糖型鉴定

细菌生化鉴定试验你了解几何？——三糖铁培养基的灵活应用摘要：糖类是细菌合成菌体成分必需的原料，各类细菌对各种糖类的分解能力也有差异，葡萄糖、乳糖、蔗糖是三糖铁培养基的三种糖，通过细菌对这三种糖的利用和分解产物做生化鉴定已经很有历史了。笔者通过对三糖铁培养基的应用，总结了三糖铁培养基在细菌鉴定中的灵活应用。总结：三糖铁培养基在肠道菌的鉴定中起到很重要的作用，只要灵活准确应用，将会在细菌的生化鉴定试验的第一步中起到关键性的作用。

如何用蒽酮鉴定糖，钼酸铵鉴定磷各位前辈好！ 学生有个样品需鉴定其中是否含有糖以及磷。老师要求用蒽酮鉴定糖，用钼酸铵鉴定磷。学生不知该怎么做，还请哪位前辈指点一二！小弟感激不尽！

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[align=center][/align][font=宋体]一、原理[/font][font=宋体]1.[/font][font=宋体]多糖的分级与纯化[/font][font=宋体]多糖纯化的实质是将粗多糖中的杂质（包括蛋白质、色素、低聚糖、无机盐等非糖物质）除去而获得分子量和极性均一的多糖组分。比较常用的方法有：醇沉法、超滤法和柱层析法等。其中柱层析法应用比较普遍，多用于样品的精细分级,具有操作简单，重现性好的优点，但样品上样量小。用于多糖分离的柱层析主要有两类：一类是通过分子量大小进行分级的凝胶柱层析，如Sephadex G-100（200、50、25、10）、SepharoseCL-6B等系列；另一类是离子交换层析，是根据多糖所带电荷的性质不同选择相应的离子交换柱对多糖进行分级。如待分离的多糖带有负电荷，可选择阴离子型的DEAE-纤维素柱或DEAE-Sepharose柱进行分级，以获得均一的多糖组分。[/font][font=宋体]通过热水煮提方法提取的多糖，通常是混合物，且分子量不均一，其单糖组成、分子结构和聚合度往往不同，可通过柱层析的方法，对其进行分级以达纯化的目的。本实验中，采用[/font]DEAE-[font=宋体]纤维素柱层析的方法对中草药中水溶性粗多糖进行分级纯化，分离纯化出各级分多糖，[/font][font=宋体]为后续研究多糖的结构特征和生物活性奠定基础。[/font][font=宋体]2.[/font][font=宋体]苯酚—硫酸法[/font][font=宋体]游离的寡糖、多糖中的己糖或糖醛酸在浓硫酸的作用下，脱水生成糠醛，再与苯酚作用起显色反应，在一定范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，吸收值与糖含量呈线性关系。且己糖在[/font]490 nm[font=宋体]处（戊糖及糖醛酸在[/font]480 nm[font=宋体]）有最大吸收，故用比色法测定多糖含量。该法简单，快速，灵敏，且颜色持久，同一台设备同一光源仅需制作一条标准曲线。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、步骤[/font]1.[font=宋体]中草药水溶粗多糖的提取流程[/font][font=宋体]中草药粉末[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]蒸馏水浸泡过夜[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]超声[/font]/[font=宋体]微波[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]水浴浸提[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]过滤去除药渣[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]定容[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]多糖含量测定[/font][font=宋体]加等体积[/font]95%[font=宋体]乙醇[/font][font=Symbol][/font]4[font=宋体]℃冰箱过夜，醇沉多糖[/font][font=Symbol][/font]5000r/min[font=宋体]离心去上清液[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]粗多糖[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]脱蛋白[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]脱色素[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]透析[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]浓缩[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]冷冻干燥得水溶多糖[/font][font=Symbol][/font]DEAE-[font=宋体]纤维素色谱柱[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]收集多糖组分[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]测定每[/font]50s[font=宋体]洗脱液的[/font]OD[font=宋体]值[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]绘制横坐标为管数与纵坐标为[/font]OD[font=宋体]值的洗脱曲线[/font][font=宋体]根据洗脱曲线收集多糖溶液[/font][font=Symbol][/font]4[font=宋体]℃无水乙醇醇沉过夜[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]离心[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]多糖沉淀[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]常规干燥[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]纯度鉴定[/font][font=Symbol][/font][font=宋体]纯多糖[/font]2.[font=宋体]脱蛋白[/font][font=宋体]由于粗多糖中含有一定量游离的和结合的蛋白，为保证多糖的纯度，必须将蛋白质脱去。常用的脱蛋白方法有[/font]Sevag[font=宋体]法、三氯乙酸法和蛋白酶法（如链蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶）等。[/font][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font]Sevag[font=宋体]法[/font][font=宋体]根据蛋白质在有机溶剂（如氯仿）中易发生变性析出的特点[/font][font=宋体]，把多糖配制成[/font]5%[font=宋体]的糖液，然后按照[/font]1:3[font=宋体]的体积比加入[/font]Sevag[font=宋体]试剂（氯仿∶正丁醇[/font]=4[font=宋体]∶[/font]1[font=宋体]），混匀后剧烈振荡，静置分层后吸去水层与溶剂层交界处的变性蛋白质，重复操作多次，直到除尽蛋白质为止。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）三氯乙酸法[/font][font=宋体]将粗多糖配成[/font]5%[font=宋体]的糖液，加入[/font]30%[font=宋体]三氯乙酸溶液，使三氯乙酸终浓度为[/font]15%[font=宋体]，在[/font]4℃[font=宋体]冰箱中放置过夜，离心弃去沉淀，得无蛋白的多糖溶液，再用[/font]1 mol/L NaOH[font=宋体]溶液中和至[/font]PH[font=宋体]为[/font]7[font=宋体]。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）蛋白酶法[/font][font=宋体]将粗多糖配成[/font]5%[font=宋体]的糖液，用酸碱调[/font]pH[font=宋体]至中性，加链蛋白酶[/font]0.5 L[font=宋体]，放恒温箱中[/font]37℃[font=宋体]保温[/font]24 h[font=宋体]后，加热升温至[/font]80℃[font=宋体]使酶失活，离心，得无蛋白的多糖溶液。[/font]3.[font=宋体]脱色[/font][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font] [font=宋体]活性炭法[/font][font=宋体]将脱蛋白后的多糖配成[/font]5%[font=宋体]的糖液，用[/font]NaOH[font=宋体]溶液调[/font]pH[font=宋体]为[/font]4.5[font=宋体]，加入活性炭粉末，于[/font]80℃[font=宋体]保温[/font]2 h[font=宋体]后过滤。