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糖醛酸

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糖醛酸相关的资讯

  • 干货学堂 | 动物源性食品中激素多残留测定的前处理方法!
    素类药物主要包括雄激素、雌激素、孕激素、皮质醇激素等。激素类药物的应用,能够较为有效地提高养殖业的经济效益,但同时激素的滥用对人体健康的危害也是不容忽视的。一些养殖户片面追求经济利益,从而过度使用激素类药物,导致饲养动物体内的激素严重超标,所生产的肉类食品中也有大量的激素残留。如果食用这样的肉类食品,也会造成人体自身激素紊乱,给人体健康造成很大威胁。实验部分应用范围:动物源性食品/猪肉/猪肝/鸡蛋/牛奶/牛肉/鸡肉/虾检测方法:液相色谱-质谱/质谱法方法原理:试样中的目标化合物经均质,酶解,用甲醇-水溶液提取,经固相萃取富集净化,液相色谱-质谱/质谱仪测定,内标法定量前处理仪器:电子天平(感量0.0001 g和0.01 g);组织匀浆机;涡旋混合器;恒温振荡器;超声清洗仪;离心机(10000 r/min);固相萃取装置;氮吹仪;pH计;移液器。检测仪器:LC-MS/MS+ESI源实验制备1.动物肌肉、肝脏、虾从所取全部样品中取出有代表性样品约500g,剔除筋膜,虾去除头和壳。用组织捣碎机充分捣碎均匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于-18 ℃以下冷冻存放。2.牛奶从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g,充分摇匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于0 ℃~4 ℃ 以下冷藏存放。3.鸡蛋从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g,去壳后用组织捣碎机充分搅拌均匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于0 ℃~4 ℃ 以下冷藏存放。前处理方法1.提取称取5g试样(精确至0.01 g)于50mL具塞塑料离心管中,准确加入混合内标溶液(100μg/L)100μL和10mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液,涡旋混匀,再加入β-葡萄糖醛酸酶/芳香基硫酸酯酶溶液100μL,于37℃±1 ℃振荡酶解12h。取出冷却至室温,加入25mL甲醇超声提取30min,0℃~4℃下10000r/min离心10min。将上清液转入洁净烧杯,加水100mL,混匀后待净化。2.净化分别用6mL二氯甲烷-甲醇(7+3),6mL甲醇,6mL水活化ENVI-Carb固相萃取柱(500mg,6 mL),将提取液以2mL/min~3mL/min的速度上样。将小柱减压抽干。再将用6mL二氯甲烷-甲醇(7+3)活化好的氨基固相萃取柱(500mg,6mL)串接在ENVI-Carb小柱下方。用6 mL二氯甲烷-甲醇(7+3)洗脱并收集洗脱液,取下ENVI-Carb小柱,再用2mL二氯甲烷-甲醇(7+3)洗氨基柱,合并洗脱液后在微弱的氮气流下吹干,用1 mL甲醇-水(1+1)溶解残渣,供仪器测定。注意事项1.激素类标准物质及内标用甲醇配成1.0 mg/mL标准储备液,在-18 ℃以下避光保存,可稳定使用12个月。2.如果有条件,建议每种标准物质使用其对应的同位素内标进行校正。实在没有对应的同位素内标,选择与其化学性质最近似的同位素内标进行校正(参考国标方法)。3.β-葡萄糖醛酸酶只能冷藏,不能冷冻保存,否则会失活。4.由于上样液比较多,可以自制一种可控流速的大针筒,固定在ENVI-Carb小柱上面,一次加上全部提取液,提高净化富集效率。5.由于检测项目比较多,在浓缩过程中需要微弱氮气缓缓吹至近干,控制温度不高于35 ℃。6.国标方法中激素类标准物质比较多,需要根据检测的项目,制定不同的色谱方法。如果检测项目比较多,建议使用一根150 mm长的色谱柱进行分离。根据出峰时间,使用正负离子切换模式进行扫描,提高检测效率。参考文献:GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法猪肉、猪肝、鸡蛋、牛奶、牛肉、鸡肉和虾中激素类药物残留量测定的前处理流程图激素类药物信息表
  • 优瓦科技获 Acanthus 独家代理权
    广州优瓦科技有限公司获得Acanthus Research中国区独家代理权代理多个全球知名品牌化学品的广州优瓦科技有限公司,近日又传来佳音, Acanthus Research Inc.正式授予广州优瓦科技有限公司中国区独家代理权,全面负责Acanthus品牌在中国区的渠道建设、销售管理及售后服务等工作。中国化学品市场具有巨大的发展空间,目前约占全球40%的份额,这也自然成为各品牌争夺之地。然而有着质量优势的进口品牌,在中国的发展并不是想象的那么轻松;战略上的错误、管理不当或水土不服等问题,会导致产品淡出客户视线,成为一个过气的符号。而Acanthus Research Inc.选择广州优瓦科技有限公司成为其中国区独家代理商,也是看中了他的实力以及多品牌协同管理的成熟运作经验。关于Acanthus Research Inc.Acanthus Research Inc.是一个国际知名品牌,畅销美加等12个国家,有着20多年的合成有机化学研究经验,主要生产特种化学品,用作各行业的分析参考标准,包括合同研究组织、制药公司、学术机构等。 Acanthus主营产品稳定的同位素标记的类似物代谢物包括诸如葡糖苷酸的结合物降解产物和工艺杂质活性药物成分基因毒性杂质药典更新的相关物质所有产品均具有支持性分析数据和随附的认证文件,其产品符合或超过行业认证标准。此外,Acanthus Research Inc.能够提供定制认证,以满足制药行业的各种需求。Acanthus核心优势1、 向客户提供高纯度产品和全纯度信息,包括分析证书(NMR,MS,HPLC纯度)和MSDS,同时配有完整的分析摘要;2、 能够以市场绝对优势的价格提供复合化合物;3、 定制合成难以制造的化学品高达100克规模;4、 致力于研究未来的客户高需求产品上,产品目录时刻更新;5、 强大的售后服务能力,对产品负有绝对的质量保证。 部分具有综合挑战性的产品药物代谢产物麦考酚酸酰基葡萄糖醛酸苷奈福泮葡萄糖醛酸达比加群葡萄糖醛酸苷埃特罗波帕酰葡糖苷酸,其他标记药物雷帕霉素-13CD3N-羟基利唑唑13C 15N2醋酸阿比特龙D4阿达帕林D6,其他杂质克林霉素磷酸酯全杂质钙泊三醇EP杂质恩替卡韦杂质脆硼砂杂质,其他克林霉素脱氢克林霉素 2-磷酸盐 克林霉素2,4-二磷酸克林霉素3-磷酸 克林霉素4-磷酸 奥氮平 杂质奥氮平内酰胺奥氮平硫拉坦 卡泊三醇杂质卡泊三醇杂质A 卡泊三醇杂质D卡泊三醇杂质I 恩替卡韦杂质 恩替卡韦1-EPI恩替卡韦3-EPI恩替卡韦4-EPI恩替卡韦4-二甲基硅烷基USP杂质 恩替卡韦4-二甲基苯基硅杂质 恩替卡韦8-甲氧基USP杂质恩替卡韦8-羟基USP杂质专用定制合成
  • 乌氏黏度计测透明质酸钠(HA)的特性黏数
    透明质酸钠(HA),化学式为(C14H20NO11Na)n,是人体内一种固有的成分,是一种葡聚糖醛酸,没有种属特异性,它广泛存在于胎盘、羊水、晶状体、关节软骨、皮肤真皮层等组织、器官中。它分布在细胞质、细胞间质中,对其中所含的细胞和细胞器官本身起润滑与滋养作用,同时提供细胞代谢的微环境.它是将一种人体天然的"透明质酸"配合以其他促进细胞再生除皱药物制成一种凝胶,可以通过注射方法使用。透明质酸钠在化妆品中最重要的作用是保湿作用,与其他保湿剂相比,周围环境的相对湿度对其保湿性的影响较小。透明质酸钠是白色、类白色的粉末,也可能是白色或类白色的颗粒或粉末。是一个由葡萄糖醛酸和乙酰氨基己糖组成双糖单位聚合而成的一种高分子质量的直链黏多糖,其分子量为100万。在水中形成一种稠粘弹性的溶液,具有生理酸碱度及离子强度。其分子形态可变,故用较细的注射针也可通过。此外,透明质酸钠的含量测定颜色是紫色,可以通过葡萄糖醛酸的含量来确定透明质酸钠的含量。透明质酸钠主要应用于化妆品,食品以及医药领域,其中化妆品市场应用占比达55%以上。随着2020年12月28日,国家卫健委正式发布2020年第9号公告,正式批准透明质酸钠为新食品原料。随着透明质酸钠纳入新食品原料,透明质酸钠的使用范围有所扩大。受市场前景吸引,越来越多的企业入局透明质酸钠市场,包括华熙生物、众山生物、丰金生物等企业,随着市场参与者不断增加,未来透明质酸钠市场规模将进一步扩大。目前乌氏毛细管黏度计测透明质酸钠的特性粘度是行业内作为控制产品质量最为重要的指标之一。在YY/T1571-2017标准中明确了采用《中华人民共和国药典》中的通则0633第二法测定(即乌氏粘度计法),并且明确了采用氯化钠为溶剂,从而得出特性黏数。实验过程如下:1. 实验所需仪器:卓祥全自动粘度仪、自动配液器、万分之一电子天平、磁力搅拌器2. 实验所需试剂:氯化钠(分析纯)或者配置好的氯化钠,纯水。一、溶剂的配置:使用万分之一电子天平称量称量1.17g的氯化钠倒入25ml烧杯备用,加少量纯水溶解后倒入100ml定容瓶,再加25纯水到烧杯中冲洗并倒入100ml定容瓶,反复两次清洗烧杯后定容到100ml,混匀后贴上0.2mol/L氯化钠备用。二、溶剂粘度的测定:卓祥全自动粘度仪温场设置到25.00℃并且稳定后,加入0.2mol/L氯化钠12-15ml,软件中启动测试任务待结束。三、粘度管的清洗:启动卓祥全自动粘度仪清洗、干燥程序,仪器自动将粘度管清洗干燥后待用。四、透明质酸钠溶液样品的制备:在万分之一天平上精准称量精确到0.0001g,通过自动配液器将溶液浓度精准配制到0.00009g/ml(若样品中不完全是透明质酸钠,即按照含量算出需要称量样品多少质量才能达到这个测试要求),样品瓶放入搅拌子后在磁力搅拌器300R/min的转速搅拌1小时。五、样品粘度的测定:加入透明质酸钠溶液样品样品,启动软件中特定公式测试,待任务结束。六、粘度管的清洗:再次启动卓祥全自动粘度仪清洗、干燥程序,仪器自动将粘度管清洗干燥后待用。七、按以下式计算特性黏数:T/T0-----分别代表的是样品流经平均时间/溶剂流经平均时间,单位为秒(S);C ------溶液质量浓度的数值,单位为克每毫升(g/ml)分子量可通过相对分子质量导出,以上结果在卓祥全自动粘度仪软件样品测量结束后可自动生成报表查看,报表可导出打印。 未经过原作者或者现发布者的同意,任何个人或者单位都不可以转载和使用上述内容
  • 元旦优惠大酬宾“上海远慕生物”感谢一路有您!
    尊敬的各位客户: 值此辞旧迎新之际,为答谢全国客户朋友及终端客户对上海远慕生物的一贯支持,在2018年元旦来临前夕特举行一次特大优惠酬宾活动,预祝大家在2018年能够取得开门红的佳绩。 活动:以下是我司促销产品,更多优惠产品请联系客服! 甲基丙烯酸异癸酯/甲基丙烯酸异癸酯 吴茱萸次碱84-26-4 标准胎牛血清(碳吸附过滤) 酵母粉琼脂 大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒 醛品红染色液 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 小鼠细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 CAS:65039-10-3,氯化1-烯丙基-3-甲基咪唑 CAS:920-66-1,六氟异丙醇价格 CAS:63700-19-6,尿苷二磷酸葡糖醛酸现货供应 大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒 人5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒说明书 人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒说明书 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒,进口elisa试剂盒 活动时间:即日起至1月31日 注:活动期间,凡购买古朵指定产品即可享受特价优惠!本次活动的zui终解释权归上海远慕生物科技有限公司所有。 远慕生物,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品,赢得客户一致好评,欢迎来电咨询与订购!
  • 医疗污水处理过程中的微生物检测标准及方法解析
    为什么需要如此重视医疗污水和城镇污水监管工作呢?美国PM Gundy的研究团队曾在《Survival of Coronaviruses in Water and Wastewater》一文中指出,水体中的有机物和悬浮固体可以吸附冠状病毒,为病毒的存活提供了保护。同时,从污水流向的我们不难看出,粪便最终排到了污水处理厂,这些可能携带新型冠状病毒的废水,在污水处理中形成携带病毒的气溶胶,从而形成了气溶胶传播的环境,使污水处理人员成为感染风险较大的群体,对阻止疫情传播有很大的影响。因此,医疗机构、污水处理机构及环境监测部门,都是控制病毒通过污水传播的关键。 目前,为有效防止新型冠状病毒通过粪便和污水扩散传播,生态环境部门要求对要接收新型冠状病毒感染的肺炎患者或疑似患者诊疗的定点医疗机构(医院、卫生院等)、相关临时隔离场所及研究机构,严格执行《医疗机构水污染物排放标准》,并参照《医院污水处理技术指南》、《医院污水处理工程技术规范》和《新型冠状病毒污染的医疗污水应急处理技术方案(试行)》等有关要求,对污水和废弃物进行分类收集和处理,确保稳定达标排放;同时,地方生态环境部门要督促城镇污水处理厂切实加强消毒工作,结合实际,采取投加消毒剂或臭氧、紫外线消毒等措施,确保出水粪大肠菌群数指标达到《城镇污水处理厂污染物排放标准》要求。 通过对比以上标准发现,在这些污水处理过程中,粪大肠菌群数是评判污水处理是否合格的关键微生物指标。研究表明,污水中粪大肠菌群数量与肠道致病菌数量存在相关关系,当污水中粪大肠菌群数超过1174个/L时,即可在污水中检出病原菌,因此将粪大肠菌群数作为特征指示性指标对这些微生物进行控制。 根据检测方法、应用领域和污染情况的不同,各标准中对粪大肠菌群数的限量也不同(表1)。目前,可用于检测水体中粪大肠菌群数的方法有4种,分别是多管发酵法、膜过滤法和快速荧光检测法、酶底物法,其中前三种认可度较高,且使用较广泛。 1 膜过滤法 膜过滤法是目前最常用于水体中粪大肠菌群数检测的一种标准方法,也是《新型冠状病毒污染的医疗污水应急处理技术方案(试行)》中的指导方法,可于地表水、地下水、生活污水、工业废水及医疗污水等样本的检测。 该方法使样品通过孔径为0.45μm的滤膜过滤,细菌被截留在滤膜上,然后将滤膜置于MFC选择性培养基上,在特定的温度(44.5℃)下培养24h,胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长,粪大肠菌群能生长并发酵乳糖产酸使指示剂变色,通过颜色判断是否产酸,并通过对呈蓝色或蓝绿色的菌落进行计数,从而测定样品中粪大肠菌群浓度。 膜过滤法的关键在于样品前处理,需借助抽滤装置才可完成,使微生物被截留在无菌滤膜上,并通过物理的方式进行富集,以保证粪大肠菌以菌落形态被检出。目前,市面上已有较为成熟、有效的的水中膜过滤装置,可用于水体中微生物前处理操作。专为水质样品前处理、富集等操作设计;结构精巧,配合精密抽滤泵,保证良好的抽滤效果;不锈钢材质,可高温高压灭菌,避免交叉污染;直抽直排,防止废液倒吸。 2 多管发酵法 多管发酵法又称最大可能数(most probable number,MPN)法或稀释培养计数法,该方法是用于检测地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定中粪大肠菌群数的一种标准方法。 该方法是一种基于泊松分布的间接计数法,利用统计学原理,根据一定体积不同稀释度样品经培养后产生的目标微生物阳性数,查表估算一定体积样品中目标微生物存在的数量(即单位体积存在目标微生物的最大可能数)。 采用多管发酵法时,先将样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中,37℃初发酵富集培养,大肠菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸产气,产生的酸使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色,产生的气体进入倒管(杜氏小管)中,指示产气。然后再44.5℃复发酵培养,培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长,最后产气的细菌确定为是粪大肠菌群。最后通过查MPN表,即可得出粪大肠菌群浓度值。 实验小贴士 该方法在操作过程中,根据样品检出限的不同,可选择12管法(检出限为3MPN/L)或15管法(检出限为3MPN/L)进行实验,因此需要大量使用试管和液体培养基(每个样品需准备12或15支试管)。若检测样品量较大时,建议可采用培养基分液器来降低工作量。可用于生理盐水、液体及半固体培养基自动分装;1L溶液分装到100个MPN法试管中,最快仅需2分钟;微电脑系统与精密泵体联合控制,分装精度高;分装量、分装速度、分装时间、停顿时间、分装次数等参数可自由设定。 采用自动微生物试剂分液器进行实验用品准备,不仅能实现准确的连续分装,还可在保证进度的同时,大大降低工作量。 3 快速荧光检测法 快速荧光检测法是一种利用ATP荧光原理与微生物特性相结合的快速检测方法,虽然该方法暂未被纳入国家标准中,但由于其操作方便,检测与培养时间短(仅为膜过滤法、多管发酵法的1/3),目前被很多大型企业作为内部微生物自检的一种重要手段。通过与对应的采样、增菌拭子配合使用,可快速检测水体中粪大肠菌群数量。 快速荧光检测法是在荧光素酶(lueiferase)和Mg2+的作用下,荧光素(lueiferin)与ATP发生腺苷酰化反应后被活化,活化的荧光素与荧光素酶相结合,形成了荧光素-AMP复合体焦磷酸(PPi)。该复合物在氧化作用下,产生荧光信号。通过ATP检测液检测微生物ATP的发光量,达到检测细菌的目的。该方法现已获得AOAC研究机构的检测方法性能担保认证。 目前,杭州大微已开发了DW-ES800型微生物实时检测系统,该系统基于ATP荧光快速检测法,采用双模块设计,实现对水体中粪大肠菌群、大肠菌群、大肠杆菌、细菌总数等多种微生物的检测和计数。耗时短:培养时间短(定性8小时,定量1~8小时),检测时间仅需15秒范围广:细菌总数、大肠杆菌、总大肠菌群、粪大肠菌群等多种微生物效率高:双培养通道,可同时培养不同温度微生物易操作:五步即可完成(增菌拭子采样→培养→转移→检测拭子激活→检测)可将RLU值转换为CFU值 4 酶底物法 酶底物法是检测水体中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的一种标准方法。该方法是利用在特定温度下培养特定的时间,总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌能产生特定的β-半乳糖苷酶将选择性培养基中的无色底物邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)分解为邻硝基酚(ONP),呈黄色反应;且大肠埃希氏菌同时又能产生β-葡萄糖醛酸酶将选择性培养基中的4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)分解为4-甲基伞形酮,在紫外灯照射下呈荧光反应。统计阳性反应出现数量,查MPN表,再除以接种样品的稀释度。计算相应水样中总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌的浓度值。由于操作起来较为繁琐,工作量巨大,故在日常检测中很少被使用。
  • 新成果:5小时可创建脂类串联质谱谱库
    通过部分脂类成员的化学结构建立谱库  来自美国和日本的科学家仅仅耗时五个小时就建立了一类新发现的脂质的串联质谱(MS/MS)谱库。一般而言,建立这样一个谱库需要更长的时间,科学家使用了一款新研发的软件缩短了研究时间。这是一款从化学结构推测质谱图的软件工具。  该软件被称为LipidBlast,是由Oliver Fiehn和他的同事们在加州大学研发的。Davis去年在《Nature Methods》杂志发表了一篇论文将此软件首次公开。LipidBlast创建一个特定类别脂质的质谱库的步骤是:首先,分析这类脂质中已知成员的化学结构。然后,使用这些信息来推测具有相似结构的此类物质的其它可能成员。接下来,此软件将部分已知成员的化学结构与之前研究得到的已知成员的串联质谱数据相关联。最后,它利用这些关系来确定含有已推测成员在内的所有其余成员的MS/MS谱图,包括母离子和子离子。一经验证,通过对比实验数据和检索MS/MS谱库,得到的谱库就可以用于鉴别LC-MS/MS分析的生物样品中的这些物质。此软件灵活性很强  由于脂类在串联质谱中容易形成可预知的碎片,所以尤其适合此软件电脑谱库的创建。而且,LipidBlast非常灵活,足以应付推测正、负离子下或不同的外加电压下的MS/MS谱图。在建立谱库时,这种灵活性使得它能够利用40种高或低分辨率质谱仪的谱图,包括三重四极杆质谱仪和傅里叶变换质谱仪。  Fiehn和他的同事利用LipidBlast 建立了一个基本演示MS/MS谱库,包含212,516张谱图,覆盖26种脂类物质的119,200种化合物。这些化合物包括磷脂类、甘油脂类、细菌脂聚糖类和植物糖脂类。他们已经使用这个库来识别了藻类、有鞭毛的原生生物和哺乳动物干细胞中的脂质。能应对低磷水平的脂类家族  最近,Fiehn已将注意力转移到了一类特殊的脂类&minus 葡萄糖醛酸糖脂(glucuronosyldiacylglycerol,GlcADG)。它是近期日本科学家从植物中发现的一种脂类。由于GlcADG可以代替植物细胞膜上的磷脂,所以可以帮助植物应对低磷水平。虽然这种脂类首先在植物中发现,但它也可能出现在细菌、真菌和藻类等其他生物中。  为了与最初发现这类脂质的日本科学家们一起在其它有机体中寻找这类脂质,Fiehn和他的一位同事使用LipidBlast创建了一个GlcADG类的MS/MS质谱库。照例,这需要利用日本科学家先前得到的MS/MS谱图和植物中GlcADG类物质的化学结构,以及相似脂类成员的化学结构。最终的谱库包含15,000 张MS/MS谱图,建成仅耗时5小时。  &ldquo 这项工作不仅有希望通过GlcADG来扩展已知有机体的范围,而且也从另一个方面体现了LipidBlast快速创建MS/MS谱库的能力&rdquo ,Fiehn说。他们还开发了应用于新型脂类的免费模板,用来鼓励其他研究人员使用这款软件。  编译:郭浩楠
  • 岛津赋能北京疫苗与抗体创新国际论坛
    在全球病毒感染性疾病此起彼伏的形势下,人们把疾病的预防提升到了一个新的高度,尤其是免疫疫苗、抗病毒疫苗、抗肿瘤疫苗已成为开发的热点。为了进一步推动我国疫苗抗体药物研究领域的发展,促进国际研发合作,第三届北京疫苗与抗体创新国际论坛于2021 年7月8-9日在北京亦庄生物医药园成功举办,岛津企业管理(中国)有限公司(以下简称“岛津”)受邀参加了此次大会,发表最新报告并分享疫苗抗体最新技术。此次论坛受到了中国生物器材网、分析测试百科网及仪器信息网等多家业内知名媒体的关注,论坛除主会场外共设置疫苗研发与评价、生物制药研发技术及生物制药研发技术三个专题。论坛首日主会场,岛津分析计测事业部市场部程汉兴发表了题目为《助力创新,岛津赋能中国疫苗与抗体行业发展方案》的报告。 岛津分析计测事业部市场部程汉兴 在报告中程汉兴首先介绍了岛津有关抗体药物以及疫苗相关工作,以抗体药物为例,围绕工艺监测和质量控制推动生物药高质量发展。岛津现有基于LC MS/MS方法的培养基和工艺监测方案可以通过离线和在线模式实现分析培养基以及细胞上清液中有机组分,监控培养基中的氨基酸,核苷酸等125种以上物质浓度变化,研究培养基中营养成分消耗变化,进而优化培养基配方及补料成分,保证抗体产品高质量生产。 从质量分析角度,在抗体以及抗体偶联药物(ADC)的表征分析实验中,可利用岛津生物兼容型液相以及高分辨飞行时间质谱,可以分析抗体的分子量,蛋白序列,二硫键以及糖型分析。如需要对抗体偶联药物关键参数DAR值进行研究,可使用针对ADC专门开发的SHIMSEN Ankylo HIC-Butyl色谱柱,可有效实现不同偶联药物抗体的分离,岛津将提供从色谱到耗材等整体解决方案。 在疫苗研究方面,程汉兴还介绍了岛津多年来与用户合作开发的多种类型疫苗解决方案。利用生物兼容型液相分析病毒疫苗抗原蛋白含量测定,使用LC-MS/MS用于百白破疫苗成品中多种抗原蛋白的定量以及TCT毒素分析。针对肺炎多糖结合疫苗,使用液相质谱快速定量糖醛酸等成分,效率大大提升。围绕mRNA疫苗相关的核酸定性分析,使用高分辨飞行时间质谱可以对核酸分子量及序列进行定性表征。 现场传真 大会期间,岛津设立相应展位与参会的专家学者进行交流,与嘉宾一同交流探讨岛津有关抗体药物以及疫苗相关方案,主要围绕工艺监测和质量控制以推动生物药高质量发展。
  • ADME系列—肾脏代谢在药物研发中的重要性
    众所周知,肝脏是药物代谢的主要器官。但是,随着分子生物学如蛋白质分离纯化技术、免疫抗体标记及cDNA技术的发展和应用,越来越多的药物代谢酶在肝外组织和器官中被发现。再加上药物代谢研究的不断深入,人们逐渐发现有些药物在肝内和肝外都有代谢,而有些药物的部分代谢过程仅在肝外的特定组织进行,如维生素D3的1位羟化仅于肾脏中代谢,更加证实了肝外组织在药物代谢过程中发挥着重要作用。1 药物的肾脏代谢除了维持水和电解质平衡的生理功能以及排泄内源性和外源性物质外,肾脏也是Ⅰ相和Ⅱ相代谢生物转化的重要器官。肾脏中的药物代谢酶主要分布于肾皮质和肾髓质中,尤其是肾皮质中酶的种类更丰富。图1 肾脏的解剖结构示意图(来源:百度图片)肾中的Ⅰ相代谢酶主要有P450 酶、脱氢酶及各种单加氧酶等,但其含量或活性均明显低于肝脏药酶,所以药物在肾脏中的 I 相代谢处于次要地位。肾中的药物代谢酶主要是Ⅱ相代谢酶,如葡萄糖醛酸转移酶硫酸转移酶、谷胱甘肽-S-转移酶、N-乙酰化酶和氨基酸结合酶等,因此Ⅱ相代谢在药物的肾代谢中占据主要的地位。表 1 肾脏中主要代谢酶的分布情况注:“√”代表有该酶分布;“×”代表没有该酶分布。来源:王广基, 刘晓东, 柳晓泉. 药物代谢动力学[M]. 化学工业出版社, 2005.肾脏是机体重要的排泄器官,药物进入机体后,以原形或者代谢物经肾脏排泄。药物在肾脏中的代谢促进了药物靶向性组织分布系统的发展,药物的靶向性组织分布避免了药物的一些副作用。药物在肾中代谢后,可以使其排泄和重吸收发生改变。除了甲基化代谢物外,大多数结合反应会产生极性更强的代谢物而被迅速排出体外。由于肾脏是药物的主要消除器官,肾功能的改变将会直接影响到药物经肾脏的代谢和排泄,对于肾功能障碍的病人,在用药时应格外谨慎,制订相应的给药方案。2 IPHASE肾脏代谢产品及优势IPHASE凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验,开发出了不同种属动物的肾微粒体、肾S9、肾胞质液、肾匀浆等产品,助力于药物的肾脏代谢研究。l 酶活高 酶活可对标或高于同类进口产品l 批量生产 采用批量生产方式,库充充足,可保证同一批次产品的供应l 货期短 国内现货,保障客户使用需求l 售后服务机制健全 有专业技术人员提供全方位服务l 可定制 可提供特定物种、特定模型和特定年龄等非常规样品的定制服务表2 IPHASE肾微粒体产品表3 IPHASE肾S9产品表4 IPHASE肾胞质液产品发 文 章 得 奖 励凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品:非SCI论文及IF≤5分,500元礼品;5分<IF≤10分 800元;10分<IF≤15分 1000元;IF≥15分 2000元;活动多多,礼品丰厚,快来参与吧!关 于 我 们汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
  • 喜讯:北京市公安司法鉴定中心使用IPHASE产品发表高质量文章!
