伸72℃30 s溶解曲线溶解曲线按仪器默认溶解曲线 结果采用t检验,用Graphpad prism5计算MSI1在mRNA水平的表达量。 Western blot检测MSI1在蛋白水平的表达总蛋白的提取将对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞移入15 mL离心管中,900 r/min离心8 min,并用PBS溶液洗涤2次,以去除培养基中血清影响。分别加入含PMSF的蛋白裂解液100 μL,与细胞充分混匀。4℃裂解1小时后,4℃,12000 g/min离心15 min,将上清移至新的离心管中,得到细胞总蛋白。 BCA法测定蛋白浓度 将Solution A和Solution B以50:1的体积比配置BCA工作液,充分混匀。将2 mg/mL蛋白标准品等比稀释,最小浓度为125 μg/mL,并分别与配置好的200 μL BCA工作液混匀,铺入96孔板中。37℃孵育30 min,测定波长562 nm处OD(光密度值)值,并绘制蛋白标准曲线。取适量H69-NC、H69-shMSI1细胞总蛋白,20:1稀释后,与200 μL BCA工作液混合均匀。37℃孵育30 min,用酶标仪测定波长562 nm处OD值,根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。Western blot检测MSI1蛋白的表达 分别收集对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞总蛋白,加入相应体积4×SDS Loading Buffer,沸水浴煮5 min,分别取40 μg细胞总蛋白,在提前配制的10% SDS-PAGE分离胶电泳。电泳结束后,将蛋白转至PVDF膜上。用含5%脱脂牛奶的封闭液 37℃封闭1.5 h。弃去封闭液,用TBST缓冲液洗3次,每次10 min,加入MSI1兔单克隆抗体(1:1000),并以GAPDH为内参,加入GAPDH鼠单克隆抗体(1:5000);4℃孵育过夜,次日用TBST缓冲液洗膜3次,每次10 min。在敷有MSI1抗体的膜上加入辣根酶标记山羊抗兔IgG(1:5000),在敷有GAPDH抗体的膜上加入辣根酶标记山羊抗鼠IgG(1:5000),37℃敷育1 h,TBST 缓冲液洗膜3次,每次10 min。用增敏化学发光底物试剂检测,暗室曝光显影。在GAPDH表达量相同的情况下比较MSI1的表达情况。多次重复,应用ImageJ计算出各个蛋白条带的灰度对比,结果采用t检验,并应用Graphpad prism5作出柱状图。 MSI1在人小细胞肺癌细胞系中高表达 提取人正常肺上皮细胞BEAS-2B、小细胞肺癌细胞H446、H69的RNA,利用Q-PCR检测MSI1在正常肺上皮及小细胞肺癌细胞系中的表达情况,结果如图2-1显示,MSI1在小细胞肺癌细胞系H446、H69中的表达远远高于正常肺上皮细胞。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201428158_6718_5389809_3.png1 MSI1 mRNA在小细胞肺癌细胞系中的表达(**代表与正常肺上皮细胞相比,小细胞肺癌细胞MSI1表达量增高具有统计学意义,P0.01)。 MSI1低表达细胞模型的构建本实验选取人小细胞肺癌细胞系H69细胞,使用慢病毒感染技术敲低MSI1的表达,同时设置对照组除外病毒本身对细胞产生的影响,待细胞状态良好使用嘌呤霉素筛选,然后在荧光显微镜下观察如图2-2,可见H69-NC、H69-shMSI1细胞均产生绿色荧光,表明人小细胞肺癌H69细胞慢病毒感染成功。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201428036_9359_5389809_3.png MSI1低表达细胞模型的构建。应用shMSI1慢病毒载体感染H69细胞,利用嘌呤霉素筛选,并在荧光显微镜下观察。 荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测MSI1的mRNA表达水平提取对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞的RNA,并测量RNA浓度及完整性,用1%琼脂糖凝胶电泳检测完整性可见,RNA有三条带,从上到下依次为28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA,且28S rRNA的亮度是18S rRNA的两倍。用NanoDrop One超微量分光光度计测定人总RNA的A260/A280的值为2.00左右,A260/A230的值为2.30左右,说明提取的RNA质量和完整性很好,可以用于后续试验。利用Q-PCR技术检测各细胞内MSI1 mRNA相对表达量,结果如图2-3所示,与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1 mRNA表达量明显降低(P0.01),抑制率约为75%。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201434330_8277_5389809_3.png MSI1在RNA水平的表达(***代表与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1 mRNA表达量下降具有统计学意义,P0.001)。 Western blot检测MSI1蛋白表达水平将BSA标准品(2 mg/mL)进行等比稀释,最低浓度为125 ug/mL,并应用BCA蛋白质浓度测定试剂盒测定在波长562 nm下的OD值,以OD值为纵坐标,对应蛋白质浓度(μg/mL)为横坐标,绘制标准蛋白曲线如图2-4所示。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201435248_4142_5389809_3.png图2-4 标准蛋白曲线分别提取H69-NC、H69-shMSI1细胞的总蛋白质,利用Western blot技术检测各细胞内MSI1蛋白的表达情况。结果如图2-5所示,与对照组相比,MSI1蛋白表达在H69-shMSI1细胞中明显降低。表明MSI1低表达细胞模型构建成功。ahttps://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201437240_855_5389809_3.pngbhttps://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201434999_3303_5389809_3.png图2-5 MSI1蛋白水平表达:(a)MSI1蛋白表达条带;(b)MSI1蛋白的相对表达量。(*表示与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1蛋白表达下降具有统计学意义,P0.05)。首先验证MSI1在小细胞肺癌细胞系中的表达情况,利用Q-PCR技术检测在RNA水平,MSI1在肺正常上皮细胞及小细胞肺癌细胞系中的表达,结果显示,MSI1在小细胞肺癌细胞中的表达明显高于正常肺上皮细胞。随后以人经典型小细胞肺癌细胞系H69细胞为研究对象,构建MSI1低表达细胞模型,应用shMSI1慢病毒载体感染H69亲本细胞,同时设置对照组除外病毒本身对细胞产生的影响,利用Q-PCR及Western blot验证MSI1在RNA及蛋白水平的表达,结果显示,H69-shMSI1组MSI1的mRNA及蛋白的表达明显降低。表明MSI1低表达细胞模型构建成功,可以用于后续实验。

