随着社会的发展,我国的传统医学正发挥着越来越重要的作用。由于中药成分组成十分复杂且很多有效成分含量很低,甚至为微量或痕量,因此,有效成分的提取与分离纯化是中药研发中的关键因素。为进一步改进中药提取与分离工艺、提高提取物收率、提升目的产物质量,中国高科技产业化研究会与中药工业网于2012年6月29日-7月1日在上海隆重召开“全国中药提取分离新技术、新设备交流研讨会”。 来自各中药生产企业、中医药大学、科研院所、中医医院、中西医结合医院,中医药研发机构等近100人参与了此次盛会。第三军医大学吴力克教授;浙江中医药大学朱承伟教授;江西中医学院郑琴教授;北京理工大学赵之平教授,陶氏化学等专家就中药提取和分离技术进行了全方位的讲解。 迪马科技一直致力于为制药行业提供全方位的技术服务,针对此次中药提取分离新技术、新设备交流研讨会,迪马科技技术应用工程师做了题为《Dikma Prep HPLC 制备色谱填料技术及在药物提纯中的应用》的技术报告。重点介绍了迪马科技多款应用于中药提取分离的制备色谱填料:Ø Diamonsil®: 通用型反相分离填料,优异的分离性能特别适用于中药及天然产物分析;Ø Inspire™:高分辨率,快速分离填料,适合分离酸性/ 中性/ 碱性化合物;Ø Spursil™:填料表面具有极性基团,适合于高水流动相条件下的分离,增强了对亲水性、极性化合物的保留能力;Ø Bio-Bond™: 大孔径300Å填料,多肽,蛋白质,生物大分子的分离制备理想选择;Ø Luster™: 专为追求经济且实用产品的用户设计,而更重要的是它优越的性能,可以提供高分离能力和制备上样量,较长的使用寿命和优良的重现性;Ø EconoSep™: 经济型中低压填料、高性能,合理的价格。 同时分享了来自Amgen Inc、The University of Mississippi等国内外用户使用迪马科技色谱填料所做的多肽和天然产物提纯分离方面的应用实例,从另一方面也验证了迪马科技色谱填料的优异性能。 迪马科技一直重视提升色谱填料科的研发能力:在国内取得了十二五国家科技支撑计划课题--分离材料研发与集成示范(课题编号:2012BAK25B02);在国外,多款迪马自有品牌液相色谱柱(Inspire, Spursil, Endeavorsil, Leapsil, Bio-Bond)成功入选美国药典USP数据库; 迪马科技也一直致力为用户提供全方位的解决方案,更乐于与用户开展广泛的技术合作,共同攻坚克难,用迪马科技的产品为您解决技术难题。
求助中压制备液相在罗汉果甜苷提取工艺的应用 我想通过中低压制备提取罗汉果中的罗汉果甜苷,现在在找适合的方法,用填C18 还是氨基填料?据说是用氨基填料更好。两种填料在分离提取罗汉果甜苷各有什么特性?如果成行,用什么规格的填料更好?要求纯度能达到百分之98以上的纯度。
作者:张玉题目:雷公藤中有效成分的提取分离与微球制剂的制备期刊:天津大学年份:2008链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&QueryID=4&CurRec=130&dbname=CMFDLAST2010&filename=2009073152.nh&urlid=&yx=
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=79368]制备液相色谱解决方案[/url]
1. 概 述1.1 生物样品处理制备的主要特点: ⑴生物材料的组成极其复杂,常常包含有数百种乃至几千种化合物。 ⑵许多生物样品在生物材料中的含量极微,分离纯化的步骤繁多,流程长。 ⑶许多生物样品一旦离开了生物体内的环境时就极易失活,因此分离过程中如何防止其失活,就是生物样品提取制备最困难之处。 ⑷生物样品的制备几乎都是在溶液中进行的,温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响,很难准确估计和判断1.2 生物样品的处理制备通常可按以下步骤进行: ①确定要制备的生物样品的目的和要求,是进行科研、开发还是要发现新的物质。 ②建立相应的可靠的分析测定方法,这是进行生物样品制备的关键。 ③通过文献调研和预备性实验,掌握生物样品及产物的物理化学性质。 ④生物材料的破碎和预处理。 ⑤分离纯化方案的选择和探索,这是最困难的过程。 ⑥产物的浓缩,干燥和保存。