    近日,山西医科大学法医学院,法医学山西省重点实验室、北京市公安司法鉴定中心,法庭毒物分析公安部重点实验室、中国人民公安大学侦查学院、上海市法医学重点实验室,司法部司法鉴定重点实验室(司法鉴定科学研究院)、 天津市公安局禁毒总队,使用IPHASE品牌产品:体外代谢研究试剂盒、混合人肝微粒体(20mg/mL)、NADPH 再生 A 液和 B 液、0.1 mol/L 磷酸盐缓冲液以及尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA),在《中国法医学杂志》期刊发表文章《合成大麻素 MDMB-4en-PICA 的体内和体外代谢研究》。【摘要】目的 随着新型合成大麻素的演变,其在体内代谢速度增快,对原药的检测难度增加,为确定是否吸食合成大麻素,其生物标志物可以作为强有力的证据,常见的代谢模型有体内代谢模型和体外代谢模型。方法 本研究采用液相色谱 - 高分辨质谱技术检测斑马鱼体内代谢模型和人肝微粒体体外代谢模型中 MDMB-4en-PICA 的代谢情况,并使用 Trance Finder 4.1 通用版进行数据采集和 Compound Discoverer 2.1 版本进行代谢物鉴定。结果 斑马鱼模型代谢产生 26 种代谢物,人肝微粒体模型代谢产生 17 种代谢物,总共 32 种代谢物,其中包括 23 种Ⅰ相代谢物和 9 种Ⅱ相代谢物,涉及 10 种代谢途径。结论 结果显示,两种模型中二氢二醇代谢物(M16)的峰面积均最高,其次是羟基化代谢物(M22),而且具有一定的特异性,可以推荐作为 MDMB-4en-PICA 潜在的生物标志物。【关键词】 LC-HRMS;体内外代谢模型;代谢物;生物标志物发 文 章 得 奖 励凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品:非SCI论文及IF≤5分,500元礼品;5分<IF≤8分 800元;8分<IF≤10分 1000元;IF≥10分 2000元;注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券;活动多多,礼品丰厚,快来参与吧!关 于 我 们汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
  • 生物试剂的分类
    ELISA试剂盒生物试剂涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 (1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。ELISA试剂盒(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。 除了上述四个级别外,ELISA试剂盒目前市场上尚有:基准试剂(PT:Primary Reagent):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。光谱纯试剂(SP:Spectrum pure):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。玉米粉琼脂 Corn Meat Medium 250 用于真菌培养沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar250用于真菌检测(GB标准)沙氏BHI琼脂Sabouraud BHI Agar250用于真菌检测(Acumedia 方法)沙门氏菌显色培养基Salmonella Chromogenic Medium1000ml用于沙门氏菌的显色培养三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar250生化培养基,用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(GB、SN标准)噻孢霉素 A1.25μg/支*5添加于100ml HB0121中乳糖肉汤 Lactose Broth250用于食品中沙门氏菌检验前增菌乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂LMG Agar250用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)乳糖复发酵培养基 Lactose Broth250用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth250用于饮用水,水源水中总大肠菌群的测定(GB标准)乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth250用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar250用于大肠杆菌固体平板测定,肠道菌选择性分离庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar250用于霍乱弧菌选择性分离培养茜素-β-半乳糖苷琼脂Aliz-gal Agar250用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)普通肉汤培养基 Broth Medium250用于金黄色葡萄球菌的增菌培养(SN标准)葡萄糖胰蛋白胨琼脂Glucose Tryptone Agar250用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)葡萄糖琼脂Dextrose Agar250用于细菌的综合生化试验葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium250用于志贺氏菌的复合生化试验(GB标准)葡萄糖铵培养基  Ammonium Dextrose Medium250用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验(GB标准)葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth250用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌葡萄球菌选择性琼脂110(CHAPMAN 琼脂)Staphylococcus Selective Agar NO.110 250用于金黄色葡萄球菌的分离培养
  • 农业部就《食品中195种农药最大残留限量》征求意见
    农农(农药)[2011]第20号  根据《食品安全法》及相关规定,我司组织拟订了《食品中2,4-滴等195种农药最大残留限量》和《豁免残留限量农药名单》等2项食品安全国家标准征求意见稿。现公开征求意见,请于2011年8月15日前将意见反馈我部农药检定所。  联 系 人:单炜力  电  话:010-59194253  传  真:010-59194107  电子邮箱:nyclbz@agri.gov.cn  农业部种植业管理司附录:《食品中2,4-滴等195种农药最大残留限量》附表: 豁免制订食品中最大残留限量标准的农药名单序号农药(中文)农药(英文)1矿物油petroleum oil2石硫合剂lime sulfur3硫磺sulfur4硅藻土silicon dioxide5苏云金杆菌bacillus thuringiensis(Bt)6荧光假单胞杆菌pseudomonas fluorescens7枯草芽孢杆菌brevibacterium8蜡质芽孢杆菌bacillus cereus9地衣芽孢杆菌bacillus licheniformis10短稳杆菌empedobacter brevis11多粘类芽孢杆菌paenibacillus polymyza12放射土壤杆菌agrobacterium radibacter13木霉菌trichodermasp14白僵菌beauveria15淡紫拟青霉菌paecilomyces lilacinus16厚孢轮枝菌verticillium chlamydosporium 17耳霉菌conidioblous thromboides18绿僵菌metarhizium anisopliae var acridum19寡雄腐霉菌pythium oligadrum20菜青虫颗粒体病毒pierisrapae granulosis virus(PrGV)21茶尺蠖核型多角体病毒ectropis oblqua hypulina nuclear polyhedrosis virus(EONPV)22松毛虫质型多角体病毒dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus(DpCPV)23甜菜夜蛾核型多角体病毒spodoptera litura nuclear polyhedrosis virus(SpltNPV)24粘虫颗粒体病毒pseudaletia unipuncta granulosis virus(PuGV)25小菜蛾颗粒体病毒plutella xylostella granulosis virus (PxGV)26斜纹夜蛾核型多角体病毒spodoptera litura nucleopolyhedrovirus (SINPV)27棉铃虫核型多角体病毒helicoverpa armigera nuclear polyhedrosis virus(HaNPV)28苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒autographa californica nuclear polyhedrosis virus(AcNPV)29三十烷醇triacontanol30赤霉酸gibberellic acid31地中海实蝇引诱剂trimedlure32聚半乳糖醛酸酶polygalacturonase33烯腺嘌呤enadenine34苄氨基嘌呤6-benzylamino-purine35羟烯腺嘌呤oxyenadenine36超敏蛋白Harpin protein37S-诱抗素S-Abscisic Acid38香菇多糖fungous proteoglycan39几丁聚糖chltosan40葡聚烯糖pujuxitang41氨基寡糖素oligosaccharins
  • 前沿 | 安捷伦质谱助力七叶树药效成分研究,揭示七叶皂苷和七叶素生物合成进化机制
    2023 年 10 月,陈士林团队在《自然-通讯》(Nature Communications) 发表“Characterization of the horse chestnut genome reveals the evolution of aescin and aesculin biosynthesis”的文章,作者采用多组学研究策略和质谱技术揭示了天然药物七叶皂苷和七叶素特异性合成的分子机制,并在大肠杆菌中实现了七叶素的绿色生物合成。研究背景现代植物化学和药理学的研究证明,草药中特异性积累的有效成分是其发挥药效的物质基础,七叶树属植物是一种温带北半球的多年生树木,该属植物由于分别含有药用活性成分七叶皂苷和七叶素被广泛应用于临床。七叶皂苷(玉蕊醇型三萜皂苷)制剂已经在临床中以口服、静脉注射和局部涂抹的方式广泛使用,用于治疗慢性静脉功能不全、水肿和痔疮等疾病。七叶素(香豆素类成分),也被称为 6,7- 二羟基香豆素 -6-O- 葡萄糖苷,与地高辛一起被广泛用作常见的眼药水七叶洋地黄双苷滴眼液的原料,以缓解眼疲劳、眼痛和干眼等症状。然而,目前对于这两种有效成分的合成、调控和转运机制的分子遗传学研究还相对薄弱。研究结果此次发表的研究通过空间代谢组揭示七叶皂苷在七叶树属植物娑罗子的子叶中特异性积累,解析了中华七叶树高质量基因组,并通过代谢组学、转录组学以及合成生物学技术等方法,成功解析七叶皂苷生物合成途径中关键的环化、氧化、酰基化和葡萄糖醛酸化等催化步骤。同时,课题组通过全被子植物基因组层面共线性研究发现该类三萜代谢基因簇的招募和进化模式,更好地理解了玉蕊醇型三萜类化合物在无患子目植物中的形成机制。针对七叶素的合成途径,研究团队根据关键基因在基因组中存在的拷贝数目及表达模式,筛选和验证了合成过程中关键基因的功能,在大肠杆菌中重建了七叶素的生物合成途径并完成了七叶素的绿色合成。研究结论本文以具有重要药用价值的七叶树为研究对象,综合运用基因组、转录组、代谢组、空间代谢组以及合成生物学等多种技术手段,揭示了七叶树中高价值代谢物七叶皂苷和七叶素的生物合成及进化过程。其意义在于,一方面为推动这些活性化合物的生物合成研究进展以促进其生产应用提供了良好的基础,另一方面为其他药用树木代谢物相关研究提供了良好的研究范式。专家团队此次发表的论文的共同第一作者为中国中医科学院中药研究所孙伟、尹青岗、万会花、高冉冉,共同通讯作者是中国中医科学院/成都中医药大学陈士林、北京化工大学孙新晓、东北林业大学徐志超。本草基因组学团队负责人陈士林院士 2022 年组织发布了千种本草基因组研究计划,在《创新》(The Innovation)、《自然-植物》(Nature Plants)、《分子植物》(Molecular Plant)、《自然-通讯》(Nature Communications) 等国际著名刊物发表了一系列的草药基因组学研究成果,极大地推动了学术界从分子遗传学层面理解中草药中有效成分的合成、转运、积累和调控,助力天然产物药物的绿色生物合成以及高含量药效成分品种的精准选育。参考文献:[1] Sun W, Yin Q, Wan H, et al. Characterization of the horse chestnut genome reveals the evolution of aescin and aesculin biosynthesis[J]. Nature communications, 2023, 14(1): 6470.
  • Mol Cell|北大伊成器课题组开发新型RNA编辑技术RESTART
    2022年12月14日,北京大学伊成器课题组在Molecular Cell杂志在线发表了题为CRISPR-free, programmable RNA pseudouridylation to suppress premature termination codons的研究论文,首次报道了名为RESTART(RNA Editing to Specific Transcripts for Pseudouridine-mediAted PTC-ReadThrough)的新型RNA单碱基编辑技术。该技术利用改造的guide snoRNA,招募细胞内源的假尿苷合成酶复合物,在RNA特定位点处实现高效、准确地尿苷(U)到假尿苷(Ψ)的编辑。在mRNA的无义突变位点精准引入假尿苷修饰,将提前终止密码子转换成ΨAA、ΨAG或ΨGA,以实现提前终止密码子的通读及功能蛋白的全长表达。无义突变(Nonsense mutation)是基因序列中编码氨基酸的密码子突变成终止密码子(TAA,TAG,TGA)的单碱基突变。无义突变产生提前终止密码子(Premature termination codon,PTC),导致翻译提前终止,产生较小、不具功能的蛋白产物。根据人类基因突变数据库(Human Gene Mutation Database, www.hgmd.org)的统计,无义突变占据了超过20%的疾病相关单碱基突变。目前有多种潜在的技术可用于治疗无义突变疾病,但仍存在局限性。例如:(1)CRISPR/Cas9依赖的DNA碱基编辑技术可实现精准的碱基修复,但是仍存在安全性问题。细菌来源的Cas蛋白可能会引发人体免疫反应;并且一旦出现基因组水平上的脱靶,将会是永久性的。此外编辑元件尺寸较大,使药物的体内递送受到限制。(2)RNA碱基编辑技术是在RNA水平上进行的,不会对基因组序列进行永久改变,因此安全性较高。但是,RNA编辑工具的脱靶效应仍存在安全隐患。因此,领域内亟需拓展新型RNA编辑工具,开发更加特异和安全的RNA编辑器。图一、RESTART技术原理研究表明,RESTART技术具有广泛的适用性。在多种不同组织来源的细胞系以及人的原代细胞——例如支气管上皮细胞和皮肤成纤维细胞中,RESTART都可以介导高效和精准的编辑。在对疾病无义突变修复和蛋白功能恢复的诸多应用尝试中,RESTART的高效性均得到了充分验证,反映了该技术在疾病治疗中的巨大潜力。例如,RESTART成功恢复了来源于Hurler综合征小鼠的α-L-艾杜糖醛酸酶缺陷细胞中IDUA蛋白的功能。该技术为无义突变疾病的治疗和RNA假尿苷修饰的基础研究都提供了一种全新的工具。传统的RNA编辑技术主要是通过脱氨反应(如A-to-I或者C-to-U)实现碱基编辑,其产生的脱靶会在RNA上引入突变,从而存在安全隐患。与这些技术不同,假尿苷修饰不会改变碱基互补配对,不会影响密码子的编码信息;RESTART产生的少量脱靶也不会影响RNA的稳定性和蛋白的翻译。此外,RESTART系统是由人源的snoRNA和修饰酶衍生而来的,理论上可以避免免疫原性。因此RESTART是一个高效且安全的潜在治疗技术。综上,RESTART技术作为一种可编程的不依赖CRISPR的RNA假尿苷编辑技术,拓展了RNA编辑的策略,可通过高效编辑mRNA上的无义突变位点介导翻译通读和蛋白功能的恢复,并且具有较好的安全性,展现了良好的疾病应用前景。在递送方面,RESTART适用于装载至腺相关病毒(AAV)等载体中进行递送;并且guide snoRNA可以通过体外转录和体外合成等多种方式制备,未来也可以与小RNA递送体系,例如GalNAc3进行偶联。除此之外,RESTART技术也将推动假尿苷修饰领域的研究,为该领域基础研究和无义突变疾病治疗领域都提供有利的工具。北京大学生命科学学院伊成器教授为该论文的通讯作者,课题组博士后宋靖慧(已出站)、博士生董利婷、孙含笑、罗楠、博士后黄强为共同第一作者。该工作得到农业部项目、科技部重点研发计划、国家自然科学基金等项目资助以及北大-清华生命联合中心、蛋白质与植物基因研究国家重点实验室等的支持。北京大学高性能计算平台,生命科学学院仪器中心及凤凰工程等多个平台对本项目提供了重要的技术支撑。原文链接:https://www.cell.com/molecular-cell/fulltext/S1097-2765(22)01100-5
  • 香港浸会大学蔡宗苇团队研究发现:双酚S暴露或增加患癌风险
    香港浸会大学环境与生物分析国家重点实验室近期的科学研究有新发现。实验室主任、化学系教授蔡宗苇教授带领团队公布最新科研成果:双酚S暴露,会使乳腺肿瘤增大,为罹患乳癌带来风险。通过蔡教授团队此前的研究发现,牙膏中存在的三氯生成分会损伤肠道,成为引发炎症性肠道疾病的元凶。蔡宗苇教授表示:“在工业生产中,双酚A被较少研究的化学物质双酚S所取代。由于我们的研究显示,双酚S或与乳腺肿瘤增生有潜在关联,故此有必要做进一步研究,了解这种化学物对人体健康的潜在影响。长远而言,业界或需寻找较为安全的双酚A和双酚S替代品。决策者也应就使用双酚S制定相关的安全标准和规划。”众所周知,双酚A是一种过往被广泛应用于生产婴儿水壶、食物及饮料容器及餐具的塑化剂,以及打印收据的感热纸中做显色剂等,由于被证实与人体内分泌系统失调、代谢疾病及乳癌风险增加有关,近年来,工业界较多改用双酚S作为替代品。双酚S是人们日常生活中经常接触到的工业化学物质接替双酚A的双酚S是否对人体健康安全、无害?对于令广大女性谈及色变的乳癌,暴露的双酚S是否对其产生、恶化也会带来影响?科学界仍然知之甚少。2022年1月18日,蔡宗苇教授在新闻发布会上介绍基于双酚S的最新研究成果。研究团队通过小鼠实验发现,双酚S同样会有令乳腺肿瘤增生及增加患癌风险。不同剂量的双酚S(BPS)暴露,与乳腺肿瘤增生和恶化相关。蔡宗苇教授在新闻发布会上上介绍双酚S的最新科研成果研究团队将人的乳腺癌细胞移植至三组小鼠身上进行试验,在对小鼠乳腺肿瘤造模后,第一组(BPS-10组别)小鼠每天被注入较低剂量的每公斤体重10微克双酚S,为期8周;第二组(BPS-100组别)小鼠每天被注入较高剂量的每公斤体重100微克双酚S;剩余属于对照组的小鼠则被注入橄榄油。研究团队通过小鼠实验观察双酚S对乳腺肿瘤的影响经过八周的实验,BPS-10组别小鼠的肿瘤平均体积和重量,分别多对照组13倍和11倍,而BPS-100组别小鼠肿瘤的平均体积和重量则多对照组4倍和4.5倍。实验结果显示,双酚S会增加肿瘤体积及重量。研究团队随后分析了三组小鼠乳腺肿瘤的坏死区和癌细胞聚集区,他们观察到两组被注入双酚S的小鼠,其肿瘤体积增加的同时,与肿瘤增生和恶化有关的细胞排列和分布也出现了变化。BPS-10和BPS-100组别的坏死区的平均面积,分别占肿瘤的54.7%和11.5%。低剂量双酚S加快肿瘤生长,高剂量双酚S或最终令肿瘤恶化。实验证明双酚S暴露会引发乳腺肿瘤增生及恶化实验证明双酚S暴露会增加乳癌风险蔡教授介绍说,在团队的研究实验过程中识别出六个调节肿瘤生长的脂质生物标志物以及十二种蛋白质生物标志物的分布,包括与乳腺肿瘤增生和恶化密切相关的蛋白质。在脂质分布研究中,团队推断出有双酚S暴露,调节肿瘤生长的脂质的代谢会受到干扰。脂质和蛋白质标志物的发现有望日后应用于乳腺的分析检测。此次双酚S研究团队除了香港浸会大学的科学家外,还包括中国科学院深圳先进技术研究院及西安交通大学的研究人员。研究成果已刊登于国际科学期刊《journal of Hazardous Materials》。2022年1月,国际著名学术期刊《自然 通讯》刊发了题为“Microbial enzymes induce colitis by reactivating triclosan in the mouse gastrointestinal tract”的文章,揭示了一种应用于牙膏、化妆品、瑜伽垫以及其他运动服装中具有抗菌功能的添加剂三氯生,会造成肠道损伤,从而引发肠道炎症疾病。该项研究同样由蔡教授带领实验室科研人员,与美国马赛诸塞大学和北卡罗莱纳大学教堂山分校的学者们共同进行。研究人员将特定的肠道微生物酶,特别是肠道微生物β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)蛋白与三氯生连接,并表明这些酶驱动三氯生在肠道中制造严重破坏。在知道哪些细菌蛋白是罪魁祸首后,研究小组利用一种微生物靶向抑制剂来阻断肠道中的三氯生作用。在小鼠中阻断这一过程可防止结肠损伤和结肠炎的症状。该研究为越来越多的被诊断为炎症性肠病的人群提供了治疗的新线索。基于三氯生和相关化合物可能造成肠道损伤,学者们建议应该重新考虑三氯生应用的安全性,并需要更好地理解环境化学物质对肠道健康的影响。
  • 上海安谱推出奶粉中雌激素检测的相关产品
    了解详细情况请进入安谱公司网站 www.anpel.com.cn奶粉中雌激素检测相关产品 近日,有关“某某奶粉疑致女婴性早熟”的报道引起社会广泛关注,卫生部在今天上午的例行新闻发布会上对此做出正式的回应。卫生部新闻发言人、卫生部办公厅副主任邓海华表示,奶粉里不允许检出雌激素,农业部门已制定检测方法并提供给湖北省,结果将在第一时间公布。 上海安谱科学仪器有限公司根据《GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法液相色谱-质谱质谱法》和《农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱-串联质谱法》,推出奶粉中雌激素检测相关产品,具体如下:标准品:订货号中文名称英文名称CAS#规格价格CDCT-C13213200雌三醇 标准品Estriol[50-27-1]0.1g810CDCT-C1321310017β-雌二醇 标准品17-beta-Estradiol[50-28-2]0.25g396CDCT-C13245100炔雌醇 标准品17a-Ethinylestradiol[57-63-6]0.25g486CDCT-C13213230雌酮 标准品Estrone[53-16-7]0.1g432CDCT-C12607000己烯雌酚 标准品Diethylstilbestrol[56-53-1]0.1g360CDCT-C14202800己烷雌酚 标准品Hexestrol[84-16-2]0.1g486CDCT-C12598000己二烯雌酚 标准品Dienestrol[84-17-3]0.1g486CDFW-D-5005-0.05g雌酮-d2 标准品(2,4-d2)Estrone-2,4-d2[350820-16-5]0.05g5320CDEN-CLM-803-1.2雌二醇-13C2 标准品,100ug/ml于乙腈ESTRADIOL-3,4-13C2 1.2mL6000CDFW-D-2849-0.05g己烯雌酚-d8 标准品Diethyl-1,1,1’,1-d4-stilbestrol-3,3’,5,5’-d4[91318-10-4]0.05g7030CDDM-H295303-1mg己烷雌酚-d4 标准品Hexestrol-d4 1mg2660CDFW-D-7129-0.01g己烷雌酚-d6 标准品(meso)Hexestrol-d6 (hexane-2,2,3,4,5,5-d6) (meso) 0.01g5700 其他产品:订货号描述规格单位价格CAEQ-4-003302-4000HPLC级甲醇4L1瓶 210 CAEQ-4-012001-4000HPLC级二氯甲烷4L1瓶 600 CAEQ-4-003306-4000HPLC级乙腈4L 1瓶 510 CAEQ-4-003513-2500HPLC级水2.5L 1瓶 200 CAEQ-4-011245-0500乙酸, ≥99.8%, for HPLC500ml 1瓶 360 CAEQ-4-014784-0500甲酸, ≥98%, for HPLC500ml 1瓶 680 CFAH-1-04114-0002β-葡萄糖醛酸苷酶,30U/ml左右(含60U/ml芳基硫酸酯酶)2ml1瓶1507 CFCQ-270121BSTFA:TMCS=99:1, BSTFA+1%TMCS硅烷化试剂10*1G 1盒 950 SBEQ-CA1654CNWBOND Carbon-GCB石墨化碳黑SPE小柱,500mg/6mL30支/盒 1盒 1129 SBEQ-CA2154CNWBOND NH2氨基 SPE 小柱,500mg/6mL30支/盒1盒790 CAEQ-4-018397-4000HPLC级叔丁基甲醚4L 1瓶 600 CAEQ-4-013326-0100无水碳酸钠, 99.9%, for HPLC100g 1瓶 360 如需咨询、订购以及查询更多产品,请联系:上海安谱 021-54890099下载: 奶粉中雌激素检测相关产品http://www.instrument.com.cn/netshow/SH100959/down_140371.htm 相关产品:奶及奶制品中17β-雌二醇、雌三醇、炔雌醇残留检测气相色谱-质谱法相关耗材 http://www.instrument.com.cn/show/news/046285.shtml 奶粉中激素类检测相关产品—雌激素、雄激素、孕激素、皮质醇激素 http://www.instrument.com.cn/show/news/046286.shtml
  • 迪马科技提供奶粉中雌激素检测全套解决方案