反复进行[/font]3[font=宋体]次，直到溶液颜色不再降低为止。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）过氧化氢法[/font][font=宋体]将脱蛋白后的多糖溶液，用浓氨水调至[/font]pH[font=宋体]为[/font]8.0[font=宋体]，逐滴滴加[/font]20%H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub][font=宋体]至溶液为浅黄色，[/font]50℃[font=宋体]水浴，保温[/font]2 h[font=宋体]后过滤。[/font]4.[font=宋体]透析脱盐[/font][font=宋体]将脱蛋白、脱色后多糖配成[/font]5%[font=宋体]溶液，置于透析袋中，先用自来水逆向流水透析[/font]72 h[font=宋体]后，再用蒸馏水透析[/font]24 h[font=宋体]，每[/font]4 h[font=宋体]换水一次。[/font]5.[font=宋体]干燥[/font][font=宋体]将脱蛋白、脱色、脱盐后的中草药多糖溶液，水浴[/font]80℃[font=宋体]浓缩至[/font]10 mL[font=宋体]，加三倍体积的无水乙醇过夜，离心取沉淀，经无水乙醇、乙醚洗涤后，常规干燥得中草药去蛋白去色素的多糖。[/font]6.[font=宋体]多糖含量测定[/font][font=宋体]采用苯酚[/font]-[font=宋体]硫酸法测定样品中的多糖含量。绘制标准曲线，根据葡萄糖标准曲线和样品吸光值计算其糖含量。[/font][font=宋体]标准曲线的制作：准确称取[/font]105℃[font=宋体]干燥恒重的标准葡萄糖[/font]50 mg[font=宋体]定容于[/font]500 mL[font=宋体]容量瓶中，加水至刻度，用移液管分别吸取[/font]0[font=宋体]、[/font]0.1[font=宋体]、[/font]0.2[font=宋体]、[/font]0.3[font=宋体]、[/font]0.4[font=宋体]、[/font]0.5[font=宋体]、[/font]0.6[font=宋体]、[/font]0.7[font=宋体]、[/font]0.8[font=宋体]、[/font]0.9[font=宋体]、[/font]1.0 mL[font=宋体]转入试管中，各以蒸馏水补至[/font]1.0 mL[font=宋体]，每个浓度重复四个平行。然后分别向每支试管中加入[/font]4%[font=宋体]苯酚试剂[/font]1mL[font=宋体]及浓硫酸[/font]2 mL[font=宋体]，摇匀，沸水浴中煮沸[/font]10 min[font=宋体]，冷却至室温，放置[/font]10 min[font=宋体]后在[/font]λ= 480 nm[font=宋体]处测定吸光值[/font]A[font=宋体]。以吸光值[/font]A[font=宋体]为纵坐标，糖含量[/font]C[font=宋体]为横坐标，得糖的标准曲线。[/font][font=宋体]样品溶液制备：精密称取水溶性粗多糖[/font]5 mg[font=宋体]，先加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水溶解，然后定容至[/font]50 mL[font=宋体]。[/font][font=宋体]样品含量测定：用移液管吸取样品液[/font]1.0 mL[font=宋体]，加入[/font]4%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体]及浓硫酸[/font]2 mL[font=宋体]，按上述方法进行操作，测其吸光值，以标准曲线计算样品糖含量[/font][font=宋体]按下式计算中草药多糖的质量浓度与得率。[/font] [img=,300,41]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111021041176368_5305_3528941_3.gif!w300x41.jpg[/img]7.[font=宋体]分级[/font][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font] DEAE-[font=宋体]纤维素的预处理和装柱[/font][font=宋体]将[/font]DEAE-[font=宋体]纤维素用蒸馏水充分浸泡溶胀后，倾倒除去水分，再用[/font]0.5 M NaOH[font=宋体]溶液浸泡[/font]1 h[font=宋体]，用蒸馏水反复洗涤至[/font]PH[font=宋体]等于[/font]7[font=宋体]。再用[/font]0.5 M[font=宋体]的[/font]HCl[font=宋体]溶液浸泡[/font]1 h[font=宋体]，用蒸馏水洗至中性，真空清除气泡，备用。[/font][font=宋体]装柱时，先将[/font]DEAE-[font=宋体]纤维素沿着玻璃棒缓慢倒入，以防产生气泡。柱子装好后，依次用[/font]5[font=宋体]倍柱体积的蒸馏水、[/font]3[font=宋体]倍柱体积的[/font]1.0 M NaCl[font=宋体]和[/font]5[font=宋体]倍柱体积的蒸馏水进行平衡，流速设定为[/font]20 cm/ h[font=宋体]。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）水溶性粗多糖的离子交换柱层析的线性梯度洗脱[/font][font=宋体]称取[/font]50 mg[font=宋体]水溶性粗多糖，溶于[/font]5 mL[font=宋体]蒸馏水中，在已平衡好的[/font]DEAE-[font=宋体]纤维素离子交换柱（[/font]1.5 × 14 cm[font=宋体]，[/font]Cl[sup]-[/sup][font=宋体]型）上进行上样，先用[/font]100 mL[font=宋体]蒸馏水做流动相进行洗脱，再用[/font]0~1.0 M NaCl[font=宋体]溶液[/font]300 mL[font=宋体]进行线形梯度洗脱，流速[/font]1.0 mL/min[font=宋体]，每个试管收集[/font]3 mL[font=宋体]洗脱液，苯酚—硫酸法测定洗脱液中相对的糖含量分布。[/font]8.[font=宋体]纯度鉴定[/font][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）高效液相色谱法[/font][font=宋体]采用高效液相色谱仪系统，[/font] 10A[font=宋体]检测器，[/font]CLASS-Vp[font=宋体]工作站，[/font]TSK-gel G-3000PWXL[font=宋体]不锈钢色谱柱（[/font]7.8 × 300 mm)[font=宋体]，柱温为[/font]40℃[font=宋体]。[/font][font=宋体]取各级多糖样品溶于[/font]0.7 M Na2SO4[font=宋体]溶液中，其多糖终浓度为[/font]2 mg/mL[font=宋体]，上样[/font]20 μL[font=宋体]，流动相为[/font]0.7 M Na2SO4[font=宋体]溶液，流速为[/font]0.5 mL/min[font=宋体]。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）紫外光谱分析[/font][font=宋体]将水溶性粗多糖各级分多糖样品配成[/font]0.1 mg/mL[font=宋体]的溶液，用[/font]752PC[font=宋体]型紫外可见分光光度计于[/font]200-400 nm[font=宋体]处扫描检测。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）旋光仪分析[/font][font=宋体]不同的多糖具有不同的比旋度，它们在不同浓度的乙醇中具有不同溶解度，所以，如同一多糖水溶液经不同浓度的乙醇沉淀所得的沉淀物，具有相同比旋度，则证明该多糖为均一组分。[/font][font=宋体]将评估多糖样品溶于水，成为近似半饱和溶液，置于磁力搅拌器上，在搅拌下加乙醇，使溶液中乙醇浓度达到[/font]20%[font=宋体]，搅拌片刻，使沉淀完全，离心得沉淀。上清液中再继续滴加乙醇，使溶液中乙醇浓度达[/font]40%[font=宋体]，所产生的沉淀再经离心。前后两次沉淀，分别干燥后在相同条件下测定其水溶液的比旋度。[/font][font=宋体]将[/font]10 mL5%[font=宋体]饱和糖液用国产[/font]WXG[font=Symbol]-[/font]6[font=宋体]型自动旋光仪，钠灯光源，以蒸馏水调零点，[/font]1dm[font=宋体]管室温下测定。[/font]

