脱脂奶粉

蛋白质是复杂的含氮有机化合物,分子量很大,大部分高达数万至数百万,分子的长链从数纳米至100nm,它们由20种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合,并具有一定的空间结构,所含的主要化学元素为C、H、O、N,在某些蛋白质中还含有P、Cu、Fe、I等元素,但氮的相对丰度基本稳定,是区别于其它有机化合物的主要标志。不同蛋白质的氨基酸构成比例及方式不同,所以各种蛋白质其含氮量也不同。一般蛋白质含氮量平均为16%,即1份氮素相当于6.25份蛋白质,此即蛋白质系数。 意大利VELP凯氏定氮仪在环保节能方面具有性能， 的蒸汽发生器和钛冷凝器，蒸馏滴定同步进行，分析速度快，冷却水用量仅0.5升/分钟，降低能耗从而节约了成本。因此该仪器被广泛应用于各类蛋白质检测的实验研究。 测定脱脂奶粉中蛋白质的含量，对掌握其营养价值和品质的变化，保障人体健康，合理配料，为乳制品深加工提供数据十分重要，此外，蛋白质分解产物对乳制品的色、香、味都有一定作用，所以测定具有深远意义。

据《法制晚报》报道，国家质检总局上周最新公布的一批入境不合格食品通报名单中，新西兰“奥兰超级金装婴儿配方奶粉”共26吨因碘含量不符合国家标准要求而被退货。　　国家质检总局每月都会公布入境不合格食品通报名单。记者统计了14个月以来的通报名单，发现共有34批次超过270吨不合格进口奶粉被销毁或退货，其中四分之三为婴幼儿奶粉。　　34批次中，超过一半来自澳大利亚和新西兰。所有不合格洋奶粉中，除了亨氏、德国涉及的两个品牌、澳大利亚的个别品牌外，其余均不出名。　　专家称，三鹿奶粉三聚氰胺事件发生后，洋奶粉大量进入中国，有的品牌找当地企业代工，专供中国市场。　　34批次问题洋奶粉　　澳大利亚新西兰最多　　据记者统计，14个月共有34批次奶粉在入境口岸被检验检疫时发现存在问题，不合格进口奶粉的总重量超过270吨。其中，界面(厦门)蛋白质技术有限公司从美国进口的一款脱脂奶粉重量达100吨，因亚硝酸盐超标被退货。　　在通报公布的不合格进口奶粉批次中，26批次为婴幼儿奶粉，占总批次的76.47%。　　除从德国进口的牛兰德较大婴儿配方奶粉未公布重量以外，其余25批次不合格进口婴幼儿奶粉的总重量为71.135吨。　　统计发现，34批次不合格奶粉分别进口自澳大利亚、新西兰、德国、美国等8个国家/地区的20家制造商。其中，来自澳大利亚和新西兰的最多，接近所有批次的六成，分别有10批次。　　广州安世乳业从澳大利亚进口的一款速溶全脂奶粉，分别因违规使用化学物质大豆磷脂、标签不合格，在今年年初被质监部门两次退货。　　据了解，已公布的不合格批次进口奶粉是在入境口岸检验检疫机构实施检验检疫时发现存在问题的，质监部门已依法做退货、销毁处理 这些不合格批次的奶粉未在国内市场销售。　　除亨氏等个别品牌外　　大多公司不知名　　北京东方艾格咨询公司乳业分析师陈连芳也告诉记者，这些洋奶粉中，除了知名的亨氏和德国涉及的两个品牌(为有近80年历史的老企业)外，澳大利亚贝拉米有机控股有限公司和达能旗下的candia也算是小有名气。其余品牌的背景并不显赫，其中大多公司并不知名。　　对于进口自澳大利亚、新西兰的不合格奶粉品牌，乳业专家王丁棉表示，贝拉米、巴兰坦在当地不是著名的品牌。　　留学澳大利亚、曾经在上海中欧国际工商学院(微博)工作的周励女士说，她几年前留学澳大利亚期间没听说过澳大利亚有那么多婴幼儿品牌奶粉 ，反倒是三鹿奶粉出事后，冒出来那么多“被著名”的奶粉。　　而在美国，食品和药物管理局(FDA)规定所有美国生产的奶粉营养价值要一样，不过制造商拥有独特的配方。