    三聚氰胺的阴影尚未散去,奶粉行业又掀起轩然大波,一则“某品牌奶粉疑致女婴性早熟”的新闻报道引起了社会各界的高度关注。我国对于奶粉中雌激素含量的检测规定了不得检出的限量,但相关具体的检测方案尚没有公布。 迪马科技作为助您保障人类食品、环境、药品安全的实验合作伙伴,根据国家及农业部公布的相关标准《GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法液相色谱-质谱质谱法》和《农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱-串联质谱法》,推出以下关于奶粉中雌激素检测的全面解决方案,希望对您准确检测雌激素含量有所帮助,具体如下:标准品:英文名中文名货号规格CASEstriol雌三醇C132132000.1g50-27-117-beta-Estradiol17β-雌二醇C132131000.25g50-28-2β-Estradiol 17-acetate17β-雌二醇乙酸酯C132131100.1g1743-60-8ESTRADIOL-3,4-13C2雌二醇-3.4-13C2CLM-803-1.21.2ml 17α-Ethinylestradiol17α-炔雌醇C132451000.25g57-63-6Estrone雌酮C132132300.1g53-16-7Estrone-2,4-d2雌酮-2.4-d2D-5005/0.050.05g Diethylstilbestrol己烯雌酚C126070000.1g56-53-1Diethyl-1,1,1’,1-d4-stilbestrol-3,3’,5,5’-d4己烯雌酚-d4D-2849/0.050.05g Hexestrol己烷雌酚C142028000.1g84-16-2Hexestrol-d4己烷雌酚-d4H295303-1MG1mg Dienestrol双烯雌酚C125980000.1g84-17-3Altrenogest四烯雌酮C101440000.1g850-52-2Desogestrel去氧孕烯,地索高诺酮32809-25MG25MG Estrone-D4雌酮-D4489204-100MG2.5mg53866-34-5β-Estradiol 3-benzoate β-雌二醇安息香酸酯C132131200.1g50-50-0β-Estradiol 3-methyl ether solutionβ-雌二醇3-甲醚32749-2ML2ML1035-77-4Equilin马烯雌酮C1319305050mg474-86-2Melengestrol acetate美仑孕酮乙酸酯C148617000.1g2919-66-6Mestranol美雌醇C149150000.1g72-33-3Dienestrol己二烯雌酚C125980000.1g84-17-3 其他相关产品: 英文名称中文名称货号规格β-Glucuronidase/aryl sulfatase 2mlβ-葡萄糖醛酸苷酶1.04114.00022MLSulfatase from Helix pomatia芳基硫酸酯酶,≥10,000 units/gS9626-5KU5KUBSTFA+TMCS, 99:1衍生化试剂 BSTFA+TMCS, 99:133148-20X1ML20X1MLN-Methyl-N-trimethylsilyltrifluoroacetamide activated I衍生化试剂, N-甲基-N-(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺50992-5ML-F5MLAcetonitrile HPLC, 4L乙腈,HPLC501014LMethanol HPLC, 4L甲醇,HPLC50102 4Ln-Hexane HPLC, 4L正己烷,HPLC501154LDichloromethane HPLC, 4L二氯甲烷,HPLC501174LMethyl tert-butyl ether HPLC, 4L甲基叔丁基醚,HPLC50123 4LAcetic acid HPLC, 50ml乙酸,HPLC5013250MLProElut CARB 500mg/6mL 30/pkg石墨化碳黑固相萃取柱6540530/PKGProElut NH2 500mg/6mL 30/pkg氨基固相萃取柱6330530/PKGProElut C18 500mg/3mL 50/pkgC18固相萃取柱6310430/PKGProElut PLS 500mg/6mL 30/pkgPLS固相萃取柱6800530/PKGProElut CARB/PSA 500mg/500mg/6mL 30/pkgCARB/PSA 复合柱6420530/PKGProElut CARB/NH2 500mg/500mg/6mL 30/pkgCARB/NH2 复合柱6410530/PKGDiamonsil C18(2) 5u 150 x 4.6mm钻石C18液相柱996011EALeapsil C18 2.7u 100 x 2.1mm飞跃UPLC/HPLC柱860051EADM-5MS 30m x 0.25mm x 0.25um DM-5MS毛细柱8221 1EA 关于迪马 迪马科技是一家致力于研发制造科学、高效的化学分析产品,提供完善服务和全面解决方案的知名色谱消耗品制造商,在色谱填料研发,色谱柱制造和相关分离产品等多个技术领域始终保持世界先进水平。核心技术产品包括:液相色谱柱、气相色谱柱、固相萃取柱、色谱溶剂和化学标准品。
  • 百灵威聚焦奶粉中雌激素检测相关产品
    &ldquo 奶粉疑致性早熟&rdquo 事件已经给我们敲响警钟,若从食物中摄入过量激素,将会严重损害人体健康,因此食物中激素检测日益重要。 GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法,用液相色谱- 质谱/ 质谱法,对猪肉、猪肝、鸡蛋、牛奶、牛肉、鸡肉和虾等动物源食品中50种激素残留进行检测,确保食物安全。百灵威作为中g分析行业的专业引l者,与权威机构共同开发g家标准中指定标准品(对照品)。在三聚氰胺、RoHs、苏丹红等检测项目中,百灵威提供的标准品被认定为&ldquo 指定产品&rdquo 。为支持《GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法》及《农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱-串联质谱法》需求,百灵威现为专业分析研究者提供该g标涉及的各项标准品、配套产品。★ 标准品 CAS 英文名 中文名 规格 734-32-7 (+)-19-Norandrost-4-ene-3,17-dione 去甲雄烯二酮 10mg 10161-33-8 Trenbolone 孕三烯酮 0.1g 846-48-0 Boldenone 勃地酮 10mg 76-43-7 Fluoxymesterone 氟甲睾酮 1g 434-22-0 19-Nortestosterone 诺龙 0.1g 63-05-8 4-Androstene-3,17-dione 雄烯二酮 0.1g 72-63-9 Methandrostenolone 美雄酮 25mg 58-22-0 Testosterone 睾酮 0.25g 53-43-0 Dehydro epiandrosterone 普拉雄酮 100mg 58-18-4 17-alpha-Methyltestosterone 左炔孕酮 0.1g 481-29-8 Epiandrosterone 表雄甾酮 1g 10418-03-8 Stanozolol 康力龙 0.1g 521-18-6 5alpha-Androstan-17beta-ol-3-one 双氢睾酮 0.1g 1424-00-6 mesterolone 甲氢睾酮 1g 17230-88-5 Danazol 达那唑 500mg 68-22-4 Norethindrone 炔诺酮 2g 64-85-7 21-Hydroxyprogesterone 去氧皮质酮 0.1g 68-96-2 17-alpha-Hydroxyprogesterone 17-&alpha -羟基孕酮 0.1g 797-63-7 D-(-)-Norgestrel 甲基炔酮 10mg 520-85-4 Medroxyprogesterone 甲孕酮 0.1g 595-33-5 Megestrol acetate 乙酸甲地孕酮 1g 302-22-7 Chloromadinon 17-acetate 氯化孕酮-17-乙酸酯 0.1g 57-83-0 Progesterone 孕酮,黄体酮 0.25g 71-58-9 Medroxyprogesterone-17-acetate 安宫黄体酮/醋酸甲羟孕酮 0.1g 124-94-7 Triamcinolone 曲安西龙 1g 52-39-1 Aldosterone 醛固酮 1mg 53-03-2 Prednisone 泼尼松 0.1g 53-06-5 Cortisone 可的松 5g 50-23-7 Hydrocortisone 氢化可的松 0.25g 50-24-8 Prednisolone 泼尼松龙/氢化泼尼松 0.25g 2135-17-3 Flumethasone 双氟美松 250mg 50-02-2 Dexamethasone 地塞米松 0.1g 514-36-3 Fludrocortisone acetate 醋酸氟氢可的松 1g 83-43-2 6-alpha-Methylprednisolone 甲基泼尼松龙 50mg 4419-39-0 Beclomethasone 倍氯米松 25mg 76-25-5 Triamcinolone acetonide 曲安奈德 0.1g 67-73-2 Fluocinolone acetonide 氟轻松 10mg 426-13-1 Fluorometholone 氟甲松龙 1g 51333-22-3 Budesonide 布地奈德 0.1g 25122-46-7 Clobetasol propionate 丙酸氯倍他索 0.1g 50-27-1 Estriol 雌三醇/1,3,5(10)-三烯- 3&beta ,16&alpha ,17&beta 三醇 0.1g 50-28-2 17-beta-Estradiol &beta -雌二醇/&beta -1,3,5(10)-三烯- 3,17&beta -二醇 0.25g 57-63-6 17&alpha -Ethinylestradiol 17&alpha -炔雌醇 0.25g 53-16-7 Estrone 雌酮 0.1g 56-53-1 Diethylstilbestrol 己烯雌酚 0.1g 84-16-2 Hexestrol 己烷雌酚/去氢己烯雌酚/4,4'-(1,2- 二乙基亚乙基)二苯酚 0.1g 84-17-3 Dienestrol 双烯雌酚/己二烯雌酚/2,3-二苯酚丁二烯 0.1g N/A Norgestrel-D6 炔诺孕酮-D6 1mg N/A Progesterone-D9 孕酮-D9 1mg N/A Megestrol acetate-D3 甲地孕酮醋酸盐-D3 0.5mg 162462-69-3 Medroxyprogesterone-D3 甲羟孕酮-D3 1mg N/A Norethindrone-ethynyl-13C2 炔诺酮-13C2 1mg 869287-60-5 Methandrostenolone-D3 甲睾酮-D3 2.5mg N/A Boldenone 17-Sulfate-D3 勃地酮-D3 5mg 73565-87-4 Cortisol-9,11,12,12-D4 可的松-9,11,12,12-D4 0.5mg 53866-34-5 Estrone-D4 雌酮-D4 2.5mg N/A Hexestrol-D4 己烷雌酚-D4 1mg N/A Testosterone-3,4-13C2 睾酮-3,4-13C2 0.01g N/A Estradiol-3,4-13C2 雌二醇-3,4-13C2 1.2mL N/A Diethylstilbestrol--D8 己烯雌酚-D8 1.2mL ★ 配套产品 CAS 英文名 中文名 规格 67-56-1 Methanol ,99.9% [HPLC/ACS] 甲醇 1L/4L 75-05-8 Acetonitrile ,99.9% [HPLC/PREP] 乙腈 1L/4L 75-09-2 Dichloromethane, stabilized with amylene, for HPLC, 99.8% 二氯甲烷 1L/2.5L 7732-18-5 Water, for HPLC gradient grade 水 1L/2.5L 64-19-7 Acetic acid, for analysis, 99.8% 乙酸 1L/2.5L 64-18-6 Formic acid, for analysis, 99+% 甲酸 1L/2.5L 9001-45-0 B-GLUCURONIDASE TYPE IX-A FROM E. COLI BETA-葡萄糖醛酸甙酶 1x25KU 25561-30-2 N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide ,98% N,O-双(三甲基硅烷基)三氟甲基乙酰胺 25g/100g 12252201 BOND ELUT CARBON, 500MG, 6ML, 30/PK 石墨化碳黑SPE小柱 1x1EA 12256045 MEGA BE-NH2, 500MG 6ML, 30/PK NH2氨基SPE小柱 1x1EA 1634-04-4 tert-Butyl methyl ether, for HPLC 叔丁基甲基醚MtBE 1L/2.5L 497-19-8 Sodium carbonate, anhydrous, powder, for analysis, 99.8% 无水碳酸钠 1kg 更多配套分析试剂欢迎致电百灵威垂询!
  • Sigma-Aldrich为奶粉中雌激素检测护航
    “奶粉疑致婴儿性早熟”引起了各界的高度关注,让人们如此揪心。对于奶粉雌激素检测,国家规定了不得检出的限量,但相关的具体检测方法目前还没有公布。作为全球数以万计的科学家和技术人员的实验伙伴的Sigma-Aldrich 公司,急大家之所急,想大家之所想。根据以往农业部及国家公布的相关标准,特别为奶粉中雌激素检测专题推荐以下全套解决方案,并迅速组织备货。希望对相关部门尽快准确检测雌激素,有所帮助。  Sigma-Aldrich /Supelco、Fluka 的分析产品以品质性能高而著称,尤其是Supelco著名的Envi-Carb SPE小柱已经多次出现在国内或国外各种食品检测标准中,受到了广大分析检测工作者的认可和喜爱。Sigma-Aldrich高品质、品种全的分析产品,是奶粉中雌激素检测的信赖保证!如有任何问题,请随时联系我们。货号 中文品名 英文品名 规格 CAS 价格 孕激素标准品 D6875-500MG 21-羟孕酮,≥97% (HPLC) 21-Hydroxyprogesterone 500mg 64-85-7 ¥1,777.23 46337-250MG 17α-羟孕酮 17α-Hydroxyprogesterone 250mg 68-96-2 ¥424.71 N2260-100MG 甲基炔酮,≥99% D(− )-Norgestrel,≥99% 100mg 797-63-7 ¥561.60 46411-100MG 甲羟孕酮 Medroxyprogesterone 100mg 520-85-4 ¥1,296.36 46420-100MG 乙酸甲地孕酮 Megestrol acetate 100mg 595-33-5 ¥588.51 C5145-1G 乙酸氯地孕酮,≥98% (Sigma) Chlormadinone acetate 1g 302-22-7 ¥1,867.32 46665-250MG 孕酮 Progesterone 250mg 57-83-0 ¥4,345.38 46412-250MG 甲羟孕酮 17-乙酸酯 Medroxyprogesterone 17-acetate 250mg 71-58-9 ¥562.77 雌激素标准品 46565-100MG 雌三醇 Estriol 100mg 50-27-1 ¥819.00 46542-100MG α-雌二醇 α-Estradiol 100mg 50-28-2 ¥1,159.47 46263-250MG 炔雌醇 17α-Ethynylestradiol 250mg 57-63-6 ¥442.26 46573-250MG 雌酮 Estrone 250mg 53-16-7 ¥442.26 46207-250MG 己烯雌酚 DIETHYLSTILBESTEROL, 250 MG 250mg 6898-97-1 ¥424.71 46320-100MG-R 己烷雌酚 HEXESTROL 100mg 84-16-2 ¥499.59 46190-100MG 己二烯雌酚 DIENESTROL 100mg 84-17-3 ¥504.27 现货 489204-100MG 雌酮-d4 Estrone-2,4,16,16-d4 100mg ¥14,323.14 样品前处理试剂及SPE小柱 G0876-2ML β-葡萄糖醛酸酶,≥85,000 units/mL(含芳基硫酸酯酶, 7,500 units/ml)" β-Glucuronidase from Helix pomatia 2mL ¥910.26 现货 S9626-5KU 芳基硫酸酯酶,≥10,000 units/g Sulfatase from Helix pomatia 5KU ¥475.02 现货 33148 衍生化试剂BSTFA+TMCS=99:1 BSTFA+TMCS=99:1 20×1 mL ¥1,917.63 现货 SPE小柱及装置57094 Supelclean Envi-Carb SPE 小柱 500mg/6mL 30支/盒 ¥1,129.05 现货 54059-U Supelclean LC-NH2 SPE 小柱 500mg/6mL 30支/盒 ¥1,317.42 现货 52579-U Supelclean PSA SPE 小柱 500mg/6mL 30支/盒 ¥1,411.02 现货 57063 Supelclean C18 SPE 小柱 500mg/3mL 54支/盒 ¥680.94 现货 54035-U Supelclean Envi-Carb/LC-NH2 SPE 双层小柱 500mg/500mg/6mL 30支/盒 ¥2,251.08 现货 54067-U Supelclean Envi-Carb-II/PSA SPE 双层小柱 500mg/500mg/6mL 30支/盒 ¥2,021.76 现货 57044 SUPELCO Visiprep DL 12位防交叉污染固相萃取装置 ¥5717.79 现货LC-MS色谱柱 53823-U Ascentis Express C18 HPLC色谱柱 2.1mm x 10cm, 2.7um 1ea ¥6,781.32 现货 GC-MS色谱柱28471-U SLB-5MS GC色谱柱 30m x 0.25mm, 0.25um ¥4699.89 现货关于Sigma-Aldrich: 美国Sigma-Aldrich公司,是一家致力于生命科学与化学领域的高科技跨国公司,产品涵盖生物化学、有机化学、色谱分析等多个领域,产品数量超过120,000种,是全球数以万计的科学家和技术人员的实验伙伴。Sigma-Aldrich公司旗下的两大著名分析品牌 Supelco和Fluka/RdH ,致力于分析化学领域的产品研制开发、生产销售和技术服务等,主要产品包括色谱柱、色谱耗材、固相萃取(SPE)、固相微萃取(SPME) 及品种十分齐全的高品质分析试剂和标准品,能为广大分析领域用户提供集色谱耗材、分析试剂和标准品于一体的一揽子解决方案。Sigma-Aldrich在36个国家与地区设有营运机构,雇员超过7900人,为全世界的用户提供优质的服务。 Sigma-Aldrich承诺通过在生命科学、高科技与服务上的领先优势帮助用户在其领域更快地取得成功。如需进一步了解Sigma-Aldrich,请访问我们的得奖网站:http://www.sigma-aldrich.com,或直接联系我们:电话:021-6141 5566 -8105email:ruihua.ma@sial.com
  • 通过LC-MS/MS测定全血中的裸鼠素,解开神奇蘑菇之谜——定量血液样本中的裸鼠素以支持临床和法医调查
    Shutterstock / ANDREA DELBO概述科学家现在可以通过使用 SPE 和 LC-MS/MS 的新分析工作流程直接量化全血样本中的裸鼠素(psilocin,有的译作“赛洛辛”,一种致幻剂),这将有助于支持对迷幻蘑菇活性成分的临床和法医研究。从迷幻的嬉皮士到开创性的治疗“迷幻蘑菇”中发现的致幻色胺曾经是 20 世纪 60 年代反主流文化的主要内容和叛逆的象征,如今作为治疗一系列神经系统疾病的潜在疗法正在复兴。裸盖菇素的临床研究取得了有希望的结果,裸盖菇素(psilocybin)是在裸盖菇中发现的,裸盖菇素在治疗抑郁症、创伤后应激障碍 (PTSD) 和焦虑方面的临床研究取得了有希望的结果。裸盖菇素还可以促进大脑生长和重组、减少炎症并对抗氧化应激。这为更有针对性的治疗方法开辟了令人兴奋的可能性,这些治疗方法可以解决神经退行性疾病的根本原因,而不仅仅是症状。临床进展伴随着迷幻蘑菇及其活性成分的非刑事化。然而,这种日益流行也导致了真菌误用和滥用的增加。裸盖菇素实际上是具有药理活性的裸鼠素的前药,裸鼠素在肝脏中去磷酸化,产生活性代谢物裸盖菇素。已有报道采用基于 LC 和 GC 的方法来测量尿液、血浆和血清中的裸鼠素。然而,裸鼠素的血液与血浆比率尚不清楚,处理血液以分离血清或血浆可能会导致裸鼠素的酶促降解。因此,山姆休斯顿州立大学(美国德克萨斯州)的 Madeline Swortwood 及其同事开发了一种基于 SPE 和 LC-MS/MS 的新型分析工作流程,用于定量检测全血中的裸盖菇素,用于临床研究和法医毒理学测试。令人惊讶的高响应 首先,Swortwood 及其同事通过直接将裸鼠素和裸鼠素-d10 注入质谱仪来优化 MS/MS 参数。氘代内标给出了令人惊讶的高响应,因此样品中的浓度从 10 ng/mL 降低至 3 ng/mL,以在整个校准范围内分析物和内标响应之间提供一致且平衡的比例。首先尝试了简单的液-液萃取,但回收率和色谱法并不令人满意,因此作者希望改用固相萃取。他们使用 Polychrom CEREX Clin II 和 UCT CleanScreen DAU SPE 柱评估了不同的洗脱溶剂和方案,最终选择了 Polychrom Clin II SPE 柱。简而言之,全血中加入了校准品或 QC,以及内标、磷酸盐缓冲液和抗坏血酸,这已被证明可以防止提取过程中裸鼠素的氧化。然后将样品涡旋并离心,并将上清液加载到 SPE 柱上。使用温和的真空将样品拉过 SPE 柱。然后用水、甲醇和乙酸乙酯洗涤负载的SPE柱,真空干燥,并用2% NH 4 OH的乙酸乙酯溶液洗脱。洗脱液干燥后,将残留物重新溶解于 90:10 流动相 A:B 中,并将 5 µL 注入 LC-MS/MS 系统进行分析。使用连接到 Agilent 6470 三重四极杆 MS/MS 检测器的 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱仪进行分析,并使用设置为 35 的 Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18 色谱柱(2.7 µm,2.1 × 100 mm)分离分析物。 °C 使用梯度。流动相 A 为含有 0.01% 甲酸的 5 mM 甲酸铵水溶液,而流动相 B 使用含有 0.1% 甲酸的乙腈溶液。包括重新平衡步骤在内,总运行时间为 6 分钟。考虑到缺乏裸鼠素的血液/血浆数据,该方法的线性范围为 0.78-200 ng/mL,以匹配先前在血浆和血清样品中建立的范围。分析人员根据 ANSI/ASB 036 指南成功验证了该方法,并且样品在冰箱中可稳定保存长达 48 小时。SPE 方案的回收率≥89%,色谱干扰最小。打开临床进步的“感知之门” 报道的方法允许分析人员直接量化全血中“迷幻蘑菇”中的活性成分裸鼠素,这应该有利于临床和法医调查。这种方法将使临床医生能够将裸盖菇素水平与临床试验中患者的反应相关联,同时也让法医专家更清楚地了解裸盖菇素相关病例的潜在损害。作者指出,虽然一些法医科学家可能倾向于分析更稳定的代谢物 裸鼠素-O-葡萄糖醛酸,但关注活性代谢物裸鼠素可以提供有价值的见解。下一步将是使用真实样本进行概念验证测试。相关链接(1)Gomonit MM, Skillman B, Swortwood MJ. Quantification of psilocin in human whole blood using liquid chromatography–tandem mass spectrometry (LC–MS/MS). J Forensic Sci. 2023. https://doi.org/10.1111/1556-4029.15454(2)De Vooght-Johnson R. Provenance of peculiar psilocin peak proved. Wiley Analytical Science. 17 November 2022 (https://analyticalscience.wiley.com/content/article-do/provenance-peculiar-psilocin-peak-proved accessed 4 January 2024).(3)De Vooght-Johnson R. Know your mushrooms: LC-MS method confirms ingestion of toxic fungi. Wiley Analytical Science. 15 July 2021 (https://analyticalscience.wiley.com/content/article-do/know-your-mushrooms-lc-ms-method-confirms-ingestion-toxic-fungi accessed 4 January 2024).作者简介 Ryan De Vooght-Johnson瑞安是一位自由科学作家和编辑。获得仪器和分析方法硕士学位后,他在制药行业担任过各种分析开发职务,然后担任编辑职位。作为委托编辑,他创办了两本与分析化学和制药相关的期刊《生物分析》和《治疗交付》,并管理了许多其他期刊。他现在是一名自由科学作家和编辑,这样他就有更多的时间陪伴家人、骑自行车和管理菜园。原文:Magic mushroom mystery managed with LC-MS/MS determination of psilocin in whole blood,WILEY Analytical Science Journals ,9 January 2024供稿:符 斌
  • 百灵威提供瘦肉精检测完美解决方案