[align=center][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]基[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]化[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]及其[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖蛋白规模化的鉴定[/color][/size][/align]O- [size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖基化是一种发生在蛋白质丝氨酸或苏氨酸上的具有一个糖单元结构的翻译后修饰，广泛分布在细胞核和细胞质中，是一种重要的胞内修饰调控方式。它参与细胞的多种应激响应和细胞进程，如信号转导、转录、翻译、蛋白降解、基因调控与细胞周期调控等。目前，已发现的[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]1000[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]多种[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖蛋白中，主要有细胞骨架蛋白、核孔蛋白、转录因子、激素受体、磷酸酶、激酶等。[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖基化异常与一些疾病，如糖尿病、帕金森病、阿尔兹海默症等有紧密联系。因此，系统地对[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖基化蛋白质进行鉴定与分析[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d],[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]对于研究其生物学功能和在疾病发生发展中的作用都具有重要意义。[/color][/size][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#0d0d0d][1][/color][/size][/sup][/font][size=16px][color=#0d0d0d]与目前磷酸化蛋白的鉴定规模相比，[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]蛋白的鉴定尚处于初级水平。[/color][/size][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#0d0d0d][2-4][/color][/size][/sup][/font][size=16px][color=#0d0d0d]导致[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]难以鉴定的原因主要有：[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]1[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]）[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]修饰在胞内是动态变化的，并且在细胞裂解时糖苷键容易被破坏；[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]2[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]）[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]修饰蛋白表达丰度较低，[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]且糖基[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]化水平不一；[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]3[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]）[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]修饰蛋白在进行质谱检测时容易发生中性丢失，难以被完全检测。[/color][/size][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#0d0d0d][5][/color][/size][/sup][/font][size=16px][color=#0d0d0d]由于[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]修饰具有表达丰度低、高度动态变化、容易分解等特点，常规质谱鉴定手段难以对其实现高灵敏度、规模化的分析鉴定，因此对[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]的鉴定往往需要先对糖蛋白[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]/[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖肽进行分离富集后方能成功进行。[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]在近年来发展了多种针对[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖基化修饰蛋白质和[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]肽段[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]的分离与富集新策略，已有的[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖肽富集方法包括凝集素富集法、抗体富集法、代谢标签富集法、化学酶促反应标签富集法以及酰肼富集法等。[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]基于亲和作用的直接捕捉方法操作简便，但由于亲和力较弱，难以避免非特异性吸附，导致特异性差；而通过非天然糖基的代谢标记法或化学酶促标记法将生物兼容性的反应基团（[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]炔[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]基、叠氮基等）引入[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖肽，再由点击化学反应进行捕捉可以显著提高糖肽的富集特异性，但点击化学等反应不可逆，容易造成糖肽修饰基团的质量标签过大，影响糖肽的鉴定效率，而且操作复杂。[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]因此，应该开发特异性高、覆盖高度、操作简便，并且不会影响质谱鉴定的新方法实现[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]O-[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]GlcNAc[/color][/size][size=16px][color=#0d0d0d]糖蛋白规模化的鉴定。[/color][/size]