  • 建立液相质谱联用法测定生姜提取液中米诺地尔、度他雄胺与非那雄胺的含量方法

    建立液相质谱联用法测定生姜提取液中米诺地尔、度他雄胺与非那雄胺的含量方法

    [align=center][b][font=黑体]建立液相质谱联用法测定生姜提取液中米诺地尔、度他雄胺与非那雄胺的含量方法[/font][/b][/align][align=center][font=楷体_GB2312]黄锦波[/font]1[font=楷体_GB2312],罗杰鸿[/font]2[/align][align=center](1.[font=宋体]吉姆斯(广州)实验技术有限公司;[/font]2.[font=宋体]广东安纳检测技术有限公司[/font][font=宋体]广州[/font] [url=http://www.cqvip.com/main/search.aspx?o=%e5%b9%bf%e5%b7%9e510520][color=windowtext]510000[/color][/url])[/align][align=left][b][font=黑体]摘要[/font]:[font=黑体]目的[/font][/b][font=宋体]建立液相串联质谱法测定生姜提取液中米诺地尔,度他雄胺与非那雄胺含量的方法。[/font][b][font=黑体]方法[/font][/b][font=宋体]样品经过乙腈溶解,超声[/font]15 min[font=宋体],再经过[/font]Oasis HLB[font=宋体]固相萃取柱净化,最终以甲醇洗脱并定容于[/font]10 ml[font=宋体]容量瓶。采用电喷雾离子源,全扫描模式,取适量样品上机测试。选择[/font]Extend-C18[font=宋体]为分离柱,[/font]90 %[font=宋体]甲醇[/font]-0.1 %[font=宋体]甲酸水为流动相。[/font][b][font=黑体]结果[/font][/b][font=宋体]米诺地尔,度他雄胺与非那雄胺的检出浓度分别为[/font]0.020mg/kg[font=宋体],[/font]0.019mg/kg[font=宋体],[/font]0.022 mg/kg[font=宋体],线性良好,[/font]R[sup]2[/sup][font=宋体]均大于[/font]0.995[font=宋体]。以空白样品为基质,回收率在[/font]89.0%-99.8%[font=宋体]之间,相对标准偏差在[/font]0.5-4.1 %[font=宋体]之间。[/font][b][font=黑体]结论[/font][/b][font=宋体]该方法的能[/font][/align][b][font=楷体]关键词[/font]:[/b] [font=宋体]液相串联质谱法;生姜提取液;米诺地尔;度他雄胺;非那雄胺;[/font][align=center][b][color=black]Determination ofthree prohibited hormones in hair cosmetics by LC-MS[/color][/b][/align][align=center][color=#2B2B2B]Huang Jin-bo 1[/color][font=黑体][color=#2B2B2B],[/color][/font][color=#2B2B2B]Luo Jie-hong2[/color][/align][align=center][color=#2B2B2B](1.Jims (Guangzhou) Experimental Technology Co., Ltd. 2. Guangdong Anna TestingTechnology Co., Ltd., Guangzhou 510000)[/color][/align][align=left][b][color=#2B2B2B]ABSTRACT: [/color][/b]Objective to establish a liquid phase tandem massspectrometry method for the determination of minoxidil, dutasteride andfinasteride in ginger extract. Methods The samples were dissolved inacetonitrile, sonicated for 15min, and then purified by Oasis HLB column.Finally, the samples were eluted with methanol and fixed in a 10 mlvolume-volume flask. Using electrospray ion source, full scan mode, takeappropriate samples on the machine test. Extend-c18 was selected as theseparation column, and 90 % methanol-0.1 % formic acid water was used as themobile phase. Results The detectable concentrations of minoxidil, dutasterideand finasteride were 0.020mg/kg, 0.019mg/kg and0.022mg/kg, respectively, withgood linearity and R[sup]2[/sup] greater than 0.995. Using blank sample assubstrate, the recoveries were 89.0%-99.8%and the relative standard deviationswere 0.5-4.1%. Conclusion This method can accurately analyze the contents ofthree prohibited hormones in ginger extract.[/align][b]Key words: [/b]LC-MSMS gingerextract Minoxidil Dutasteride finasteride [align=left][font=宋体]生姜提取液可通过刺激头皮血液,使得毛囊活跃,有助于毛发生长,减少脱发断发[/font][sup][1][/sup][font=宋体],往往被用作生发原料。米诺地尔或雄胺激素类激素可被用于治疗脱发症状,但根据《化妆品安全技术规范》([/font]2015[font=宋体]年版)中规定,米诺地尔或雄胺激素类激素禁止添加到日化用品中,若长期使用含有这三种激素的日化用品,很有可能导致头屑增多、皮肤瘙痒、脱发加剧等[/font][sup][2][/sup][font=宋体],因此需建立相关的检测方法,以监测相关的产品。[/font][/align][align=left][font=宋体]目前,检测米诺地尔,非那雄胺与度他雄胺的主要方法为液相色谱仪[/font][sup][3-4][/sup][font=宋体]、液相质谱联用法[/font][sup][5-6][/sup][font=宋体]。液相色谱仪在检测的过程中对分离条件要求高,不同基质的样品有可能需要开发不同的分离方法,同时容易出现假阳性。液相色谱[/font]-[font=宋体]串联质谱法,能同时检测几十种激素[/font][sup][7][/sup][font=宋体],这有利于缩短分析时间,有利于辨别假阳性,因此,在实际工作中,首选液相串联质谱测定激素。[/font][/align][align=left][font=宋体]目前质谱法测定米诺地尔与非那雄胺的检测方法相对较多[/font][sup][8-9][/sup][font=宋体],但是检测度他雄胺的检测方法较少,因此本实验通过优化前处理条件,色谱条件与质谱条件,建立了液相质谱联用测定生姜提取液中米诺地尔、度他雄胺与非那雄胺含量的方法。[/font][/align][align=left]1 [font=仿宋]试验[/font][/align][align=left]1.1 [font=黑体]仪器和试剂[/font][/align][align=left][font=宋体]赛默飞液相色谱质谱联用仪[/font]TSQ Quantum Ultra&Access MAX[font=宋体],吉姆斯[/font]ZY-1001[font=宋体]超声波清洗器、[/font]TDL-5A[font=宋体]台式离心机。[/font][/align][align=left][font=宋体]米诺地尔标准品(纯度为[/font]99.5 %[font=宋体])、非那雄胺标准品(纯度为[/font]99.7 %[font=宋体])、度他雄胺标准品(纯度为[/font]99.9 %[font=宋体])[/font]([font=宋体]均购于上海安谱实验科技有限公司[/font])[font=宋体]。[/font][/align][align=left][font=宋体]样品:市售[/font][/align][align=left][font=宋体]试剂:甲醇、乙醇、乙腈均为色谱纯,三氯甲烷为分析纯。[/font][/align][align=left][font=宋体]耗材:[/font]Oasis HLB[font=宋体]固相萃取小柱,[/font]Aisimo WAX[font=宋体]固相萃取小柱。[/font][/align][align=left]1.2 [font=黑体]溶液配制[/font][/align][align=left][font=仿宋]1.2.1 3[/font][font=仿宋]种激素的混合对照品储备液[/font][/align][align=left][font=宋体]分别称取米诺地尔、非那雄胺、度他雄胺对照品适量,用甲醇溶解并稀释成各组分质量浓度分别约为[/font]10μg/ml[font=宋体]的混合对照品储备液。[/font][/align][align=left][font=仿宋]1.2.2 3[/font][font=仿宋]种激素的系列混合标准工作溶液[/font][/align][align=left][font=宋体]精密[/font]3[font=宋体]种激素的混合对照品储备液[/font]0.01[font=宋体]、[/font]0.02[font=宋体]、[/font]0.04[font=宋体]、[/font]0.06[font=宋体]、[/font]0.08[font=宋体]、[/font]0.1ml [font=宋体],分别置于[/font]6[font=宋体]只[/font]10ml[font=宋体]棕色容量瓶中,用甲醇稀释至标线,配制成各组分质量浓度均分别为[/font]10[font=宋体]、[/font]20[font=宋体]、[/font]40[font=宋体]、[/font]20[font=宋体]、[/font]40[font=宋体]、[/font]60[font=宋体]、[/font]80[font=宋体]、[/font]100μg/l[font=宋体]的系列混合标准工作溶液,[/font][/align][align=left]1.3 [font=黑体]仪器工作条件[/font][/align][align=left]1[font=宋体])色谱条件[/font] [font=宋体]色谱柱:[/font]Extend-C18[font=宋体]色谱柱([/font]100mm×0.46 cm×0.25 μm[font=宋体]),柱温:[/font][font=宋体]35℃[/font][font=宋体];进样体积[/font]5μl[font=宋体];流速为[/font]0.2ml/min[font=宋体]。流动相[/font]A[font=宋体]为甲醇,流动相[/font]B[font=宋体]为[/font]0.1 %[font=宋体]甲酸水,等度洗脱,[/font]A:B=90 %:10 %[font=宋体]。[/font][/align][align=left]2[font=宋体])质谱条件[/font][font=宋体]电喷雾离子源([/font]ESI[sup]+[/sup][font=宋体]),全扫描模式([/font]scan[font=宋体]),碰撞气为氩气,雾化气为氮气,雾化室温度:[/font]350[font=宋体]℃[/font][font=宋体],接口温度为[/font]250[font=宋体]℃[/font][font=宋体],接口电压为[/font]3.5 kV[font=宋体],其余质谱参数见表[/font]1[font=宋体]。