    央视在3· 15消费者权益日播出了《&ldquo 健美猪&rdquo 真相》的特别节目后,健美猪、瘦肉精事件,又y次挑战了中g人的饮食承受j限。g家相关部门已紧急出台y系列应对措施,而检测部门技术人员则急需快速、可靠的检测手段。百灵威得知该事件后,即召开了分析检测小组专项讨论会,根据《动物源性食品中多种&beta &mdash 受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》(GB/T 22286-2008)要求,建立瘦肉精检测解决方案,为全g瘦肉精检测保驾护航!检测方法基本操作步骤:1.提取:称取2 g(精确到0.01 g)的均匀样品于50 mL离心管中,加入8 mL乙酸钠缓冲液,充分混匀,再加入50 &mu L&beta -葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶,混匀后于37℃水域水解12 h。添加100 &mu L 10 ng/mL的内标液于待测样品中,加盖置于水平振荡器中振荡15 min,5000 r/min离心10 min。取4 mL上清液加入0.1 moL/L高氯酸溶液5 mL,混合均匀。用高氯酸调节pH到1± 0.3。5000 r/min离心10 min后,将全部上清液(约10 mL)转移到50 mL离心管,用10 moL/L的氢氧化钠调节pH到11。加入10 mL饱和氯化钠溶液和10 mL异丙醇/乙酸乙酯(6:4)混合溶液,充分提取,在5000 r/min离心10 min。转移全部有机相,在40℃水浴下用氮气吹干。加入5 mL乙酸钠,c声混均溶解备用。2.净化:将阳离子交换小柱连接到真空过柱装置,将溶液上柱,依次用2 mL去离子水、2 mL 2%甲酸水溶液和2 mL甲醇洗涤柱子并彻底抽干。z后用2 mL的5%氨水甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。流速控制在0.5 mL/min,洗脱液在40℃水浴下氮气吹干。准确加入200 &mu L 0.1%甲酸/水-甲醇溶液(95:5),c声混均,15000 r/min离心10 min。■ 标准品及相关试剂产品编号英文名称中文名称CAS包装目录价C 17295000Terbutalin sulfate硫酸叔丁宁按23031-32-50.1 g¥540C 11668550Clenbuterol hydrochloride盐酸克仑特罗21898-19-10.1 g¥1,512XA11668561AC(± )-Clenbuterol D9 (trimethyl D9)克伦特罗- D9129138-58-51 mL¥2,664C 16903000Salbutamol free base沙丁胺醇18559-94-90.1 g¥3,960XA16903001ACSalbutamol D3 (3-hydroxymethyl-D2,a D1)沙丁胺醇-D3N/A1 mL¥2,664C 16805000Ractopamine hydrochloride莱克多巴胺盐酸盐90274-24-10.1 g¥846R071402Ractopamine-d6 Hydrochloride莱克多巴胺-d6N/A1 mg¥1,960G0751&beta -Glucuronidase from Helix pomatia,&beta -D-Glucuronide glucuronosohydrolaseBETA-葡萄糖醛酸甙酶9001-45-01 MU¥4,217T897250Tulobuterol妥布特罗41570-61-0100 mg¥1,680XA13497000ALFenoterol hydrobromide氢溴酸非诺特罗/酚丙喘宁芬忒醇1944-12-31 mL¥576F693400Formoterol Fumarate Dihydrate福莫特罗富马酸盐二水合物183814-30-425 mg¥1,330I0900000Isoxsuprine hydrochlorideN/AN/A1 EA¥1,266BA016-50CimaterolN/AN/A50 mg¥4,100BA008-25Clenbuterol-D9 hydrochlorideN/AN/A25 mg¥7,543XA16903000ALSalbutamol free base沙丁胺醇18559-94-91 mL¥756T109752Terbutaline-d95-(1-羟基-2-叔丁基氨基乙基)苯-1,3-二酚N/A1 mg¥1,750BA003-50CimbuterolN/AN/A50 mg¥3,871BA001-50Brombuterol hydrochlorideN/AN/A50 mg¥3,871C 14660000Mabuterol hydrochloride马布特洛盐酸盐54240-36-750 mg¥5,580BA006-50Mapenterol hydrochlorideN/A54238-51-650 mg¥4,848BA002-50Bromchlorbuterol hydrochlorideN/AN/A50 mg¥3,871116481Methanol, 99.9% [HPLC/ACS]甲醇67-56-14 L¥1459382192-Propanol, 99.8%[HPLC/ACS]异丙醇67-63-04 L¥360300999Ethyl acetate, 99.9% [HPLC/ACS]乙酸乙酯141-78-64 L¥44027048Formic acid, for analysis, 99+%甲酸64-18-61 L¥1,15520584Ammonium hydroxide, 28-30 wt% solution of NH3 in water, for analysis氨水1336-21-61 L¥26922089Acetic acid, sodium salt, anhydrous, for analysis, 99+%乙酸钠127-09-3250 g¥349■ 配套仪器耗材产品编号产品名称包装目录价3581025加热磁力搅拌器1台¥2,3103810025RCT 基本型磁力搅拌器1台¥4,9901572500磁力搅拌子1PK¥95E03935569手动单道可调式移液枪,1000-5000 µ L1支¥645E02901275瓶口分液器,5-50 mL1个¥2,000WX-7009-0020-18247 R95 有机蒸气异味防护口罩,120个/箱1箱¥2,2825982-3236SCX Polymer - Box, 50 x 3 mL tubes, 60 mg50支/盒¥1,239959741-902Eclipse Plus C18, 2.1 x 50 mm,1.8 µ m, 600 bar1支¥4,591BR36849100 mL, DURAN, NS 14/23, -stoer1套¥3145182-0714Screw cap vials, clear 100/PK 透明螺口2 mL样品瓶1盒¥204WKLM-2.1微孔滤膜Ф50 0.2 &mu (水)混合纤维素100片/包¥130WKLM-4.1微孔滤膜Ф50 0.2 &mu (有机)尼龙6100片/包¥210RJGL1L-C溶剂过滤器(1 L) 杯300 mL 瓶1000 mL,PTFE滤板1套¥6005982-911012 Port Vacuum Extraction Manifold Assy1套¥7,746J&K-Abel气相色谱柱百灵威凭借着良好的g际化运作能力,与世界y流气相色谱柱供应商密切合作,隆重推出J&K-Abel 气相色谱柱产品。此系列毛细柱不仅拥有品种齐全的固定相,包括聚硅氧烷、交联聚二乙醇(PEG)和PLOTs等;同时每根色谱柱均按照严格的流程生产,经过标准的性能检测,确保柱子卓越的性能。百灵威还可以根据用户需求专门定制特殊规格的柱子。●高性能AB色谱柱:低流失、独特去活技术;高惰性、高选择性和高柱效●成熟的技术生产,确保柱性能,可放心选用●资深丰富的分离经验和专业知识供强有力的技术支持●强劲的价格竞争力,更多实惠聚硅氧烷色谱柱非j性和中j性固定相两种类型,例如AB-1、AB-5是非j性柱,AB-35、AB-1701、AB-1301是中j性柱。聚合乙二醇(PEG)色谱柱三种类型的PEG色谱柱,如AB-INOWAX、AB-FFAP、AB-CarBoWax 20M,基于PEG固定相的特征,该系列色谱柱具有广泛的应用。PLOT色谱柱AB-PLOT、AB-PLOT Al2O3、AB-PLOT MoleSieve、AB-PLOT Q、AB-PLOT U等型号,广泛应用于石化工业、环境、药学等l域。熔融石英管未去活管与去活熔融石英管两种类型。 产品编号英文名称描述S010125-3002AB-1, 30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091Z-433S010125-6002AB-1, 60 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091Z-436S010132-3002AB-1, 30 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091Z-413S011125-3002AB-1MS, 30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091S-933S011132-3002AB-1MS, 30 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091S-913S010525-3002AB-5, 30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091J-433S010525-6002AB-5, 60 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091J-436S010532-3002AB-5, 30 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091J-413S010532-6002AB-5, 60 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091J-416S011525-3002AB-5MS, 30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091S-433S011525-6002AB-5MS, 60 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091S-436S011532-3002AB-5MS, 30 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m-60 to 325/350 19091S-413S016125-3002AB-1701, 30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m-20 to 280/300 122-0732S016132-3002AB-1701, 30 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m-20 to 280/300 123-0732S016225-3014AB-624, 30 m × 0.25 mm × 1.40 &mu m-20 to 260 122-1334S016232-3018AB-624, 30 m × 0.32 mm × 1.80 &mu m-20 to 260 123-1334S016232-6018AB-624, 60 m × 0.32 mm × 1.80 &mu m-20 to 260 123-1364S016253-3030AB-624, 30 m × 0.53 mm × 3.00 &mu m-20 to 260 125-1334S012025-3002AB-INOWAX, 30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m40 to 260/280 19091N-133S012032-3002AB-INOWAX, 30 m × 0.32 mm × 0.25 &mu m40 to 260/280 19091N-113S018653-3030AB-PLOT Q, 30 m × 0.53 mm × 30.0 &mu m-80 to 280/290 19095P-QO4S011125-3002-G5AB-1MS Builtin-Guard 30 m,0.25 mm,0.25 &mu m with 5 m Guard Column-60 to 325/350
  • 从2D到3D---在线水质分析仪器对水质指标的多维度监测
    p  span style="color: rgb(84, 141, 212) "生物指标在线水质分析仪器的出现,改变了传统在线水质分析仪器只能对水的物理和化学两种指标进行实时监测的情况,使得更全面的水质安全快速综合评价和水处理工艺过程的物理、化学、生物指标三维控制逐渐成为现实。/span   /pp  strong01/strong/ppstrong  有关名词/strong/pp  在线水质分析仪器是一类专门用于水质分析的自动化分析仪表,仪器可在无需人工介入的情况下实现从水样采集到水质指标数据实时输出的连续运行。在线水质分析仪器具有实时、原位、自动分析的特点,在水污染实时报警、水质安全快速评估及预警特别是水处理工艺过程控制方面都有着重要的应用价值。/pp  水质指标是表征水的各种不同物理、化学、生物特性以及放射性的参数,具体是指水中除水分子之外的其他物质(杂质)的浓度或者由杂质所引起的水的物理、化学、生物特性以及放射性的变化结果。以饮用水为例,世界各国,包括世界卫生组织(WHO)的生活饮用水标准,其检测指标都包含了这四类指标的内容,希望通过对水的物理、化学和生物及放射性指标的全面获取和分析,对水质进行全面评估,达到保证饮用水安全的目的。/pp  在实际应用中,由于固定水源的水放射性指标一般情况下变化不大,除了天然矿泉水和生活饮用水、海水,以及核电厂用水及排水外,在总体水质评估以及水处理工艺过程控制方面,被广泛关注和研究更多的物理、化学和生物三类水质指标及其分析技术。以美国清洁水法(Clean Water Act)为例,其第101部分第1条(SECTION 101.(a)就明确表示: The objective of this Act is to restore and maintain the chemical,physical, and biological integrity of The Nation’s water(中文:本法规的目的是恢复和保持国家水体的化学、物理和生物完整性) 还有,中国的GB/T 33087-2016《仪器分析用高纯水规格及试验方法》中,对高纯水的要求才只有区区6项指标,也是涵盖了物理(电阻率)、化学(氯离子、钠离子、硅酸根、总有机碳或COD)以及生物指标(细菌总数)。/pp  水质的生物指标是指水中的生物,主要是微生物、藻类以及原生动物及其组成成分(如酶、叶绿素、内毒素、抗性基因等)等存在的数量、活性、以及微生物群落的情况。广义的生物指标还包括生物毒性指标,具体指以生物作为检测手段,通过试验生物面对特定水样时某些特性的变化情况来评价水质。/pp  strong02/strong/ppstrong  物理、化学指标监测,在线水质分析仪器的“2D时代”/strong/pp  在线水质分析仪器技术发展的初期,在线水质分析仪器可以测量的水质指标主要只是一些相对简单的物理指标和化学成分指标,如水温、电导率、pH、ORP、溶解氧、浊度、悬浮物浓度等。虽然,随着分析化学、材料科学、电子科学以及计算机技术和通讯技术的发展,在线水质分析仪器技术也得到了快速的发展,可以在线监测的水质指标不断增多,出现了COD、SDI(污染指数)、SiO2、总磷(TP)、总氮(TN)等一大批结构复杂的在线水质分析仪器。但是,受制于生物技术的发展水平,生物指标的数据还只能通过实验室分析方法取得,存在很大的时间滞后性。由于缺失了生物指标的实时变化数据,不能从水的物理、化学、生物学指标这三个维度来全面了解水质数据的实时变化,在实现对水质变化的预测预警或者对水处理工艺过程进行优化和自动控制还是受到了许多的制约。有人把在线水质分析仪器只能测量水的物理和化学指标的这个阶段称为在线水质分析技术的“2D时代”。/pp  在这个时期,为应对生物指标不能直接实时在线监测的局限性,水质科学家和水处理工艺专家们提出了许多间接测量的方法,具体主要有两类:一类是采用水质替代指标,水质替代指标是指一类特定的水质参数,可以综合反映水体的某一类别的水污染情况或水处理过程中某些不能实现在线监测而且实验室分析也非常繁琐水质指标的变化。浊度是其中最具有代表的一个水质替代参数,浊度本来是一个湖沼学的概念,原本是指天然水体中的各种浮游生物和悬浮物所造成的浑浊程度,采用肉眼观察或者光学测量方式来进行测量。由于浊度可以反映水中泥沙、粘土以及藻类、微生物等有机物质的含量,迅速成为了水质净化处理最重要的关键性工艺参数,同时由于浊度还能反映人的感官对水质最直接的评价,全球各国包括世界卫生组织的饮用水标准都把浊度作为了一个必测的指标,美国饮用水水质标准中,还把浊度和异养菌总数、大肠杆菌、军团菌、病毒等微生物指标一并归属于微生物指标系列中,理由是:浊度对消毒有影响、为细菌生长提供场所。在饮用水标准和水净化工艺过程中,浊度成为了“两虫”(隐孢子虫和贾第鞭毛虫)、耐热大肠杆菌和病毒等致病微生物的替代指标,一方面是由于引起浊度的颗粒物在一定程度能表征水中微生物数量的多少。另外,由于浊度还能影响水的消毒效果:在其他水质条件相同的情况下,浊度越低,消毒效果越好。更为重要的是,由于微生物(尤其是“两虫”)检测十分复杂,误差大、时效性差,难以及时准确地表征净水工艺对微生物的去除效果。以浊度作为微生物替代指标,具有检测方法简单、快速、准确等优点,可方便监测水质净化工艺对微生物的去除效果、对工艺运行状况进行评估并对工艺运行参数进行及时优化和调整。/pp  span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "PS:在线浊度分析仪的测量原理是利用光的散射原理,当光束接触到水中的悬浮物颗粒表面时,将会散射和吸收通过水样的光线,散射光与入射光成90度直角时,散射光强度与浊度的大小成线性关系,通过检测器测量散射光强度,同标准比较,就能获得水样的浊度值。现在的在线浊度分析仪,由于其结构简单、响应速度快、可靠性高,已经成为了饮用水、工业过程用水等水质净化工艺过程控制最重要的监测设备之一,目前市场上已经有了数十种不同结构、不同量程、不同测试精度、不同安装方式的在线浊度分析仪器产品,可以满足从洁净度极高的膜过滤水到高污染、高悬浮物水样浊度的实时监测。(目前市场上主流的在线悬浮物分析仪也普遍采用基于浊度的散射光测量原理,其方法是:利用水中悬浮物含量和散射光强度变化的相关性,通过取一定体积水样,经实验室过滤、烘干后称重的方法获得的悬浮物浓度对仪器进行比对校正,可以获得相对准确的悬浮物监测数据。由于悬浮物浓度是指一定体积的水溶液中所含悬浮物的量,单位是mg/L 需要注意的是,浊度单位NTU(散射光浊度单位)和作为悬浮物浓度单位的mg/L是两个不同的概念,前者是光学单位,后者是质量浓度单位,两者之间不存在数值上的相应或等同关系。悬浮物浓度是污水生物处理法的重要工艺参数,在线悬浮物分析仪在污水处理、工业水处理过程控制方面都有着非常广泛的应用)/span/pp  第二类方法是测量由生物特别是微生物作用引起的水的物理或者化学指标的改变,以此来推断生物指标的变化,从而对水处理工艺进行控制。以污水处理为例,目前全世界污水处理的主流工艺大都是采用生物处理,众所周知,污水生物处理作为一个生物反应过程,其核心是水中的微生物活性。准确了解污水中的微生物活性是非常重要的,但是在以前通过在线水质分析仪器实时检测微生物活性几乎是不可能完成的任务。水处理专家们围绕污水的生物处理工艺开发了以溶解氧(DO)、氧化还原电位(ORP)、好氧率(OUR)、污泥体积指数(SVI)、MLSS(混合液悬浮固体(活性污泥)浓度)、生物需氧量(BOD)等等一大批和污水中微生物活动相关的物理、化学指标,或者环境条件参数 当然,还有针对厌氧工艺的挥发性脂肪酸(VFA)、碱度等物理、化学指标,这些指标都成为了非常重要、在污水生物处理工艺过程控制中起到重要作用的工艺参数,针对这些指标的在线水质分析仪器也都在实际污水处理工艺中得到了广泛应用。尽管这样,由于不能直接获得微生物活性的数据,造成了整个污水处理过程还是处于黑箱运行状态,在实际运行中常常还需要依靠运行人员的经验来应对异常水质情况的发生。/pp  饮用水中的消毒剂残留量,是另外一个有价值的实例。饮用水中加入消毒剂的目的是为了杀灭水中的致病性微生物和原虫,同时,为了保证在饮用水输配过程中持续保持消毒能力,需要保证水中有一定的消毒剂残留量。目前全球最广泛应用的饮用水消毒剂是氯制剂(包括氯气、次氯酸钠等),其残余量简称余氯浓度。按照世界卫生组织(WHO)在“饮用水水质准则”(第四版)中的说法:“监测余氯可快速指示原来由直接测量微生物参数所反映的问题。。。。当发现输配水系统中某处很难保持余氯,或者余氯逐渐消失,可能指示水或管道已经因细菌生长而对氧化剂的需求增加。”另外,还建议:“大肠菌群可以用作评价输配系统清洁度、完整性和生物膜存在与否,然而检测太慢且不太可靠,不如直接检测消毒剂残留量。”目前,全球饮用水行业中采用氯消毒的水厂都把余氯浓度作为控制饮用水微生物安全的一个最重要指标,在中国的“生活饮用水卫生标准”中,也规定了自来水出厂时余氯浓度需不低于0.3mg/L 管网末梢的自来水中的余氯浓度也不能低于0.05mg/L。尽管如此,在实际情况中,由于水中除细菌外,还有其他会消耗余氯的物质,以及大量耐氯微生物的存在,饮用水中还是会出现虽然余氯浓度合格,但是微生物指标超标的情况,给饮用水安全带来风险。同时,由于不能及时得到水中微生物污染的直接信息,在水质有可能出现风险时,为了充分保证水质安全,有时还会采用过量投加消毒剂的做法,既浪费消毒剂,又增加了消毒副产物生成的风险。/pp  strong03/strong/ppstrong  在线监测生物指标,在线水质分析仪器迎来3D时代/strong/pp  随着生物科学技术的快速发展,加上水行业对水中以致病细菌、病毒及抗性基因等为代表的生物污染物的日益重视,新兴的生物科学技术和传统在线水质分析仪器技术在水质分析领域得以结合,在线水质分析仪器技术取得了突破,对生物指标进行实时在线监测得以实现,通过在线分析技术实时从物理、化学、生物3个维度检测水质指标,全面描述水质状况,对水质安全进行快速综合评估,也使得水处理工艺过程多维度自动控制成为可能,在线水质分析仪器技术开始步入了“3D时代”。/pp  生物技术的采用可以直接测量待测水样中的生物组成成分和数量,如藻类浓度或者微生物含量等,也可以通过测量水中微生物的代谢产物等来获得微生物活性的信息。到目前为止,前一种方式中比较重要的新产品有藻类在线分析仪、在线流式细胞仪等 后一种方式中有在线大肠杆菌分析仪、碱性磷酸酶(ALP)法细菌总数分析仪、三磷酸腺苷(ATP)在线分析仪等。/pp  藻类在线分析仪是利用以叶绿素为代表的光合色素,在激发光下会发出荧光,荧光的强度和藻类中叶绿素的含量相关,进而和水中藻类总量相关 而且同一门类的藻类中的光合色素对特定波长的激发光具有相近的相应荧光光谱,因为这种特征色素的存在,不同门类藻类的荧光光谱之间具有较显著的差异,根据藻类各自的特征光谱及其强度,可以对藻类进行分类及对不同门类藻的浓度进行定量检测。在线流式细胞仪(FCM)是将实验室流式细胞仪应用于水质在线分析的一种技术,仪器通过检测多种散射光和荧光信号,实现在细胞分子水平上对待测对象(细胞、RNA\DNA、蛋白质等)的物理和生物学特征的快速检测,在先进算法和运算能力的支持下,对这些复杂和数量众多的信号加以定量处理 流式细胞仪测量总细胞数(TCC),已经被瑞士列入饮用水标准分析方法。目前流式细胞术在线细菌分析仪,可以快速测量水中细菌总数、藻类等指标,并能通过不同的荧光染色材料对活细菌和死细菌进行区分,获得大量有价值的水中微生物信息。/pp  目前,采用水下3D显微成像镜头,在人工智能、图像识别技术的支持下,实时连续获得水体中的藻类数量、分类情况等信息 或者对污水生物处理过程中的原虫以及微生物种群、活动进行连续监测,帮助运行人员实时控制和优化污水处理工艺也开始得到应用。/pp  通过测量水中微生物代谢产物的方式来及时获得微生物活性的信息,也是目前发展很快的在线分析仪器技术。新陈代谢是活生物体最基本的标志,它反映了细胞从环境中获取能量的能力,生物体新陈代谢都会通过酶来进行。某些生物体或生物群落会产生特异性的酶,测量这种特异性酶进行测量,就可以得到目标生物体代谢活性的信息,并计算出活的目标生物体的浓度。由于实验室微生物分析方法需要人工培养,耗时长,在涉及水处理工艺过程控制,以及水质超标报警、水质安全预警的需求时,在线水质分析仪器快速、自动的优势就得到了充分的体现。以大肠杆菌分析为例,目前有两种方式的在线大肠杆菌分析仪,一种是酶底物法,酶底物法基于标准的实验室方法,其原理是利用水中大肠杆菌经过培养在代谢过程中产生的β-葡糖醛酸酶,分解培养基中的特定底物,产生荧光,荧光强度与水中大肠杆菌的含量有数学相关性,通过测量荧光强度就能够计算出大肠杆菌浓度。由于酶底物法方法仍然需要培养,测量时间会受待测水样大肠杆菌浓度的影响,通常需要从4-18小时,目前这种方法的在线分析仪器还只能用于水质自动分析,不能满足过程控制的需求 另一种是酶活力直接测量法,通过建立酶活力的标准曲线,直接测量水中β-葡糖醛酸酶的活力,酶活力的大小与大肠杆菌的含量高度相关,进而得到水中大肠杆菌的浓度 由于酶活力直接测量法不需要对水样进行培养,可以在15分钟内完成一次测量。/pp  碱性磷酸酶(ALP)法细菌总数分析仪是利用细菌碱性磷酸酶活力与细菌总数的相关性,通过直接测量待测水样中的碱性磷酸酶活力,获得水中细菌总数的相对数据,并通过和实验室传统培养方法的测量结果进行比对校准,进而实现针对特定水样的细菌总数的在线实时监测,这种原理的在线水质分析仪器,其测量周期也只需要15分钟,可以满足实时监测和水处理工艺过程自动控制的需求。/pp  三磷酸腺苷(ATP)在线分析仪是测量三磷酸腺苷 (ATP)这种存在于所有活细胞内的能量物质,研究表明,水中ATP含量与活细胞数量呈正相关关系,通过测定 ATP含量就能间接反映水中的活性生物量。其测量方法是:基于生物发光技术,细胞在裂解后释放出ATP,在荧光素酶的作用下,试剂中的荧光素与ATP发生反应,最终释放出固定波长的荧光,荧光强度与ATP浓度呈一定比例关系,利用荧光检测计检测得到荧光信号,和已知的ATP校准曲线对比,就可得到ATP浓度,进而得到水中活性生物量的数据。这种方法试剂中的荧光素酶,需要在低温下保存,否则酶活力会受到影响,进而影响测量结果的准确性,要求在线分析仪器内置制冷设备,仪器结构稍显复杂。/pp  在线水质分析仪器的“3D时代”,通过生物指标的在线监测,解决了以往只能通过物理、化学指标间接反应水中微生物活动的局限性,为更全面的水质安全评估和水处理过程真正受控提供了更多有价值的数据 随着更多生物指标实现在线监测,和在线监测的物理、化学指标协同作用,水处理过程的微生物污染控制和生物法水处理工艺都将不再是黑箱控制,水处理的效率和安全性将会得到进一步的提高。/pp  strong番外:/strong/pp  关于在线生物毒性仪,前面提到过,广义的生物指标还包括水的生物毒性,具体是以某种生物作为实验手段,测试其对特定水体的反应来衡量水的综合毒性。由于水中的有毒物质种类繁多,数量巨大,几乎不可能通过物理或者化学手段分析穷尽这些物质 而且,即使知道了这些物质分别在水中的含量和毒性,也会由于这些物质在水中还存在着诸如协同、拮抗、相加、独立等多种不同的相互作用方式,对水的毒性产生影响,导致无法通过物理、化学的方法来确定最终水的毒性。这时就需要采用生物体来直接评价水的综合毒性。/pp  被用作毒性试验的生物主要有:发光细菌、鱼、大型蚤、藻类、硝化细菌等,微生物燃料电池(MFC)在毒性测试的应用也有报道。目前,采用上述这些生物的在线毒性分析仪器都有了成熟的产品和市场应用。/pp  其中,发光细菌法测量生物毒性分析是一种十分成熟的方法,在国际标准化组织(ISO)和中国都有实验室测量的标准方法,标准代号和名称分别是:ISO11348-3:2007 《Water quality — Determination of the inhibitory effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test) — Part 3: Method using freeze-dried bacteria》 以及GB/T15441-1995 《水质急性毒性的测试 发光细菌法》,具体方法是 利用某些自体发光的细菌,如明亮发光杆菌、青海弧菌、费氏弧菌等,在遇到毒性物质时,细菌会死亡造成发光强度减弱,其相对发光度与水样毒性组分浓度呈显著负相关(P≤0.05),因此可以通过以一定量的发光细菌作为测试试剂,测量其在特定水体的相对发光度,以此表征水样的毒性水平。现有的发光细菌法在线生物毒性分析仪,就是把上述实验室分析方法及步骤通过自动控制完成从水样采集、输送、试剂添加到结果计算的全过程自动分析,从而实现对待测水样综合生物毒性的实时在线监测。目前主要有两种进样方式的发光细菌法在线生物毒性分析仪,一种是采用实验室分析仪常用的批次进样方式,一次进样,完成一个分析流程后再进下一个水样,由于这种仪器分析的是非连续的水样,有可能在水体发生突然变化时,丢失部分水样的真实数据。另一种是连续进样方式,水样连续的进入反应器和发光细菌试剂混合,仪器连续检测发光强度变化,这种进样方式可以保证在线生物毒性仪分析的是连续水样,相比批次进样能够更加及时连续地反映水体毒性的变化。/pp style="text-align: right "strong(供稿:重庆昕晟环保科技有限公司 总经理程立)/strong/pp style="text-align: left "strongbr//strong/pp style="text-align: left "strong  本网按:/strong/pp  正如文中所提,水中生物指标的实时变化数据,在实现对水质变化的预测预警或者对水处理工艺过程进行优化和自动控制方面是至关重要的。在“2D时代”,受制于生物技术的发展水平,人们大多采用水质替代指标或是测量由生物特别是微生物作用引起的水的物理或者化学指标的改变等间接测量手段来推断生物指标的变化,从而对水处理工艺进行控制。/pp  近年来,对生物指标进行实时在线监测得以实现,水质在线监测进入“3D时代”,一方面是得益于生物科学技术的快速发展 另一方面则是因为水行业对水中以致病细菌、病毒及抗性基因等为代表的生物污染物的日益重视,这一点在我国新冠肺炎防疫工作中得到了体现。/pp  本网关注发现,在2019年年底爆发的新冠肺炎疫情重大公共卫生事件中,水中微生物的检测/监测为阻断疫情传播入口发挥了重要的作用,同时,这次疫情暴露出我国在城市公共环境治理方面还存在短板死角,亟待补齐。中共中央总书记、国家主席、中央军委主席、中央全面深化改革委员会主任习近平在2020年2月14日下午主持召开了中央全面深化改革委员会第十二次会议并发表重要讲话。他指出,要改革完善疾病预防控制体系,坚决贯彻预防为主的卫生与健康工作方针,坚持常备不懈,将预防关口前移,避免小病酿成大疫。技术的发展加上市场的需求,水中微生物的检测/监测或将迎来良好的发展机遇。/pp  为此,仪器信息网特于2020年3月17日组织召开了“水中微生物检测技术及热点应用”专题网络研讨会,邀请多位专家作精彩主题报告,为相关技术人员提供线上互动交流平台,加强学术交流。/pp  会议链接如下,点击链接可查看报告回放视频:/pp  a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/weishengwu/" target="_self" style="color: rgb(192, 0, 0) text-decoration: underline "strongspan style="color: rgb(192, 0, 0) "“水中微生物检测技术及热点应用”/span/strong/a/p