[color=#444444]做酶催化反应实验出现中间产物，现在推测是D-木酮糖，想做鉴定。现在两个方向解决，希望大神给点建议~~如果有更好的方法，不胜感激！！[/color][color=#444444]1.想做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]但是查不到检测方法！但现在检测方法完全查不到，一些老师说羟基太多，很难离子化，不给做。[/color][color=#444444]2.制纯品做质谱或者核磁，但反应液中有PBS缓冲液，求问如何除盐？另外反应中还有其他糖类，如何进行分离纯化？[/color]

请问：多糖疫苗的鉴定是如何做的？听说需要用到蛋白层析仪的。具体是怎么用呢？

请教一下使用过钙型糖柱的人，我要分析的五碳醛糖没有共轭双键，但工程师说用钙型糖柱可以用紫外检测器在192nm处检测。请问这是什么原理啊？

[color=#444444]我想做水样里所有可培养细菌的鉴定分型，请问用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可不可以啊？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]做细菌的鉴定分型可以做到什么程度？比如说属、种、亚种？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法在这方面比生化检测有什么优势?大家要帮帮我啊[/color]

还原性糖种类：还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。非还原性糖有蔗糖、淀粉、纤维素等，但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。还原性糖概念：还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。葡萄糖分子中含有游离醛基，果糖分子中含有游离酮基，乳糖和麦芽糖分子中含有游离的醛基，故它们都是还原糖。还原性糖鉴定：鉴定原理：生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团（游离醛基或游离酮基）。用斐林试剂、班氏试剂、银氨溶液等可以检验生物组织中还原糖存在与否。（1）利用斐林试剂：斐林试剂由质量浓度为0.1g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→→棕色→砖红色(沉淀)。(2)利用班氏试剂：班氏试剂由A液(硫酸铜溶液)，B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。将A溶液倾注人B液中，边加边搅，如有沉淀可过滤。实验原理与斐林试剂相似，所不同的是班氏试剂可长期使用。班氏试剂A液中的硫酸铜溶液与B液中的无水硫酸钠和柠檬酸钠相遇，能产生可溶性的又略能离解出cu2+的柠檬酸铜。(3)利用银氨溶液：银氨溶液是在2％的AgNO3溶液中逐滴滴人2％的稀氨水，至最初产生的沉淀恰好溶解为止，这时得到的溶液就是银氨溶液。银氨溶液中含有Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银)，这是一种弱氧化剂，能把醛基氧化成羧基，同时Ag+被还原成金属银。还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜。可见，银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。鉴定的结果是出现银镜。

【题名】：G—SZ—1型离子计初步鉴定【全文链接】: https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HGZD197901014.htm

月旭公司的钙型糖柱能做木糖分析吗？如果不能的话，哪一款能做，请介绍一下，谢谢！

问:分离的细菌如何鉴定?答:细菌的传统鉴定 1. 形态特征及染色结果 ①革兰氏染色 ②鞭毛染色 ③荚膜染色 ④细胞壁染色（NaCl法：1.取1d25%NaCl溶液于洁净的载玻片上。2.挑一环培养6h的细菌在25%的NaCl中涂匀，自然凉干。3.滴加0.01%的结晶紫于其上，30s后水洗干燥，油镜观察。） ⑤抗酸染色 2. 培养特征观察取菌龄24-28h的菌3.6接种于PDA平板，PDA斜面，营养肉汤中培养24h，进行琼脂柱，明胶穿刺培养，30℃培养24h。 3. 生理生化实验需氧性测定和运动性测定：将斜面培养24h的待测菌用接种针穿刺到培养基管底，3d后观察变化。如果菌落沿培养基表面生长，表明为好氧菌，反应为阳性，如果菌落沿穿刺线生长，反应为阴性。培养基成分：蛋白胨0.2g，NaCl0.5g，K2HPO40.2g，琼脂0.5-0.6g，葡萄糖1.0g，水100ml。 4. 生长温度测定在肉汤培养基（外加1%葡萄糖）中用接种针接种，在恒温水浴锅中不同温度下（[c