一、方案目的:制备内控标准样,并随机安插在化验员的日常化验中,用于监控化验员的化验结果是否出现偏移,以便及时做出调整,保证化验工作的工作质量。二、适用范围:内控标准样适用于原料、半成品、成品化验工作的监控。三、制备步骤:1.标准样的来源:在已知大致组分的原料、半成品、成品中选取成分尽可能均一的铸锭来制备标准样,可在外观不良品中挑选。计划制备的标准样总类及数量见下表:锌合金牌号3#4#5#L40锌锭数量633332.标准样的取样:在一块铸锭中钻取约500g—1000g的碎屑,然后剪成碎屑,搅拌均匀,作为一份标准样。3.标准样的选取原则:1)所选标准样的值范围应尽可能覆盖测量系统正常操作条件下被测量的范围。2)所选标准样的成分应尽可能接近于被测样品的成分。3)标准样品值应大致等距离分布在测量系统正常操作条件下的整个测量范围。4.标准样的定值:主要采用两种方法来定值,然后再从中选取一部分样品送外检验进行比对。综合所有数据,再系统地定值,确定标准样的各成分含量以及误差范围。1)按照质检部内现用的化验方法来比对定值:铝含量的测定使用EDTA滴定法;铅铁镉铜镁锡使用原子吸收光谱法。2)利用ICP光谱法进行化验来比对定值:使用ICP光谱法来进行定值,首先是为了进行同一实验室内不同化验方法之间的比对,进一步提高我们化验结果的准确性。其次是为了探索开发ICP光谱法,避免ICP光谱仪长期闲置所造成的资源浪费,同时也作为一种技术储备,以备不时之需。3)从中选取一部分样品送去我们客户的化验室进行化验:这样既可以减少化验的费用,又可以与客户化验室进行数据比对,考察我司与客户之间化验结果的差异。4)从中选取一部分样品送去第三方检验机构化验:以此作为标准样成分的权威认定。5.标准样的储存:标准样可以装在聚氯乙烯瓶中,需要避光、干燥、恒温存放。四、标准样的使用计划:1.日常检验过程的监控。
主要是做反应中间产物的分离和鉴定。把反应体系中的有机物提出来,进行核磁、红外等分析,确定最后的物质结构。需要的量不多,我想也就是几十毫克,顶多100毫克级别的吧。查了下文献,发现可以用半制备色谱,也有用自动层析仪的。由于对这些仪器都没有什么概念,也不知道如何选择。希望这个功能实现,比较方便,不用操作那么麻烦。因为我们的主要核心研究不是 这个有机物提取。我们主要做有机物的质谱分析的。自动层析仪好像也就2-3万左右,我们这有一台闲置的LC100分析性液相色谱,如果要改造成半制备性,可能也要往里投钱。所以想请有经验的能否指导一二。
[b][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#FF6600]实验原理[/color][/font][/b][font='微软雅黑','sans-serif']碱性磷酸酶(alkaline phosphatase EC 3.1.3.1简称为ALPase)广泛存于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应,磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受体上。在磷的生物和化学循环过程中,ALPase起了及其重要的作用。在生物体内ALPase与磷的代谢直接相关,参与磷与钙物质的消化、吸收、分泌以及骨骼的形成等生理生化过程。ALPase的作用最适PH在碱性区域,一般在PH9.0~10.5范围内。Mg[sup]2+[/sup]对该酶的活力有显著的激活使用。[/font][font='微软雅黑','sans-serif']为了获得好的提取效果,在酶的制备过程,特别应注意以下几点:[/font][font='微软雅黑','sans-serif'](1)[/font][font='微软雅黑','sans-serif']选取来源丰富、酶含量高的新鲜材料。提取工作应在获得材料后立刻开始,否则应在低温下保存。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'](2)[/font][font='微软雅黑','sans-serif']用盐分级沉淀是一种应用非常广泛的方法。碳酸铵是最常用的盐。操作时,要注意保持缓冲液的合适PH值和温度。在加碳酸铵时需事先将其研细,需缓慢加入并及时搅拌溶解,尽量防止泡沫形成,以免酶蛋白在溶液中表面变性。盐析生成的沉淀,要静置20min以上,以使沉淀完全,然后方可时行离心分离。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'](3)[/font][font='微软雅黑','sans-serif']有机溶剂沉淀法也常用于蛋白质的分离提纯。丙酮和乙醇是使用最为广泛的两种有机溶剂。应注意在低温下操作,缓慢加入,充分搅拌,避免局部浓度过高放出大量热量而使酶蛋白变性。离心收集沉淀后,最好立即将其溶于适量缓冲液中,以避免酶活力的丧失。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'](4)[/font][font='微软雅黑','sans-serif']在酶的制备过程中,每经一步处理,都需测定酶的活力和比活力。唯有比活力提高较大,提纯步聚才有效。[/font][align=left][font='微软雅黑','sans-serif'] [/font][font='微软雅黑','sans-serif']酶活力的分析:通常是以对—硝基苯磷酸二纳(pNPP)为底物,在PH10.1的碳酸盐缓冲液(含2mmol/L Mg[sup]2+[/sup])的测活体系中检测酶催化pNPP水解产生黄色的对硝基苯( pNP)在405 nm处有最大的吸收峰,可以根据OD[sub]4[/sub][sub]〇5[/sub]值的增加计算酶活力的大小。酶活力定义为在37℃下,以5mmol/L pNPP为底物,在pH 10.1的碳酸盐缓冲液含2 mmol/L Mg[sup]2+[/sup]的测活体系中每分钟催化产生1 mol/L pNP的酶量定为1个酶活力单位。酶的比活力定义为每mg蛋白所具有的酶活力单位数。 [/font][/align]