  • 岛津成像质谱显微镜应用专题丨米曲可视化
    镜质合璧 还原真实成像质谱显微镜用于米曲中磷脂和葡萄糖的可视化分析 引言米曲是清酒酿造中的关键元素。它在清酒酿造中的主要作用被认为是提供分解淀粉和蛋白质的消化酶。众所周知,米曲成品的成分对清酒的品质(味道和香气)有很大的影响。然而,目前为止对米曲质量的评估经常依赖于首席酿酒师的经验。这意味着此领域相关科学知识的不足,且仍有发展空间。当首席酿酒师评估米曲质量时,米曲的物理结构,即外观和质地似乎是质量指标之一。在过去的研究中利用扫描电子显微镜来研究米曲的内部结构,但直到近几年,评估米曲结构和成分关系的研究仍然进展甚微。由于岛津iMScope成像质谱显微镜可同时观察样品结构和成分分布,在本应用报告中,我们将iMScope应用于发酵领域,并尝试可视化分析米曲结构和成分分布。 如图1所示,质谱成像(MSI)是非常适合观察米曲结构以及决定其有效成分分布的技术。MSI应用于食品的论文,已有芦笋中天冬酰胺和姜黄根中姜黄素分布可视化的应用报告⑴,⑵。本文针对食品科学研究中的“发酵”新应用领域,尝试着将米曲内的结构和成分分布可视化。由于米曲非常易碎,在进行MSI分析时,未经前处理制作米曲切片几乎是不可能的。因此,我们研究了各种切片制备方法,并成功实现从生米到蒸米和米曲过程中的代谢物可视化分析。图1 质谱成像(MSI)工作流程 实验 2-1试剂使用羧甲基纤维素(CMC)(FUJIFILM Wako)为包埋剂,配制浓度为4%的CMC水溶液,并将溶液放入70℃的恒温箱过夜来确保完全溶解。本实验中使用的基质是α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)和N-(1-萘基)聚乙烯二胺二盐酸盐(NEDC)(Merck),溶剂为乙腈、异丙醇和甲醇(FUJIFILM Wako)、超纯水。 2-2切片制备使用清酒酿造用的抛光率为70%的山田锦大米(白鹤酒造株式会社)制成的蒸米和米曲。生米可视化研究中使用市售大米。如前所述,这些样品材料极其脆弱。因此,采用冷冻切片机制备切片并使用粘性冷冻膜(cryo-lab)回收获得的切片。将米粒包埋在上文所述的4%羧甲基纤维素溶液中,在-80℃冷冻。切片厚度为20 μm,获得的薄膜利用导电双面胶带(3M公司)固定在ITO涂层玻璃载玻片上(无MAS涂层,表面电阻:100 Ω/m2)(松浪玻璃工业株式会社)(图2)。图2 米曲切片制备 2-3基质涂敷在检测米粒切片和米曲切片中的磷脂时,使用岛津iMLayer基质升华系统将CHCA沉积在样品表面(图3),接着喷涂CHCA溶液(3)。基质升华的膜厚度为0.5 μm。利用由乙腈、异丙醇、超纯水(3: 1: 6)构成的含0.1 %甲酸的混合溶剂溶解CHCA,调节其浓度为10 mg/mL。已知可以有效电离葡萄糖的基质NEDC,利用iMLayer进行升华,升华时设置温度为220℃、时间为10分钟。NEDC基质升华后,利用5%甲醇溶液进一步进行重结晶。图3 iMLayer基质升华系统 2-4质谱成像MSI检测使用岛津iMScope成像质谱显微镜进行。激光照射次数为100次/点。正离子模式检测磷脂,空间分辨率为25 μm,负离子模式检测葡萄糖,空间分辨率为50 μm。检测范围:正离子模式m/z 400-800,负离子模式m/z 180-230。在所有检测中,激光强度均设置为45,检测器电压为2.1 kV。 2-5构建MS图数据分析和MS图像构建采用岛津MSI分析软件Imaging MS Solution和IMAGEREVEAL MS进行。IMAGEREVEAL MS是通过统计学功能实现非靶向分析的软件。它拥有卓越的校正函数(图像过滤、像素插值),并含有“相似图片提取”功能。本文后半部分所示的葡萄糖可视化数据是利用IMAGEREVEAL MS软件进行分析。 结果 3-1生米、蒸米和米曲中磷脂的分布图4显示了生米、蒸米和米曲切片中胆碱的分布。胆碱是一种在米曲制作过程中分布和数量会发生巨大变化的典型成分。生米的结果在碾米之前测得,且结果表明胆碱累积在大米胚芽中。在碾碎后的蒸米中,来自胆碱的峰急剧下降,但在米曲的内部则观察到极强的峰。这表明胆碱在米曲发酵过程(即米曲制作过程)形成。因此,使用MSI 可以观察到米曲制作过程中胆碱数量和空间分布发生急剧变化的现象。图4 生米、蒸米和米曲中胆碱的分布 在米曲的内部还观察到各种磷脂(包括溶血磷脂)的累积(图5)。尤其是溶血磷脂酰胆碱LPC(16:0),m/z 496.34和LPC(18:2),m/z 520.34显示这一趋势(4)。而磷脂m/z 748.35和786.30的MS图像显示出其在米曲中的不均匀分布。这种异质性被认为由曲霉(米曲霉,Aspergillus oryzae)侵入蒸米中生长出雾状菌丝导致,这个过程就被称为“hazekomi”。下一部分我们将介绍一种将hazekomi过程可视化的方法开发以及将这种方法与MSI结合使用的结果。图5 米曲(山田锦,稻米抛光率:70 %)中溶血磷脂和磷脂的分布 3-2hazekomi可视化及其与MSI的配合使用⑸,⑹haze指的是米曲霉菌丝在蒸米表面扩散时呈现的白点,在首席酿酒师进行米曲目检时被作为一个结果指标。在早期的hazekomi可视化研究中,Yoshii等人发表了一篇基于扫描电子显微镜(SEM)观察的报告,他们通过将米曲霉传播过程直接可视化的方式成功观察到了米曲中米曲霉的生长,该结果有助于改善制曲过程(7)。 利用SEM将hazekomi过程可视化时,观察微观区域的能力是一个重要特征。不过,我们认为将整个米曲hazekomi过程可视化的方法以及可获取成分分布信息的技术也是有用的。为了解决这一问题,我们引入了采用β-葡萄糖醛酸酶(GUS)作为标志基因的GUS报告系统用于hazekomi可视化。具体来说,通过构建米曲霉GUS表达株以及生产使用该菌株的米曲(以下称为GUS米曲)来实现对制曲过程中米曲霉生长的清晰观察。GUS米曲的使用实现了通过颜色反应来可视化米曲霉位置,而当这种技术和MSI配合使用时,可获取关于成分分布的信息。这两种技术的结合同时实现了整个米曲的hazekomi可视化以及成分分布的可视化研究。 在此我们将对这种旨在把GUS报告基因系统应用于米曲的创新研究进行阐述。GUS报告基因系统最初是为了将植物组织中菌丝体的可视化而开发的。在植物组织中,常见做法是将样品浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷(X-Gluc)溶液中,这是一种用于着色的显色底物。拥有极硬细胞壁的植物组织即便是长期浸泡在X-Gluc溶液中,也能够毫无问题地维持样品观察所需的形态。 不过,如前所述,米曲非常脆弱,且其性状和植物组织完全不同。这意味着采用现有的着色方案将极为困难。事实上,我们证实了在米曲浸泡在X-Gluc溶液中固定着色所需时间内,样品的形态由于吸水而发生了很大的改变。为了避免这一问题,必须改变添加X-Gluc的方式。因此,我们构思了一种通过将X-Gluc溶液喷洒在GUS米曲切片上的方法来可视化分析hazekomi过程。 图6显示了采用这种方法得到的结果。这里制曲使用的是抛光率为70%的抛光白鹤锦稻米(白鹤酒造株式会社的酒米),并在制曲开始24h、31h以及43h后取样。随着制曲的进行,可以观察到靛蓝色从曲的表面渗透到内部。尤其是在43小时之后、制曲完成时,不仅在曲的表面,在内部也能检测到浓烈的靛蓝色,表明米曲霉已经到达了稻米内部。 曲的一个主要作用是在酿造(发酵)阶段提供各种酶,以便形成酵母菌所需的营养。观察到的主要酶为α-淀粉酶或葡萄糖淀粉酶,这两者会形成作为酵母生长所需的葡萄糖。此外,也有报道表示α-淀粉酶可能是影响曲霉菌丝体侵入性生长的非常重要的酶。图6 GUS米曲中hazekomi过程的可视化分析(比例尺:1 mm(插入图片:200 μm)) 尽管既往研究中报道了制曲后葡萄糖的增加,但hazekomi和葡萄糖分布之间的关系尚未明确。在制曲过程每个阶段的米曲质谱图中,确实观察到了葡萄糖峰强度的升高(图7)。已有报道表明NEDC可以增加癌组织中葡萄糖检测的灵敏度(8)。因此,当使用NEDC作为葡萄糖MSI的基质时,[M+Cl]-= m/z 215.02在负离子模式下被检测到。 为了研究GUS米曲的hazekomi过程和葡萄糖分布之间的关系,使用GUS染色切片相邻的切片进行了MSI,比较获得的葡萄糖离子强度和GUS染色图像的分布,图8显示其结果。 观察葡萄糖分布及与GUS染色图像的叠加可以了解到从制曲初始阶段到后期阶段,葡萄糖从外到内增加。这一结果表明hazekomi和葡萄糖分布之间存在相关性。 另外,有些区域由于X-Gluc为深色且葡萄糖强度很高而成像为蓝色(黑色箭头显示),同时在本实验中也能看到有些部分虽然也观察到了hazekomi,但葡萄糖强度低,例如以黑色圆圈表示的区域。这些结果表明位置不同,hazekomi产生的葡萄糖量存在差异性。今后,可以通过包含各种代谢物(例如氨基酸、糖类、糖醇)分析的探讨来实现从化学角度更好地了解hazekomi现象。 虽然目前的考察着重于葡萄糖并解释了伴随hazekomi过程葡萄糖分布的变化,但可以想象,形成的酶的扩散范围和活性也会受到诸如米粒特征等其他因素的影响。这种新的可视化技术(GUS米曲和MSI的融合)预期可以改进米曲和其他曲衍生产品的制曲流程。图7 利用NEDC基质获得的葡萄糖峰的时间依赖性变化图8 GUS米曲中葡萄糖([M + Cl]–)的可视化(比例尺:1 mm) 结论 在本研究中,分析了磷脂在山田锦大米(清酒酿造米)中的空间分布,并利用白鹤锦米(白鹤酒造株式会社的专有清酒米)可视化分析hazekomi过程和葡萄糖分布之间的关系。同时还利用白鹤锦米制备了一种表达GUS的米曲品系,并用于揭示hazekomi过程和葡萄糖分布之间的关系。这种新的可视化技术利用了GUS米曲和MSI相结合,可有助于更好地了解米曲和其他曲衍生产品的制曲流程并改进制曲方法。由于本实验中采用的岛津iMScope成像质谱显微镜能同时实现微观区域的光学显微镜观察以及显微镜下的质谱分析,将iMScope应用于各种酒曲和其他麦芽的分析,可以获得发酵领域相关新科学知识。 iMScope QT(图9)是iMScope的新一代产品,于2020年6月发布。在延续iMScope TRIO卓越的显微镜观察功能和空间分辨率的同时,新的iMScope QT提供了更高的质量分辨率、检测灵敏度和分析速度,让分析变得更轻松。同时,由于能够分析更宽的质量范围,期待MSI技术可以进一步扩展在不同研究领域应用的可能性。图 9 iMScope QT 参考文献(1) K. Miyoshi, Y. Enomoto, E. Fukusaki, and S. Shimma, Shimadzu Application Note (No. 57).(2) S. Shimma and T. Sagawa, Shimadzu Application Note (No. 63).(3) S. Shimma, Y. Takashima, J. Hashimoto, K. Yonemori, K. Tamura, and A. Hamada, J. Mass Spectrom., 2013, 48, 1285(4) N. Zaima, N. Goto-Inoue, T. Hayasaka, and M. Setou, Rapid Commun.Mass Spectrom., 2010, 24, 2723.(5) A.P.Wisman, Y. Tamada, S. Hirohata, K. Gomi, E. Fukusaki, S. Shimma, J. Biosci.Bioeng., 2020, 129, 296(6) A.P.Wisman, Y. Tamada, S. Hirohata, K. Gomi, E. Fukusaki, and S. Shimma, J. of Brew.Soc.Japan (in press).(7) M. Yoshii and I. Aramaki, J. of Brew.Soc.Japan, 2001, 96, 806.(8) J. Wang et al., Anal.Chem., 2015, 87, 422. 文献题目《成像质谱显微镜用于米曲中磷脂和葡萄糖的可视化分析》 使用仪器岛津iMScope TRIO 作者Shuichi Shimma *1, 2, Yoshihiro Tamada *3, Adinda Putri Wisman *1, Shuji Hirohata *3, Katsuya Gomi *4 Eiichiro Fukusaki *1,2*1 大阪大学工程研究生院生物技术系*2 大阪大学岛津组学创新研究室*3 白鹤酒造株式会社*4 日本东北大学农学研究生院未来生物产业的生物科学与生物技术系
  • 临床实验室自建检测方法渐行渐近,岛津红宝书助您大展宏图!
    导语2023年1月全国医疗器械监督管理工作会议在北京召开,会议指出,支持重点区域监管创新和产业发展,持续夯实注册管理法制基础,扎实开展自制试剂试点等内容。随着“健康中国”战略的实施,临床实验室自建检测方法(Laboratory Developed Tests, 以下简称LDT)势在必行。针对客户需求和临床行业发展趋势,岛津推出《医学检验应用手册》,共分8大章节,内容涵盖质谱在出生缺陷领域、内分泌代谢及小分子代谢领域、营养水平监测、诊断标志物、基因检测、职业病与中毒医学领域的应用,以及全自动前处理设备在医学检验中的应用和精准医疗。每个章节均包含临床检验中热点难点项目,满足质谱检测行业需求。手册中检测项目大部分采用自建方法,从试剂配置、样品前处理到质谱测定,助您轻松应对临床实验室自建检测方法开发!相关法规2021年3月18日,国家药监局正式发布了最新修订的《医疗器械监督管理条例》。该《条例》指出,对国内尚无同品种产品上市的体外诊断试剂,符合条件的医疗机构根据本单位的临床需求,可以自行研制,在执业医师指导下,在本单位内使用。这为医疗机构采用LDT方式进行临床检验提供了法律依据。2022年,上海、广州及杭州等多地城市陆续出台相关文件积极支持LDT试点,有条件允许LDT项目服务于临床推广。质谱技术在医学检验中的应用目前,临床诊断中最常用的质谱类型有三重四极杆质谱仪LC-MS/MS、气相色谱质谱仪GC-MS、基质辅助激光解析质谱仪MALDI-TOF、液相色谱仪和电感耦合等离子体质谱仪ICP-MS等。尤其是LC-MS/MS,是当前在临床诊断中应用最广的质谱技术,其与自动化前处理设备联用广受青睐。【岛津解决方案】丰富的产品线岛津拥有丰富的产品线,仪器涵盖液相色谱、气相色谱、三重四极杆质谱、气相色谱质谱、基质辅助激光解析质谱、电感耦合等离子体质谱、全自动在线前处理设备等,丰富的产品线保证了医学检验完善的方案应对。LDT红宝书 -《医学检验应用手册》岛津《医学检验应用手册》分8大板块,共包含71篇应用文章,其中包括临床热点项目新筛、维生素检测、微生物诊断、血药浓度检测及微量元素检测等,丰富的医学检验内容及细致广泛的LDT方案,堪称医学检验红宝书!LDT红宝书八大板块临床项目涵盖广泛1特色案例1:串联质谱同时测定27种激素串联质谱测定类固醇激素,一直被认为是质谱测定重点难点项目,而超过20种激素同时测定方案,更是难点中的难点。岛津激素方案从标准品配制,样品SPE净化到质谱分析,全套LDT流程助您轻松拿捏激素测定项目。串联质谱同时测定27种激素色谱图2特色案例2:ICP-MS快速测定血清中微量金属元素的含量临床应用中人体微量元素及痕量元素测定越来越倾向于使用灵敏度更高更准确的ICP-MS,岛津ICP-MS临床测定方案操作简单、测定准确、仪器稳定,可准确定量分析人体内微量元素及痕量元素。3特色案例3:GPC-GCMS法测定血液中17种有毒物质对于低沸点、低极性的毒药物分析,岛津方案简单的前处理及GCMS准确定性定量优势,助您迅速开展相关检测。LDT自建项目步骤完整而清晰手册中大部分应用文章采用LDT自建方法完成,从标准品配置、样品前处理到液相条件设置及质谱参数设置,包含一条龙式完整方法开发,您只需“copy”即可完成LDT自建方法转移,使LDT方法开发化繁为简,使LDT方法开发“so easy”,解放您的时间和精力。4特色案例4:血尿同筛检测方案新生儿遗传代谢病筛查作为检品量最大的串联质谱检测项目之一,目前已在全国推广开来。按照相关规定,干血斑初筛阳性的患儿需进行GCMS尿筛二次确证。岛津提供即可使用的血尿同筛方案,血尿同筛均提供完整的前处理操作流程及数据处理软件,可轻松应对血尿同筛。血筛&bull 提供“即刻使用方法” ,可于多种试剂盒相匹配。&bull 仅需1uL进样量即可提供准确结果&bull 提高工作效率60 秒/ 样品专业化的软件简化操作步骤并提供质量控制管理尿筛&bull 单个标本一次分析可同时进行40种代谢病的筛查和判断。&bull 超130种有机酸已登陆于诊断软件,无需购买标准品,零方法开发。&bull 诊断软件可扩展多种有机酸筛查诊断。红宝书《医学检验应用手册》目录质谱在出生缺陷领域中的应用● 非衍生化-三重四极杆液质联用法进行新生儿遗传代谢缺陷筛查的应用研究● 液相-三重四极杆质谱法进行新生儿遗传代谢病筛查的应用方案● 使用LCMS-8050衍生化法测定DBS中的氨基酸和酰基肉碱● 气相色谱质谱联用法在有机酸尿症诊断中的应用● LCMSMS用于罕见病X-ALD筛查应用研究查的应用方案● LCMSMS用于肌酸缺乏综合征筛查应用研究● LCMSMS用于多种有机酸血症筛查应用研究● 串联质谱法用于先天性肾上腺皮质增生症筛查诊断应用研究质谱在内分泌代谢及小分子代谢领域中的应用● 应用LCMSMS检测人血浆中儿茶酚胺及其代谢物● LCMSMS测定人血浆中27种激素含量● LCMSMS测定人血浆中17种糖皮质激素含量● LCMSMS同时测定血清中血管紧张素I、II● 应用LCMSMS检测人血清中游离脂肪酸含量● 高效液相色谱三重四极杆质谱法测定人血清中游离氨基酸含量● 超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定血清和尿液中氨基酸含量● LCMSMS检测人血清中全谱氨基酸● LCMSMS测定人血清中17种胆汁酸含量● LCMSMS用于高同型半胱氨酸血症诊断应用研究● LCMSMS结合蛋白沉淀法用于人血浆中胰岛素样生长因子1的测定● 气相色谱-质谱法检测血液中的5种脂肪酸含量● GCMS法检测血液中8种短链脂肪酸含量● GCMS法检测尿液中8种短链脂肪酸含量质谱在营养水平监测应用● 应用LCMSMS检测人血清中25-羟基维生素D2/D3含量检测● 应用Nexera MX System平行液相三重四极杆质谱联用系统检测人血清中25-羟基维生素D2/D3含量● 串联质谱用于血清中脂溶性维生素含量测定● Nexera MX平行液相色谱质谱联用系统测定人血清中的VA和VE含量● LCMSMS测定血清中的维生素K1● LCMSMS检测人血清中维生素B1、B2和B6含量● ICPMS-2030在临床尿液碘含量测定中的应用● ICPMS-2030测定尿液中多种金属元素的含量● ICPMS-2030碰撞池技术快速测定血清中微量元素的含量质谱在诊断标志物检测中的应用● LCMSMS测定人血浆中的总同型半胱氨酸● 超高效液相色谱三重四极杆质谱法测定血清中甲基丙二酸的含量● LCMS-8050选择离子监测模式快速测定人体血液中糖化血红蛋白含量● LCMS-8045多反应监测模式快速测定人体血液中糖化血红蛋白含量● LCMSMS同时测定人脑脊液中淀粉样蛋白Aβ1-42和Aβ1-40● LCMSMS测定人血浆中草酸含量● 同位素稀释气相色谱质谱法测定血清甘油三酯含量● LCMSMS定量分析人血清中的甲状腺激素T3和T4含量基因检测● 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF结合SARAMIS数据库鉴定耐药菌品种● 应用微芯片电泳仪MultiNA高通量检测诺如病毒基因● 一种高通量和自动化用于宫颈癌筛选和预测的人乳头瘤病毒分型方法● 微芯片电泳MultiNA在二代测序(NGS)文库质控中的应用● RFLP片段的定性与定量分析● DNA外显子的定性与定量分析● 微芯片电泳MultiNA分析基因编辑样本基因型质谱在职业病与中毒医学中的应用● ICPMS-2030测定血液中的Cr、Cd、As、Tl 和Pb● ICPMS-2030碰撞池技术快速测定血清中微量金属元素的含量● LC-ICP-MS直接测定血浆中Pt元素含量● LCMS-8045 测定血液中的草甘膦● LCMS-8045 测定血液和尿液中的乙基葡萄糖醛酸苷● GPC-GCMS法测定血液中有毒物质● 在线凝胶色谱净化结合三重四极杆气质联用仪测定人体血液中有毒物质● 顶空-气相色谱法测定血液中乙醇含量● 生物样品血液中甲醇、乙醇、乙醛、正丙醇、异丙醇、丙酮和正丁醇的顶空-气相色谱检测方法(内标法)● GC Smart+HS-10测定血液中酒精含量● 顶空-气相色谱质谱法测定血液中磷化氢及其代谢物含量● 超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法进行血液中的5种毒物检测全自动前处理设备在医学检验中的应用● CLAM-2000-LCMS-8050联用系统测定人血清中1,5-脱水葡萄糖醇含量● CLAM-2000和LC-MS/MS联用测定尿样中的苯丙胺类毒 品含量● CLAM-2000与LCMS-8050联用测定人血清中5种雌激素含量● ATLAS-LEXT和LCMS-8045联用检测尿液中酸碱毒 品含量● ATLAS-LEXT和LCMS-8045联用检测毛发中四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚● ATLAS-LEXT和LCMS-8045联用检测血液中11种常见毒 品含量● ATLAS-USIS结合GCMS测定血液中有机磷农药毒物● ATLAS-LEXT结合GCMSMS法测定血液中46种农药类毒物● ATLAS-USIS结合岛津“药物毒物快速筛查方法包”对尿样中毒物进行高自动化快速筛查、定性及定量● CLAM-2030-LCMSMS联用系统结合岛津“药物毒物快速筛查方法包”对血浆样品中毒物进行全自动化快速筛查、定性分析精准医疗● 《Nature》:血浆中β-淀粉样蛋白生物标记物对阿尔兹海默疾病的高效诊断● 《Oncotarget》:应用气相色谱质谱联用法对结直肠癌进行早期诊断筛查●《Biological and Pharmaceutical Bulletin》:基于nSMOL酶解技术对利妥昔单抗的LC/MS生物分析及方法验证医学检测道路上,岛津伴您同行,更多内容,敬请关注《医学检验应用手册》请扫码查看撰稿人:孙亮文中推荐技术方法方案仅用于医学专业人士技术交流,不作为临床诊断依据。如需深入了解更多细节,欢迎联系津博士 sshqll@shimadzu.com.cn
  • 第十届全国药物分析大会第二轮通知
