提取制备

求助中压制备液相在罗汉果甜苷提取工艺的应用 我想通过中低压制备提取罗汉果中的罗汉果甜苷,现在在找适合的方法,用填C18 还是氨基填料？据说是用氨基填料更好。两种填料在分离提取罗汉果甜苷各有什么特性？如果成行，用什么规格的填料更好？要求纯度能达到百分之98以上的纯度。

作者：张玉题目：雷公藤中有效成分的提取分离与微球制剂的制备期刊：天津大学年份：2008链接：http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&QueryID=4&CurRec=130&dbname=CMFDLAST2010&filename=2009073152.nh&urlid=&yx=

主要是做反应中间产物的分离和鉴定。把反应体系中的有机物提出来，进行核磁、红外等分析，确定最后的物质结构。需要的量不多，我想也就是几十毫克，顶多100毫克级别的吧。查了下文献，发现可以用半制备色谱，也有用自动层析仪的。由于对这些仪器都没有什么概念，也不知道如何选择。希望这个功能实现，比较方便，不用操作那么麻烦。因为我们的主要核心研究不是 这个有机物提取。我们主要做有机物的质谱分析的。自动层析仪好像也就2-3万左右，我们这有一台闲置的LC100分析性液相色谱，如果要改造成半制备性，可能也要往里投钱。所以想请有经验的能否指导一二。

[b][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#FF6600]实验原理[/color][/font][/b][font='微软雅黑','sans-serif']碱性磷酸酶（alkaline phosphatase EC 3.1.3.1简称为ALPase）广泛存于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应，产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应，磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受体上。在磷的生物和化学循环过程中，ALPase起了及其重要的作用。在生物体内ALPase与磷的代谢直接相关，参与磷与钙物质的消化、吸收、分泌以及骨骼的形成等生理生化过程。ALPase的作用最适PH在碱性区域，一般在PH9.0~10.5范围内。Mg[sup]2+[/sup]对该酶的活力有显著的激活使用。[/font][font='微软雅黑','sans-serif']为了获得好的提取效果，在酶的制备过程，特别应注意以下几点：[/font][font='微软雅黑','sans-serif']（1）[/font][font='微软雅黑','sans-serif']选取来源丰富、酶含量高的新鲜材料。提取工作应在获得材料后立刻开始，否则应在低温下保存。[/font][font='微软雅黑','sans-serif']（2）[/font][font='微软雅黑','sans-serif']用盐分级沉淀是一种应用非常广泛的方法。碳酸铵是最常用的盐。操作时，要注意保持缓冲液的合适PH值和温度。在加碳酸铵时需事先将其研细，需缓慢加入并及时搅拌溶解，尽量防止泡沫形成，以免酶蛋白在溶液中表面变性。盐析生成的沉淀，要静置20min以上，以使沉淀完全，然后方可时行离心分离。[/font][font='微软雅黑','sans-serif']（3）[/font][font='微软雅黑','sans-serif']有机溶剂沉淀法也常用于蛋白质的分离提纯。丙酮和乙醇是使用最为广泛的两种有机溶剂。应注意在低温下操作，缓慢加入，充分搅拌，避免局部浓度过高放出大量热量而使酶蛋白变性。离心收集沉淀后，最好立即将其溶于适量缓冲液中，以避免酶活力的丧失。[/font][font='微软雅黑','sans-serif']（4）[/font][font='微软雅黑','sans-serif']在酶的制备过程中，每经一步处理，都需测定酶的活力和比活力。唯有比活力提高较大，提纯步聚才有效。[/font][align=left][font='微软雅黑','sans-serif'] [/font][font='微软雅黑','sans-serif']酶活力的分析：通常是以对—硝基苯磷酸二纳（pNPP)为底物，在PH10.1的碳酸盐缓冲液（含2mmol/L Mg[sup]2+[/sup]）的测活体系中检测酶催化pNPP水解产生黄色的对硝基苯（ pNP）在405 nm处有最大的吸收峰，可以根据OD[sub]4[/sub][sub]〇5[/sub]值的增加计算酶活力的大小。酶活力定义为在37℃下，以5mmol/L pNPP为底物，在pH 10.1的碳酸盐缓冲液含2 mmol/L Mg[sup]2+[/sup]的测活体系中每分钟催化产生1 mol/L pNP的酶量定为1个酶活力单位。酶的比活力定义为每mg蛋白所具有的酶活力单位数。 [/font][/align]