最经在做细胞内辅酶Ⅰ提取研究,想通过制备型液相来纯化经高压均质机破壁和粗提取的辅酶。但是不知道该制备型液相固定相怎么选择,选择哪种填料好
最经在做细胞内辅酶提取研究,想通过制备型液相来纯化经破壁和粗提取的辅酶。但是不知道该制备型液相固定相怎么选择,选择哪种填料好
制备薄层色谱使用薄层色谱板进行制备分离,从混合物中提取所需要的单体。与常用的柱色谱相比,具有简单、快速与节省溶剂与人力的优点,是实验室比较常用的制备方法之一,比较常用的是制备薄层板色谱、制备离心薄层色谱、制备干柱薄层色谱三类别。
有没有人用HPLC测定硫甙组分的,样品制备时所用的聚丙烯离子交换柱规格具体是多少呢?标准是这样写的:聚丙烯离子交换微柱:底部筛板为100目。离子交换微柱的制备:每一个试样提取液准备一支聚丙烯离子交换微柱,垂直置于试管架上。取0.5 mL充分混匀的葡聚糖凝胶悬浮液至每一离子交换微柱中,注意不要使悬浮液粘附在柱壁。静置待液体排干后,取2 mL 6 mol/L甲酸咪唑溶液冲洗树脂,排干后,再用1 mL水冲洗树脂两次,每次均让水排干。
黄芪含量计算小弟我高数没学好,这个含量要用外表两点法,没法做。麻烦各位帮忙计算哈,要详细的步骤。谢谢。下面是相信检测方法:试品溶液的制备:取本品中粉约4g,置索氏提取器中,加甲醇40ml,冷浸过夜,再加甲醇适量,加热回流4小时,提取液回收溶剂并浓缩至干,残渣加水10ml,微热使溶解,用氨试液充争洗涤2次,每次40ml,充弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水5ml使溶解,放冷,通过D101大孔吸附树脂柱,(内径1.5cm,长12cm),以水50ml洗脱,弃去水液,再用40%乙醇30ml洗脱,弃去洗脱液,再用70%乙醇80ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解并转移至5ml的量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。⑷测定法:精密吸取对照品溶液10μl、 20μl,供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定,以外标两点法对数方程计算,即得。 [size=3][font=宋体]进样量[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]峰面积[/font][/size][size=3][font=Arial]10μl [/font][font=宋体]对照品[/font][font=Arial]-1 1050986[/font][/size][size=3][font=Arial]20 [/font][font=宋体]对照品[/font][font=Arial]-2 2834217[/font][/size][size=3][font=Arial]20 [/font][font=宋体]样品[/font][font=Arial]-1 2785151[/font][/size][size=3][font=Arial]20 [/font][font=宋体]样品[/font][font=Arial]-2 2823901[/font][/size]对照品浓度为 0.512mg/ml 样品-1 的称样量为 4.0027g 样品-2称样量为 4.0123g
[b]膳食纤维[/b]根据其原料的不同及产品性质不同,分离制备的方法大致有6类,即[b][color=#0000ff]粗分离法、化学分离法、酶试剂法、化学与酶试剂法、膜分离法及发酵法[/color][/b]等。但是哪种方法是比较常用的方法呢?经分析,[b]化学分离法[/b]提取膳食纤维最为快捷、最为迅速。所以被称之为最常用的[b]制备膳食纤维[/b]的方法。[b]化学分离法的定义:化学分离法[/b][color=#3366ff]是将粗产品或原料干燥、磨碎后,采用化学试剂提取膳食纤维的方法,以碱的应用最为广泛,除此之外还有酸法、酸碱法、絮凝法等[/color]。[b]酸碱法提取制备膳食纤维[/b]就是分别用一定浓度的酸溶液和碱溶液处理样品,这样得出的膳食纤维纯度较高。
如题,本人想对一组降解产物进行各个提取制备请问北京哪个单位或高校有制备型的高效液相呢?联系方式?感谢!