    仪器信息网讯药物分析学是分析科学在药学中的应用,并在与化学、生物学、医学及药学相关学科的交叉融合过程中实现创新性发展,为药物研发和应用的全链条创新提供关键的技术平台和方法学支撑。药物分析学于2008年被国家自然科学基金委正式列入学科方向目录(代码H3010)。在国家自然科学基金委药物学与药理学处领导支持下,由罗国安教授、贺浪冲教授、曾苏教授作为发起人,于2011、2012、2013年分别在西安、杭州和北京召开了三届“药物分析学科战略发展研讨会”,2013年起由清华大学、西安交通大学、浙江大学、沈阳药科大学、中国药科大学、第二军医大学、中国医学科学院、中国食品药品检定研究院、武汉大学等作为发起单位成立全国药物分析大会理事会并每年召开全国药物分析大会,至今已成功召开9届,得到了广大同行的充分认可和支持。2018年10月,以全国药物分析大会理事会为基础成立了中国医药生物技术协会药物分析技术分会。  为使我国广大药物分析工作者及时把握本学科领域发展动态,获取国内外最新研究成果信息,为从事药物分析研究的专业人员提供展示成果的平台,促进交流与合作,推动我国药物分析学学科的发展,中国医药生物技术协会药物分析技术分会决定于2020年11月20-23日在西安中国西部创新港召开“第十届全国药物分析大会”。会议由中国医药生物技术协会药物分析技术分会主办,西安交通大学承办。届时将邀请药学领域专家与药物分析同行就新技术、新方法进展及其最新应用研究成果、未来发展趋势等进行深入交流与探讨,并为药物分析学科青年人才成长和基金项目申请提供指导。现将有关事宜通知如下:  一、会议时间和地点时间:2020年11月20日报到,21-22日开会,23日离会。地点:中国西部创新港(陕西省咸阳市秦都区钓台街道交大创新港)二、会议主办及承办单位  主办单位:中国医药生物技术协会药物分析技术分会  承办单位:西安交通大学三、会议组织结构  1.大会主席:罗国安  副主席:贺浪冲曾苏毕开顺再帕尔· 阿不力孜张尊建陈子林江正瑾执行主席:王嗣岑梁琼麟  2.学术委员会:见附件1  3.组委会:  组长:王嗣岑梁琼麟 委员:余露山许风国解笑瑜侯晓芳魏芬景王慧四、会议特邀专家和学术报告(部分专家及报告还在确认中) 序号姓名职称单位报告题目1陈志南院士空军军医大学待定2王广基院士中国药科大学待定3罗国安教授清华大学创建古方比较学4曾苏教授浙江大学我国药物分析学应用基础研究状况分析和展望5罗茜研究员中国科学院深圳先进技术研究院质谱成像技术应用于生物医学研究6再帕尔· 阿不力孜教授中央民族大学基于质谱成像技术与代谢组学的药物体内分析方法研究进展7柴逸峰教授海军军医大学药物分析学科在药学中的地位和创新发展方向8林金明教授清华大学微流控单细胞分析方法研究9陈子林教授武汉大学药物分析新技术与方法的机遇与挑战及新进展10伍建林教授澳门科技大学Lessismore:multi-omicsbasedlowabundancebiochemicalsubstancesanalysesandtheirapplication11王璇教授北京大学待定12卢建忠教授复旦大学多组分microRNA流式荧光检测13曾湖烈教授复旦大学光学微球在高灵敏度荧光检测中的应用14李迎春教授哈尔滨工业大学(深圳)微流控电化学传感芯片在药物分析和毒性监测中的应用15洪战英教授海军军医大学中药成分跨生物屏障转运分析新方法研究16周婷婷教授海军军医大学基于药效物质、指纹特征及体内过程的中药全面质量控制技术体系17朱臻宇副教授海军军医大学待定18杨帆教授湖北中医药大学高曲率纳米界面生物分析与本草鉴定19徐丽教授华中科技大学多功能荧光微纳材料的构建及在药物分析中的应用20姜宏梁教授华中科技大学液质联用技术在磷脂及鞘脂类成分分析中的应用研究21顾景凯教授吉林大学待定22江正瑾教授暨南大学待定23周海波教授暨南大学基于点击反应开关的SERS技术检测单胺氧化酶B的活性24谭光国副教授空军军医大学代谢组学和生物色谱技术助力中药经典名方四逆汤配伍规律和物质基础研究25吴红教授空军军医大学待定26董钰明教授兰州大学胶束色谱法测定动物源性食品中磺胺和中药中异黄酮的方法研究27孟宪生教授辽宁中医药大学待定28朱栋教授南京中医药大学荧光成像垂钓技术识别中草药中活性分子29白钢教授南开大学整合现代分析技术探索中医药治疗温病的作用机制30梁琼麟教授清华大学从小芯片看大药分——整合药物学与药理学分析的芯片实验室31阎超教授上海交通大学待定32吕海涛教授上海交通大学精准靶向代谢组学及其生物医药转化应用33范国荣教授上海交通大学附属第一人民医院基于现代药物分析技术的临床转化研究与精准药学服务34许旭教授上海应用技术大学LC-MS与NMR分析识别植物油中掺假的动物油35葛广波教授上海中医药大学药物代谢酶光学底物的设计研发及其应用进展36李清教授沈阳药科大学待定37邸欣教授沈阳药科大学药物分析中的生物样品前处理新技术一液-液-固微萃取38张真庆教授苏州大学新型糖醛酸寡糖类抗AD药物药代动力学和临床药理学研究39李敏勇教授山东大学DevelopmentofCoelenterazine-likeBioluminescentSystems40唐于平教授陕西中医药大学基于UPLC-MS/MS化学模糊识别策略的中药配伍相互作用研究41徐亮教授天津医科大学免疫亲和固相微萃取及其在疾病标志物诊断中的应用42肖玉秀教授武汉大学待定43向铮教授温州医科大学“定量网络药理学初探”:以大黄酸延缓慢性肾病为例44王嗣岑教授西安交通大学待定45刘必武教授西安交通大学待定46赵新锋教授西北大学单构象态G蛋白偶联受体固定化方法及中药成分筛选47王超展教授西北大学聚合物修饰和聚合物基高选择性吸附剂的制备及应用48黄承志教授西南大学基于短肽自组装的机械破膜癌疗法及耐药性研究49王健教授西南大学局域表面等离子体共振散射新方法在药物分析中的应用50付志锋教授西南大学噬菌体功能蛋白在耐药菌检测与治疗中的应用51钱玲慧教授浙江大学单克隆抗体药物的分子成像研究52许风国教授中国药科大学中药与化疗药物联用减毒增效等效质量标志物发现53叶慧教授中国药科大学TRAP化学蛋白质组学技术描绘活性分子胞内靶标全景54狄斌教授中国药科大学待定55杭太俊教授中国药科大学待定56贺玖明研究员中国医学科学院药物研究所质谱成像新技术及其体内组织微区药物代谢研究57王琰研究员中国医学科学院药物研究所待定58张金兰研究员中国医学科学院药物研究所待定59郭明全研究员中国科学院武汉植物园多靶酶超滤质谱法快速筛选天然活性化合物60宋凤瑞研究员中国科学院长春应化所基于质谱技术的中药活性筛选方法61邓必阳教授广西师范大学杂原子掺杂的碳量子点作为一种开关荧光探针在药物分析和细胞成像中的应用62谢智勇教授中山大学肠道菌群原位成像分析63陈缵光教授中山大学待定64姚美村教授中山大学中药防治幽门螺杆菌的研究65邱洪灯研究员中科院兰州化学物理研究所待定五、会议主题及论文投稿  1.会议主题:新时代新机遇交叉合作与创新发展2.征文内容:  会议按学科组设6个分会场,包括:药物分析新方法、生物药物分析、中药分析、化学药物分析、分析药理学及青年学者论坛。  征文内容包括:药物分析新技术、新方法、新原理与新应用各个方面。  3.论文摘要投稿要求:  论文摘要应包括:1)论文题目2)作者姓名及工作单位3)大摘要和关键词(6个以内)4)字数500-1500。  稿件格式:word文档,A4纸一页,中文,宋体,小四号字体。英文,TimesNewRoman,五号字体。行距1.5倍。  投稿文件请按以下格式命名:中文姓名-单位全称  交流方式:采用大会报告、分会场报告和墙报三种形式交流  论文评奖:本次会议将进行优秀Poster评奖及优秀口头报告奖。设一等奖、二等奖及优秀奖若干名,颁发证书及奖金。  投稿方式:请将论文电子稿发送至邮箱ywfxtech_2018@163.com  论文投稿截止日期:2020年10月31日  六、会议注册  1.会议注册:请填写附件的参会回执表,并按以下格式命名:参会回执-中文姓名-单位全称,发送至邮箱:ywfxtech_2018@163.com。   2.会务费用:2020年11月10日前注册并完成缴费的正式代表缴纳1300元,学生代表(凭有效证件)缴纳800元;现场注册的正式代表缴纳1600元,学生代表(凭有效证件)缴纳1100元。注册费汇款账户信息如下:  户名:中国医药生物技术协会  开户行:中国银行股份有限公司北京港澳中心支行  账号:324656017253 汇款截图以电子版形式发送至会务组邮箱ywfxtech_2018@163.com 3.会议联系:  总负责:王嗣岑:18629057973,wangsc@xjtu.edu.cn  梁琼麟:13683328687,liangql@tsinghua.edu.cn  (1)注册、论文摘要提交及报告联系人  解笑瑜:18092951319,xiexiaoyu@xjtu.edu.cn  (2)会务及住宿联系人  侯晓芳:18009210696,houxiaofang@xjtu.edu.cn(会务)景王慧:13165715119,18089190886,jingwanghui1987@163.com(住宿) 魏芬:13227876326,weifen.91@xjtu.edu.cn(用餐)七、住宿大会推荐酒店:1.蔓兰酒店(紧邻创新港,029-88685197,029-88687888)房型数量(间)协议价(元/间)含单早/双早正常价(元/间)精品大床房38m259350528精品双床房38m27335058尊雅双床房50m259470588观景双床房54m210494618备注:因蔓兰酒店房源有限,双床房需2人拼床,敬请谅解。2.咸阳丽彩天祺酒店地址:秦都区玉泉东路万达广场(近咸阳秦都火车站),距离创新港10km,班车需30min。价格:标间双床330元/间/晚,大床房350元/间/晚,含双早。备注:会议安排班车接送注意:本次会议食宿统一安排,费用自理。八、交通路线预计路程预计时间预计费用路线1咸阳机场-中国西部创新港27km60min65元(打车)路线2咸阳秦都站-西部创新港13km26min28元(打车)路线3西安北站-中国西部创新港41km40min130元(打车)47km180min15元(地铁)路线4西安站-中国西部创新港40km50min110元(打车)路线3:地铁2号线→地铁1号线→860路图1交通路线图图2创新港蔓兰酒店及会场位置图九、鸣谢金牌赞助商:安捷伦科技有限公司(AgilentTechnologies)布鲁克(北京)科技有限公司(Bruker)岛津企业管理(中国)有限公司(Shimadzu)赛默飞世尔科技公司(ThermoScientific)银牌赞助商:JournalofPharmaceuticalAnalysis(JPA)杂志美国应用生物系统公司(ABSCIEX)沃特世科技(上海)有限公司(Waters)铜牌赞助商:耐尼恩技术(北京)有限公司,陕西云能仪器设备有限公司支持媒体:仪器信息网(www.instrument.com.cn)附件1:  第十届全国药物分析大会学术委员会主席:罗国安  副主席:贺浪冲曾苏毕开顺再帕尔· 阿不力孜张尊建陈子林江正瑾秘书长:梁琼麟  副秘书长:王嗣岑余露山许风国  学术委员会成员:(按照姓氏笔画排序)  王璇王振中王海彬王嗣岑王新宏卢建忠叶正良白钢再帕尔· 阿不力孜毕开顺刘志强刘绍勇江正瑾许风国李川李绍平肖伟肖红斌余露山邸欣狄斌张金兰张真庆张铁军张尊建陈万生陈子林陈钟陈缵光罗国安季申周祥山孟宪生练鸿振胡坪饶毅姜志宏姜宏梁洪战英贺浪冲顾景凯凌笑梅高建胜黄承志曹进梁琼麟梁鑫淼董亚琳董钰明曾苏谢智勇
  • “碳达峰碳中和关键技术研究与示范”重点专项2022年项目申报指南
    根据《国务院关于改进加强中央财政科研项目和资金管理的若干意见》(国发〔2014〕11号)、《国务院关于深化中央财政科技计划(专项、基金等)管理改革方案的通知》(国发〔2014〕64号)、《科技部 财政部关于印发的通知》(国科发资〔2017〕152号)等文件要求,现将国家重点研发计划“碳中和关键技术研究与示范”重点专项2022年度项目申报指南向社会征求意见和建议。征求意见截止时间为2022年3月28日。国家重点研发计划相关重点专项的凝练布局和任务部署已经战略咨询和综合评审特邀委员会咨询评议,国家科技计划管理部际联席会议研究审议,并报国务院批准实施。本次征求意见重点针对指南方向提出的目标指标和相关内容的合理性、科学性、先进性等方面听取各方意见和建议。科技部将会同有关部门、专业机构和专家,根据征求意见情况,修改完善项目申报指南。征集到的意见和建议将不再反馈和回复。相关意见建议请于3月28日24点之前发至相应电子邮箱。联系邮箱:sfs_zyhjc@most.cn科技部社会发展科技司2022年3月21日“碳达峰碳中和关键技术研究与示范”重点专项 2022 年项目申报指南 “碳达峰碳中和关键技术研究与示范”重点专项面向国家碳达峰碳中和重大需求,聚焦社会发展和二氧化碳难减排行业关键技术突破,综合提升我国应对气候变化技术研发能力。到“十四五”末 时,使我国在该领域技术研发总体上取得重要突破,并与其他领域重点专项形成互补,为我国二氧化碳 2030 年前碳达峰提供重要的技术支撑、2060 年前实现碳中和提供技术储备,为全球气候治理提供技术贡献和系统解决方案。 2022 年,本专项立足碳达峰碳中和问题的复杂性和迫切性,跨领域综合交叉形成重大科技创新,拟重点解决其他重点专项难以统筹考虑的碳中和共性支撑技术研究示范、低碳/零碳工业流程再造工艺技术与示范、面向碳中和的前沿和颠覆性技术创新与研发、面向碳中和的创新体系与全球气候治理技术等关键问题原则/要求, 围绕面向碳中和的脱碳模型构建与决策支持系统、面向碳交易检测和监测关键核心技术研发、新型二氧化碳捕集、化学利用、区域封存安全性评价、生物质负排放技术、非二氧化碳温室气体减排、钢铁行业的富氢气体还原冶炼、钢-化联产技术、水泥行业耦合碳捕集利用封存流程再造技术、碳中和的前沿和颠覆性技术、非二氧化碳温室气体监测、碳中和技术发展路线图与创新支撑体系、碳中和进程重大治理策略、全球气候治理关键问题与应对等方向,按照基础前沿技术、共性关键技术、示范应用,拟支持 17 个研究方向。 同一指南方向下,除特殊说明外,原则上只支持 1 项(青年科学家 1项目除外),仅在申报项目评审结果相近、技术路线明显不同时, 可同时支持 2 项,并建立动态调整机制,根据中期评估结果,再择优继续支持。 本重点专项所有项目均应整体申报,须覆盖全部研究内容和考核指标(青年科学家项目除外)。项目实施周期 3-4 年。一般项目下设课题数不超过 5 个,项目参与单位总数不超过 10 家,项目设 1 名负责人,每个课题设 1 名负责人;青年科学家项目不再下设课题, 项目参与单位总数不超过 3 家,项目设 1 名负责人,项目负责人年龄要求,男性应为 1984 年 1 月 1 日以后出生,女性应为 1982 年 1 月 1 日以后出生。 本专项鼓励产学研用联合申报,项目承担单位需推动研究成果 转化应用和支持专项数据共享。 1. 碳中和共性支撑技术研发示范 1.1 面向碳中和的脱碳模型构建与决策支持系统 研究内容:提出基于全国分城市/行业详细排放清单的地区与 行业减排进程与成效监测评估指标体系和数据采集体系,构建碳达峰碳中和脱碳成本模型,并实现应用示范;针对重点控排企业,开发融合多源数据和基于先进算法的分布式企业碳排放数据智能核查信息管理系统,形成碳排放的监管动态监测预警系统;研究数据驱动的碳中和转型路径与关键不确定性评估方法,建成国家碳中和决策支撑系统;集成上述研究成果,在典型区域和城市开展系统的落地示范。 考核指标:研发面向碳达峰/碳中和的进程与成效监测评估的技术方法及指标体系 1 套;构建多维度的脱碳成本模型,并实现示 23 范应用;研发分布式企业碳排放数据采集与核证综合信息管理系统 1 套,并被政府管理部门采用;完成国家碳中和决策支持系统,具 备“平战结合”的全域管控与决策支持能力,系统应急响应时间小 于 6 小时,并被政府管理部门采用,集成以上系统在典型区域和城市示范应用。 1.2 面向碳交易检测和监测的关键核心技术研发 研究内容:针对代表性排放源和产业技术的升级迭代,开展以二氧化碳为主体的持续检测,获得具有产业和技术特征的排放因子集,形成面向碳交易的系列碳排放核算的国家标准;针对国家、省 市与工业园区碳排放复杂性和随机性,研究车载走航二氧化碳、甲烷及其碳 13(13C)的同位素在线监测技术,实现典型区域二氧化碳、甲烷浓度分布以及高浓度区域碳来源监测;研发无人机超光谱温室气体遥感监测设备和反演算法,实现对目标区域二氧化碳、甲烷等温室气体的多时段米级分辨率水平空间分布遥测,构建融合实测信息的高分辨率大气垂直分布先验廓线数据库;突破红外多波段下高精度、高覆盖率、高时空分辨的多源超光谱卫星温室气体(二氧化 碳、甲烷等)联合反演技术,形成典型区域碳排放的点-线-面-区 域全方位监测解决方案,发展区域和工业园区碳排放快速精准核算方法。考核指标:构建代表性行业持续检测体系,形成代表性排放行业排放因子集,形成 8-10 项面向碳交易的碳排放核算国家标准, 较现有方法精度提高 10%以上;监测体系中,二氧化碳测量范围: 380~1000ppm,二氧化碳测量精度 0.1ppm,δ13C-二氧化碳测量精度 1‰,甲烷测量范围:0~100ppm;甲烷测量精度 1ppb+5‰,δ13C-4 甲烷测量精度 1‰;无人机超光谱遥测设备,10ppm~100ppm 空间探测分辨率≤10 米,单格点探测时间分辨率≤10 秒;通过卫星的联合反演算法中,获取每日覆盖率30%,分辨率为 2 公里×2 公里的甲 烷 、二氧化碳浓度数据集,形成区域和工业园区碳排放快速精准核算方法体系。 1.3 新型二氧化碳捕集技术研发和示范 研究内容:研究新型相变吸收剂、非水溶剂吸收剂、复合吸收 剂等二代溶剂吸收法碳捕集技术和高效固体吸附法碳捕集技术,开展关键材料的设计、宏量制备和生产技术研究,开展示范工程设计、 建设和运行;研发用于直接空气捕集的新型吸收剂/吸附新材料, 开发强化吸收/吸附分离的技术和样机,完成技术验证;研发二氧 化碳捕集-转化一体化的可行途径,开发吸附-催化多功能新材料, 建立集成工艺,优化过程参数,形成与典型排放源紧密结合的新型碳减排集成方案,完成技术验证。 考核指标:形成新型吸收法碳捕集关键技术,建设和运行万吨 级示范线 1 套,二氧化碳捕集率大于 90%,能耗小于 2.2 吉焦尔(GJ) /吨二氧化碳;形成吸附法碳捕集关键技术,二氧化碳捕集率大于 90%,能耗小于 2.1 吉焦尔(GJ)/吨二氧化碳,并建设和运行万吨级示范线;研发并验证具备大规模推广潜力的直接空气捕集技术 1 项,创制百吨级样机并实现稳定运行;建立百吨级二氧化碳捕集- 转化一体化验证装置 1 套,二氧化碳捕集率大于 90%,转化率大于 90%。1.4 二氧化碳高值化化学利用关键技术与示范 研究内容:开展二氧化碳高效化学转化合成高附加值化学品研5 究,构建高活性、高选择性以及高稳定性的反应体系;探明二氧化 碳高效合成醇酯类化学键断裂重构规律及表界面微观反应机理,阐 明提高碳-氧双键活化的关键因素和传递反应耦合强化机制;探索新型可再生能源驱动的二氧化碳高效利用新途径,实现低成本、规 模化应用的技术突破。 考核指标:开发构建新型高效二氧化碳化学转化装置 2-3 套, 建设和运行十万吨级示范 1-2 套,二氧化碳利用率大于 90%,产物选择性大于 80%,完成新型二氧化碳光电催化转化关键技术验证, 并具备较好的经济效益。 1.5 二氧化碳地质封存风险监测、评价与控制技术集成示范 研究内容:面向二氧化碳地质封存潜力评估和安全需求,解决地质封存二氧化碳潜力、泄漏和力学稳定性等问题。开展主要盆地 -重点区块的封存潜力评估,深化场地与各行业集中排放源的动态 匹配分析;深化二氧化碳在地层及井简内的迁移机制及泄漏规律研 究,研发封存过程大规模高效数值模拟软件;开发集成陆上地质封 存安全系统。 考核指标:形成我国区域与行业封存潜力的评估报告和图集; 完成实际场地千万网格非均质模型高效计算软件及陆上封存安全 评价方法 1 套;形成陆上二氧化碳封存安全监测系统 1 套,地表空气二氧化碳质量分数遥测量程 20000ppm 浓度、误差小于读数的 2%, 浅层水溶解二氧化碳质量分数监测量程 30000ppm 浓度、误差小于 读数的 2%(20~300 米深度区间),深层水溶解二氧化碳质量分数 监测量程 60000ppm 浓度、误差小于读数的 2%(1500~2000 米深度 区间),上述评价、模拟和监测技术需要通过规模万吨级以上、深度大于 1500 米的现场试验进行检验。 1.6 碳负排放的生物质综合精炼研究与示范 研究内容:针对我国农林生物质废弃物体量大、种类复杂和资源化利用率低等问题,开展生物质超微结构解译,建立典型农林生物质结构信息数据库,研究生物质微观结构、区域化学、键合机制在不同预处理环境下的时空演变规律与应答机制;研究纤维素酶解过程调控技术及基于纤维素糖利用的连续发酵技术,开展基于微生物集群效应的生物膜催化体系研究,降低发酵周期,提高总糖利用效率,开发面向木质纤维素成分的发酵强化与连续化技术;研究木质素组分的高效改性技术和选择性催化解聚的反应规律,开发木质素分离提取及高值材料化利用技术,实现传统生物炼制废弃物木质素的工业示范应用;研究生物质完全拆解系列生物基工业原料产品关键技术与装备,建立生物质利用高效可持续的碳负排放集成示范。 考核指标:建成百吨级秸秆高效预处理示范装置,实现高品质木质素与棕纤维的高效分离,木质素得率≥60%,纯度≥90%(残糖 <3%,灰份<5%),混合糖得率≥80%;形成生物质完全拆解单宁、 纤维素、木质素、糖、糖醛酸、糠醛、氨基酸、微生物肥等系列生物基产品成套关键技术,生物质原料干物质利用率 100%;建立生物质综合精炼的万吨级示范线 1-2 条,并具有较好的经济效益。 1.7 分布式生物质光热转化制氢或合成气 研究内容:发展利用太阳能全裂解生物质制氢气或合成气的方 法,建立全套太阳能光热生物质转化的集光吸热连续反应装置。具体内容包括:发展高效的多种来源生物质的预处理方法,高收率低 能耗获得能用于太阳能光热转化的混合糖液;开发混合糖液光热转 67 化的光催化剂,将混合糖液全裂解转化为氢气或合成气,并探究糖类碳-氢和碳-碳健的断裂机理和光催化剂表界面微观反应机理。开发太阳能分光谱利用技术,研究高光透性的流动式反应器,建立集光吸热的太阳能光热连续反应系统,实现大规模的糖液全裂解转化制氢气或合成气的工艺流程。 考核指标:形成成套分布式生物质光热转化制氢或合成气技术, 建立集光吸热的太阳能光热连续反应系统,日处理混合糖 50 公斤, 实现连续稳定运行时间大于 200 小时。按混合糖计算,当目标产物为氢气时,每吨混合糖的氢气产量不低于 80 公斤;当产物为氢气 和一氧化碳时,每吨混合糖的氢气和一氧化碳产量分别不低于 30 公斤和 550 公斤。2. 低碳/零碳工业流程再造工艺技术与示范 2.1 富氢气体及氢气直接还原技术研发与示范研究内容:针对直接还原-电炉熔分短流程低碳炼铁技术体系 需突破的关键科技问题,研究富氢气体及氢气还原铁矿粘结机理与过程强化规律,研究直接还原竖炉氧化球团技术、竖炉直接还原技术和流化床直接还原技术、高能效电炉生产技术及装备,开发气基竖炉和流化床直接还原成套工艺及装备,开展工程示范。 考核指标:发展铁矿气基直接还原过程强化技术,形成 1-2 项 气基直接还原铁(DRI)成套关键技术与装备;建成不低于 50 万吨 DRI/年富氢气体竖炉直接还原生产线,DRI 金属化率>92%,富氢气体消耗折合能耗不高于 11 吉焦尔(GJ)/吨-DRI,二氧化碳排放不 高于 0.7 吨/吨-DRI,完成竖炉直接还原-电炉熔分成套技术示范。 建成 1 万吨 DRI/年流化床氢气直接还原示范装置,DRI 金属化率>8 92%,氢气消耗折合能耗不高于 10.5 吉焦尔(GJ)/吨-DRI。 2.2 钢铁行业二氧化碳气体发酵技术研发与示范 研究内容:针对钢铁行业尾气,针对将二氧化碳、氢气混合气体生物发酵法转化为乙醇等有机化学品实现工业化应用需要突破的关键技术问题,研究针对不同气体组分的气体净化技术,研究不同氢气比例对二氧化碳生物发酵过程转化的影响规律,研究二氧化碳、氢气混合气体高效生物发酵关键工艺参数控制技术,研究气体发酵-蒸馏耦合膜系统技术,研究高效气液传质发酵反应器装备; 研究发酵菌体蛋白高值化利用技术,开发二氧化碳气体发酵制乙醇成套系统集成工艺技术,开展万吨级二氧化碳发酵制乙醇工业化示 范。考核指标:开展二氧化碳、氢气混合气体发酵制乙醇中试规模试验,二氧化碳利用率≥60%,氢气利用率≥75%,乙醇选择性≥80%, 实现连续稳定运行时间大于 200 小时,二氧化碳综合减排不少于 2 吨/吨乙醇,单级发酵乙醇浓度不小于 20 克/升;开发气液强化传质及高效发酵技术,形成 1-2 项成套发酵关键技术装备;形成二氧化碳生物发酵制乙醇集成工艺技术路线;建成万吨级二氧化碳发酵制乙醇工业化示范装置。 2.3 钢厂尾气制乙醇技术及 20 万吨工业示范 研究内容:研发钢厂尾气(焦炉气、转炉气、高炉气)为原料的甲醇制乙醇技术,实现钢厂尾气的高价值环保转化利用。具体内容包括:特定结构高性能二甲醚羰基化催化剂的可控合成;高性能乙酸甲酯加氢催化剂的开发;催化剂放大制备及对催化剂性能的影 响,以满足长期运行的需要;研究两步反应串接及一氧化碳、氢气循环利用工艺,有效解决工业化过程中反应热的撤离问题,并在此基础上进行反应器的设计和优化;完成不小于 20 万吨/年规模钢厂尾气制乙醇技术的工业示范。 考核指标:研制开发甲醇制乙醇技术高效催化剂,二甲醚羰基化催化剂单程寿命一年以上(>8000 小时),乙酸甲酯时空产量≥ 0.45/小时,乙酸甲酯选择性≥99%;研制开发高效乙酸甲酯加氢催 化剂,乙酸甲酯单程转化率≥90%,乙醇总选择性≥98%(相对于理 论值),催化剂寿命≥1 年;编制不小于 20 万吨/年规模的钢厂尾气制乙醇技术工业示范装置工艺包,并实现装置投产和运行,综合技术经济指标达到国际领先水平。 2.4 低钙高胶凝性硅酸盐水泥熟料制备关键技术与低碳水泥生产及应用示范 研究内容:针对水泥行业碳中和迫切需求,以减低水泥生产中石灰石消耗,减少二氧化碳排放为目标,研究直接减少石灰石用量的低钙高胶凝性熟料新型物相体系设计与亚稳态结构调控,建立物相形成热动力学模型,形成高胶凝性新型熟料制备关键技术;研究替代原料/被替代原料间的物理化学耦合效应及调控机制,开发典型富钙固废大比例替代石灰石关键技术与装备,形成熟料矿相调控及其品质与环境安全保障等综合技术体系。构建全流程低排放、低环境负荷的低碳水泥新体系及其评价技术体系,并实现规模化生产 与应用示范。 考核指标:低钙高胶凝性熟料体系石灰石用量较传统硅酸盐水 泥熟料降低 15%以上;富钙固废替代石灰石的比例不低于 30%。熟料28 天抗压强度不低于 58 兆帕,制备的 42.5 等级通用硅酸盐水 9泥的熟料系数不高于 0.75。熟料二氧化碳排放减少 150 公斤/吨以 上,水泥二氧化碳排放减少 25%以上。编制相关标准(草案)3 项, 成果在 3 条不低于 3000 吨熟料/天规模化生产与应用示范。 3. 面向碳中和的前沿和颠覆性技术创新与研发 3.1 二氧化碳光/电催化前沿新材料与新技术试验验证 研究内容:研发用于二氧化碳电催化还原转化的新型催化剂材料和气体扩散电极,建立低成本、规模化催化剂合成和电极制备技 术;开展先进原位波谱表征技术,探究二氧化碳电催化还原过程中催化剂的演化过程和电极反应动力学;建立二氧化碳电还原制备高 附加值化学品的试验验证。研发新型高效稳定光催化二氧化碳还原 材料,构建新型光催化二氧化碳还原验证器件。设计构建高效光电催化二氧化碳还原全器件,并评估其实际运行稳定性等参数。 考核指标:电催化二氧化碳还原:研发高效、稳定运行时长≥ 1000 小时的催化剂材料和气体扩散电极;揭示电催化二氧化碳还原过程中催化剂演化过程和电极反应动力学;实现电催化二氧化碳还 原制备高值化学品的试验验证,产物选择性≥80%,能量转换效率 ≥50%。研发新型稳定高效光催化二氧化碳还原材料 1-2 种;揭示 光催化二氧化碳还原转化机制;实现太阳能到燃料转化效率≥3%。 开发新型高效光电极材料和电催化剂材料 2-3 种;构建高效光电催 化二氧化碳还原全器件,实现太阳能到燃料转化效率≥5%;揭示光电催化过程中光生电荷分离和传输机制及光电极材料和助催化剂协同工作机制。3.2 变革性高能量密度、低成本水系液流电池储能技术 研究内容:在碳中和背景下,面向以新能源为主体的新型电力 10系统对电化学储能技术的重大需求,探索开发高安全、低成本、高能量密度液流电池新体系,构建以无机多电子转移电对为活性物质的电化学储能新过程,研究水系多电子转移体系电化学反应机制, 电解液中离子的输运机制和规律;离子跨膜输运机制及关键膜材料的选择与设计,电解液稳定调控机制等。突破高选择性、低成本离 子传导膜、高活性电极、高稳定性电解液制备技术,高功率密度单体电堆设计和集成技术,开发新一代高能量密度、低成本液流电池新体系,开展 100 千瓦级系统示范,推动液流电池储能技术的可持续发展。考核指标:研究探索新一代高能量密度、低成本多电子转移的液流电池新体系,阐明多电子转移体系电化学反应机制。突破其关 键材料和电堆的规模放大技术,推动示范应用。新体系液流电池单 电池在 80 毫安/平方厘米恒流充放电条件下,能量效率≥85%,能 量密度≥200 瓦时/升。 3.3 面向碳中和相关的颠覆性技术研究(青年科学家项目) 研究内容:面向国家碳达峰碳中和重大需求和世界科技前沿, 开展非二氧化碳温室气体监测、源头解决温室气体排放、可再生能 源与传统化石能源化工衔接、能源和工业流程低/零碳改造等颠覆性技术研究;开展大数据、人工智能、生物技术等与新能源、新材料、高端装备融合颠覆性技术研究;开展氢能、光伏、核能等清洁能源替代颠覆性技术研究;石油基产业向可循环生物基产业转型的 颠覆性技术研究;碳基产业替代产品颠覆性技术研究;其他方向具有颠覆性特征的技术探索等。 有关说明:通过评审,拟部署前沿颠覆性技术 5-10 项青年科 11学家项目。6. 面向碳中和的创新体系与全球气候治理关键技术研究6.1 碳中和技术发展路线图与创新支撑体系研究 研究内容:面向 2060 年碳中和目标,研究关键行业和产业发 展的低碳/零碳技术需求,形成碳中和关键技术发展评估与预测方 法体系、行业领域数据库和综合分析评估模型;围绕电力、非电能源、工业、建筑、交通、负排放技术、系统集成优化等大类技术领 域,根据技术发展状况与趋势研究提出近中远期部署重点和实施路 径;研究重点技术路线的中长期跨系统影响,提出高精度产业部署 路径和高分辨率空间布局;编制和更新碳中和技术发展路线图;围绕碳中和技术发展路线图的实施,研究提出面向技术、行业和产业 等多维度协同推进碳中和技术发展的创新体系方案。 考核指标:形成关键行业碳中和技术评估预测方法学 5-8 套, 技术数据库 5-8 套,综合评估模型 1 套;形成 5-8 个行业领域碳中 和技术路线图和总体技术路线图一套;3-5 个重点产业碳中和部署 路径和空间布局方案;提出推进碳中和创新体系方案 1 套。 6.2 我国碳中和进程重大治理策略研究 研究内容:研究分析气候变化科学进展、国际政策及碳中和进程对我国技术创新、产业发展、环境治理和经济社会的综合影响, 定量评估有关国际组织和国家碳边境调节措施、国际贸易与全球产业链中的碳排放标准等对我国相关产业与经济发展、产业链和供应链安全的影响,研究技术解决方案和应对策略;系统评估我国绿色 低碳技术推广应用面临的行业性和区域性政策瓶颈,模拟研究技术创新政策、产业发展政策、财税金融政策、环境经济政策等对协同 12推进碳达峰碳中和的效果及综合影响,研究提出政策优化方案;统筹发展和低碳关系,开发面向行业和区域碳达峰碳中和进展评估体系,引导行业和区域稳健推进;针对重点行业和区域开展协同碳达 峰碳中和与环境质量改善的技术路径识别和综合方案模拟研究。 考核指标:形成国际气候政策及碳中和进程对我国综合影响评估模型 1 套;形成 5-8 个重点行业受碳边境调节措施和产业链排放标准影响等评估和应对策略;提出绿色低碳技术发展政策评估体系 1 套及相关政策建议 4-6 套;形成碳达峰碳中和进展评估体系并应用于 5-8 个行业和区域;形成碳达峰碳中和与环境质量改善协同的模型 1 套。 6.3 全球气候治理关键问题与应对研究 研究内容:开展全球碳中和进程下气候治理体系发展趋势研究, 提出我国参与全球气候治理的策略;围绕联合国气候变化框架公约 与航空海运等国际组织与碳中和相关的谈判议题开展综合影响研 究并提出中国方案;研究以贸易、航运、制造业分包与来料加工等 跨境业务为基础的气候治理国际合作新路径,形成以碳中和目标与经济发展深度结合的合作机制;开展对主要发达国家、发展中国家和国际组织气候、创新动向与合作需求研究,形成有针对性的双多边合作策略;开展进程与重大脱碳技术创新对我国经济社会与产业发展的影响和机遇研究。 考核指标:提出全球气候变化治理中多双边气候合作战略、低碳和脱碳技术创新与产业机遇、技术合作与贸易、参与气候变化谈判策略等重大问题的策略方案 15 套。