[/font][/align][align=left][font=黑体]表[/font]1 [font=黑体]质谱参数[/font][/align] [table][tr][td=1,2] [align=center][b][font=宋体]化合物[/font][/b][/align] [/td][td=3,1] [align=center][b][font=宋体]质荷比[/font][i]m/z[/i][/b][/align] [/td][td=1,2] [align=center][b][font=宋体]碰撞电压[/font]/V[/b][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][b][font=宋体]分子量[/font][/b][/align] [/td][td] [align=center][b]M+H[sup]+[/sup][/b][/align] [/td][td] [align=center][b]M+Na[sup]+[/sup][/b][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]米诺地尔[/font][/align] [/td][td] [align=center]209.2[/align] [/td][td] [align=center]210.2[/align] [/td][td] [align=center][color=black]/[/color][/align] [/td][td] [align=center]25[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]非那雄胺[/font][/align] [/td][td] [align=center]372.5[/align] [/td][td] [align=center]373.4[/align] [/td][td] [align=center]395.3[/align] [/td][td] [align=center]30[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]度他雄胺[/font][/align] [/td][td] [align=center]528.5[/align] [/td][td] [align=center]529.3[/align] [/td][td] [align=center][color=black]551.3[/color][/align] [/td][td] [align=center]22[/align] [/td][/tr][/table][align=left] [/align][align=left]1.4 [font=黑体]试验方法[/font][/align] [font=宋体]准确称取均匀的样品[/font]0.5 g[font=宋体]于[/font]10 ml[font=宋体]离心管中,加入[/font]3 ml[font=宋体]乙腈进行提取,振荡[/font]1 min[font=宋体],超声[/font]10 min[font=宋体]后,于[/font]5000 r/min[font=宋体]的离心机上进行离心,有机相经[/font]Oasis HLB[font=宋体]固相萃取小柱(提前分别以[/font]5 ml[font=宋体]甲醇,[/font]10ml[font=宋体]水活化)净化,待样品液体流尽后,以甲醇进行自然流下洗脱,最终以甲醇定容于[/font]10 ml[font=宋体]容量瓶中,供试品经过有机滤膜过滤后,上机待测。[/font][align=left] [/align][align=left]2 [font=仿宋]结果与讨论[/font][/align][align=left]2.1 [font=黑体]色谱行为[/font][/align][font=宋体]在优化的色谱条件下,[/font]3[font=宋体]种激素的混合标准溶液的色谱图见图[/font]1[align=center][sub][img=total-map 拷贝,362,163]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151650413053_6906_3237657_3.jpg!w543x245.jpg[/img][/sub][/align][align=center][font=宋体]图[/font]1-1 3[font=宋体]种激素的总离子色谱图[/font][/align][align=center][img=mi-背景白色-离子,108,162]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151650558752_9924_3237657_3.jpg!w162x243.jpg[/img] [img=fei-背影白色-离子,130,185]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151651059044_5407_3237657_3.jpg!w195x277.jpg[/img] [img=du-背影白色-离子,91,195]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151651141788_8226_3237657_3.jpg!w136x292.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]图[/font]1-2 [font=宋体]米诺地尔,非那雄胺与度他雄胺(从左到右)标准溶液的总离子色谱图与相关离子柱状图[/font][/align][b][font='Times New Roman',serif] [/font][font='Times New Roman',serif]2.2 [/font][font=黑体]仪器条件的优化[/font][/b][align=left][font=仿宋]2.2.1[/font][font=仿宋]流动相的选择[/font][/align][align=left][font=宋体]本试验以常见的甲醇[/font]-0.1 %[font=宋体]甲酸水作为流动相,分别设置[/font]10 %[font=宋体]甲醇[/font]-0.1 %[font=宋体]甲酸水,[/font]30 %[font=宋体]甲醇[/font]-0.1%[font=宋体]甲酸水、[/font]50 %[font=宋体]甲醇[/font]-0.1%[font=宋体]甲酸水、[/font]70 %[font=宋体]甲醇[/font]-0.1%[font=宋体]甲酸水,[/font]90 %[font=宋体]甲醇[/font]-0.1%[font=宋体]甲酸水进行测试,查看各个目标峰的响应值(响应值以同浓度下的峰面积大小判断)。结果发现,流动相的变化,对度他雄胺的响应值无明显影响,但有机相的占比越高,米诺地尔与非那雄胺的响应值越高,因此本试验的流动相采用[/font]90 %[font=宋体]的甲醇[/font]-0.1%[font=宋体]甲酸水。[/font][/align][align=left][font=仿宋]2.2.2 [/font][font=仿宋]质谱条件的优化[/font][/align][font=宋体]以[/font]0.1μg/ml[font=宋体]的混合标准溶液以注射进样的方式进行全扫描分析,通过优化雾化室温度、碰撞能量、毛细管电压等参数,得到[/font]3[font=宋体]种激素的最优分析条件。结果表明,这三种激素在正模式下响应更高。米诺地尔、非那雄胺、度他雄胺的最佳碰撞电压分别为[/font]25V[font=宋体]、[/font]30V[font=宋体]、[/font]22 V[font=宋体]。[/font]M+H[sup]+[/sup][font=宋体]分别为[/font]210.3[font=宋体]、[/font]373.4[font=宋体]、[/font]529.3[font=宋体]、[/font]551.3[font=宋体]。[/font][b][font='Times New Roman',serif]2.4 [/font][font=黑体]样品前处理条件的优化[/font][/b][align=left][font=仿宋]2.4.1[/font][font=仿宋]提取溶剂的选择[/font][/align][font=宋体]本试验以甲醇、乙醇、乙腈与三氯甲烷作为提取剂,分别考察不同提取剂对目标物的回收率影响。结果表明,这甲醇与乙醇对米诺地尔的回收率较低,而三氯甲烷对非那雄胺与度他雄胺的回收率相对偏高,而乙腈作为提取剂时,三个目标物的回收率均较好(如表[/font]2[font=宋体]所示),因此本实验选择的样品提取剂为乙腈。[/font][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left][font=黑体]表[/font]2 [font=黑体]考察不同溶剂作为提取剂的回收率结果[/font][/align] [table][tr][td=1,2] [align=center][font=宋体]化合物[/font][/align] [/td][td=4,1] [align=center][font=宋体]米诺地尔加标量为[/font]0.10 μg[font=宋体]、非那雄胺加标量为[/font]0.10 μg[font=宋体]、与度他雄胺加标量为[/font]0.11 μg[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]甲醇[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]乙醇[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]乙腈[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]三氯甲烷[/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]米诺地尔[/font][/align] [/td][td] [align=center][color=black]85.4 [/color]%[/align] [/td][td] [align=center]84.4 %[/align] [/td][td] [align=center][color=black]90.5 [/color]%[/align] [/td][td] [align=center]109.4 %[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]非那雄胺[/font][/align] [/td][td] [align=center]92.5 %[/align] [/td][td] [align=center]91.4 %[/align] [/td][td] [align=center]92.5 %[/align] [/td][td] [align=center]105.4 %[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]度他雄胺[/font][/align] [/td][td] [align=center][color=black]90.9 [/color]%[/align] [/td][td] [align=center]93.4 %[/align] [/td][td] [align=center][color=black]95.9 [/color]%[/align] [/td][td] [align=center]110.4 %[/align] [/td][/tr][/table][align=left][font=仿宋] [/font][/align][align=left][font=仿宋]2.4.2 [/font][font=仿宋]超声时间的确定[/font][/align][font=宋体]本实验设计超声[/font]1 min[font=宋体],[/font]5 min[font=宋体],[/font]10min[font=宋体],[/font]15 min[font=宋体],[/font]20 min,[font=宋体]与[/font]30min[font=宋体]进行对比实验,以一定浓度的质控样作为提取样品,参考[/font]1.3[font=宋体]的方法进行前处理,以回收率的高低作为判断的标准。结果发现,米诺地尔在超声[/font]10 min[font=宋体]内,回收率呈上升阶段,而[/font]10min[font=宋体]到[/font]15 min[font=宋体]内无明显的变化,大于[/font]15 min[font=宋体]后,有往下的趋势,而非那雄胺与度他雄胺在超声[/font]15 min[font=宋体]内,呈上升的阶段,而大于[/font]15 min[font=宋体]后,并无明显的变化。因此本试验,采用超声提取时间为[/font]15 min[font=宋体]。具体如图[/font]4-[font=宋体]图[/font]6[font=宋体]所示[/font][align=center][img=,305,115]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151651368262_41_3237657_3.png!w457x172.jpg[/img][/align][align=center][font=黑体]图[/font] 4 [font=黑体]米诺地尔的超声提取时间与回收率的趋势图[/font][/align][align=left] [/align][align=center][img=,325,129]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151651483537_5445_3237657_3.png!w487x193.jpg[/img][/align][align=center][font=黑体]图[/font] 5 [font=黑体]非那雄胺的超声提取时间与回收率的趋势图[/font][/align][align=center][img=,333,129]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151651573213_2787_3237657_3.png!w499x193.jpg[/img][/align][align=center][font=黑体]图[/font] 6 [font=黑体]度他雄胺[/font][font=黑体]超声提取时间与回收率的趋势图[/font][/align][align=left][font=仿宋]2.4.3[/font][font=仿宋]净化条件的选择[/font][/align][font=宋体]本试验考察两种固相萃取柱对质控样中的目标物的净化能力,分别为[/font]Oasis HLB[font=宋体]固相萃取柱与[/font]Aisimo WAX[font=宋体]固相萃取柱,结果发现采用[/font]Aisimo WAX[font=宋体]固相萃取小柱进行净化时,三种目标物的回收率范围在[/font]58.4 %[font=宋体]至[/font]75.9 %[font=宋体]之间,而采用[/font]Oasis HLB[font=宋体]固相萃取柱时,回收率的范围在[/font]89.1 %[font=宋体]到[/font]96.4 %[font=宋体]之间,因此本实验选用[/font]Oasis HLB[font=宋体]固相萃取柱作为净化柱。