最经在做细胞内辅酶Ⅰ提取研究，想通过制备型液相来纯化经高压均质机破壁和粗提取的辅酶。但是不知道该制备型液相固定相怎么选择，选择哪种填料好

最经在做细胞内辅酶提取研究，想通过制备型液相来纯化经破壁和粗提取的辅酶。但是不知道该制备型液相固定相怎么选择，选择哪种填料好

制备薄层色谱使用薄层色谱板进行制备分离，从混合物中提取所需要的单体。与常用的柱色谱相比，具有简单、快速与节省溶剂与人力的优点，是实验室比较常用的制备方法之一，比较常用的是制备薄层板色谱、制备离心薄层色谱、制备干柱薄层色谱三类别。

有没有人用HPLC测定硫甙组分的，样品制备时所用的聚丙烯离子交换柱规格具体是多少呢？标准是这样写的：聚丙烯离子交换微柱：底部筛板为100目。离子交换微柱的制备：每一个试样提取液准备一支聚丙烯离子交换微柱，垂直置于试管架上。取0.5 mL充分混匀的葡聚糖凝胶悬浮液至每一离子交换微柱中，注意不要使悬浮液粘附在柱壁。静置待液体排干后，取2 mL 6 mol/L甲酸咪唑溶液冲洗树脂，排干后，再用1 mL水冲洗树脂两次，每次均让水排干。

黄芪含量计算小弟我高数没学好，这个含量要用外表两点法，没法做。麻烦各位帮忙计算哈，要详细的步骤。谢谢。下面是相信检测方法：试品溶液的制备：取本品中粉约4g，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用氨试液充争洗涤2次，每次40ml，充弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101大孔吸附树脂柱，（内径1.5cm，长12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至5ml的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。⑷测定法：精密吸取对照品溶液10μl、 20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。 [size=3][font=宋体]进样量[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]峰面积[/font][/size][size=3][font=Arial]10μl [/font][font=宋体]对照品[/font][font=Arial]-1 1050986[/font][/size][size=3][font=Arial]20 [/font][font=宋体]对照品[/font][font=Arial]-2 2834217[/font][/size][size=3][font=Arial]20 [/font][font=宋体]样品[/font][font=Arial]-1 2785151[/font][/size][size=3][font=Arial]20 [/font][font=宋体]样品[/font][font=Arial]-2 2823901[/font][/size]对照品浓度为 0.512mg/ml 样品-1 的称样量为 4.0027g 样品-2称样量为 4.0123g

[b]膳食纤维[/b]根据其原料的不同及产品性质不同，分离制备的方法大致有6类，即[b][color=#0000ff]粗分离法、化学分离法、酶试剂法、化学与酶试剂法、膜分离法及发酵法[/color][/b]等。但是哪种方法是比较常用的方法呢？经分析，[b]化学分离法[/b]提取膳食纤维最为快捷、最为迅速。所以被称之为最常用的[b]制备膳食纤维[/b]的方法。[b]化学分离法的定义：化学分离法[/b][color=#3366ff]是将粗产品或原料干燥、磨碎后，采用化学试剂提取膳食纤维的方法，以碱的应用最为广泛，除此之外还有酸法、酸碱法、絮凝法等[/color]。[b]酸碱法提取制备膳食纤维[/b]就是分别用一定浓度的酸溶液和碱溶液处理样品，这样得出的膳食纤维纯度较高。

如题，本人想对一组降解产物进行各个提取制备请问北京哪个单位或高校有制备型的高效液相呢？联系方式？感谢！

标准上写的是不加样品，按照上一步骤碱提取。我同事理解的是直接用碱提取液按照提取步骤做完了之后进样就是空白。我感觉应该使用金刚砂按照做样步骤制备一下才是空白。

各位大侠 ：有谁知道国产厂家有生产中压制备色谱啊在网上查到了一些经销商，都是代理瑞士或是美国得机器，打电话问价格都好贵啊，都要20几万，国产的有嘛，大概多少钱，有没有人知道，谢了 我们是做天然提取物的 现在在关注这个

最经在做细胞内辅酶提取研究，想通过制备型液相来纯化经破壁和粗提取的辅酶。但是不知道该制备型液相固定相怎么选择，选择哪种填料好

1. 概 述1.1 生物样品处理制备的主要特点： ⑴生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至几千种化合物。 ⑵许多生物样品在生物材料中的含量极微，分离纯化的步骤繁多，流程长。 ⑶许多生物样品一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物样品提取制备最困难之处。 ⑷生物样品的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，很难准确估计和判断1.2 生物样品的处理制备通常可按以下步骤进行： ①确定要制备的生物样品的目的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。 ②建立相应的可靠的分析测定方法，这是进行生物样品制备的关键。 ③通过文献调研和预备性实验，掌握生物样品及产物的物理化学性质。 ④生物材料的破碎和预处理。 ⑤分离纯化方案的选择和探索，这是最困难的过程。 ⑥产物的浓缩，干燥和保存。