  • 固定化酶技术在中药酶抑制剂筛选中的研究现状
    中药资源丰富,历史悠久,在预防与治疗疾病中扮演着重要的角色。然而,中药的化学成分多种多样,作用机制更是复杂多样,如何从中药中筛选疾病相关药效物质是当前亟待解决的关键问题。大量研究表明,人体许多疾病过程都与体内生物酶调节作用相关,如痛风[1]、阿尔茨海默症[2]、糖尿病[3-5]等。而且,中药在治疗各种疾病中也扮演着重要角色,如白芷提取物能促进新生血管形成与成熟,从而提高自发2型糖尿病小鼠创面愈合速率和质量[6];绞股蓝叶水提物能够降低链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的血糖,其作用机制可能与增加骨骼肌肌膜葡萄糖转运体4蛋白表达和抑制骨骼肌炎症有关[7]。因此,基于酶在疾病发生发展的重要性,以酶为靶点从中药中筛选新药是一有力途径,而且开发一种快速、高效的酶抑制剂筛选方法是当前首要任务。固定化酶技术是20世纪60年代发展起来的,该技术利用物理或化学方法将游离酶固定在相应的载体上用于筛选酶抑制剂。固定化酶技术可以有效提高酶的催化性能和操作稳定性,并降低成本,是目前广泛使用的技术[8]。此外,相比于游离酶,固定酶更有利于酶-配合物的分离纯化,在pH耐受性,底物选择性,热稳定性和可回收性等方面表现出优越的性能[9-10]。不同的酶发挥催化作用的活性部位不同,将酶进行固定时,要使载体材料与酶的非活性部位结合,才可以保留酶的活性,因此载体材料的选择是固定化酶技术发挥作用的关键。本文以固定载体材料(表1)为分类综述了近10年固定化酶技术在中药酶抑制剂[α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,α-Glu)、脂肪酶等] 筛选中的研究现状,希望可以为后续的相关研究提供一定的参考依据。1 磁性载体磁性载体材料是利用铁、锰、钴及其氧化物等化合物制备的一类具有磁性的材料[11],通过改变磁力大小和外部磁场的方向来改变粒子的运动轨迹,从而使酶与载体的结合与分离可以在可控条件下完成,便于固定化酶的分离和收集,并用于酶抑制剂的筛选[12]。以磁性载体为材料的固定化酶技术的最大优点在于利用磁力吸引可使固定化酶快速从反应体系中分离,且固定化方法简单,能有效减少筛选时间及实验试剂的消耗。因此,通过不同方法对磁性载体材料进行功能化修饰,在充分发挥磁性材料优势的基础上改善其表面性质,提高对不同类型目标物的特异性,从而在各类复杂样品的前处理过程中有着良好的应用潜力[13]。目前,磁珠是近年来发展起来的一种常用的磁性载体材料,也叫做磁性纳米粒子,包括氧化铁(Fe3O4和γFe2O3)、合金(CoPt3和FePt)等。其中,Fe3O4纳米粒子具有生物相容性和无毒性等优点,被广泛应用于酶的固定化。中药酶抑制剂筛选中的常用磁珠其磁核以Fe3O4纳米粒子为主,壳层为二氧化硅、琼脂糖、葡聚糖等,是具有超顺磁性的小球形磁性粒子[14-15],可借助外部磁场从生物催化体系中分离酶抑制剂。该方法机械稳定性高、孔隙率低,利于降低反应中的传质阻力,提高了固定化酶的重复使用性。由于其具有操作稳定性高、磁响应强、磁分离速度快等优点,在生物和药物研究中得到了广泛的应用[16]。在进行酶抑制剂筛选时,磁珠的修饰位置不同,所固定的位点也不同。因此,在实验中,往往要根据靶蛋白的分子结构选择合适的磁珠或将某一磁珠进行修饰后作为固定载体。将酶固定在合适的磁珠上会增强酶与待筛选酶抑制剂的亲和力,利用磁力将固定化酶及其抑制剂从提取液中分离,然后洗去与酶不相互作用的化合物,随后可得到酶固定化磁珠配体配合物,最后通过洗脱溶剂使配体释放进而通过质谱表征[17]。在这种方法中,潜在的配体与酶相互作用,生成酶配体配合物,这有利于利用磁性[18-23]从复杂混合物中分离活性化合物。在酶抑制剂的筛选中,磁性载体材料是最常用的固定化载体材料[24-30]。1.1 无机载体材料二氧化硅是磁性纳米粒子表面修饰最常用的无机材料[23,31-34],此外还有二氧化钛[35]、介孔二氧化硅[16]等。Li等[23]首先将Fe3O4分散在水中加入聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)室温搅拌得到产物。然后在超声作用下将产物分散在含有异丙醇和氨水的混合溶剂中,室温搅拌下缓慢加入正硅酸乙酯(tetraethylorthosilicate,TEOS)溶液得到SiO2@Fe3O4磁性微球,并加入3-氨丙基三甲氧基硅烷(3-aminopropyltrimethoxysilane,ATPES)对其表面进行改性。最后将α-淀粉酶固定在表面改性的SiO2@Fe3O4磁性微球上。将制得的酶固定化磁性微球用于黄花草中α-淀粉酶抑制剂的筛选,最终得到3种黄酮类化合物对α-淀粉酶具有较好抑制作用。Liu等[35]采用溶剂热法(也称水热法或水热合成法)制备了Fe3O4@TiO2纳米粒子,并通过静电相互作用固定脂肪酶。采用透射电镜、傅里叶变换红外光谱和X射线衍射等方法对磁性纳米粒子进行表征,以确定脂肪酶是否已经被固定。研究中应用脂肪酶固定化Fe3O4@TiO2纳米粒子从6种具有脂肪酶抑制活性的藏药中筛选出脂肪酶抑制剂,获得5种具有与临床常用减肥药物奥利司他活性类似的化合物,其中1种化合物(山柰酚)的抑制活性优于奥利司他。Yi等[16]将谷胱甘肽S-转移酶固定在介孔二氧化硅磁性微球表面筛选紫苏中的酶抑制剂,利用高效液相色谱和四极飞行时间质谱法进行鉴定,筛选出6种具有谷胱甘肽S-转移酶抑制作用的物质,其中,迷迭香酸、(−)表没食子儿茶素-3-没食子酸酯和 (−)-表儿茶素-3-没食子酸酯具有较好的抑制活性。最后利用分子对接技术确定潜在抑制剂与谷胱甘肽S-转移酶的结合方式。首先,用FeCl3与柠檬酸三钠和乙酸钠合成Fe3O4,然后将其分散在含有乙醇、去离子水和氨水的混合溶液中,搅拌均匀后加入TEOS制得SiO2@Fe3O4磁性微球。为进一步合成介孔二氧化硅磁性微球(mSiO2@SiO2@Fe3O4),将SiO2@Fe3O4磁性微球分散在十六烷基三甲基氯化铵、去离子水和三乙醇胺中并滴加TEOS,产物用磁铁分离并清洗除杂后得mSiO2@SiO2@Fe3O4磁性微球。最后用PDA对mSiO2@SiO2@Fe3O4磁性微球进行表面改性并将谷胱甘肽S-转移酶固定在其表面。1.2 有机载体材料在酶抑制剂的筛选中,有机载体材料相比于无机载体材料应用较少。目前,用于磁性纳米粒子表面修饰的有机载体材料有聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)[36]、共轭-有机骨架[37]和金属-有机骨架[38]等。Jiang等[36]以PAMAM包覆磁性微球为基础,建立了一种筛选和鉴定赤芍提取物中α-Glu抑制剂的方法。首先,采用微修饰法合成了Fe3O4-COOH微球。然后,通过Fe3O4-COOH微球表面羧基与PAMAM氨基的偶联反应,制备了Fe3O4@PAMAM微球。最后,通过GA的交联,成功地将α-Glu连接到其表面。结果表明,没食子酸和(+)-儿茶素对α-Glu均具有较好抑制作用。Zhao等[37]将乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)固定在适配体功能化磁性纳米颗粒共轭有机骨架上构建固定化酶反应器,并将该方法用于酒石酸、(−)-石杉碱A、多奈哌齐和小檗碱4种AchE抑制剂抑制活性的测定,发现酒石酸的IC50与已报道的结果相当,证明了该固定化酶反应器的可行性。Wu等[38]将α-Glu固定在磁性纳米材料Fe3O4@ZIF-67上,构建了快速筛选α-Glu抑制剂的生物微反应器。然后,将酶生物微反应器通过外加磁场固定在连接高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)和微注射泵2端的管中,形成一个磁性在线筛选系统。以信阳毛尖粗茶提取物为实验对象,对该在线筛选方法进行验证,利用该在线筛选系统筛选出3种抑制剂(儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表没食子酸酯)。与传统方法相比,该方法可将筛选、洗脱和分析结合起来,可以简单、高效、直接地从天然来源筛选和鉴定潜在的α-Glu抑制剂。磁珠分散性好,磁分离速度快,酶结合量大,酶活性高,是固定化酶的理想载体,现已广泛应用于酶抑制剂的筛选中。将酶固定在特定的磁珠上,可实现酶抑制剂的分离。此方法操作较稳定,非特异性结合率低。因此,酶固定化磁珠技术因其快速的生物分析、导向性分离和从复杂混合物中直接捕获配体而受到越来越多的关注。2 非磁性载体2.1 无机载体材料2.1.1 石英毛细管 毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)具有分离效率高、分析速度快、操作简单和样品消耗少以及可与多种检测手段联用等优点,在酶分析研究中越来越受到关注[39-41]。近年来,固定化酶微反应器与生物活性靶向技术相结合已应用于中药酶抑制剂的筛选[42]。该方法将酶固定在经过修饰的石英毛细管内,捕获抑制剂后,洗涤未结合组分,进而通过蛋白质变性洗脱活性结合配体,允许直接并可重复注射生物样品到高效液相色谱上进行检测,筛选和分离一步完成,大大缩短了操作时间。但该方法制备过程中是比较复杂繁琐的[43-44],而且载体的孔隙率[45]、孔径[46]和表面化学[47-48]等因素也很容易影响固定化酶的性能。Wu等[49-50]用PDA对石英毛细管进行表面改性,并与氧化石墨烯共聚形成聚多巴胺/氧化石墨烯涂层,增加了固定化酶的结合率,并将该方法成功用于凝血酶和凝血因子Xa以及黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选。有研究者用3-氨基丙基三乙氧基硅烷对石英毛细管进行表面改性,采用戊二醛交联法进行酶的固定,并成功用于酶制剂的筛选。Rodrigues等[51]将此修饰方法用于黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制剂的筛选,成功地从不同天然产物中筛选出30个潜在的XOD抑制剂。Zhang等[52]将此修饰方法用于组织蛋白酶B抑制剂筛选,并从中药中发现了17个具有抑菌潜力的活性成分,发现山柰酚等5种天然产物有潜在的抑制作用,并以分子对接进行验证。Tang等[53]将此修饰方法用于脂肪酶抑制剂的在线筛选,结果发现6种天然产物对脂肪酶活性均有抑制作用。Zhao等[54]将此修饰方法用于神经氨酸酶抑制剂的筛选,发现了6种天然产物为潜在抑制剂。进一步测定了这6种化合物对神经氨酸酶潜在的抑制活性,由大到小分别为:甲基补骨脂黄酮A>补骨脂甲素>黄芩素>黄芩苷>白杨素和牡荆素。此外,还有研究者采用单片毛细管固定化酶反应器与液相色谱-串联质谱联用技术,成功用于酶抑制剂的筛选[55-56]。毛细管的高表面体积比有利于足够高浓度的酶用于酶促反应[57-58]。此外,由于注入的底物溶液直接与固定化酶分子接触,使传统的采样、反应、分离和检测多步操作简化为一步操作,因此该分析变得更简单,不需要额外的混合程序。与磁性载体相比,该技术将筛选和分离集成为一步,大大缩短了操作时间。该技术适用于复杂混合物中酶抑制剂的快速筛选,而且样品消耗量少,节省了试剂成本,可以实现酶抑制剂的快速分离。2.1.2 硅酸铝纳米管 硅酸铝纳米管(halloysite nanotubes,HNTs)是一种天然存在的硅酸盐纳米管,由于其优异的物理特性,引起了人们越来越多的兴趣。HNTs的内径为20~30 nm,外径为30~50 nm,长度为1~2 µm,为药物、酶和杀菌剂的储存提供了理想的纳米级包埋系统。更重要的是,HNTs的外表面主要由O-Si-O基团组成,内表面由Al2O3组成,为酶提供了更多的选择性结合位点,从而减少了配体在HNTs上的非特异性吸附[59]。因此,有研究者将HNTs作为一种新的酶固定载体材料用于酶抑制剂的筛选。Wang等[59]通过静电吸附作用将脂肪酶固定到羟基纳米管上用于厚朴中脂肪酶抑制剂的筛选,发现厚朴三酚和厚朴醛B 2种化合物对脂肪酶抑制活性较好。HNTs的内外表面为酶提供了更多的选择性结合位点,降低了非特异性吸附,但其合成较为复杂,收率较低,因此应用有限。2.1.3 多孔二氧化硅 多孔二氧化硅材料具有表面张力低、粘温系数小、压缩性高、气体渗透性高等基本性质,同时还具有耐高温和低温、电气绝缘、耐氧化稳定性、耐候性、难燃、耐腐蚀、无毒无味以及生理惰性等特性[60]。Hou等[61]首先将α-Glu结合到脂质体囊泡中,然后采用反蒸发法将其负载到多孔二氧化硅表面,制备成受体脂质体生物膜色谱柱,用于五味子提取物的α-Glu抑制剂筛选,并通过体外实验进一步证实了五味子苷的降糖作用。2.2 有机载体材料2.2.1 中空纤维 中空纤维是一种具有孔径和内腔的有机聚合物,具有比表面积大、生物材料和有机溶剂消耗低,且设备便宜、用于中空纤维制备的材料来源丰富,是酶、细胞、脂质体等生物材料的理想载体,已被应用于酶固定化中。首先,对中空纤维进行活化。然后,将酶与已活化的中空纤维孵育使酶被吸附在中空纤维上。最后,将待测物与中空纤维固定化酶孵育,筛选待测物中潜在酶抑制剂。Zhao等[62]提出了一种基于吸附中空纤维固定化酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)的方法,从葛根提取物中筛选潜在的TYR抑制剂。通过液相色谱-质谱分析,成功地检测出了7种潜在活性化合物,并进一步结合体外实验,发现葛根素、葛根素-6-O-木糖苷、葛根素和阿片苷具有良好的TYR抑制活性。中空纤维因其具有孔径、内腔及比表面积大等优点,为酶提供了充分的附着空间,但由于其清洗较为困难,导致重复利用率低。2.2.2 生物传感器 生物传感器是一种对生物物质敏感并可将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。丝网印刷电极因其具有批量生产、低成本、高重现性、小尺寸等特点而被广泛应用于分析领域。所谓酶生物传感器法,是将酶固定在经过修饰的丝网印刷电极上,当与抑制剂接触时会发生电信号变化,通过检测电信号的变化,达到分析检测的目的。Elharrad等[63]为筛选药用植物中潜在的XOD抑制剂,研制了一种简便、灵敏的安培生物传感器,并用于测定多种药用植物对黄嘌呤氧化酶的抑制率,发现留兰香和马齿苋2种植物对黄嘌呤氧化酶抑制活性较高。以普鲁士蓝修饰丝网印刷电极表面,极大降低了生物传感器的检测电位,使该装置具有较高的选择性。该传感器具有结构简单、选择性好、成本低、稳定性好、结果快速等优点。2.2.3 纸 自2007年Whiteside研究小组首次提出微流体装置概念以来,纸作为一种新的载体材料,以其良好的生物相容性、大的比表面积、易于修饰、价格低廉等优点,在环境监测、化学检测、生物医学诊断等领域具有广阔的应用前景[64]。(1)滤纸:三维打印技术是利用一种纸分析仪器将纸张制作成为一种特殊的微流体装置,该装置成本低,具有较高的比表面积,易于结合分子吸附蛋白质。使用过的纸张设备可以很容易地通过燃烧来处理,可减少实验消耗品造成的污染。Guo等[65]将三维打印技术用于酶抑制剂的筛选,首先,用3D印刷的聚己内酯对滤纸进行改性,形成疏水区。然后,对滤纸进行准确切割,得到既具有亲水性又具有疏水性的改性纸。接下来,用壳聚糖对亲水区进行改性。最后,将α-Glu固定在亲水区,制备出具有独特微流体结构的三维打印技术微装置,并成功地将该方法用于筛选植物提取物中具有α-Glu抑制活性的物质,发现绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸、异槲皮素和槲皮素4种化合物对α-Glu的抑制活性较好。该方法结合一些便携式探测器,如手机和照相机,可以获得定性和定量的结果。因此,很容易判断酶在纸上的固定化效果。(2)纤维素滤纸:纤维素滤纸(cellulose filter paper,CFP)具有成本低、来源广、表面积大、生物相容性好、表面羟基含量高等优点,被选为新型酶固定化载体,而且CFP可以快速从酶反应混合物中分离并终止反应,从而缩短了操作时间,简化了其他载体(如纳米材料和磁性纳米颗粒)所需的分离过程。Li等[66]以纤维素滤纸为载体,对α-Glu进行固定化。利用多巴胺的自聚-粘附行为,通过希夫碱反应和迈克尔加成反应,将聚多巴胺复合层包覆α-Glu与改性后的CFP共价结合形成固定化酶(CFP/DOPA/α-Glu)。用CFP/DOPA/α-Glu筛选11种中药中的α-Glu抑制剂,发现诃子对α-Glu的抑制作用最强。Zhao等[67]以CFP为载体,以壳聚糖为物理包覆剂引入氨基基团,然后以戊二醛为交联剂,通过希夫碱反应,将AchE与氨基功能化的CFP共价键合进行固定化酶。最后,将CFP固定化AchE应用于17种中药的抑制剂筛选。2.2.4 金属-有机骨架 金属-有机骨架(metal- organic framework,MOFs)为一种杂化多孔材料,由有机连接体和金属节点通过强的化学键组装而成。MOFs具有可调节孔径、大比表面积和热稳定性等优点。有研究表明,酶被固定在MOFs上后,其在可重用性、催化活性和稳定性方面的性能都有了很大的提高。Chen等[68]首先将ZrCl4和氨基对苯二甲酸溶于N,N-二甲基甲酰胺溶液中进行超声,然后分别加入HCl和HAc,得到混合物。随后,将混合物转移到不锈钢聚四氟乙烯内衬的高压釜中密封加热,反应混合物在空气中冷却至室温,然后离心。沉淀物用新鲜N,N-二甲基甲酰胺和无水乙醇洗净,后减压干燥,合成了金属有机骨架UiO-66-NH2。UiO-66-NH2通过沉淀交联固定化猪胰脂肪酶(porcine pancreatic lipase,PPL),得到的PPL@MOF具有较高的PPL载量和相对活力恢复率,并将PPL@MOF复合物用于筛选夏枯草脂肪酶抑制剂,发现了13种潜在的脂肪酶抑制剂。与磁珠、纳米粒子相比,MOFs材料酶固定量大、相对活力恢复率高。2.2.5 酶微柱 有研究者采用酶微柱法用于酶抑制剂的筛选,该方法属于固相萃取技术,操作简单,可与高效液相色谱耦合,实现了在线筛选,提高了酶抑制剂的筛选和分析效率。首先将硅胶分散在乙醇中,加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷形成氨基功能化硅胶,然后将氨基功能化的硅胶与酶液混合,使酶固定在硅胶表面,洗去未结合酶,最后将酶固定化硅胶填入不锈钢微柱中形成酶微柱。Peng等[69]运用该方法成功的从金银花中筛选和鉴定XOD抑制剂。该方法与高效液相色谱的在线耦合提高了筛选和分析效率。与传统的与二维色谱耦合相比,该方法为直接与HPLC耦合,缩短了分析检测时间。3 总结与展望中药含有的化学成分复杂、种类繁多、作用机制比较复杂,一直是获取活性成分或者先导化合物的重要来源。以酶为靶标进行药物筛选是发现和寻找新药的重要环节之一。随着固定化酶技术的发展,研究者将固定化酶技术与中药酶抑制剂的筛选相结合,并通过高效液相色谱-质谱联用技术进行鉴定,筛选得到很多具有酶抑制活性的化合物,在一定程度上明确了中药发挥作用的活性成分及其作用机制。本文以不同载体材料为分类,综述了固定化酶技术在中药酶抑制剂筛选中的应用。磁珠是最常用的磁性载体材料,该类材料利用磁力吸引可使固定化酶配体配合物快速从体系中分离,且固定化方法简单,而且使用后的磁珠可以回收利用,能有效减少人力物力的投入。非磁性载体材料主要以石英毛细管应用最为广泛。此外,还有中空纤维、纳米管、生物传感器等材料用于筛选中药中的酶抑制剂,丰富了固定酶的载体材料。固定化酶技术在酶抑制剂筛选上的应用前景十分广泛,不仅节省了人力物力而且提高了新药研发的效率。目前,固定化酶技术仍然存在一些问题,如酶与载体材料的结合率较低、固定化酶的活力也会有所下降等。但相信随着科学技术的不断发展及酶抑制剂研究的不断深入,固定化酶技术会成为酶抑制剂筛选最有前景的方法之一。利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突
  • 第九届全国药物分析大会会议日程安排
    由中国医药生物技术协会药物分析技术分会主办,武汉大学承办的“第九届全国药物分析大会”将于2019年6月14日-16日在武汉召开。  日程安排如下:  会议日程6月14日星期五报到注册(弘毅大酒店)6月15日星期六8:30-9:00开幕式(主持人:陈子林)地点:裕璧厅领导致辞:武大校领导&大会主席:罗国安大会报告主持人:张尊建、梁琼麟9:00-9:30PL1罗国安9:30-10:00PL2贺浪冲10:00-10:20茶歇大会报告主持人:罗国安、贺浪冲10:20-10:50PL3张学记10:50-11:20PL4张尊建11:20-11:50PL5陈子林11:50-14:00午餐、墙报展(13:00-14:00单号Poster讲解)14:00-15:50药物分析方法A(裕璧厅)化学药物分析A(8001)生物药物分析A(8002)主持人:伍建林、洪学传主持人:狄斌、姜宏梁主持人:黄承志、胡泽平14:00-14:20洪学传I114:00-14:20姜宏梁I514:00-14:20胡泽平I914:20-14:40伍建林I214:20-14:40狄斌I614:20-14:40黄承志I1014:40-14:55侯晓芳O114:40-14:55杨帆O514:40-14:55蔡容O914:55-15:10陈啸飞O2Y14:55-15:10蔡圣O6Y14:55-15:10邹李O10Y15:10-15:20周韦S1Y15:10-15:20王婷S515:10-15:25艾晓妮O11Y15:20-15:30于龙S2Y15:20-15:30李敬伟S6Y15:25-15:40王冬尧O12Y15:30-15:50金牌赞助商(安捷伦)15:30-15:50金牌赞助商(岛津)15:40-15:50欧丹S10Y15:50-16:10茶歇16:10-17:55主持人:陈缵光、梁琼麟主持人:阎超、卢建忠主持人:吕海涛、李敏勇16:10-16:30梁琼麟I316:10-16:30阎超I716:10-16:30吕海涛I1116:30-16:50陈缵光I416:30-16:50卢建忠I816:30-16:50李敏勇I1216:50-17:05陈刚O316:50-17:05朱栋O716:50-17:10刘冰I1317:05-17:20张文鹏O4Y17:05-17:20张群林O817:10-17:25王军O1317:20-17:35银牌赞助商(默克)17:20-17:30王梦婷S7Y17:25-17:40王启钦O14Y17:35-17:45毛振坤S3Y17:30-17:40张俊红S8Y17:40-17:50周园园S11Y17:45-17:55李显会S4Y17:40-17:50努尔买买提S9Y18:00-20:00晚餐(弘毅大酒店)20:00-21:00药物分析技术分会委员会会议(裕璧厅)6月16日星期日8:30-10:10药物分析方法B(裕璧厅)中药分析A(8001)生物药物分析B(8002)主持人:顾景凯、洪战英主持人:白钢、郭明全主持人:张金兰、谢智勇8:30-8:50顾景凯I148:30-8:50白钢I188:30-8:50谢智勇I238:50-9:10洪战英I158:50-9:10郭明全I198:50-9:10张金兰I249:10-9:25侯晓虹O159:10-9:25刘舒O22Y9:10-9:25邓必阳O279:25-9:40赵龙山O169:25-9:40解笑瑜O239:25-9:40陈朗星O289:40-9:55付海燕O179:40-9:55赖长江生O24Y9:40-9:55朱全红O299:55-10:10闵俊哲O189:55-10:10李洪福O259:55-10:10银牌赞助商(Thermo)10:10-10:30茶歇10:30-11:55主持人:徐丽、董钰明主持人:邸欣、宋凤瑞主持人:夏之宁、张真庆10:30-10:50徐丽I1610:30-10:50邸欣I2010:30-10:50夏之宁I2510:50-11:10董钰明I1710:50-11:10宋凤瑞I2110:50-11:10张真庆I2611:10-11:25宋彦廷O1911:10-11:30孟宪生I2211:10-11:25王芳O3011:25-11:40李博O2011:30-11:45刘利红O2611:25-11:40余飞O3111:40-11:55李迎春O2111:45-11:55梁春苏S12Y11:40-11:55周海波O32Y11:55-14:00午餐、墙报展(13:00-14:00双号Poster讲解)14:00-15:25药物分析方法C(裕璧厅)中药分析B(8001)分析药理学(8002)主持人:陆峰、曾湖烈主持人:刘志强、王璇主持人:付志锋、葛广波14:00-14:20曾湖烈I2714:00-14:20刘志强I3114:00-14:20葛广波I3514:20-14:40陆峰I2814:20-14:40王璇I3214:20-14:40付志锋I3614:40-14:55陈琴华O3314:40-14:55潘英妮O3814:40-14:55钱玲慧O4314:55-15:10孙端平O34Y14:55-15:10吴彩胜O39Y14:55-15:10李新O4415:10-15:25胡斌O35Y15:10-15:25吴骁O40Y15:10-15:25程妍O4515:25-15:45茶歇15:45-16:55主持人:江正瑾、肖玉秀主持人:杭太俊、王嗣岑主持人:余露山、许风国15:45-16:05江正瑾I2915:45-16:05王嗣岑I3315:45-16:05余露山I3716:05-16:25肖玉秀I3016:05-16:25杭太俊I3416:05-16:25许风国I3816:25-16:40张伟O3616:25-16:40何丹O4116:25-16:40李娜O4616:40-16:55郭梦喆O37Y16:40-16:55万建波O4216:40-16:55张丽军O4717:00-17:30闭幕式及颁奖(主持人:陈子林;大会总结:贺浪冲;颁奖嘉宾:罗国安、贺浪冲、梁琼麟等)18:00-20:00晚餐(弘毅大酒店)  报告内容  大会报告  PL1罗国安仿肝肾器官芯片研制及在药物毒性分析中的应用(清华大学)  PL2贺浪冲药物分析学科的探索与发展(西安交通大学)  PL3张学记纳米生物及药物分析-机遇及挑战(深圳大学)  PL4张尊建网络药理学桥接的黄芩汤联用伊立替康减毒增效质控标志物发现(中国药科大学)  PL5陈子林药物分析新方法研究(武汉大学)  邀请报告  I1洪学传.