班氏试剂的配制与鉴定结果班氏试剂的配置 取无水硫酸铜1.47g,溶于100ml热水中，冷却后稀释到150ml，取柠檬酸钠173g，无水碳酸钠100g和600ml水共热，溶后冷却并加水至850ml，再将冷却的150ml硫酸铜倾入即可。鉴定糖尿的结果　　　　沸水浴加热后的现象　　　　　　 　　葡萄糖含量（g/dl）透明蓝色　　　　　　　　　　　　　　　　　　无加热时无变化，仅冷却后有少量沉淀　　　　微量，约0.5以下　加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀　　　　少量，约0.5－1加热10－15秒后即出现土黄色沉淀　　　　　中量，约1－2加热时很快出现多量砖红色沉淀　　　　　　大量，约2以上班氏试剂与斐林试剂比较： 首先，两者的配方不一样。斐林试剂主要由质量浓度为０.１ｇｍＬ-1的ＮａＯH溶液和质量浓度为０.０５ｇｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液配制而成。其中０.１ｇｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液称为斐林试剂甲，0.05ｇｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液称为斐林试剂乙。而班氏试剂的配方为：①４００ｍＬ水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠；②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜，制成ＣｕＯ4溶液；③把ＣｕＳＯ4溶液倒入柠檬酸钠?Ｎａ2ＣＯ3溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。 其次，两者在反应原理上略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Ｃｕ（ＯＨ）2，Ｃｕ（ＯＨ）2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中Ｃｕ（ＯＨ）2的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生ＯＨ-，与柠檬酸钠?Ｎａ2ＣＯ3溶液和ＣｕＳＯ4溶液混合时，Ｃｕ2+和ＯＨ-结合，生成Ｃｕ（ＯＨ）2，Ｃｕ（ＯＨ）2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。 第三，两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反应产生Ｃｕ（ＯＨ）2，Ｃｕ（ＯＨ）2很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠?Ｎａ2ＣＯ3为一对缓冲物质，产生的ＯＨ-数量有限，与ＣｕＳＯ4溶液混合后产生的Ｃｕ（ＯＨ）2浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。 无论利用班氏试剂还是斐林试剂，归根结底都是Ｃｕ（ＯＨ）2与醛基反应而生成砖红色的Ｃｕ2Ｏ沉淀，因此两者反应现象一样25v 可溶性还原糖的鉴定：生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。(1)利用斐林试剂：斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，醛基则被氧化为羧基。可见用斐林试剂只能鉴定还原性糖，不能鉴定可溶性的非还原性糖。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。(2)利用班氏试剂：班氏试剂由A液(硫酸铜溶液)，B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。将A溶液倾注人B液中，边加边搅，如有沉淀可过滤。实验原理与斐林试剂相似，所不同的是班氏试剂可长期使用。(3)利用银氨溶液：银氨溶液是在2％的AgNO3溶液中逐滴滴人2％的稀氨水，至最初产生的沉淀恰好溶解为止，这时得到的溶液就是银氨溶液。银氨溶液中含有Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银)，这是一种弱氧化剂，能把醛基氧化成羧基，同时Ag+被还原成金属银。还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜。可见，银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。鉴定的结果是出现银镜。2．用班氏试剂鉴定可溶性还原糖，比用斐林试剂更简便。斐林试剂要现配现用，否则实验难以得到满意结果，因为此反应利用的是斐林试剂中的Cu(OH)2产物作为弱氧化剂参与与还原糖的反应，而我们知道，Cu(OH)2是一种沉淀物质，放置过久沉淀过多则不利于反应，而班氏试剂是斐林试剂的改良，它利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂，使溶液稳定、灵敏度高且可以长期使用，故更简便。3．利用斐林试剂或班氏试剂可以进行尿糖检测。实验原理 尿液中葡萄糖属可溶性还原糖，可以用班氏试剂或斐林试剂检验。材料器具 人体新鲜尿液，试管，酒精灯，试管夹，火柴，滴管，班氏试剂。步骤(1)在试管中加入1mL班氏试剂，加热到沸腾，如不变色，则可使用。(2)再在试管中滴人2滴新鲜澄清的尿液，摇匀。(3)加热上述混合液到沸腾，并持续2min～3min。(4)观察试管内混合液颜色是否发生变化，是否有沉淀物产生，并按表5提示作出判断记录。混合液现象 —记录符号 含糖量混合液呈蓝色或蓝灰色 - 0.02g／100mL出现浅黄绿色沉淀 + (0.1～0.5g)／100mL出现黄绿色沉淀 ++ (0.5～1.4g)／100mL出现黄色沉淀 +++ (1.4～2.0g)／100mL出现橘黄色沉淀 ++++ 2.0g／100mL注意事项：(1)班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10：1。(2)如是糖尿病人，检验前两三天最好停止服药。