各位老师，我以前接触分析技术不多，现在制备肝微粒体，想进一步纯化获得高浓度的P450酶系，文献有用层析柱的，想请问如果用制备型HPLC提取定条件该注意些什么？不知道问得恰当不恰当。。[em09511]

[b][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]总[/font][font=宋体]多糖的制备、鉴别与纯度检查[/font][font=宋体]及提取[/font][font=宋体]条件优化[/font][/b][font=宋体]1.[/font][font=宋体]样品预处理[/font][font=宋体]干燥样品经粉碎机粉碎，过[/font]40[font=宋体]目筛，置密封袋中，干燥、避光条件下密封保存[/font][b][font=宋体]2.[/font][font=宋体]可见分光光度法测定条件[/font][/b][font=宋体]精密吸取葡萄糖对照品溶液和供试品溶液适量，置[/font][font=宋体]10 mL[/font][font=宋体]具塞磨口试管中，[/font][font=宋体]加入[/font]5[font=宋体] [/font]%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体]，充分混匀后，加入浓硫酸[/font]6 mL[font=宋体]，[/font]40[font=宋体] [/font][font=宋体]℃反应[/font]20 min[font=宋体]，放置室温，在[/font]490 nm[font=宋体]处测得吸光度。[/font][b][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]总[/font][font=宋体]多糖的制备、鉴别与纯度检查[/font][font=宋体]与提取[/font][font=宋体]3.[/font][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]纯化[/font][font=宋体]多糖的制备[/font][/b][font=宋体]取藤三七药材干粉约[/font]10 g[font=宋体]，精密称定，[/font][font=宋体]加入石油醚[/font](60[font=宋体]～[/font]90 [font=宋体]℃[/font])100 mL[font=宋体]回流提取两次，每次[/font]2 h[font=宋体]，弃去[/font][font=宋体]提取液[/font][font=宋体]（[/font][font=宋体]除去[/font][font=宋体]脂溶性成分[/font][font=宋体]）[/font][font=宋体]，药渣烘干，用[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]乙醇[/font]100 mL[font=宋体]浸泡过夜，回流提取[/font]2[font=宋体]次，每次[/font]2 h[font=宋体]。弃去提取液[/font]([font=宋体]除去单糖、低聚糖[/font][font=宋体]和苷类等小分子物质[/font])[font=宋体]，药渣烘干，[/font][font=宋体]加蒸馏水[/font]100 mL[font=宋体]回流，提取三次，每次[/font]2 h[font=宋体]。合并提取液，减压浓缩至[/font]40 mL[font=宋体]，[/font][font=宋体]即得粗多糖的水溶液。[/font][font=宋体]在粗多糖水溶液中加入[/font]Sevage[font=宋体]试剂[/font][font=宋体]（[/font][font=宋体]氯仿：正丁醇[/font][font=宋体]=[/font]4[font=宋体]：[/font]l[font=宋体]）[/font]10 mL[font=宋体]，剧烈震荡[/font]20 min[font=宋体]，使其充分混合，在[/font]4000 rmin[sup] -1[/sup][font=宋体]转速下离心[/font]5 min[font=宋体]，弃去中间变性蛋白层和下层有机层，水相继续重复上述操作[/font]8[font=宋体]次，直至水相与有机相中间无变性蛋白出现为止，[/font][font=宋体]即得脱蛋白多糖水溶液。[/font][font=宋体]向脱蛋白多糖水溶液中加入[/font][font=宋体]无水乙醇[/font]80 mL[font=宋体]，使溶液含醇量达[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]以上，充分[/font][font=宋体]搅拌，[/font][font=宋体]静置过夜。在[/font]4000 r min[sup] -1[/sup][font=宋体]转速下离心[/font]5 min[font=宋体]，弃去上清液，所得沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各洗涤[/font]3[font=宋体]次，弃去有机溶剂[/font][sup][2[/sup][sup][font=宋体]2[/font][/sup][sup]-2[/sup][sup][font=宋体]5[/font][/sup][sup]][/sup][font=宋体]后挥干沉淀，并用真空干燥机抽真空，[/font]60[font=宋体] [/font][font=宋体]℃干燥[/font]30 min[font=宋体]，得到灰白色颗粒状多糖样品。[/font][b][font=宋体]4.[/font][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]总[/font][font=宋体]多糖的鉴别与纯度检查[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])[/font]Molish[font=宋体]试验[/font][/b](1)[font=宋体]供试品溶液：取藤三七多糖[/font]10 mg[font=宋体]，加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水，加热溶解，[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]至试管中，[/font][font=宋体]再加入[/font]α-[font=宋体]萘酚[/font][font=宋体]乙醇溶液[/font][font=宋体]；[/font](2)[font=宋体]阳性对照品溶液：取淀粉[/font]10 mg[font=宋体]，加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水，加热溶解，[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]至试管中，[/font][font=宋体]再加入[/font]α-[font=宋体]萘酚[/font][font=宋体]乙醇溶液[/font][font=宋体]；[/font](3)[font=宋体]阴性对照品溶液：[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]蒸馏水于试管中[/font][font=宋体]，加入[/font]α-[font=宋体]萘酚[/font][font=宋体]乙醇溶液[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]分别摇匀上述溶液，将试管倾斜，沿试管壁慢慢加入浓硫酸，竖直试管观察。结果，供试品溶液与阳性对照品溶液试管中界面呈[/font][font=宋体]紫堇[/font][font=宋体]色环，阴性对照品溶液试管界面无变化，表明供试品为糖类。[/font][b][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font]Feling[font=宋体]试验[/font][/b]Feling[font=宋体]试剂的配[/font][font=宋体]制[/font][font=宋体]：[/font][font=宋体]甲液[/font][font=宋体]：[/font][font=宋体]取[/font]34.6 g[font=宋体]酒石酸钾钠[/font]KNaC[sub]4[/sub]H[sub]4[/sub]O[sub]6[/sub]4H[sub]2[/sub]O[font=宋体]，[/font]14.2 g NaOH[font=宋体]固体溶于[/font]80 mL[font=宋体]水中，加水稀释到[/font]100[font=宋体] [/font]mL[font=宋体]；[/font][font=宋体]乙液[/font][font=宋体]：称取[/font]7.28 g CuSO[sub]4[/sub]5H[sub]2[/sub]O[font=宋体]溶于[/font]40 mL[font=宋体]水中，加水稀释到[/font]100 mL[font=宋体]待用。