其中，美赞臣、雅培、雀巢三大品牌占据美国奶粉市场的90%。　　美国界面蛋白质技术有限公司的两批奶粉被检出亚硝酸盐和菌落总数超标，记者登录其官方网站，发现该公司成立于2003年，总部位于美国芝加哥。　　“我有三个孩子，从来没有喝过界面蛋白质公司的奶粉，都没听说过。”当问到美国界面蛋白质技术有限公司的脱脂奶粉时，波士顿一名母亲Tim在接受记者采访时称，美国孩子们通常喝鲜奶，偶尔吃奶粉也是偏向于惠氏等知名品牌。　　波士顿大学的一些学生也告诉记者说，从未听说过这家公司。在美国比较畅销的奶粉还是雅培、惠氏、美赞臣等等。　　三聚氰胺事件后　　洋奶粉品牌骤增　　不少是贴牌生产，专供中国市场　　“国内婴幼儿奶粉市场太乱了，上百个品牌。” 北京东方艾格咨询公司乳业分析师陈连芳接受记者采访时说，一般情况下，一个国家也就几个品牌的婴幼儿奶粉。而在中国包括网购在内，洋品牌就有上百个。“这在国外简直不可思议。”他说。　　目前，惠氏、美赞臣、雅培、雀巢、多美滋等5大洋奶粉在国内奶粉市场份额约为50.1%。而让洋奶粉大举进入中国市场的时间就是2008年。　　资料显示，三鹿奶粉三聚氰胺事件发生后，国产奶粉的市场份额从半壁江山迅速下降到20%～30%，外资品牌的市场份额猛增至70%～80%，销售五强(多美滋、伊利、美赞臣、贝因美(21.34,0.62,2.99%)和惠氏)中，洋品牌占三席。　　据不完全统计，在“三聚氰胺”事件之前，只有约五六家国内企业在澳大利亚、新西兰等地注册奶粉品牌并进行贴牌生产，而在“三聚氰胺”事件之后，这个数字上升到20多个。“据了解，还有70多家企业正在排队申请商标注册。”乳品专家王丁棉表示，这些企业的背后多数是中国人在操控。　　“三四年前新西兰的奶粉品牌只有五六家，而目前新西兰的奶粉品牌猛增至20余家，新注册的奶粉品牌大多找当地企业代工，专供中国市场。”王丁棉告诉记者。　　部分洋奶粉入境前被检出不合格　　新西兰10批次(奶粉名称后为生产商)　　●好健康婴幼童牛初乳奶粉，　　Good Health Products Limited，标签不合格　　●羊奶粉(6个月以下婴儿配方奶粉) ，　　Dairy Goat Co-operativ(N.Z.) Ltd，标签不合格　　●Newturn Growing up配方奶粉，　　新西兰南太平洋(5.97,0.04,0.67%)国际生物和化学公司，检出阪崎肠杆菌　　●可益多幼儿/婴儿/较大婴儿配方奶粉 ，　　Carrickmore Limited，标签均不合格　　●佳顿可儿金装婴幼儿配方奶粉1/2/3阶段　　SUTTON GROUP LTD，硒、碘、乳糖含量/硒含量/硒含量不符合要求　　●奥兰超级金装婴儿配方奶粉1段、2段、3段、1段(200克)　　新西兰善腾有限公司，碘含量不符合要求　　澳大利亚10批次　　●贝拉米有机婴儿奶粉(阶段一/三)　　Bellamy’s Organic Pty LTD，硒含量不符合要求　　●速溶全脂/脱脂奶粉　　LIAN AGRI-FOODS IMPORT&CO PTY LTD，　　违规使用化学物质大豆磷脂/标签不合格　　●酸奶粉　　LIAN AGRI-FOODS IMPORT&CO PTY LTD，　　未能提供官方许可文件　　●脱脂奶粉　　BURRA FOODS PTY LTD，蛋白质不符合要求　　●幼儿配方奶粉(第三阶段)/较大婴儿配方奶粉(第二阶段)　　MILK POWER SOLUTIONS PTY LTD，标签不合格　　●婴儿配方奶粉　　MILK POWER SOLUTIONS PTY LTD，泛酸含量不符合要求　　●亨氏婴儿配方奶粉　　H.J.Heinz company