标准上写的是不加样品,按照上一步骤碱提取。我同事理解的是直接用碱提取液按照提取步骤做完了之后进样就是空白。我感觉应该使用金刚砂按照做样步骤制备一下才是空白。
各位大侠 :有谁知道国产厂家有生产中压制备色谱啊在网上查到了一些经销商,都是代理瑞士或是美国得机器,打电话问价格都好贵啊,都要20几万,国产的有嘛,大概多少钱,有没有人知道,谢了 我们是做天然提取物的 现在在关注这个
最经在做细胞内辅酶提取研究,想通过制备型液相来纯化经破壁和粗提取的辅酶。但是不知道该制备型液相固定相怎么选择,选择哪种填料好
中药提取方案的制定?
[b][font='Times New Roman'][font=宋体]解答:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]([/font]1[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]分析型液相色谱是用来给一种或多种组分进行定量和定性,而制备型液相色谱则是用来对产品的单体进行提取和纯化。所以将制备型高效液相色谱仪定义为大容量色谱柱和高流速是不准确的。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]与传统的纯化方法(如蒸馏、萃取)比较,制备液相是一种更有效的分离方法,因此被广泛应用在样品和产品的提取和纯化上。随着合成、植化、生化和制药等领域对高纯度组份的需求不断增加,制备型液相色谱仪应用的领域也在迅速的扩大发展。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]([/font]3[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]半制备液相色谱通常也称为分析兼半制备液相色谱,理论上分析型液相色谱都是可以进行半制备的,只不过分析兼半制备液相色谱在流速和样品通量上有所提高。一般来说,按照流量划分,半制备一般为[/font]50mL/min[font=宋体],譬如[/font][font=Times New Roman]Thermo Fisher[/font][font=宋体]的[/font][font=Times New Roman]UltiMate? 3000 [/font][font=宋体]半制备系统[/font][/font][font=宋体];[/font][font='Times New Roman']100mL/min[font=宋体]以上的大流量为制备色谱。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img=,256,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103172149596942_4027_3389662_3.jpg!w256x256.jpg[/img][/font][/font]
各位老师,我以前接触分析技术不多,现在制备肝微粒体,想进一步纯化获得高浓度的P450酶系,文献有用层析柱的,想请问如果用制备型HPLC提取定条件该注意些什么?不知道问得恰当不恰当。。[em09511]
[b][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]总[/font][font=宋体]多糖的制备、鉴别与纯度检查[/font][font=宋体]及提取[/font][font=宋体]条件优化[/font][/b][font=宋体]1.[/font][font=宋体]样品预处理[/font][font=宋体]干燥样品经粉碎机粉碎,过[/font]40[font=宋体]目筛,置密封袋中,干燥、避光条件下密封保存[/font][b][font=宋体]2.[/font][font=宋体]可见分光光度法测定条件[/font][/b][font=宋体]精密吸取葡萄糖对照品溶液和供试品溶液适量,置[/font][font=宋体]10 mL[/font][font=宋体]具塞磨口试管中,[/font][font=宋体]加入[/font]5[font=宋体] [/font]%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体],充分混匀后,加入浓硫酸[/font]6 mL[font=宋体],[/font]40[font=宋体] [/font][font=宋体]℃反应[/font]20 min[font=宋体],放置室温,在[/font]490 nm[font=宋体]处测得吸光度。[/font][b][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]总[/font][font=宋体]多糖的制备、鉴别与纯度检查[/font][font=宋体]与提取[/font][font=宋体]3.[/font][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]纯化[/font][font=宋体]多糖的制备[/font][/b][font=宋体]取藤三七药材干粉约[/font]10 g[font=宋体],精密称定,[/font][font=宋体]加入石油醚[/font](60[font=宋体]~[/font]90 [font=宋体]℃[/font])100 mL[font=宋体]回流提取两次,每次[/font]2 h[font=宋体],弃去[/font][font=宋体]提取液[/font][font=宋体]([/font][font=宋体]除去[/font][font=宋体]脂溶性成分[/font][font=宋体])[/font][font=宋体],药渣烘干,用[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]乙醇[/font]100 mL[font=宋体]浸泡过夜,回流提取[/font]2[font=宋体]次,每次[/font]2 h[font=宋体]。弃去提取液[/font]([font=宋体]除去单糖、低聚糖[/font][font=宋体]和苷类等小分子物质[/font])[font=宋体],药渣烘干,[/font][font=宋体]加蒸馏水[/font]100 mL[font=宋体]回流,提取三次,每次[/font]2 h[font=宋体]。合并提取液,减压浓缩至[/font]40 mL[font=宋体],[/font][font=宋体]即得粗多糖的水溶液。[/font][font=宋体]在粗多糖水溶液中加入[/font]Sevage[font=宋体]试剂[/font][font=宋体]([/font][font=宋体]氯仿:正丁醇[/font][font=宋体]=[/font]4[font=宋体]:[/font]l[font=宋体])[/font]10 mL[font=宋体],剧烈震荡[/font]20 min[font=宋体],使其充分混合,在[/font]4000 rmin[sup] -1[/sup][font=宋体]转速下离心[/font]5 min[font=宋体],弃去中间变性蛋白层和下层有机层,水相继续重复上述操作[/font]8[font=宋体]次,直至水相与有机相中间无变性蛋白出现为止,[/font][font=宋体]即得脱蛋白多糖水溶液。