使用时取等体积两溶液混合即可。[/font](1)[font=宋体]供试品溶液：[/font] [font=宋体]取上述[/font][font=宋体]多糖溶液[/font]1 mL[font=宋体]于试管中；[/font](2)[font=宋体]阳性对照品溶液：取葡萄糖[/font]10 mg[font=宋体]，加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水，溶解，摇匀，[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]于试管中；[/font](3)[font=宋体]阴性对照品溶液：[/font] [font=宋体]量取蒸馏水[/font]1 mL[font=宋体]于试管中。[/font][font=宋体]分别加入[/font]Feling[font=宋体]试剂[/font]2 mL[font=宋体]，在沸水中加热[/font]10 min[font=宋体]。结果，供试品溶液与阴性对照品溶液为蓝色，阳性对照品溶液变为砖红色。单糖多为还原性糖，可与[/font]Feling [font=宋体]试剂反应产生砖红色，而多糖为非还原性糖，不与[/font]Feling[font=宋体]试剂反应，结果表明供试品中不含有单糖。[/font][b][font=宋体]([/font]3[font=宋体])[/font][font=宋体]紫外可见光谱分析[/font] [/b][font=宋体]将上述供试品溶液在[/font]190 ~ 500 nm[font=宋体]区间进行光谱扫描，结果在[/font]260 ~ 280 nm[font=宋体]处无明显吸收峰，而未经脱蛋白处理的藤三七粗多糖水溶液，在[/font]260 ~ 280 nm[font=宋体]处有明显吸收峰，表明多糖样品中不含有蛋白质、多肽和核酸类物质。[/font][font=宋体]通过以上三种试验证明所制藤三七多糖为不含单糖、蛋白质、多[/font][font=宋体]肽[/font][font=宋体]、核酸等物质的纯化多糖。[/font][b][font=宋体]5.[/font] [font=宋体]苯酚[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]硫酸法测定总[/font][font=宋体]多[/font][font=宋体]糖含量的条件优化[/font][font=宋体]检测波长的选择[/font][/b][font=宋体]吸取一定浓度的葡萄糖对照品溶液[/font] 0. 2 mL[font=宋体]，用蒸馏水补充至[/font]1 mL[font=宋体]，加入[/font]5[font=宋体] [/font]%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体]，充分混匀后，加入浓硫酸[/font]6 mL[font=宋体]，振摇[/font]5 min[font=宋体]，至[/font]40[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水中反应[/font] 20 min[font=宋体]，放置室温，同法制得空白溶液，紫外可见分光光度计在[/font]200~800 nm[font=宋体]范围内扫描，结果表明最大吸收波长为[/font]490 nm[font=宋体]。[/font][b][font=宋体]提取方法的优化[/font][/b][font=宋体]采用正交设计，选用提取溶剂用量[/font](A)[font=宋体]、提取时间[/font](B)[font=宋体]及提取温度[/font](C)3[font=宋体]个因素，每个因素选[/font]3[font=宋体]个水平，用[/font]L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])[font=宋体]正交表进行实验设计的优选，见表[/font]1[font=宋体]。[/font][font=宋体]以藤三七总多糖的含量为检测指标，[/font] [font=宋体]处理组合见表[/font]2[font=宋体] ~[/font]3[font=宋体]。[/font][align=center][font=宋体]表[/font].1 The factor-level table[/align][table][tr][td]levels[/td][td][align=center]A[/align][align=center]Quant. of solvent [/align][align=center](mL)[/align][/td][td][align=center]B[/align][align=center]Time[/align][align=center](h)[/align][/td][td][align=center]C[/align][align=center]Temp[/align][align=center]([font=宋体]℃[/font])[/align][/td][/tr][tr][td]1[/td][td][align=center]10[/align][/td][td]2[/td][td]70[/td][/tr][tr][td]2[/td][td][align=center]20[/align][/td][td]3[/td][td]80[/td][/tr][tr][td]3[/td][td][align=center]30[/align][/td][td]4[/td][td]90[/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]取烘干并粉碎的藤三七药材[/font]9[font=宋体]份，每份[/font]1 g[font=宋体]，精密称定，用[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]乙醇浸泡过夜，再用[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]乙醇回流[/font]2 h[font=宋体]，残渣挥去溶剂，根据正交实验设计，分别加入不同体积水、按不同提取时间、不同提取温度提取。提取液过滤，待冷却后转移于[/font]250 m[font=宋体]L[/font][font=宋体]容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度。精密吸取[/font]l mL[font=宋体]于试管中，再分别加入[/font]5[font=宋体] [/font]%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体]，充分混匀后，加入浓硫酸[/font] 6 mL[font=宋体]，[/font]40[font=宋体] [/font][font=宋体]℃[/font][font=宋体]反应[/font]20 min[font=宋体]，放至室温，[/font]490 nm[font=宋体]处测得吸光度。[/font][align=center][font=宋体]表[/font]2 Results of L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup]) orthogonal design[/align][table][tr][td][align=center] [/align][align=center]Test NO.[/align][/td][td][align=center]A[/align][align=center]Volume[/align][/td][td][align=center]B[/align][align=center]Time[/align][/td][td][align=center]C[/align][align=center]Temp[/align][/td][td][align=center] [/align][align=center]Content (%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td]10[/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]70[/align][/td][td][align=center]1.66[font=宋体]2[/font][/align][/td][/tr][tr][td]2[/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]80[/align][/td][td][align=center]2.53[font=宋体]1[/font][/align][/td][/tr][tr][td]3[/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]3.4[font=宋体]18[/font][/align][/td][/tr][tr][td]4[/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center][font=宋体]8[/font]0[/align][/td][td][align=center]2.31[font=宋体]4[/font][/align][/td][/tr][tr][td]5[/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center][font=宋体]9[/font]0[/align][/td][td][align=center]3.19[font=宋体]4[/font][/align][/td][/tr][tr][td]6[/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center][font=宋体]7[/font]0[/align][/td][td][align=center]1.80[font=宋体]3[/font][/align][/td][/tr][tr][td]7[/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center][font=宋体]9[/font]0[/align][/td][td][align=center]4.02[font=宋体]2[/font][/align][/td][/tr][tr][td]8[/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center][font=宋体]7[/font]0[/align][/td][td][align=center]1.90[font=宋体]4[/font][/align][/td][/tr][tr][td]9[/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center][font=宋体]8[/font]0[/align][/td][td][align=center]2.76[font=宋体]0[/font][/align][/td][/tr][tr][td]K[sub]1[/sub][/td][td][align=center]2.537[/align][/td][td][align=center]2.663[/align][/td][td][align=center]1.787[/align][/td][td][/td][/tr][tr][td]K[sub]2[/sub][/td][td][align=center]2.433[/align][/td][td][align=center]2.54[/align][/td][td][align=center]2.533[/align][/td][td][/td][/tr][tr][td]K[sub]3[/sub][/td][td][align=center]2.893[/align][/td][td][align=center]2.66[/align][/td][td][align=center]3.543[/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center] R[/align][/td][td][align=center]0.64[/align][/td][td][align=center]0.123[/align][/td][td][align=center]1.756[/align][/td][td][/td][/tr][/table][font=宋体]表[/font]3 Results of analysis of varianee[table][tr][td][align=center]Source of[/align][align=center]variation[/align][/td][td][align=center]Sum of[/align][align=center]squares[/align][/td][td]Degrees of freedom[/td][td][align=center]F[/align][/td][td][align=center]P[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]A[/align][/td][td][align=center]0.379[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]2.958[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]B[/align][/td][td][align=center]0.03[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]0.254[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]C[/align][/td][td][align=center]4.663[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]39.517[/align][/td][td][align=center]AB[font=宋体]，最佳水平组合为[/font]A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub] C[sub]3[/sub][font=宋体]，即加入[/font]30[font=宋体]倍体积水于[/font]90[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水浴中提取[/font]2 h[font=宋体]。[/font][font=宋体]方差分析[/font] [font=宋体]由表[/font]2-3[font=宋体]方差分析结果可见：水浴温度对测定结果有显著性影响。[/font][font=宋体]综合分析[/font] [font=宋体]综合考虑各因素对[/font]3[font=宋体]个考察指标的影响，确定藤三七总多糖的最佳提取工艺条件为[/font]A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]3[/sub][font=宋体]，即加入[/font]30[font=宋体]倍量体积水于[/font]90[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水浴中提取[/font]2 h[font=宋体]。[/font][font=宋体]多糖提取次数的考察[/font] [font=宋体]称取藤三七药材粉末约[/font]1 g[font=宋体]，精密称定，按正交试验优选的最佳工艺条件分别提取[/font]3[font=宋体]次，实验结果见表[/font]4[font=宋体]。[/font][align=center][font=宋体]表[/font]-4 Results with the different times[/align][table][tr][td][align=center]time[/align][/td][td][align=center][font=宋体]extraction rate [/font](%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center][font=宋体]77.63[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center][font=宋体]22.37[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center][font=宋体]1.225[/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体]由表可以看出，第[/font]1[font=宋体]次和第[/font]2[font=宋体]次[/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]多糖[/font][font=宋体]提取[/font][font=宋体]率较多，而第[/font]3[font=宋体]次多糖[/font][font=宋体]的提取[/font][font=宋体]率较少，多糖[/font][font=宋体]提取率[/font][font=宋体]不足[/font][font=宋体]1.3 [/font]%[font=宋体]，所以提取次数可选为[/font]2[font=宋体]次。[/font][font=宋体]综上所述，本实验得到藤三七多糖最佳提取工艺条件为[/font]30[font=宋体]倍量体积的水，于[/font]90[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水浴中提取[/font]2[font=宋体]次，每次[/font]2 h[font=宋体]。[/font]