可视化诊断和治疗(武汉大学)  I2伍建林.Comprehensiveriskassessmentoftriclosan-anantibioticsinenvironmentandinvivo  (澳门科技大学)  I3梁琼麟.体外仿生3D肾小球模型的构建与应用(清华大学)  I4陈缵光.高效液相色谱光衍生检测法的研究进展(中山大学)  I5姜宏梁.基于靶向脂质组学的动脉粥样硬化进程相关生物标志物研究(华中科技大学)  I6狄斌.基于LC-MS的药物滥用预警与评估方法研究(中国药科大学)  I7阎超.当前药物分析面临的挑战及应对策略浅谈(上海交通大学)  I8卢建忠.基于Spinach适配体修饰改造的分析研究(复旦大学)  I9胡泽平.基于疾病代谢组分析的药物靶标发现(清华大学)  I10黄承志.基于单纳米颗粒散射成像与光谱技术的药物分析新方法(西南大学)  I11吕海涛.基于质谱的小分子功能天然产物表征及其转化应用(上海交通大学)  I12李敏勇.Coelenterazine-basedbioluminscenceforbioactivityanalysis(山东大学)  I13刘冰.基于拟菌蛋白结构的新一代抗生素的设计研究(西安交通大学)  I14顾景凯.高分子药用辅料多分散性成分的精准分析策略(吉林大学)  I15洪战英.中药活性成分与P-糖蛋白相互作用研究(海军军医大学)  I16徐丽.多级孔聚合物材料的制备及应用(华中科技大学)  I17董钰明.聚HDDMA和聚TMPTA整体柱的制备及其在小分子药物分离和富集方面的应用研究(兰州大学)  I18白钢.中药复杂体系研究中的分析技术的整合与创新(南开大学)  I19郭明全.辣木的降糖降脂活性研究(中科院武汉植物园)  I20邸欣.基于细胞水平的白屈菜致肝毒性成分筛选和毒性预测新策略(沈阳药科大学)  I21宋凤瑞.熊果酸逆转肿瘤细胞耐药及降低其侵袭转移的作用机制研究(中国科学院长春应用化学研究所)  I22孟宪生.研究中药不泥古,发展中药不离宗——以气滞胃痛方研究为例(辽宁中医药大学)  I23谢智勇.“肠道菌群-宿主”对话的代谢组学研究及其应用(中山大学)  I24张金兰.新型胆固醇酯分析新方法研究(中国医学科学院药物研究所)  I25夏之宁.动力学毛细管电泳及其在药物筛选上的应用前景(重庆大学)  I26张真庆.抗AD糖醛酸寡糖类药物,甘露特钠(GV-971)的药代动力学研究初探(苏州大学)  I27曾湖烈.生物及药物微量分析方法研究(复旦大学)  I28陆峰.看药物分析如何玩转拉曼光谱(海军军医大学)  I29江正瑾.自组装磷脂膜聚合物的制备及在药物分析中的应用研究(暨南大学)  I30肖玉秀.新型低共熔溶剂及其在食药分析中应用(武汉大学)  I31刘志强.基于“体外-体内”逐层递进关联分析策略的中药多维化学物质组精准辨识方法(中国科学院长春应用化学研究所)  I32王璇.以中药活性或临床应用为导向的中药分析研究(北京大学)  I33王嗣岑.细胞膜仿生样品前处理材料的构建及其在中药活性成分研究中的应用(西安交通大学,陕西省心血管药物工程技术研究中心)  I34杭太俊.含朱砂中成药柏子养心丸的人体汞形态药代动力学研究(中国药科大学)  I35葛广波.药物代谢酶光学底物的设计研发及应用(上海中医药大学)  I36付志锋.基于噬菌体识别机制的致病菌及其耐药性快速检测方法(西南大学)  I37余露山.基于表观遗传机制的药物转运体表达调控机制及逆转耐药(浙江大学)  I38许风国.基于多维组合衍生化的靶向代谢组学LC-MS/MS分析方法开发及拓展研究(中国药科大学)  口头报告(教师)  O1张平,施迎娣,孙卫,赵雅文,侯晓芳*.CMC-offline-MALDI-TOF/MS筛选乳制品中潜在致敏蛋白(西安交通大学)  O2Y郑乐艺,柴逸峰,陈啸飞*.新型仿生跨膜蛋白生物色谱固定相的制备和全二维色谱应用研究(第二军医大学)  O3陈刚.基于碳基纳米材料的中药活性成分毛细管电泳电化学检测技术研究(复旦大学)  O4Y张文鹏.脂质异构体的高效质谱分析方法研究(普渡大学)  O5杨帆.ExoAPP技术监测药物诱导肿瘤细胞的上皮-间充质转变(湖北中医药大学)  O6Y蔡圣.基于核酸-铂配位结合的铂类药物检测方法研究(浙江大学)  O7YueHu,XiaoJ.Zhang,XiaoT.Yang,YingY.Tang,LinY.HuandDongZhu*.Fluorescentligandfishingofheatshockprotein90inhibitorsfromnaturalproducts(南京中医药大学)  O8张苗苗,徐林玉,余欢,张群林*.pH调控和类过氧化物酶催化荧光增强的总胆红素和直接胆红素诊断试剂盒的构建(安徽医科大学)  O9蔡容.基于含磷酸基小分子活性探针的定量蛋白组学研究(山东大学)  O10Y邹李*.基于DNA纳米结构组装的生物传感器在药物分析中的应用研究(广东药科大学)  O11Y王瑜江,赵琳,侯宇,高照,姜勇,郭晓宇,屠鹏飞,艾晓妮*.高通量器官芯片在药物筛选中的应用(北京大学)  O12Y王冬尧*,曹岩,洪战英,陈啸飞,李笑宇,柴逸峰.基于DNA亲和探针靶标鉴定技术的MLN8237的靶标分析(海军军医大学,香港大学)  O13王军*,付慧敏,姚璐璐,邓文文.一氧化氮信号通路的检测及其在精准医药中的应用(湖北工业大学)  O14Y王启钦*,刘潇,黄昊,王祥宇,江正瑾.基于多肽仿生材料的乳腺癌治疗性单抗捕获新技术研究(暨南大学,广州医科大学)  O15侯晓虹*,高桂花,王玉丹,李朔.多维MOFs复合组装体的构建及其在PPCPs新型样品前处理中的应用(沈阳药科大学)  O16赵龙山*,高珣,王洋,赵晶.新型磁性固相萃取结合技术在痕量残留检测中的应用(沈阳药科大学,淮海工学院)  O17付海燕*,时琼.多元谱学和传感分析新方法及其在食药分析中应用(中南民族大学)  O18闵俊哲*.靶向氨基、羧基官能团手性衍生化试剂的开发及手性拆分效能评价(延边大学)  O19廖依依,宋彦廷*.基于超声辅助的离子液体分散液液微萃取-高效液相色谱法直接测定中药口服液中拟除虫菊酯的残留量(海南大学)  O20李博*,王佳凤,高准,狄斌*.基于LC-MS/MS法研究过氧化物还原蛋白2(Prx2)特定位点的外消旋化(中国药科大学)  O21李迎春*,刘江.药物监测和肾功能多指标分析芯片构建与应用(哈尔滨工业大学)  O22Y刘舒*,刘志强,宋凤瑞.基于质谱技术的中药药效物质基础及整体作用机制研究(中国科学院长春应用化学研究所)  O23胡琪,柯蕊芳,甄雪燕,解笑瑜*.基于磁性碳纳米管的细胞膜仿生修饰及在川乌活性组分筛选中的应用(西安交通大学,陕西省心血管药物工程技术研究中心)  O24Y邱子栋,魏旭雅,陈金龙,孙瑞琦,黄璐琦,陈焕文,赖长江生*.在线EESI-MS用于乌头类中药毒性评价与解毒机理研究(中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地,东华理工大学,江西省质谱科学与仪器重点实验室)  O25李洪福,李腾,杨平,徐风*,刘广学,尚明英,李耀利,蔡少青*,王璇*.基于HPLC-ESI-IT-TOF-MSn的黄芪异黄酮类成分芒柄花苷体内代谢产物系统发现和表征(北京大学,中国食品药品监督管理局)  O26刘利红*.基于微流控芯片检测内毒素新方法的研究及应用(南方医科大学)  O27孙双姣,韦艳分,王浩,曹玉嫔,邓必阳*.一种新型的电化学发光传感器与毛细管电泳联用同步测定人血浆中盐酸喹那普利及其代谢产物盐酸喹普利拉(药用资源化学与药物分子工程国家重点实验室,广西师范大学)  O28陈朗星*.亲水性功能化磁性纳米材料的开发与应用(南开大学)  O29刘睿轩,吴登宇,朱泳妍,朱全红*.氨基酸纳米水凝胶的制备及其对人血浆蛋白的识别作用(南方医科大学)  O30王芳.DNA甲基化以及相关酶活性分析(武汉大学)  O31衣雪雪,谢洪平,刘万卉,余飞*.运用基于MRM的羟自由基足迹法表征单抗的高级结构(烟台大学,苏州大学)  O32Y周海波.基于纳米间隙的新型SERS探针和银包裹的磁性纳米粒子对C反应蛋白的超灵敏检测(暨南大学)  O33罗丹,冉凤英,陈琴华*.基于核酸酶的荧光适配体生物传感器用于生物标记物的检测(湖北医药学院,武当特色中药研究湖北省重点实验室)  O34Y孙端平*,路静,张陆勇,陈缵光.基于三维DNA四面体纳米结构和磁性金属有机框架构建电化学适配体传感器的研究(广东药科大学,中山大学)  O35Y胡斌*.活体中药物和代谢物的原位质谱分析(暨南大学)  O36张慧霞,李妍,栗政,朱鹏,张伟*.基于化学衍生化的LC-MS/MS靶向核苷酸组学分析方法的建立和应用(澳门科技大学)  O37Y刘丹彤,沙倩,郭梦喆*.m6A调控SOCS/JAK/STAT信号通路在糖尿病肾病发展中的作用机制研究(徐州医科大学)  O38潘英妮*,崔庆玲,张娅楠,常福瑞,丁文婧,张馨月.肉苁蓉苯乙醇苷类成分体内药效物质的研究(沈阳药科大学)  O39Y朱春艳,蔡婷婷*,刘国强,徐牛生,金滢,韩璐营,陈佳云,吴彩胜*,朱明社.基于“AcquireX智能数据采集”等非靶向分析技术策略识别和鉴定中药复方消渴丸大鼠体内暴露成分" (厦门大学,药明康德,赛默飞世尔科技公司,佳木斯大学,MassDefectTechnologies)  O40Y吴骁,林超,彭琳秀,麻彤辉*,杭太俊*.基于肠道菌群的雄黄体外代谢研究(南京中医药大学,中国药科大学)  O41何丹*,孙全,张景勍.清半夏炮制工艺及指纹图谱研究(重庆医科大学)  O42Ji-LiangCao,Li-JuanMa,Jian-BoWan*.ComprehensivequalitativeandquantitativeanalysisofginsenosidesinPanaxnotoginsengleavesbyonlinetwo-dimensionalliquidchromatographycoupledtohybridlineariontrapOrbitrapmassspectrometrywithdeeplyoptimizeddilutionandmodulationsystem(澳门大学)  O43钱玲慧.疾病相关酶的探针构建与应用(浙江大学)  O44李新.建立生物甲醛原位分析方法用于发现阿尔兹海默症早期病理标志物(浙江大学)  O45张婷,朱必越,程妍*.基于近红外荧光技术的脑内tau聚集体的无创成像分析(四川大学华西)  O46李娜*,卓越,颜晓静,伍建林.应用蛋白组学技术评估药物肝毒性的新方法(澳门科技大学)  O47AoWu,JiaoliZhang,LiXu,XiaofangJia,LiangfeiNiu,LinYin,LiyanZeng,TiefuLiu*,LijunZhang*.AquantitativeproteomicstudyrevealedPXXX2tobeacoloncancerearlybiomarker(上海市公共卫生临床中心,复旦大学)  口头报告(学生)  S1Y周韦,陈子林*.基于新型聚醚醚酮套层搅拌棒的固相萃取新方法(武汉大学)  S2Y于龙,肖玉秀*.基于镧系发光MOF的纸基微传感器及应用(武汉大学)  S3Y毛振坤,陈子林*.芳香基功能化有机聚合物整体柱及其毛细管电色谱分离行为研究(武汉大学)  S4Y李显会,赵晶,熊健成,高询,赵龙山*.新型绿色提取溶剂在中药活性成分及农药残留中的应用(沈阳药科大学,淮海工学院)  S5王婷,侯晓虹*.Fe3O4/MIL-101(Cr)为吸附剂的磁固相萃取结合UPLC-MS/MS测定水中非甾体抗炎药(沈阳药科大学)  S6Y李敬伟,赵旻,姜雪,刘婷婷,王淼,赵春杰.基于1H-NMR和MS法的杜仲降压片联用苯磺酸氨氯地平治疗高血压的代谢组学研究(沈阳药科大学)  S7Y王梦婷,王洋,熊建成,赵龙山*.利用加压液相萃取-液相色谱-串联质谱法测定脂肪性火锅食材中类固醇激素和抗生素的残留(沈阳药科大学)  S8Y张俊红,周园园,孙亚新,闫昊,徐霞*.基于UPLC-MS/MS代谢组学技术的冬凌草甲素对心肌缺血再灌注损伤的机制研究(郑州大学)  S9Y努尔买买提· 开合热曼,凌笑梅*.以R15K为靶点HPCE筛选新疆一枝蒿抗HIV病毒活性成分方法研究(北京大学)  S10Y欧丹,孙端平*,陈缵光*.基于花状纳米酶和DNA纳米结构的双适配体生物传感器用于肿瘤标志物的高灵敏检测(中山大学)  S11Y周园园,张俊红,孙亚新,闫昊,徐霞*.姜黄素通过调控脂肪酸相关代谢,激活PPARγ(郑州大学药物研究院)  S12Y梁春苏,凌笑梅*.基于ACE研究KChIP4a及其突变体与Ca2+或Kv4.3N末端相互作用(北京大学)更多详细信息,请点击下载:第九届全国药物分析大会会议手册兼第三轮通知.pdf
  • 瘦肉精变身兴奋剂!食品检测如何帮助运动员避免躺枪?
    目前,来源于肉类食品的饮食污染、其他食品或药物误服而导致的食源性兴奋剂困扰事件层出不穷,食源性兴奋剂的预防控制也成为各类体育赛事管理机构和供应服务基地保障的重要内容。 食源性兴奋剂食源性兴奋剂是指来源于食品中的兴奋剂,包括一般性食品及保健食品中从生产到加工过程中天然存在或故意添加而残留的兴奋剂成分,如肉类食品多次被爆出的“瘦肉精”。“瘦肉精”是一大类药物的总称从兴奋剂的分类来看,它属于β-肾上腺素受体激动剂。克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺是常见的三种在畜牧养殖使用的“瘦肉精”,同时也是常见的人为服用兴奋剂。[1]世界反兴奋剂机构在其2021年的指导性文件里特别指出,如果克伦特罗、莱克多巴胺等四种违禁物质的阳性结果显示浓度低于5纳克/毫升,他们将进行调查。[2] 兴奋剂成分检测仪器灵敏度及相应物质的检测标准的不断提升、新技术的应用为反兴奋剂管理机制提供了坚强保障。有关单位通过开展微生物检验、样品制备管理等,高质量、高标准、高效率开展食品检验检测工作,监测评估食品安全风险,竭力保障食源性兴奋剂“零检出”,使运动员得以安心训练备战。[3] 食品中4种瘦肉精类残留量测定依据《GB/T 22286-2008 动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》,试样中的β-激动剂经过酶解,用高氯酸调节pH值,沉淀蛋白后离心,上清液用氢氧化钠调节pH后用异丙醇-乙酸乙酯提取,用阳离子交换柱净化,采用液相色谱-串联质谱法进行测定,内标法定量。仪器和耗材1 仪器Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪;Auto EVA 60全自动平行浓缩仪;Agilent 1290II/6470 高效液相色谱-串联质谱MCX固相萃取柱(RayCure,60mg/3mL)全自动固相萃取仪全自动氮吹浓缩仪 2 试剂乙酸乙酯、异丙醇、甲醇均为色谱纯;甲酸、高氯酸、氨水、氢氧化钠;β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶。0.2mol/L乙酸钠缓冲液:称取13.6g乙酸钠,溶解于500ml水中,用适量乙酸调节pH至5.2。标准品:莱克多巴胺盐酸盐,克伦特罗盐酸盐,沙丁胺醇,特布他林硫酸盐,100ng/ml。内标物:沙丁胺醇-D3,克伦特罗-D9,10ng/ml。 样品制备1 酶解准确称取5g(精确到0.01g)经捣碎的样品于50mL离心管内,加入0.2moL/L乙酸钠溶液(pH=5.2)20mL,再加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶100μL,漩涡混匀,于37℃下避光水浴水解12h。2 提取添加1ml的内标工作液于待测样品中,加盖置于水平振荡器震荡15min,5000r/min高速离心10min,准确取10mL上清液于另一50mL离心管中,用高氯酸调节PH至1.0±0.3,4000r/min离心5min,将上清液转移至另一50mL离心管中,用10moL/L氢氧化钠溶液调节pH至11,加入4~5g氯化钠,加入异丙醇:乙酸乙酯=6:4 15mL,充分提取,4000r/min离心5min,吸取全部有机相到睿科全自动氮吹浓缩仪EVA-60plus 50℃下氮气吹干,加入0.2M乙酸铵溶液5mL溶解,超声混匀,使残渣充分溶解后备用。3 净化将MCX固相萃取柱安装在Raykol Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪上,依次用甲醇3 mL、水3 mL活化。备用液全部过柱,用水2 mL、2%甲酸水2ml、甲醇2 mL依次淋洗,抽干,用5%氨水甲醇溶液2 mL洗脱,收集洗脱液,使用EVA-60plus全自动氮吹浓缩仪于40℃水浴氮气吹干,用10%乙腈水溶液(含0.1%甲酸)1.0 mL溶解,滤过,液相色谱-串联质谱测定。具体的固相萃取方法见图。 结果与讨论为了验证该方法的回收率,本实验分别在猪肉样品中加入盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特布他林4种混合标准品进行加标回收验证(n=3),加标水平为0.5ug/kg,数据如表-2所示。加标回收率在87.8-112.4%之间,RSD值控制在10%以内。说明该方法能够很好地运用于猪肉中瘦肉精残留量的检测。表-2.猪肉样品加标回收率及RSD值注:其中克伦特罗的内标为克伦特罗-D9;沙丁胺醇、特布他林与莱克多巴胺的内标为沙丁胺醇-D3。 本解决方案操作方便、提取和浓缩效率高、回收率好。符合GB/T 22286-2008《动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》要求。 食源性兴奋剂的风险控制不仅要依靠检测标准,还应借鉴“预防为主”原则,加强“从农田到餐桌”整个链条中食品安全的监控,与时俱进的检测方法和技术手段的应用利于防止误食兴奋剂事件的发生,运动员得以吃得健康、吃得安心。 参考文献[1]黄炜:运动员冬奥会期间不要吃中国肉!反兴奋剂机构又来了… … ,观察者网[2]冬奥会食品符合食源性兴奋剂“零检出”特殊要求,新华每日电讯/2022 年/1 月/19 日/第 006 版[3]严字当头“零容忍” 全力以赴“零出现”——心怀“国之大者”,反兴奋剂中心备战北京冬奥会,国家体育总局反兴奋剂中心
  • 动物源性样品中β-受体激动剂的检测(SPE-LC/MS)
    1) SPE 方法订货号:C2160107-304固定相: Thermo HyperSep Retain-CX柱体积: 3mL固定相重量:200mg酶解: 动物源性样品2g (精确到0.01g)于50mL离心管中,加入0.2 mol/L乙酸铵溶液(pH 5.2)10mL,然后加入&beta -盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶40&mu L,涡旋混匀3 min,于37℃下水浴避光振荡16h。提取:样品酶解后放置至室温,涡旋混匀3 min,高速离心10min,取出上清液,加入1mol/L高氯酸溶液1mL,涡旋,混匀,高速离心10min后,转移上清液至另一50mL离心管内。活化:3mL甲醇,3mL水,3mL 0.5mol/L高氯酸上样:样品清洗:3 mL水,3mL甲醇,柱子抽干洗脱:3mL5%氨水甲醇溶液2)LC/MS 方法定货号:25005-152130色谱柱:Hypersil Gold,5&mu m,2.1× 150mm流动相:A:水(5mM乙酸铵)B:甲醇,梯度洗脱: 进样量:10&mu L流速:250&mu L/minMS条件:电喷雾电离源(ESI),正离子模式选择反应监控(SRM)扫描模式喷雾电压:4500V离子传输管温度:350℃结果:1.典型LC/MS/MS 色谱图 2.定量限(LOQ):本方法沙丁胺醇、非诺特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克仑特罗、妥布特罗、喷布特罗和心得安在猪肝、猪肉、牛奶和鸡蛋等动物源性食品组织中的定量限均可达0.1&mu g/kg,西马特罗、特布他林为0.5&mu g/kg。3.提取回收率均可达75 - 120 %。
  • 【睿科】315特辑动物源性食品中的4种瘦肉精类残留量的测定解决方案
    导读“瘦肉精”属于β-激动剂类化合物,包括盐酸克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等十几种物质,是一类动物用药的统称,属于肾上腺类神经兴奋剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。瘦肉精在减少脂肪增加瘦肉方面的作用非常明显,能让猪的单位经济价值提升不少,但也存在引发心律不齐甚至是心脏病等极具危险性的副作用。近年来(2011年),因食用被“瘦肉精”污染的食物导致中毒事件屡有发生,且后果极其严重,引起了世界各国的高度重视。检验方法为了保证畜产品质量安全,保护人类健康,许多国家都禁止在食源性动物的生产中使用盐酸克伦特罗,美国食品与药品监督管理局(FDA)将肉品中的盐酸克伦特罗残留作为必检项目,欧盟也严禁在饲料中添加“瘦肉精”类药物。我国虽然于2000年提出禁止使用“瘦肉精”类药物,但在畜牧业生产中“瘦肉精”的使用仍屡禁不止,如:在2011年河南省和江苏省发生济源双汇的“瘦肉精”事件以及2021年“3.15晚会”中曝光的沧州青县瘦肉精羊肉问题,都具有很大的社会影响力。依据《GB/T 22286-2008 动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》,试样中的β-激动剂经过酶解,用高氯酸调节pH值,沉淀蛋白后离心,上清液用氢氧化钠调节pH后用异丙醇-乙酸乙酯提取,用阳离子交换柱净化,采用液相色谱-串联质谱法进行测定,内标法定量。 图-1.盐酸克伦特罗的结构式 图-2.莱克多巴胺的结构式图-3. 硫酸沙丁胺醇的结构式 图-4. 特布他林的结构式睿科应用方案仪器与耗材NO.1 仪器与耗材Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪;Auto EVA 60全自动平行浓缩仪;Agilent 1290II/6470 高效液相色谱-串联质谱MCX固相萃取柱(RayCure,60mg/3mL)净化:高通量全自动固相萃取仪浓缩:全自动氮吹浓缩仪NO.2 试剂乙酸乙酯、异丙醇、甲醇均为色谱纯;甲酸、高氯酸、氨水、氢氧化钠;β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶。0.2mol/L乙酸钠缓冲液:称取13.6g乙酸钠,溶解于500ml水中,用适量乙酸调节pH至5.2。标准品:莱克多巴胺盐酸盐,克伦特罗盐酸盐,沙丁胺醇,特布他林硫酸盐,100ng/ml。内标物:沙丁胺醇-D3,克伦特罗-D9,10ng/ml。 样品制备NO.1 酶解准确称取5g(精确到0.01g)经捣碎的样品于50mL离心管内,加入0.2moL/L乙酸钠溶液(pH=5.2)20mL,再加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶100μL,漩涡混匀,于37℃下避光水浴水解12h。NO.2 提取添加1ml的内标工作液于待测样品中,加盖置于水平振荡器震荡15min,5000r/min高速离心10min,准确取10mL上清液于另一50mL离心管中,用高氯酸调节PH至1.0±0.3,4000r/min离心5min,将上清液转移至另一50mL离心管中,用10moL/L氢氧化钠溶液调节pH至11,加入4~5g氯化钠,加入异丙醇:乙酸乙酯=6:4 15mL,充分提取,4000r/min离心5min,吸取全部有机相到睿科全自动氮吹浓缩仪EVA-60plus 50℃下氮气吹干,加入0.2M乙酸铵溶液5mL溶解,超声混匀,使残渣充分溶解后备用。NO.3 净化将MCX固相萃取柱安装在Raykol Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪上,依次用甲醇3 mL、水3 mL活化。备用液全部过柱,用水2 mL、2%甲酸水2ml、甲醇2 mL依次淋洗,抽干,用5%氨水甲醇溶液2 mL洗脱,收集洗脱液,使用EVA-60plus全自动氮吹浓缩仪于40℃水浴氮气吹干,用10%乙腈水溶液(含0.1%甲酸)1.0 mL溶解,滤过,液相色谱-串联质谱测定。具体的固相萃取方法见图。Fotector Plus固相萃取方法液质检测条件NO.1 液相条件NO.2 液相梯度洗脱条件NO.3 质谱仪器参数NO.4 MAR参数图5 4种瘦肉精类MRM色谱图结果与讨论为了验证该方法的回收率,本实验分别在猪肉样品中加入盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特布他林4种混合标准品进行加标回收验证(n=3),加标水平为0.5ug/kg,数据如表-2所示。加标回收率在87.8-112.4%之间,RSD值控制在10%以内。说明该方法能够很好地运用于猪肉中瘦肉精残留量的检测。表-2.猪肉样品加标回收率及RSD值注:其中克伦特罗的内标为克伦特罗-D9;沙丁胺醇、特布他林与莱克多巴胺的内标为沙丁胺醇-D3。本解决方案操作方便、提取和浓缩效率高、回收率好。符合GB/T 22286-2008《动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》要求。EVA 系列全自动平行浓缩仪可以自动完成样品的浓缩,采用氮吹针追随的方式使得浓缩进程更快,并节省氮气;Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪采用全自动操作,可以排除人员操作带来的误差,从活化到上样、洗脱一步到位,六通道同时进行;同时Fotector Plus能够实现高通量处理,最多一天能够处理180个样品,省时省力,真正为批量检测提供帮助。
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