Australia Ltd，维生素B2超标泛酸未达标准　　德国6批次　　●泓乐较大婴儿配方羊奶粉/泓乐婴儿配方奶粉1段/2段/3段　　(其中三段两批)　　HOLLE BABAY FOOD GMBH，5批次均为标签不合格　　●牛兰德较大婴儿配方奶粉　　TOPFER GMBH，蛋白质含量不符合要求　　法国2批次　　肯迪雅婴儿、较大婴儿配方奶粉，CANDIA，乳糖、维生素D、硒含量不符合要求/蛋白质、硒含量不符合要求　　新加坡2批次　　优萌配方奶粉一/二阶段OMNI NUTRITION PTE LTD，钠、钾超标/蛋白质含量不符合要求　　美国2批次　　脱脂奶粉，美国界面蛋白质技术有限公司，亚硝酸盐超标/菌落总数超标

日前，国家质量监督检验检疫总局进出口食品安全局公布了今年4月进境的不合格食品、化妆品信息，其中，全球最大的乳品原料供应商新西兰恒天然(前译名方塔拉)多个批次的全脂奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。　　不合格产品国家已按规定处理　　据公布的数据显示，被检出阪崎肠杆菌的三批全脂奶粉，总数达277.9吨，分别是今年1月和3月进口的，被上海检验检疫局和广东检验检疫局截获。　　对此，记者联系了恒天然商贸(上海)有限公司，该公司给记者发回传真表示，恒天然确有进口到中国的食品工业用乳品原料在4月份被相关地方的出入境检验检疫局检出阪崎肠杆菌。尊重中国政府的相关考虑和规定，已对被检测出阪崎肠杆菌的产品按规定作出了相应的处理。　　在这份4月份进境不合格食品、化妆品信息的表格里，记者看到国家已经按相关的规定对这些批次的产品进行处理。　　恒天然中国进口产品抽检频出问题　　同时，记者在查阅相关的资料发现，去年9月恒天然同样有两批全脂奶粉，共计231吨被广东检验检疫局检出含有阪崎肠杆菌。　　记者还了解到，这两年来，恒天然进口中国多个批次的产品均存在水分检测不合格、标签不合格等问题而被处理。仅某国内奶粉品牌这两年从方塔拉进口的奶粉当中，就有5个批次，超过650多吨原料被检验出了水分检测不合格、标签不合格等问题。最近一次是今年3月从方塔拉进口的119.95吨速溶脱脂奶粉被检出水分检测值与外包装标示不符。　　对此，恒天然表示，恒天然公司一向极为重视标签问题，并利用国际日恩克的方法在经认证的实验室中进行检验。食品工业用原料奶粉的水分含量问题，差距可能来自于检测的可变性。如利用同一个方法多次重复检测，其结果可能不同 而当使用不同的检测方法时，其结果也可能产生差异。　　恒天然中国战线在收缩?　　据悉，恒天然作为世界上最大的乳品原料供应商，每年乳品原料的全球销量超过200万吨，出口到120多个国家。在中国，包括国内乳业巨头蒙牛、伊利、三鹿等都是恒天然的客户。而雅培等国际品牌的基粉都是来自恒天然。达能、益力多等乳制品企业都在用恒天然的脱脂奶粉作为原料，也会用到其全脂奶粉做增稠剂。 业内人士介绍，恒天然在中国的战线已经在逐渐收缩，减少了对中国的出口配额。其对中国的年出口量以前有20～30万吨，但现在逐步缩小到原来的1/3。 而恒天然媒体事务的相关负责人也表示，今年恒天然出口中国的原料确实会大幅缩减，一方面处于原加料价格成本的飞速上涨，另一方面则是产品供应的紧张。该人士表示，这种情况在日本、东南亚等国家也同时存在。　　各方反应恒天然：中国标准与国际惯例有差别　　对于此次恒天然的进口全脂奶粉也被检出阪崎肠杆菌，恒天然商贸(上海)有限公司方面表示，按照国际惯例通常只有应用于 0～6个月婴儿、早产儿、低体重婴儿的配方食品或原料将阪崎肠杆菌作为常规检测项目。国际上对于成人的食品原料和产品检测通常不将阪崎肠杆菌列为常规检测对象。