原来做过这个帖子：[color=#00008B]【色谱新品早知道】JAI最新推出全自动循环制备液相色谱[/color]，链接如下：http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090902/2093367/今天和研发的同事偶然讨论起这个事情，他说我们的研发部门也有一台，不过，没几个人会用，且价格很贵。于是，我们就讨论了一些关于“制备色谱”的知识，我总结了一下，大体如下：[B]1.制备色谱的目的是为了提取不易得到的成分，如杂质等；2.主要分析的是样品中含量很少的成分，因此进样浓度比较高，且流速也比一般高；3.浓度高、流速大、分析成分特殊也就需要特殊的制备色谱柱，一般是耐高压、特殊填料；[/B]我们也就讨论到这些问题，有时间我再去现场看看仪器。[color=#DC143C]你是怎么理解制备色谱的呢？你的使用过程是怎样的呢？[/color]欢迎您的发言！[em09505]

本人在做植物提取物产品的分离纯化，采用硅胶柱（ID9.5cm*80cm）常压下整个周期要两周以上，慢慢长路不经济供货周期也太长，所以准备采用大点的（直径5cm以上）中压制备。我有BUCHI的B688，最大的一根柱子3.5*45cm,小了点，再大的呢需要很多银子。所以想用国内自己做的中压设备，如果只能提供柱子也可以，泵和检测器我可以自己配。构想是：有机玻璃柱（耐压10Bar）+蠕动泵or双柱塞泵or隔膜泵（100ml/min）检测器可以采用分流方式连接到Waters2487上，其实不要也可以的；馏分收集器要不要都可以，反正都得要TLC检测。希望可以大家交流下。