[/font][font=宋体]向脱蛋白多糖水溶液中加入[/font][font=宋体]无水乙醇[/font]80 mL[font=宋体],使溶液含醇量达[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]以上,充分[/font][font=宋体]搅拌,[/font][font=宋体]静置过夜。在[/font]4000 r min[sup] -1[/sup][font=宋体]转速下离心[/font]5 min[font=宋体],弃去上清液,所得沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各洗涤[/font]3[font=宋体]次,弃去有机溶剂[/font][sup][2[/sup][sup][font=宋体]2[/font][/sup][sup]-2[/sup][sup][font=宋体]5[/font][/sup][sup]][/sup][font=宋体]后挥干沉淀,并用真空干燥机抽真空,[/font]60[font=宋体] [/font][font=宋体]℃干燥[/font]30 min[font=宋体],得到灰白色颗粒状多糖样品。[/font][b][font=宋体]4.[/font][font=宋体]藤三七[/font][font=宋体]总[/font][font=宋体]多糖的鉴别与纯度检查[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])[/font]Molish[font=宋体]试验[/font][/b](1)[font=宋体]供试品溶液:取藤三七多糖[/font]10 mg[font=宋体],加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水,加热溶解,[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]至试管中,[/font][font=宋体]再加入[/font]α-[font=宋体]萘酚[/font][font=宋体]乙醇溶液[/font][font=宋体];[/font](2)[font=宋体]阳性对照品溶液:取淀粉[/font]10 mg[font=宋体],加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水,加热溶解,[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]至试管中,[/font][font=宋体]再加入[/font]α-[font=宋体]萘酚[/font][font=宋体]乙醇溶液[/font][font=宋体];[/font](3)[font=宋体]阴性对照品溶液:[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]蒸馏水于试管中[/font][font=宋体],加入[/font]α-[font=宋体]萘酚[/font][font=宋体]乙醇溶液[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]分别摇匀上述溶液,将试管倾斜,沿试管壁慢慢加入浓硫酸,竖直试管观察。结果,供试品溶液与阳性对照品溶液试管中界面呈[/font][font=宋体]紫堇[/font][font=宋体]色环,阴性对照品溶液试管界面无变化,表明供试品为糖类。[/font][b][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font]Feling[font=宋体]试验[/font][/b]Feling[font=宋体]试剂的配[/font][font=宋体]制[/font][font=宋体]:[/font][font=宋体]甲液[/font][font=宋体]:[/font][font=宋体]取[/font]34.6 g[font=宋体]酒石酸钾钠[/font]KNaC[sub]4[/sub]H[sub]4[/sub]O[sub]6[/sub]4H[sub]2[/sub]O[font=宋体],[/font]14.2 g NaOH[font=宋体]固体溶于[/font]80 mL[font=宋体]水中,加水稀释到[/font]100[font=宋体] [/font]mL[font=宋体];[/font][font=宋体]乙液[/font][font=宋体]:称取[/font]7.28 g CuSO[sub]4[/sub]5H[sub]2[/sub]O[font=宋体]溶于[/font]40 mL[font=宋体]水中,加水稀释到[/font]100 mL[font=宋体]待用。使用时取等体积两溶液混合即可。[/font](1)[font=宋体]供试品溶液:[/font] [font=宋体]取上述[/font][font=宋体]多糖溶液[/font]1 mL[font=宋体]于试管中;[/font](2)[font=宋体]阳性对照品溶液:取葡萄糖[/font]10 mg[font=宋体],加[/font]10 mL[font=宋体]蒸馏水,溶解,摇匀,[/font][font=宋体]量取[/font]1 mL[font=宋体]于试管中;[/font](3)[font=宋体]阴性对照品溶液:[/font] [font=宋体]量取蒸馏水[/font]1 mL[font=宋体]于试管中。[/font][font=宋体]分别加入[/font]Feling[font=宋体]试剂[/font]2 mL[font=宋体],在沸水中加热[/font]10 min[font=宋体]。结果,供试品溶液与阴性对照品溶液为蓝色,阳性对照品溶液变为砖红色。单糖多为还原性糖,可与[/font]Feling [font=宋体]试剂反应产生砖红色,而多糖为非还原性糖,不与[/font]Feling[font=宋体]试剂反应,结果表明供试品中不含有单糖。[/font][b][font=宋体]([/font]3[font=宋体])[/font][font=宋体]紫外可见光谱分析[/font] [/b][font=宋体]将上述供试品溶液在[/font]190 ~ 500 nm[font=宋体]区间进行光谱扫描,结果在[/font]260 ~ 280 nm[font=宋体]处无明显吸收峰,而未经脱蛋白处理的藤三七粗多糖水溶液,在[/font]260 ~ 280 nm[font=宋体]处有明显吸收峰,表明多糖样品中不含有蛋白质、多肽和核酸类物质。[/font][font=宋体]通过以上三种试验证明所制藤三七多糖为不含单糖、蛋白质、多[/font][font=宋体]肽[/font][font=宋体]、核酸等物质的纯化多糖。[/font][b][font=宋体]5.[/font] [font=宋体]苯酚[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]硫酸法测定总[/font][font=宋体]多[/font][font=宋体]糖含量的条件优化[/font][font=宋体]检测波长的选择[/font][/b][font=宋体]吸取一定浓度的葡萄糖对照品溶液[/font] 0. 