而中国的标准是全部都要检查。 恒天然方面表示，此次被检验出的产品为食品工业用的全脂奶粉，供中国的乳品企业进行再加工或生产，如乳饮料、酸奶、酸奶饮料的生产等。国际上应用于生产酸奶、UHT酸奶饮料等产品的全脂乳粉常规上一般也不检测阪崎肠杆菌。由于在热处理参数为 68℃，16秒的条件下，能确保阪崎肠杆菌以10万级数减少。所有在UHT、酸奶等产品的生产过程中，其加工工艺均高于该热处理参数，并且酸奶类产品的 PH值都很低，因此阪崎肠杆菌不会存活于高温热处理和低PH值的工艺中，从而在终产品中也不存在。　　业界：在华产品都要遵守中国标准　　对此，有业内人士就认为，任何产品要进入中国市场，都要遵守中国市场的相关标准，对于恒天然来说也是如此。 “方塔拉的产品出口到120多个国家，产品均符合国际的标准。当在进口中国的某些批次产品后，公司也在积极与新西兰方面协调，希望能比较好地与中国的相关检测标准契合。恒天然公司已经实施了一个风险管理战略以宰加工环境中尽可能减少肠杆菌的水平，进而确保可能的阪崎场杆菌的污染降到一个非常低的水平，并与国际上认可的食品要求相一致”恒天然表示。　　乳制品客户：目前并不受影响　　那么世界最大的乳品原料供应商再次在“阪崎肠杆菌“和水分检测、标签等问题上触礁。是否会影响其众多乳制品客户的信心?　　记者了解到，已经有牛初乳品牌为保证产品的质量，转换了其他的供应商。而部分乳品企业在接受记者采访时则表示，每一批进口奶粉包括恒天然在内，在进入中国之前一定要经过国家检验检疫部门的抽检，抽检过关后企业才会用。而且进入中国后，企业内部仍会进行抽检。因此部分批次产品被抽检出阪崎肠杆菌超标并不代表恒天然所有产品都是有问题的。　　背景资料:阪崎肠杆菌对婴儿具有威胁　　据了解，阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的引起广泛关注的一种致病菌。它是存在自然环境中的一种“条件致病菌”，已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌，可导致任何年龄层人群的疾病，尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大，严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。　　继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，此后成为世界关注的焦点。我国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定，对奶粉严查此菌。　　今年以来，广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪歧肠杆菌。

不仅是国产乳制品不让人放心，进口乳制品也常出问题。近日，国家质检总局公布的2013年5月、6月进境不合格食品名录显示，来自新西兰、法国、德国等多地的乳制品发现质量问题被销毁或退货。其中，三批次近百吨奶粉亚硝酸盐超标。　　国家质检总局表示，上述不合格食品均是入境口岸检验检疫机构实施检验检疫时发现的，均已依法做退货、销毁或改作他用处理，未在国内市场销售。　　不合格食品名录显示，三批次进口奶粉亚硝酸盐超标，涉及数量巨大。包括苏州市佳禾食品工业有限公司从法国进口的50吨脱脂奶粉，上海良昊置业发展有限公司从新西兰进口的28吨全脂奶粉，上海英联食品饮料有限公司从新西兰进口的14吨全脂奶粉。目前，这些奶粉已做退货处理。　　另外还有多批次乳制品因不同原因出现在问题食品名录中。