[color=#444444]我查了下文献，他们用液相提取呋喃唑酮，流动相都用乙腈磷酸水。但我是要制备的，不知道怎么除去其中的磷酸。求一个好的流动相或者有啥简单地方法除去磷酸。[/color]

我们二氯甲烷提取水中有机氯农药，结果杂质很多，需要净化，请教下用弗罗里硅土柱净化的方法：1.据说弗罗里硅土使用前须经高温处理，请问温度和时间是多少？2.制备柱子需要质量多少克？3.具体的活化步骤（包括溶剂类型，使用量，活化时间等）？谢谢！

我最近在做挥发油的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]分析，由于我提取的挥发油的量很少，感觉制备试品有点问题，在挥发油提取器上读数大概只有0.1ML，我要用乙醚来溶解的，我想问下怎么样的操作步骤，可以得到纯的挥发油？ 大家帮帮忙咯！谢谢!

[b][size=10.5pt][font=微软雅黑]1、[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]粗分离法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 粗分离法中的代表方法是悬浮法和气流分级法。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]2、化学分离法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 化学分离法是指将粗产品或原料干燥、磨碎后，采用化学试剂提取制备膳食纤维的方法。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]3、酶试剂法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 酶试剂法主要利用多种生物酶制剂处理原料，从而获得膳食纤维。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]4、[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]化学试剂和酶相结合的方法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 采用化学分离法和膜分离法制备的膳食纤维都还含有少量的蛋白质和淀粉，要制备纯净的膳食纤维必须结合酶处理。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]5、膜分离法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 膜分离法是利用高科技的膜分离技术，将分子量大小不同的膳食纤维提取。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]6、发酵法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑]发酵法提取是采用如保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌对原料进行发酵，然后水洗至中性，干燥即可得到膳食纤维。目前该方法主要是在果皮原料抽取膳食纤维时使用。[/font][/size]

各位老师，我们单位有一台莱伯泰科的GPC，又紫外检测器，自动浓缩装置，还有自动进样装置，GPC柱子规格不清楚，原本用作农药残留净化用，定量环2ml，工程师说还可以加到8ml。现在我想利用它做一个植物功能成分的制备，在这个植物初提取物中，这类功能物质分子量在190-250之间。工程师说他们没有做过这方面的工作，请问各位老师，我该选择什么样的GPC柱子呢，还有什么工作要做？谢谢！