[color=#333333][font=&][size=16px]点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39820.html[/url]服务背景[/size][/font]为了保证货物存储和运输的安全，中广测面向客户提供货物运输条件的咨询和鉴定服务，依据国内外有关危险货物运输的法规、标准，对货物的运输安全性作出鉴定和建议，出具空运、海运、道路运输、铁路运输的《货物运输条件鉴定书》,依照国内国际相关法规标准和海关总署的要求，出具《化学品危险特性分类鉴别报告》、编制GHS标签和符合各种要求的SDS/MSDS。我中心通过了民航局、各大航空公司、国际快递公司“货物航空运输条件鉴定机构”资质认可，是民航危险品检验检测联合工作组首批推荐的检验检测机构之—，是海关总署认可的进出口商品检验鉴定机构。服务范围（1）货物运输（空运、海运、公路运输、铁路运输）条件鉴定服务与咨询（2）化学品理化参数和危险特性检测及危险性鉴定（3）MSDS/标签编制和咨询服务（4）欧盟CLP法规分类/标签/SDS编制和咨询服务（5）铅酸蓄电池的振动、压差、55℃渗漏测试（6）锂电池包装件1.2米跌落测试检测项目（1）化学品理化参数检测依据GB、ASTM、EC等相关物性测试标准，提供化学品的理化参数检测服务，为化学品登记、生产监督管理、环境保护等提供科学依据；差示扫描量热DSC分析、pH值、闭杯闪点、开杯闪点、燃点、熔点/熔程、沸点、密度、粘度、金属腐蚀速率等（2）化学品危险特性分类鉴别、危险化学品鉴定与分类依据联合国《关于危险货物运输的建议书 规章范本》、联合国《全球化学品统一分类和标签制度》(GHS)、《危险化学品目录》、《化学品分类和标签规范》等标准，向客户提供化学品危险特性分类鉴别、危险化学品鉴定与分类、《危险化学品目录》列入证明、单项物理危险特性鉴定等服务（3）货物运输（空运、海运、公路运输、铁路运输）条件鉴定依据国内外有关危险货物运输的法规、标准，对货物进行分类鉴定，并对其运输安全性作出鉴定和建议，出具空运、海运、陆运、铁路运输的《货物运输条件鉴定书》和《货物危险性鉴定书》，为货物运输各环节的货主、货代、承运人提供各类货物的包装、适航（适运）性等咨询服务；为方便客户、确保安全和促进贸易，针对不便送至实验室鉴定的可能含有潜在危险性的器械/设备，中广测可提供现场鉴定服务（4）磁性检测及咨询服务按IATA DGR要求对航空运输的货物进行磁性检测以保证航空运输的安全。(1)经中广测磁性检测合格并出具《货物运输条件鉴定书》的货物可作为非限制性货物运输；(2)对于磁性检测不合格的货物则可提供包装、屏蔽方面的咨询和建议，尽可能使之符合非限制性货物的运输条件（5）铅酸蓄电池的振动、压差、55℃渗漏测试振动、压差、55℃渗漏测试是针对铅酸蓄电池运输的一系列测试。根据联合国《关于危险货物运输的建议书 规章范本》中的规定，一般情况下含电解液的铅酸蓄电池如未经过任何测试，鉴定为第8类危险品；如果密封型的铅酸蓄电池通过了振动、压差和渗漏测试，则鉴定为“非限制性物品”（6）SDS/MSDS编制、标签编制和咨询服务中广测专业从事产品理化特性特别是危险特性的检测工作，熟悉国内外的法规、标准，有丰富的资料储备，为客户提供中国标准(GB)、国际标准(ISO)、欧洲版(CLP)、GHS版、美国版等多种版本的SDS/标签编制和咨询服务（7）锂电池包装件1.2米跌落测试按照危险品运输的规定，含锂电池的包装件必须通过1.2米跌落测试才可以收运，中广测可依据相关的标准为客户提供包装件1.2米跌落测试服务，并出具测试合格报告（8）危险品包装服务为客户提供符合国际航空运输协会（IATA）和相关国家标准规定的包装材料及服务（9）危险品申报单（DGD）填写相关检测人员通过了国际航协（IATA）、中国民航局的培训和资质认定，可接受托运人的委托，填写《危险品申报单》（DGD）[font=&][size=16px]检测标准[/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][/color][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]货物运输[/td][td]鉴定[/td][td][url=https://www.woyaoce.cn/download/paperinfo_124628.html]GB/T 19459-2004 危险货物及危险货物包装检验标准基本规定[/url][/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]我们的愿景：建设成为社会尊重、客户信赖的国内一流研究型分析测试机构，支撑产业技术创新的大型综合性分析测试高端平台。我们的使命：以全社会科技创新活动为关注焦点，致力于为客户提供分析测试综合服务和系统解决方案，推动科技进步、支撑绿色发展、服务政府履职、保障社会民生。我们的质量方针：“行为公正、方法科学、数据准确、服务高效”。

山东云唐鸽子飞行能力DNA鉴定仪技术参数：　　外形尺寸：235mm*385mm*175mm(宽*深*高)　　重量：5.8Kg　　电气参数：~220V/50Hz，255W　　数据接口：USB 2.0*2　　运行条件：温度：10-30℃，湿度：20%~80%　　运输及贮存条件：温度：-20~55℃，湿度：20%~80%　　海拔高度：2500米　　噪声等级：A计权，60dB　　样本容量：32*0.2mL　　试管类型：0.2[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]单管，八联排管　　样本容积：15-100uL　　加热/冷却方式：半导体加热/制冷　　温度范围：4℃-99℃　　最大升温速率：≤5.5℃/s(MAX)　　平均升温速率：≥3.5℃/s　　最大降温速率：≤4.5℃/s(MAX)　　平均降温速率：≥2.5℃/s　　控温精度：≤±0.01℃　　温度准确度：≤±0.1℃　　温度均匀性：≤±0.3℃　　荧光检测通道数：4通道　　发光器件：高亮度LED　　采光器件：高灵敏度，高信噪比光电二极管　　适配探针或染料：第一通道：470/520 FAM,SYBR Green　　第二通道：530/570 HEX,JOE,VIC　　第三通道：580/610 ROX,CY3.5,Texas-Red　　第四通道：630/670 CY5　　检测灵敏度：1个拷贝　　线性检测范围：100~1010个拷贝　　线性相关系数：≥0.999　　通道交叉串扰：无串扰　　检测重复性：≤1.0%

[font=&]【题名】： G—SZ—1型离子计初步鉴定[/font][font=&]【全文链接】: https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HGZD197901014.htm[/font]