[/font][b][font='Times New Roman',serif]2.5[/font][font=黑体]标准曲线与检出浓度[/font][/b][font=宋体]配制[/font]0.1[font=宋体],[/font]0.5[font=宋体],[/font]2.0[font=宋体],[/font]5.0[font=宋体],[/font]10.0[font=宋体],[/font]50.0[font=宋体],[/font]100 μg/l[font=宋体]的混合标准溶液系列,按优化后的色谱条件对其进行测定,以目标物的配置浓度为横坐标,峰面积为纵坐标。线性范围,回归方程与相关系数详见表[/font]3[font=宋体]。[/font][font=宋体]检出限以[/font]3[font=宋体]倍信噪比([/font]3S/N[font=宋体])时所对应的浓度计算、[/font][align=left][font=黑体]表[/font]3 3[font=黑体]种激素标准曲线考察结果[/font][/align] [table=569][tr][td] [align=center][font=宋体][color=black]峰号[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]目标物[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]线性范围([/color][/font][color=black]μg/l[/color][font=宋体][color=black])[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]线性回归方程[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]相关系数[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]检出限[/color][/font][color=black] (mg/kg)[/color][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][color=black]1[/color][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]米诺地尔[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center]10.05-100.5[/align] [/td][td] [align=center]Y =53460X-329[/align] [/td][td] [align=center]0.9998[/align] [/td][td] [align=center]0.020[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][color=black]2[/color][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]非那雄胺[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center]9.77-97.7[/align] [/td][td] [align=center]Y =99878X-1472[/align] [/td][td] [align=center]0.9999[/align] [/td][td] [align=center]0.019[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][color=black]3[/color][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]度他雄胺[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center]10.99-109.9[/align] [/td][td] [align=center]Y =43944X-3072[/align] [/td][td] [align=center]0.9994[/align] [/td][td] [align=center]0.022[/align] [/td][/tr][/table][b][font='Times New Roman',serif]2.6 [/font][font=黑体]回收试验与精密度[/font][/b][font=宋体]以不含的生姜提取液作为空白基质,分别对其添加低、中、高三个水平的混合标准溶液,每个水平测试[/font]6[font=宋体]次,回收率和测定值的相对标准偏差[/font](RSD)[font=宋体]见表[/font]4[font=宋体]。[/font][align=left][font=黑体]表[/font]4 [font=黑体]精密度和回收率实验结果([/font]n=6[font=黑体])[/font][/align] [table][tr][td=1,2] [align=center][font=宋体]化合物[/font][/align] [/td][td=2,1] [align=center][font=宋体]加标量[/font]0.02 μg[/align] [/td][td=2,1] [align=center][font=宋体]加标量[/font]0.04 μg[/align] [/td][td=2,1] [align=center][font=宋体]加标量[/font]0.2 μg[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体]回收率[/font]%[/align] [/td][td] [align=center]RSD %[/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]回收率[/font] %[/align] [/td][td] [align=center]RSD %[/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]回收率[/font] %[/align] [/td][td] [align=center]RSD %[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体][color=black]米诺地尔[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][color=black]92.8%[/color][/align] [/td][td] [align=center]4.1[/align] [/td][td] [align=center][color=black]92.7[/color][/align] [/td][td] [align=center]3.6[/align] [/td][td] [align=center][color=black]99.8[/color][/align] [/td][td] [align=center]1.3[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体][color=black]非那雄胺[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center]89.0%[/align] [/td][td] [align=center]3.4[/align] [/td][td] [align=center]95.0[/align] [/td][td] [align=center]2.5[/align] [/td][td] [align=center][color=black]97.9[/color][/align] [/td][td] [align=center]0.5[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体][color=black]度他雄胺[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][color=black]90.4%[/color][/align] [/td][td] [align=center][color=black]3.9[/color][/align] [/td][td] [align=center][color=black]93.5[/color][/align] [/td][td] [align=center][color=black]3.1[/color][/align] [/td][td] [align=center][color=black]98.8[/color][/align] [/td][td] [align=center][color=black]2.6[/color][/align] [/td][/tr][/table][align=left]3 [font=仿宋]总结[/font][/align][font=宋体]本实验通过优化样品前处理与色谱仪器条件,探索出适合液相质谱法测定生姜提取液中[/font]3[font=宋体]种激素含量的检测方法,本实验方法具有较高的准确度和精密度,能准确的检测生姜提取液中米诺地尔,非那雄胺与度他雄胺含量。[/font][align=left][b][font=黑体]参考文献[/font][/b][/align][1] [font=宋体]高合意[/font],[font=宋体]黄健聪[/font],[font=宋体]等[/font].[font=宋体]复配植物防脱生发原料的制备与功效评价研究[/font][J].[font=宋体]日用化学工业[/font]. 2018,48(09)[font=宋体],[/font]521-526[2] [font=宋体]张朝辉[/font].[font=宋体]非那雄胺与米诺地尔治疗男性雄激素性秃发疗效分析[/font][J]. [font=宋体]临床研究[/font],2017,03(25):39-42.[3] [font=宋体]高媛[/font].HPLC[font=宋体]法测定米诺地尔洗剂含量及温度对含量影响的考察[/font][J]. [font=宋体]中国药师[/font],2018,07:1284-1286.[4] [font=宋体]刘亚雄[/font].[font=宋体]高效液相色谱法检测防脱、育发类化妆品中的非那雄胺[/font][J]. [font=宋体]日用化学工业[/font],2014,01:54-56.[5] [font=宋体]赵薇[/font],[font=宋体]等[/font]. [font=宋体]超高效液相色谱[/font]-[font=宋体]串联质谱法测定婴幼儿化妆品中米诺地尔等[/font]7[font=宋体]种成分[/font][J]. [font=宋体]食品安全质量检测学报[/font], 2019, 09: 2765-2770.[6] [font=宋体]许文佳[/font].HPLC-MS/MS[font=宋体]法同时测定生姜提取液中的[/font]13[font=宋体]种违禁成分[/font][J]. [font=宋体]药物分析杂志[/font],2019,08:1483-1488.[7] [font=宋体]郑磊[/font],[font=宋体]等[/font].[font=宋体]育发产品中斑蝥素和氮芥及米诺地尔的液相色谱[/font]-[font=宋体]串联质谱测定法[/font][J]. [font=宋体]环境与健康杂志[/font],2016,01[font=宋体]:[/font]66-68.[8] [font=宋体]吴川彦[/font],[font=宋体]等[/font].HPLC-Q-TOF-MS[font=宋体]法对米诺地尔及凝胶有关物质的分:中国药师[/font],2017,12:2267-2272.[9] [font=宋体]龚越强[/font].HPLC[font=宋体]测定中草药育发类化妆品中非法添加的米诺地尔[/font][J]. [font=宋体]食品与药品[/font],2014,04:267-269.