2 mL[font=宋体],用蒸馏水补充至[/font]1 mL[font=宋体],加入[/font]5[font=宋体] [/font]%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体],充分混匀后,加入浓硫酸[/font]6 mL[font=宋体],振摇[/font]5 min[font=宋体],至[/font]40[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水中反应[/font] 20 min[font=宋体],放置室温,同法制得空白溶液,紫外可见分光光度计在[/font]200~800 nm[font=宋体]范围内扫描,结果表明最大吸收波长为[/font]490 nm[font=宋体]。[/font][b][font=宋体]提取方法的优化[/font][/b][font=宋体]采用正交设计,选用提取溶剂用量[/font](A)[font=宋体]、提取时间[/font](B)[font=宋体]及提取温度[/font](C)3[font=宋体]个因素,每个因素选[/font]3[font=宋体]个水平,用[/font]L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])[font=宋体]正交表进行实验设计的优选,见表[/font]1[font=宋体]。[/font][font=宋体]以藤三七总多糖的含量为检测指标,[/font] [font=宋体]处理组合见表[/font]2[font=宋体] ~[/font]3[font=宋体]。[/font][align=center][font=宋体]表[/font].1 The factor-level table[/align][table][tr][td]levels[/td][td][align=center]A[/align][align=center]Quant. of solvent [/align][align=center](mL)[/align][/td][td][align=center]B[/align][align=center]Time[/align][align=center](h)[/align][/td][td][align=center]C[/align][align=center]Temp[/align][align=center]([font=宋体]℃[/font])[/align][/td][/tr][tr][td]1[/td][td][align=center]10[/align][/td][td]2[/td][td]70[/td][/tr][tr][td]2[/td][td][align=center]20[/align][/td][td]3[/td][td]80[/td][/tr][tr][td]3[/td][td][align=center]30[/align][/td][td]4[/td][td]90[/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]取烘干并粉碎的藤三七药材[/font]9[font=宋体]份,每份[/font]1 g[font=宋体],精密称定,用[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]乙醇浸泡过夜,再用[/font]80[font=宋体] [/font]%[font=宋体]乙醇回流[/font]2 h[font=宋体],残渣挥去溶剂,根据正交实验设计,分别加入不同体积水、按不同提取时间、不同提取温度提取。提取液过滤,待冷却后转移于[/font]250 m[font=宋体]L[/font][font=宋体]容量瓶,用蒸馏水稀释至刻度。精密吸取[/font]l mL[font=宋体]于试管中,再分别加入[/font]5[font=宋体] [/font]%[font=宋体]苯酚溶液[/font]1 mL[font=宋体],充分混匀后,加入浓硫酸[/font] 6 mL[font=宋体],[/font]40[font=宋体] [/font][font=宋体]℃[/font][font=宋体]反应[/font]20 min[font=宋体],放至室温,[/font]490 nm[font=宋体]处测得吸光度。[/font][align=center][font=宋体]表[/font]2 Results of L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup]) orthogonal design[/align][table][tr][td][align=center] [/align][align=center]Test NO.[/align][/td][td][align=center]A[/align][align=center]Volume[/align][/td][td][align=center]B[/align][align=center]Time[/align][/td][td][align=center]C[/align][align=center]Temp[/align][/td][td][align=center] [/align][align=center]Content (%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td]10[/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]70[/align][/td][td][align=center]1.66[font=宋体]2[/font][/align][/td][/tr][tr][td]2[/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]80[/align][/td][td][align=center]2.53[font=宋体]1[/font][/align][/td][/tr][tr][td]3[/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]3.4[font=宋体]18[/font][/align][/td][/tr][tr][td]4[/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center][font=宋体]8[/font]0[/align][/td][td][align=center]2.31[font=宋体]4[/font][/align][/td][/tr][tr][td]5[/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center][font=宋体]9[/font]0[/align][/td][td][align=center]3.19[font=宋体]4[/font][/align][/td