头一次用钙型阳离子交换柱做糖，流速0.4ml/min，正常泵压一般多少bar？我用安捷伦LC1200

重组子可通过酶切进行鉴定，也可以利用扩增引物通过 PCR 进行鉴定，阳性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的 PCR 产物。1. 用牙签挑取平板上的菌落接种于 2ml 含适当抗生素的 LB 培养基中，37℃摇 床培养过夜。2. 次日取菌液 0.2-0.5ml，13,000rpm×3min 离心，弃上清，加入 20μl ddH2O 和 20μl 酚/ 氯仿，震荡混匀，13,000rpm×5min 离心。3. 取上清进行琼脂糖电泳，加入载体质粒 DNA 作为阴性对照，根据质粒大小 初步筛选重组子，重组子的泳动速度应该慢于载体质粒。4. 用碱法小量制备可能是重组子的质粒 DNA。5. 选取适当的酶，对重组子进行酶切分析，酶切体积均为 10μl 体系。酶切样品 进行琼脂糖电泳鉴定是否有所需片段。6. 酶切分析正确的重组子分成两份，一份进行测序反应，另外一份保种。7. 若用 PCR 法鉴定，则在第 2 步时每个样本取 0.5-1.0μl 菌液为模板进行 PCR 反应，每管反应体系最低可少至 10μl ，PCR 产物电泳，能得到所需条带的样 本进一步提取质粒酶切鉴定或送样品测序。

最近在做干海参，两个方法，一个是SC/T3206-2009 一个是GB31602-2015，里面要做水溶性还原糖1%跟水溶性总糖3%。请问各位大神，有没有做过的，正常的海参结果应该做多少才是好海参。

新华社柏林11月10日电 二型糖尿病是胰岛素与受体较少结合、胰岛素不能发挥作用所致，传统的治疗方法效果并不明显。德国科研人员日前发现一种新的激素，可以显著提高二型糖尿病的治疗效果。 人体摄入糖类后，肠道中的“肠促胰素”会促进胰岛素分泌，从而降低血糖浓度。肠促胰素包括胰高血糖素样肽－1（简称GLP－1）和糖依赖性胰岛素释放肽（简称GIP）。但二型糖尿病患者肠促胰素作用减退，使血糖不能降下。 德国慕尼黑工业大学日前发表的研究公报称，该校与亥姆霍兹糖尿病研究中心及美国高校的研究人员找到了一种新的单分子激素，能够同时对GLP－1和GIP这两种肠促胰素的受体产生作用，可以显著改善人体的血糖水平。 目前治疗二型糖尿病主要通过补充GLP－1或类似激素，但并未对另一种肠促胰素GIP发生作用，治疗效果不显著，还会引起肠胃不适。新的单分子激素却可同时对两种肠促胰素起作用，明显促进新陈代谢的效果，并减轻肠胃的不适。 参与此项研究的亥姆霍兹糖尿病研究中心教授马蒂亚斯·乔普说，新的单分子激素能够为革新糖尿病治疗方法带来希望，并为新一代“个性化”二型糖尿病治疗法提供新思路。

[color=#444444]在公司的许多口服液产品中，大多有测可溶性固形物这一指标，记得有机化学中讲旋光度什么的，那是讲糖类的，还有一个是可溶性固形物和我们测定的总糖成正相关，想请教大家的就是，可溶性固形物仅指糖类吗？测可溶性固形物的是手持式折光仪，和悬光仪的测定原理一样吗？[/color]

[font=宋体][font=宋体]抗体亚型是指相同构成方式但空间结构各异的蛋白质结构。在机体内，这些[/font][font=宋体]“[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]”构型的免疫球蛋白（[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]）因小分子多肽结构的细微差异，可进一步细分。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、抗体亚型分类[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重链亚型[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗体以单个或多个[/font][font=宋体]“[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]”字形单体形式存在，每个单体由[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]条多肽链组成，包括两条相同的重链和两条相同的轻链。抗体的类型主要由重链决定。例如，哺乳动物的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]重链有五种，分别用希腊字母α、δ、ε、γ和μ命名，对应的抗体即[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]。其中，人和小鼠的γ重链可进一步细分为多个亚类，对应不同的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]亚型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]轻链亚型[/font][/b][font=宋体][font=宋体]哺乳动物轻链主要有[/font][font=宋体]λ型和κ型两种。出于科研需求，轻链的亚型鉴定也至关重要。[/font][/font][font=宋体] [/font][align=center][img=不同亚型抗体的结构与功能,690,398]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403081116147141_3653_5907840_3.png!w690x398.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]不同亚型抗体的结构与功能[/font][/align][b][font=宋体] [/font][font=宋体]二、鉴定原理与方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体亚型鉴定的原理基于酶联免疫吸附实验（[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]）。通过测定待测抗体与不同亚型特异性抗体的结合情况，找出能与待测抗体特异性结合的抗体，进而根据这些特异性抗体的已知性质，推断出待测抗体的亚型。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]目前，常用的鉴定方法是利用试剂盒。按照说明书操作，可以直观地读出抗体的亚型。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]三、常见问题与解决方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]在利用试剂盒进行抗体亚型鉴定时，可能会遇到一些问题，如假阳性或假阴性结果。这时，需要检查实验操作是否规范，试剂是否过期，以及样本是否受到污染等，以确保结果的准确性。[/font][font=宋体] [/font][align=center][img=常见的问题与解决办法,690,202]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403081116410260_5567_5907840_3.png!w690x202.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]抗体亚型：常见的问题与解决方法[/font][/align][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、鉴定意义[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]不同亚型的抗体在结构和功能上存在差异，这决定了它们在体内发挥的不同作用。因此，对抗体进行亚型鉴定，有助于深入研究疾病的作用机理，为抗体药物的开发提供重要依据。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构与功能[/b][/url]详情：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