  • 【资料】非水溶剂和非水溶剂化学的特性及应用进展非水溶剂和非水溶剂化学的特性及应用进展!

    非水溶剂和非水溶剂化学的特性及应用进展非水溶剂和非水溶剂化学的特性及应用进展11 22陈经涛陈经涛,,陈养民陈养民((11陕西教育学院生化系陕西教育学院生化系,,陕西西安陕西西安710061 2710061 2渭南师范学院化学系渭南师范学院化学系,,陕西渭南陕西渭南714000714000))摘 要摘 要::非水溶剂具有水所没有的特性非水溶剂具有水所没有的特性..在非水溶剂中可以得到与在水中不同的反应结果在非水溶剂中可以得到与在水中不同的反应结果..许多不能够在水中发生的许多不能够在水中发生的化学反应化学反应,,在非水溶剂中却可以发生或者向相反的方向进行在非水溶剂中却可以发生或者向相反的方向进行 非水溶剂在制备无水盐非水溶剂在制备无水盐,,制备某些异常氧化态的特殊配合物制备某些异常氧化态的特殊配合物,,改变某些反应的速度改变某些反应的速度,,改进工艺改进工艺,,提高产率等方面都具有重要的意义提高产率等方面都具有重要的意义..关键词关键词::非水溶剂非水溶剂 非水溶剂化学非水溶剂化学 超酸超酸 熔融盐熔融盐 拉平效应拉平效应中图分类号中图分类号:O6-1:O6-1   文献标识码   文献标识码:A:A   文章编号   文章编号:1009:1009——51285128((20032003))05-0047-0305-0047-03CharacteristicsandACharacteristicsandAppplicationProsplicationProspectsofpectsofNonaNonaqueousqueousSolventandNonaSolventandNonaqueousSolventChemistrqueousSolventChemistryy11 22CHENJinCHENJingg22taotao,CHEN,CHENYanYangg22minmin((1De1DepartmentofBiochemistrpartmentofBiochemistry,ShaanxiInstituteofy,ShaanxiInstituteofEducation,710061XiEducation,710061Xi’’an,China an,China 2De2DepartmentofChemistrpartmentofChemistry,WeinanTeachersColley,WeinanTeachersCollege,714000Weinan,Chinage,714000Weinan,China))Abstract:Abstract:NonaNonaqueoussolventhasthecharacteristicsthataqueoussolventhasthecharacteristicsthataqueoussolventdoesnotqueoussolventdoesnotpossess.possess.DifferentDifferentreactionresultcanbereactionresultcanbeachievedinnonaachievedinnonaqueoussolvent.queoussolvent.ManManyreactionsthatcannotbedoneinwatercanbedoneinnonayreactionsthatcannotbedoneinwatercanbedoneinnonaqueoussolventorcanhavetheoqueoussolventorcanhavetheopp22positeresult.positeresult.InasInaspectsofpectsofproducinproducingsomesgsomespecialcoordinationcompecialcoordinationcompoundsofunusualoxidationstate,chanpoundsofunusualoxidationstate,changingingthesgthespeedofthepeedofthesomereactions,imsomereactions,improvinprovingthetechnigthetechniquesandquesandproductivitproductivity,nonay,nonaqueousisofqueousisofgreatsigreatsignificance.gnificance.KeKeyWords:yWords:nonanonaqueoussolvent queoussolvent nonanonaqueoussolventchemistrqueoussolventchemistry suy superacid meltedsalt levelinperacid meltedsalt levelingeffectgeffect