从新西兰进口的田园无乳糖牛奶，微生物污染被销毁 从德国进口的妙卡力士风味发酵乳(含黄桃果粒)，违规使用化学物质姜黄素被销毁 从捷克进口的乳清粉，检出金黄色葡萄球菌被退货 从荷兰进口的初生婴儿配方奶粉1段，月桂酸和肉豆蔻酸总量不符合国家标准要求被退货 从新西兰进口的味惠思乐多种口味乳粉，标签不合格被退货。　　■相关链接　　一罐奶粉需过“五关”　　今年5月1日起，《进出口乳品检验检疫监督管理办法》正式实施，乳品进口面临更严格的准入门槛。记者从北京出入境检验检疫局获悉，新规实施后，一罐奶粉需过“五关”后，才能来到消费者手中。　　这“五关”包括：单证审核关、现场查验关、标签审查关、抽样送检关、实验检测关。北京国检局朝阳办事处副主任周玉峰说，以“一段”婴儿奶粉为例，按照新规，必检项目达到50项。“新规实施前，全项目检测报告是抽检，新规实施后，必须批批核审。”　　业内人士表示，随着我国对进口乳制品进一步强化管理，越来越多问题洋奶粉将被拒入境。

前处理方法:奶粉消解（硝酸+高氯酸） 样品:奶粉 称样量:0.5g 实验介绍: 本实验采用36位石墨消解系统( 胜谱 ) ，此系统带有PDA温度控制器可进行程序升温和温度探针可对石墨加热温度进行时时监控并做出相应调节，实验采用长度为100mL玻璃消解管，可以一次消解36个样品。 此实验方法依照国标GB/T5009硝酸+高氯酸（5+1）湿消解法进行前处理， 实验样品选用： 乳及乳制品类：奶酪（脂肪含量：22%）/ 全脂奶粉（脂肪含量：28%）/脱脂奶粉 实验耗材与试剂: 1. 胜谱 石墨消解仪 3. PDA温度控制器 5. HNO3 (67-70%)，优级纯 2. 石墨消解仪温度探针 4. 100ml玻璃消解管 6. HClO4(70-72%)，优级纯 实验步骤: 用100ml玻璃消解管称取样品0.5克，加入硝酸+高氯酸（5+1）混酸15ml，左右摇动玻璃管，使样品与消解液充分混合，盖上表面皿，置于胜谱石墨消解仪石墨孔中，将温度探针放入石墨炉测温孔中，样品消解程序： ① 15min 室温升至70° C，并在70° C 保持10min； ② 25min由70° C升至153° C，在153° C保持120min左右，至样品冒白烟； ③ 10min由153° C降至140° C，保持 30min，至消解液无色澄清。若消解液仍有淡黄色，则需140° C再延长30min。取下消解管，冷却至室温。 参考文献: 1．中华人民共和国国家标准GB/T5009.12&mdash 2003食品中铅的测定 2．中华人民共和国国家标准GB/T5009.15&mdash 2003食品中镉的测定 3．中华人民共和国国家标准GB/T5009.17&mdash 2003食品中砷的测定 联系我们: 广州 地址:广州市先烈中路100号34号楼3A02室 (510070) 电话:020-87688215 传真:020-87688280 成都 地址:成都市磨子街9号新棕北大厦905室 (610041) 电话:028-85218268 传真:028-8535307 厦门 地址:厦门市思明区夏禾路862号金山大厦14C室 (361004) 电话:0592-2669398 传真: 0592-2669399 福州 地址:福州市鼓楼区古田路139号御泉花园1座501 (350005) 电话: 0591-83358812 传真: 0592-83358817 昆明 地址:昆明市春城路64号米兰国际B座1311室 (650041) 电话:0871-3134069 传真: 0871-3182989 欢迎浏览网址:www.evertechcn.com