制备型高效液相色谱系统的应用领域制备型高效液相色谱系统主要应用在植化、合成、制药、生物及生化等领域的产品的提取及纯化工作中。在不同的工作领域中，组份的提取和纯化量的差异是很大的。在生物技术领域中，酶的分离是微克级；在植化和合成化学领域中，为了鉴别未知成份并进行结构测定，需要得到一至若干毫克的纯品；在药品和医药学测试中，需要克级的标准品和对照品；在当今的工业级提纯中，制药成份往往需要千克级的提取。制备型高效液相的应用领域可以归纳在下表中。 成份量:所在领域 微克: 生物技术领域的酶的分离、生物学和生化学测试 毫克: 结构描述和特征鉴定，包括：生产中的副产品、生物矩阵的新陈代谢产物、天然产物 克级: 对照品（分析标准）毒物学分析所需组份：高纯品中的主要成份、副产品的分离提取 千克级:工业规模生产，活性成份，药物 制备方法的发展和扩大规模的计算　　在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级，甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:100000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积（小于1:100）。 在这种条件下，会达到很好的分离效果，峰形尖锐并且很对称。而在制备液相中，最大的区别就是超量进样。其结果，超量进样的方法和分析方法的放大将在下章内介绍。 吸附变化线　　分析液相的目的是给一种组份定性、定量。重要的色谱参数有溶解度、峰宽和峰的对称性。如果进样量越来越多，峰高和峰面积会增加，但峰的对称性和容量因子保持不变。如下图。 　 在分析液相中，最佳的峰形应是一条高斯曲线。峰的标准背离 бV 描述了其对称性和与高斯曲线的相似性。容量因子是与一种不保留物质的保留时间t0相关的保留时间。　 如果将超过一定量的样品注射进色谱柱，吸附变化线就会成非线性。这意味着峰形会变的不再对称，表现为严重的拖尾和容量因子的缩小。如下图。在制备液相中，这种效果称作浓缩超量进样。在一些情况中，根据进样量的增加，容量因子也相应变大，并造成很强的前峰。既然吸附变化线取决于组份的多少，那么液相色谱柱的载样能力就必须根据不同的制备液相实验来决定。 色谱柱载样和超量载样　　大样品量的纯化有两种可行的方法：分析系统的放大或色谱柱超量载样。分析系统的放大意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增加进样量并保持样品浓度不变。峰形仍会保持尖锐而对称。这种方法需要大型的色谱柱和大量的溶剂来分离较少的样品，因此这种方法是不经济的。 因此色谱柱超量载样，暨在相同的分析条件下超量进样通常是一种很好的选择。使用色谱柱超量载样的方法，在分析柱上甚至可以进行毫克级的分离。但更大 量的样品分离就需要整个系统的放大。色谱柱超量载样可以通过两钟方法进行— 浓缩法和体积超载法。　在浓缩法中，样品的浓度会提高，但进样体积保持不变。容量因子k’降低，同时峰形从高斯曲线变为矩形。如下图。浓缩法超量载样只有在样品组份在流动相中具有良好的溶解性的条件下才有可能采用。 　　如果样品组份的溶解性很差，浓缩法超量载样不能使用。同时更多的样品体积注射到色谱柱中，这种技术称作体积法超量载样。超过一定的进样体积，峰高不变，但峰变宽并且呈矩形。在制备液相中浓缩法超量载样比体积法超量载样更受欢迎，因为可被分离的样品量更高。既然组份的溶解性通常是一个限制因素，所以两钟超量载样技术通常被结合起来使用。两种技术的概览浓缩法超量载样 　 体积法超量载样 取决于组份在流动相中的溶解性 　 取决于进样体积 吸附变化线的制备部分 　 吸附变化线的分析部分 生产效率决定于选择性 　 生产效率决定于制备柱直径 受固定相粒度大小的影响不大 　 需要小颗粒填料 方法的放大　浓缩法超量载样和体积法超量载样都会导致组份溶解性的降低。既然组份的分离需要一定的溶解性，那么在放大分析方法的时候，优化溶解性、特别是选择性就是一项很重要的工作。 　　因为选择性和超量载样潜力是相互依靠的，选择性的提高会提高一次运行中所分离的样品量，因此从分析方法到制备方法的放大和方法的优化需要三个步骤。 1. 优化分析方法的选择性。2. 在分析柱上进行超量载样。3. 放大到制备柱 制备型高效液相色谱的目的　　判断制备型高效液相色谱使用的结果有三个重要参数：产品的纯度、产量和生产效率。三个参数之间是相对独立的，因此很难同时使用这三个参数来优化制备型高效液相色谱方法。见图形6。 色谱图1显示在制备型高效液相色谱的使用中有很高的生产效率，但是两种组份的分离效果却是很差的。这种方法很可能得到两种组份的高纯品，但是产量和收率却是很低的。　 在色谱图2中峰有很好的分离，因此这种方法可以得到两种组份的高纯品和高产量，但是生产效率却很低。　 色谱图3中的情况是三个参数综合后得到的最优化的结果。峰在基线上被完全分开，这使得产品纯度、产量和生产效率都达到最高。　 在实际应用中，每个参数的重要性都是不同的。如为了进行活性或药物测试，某种组份必须被完全单独提取，那么组份的纯度是最重要的参数，产量和生产效率是其次的。如果某种合成中间体必须被纯化，并且需要有足够的量为下一步合成作准备，那么纯度就不是最重要的了。而生产效率在这种情况下就是个首先需要解决的问题，因为其直接关系到完成整个合成工作的进程和速度。同时产量也是很重要的，因为高价值组份的损失需要控制在最少的范围内。

制备柱与半制备柱的区别？对于半制备柱进样量和流速，压力，上样量等有什么要求？半制备柱使用有什么注意事项？

有无制备高手，请教制备知识，尤其是制备柱方面

关于饼干碱度的问题1.关于稀释倍数K的问题。按GB/T 12456-2008要求制备试样。取饼干200g，加入等量的水。混合过滤。取试液50ml置于三角瓶中，以下步骤按GB/T20980-2007(6.3)进行检测。请问，此时的稀释倍数K为几？如果取饼干200g，加入1000ml水中，混合过滤。取试液50ml置于三角瓶中，以下步骤按GB/T20980-2007(6.3)进行检测，此时的稀释倍数K为几？2.GB/T20980-2007中碱度的计算公式中的m（样品的质量，单位为g）。这里的m是指样品的质量（用来提取的样品）还是指试样的质量（取50ml试样）。3.谢谢各位大侠的指点。谢谢了。