  • 埃菲尔铁塔的宝宝Effeila(小埃菲尔铁塔)诞生了!1

    埃菲尔铁塔的宝宝Effeila(小埃菲尔铁塔)诞生了!1

    [b][color=#cc0000]埃菲尔铁塔的宝宝Effeila(小埃菲尔铁塔)诞生了!1埃菲尔铁塔的宝宝Effeila(小埃菲尔铁塔)于2023年4月1日525分诞生,高32米,重23吨 。[img=,690,818]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/04/202304031738535730_2232_1841897_3.jpg!w690x818.jpg[/img][/color][/b]

  • 吸附剂Tenax-TA和活性炭对空气中苯的吸附性能比较

    吸附剂Tenax-TA和活性炭对空气中苯的吸附性能比较

    转载声明:本论文版权归原作者所有,转载仅作为学术交流使用,如有侵权可删除本转载,但不承担其他责任吸附剂Tenax-TA和活性炭对空气中苯的吸附性能比较朱小红,潘 红,马二琴,康怡平(上海市建设工程质量检测中心 浦东分中心,上海201209)摘要 :分别采用吸附剂为Tenax-TA和活性炭的吸附管模拟现场采集室内环境空气,了解Tenax-TA和活性炭对空气中苯的吸附性能。当Tenax-TA吸附剂以0.5L/min的流量采集10L空气时,苯存在漏出现象。说明空气中苯的采集不宜用Tenax-TA吸附剂替代活性炭吸附剂。关键词 :吸附剂 ;Tenax-TA ; 活性碳 ; 漏出中图分类号:O656 文献标识码:B 文章编号:1004-1672(2006)05-0012-02Comparison of Adsorptive Capacity of Benzene in Air between Tenax TA Adsorbent and Activated Carbon / Zhu Xiaohong et al // Shanghai Construction Engineering Quality Testing CenterAbstract: Through simulated sampling of the ambient air indoors with adsorption tube filled with Tenax TA adsorbent andactivated carbon respectively,adsorptive capacity of benzene in air from Tenax TA adsorbent or activated carbon could befound out. If 10 liter of air was sampled with Tenax TA adsorbent at a flow of 0.5L/min, benzene would leak out whichindicated that Tenax TA adsorbent was not suitable for sampling of benzene in the air instead of activated carbon.Key Words: adsorbent; Tenax TA; activated carbon; leakTenax-TA是一种多孔高分子聚合物,化学名为2,6- 二苯基对苯醚,具有良好的耐温性(极低流失性),对碳6以上的烃类具有良好的吸附性和热解吸性,被广泛应用于有机挥发物和半挥发物的吸附,在GB 50325-2001《民用建筑工程室内环境污染控制规范》中TVOC吸附管所采用的吸附剂就是Tenax-TA。活性炭亦是一种非常优良的吸附剂,它具有物理吸附和化学吸附的双重特性,对于非极性有机物有强的保留性,常温下适合采集蒸气态有机物,最常用的是椰子壳活性碳。在GB 11737-1989《居住区大气中苯、甲苯、二甲苯卫生检验标准方法气相色谱法》中苯吸附管所采用的吸附剂就是椰子壳活性炭本文通过试验比较吸附剂Tenax-TA和活性炭对空气中苯的吸附性能。1 试验部分1.1 仪器与试剂空气采样泵:Gilair-3型,流量范围:0.005~0.5 L/min,±5%恒流;空气流量校正器:Cilibrator-2 型,流量范围:0.02~6 L/min,一级皂泡式;气相色谱仪:GC6890型和GC122型 ;热解吸仪装置:ULTRATD+UNITY型和RJ-Ⅲ型 ;Tenax-TA吸附管 :不锈钢管(内填200 mg 的60~80 目Tenax-TA吸附剂) ;活性炭吸附管:玻璃管(内填100 mg椰子壳活性炭) ;温湿度计:TES1360型 ;大气压力表。标气-氮气中苯系物(BTX/N2) ;高纯氮。1.2 吸附管的活化填装好的吸附管在使用前需在高温下(TenaxTA 吸附管320℃,活性炭吸附管350℃)通高纯氮活化至少30 min,活化好的吸附管立即密封,保存在洁净的干燥器中。1.3 Tenax-TA吸附剂对空气中苯的吸附性能的试验(1) 基准管的制备。将Tenax-TA吸附管与恒流采样泵的采气口连接,以100 mL/min的流量抽取BTX/N2标气,每支Tenax-TA 吸附管含苯0.886 g,取下后密封,作为基准管待用。(2) 样品管的制备。在温度为23.6℃,大气压为101.6 kPa,相对湿度为45.0%RH的试验室环境条件下,模拟现场空气采样,将基准管用硅橡胶管与恒流采样泵连接,以0.5 L/min的流量分别抽取3L、4L、5L、6L和10L的高纯氮(3) 热解吸和气相色谱分析条件。采用TenaxTA 吸附/ 二次热解吸/ 毛细管气相色谱法的热解吸和气相色谱分析系统。ULTRA TD+UNITY热解吸仪和自动进样器各参数 解吸温度300℃,解吸时间6 min,冷阱低温-10℃;气相色谱分析条件按GB50325-2001《民用建筑工程室内环境污染控制规范》附录E 中规定的执行,采用程序升温,即初始温度 50℃保持 10 min,升温速率 5℃/min, 终止温度 250℃,恒温5 min。(4) 所有基准管和样品管的试验均做两次平行样试验。1.4 活性炭吸附剂对空气中苯的吸附性能的试验(1) 基准管的制备。 方法同1.3.1, 每支活性炭吸附管的苯含量为2.110 m g。(2) 样品管的制备。 在温度为16.0℃, 大气压为102.6 kPa, 相对湿度为60.0%RH的试验室环境条件下, 模拟现场空气采样, 将基准管用硅橡胶管与恒流采样泵连接, 以0.5 L/min 的流量抽取10 L 高纯氮。(3) 热解吸和气相色谱分析条件。 采用热解吸和填充柱气相色谱分析条件。 解吸温度350℃, 解吸时间 10 min ; 色谱条件进样口温度150℃, 检测器温度 150℃,炉温 90℃恒温。(4) 所有基准管和样品管的试验均做6次平行样试验。2 试验结果2.1 Tenax-TA吸附剂对空气中苯的吸附性能结果试验结果以回收率表示, 即不同采气体积的样品管与不采样的基准管进行峰面积比较, 峰面积的值取两个平行试验的均值。试验结果见表 1http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504241124_543386_2206495_3.jpg由表 1 可看出:当采样体积大于 4 L 时,苯的回收率出现下降趋势, 尤其是采样体积达到10 L 时,苯的回收率明显下降,仅相当于基准管的 60% 活性炭吸附剂对空气中苯的吸附性能结果试验结果同样以回收率表示, 即采样体积为10L 时的样品管与不采样的基准管进行峰面积比较,峰面积的值取六个平行试验的均值。 试验结果证明,用活性炭管吸附苯,其回收率达到 95% 以上。3 分析与讨论3.1固体吸附剂采样原理本试验中的采样属于固体吸附剂富集采样, 其采样过程类似色谱法中的样品前处理分析, 空气作为一个混合样品穿过吸附柱, 空气中氧、 氮和二氧化碳由于它们的吸附性弱且含量高首先流出, 一些吸附性强些的组分留在吸附剂上。 采样开始时, 空气中多数组分都滞留在吸附剂进气端, 随着抽过空气体积的增加, 被吸附的各组分向前推进, 由于各组分的吸附性能存在差异, 各组分间拉开距离, 一些吸附性小的组分先流出。3.2讨论与建议从试验数据可看出, 当以 0.5 L/min 的采样流量,用不同的采样体积通过内含 200 mg Tenax-TA吸附剂的吸附管, Tenax-TA吸附剂对空气中苯的保留能力显著不同, 采样体积从3 L变化到10 L, 回收率从 101.69% 下降到 60.09%。同样的采样条件,当采样体积为 10L 时,活性炭对苯的回收率大于95%,而 Tenax-TA 对苯的回收率只有 60%。一般来说, 用固体吸附剂采样当流出气中某组分浓度是流入气浓度的 5% 时则认为有漏出。 也就是说, TenaxTA吸附剂应用于苯的采样过程中时, 若以0.5 L/min的采样流量,采样体积为 10 L,苯会有漏出现象;而用同样的采样条件, 活性炭吸附剂应用于苯的采样, 则未发生漏出现象。 尽管吸附管的吸附能力和吸附剂与被吸附组分的性质、采样流量、温度、湿度、浓度和共存物等等有关,但是,其中的主要原因是 Tenax-TA 比活性炭对苯的吸附能力要弱。现行国家标准 GB 50325-2001 《民用建筑工程室内环境污染控制规范》 中规定, 空气中苯的采样采用活性炭吸附剂,TVOC 的采样采用 Tenax-TA 吸附剂。由于在 TVOC 的检测中,其中包含了苯的检测,为了省时省力,有些检测单位就以 TVOC 测定中的苯含量替代苯的检测,即对苯和 TVOC 的检测只做 TVOC 的检测,苯的数据就直接 TVOC 中报出。试验证明, 这种做法是不科学的, 因为在Tenax-TA吸附剂对苯的采样过程中,苯会有漏出现象发生,最终造成得到的 TVOC 测定中的苯含量结果会偏低。据此,笔者认为对于空气中苯的采样,其吸附剂不能用 Tenax-TA 替代活性炭。参考文献: GB50325-2001, 民用建筑工程室内环境污染控制规范