质检总局通报进境不合格食品名单，其中过半来自澳大利亚和新西兰　　国家质检总局上周最新公布的一批进境不合格食品通报名单中，新西兰“奥兰超级金装婴儿配方奶粉”共26吨因碘含量不符合国家标准要求而被退货。国家质检总局每月都会公布进境不合格食品通报名单，记者统计了14个月以来的通报名单，发现共有34批次超过270吨不合格进口奶粉被销毁或退货，其中四分之三为婴幼儿奶粉。　　据记者统计，14个月共有34批次奶粉在入境口岸被检验检疫时发现存在问题，不合格进口奶粉的总重量超过270吨。其中，界面(厦门)蛋白质技术有限公司从美国进口的一款脱脂奶粉重量达100吨，因亚硝酸盐超标被退货。　　在通报公布的不合格进口奶粉批次中，26批次为婴幼儿奶粉，占总批次的76.47%。　　除从德国进口的牛兰德较大婴儿配方奶粉未公布重量以外，其余25批次不合格进口婴幼儿奶粉的总重量为71.135吨。统计发现，34批次不合格奶粉分别进口自澳大利亚、新西兰、德国、美国等8个国家/地区的20家制造商。其中，来自澳大利亚和新西兰的最多，接近所有批次的六成，分别有10批次。　　据了解，已公布的不合格批次进口奶粉是在入境口岸检验检疫机构实施检验检疫时发现存在问题的，质监部门已依法做退货、销毁处理 这些不合格批次的奶粉未在国内市场销售。　　乳业专家王丁棉接受采访时表示，在34批次不合格进口奶粉中，来自澳大利亚、新西兰的不合格奶粉有20批次，占有比较大的比重，这和这两个国家的进口奶类产品在我国的市场占有率是相对应的。　　据介绍，在我国奶类产品市场上，进口自澳大利亚和新西兰的产品市场占有率达到70%以上。　　北京东方艾格咨询公司乳业分析师陈连芳告诉记者，这些洋奶粉中还有知名的亨氏奶粉的旗下品牌。　　据不完全统计 ，在“三聚氰胺”事件之前，只有约五六家国内企业在澳大利亚、新西兰等地注册奶粉品牌并进行贴牌生产，而在“ 三聚氰胺”事件之后，这个数字上升到20多个。“三四年前新西兰的奶粉品牌只有五六家，而目前新西兰的奶粉品牌猛增至20余家，新注册的奶粉品牌大多找当地企业代工，专供中国市场。”乳品专家王丁棉告诉记者。

“我们已与新西兰有关部门联系，并约见了新西兰驻华大使，要求对方提供风险评估报告。”随着新西兰奶粉被检出双氰胺残留物的消息持续发酵，昨天(1月28日)下午，国家质检总局紧急召开新闻发布会，首次就新西兰奶粉疑似涉毒事件公开表态。《每日经济新闻(微博)》记者获悉，质检总局还要求对方在风险评估报告中体现涉事奶粉的产地、批次等详细信息。　　最新消息显示，新西兰驻华大使伍开文称，他已前往中国国家质检总局进行了说明。他强调，新西兰政府向所有消费者保证：包括出口中国的乳制品在内，所有新西兰乳制品都是安全的。　　分析师认为，此次事件对国内乳业市场影响深远，未来新西兰品牌或者与新西兰奶源有关联性的乳制品将遭遇一段时间的信任危机。 国内奶粉市场的格局或将出现欧美奶源的品牌市场份额上升，而使用新西兰奶源或者在新西兰投资建厂的品牌市场份额下降。　　不排除启动各品牌双氰胺残留量检测　　去年9月，新西兰恒天然乳制品公司在抽检其生产的全脂奶粉、脱脂奶粉和酪乳粉等100个样品时，在其中10个样品中检出了微量双氰胺残留物，这一检测结果已于本月公布。　　《每日经济新闻》记者从国家质检总局获悉，国家质检总局已正式介入此事，并多次与新西兰有关部门联系，约见了新西兰驻华大使，要求新方尽快详实说明有关情况，提供风险评估报告。质检总局还要求对方在风险评估报告中体现涉事奶粉的产地、批次等详细信息。　　当《每日经济新闻》记者追问是否已经提出要求，让新西兰涉事奶粉下架，且尽快启动对各个奶粉品牌的双氰胺残留量检测时，质检总局内部人士仅回复称，“将对此事继续予以关注和调查。”　　