][/tr][tr][td]6[/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center][font=宋体]7[/font]0[/align][/td][td][align=center]1.80[font=宋体]3[/font][/align][/td][/tr][tr][td]7[/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center][font=宋体]9[/font]0[/align][/td][td][align=center]4.02[font=宋体]2[/font][/align][/td][/tr][tr][td]8[/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center][font=宋体]7[/font]0[/align][/td][td][align=center]1.90[font=宋体]4[/font][/align][/td][/tr][tr][td]9[/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center][font=宋体]8[/font]0[/align][/td][td][align=center]2.76[font=宋体]0[/font][/align][/td][/tr][tr][td]K[sub]1[/sub][/td][td][align=center]2.537[/align][/td][td][align=center]2.663[/align][/td][td][align=center]1.787[/align][/td][td][/td][/tr][tr][td]K[sub]2[/sub][/td][td][align=center]2.433[/align][/td][td][align=center]2.54[/align][/td][td][align=center]2.533[/align][/td][td][/td][/tr][tr][td]K[sub]3[/sub][/td][td][align=center]2.893[/align][/td][td][align=center]2.66[/align][/td][td][align=center]3.543[/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center] R[/align][/td][td][align=center]0.64[/align][/td][td][align=center]0.123[/align][/td][td][align=center]1.756[/align][/td][td][/td][/tr][/table][font=宋体]表[/font]3 Results of analysis of varianee[table][tr][td][align=center]Source of[/align][align=center]variation[/align][/td][td][align=center]Sum of[/align][align=center]squares[/align][/td][td]Degrees of freedom[/td][td][align=center]F[/align][/td][td][align=center]P[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]A[/align][/td][td][align=center]0.379[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]2.958[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]B[/align][/td][td][align=center]0.03[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]0.254[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]C[/align][/td][td][align=center]4.663[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]39.517[/align][/td][td][align=center]AB[font=宋体],最佳水平组合为[/font]A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub] C[sub]3[/sub][font=宋体],即加入[/font]30[font=宋体]倍体积水于[/font]90[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水浴中提取[/font]2 h[font=宋体]。[/font][font=宋体]方差分析[/font] [font=宋体]由表[/font]2-3[font=宋体]方差分析结果可见:水浴温度对测定结果有显著性影响。[/font][font=宋体]综合分析[/font] [font=宋体]综合考虑各因素对[/font]3[font=宋体]个考察指标的影响,确定藤三七总多糖的最佳提取工艺条件为[/font]A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]3[/sub][font=宋体],即加入[/font]30[font=宋体]倍量体积水于[/font]90[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水浴中提取[/font]2 h[font=宋体]。[/font][font=宋体]多糖提取次数的考察[/font] [font=宋体]称取藤三七药材粉末约[/font]1 g[font=宋体],精密称定,按正交试验优选的最佳工艺条件分别提取[/font]3[font=宋体]次,实验结果见表[/font]4[font=宋体]。