  • 做microRNA的,必须提取RNA检测基因表达水平的改变

    我们实验室主要是做microRNA的,所以必须提取RNA检测基因表达水平的改变。这里我就说说几点我自己的个人感受:一、关于组织标本的收集:听隔壁实验室说他们提取的RNA经常降解,他们认为主要原因就是标本的收集过程不够严格(由于客观原因,他们往往都是在标本离体一个多小时后才能收集到标本,对此他们也很无奈)。我们实验室每周都会派一名研究生去手术室收集标本。我们的要求是在组织离体30分钟内就放入液氮中,然后回实验室-80°长期保存。由于标本量大,我们基本上都会选择近半个月收集的标本来提取RNA,所以貌似到目前为止还没有出现过RNA降解的情况。二、关于RNA酶的失活:网上看过很多别人的经验,大多数意见是:RNA酶是导致RNA降解的罪魁祸首。我个人认为到不必如此,因为一个酶要发挥作用需要特定的温度和一定的时间。现在用试剂盒提取RNA也就半小时左右,而且还是冰上操作,因此还没有等RNA酶来得及发挥作用就全部操作完成了。但是对于预防RNA酶还是需要的。最开始我们选择用DEPC水来浸泡枪头和EP管,这确实是吃力不讨好的工作:DEPC对人体有毒而且易挥发;DEPC比较难于溶于水需要加温搅拌过夜才能完全溶解;DEPC如果不去除干净(主要是通过高压灭菌失活)会影响提取的RNA的质量。所以后来我们基本上抛弃这种方法了。现在我们采用的方法是:用XYGEN盒装的枪头(外面带包装好的塑料薄膜)和袋装的EP管,使用之前灭菌一遍即可。若暂时没有盒装的枪头,我们就用蛋白酶K溶液浸泡枪头和EP管15分钟,然后高压灭菌。个人觉得效果都很好。三、关于RNA提取的操作:组织的匀浆比较重要。貌似现在还是有不少实验室采用匀浆器研磨组织。我也试过,很累而且效果一般。我们现在用的是MP的匀浆仪,自动匀浆45秒钟即可,若觉得一次匀浆不够充分可以在冰上放置2分钟后再次匀浆45秒,匀浆效果非常好,但是费用比较贵:一个带有陶珠的匀浆管大约需要45RMB(一个管只能匀浆一个标本而且是一次性的)。后续的提取我们都是采用试剂盒的,方便且快捷。国产试剂盒50次的大约400多元。四、关于RT-PCR:其余不说,单独谈谈内参的选择。我们主要是做荧光定量PCR,RT做的不多。由于要通过内参来比较不同组织中某个基因的表达是否改变,所以我认为内参的选择相当关键。绝大多数文章都用GAPDH或者β-actin来做内参,但是不知道大家思考过没有:他们为什么这么选择,依据是什么,别人选择的内参是否也适合你自己的实验呢?答案是否。举一个我自己的例子。我是研究肾癌的,刚开始我选择用GAPDH作内参,得出的结果和且他文章上的不一致。当时我比较困惑:莫非别人都错了,就我是对的?(呵呵,自己都知道是不可能滴)后来经过查阅文献发现有人明确指出GAPDH不适合在肾组织中用作内参(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17559644?dopt=Citation)。换了一个文献中推荐的内参后,实验结果终于和别人一致了。其实随着实验经验的增长,RNA水平的操作相对于蛋白水平的操作(western-blot、免疫组化)要简单一些。我相信只要大家能多实践、多交流(尤其是上论坛看看别人的经验),做出漂亮的实验只是时间问题而已!附一张我们实验室MP匀浆仪的图片,推荐如果经费充足可以采购试试。 0 http://img.dxycdn.com/upload/2010/08/04/36174374.snap.jpg