在做细菌鉴定试验的时候，你比较过双糖和三糖的反应吗？有哪些啊。

[size=4] 我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析，探讨其发生原因、处理方法，以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。[/size][size=4]　　[b]一、材料与方法[/b][/size][size=4]　　1. 仪器与试剂：VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试验卡（生物梅里埃公司产品)。[/size][size=4]　　2. 试验菌株：1 025株本院1999.10.21-2000.3.3临床标本分离的菌株进行了Vitek- AMS鉴定，其中应用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。[/size][size=4]　　3.VITEK-AMS鉴定法：根据细菌表型特征，选择相应GNI+、GPI、YBC卡，严格按仪器操作说明进行，孵育后当检验地带网仪器报告结果为UIO时，挑取生长对照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)悬液于非选择性培养基上重新分离，观察是否纯培养，若是，分别按同法及以下两法鉴定。否则， 经纯培养后重新上机鉴定。[/size][size=4]　　4. 双歧检索鉴定法：根据Vitek全自动微生物分析系统技术资料提供的双歧检索表，依生化结果检索至属或种。[/size][size=4]　　5. 常规鉴定法：按照全国临床检验操作规程［1］进行，并经API系统(生物梅里埃公司) 复核鉴定至种。部分菌株鉴定依据文献［2］进行。 [/size][size=4]　　[b]二、结果[/b][/size][size=4]　　1. UIO发生机率：总共1025株细菌鉴定中，共出现UIO 44株，占4.3%。其中GPI卡334株，出现UIO16株，占4.8%；GNI+卡631株，出现UIO 24株，占3.8%；YBC卡60株，出现UIO4株，占6.7%。[/size][size=4]　　2.UIO发生原因：在44株出现UIO中，9株（0.9%)为待检细菌不纯，3株(0.3%)为浊度不合要求，2株(0.2%)为接种物孵育时间过长（超过48h），2株(0.2%)为超出试验卡鉴定范围（均为臭鼻克雷伯菌），1株(0.1%)为菌悬液不乳化（粘液型绿脓假单胞），其他如冲液时气泡过多，或其他原因不确定者27株（2.6%）。[/size][size=4]　　3.处理：（1）9株不纯菌株，经纯培养后，重新上机，均能成功鉴定。（2）35株纯培养但报告UIO菌株中，18株(1.8%)可通过双歧检索法获得结果，并与常规分类法结果完 全一致。3株（0.3%）浊度不合要求者经调整浊度后重新上机获得结果。 2株(0.2%)接种物超过48h菌株，经重新孵育后得以鉴定。1株(0.1%)为悬液不乳化菌株经|检验地带网|配制3个麦氏单位菌悬液，然后低速离心1～2 min(1 000r/min)，取上清液比浊并调节到所需的浓度后，得以鉴定。(3)余下11株(1.1%)菌中，仅2株(1株为大肠埃希菌，另1株为臭鼻克雷伯菌)不能从双歧检索表中查出结果，其他9株(主要为洋葱假单胞菌、琼氏不动杆菌、木糖产碱氧化杆菌等)，虽能从双歧检索表获得结果，但与常规鉴定法结果不相符合，或出现矛盾的生化结果，需增加试验项目，按常规鉴定方法及 API系统报告结果。[/size][size=4]　　[b]三、讨论[/b][/size][size=4]　　实验表明95.7%的临床分离菌株可通过VITEK-AMS正确鉴定，仅4.3%菌株无法一次性成功鉴定。细菌不纯是产生这部分菌株的主要原因（占近1/5），其他如待检菌菌龄、菌液浓度也是关系鉴定成败的关键。由于仪器本身原因（如对于罕见生物型、新种或不典型菌株无法鉴定）也不可忽视。正确处理这部分菌株，有重要的临床意义。实际应用自动化仪器时，必须挑取纯培养菌落，可提高鉴定率，对确认为纯培养而无法鉴定者，可通过传统分类法，参照双歧检索表能成功鉴定将近一半菌株，因此合理应用双歧检索表不失为一种较好的辅助方法。但仍有占总数1.1%菌株需用常规方法或其他方法如API系统重新鉴定。[/size][size=4]　　参考文献[/size][size=4]　　1，叶应妩，王毓三，主编. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京： 东南大学出版社,1997.5.[/size][size=4]　　2，Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647. [/size]

就我所知，用化学方法鉴定某种物质基本上都是将某些试剂加入待测样品观察是否产生预期的变化来判断某种物质是否存在，但是你怎么知道不会有其他物质存在会使得产生同种变化呢？如果事先已知样品可能含有哪些物质还好说，如果不知道，那么用所谓的一些特征反应去鉴定结果的可靠性如何？即便那些特征反应都是精挑细选有很高的灵敏度和特性，也不能完全保证不出例外吧。关键是我想知道这样的鉴定可靠性如何？或者有什么方法可以在佷大程度上确保其可靠性（仅限化学方法）。还是说这样的样品根本不能只用化学方法去精确鉴定。

就我所知，用化学方法鉴定某种物质基本上都是将某些试剂加入待测样品观察是否产生预期的变化来判断某种物质是否存在，但是你怎么知道不会有其他物质存在会使得产生同种变化呢？如果事先已知样品可能含有哪些物质还好说，如果不知道，那么用所谓的一些特征反应去鉴定结果的可靠性如何？即便那些特征反应都是精挑细选有很高的灵敏度和特性，也不能完全保证不出例外吧。关键是我想知道这样的鉴定可靠性如何？或者有什么方法可以在佷大程度上确保其可靠性（仅限化学方法）。还是说这样的样品根本不能只用化学方法去精确鉴定。