[/font][align=center][font=宋体]表[/font]-4 Results with the different times[/align][table][tr][td][align=center]time[/align][/td][td][align=center][font=宋体]extraction rate [/font](%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center][font=宋体]77.63[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center][font=宋体]22.37[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center][font=宋体]1.225[/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体]由表可以看出,第[/font]1[font=宋体]次和第[/font]2[font=宋体]次[/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]多糖[/font][font=宋体]提取[/font][font=宋体]率较多,而第[/font]3[font=宋体]次多糖[/font][font=宋体]的提取[/font][font=宋体]率较少,多糖[/font][font=宋体]提取率[/font][font=宋体]不足[/font][font=宋体]1.3 [/font]%[font=宋体],所以提取次数可选为[/font]2[font=宋体]次。[/font][font=宋体]综上所述,本实验得到藤三七多糖最佳提取工艺条件为[/font]30[font=宋体]倍量体积的水,于[/font]90[font=宋体] [/font][font=宋体]℃水浴中提取[/font]2[font=宋体]次,每次[/font]2 h[font=宋体]。[/font]
原来做过这个帖子:[color=#00008B]【色谱新品早知道】JAI最新推出全自动循环制备液相色谱[/color],链接如下:http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090902/2093367/今天和研发的同事偶然讨论起这个事情,他说我们的研发部门也有一台,不过,没几个人会用,且价格很贵。于是,我们就讨论了一些关于“制备色谱”的知识,我总结了一下,大体如下:[B]1.制备色谱的目的是为了提取不易得到的成分,如杂质等;2.主要分析的是样品中含量很少的成分,因此进样浓度比较高,且流速也比一般高;3.浓度高、流速大、分析成分特殊也就需要特殊的制备色谱柱,一般是耐高压、特殊填料;[/B]我们也就讨论到这些问题,有时间我再去现场看看仪器。[color=#DC143C]你是怎么理解制备色谱的呢?你的使用过程是怎样的呢?[/color]欢迎您的发言![em09505]
本人在做植物提取物产品的分离纯化,采用硅胶柱(ID9.5cm*80cm)常压下整个周期要两周以上,慢慢长路不经济供货周期也太长,所以准备采用大点的(直径5cm以上)中压制备。我有BUCHI的B688,最大的一根柱子3.5*45cm,小了点,再大的呢需要很多银子。所以想用国内自己做的中压设备,如果只能提供柱子也可以,泵和检测器我可以自己配。构想是:有机玻璃柱(耐压10Bar)+蠕动泵or双柱塞泵or隔膜泵(100ml/min)检测器可以采用分流方式连接到Waters2487上,其实不要也可以的;馏分收集器要不要都可以,反正都得要TLC检测。希望可以大家交流下。
[color=#444444]我查了下文献,他们用液相提取呋喃唑酮,流动相都用乙腈磷酸水。但我是要制备的,不知道怎么除去其中的磷酸。求一个好的流动相或者有啥简单地方法除去磷酸。[/color]
小弟最近在做一个实验:混合糖液进料,糖浓:30~70 Brix,进样量:15~80ml,洗脱流速:3~15 ml/min,PH=4,温度:60 ℃。现用制备层析柱:30*1000mm,工业离子交换树脂填料,粒径300微米。 因为实验室原有的一套HPLC被做药物的长期使用,所以现在想对装置改装一下,进行实验。现在的想法:添加一台制备的示差折光检测器;计量泵一台,带有稳压装置。这样,从流出曲线,就可以对树脂的性能以及分离情况有一个直观的了解。 这个只是一个目前的设想现在,就方案是否可行,是否可以改进,是否有合适的产品型号等。非常期待大家的发言!
我们二氯甲烷提取水中有机氯农药,结果杂质很多,需要净化,请教下用弗罗里硅土柱净化的方法:1.据说弗罗里硅土使用前须经高温处理,请问温度和时间是多少?2.制备柱子需要质量多少克?3.具体的活化步骤(包括溶剂类型,使用量,活化时间等)?谢谢!
我最近在做挥发油的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]分析,由于我提取的挥发油的量很少,感觉制备试品有点问题,在挥发油提取器上读数大概只有0.1ML,我要用乙醚来溶解的,我想问下怎么样的操作步骤,可以得到纯的挥发油? 大家帮帮忙咯!谢谢!
[b][size=10.5pt][font=微软雅黑]1、[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]粗分离法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 粗分离法中的代表方法是悬浮法和气流分级法。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]2、化学分离法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 化学分离法是指将粗产品或原料干燥、磨碎后,采用化学试剂提取制备膳食纤维的方法。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]3、酶试剂法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 酶试剂法主要利用多种生物酶制剂处理原料,从而获得膳食纤维。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]4、[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]化学试剂和酶相结合的方法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 采用化学分离法和膜分离法制备的膳食纤维都还含有少量的蛋白质和淀粉,要制备纯净的膳食纤维必须结合酶处理。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]5、膜分离法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑] 膜分离法是利用高科技的膜分离技术,将分子量大小不同的膳食纤维提取。[/font][/size][b][size=10.5pt][font=微软雅黑]6、发酵法[/font][/size][/b][size=10.5pt][font=微软雅黑]发酵法提取是采用如保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌对原料进行发酵,然后水洗至中性,干燥即可得到膳食纤维。目前该方法主要是在果皮原料抽取膳食纤维时使用。[/font][/size]
各位老师,我们单位有一台莱伯泰科的GPC,又紫外检测器,自动浓缩装置,还有自动进样装置,GPC柱子规格不清楚,原本用作农药残留净化用,定量环2ml,工程师说还可以加到8ml。现在我想利用它做一个植物功能成分的制备,在这个植物初提取物中,这类功能物质分子量在190-250之间。工程师说他们没有做过这方面的工作,请问各位老师,我该选择什么样的GPC柱子呢,还有什么工作要做?谢谢!