  • EDTA-2Na的溶解

    求解,10%的EDTA-2Na好难溶解,可以在水浴锅里加热溶解么,会不会因为蒸发而稀释呢 求解

  • DNA测序问题大汇总

    以下问题是我摘抄的,当时记在我的记录本上,所以没有记下名字,很是抱歉。但是我想拿出来这是对大家的一种共享,所以祈求大家原谅。Q:我将PCR产物纯化后送测,结果说是双模板,测序峰重叠,请问是模板不纯吗?A:应该指的是模板不纯。可能是割胶纯化时,范围偏大,非目的基因片断亦混入其中。该非目的片断的大小与目的片断也类似。如果片断长度大的话,可以先连一下克隆载体,这样测序应该没有问题。 测序峰重叠不知道你讲的时双峰类型的还是指比较杂乱的而且无序的重叠: 如果是双峰(TP),有可能是标本来源是杂合子的缘故,如果是后者,原因很多,一般看打印出的测许结果大致可以判断。原因:1。有时候PCR产物可能就是失败的产物或者浓度很低。2.提纯不好,非目的片段保留。3.测序时Matrix等条件的错误。Q:测序结果不好,测序峰比较乱,基线不平,测许公司说含有复杂结构,现急需要该序列,请问高手这种情况该怎么办?有什么测许方法?A;我自己曾经亲自做过测序,对于这种情况,一般是有解决的方法的。不过公司不愿意为了你自己的一个样品去专门摸索条件。1. 最大可能是提取的质粒不纯,可以将质粒再次转化后挑单克隆重做(很奏效)。2. 直接在测序前的模板热变性使用86度,5分钟而不是大多数的96度3分钟3. 实在不行切后分别放到T载体上,一般都可以保证顺利读出序列。最后值得一提的是如果能自己根据理论序列给设计几个比较合理的测序引物可能一切就OK了。Q:上星期将我的PCR纯化产物拿到TAKARA测序,结果今天公司打电话来说测了100多个bp就读不下去了,建议我克隆后再测,我的PCR产物纯化只有很亮的一条带,不知道为什么测不出来。答:测不下去的原因主要是序列里面有困难序列,二级结构或短序列重复,比如发卡结构和AT长重复等,甲基化的影响不大清楚,本人认为不会影响测序。所以,PCR产物测不下去的话,克隆后也很难保证测过去。其实就测序来说,PCR产物还是质粒都无所谓,只要样品纯可以了。正向测不通反向再测也可能会测通,因为DNA中正链和反链二级结构不是完全一样的,正链中遇到困难序列在反链中可能相对简单,测序酶可能可以急需合成DNA。另外,还可以改一下测序PCR的反映条件等等,也可以测通。

  • 【分享】带你走进神秘的长链非编码RNA

    长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,它们并不编码蛋白,而是以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平。lncRNA起初被认为是基因组转录的“噪音”,是RNA聚合酶II转录的副产物,不具有生物学功能。然而,近年来的研究表明,lncRNA参与了X染色体沉默,基因组印记以及染色质修饰,转录激活,转录干扰,核内运输等多种重要的调控过程,lncRNA的这些调控作用也开始引起人们广泛的关注。哺乳动物基因组序列中4%~9%的序列产生的转录本是lncRNA(相应的蛋白编码RNA的比例是1%),虽然近年来关于lncRNA的研究进展迅猛,但是绝大部分的lncRNA的功能仍然是不清楚的。生物学功能许多lncRNA都具有保守的二级结构,剪切形式以及亚细胞定位,这种保守性和特异性表明它们是具有功能的。但lncRNA的功能相对于microRNA和蛋白质的功能来说更加难以确定,因为目前并不能仅根据序列或者结构来推测它们的功能。根据它们在基因组上相对于蛋白编码基因的位置,可以将其分为(1) sense, (2) antisense, (3) bidirectional,(4) intronic, (5) intergenic这5种类型。这种位置关系对于推测lncRNA的功能有很大帮助。[/si

  • CNAS、CMA非认可、认证项目管理

    小弟,做CNAS、CMA认可也有几年了,可始终对一些事情有疑问,现在罗列一下供大家讨论。1、CNAS、CMA是对认可项目的管理还是对实验室体系运作的管理。个人认为应该是对整个实验室的一种管理,否则只管理认可项目,对非认可不进行管理,对实验室整体质量提高是没有帮助的。但是否有文件支持小弟这种看法,我没有找到,有同样看法的朋友可以指点一下。2、对于一个实验室来说,主要业务都没有CMA资质,这样可以吗?所谓的“向社会出具具有证明作用的数据和结果”如何理解,如果一个工厂委托我给他测个物质纯度,我不知道他后续拿报告用来做什么,那我这种行为是否属于向社会出具公证性数据,如果我们认可这个参数,是不是我就不能进行这种活动。3、对于分包的管理分为认可项目分包和非认可项目分包1)认可项目分包,CNAS文件中有描述,不再赘述。2)非认可项目分包也分两种情况:(1)直接出外包方的报告书,相当于中介;(2)copy别人的数据出自己的报告书对于(2)中的行为小弟不是很认同,因为有时候可能实验室对于分包的项目完全不了解,根本不能有效的对分包数据进行确认,直接出具报告即是对客户不负责、也是对自身不负责。但这种行为实验室在经营过程中可能或多或少都经从事过,没办法赚钱嘛。小弟在这里想了解一下,CMA、CNAS是否明确的规定,允许你怎么做,不允许你怎么做。今天脑子比较乱,大家将就着看,希望能够通过此贴长期讨论。

  • tenax-ta填料是啥颜色的

    tenax-ta填料是啥颜色的,刚买的填料,感觉黄色的,以前用的采样管离得填料都是白色的,用久了才是黄色的,大家谁买过告诉我啊 ,在线等

  • tenax-ta吸附管的问题

    tenax-ta吸附管吸附同一化合物的量与吹扫时间有关吗,会不会随着吹扫时间增多吸附量减少?

  • Tenax-TA吸附管品牌求助

    大家能推荐几家Tenax-TA吸附管的品牌吗?之前没有买过,不知道都有哪些好的品牌,所以来请教各位专家,前辈,希望大家多多推荐,非常感谢!!

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制