卓创资讯乳制品行业分析师刘强认为，从监管部门的角度来说，此次事件说明，国内、国际对奶粉上游源头的监管力度仍不够严格。但换位思考，新西兰在问题曝光后，自行检测，并主动停止出口，值得国内企业借鉴。　　据《法制晚报》报道，淘宝网1月28日上午的最新统计数据显示，最近7天“新西兰奶粉进口”的成交指数环比下降50.0%，与去年同期相比下降50.0%。而“新西兰代购奶粉”26日成交指数为“2”，27日急速下滑至“0”。根据淘宝数据说明，成交指数为指数化的成交量，反映了成交趋势。　　新西兰官方称乳制品安全　　据《财经》报道，恒天然CEO史毕根思在发给媒体的一份新闻稿中向全球消费者保证：“我们拥有强大的科学依据证明恒天然产品的安全性”，“整件事情的来龙去脉是这样的，首先，我们在少数产品样本中检测出了双氰胺的微量残留，需要提请大家注意的是，我们检测到的双氰胺残留水平是极其微量的，还不到欧盟食品安全限值的百分之一。”　　昨日，伍开文说，他已前往中国国家质检总局进行了说明。新方也在努力地向中国监管部门和消费者提供更多信息，以使他们对新西兰乳制品安全做出独立的判断。　　新西兰初级产业部则公开表示，双氰胺被使用在牧草上，以降低温室气体的排放和减少硝酸盐进入水中，目前对于特定的化合物的残留并无国际标准，少量双氰胺残留并不会对食品安全造成危害。　　“根据目前在新西兰乳品所检测出的最高双氰胺残留,一个60公斤体重的人必须饮用超过130公升的液态牛奶,或是摄取60公斤的奶粉才会达到欧盟委员会所设定的每日可接受含量的限额。”新西兰官方如是表示。　　“奶粉中不可避免要掺杂一定量的化学残留物，其残留物含量标准是多少，消费者应该有知情权。但是，奶粉中双氰胺含量较低，且目前暂无双氰胺相关的毒性报告和病例，消费者不必过于恐慌。”刘强对《每日经济新闻》记者说，新西兰方的表态是有一定事实依据的，因为目前尚未有双氰胺中毒的病例。　　既然没有安全危害，为什么还要暂停施用双氰胺?伍开文说，这是因为目前对于双氰胺残留没有国际公认标准，而国际消费者又期待新西兰乳制品是零残留的。在国际标准出台之前，暂停施用双氰胺是出于谨慎，旨在消除任何不安、疑惑和不解。　　中投顾问食品行业研究员简爱华认为，新西兰方面如此表态，主要是想最大限度地减少新西兰出口损失。新西兰95%的乳制品用来出口，对国家的出口收入贡献颇大。　　或将改变国内乳品市场格局　　恒天然2001年成立以来，已成为世界上最大的乳制品出口商之一，拥有超过10500个股东，并出口95%新西兰生产的乳制品，供应世界上140多个国家和地区的消费者，其奶罐车每年收取140亿公升牛奶。　　简爱华直言，此次事件对国内乳业市场影响深远，或将改变国内的市场格局，主要表现是使用欧美奶源的品牌市场份额将上升，而使用新西兰奶源或者在新西兰投资建厂的品牌市场份额将下降。　　简爱华认为，国内进口奶粉价格可谓保持全球最高，此前关税下调并未使国内洋奶粉价格出现松动迹象，经过此次事件的冲击，未来新西兰品牌或者与新西兰奶源有关联性的乳制品将遭遇一段时间的信任危机。　　新西兰的乳制品向来以高品质享誉全球，如今新西兰奶粉事件的发生说明食品安全无法零风险，只能靠企业和政府共同努力最大程度地降低风险，如此完善的奶粉安全机制就显得尤为重要。“更关键的是，牧草作为养殖业的原料，其安全与否直接决定着下游产品的安全性，从该事件看出，牧草污染是奶粉产业安全机制遗漏的部分，未来牧草、水等养殖业的原料监测也应成为重点。”简爱华对《每日经济新闻》记者说。

中国经济网北京5月24日讯 香港食物安全中心(Centre for Food Safety)周五发表声明说，来自澳大利亚乳制品生产商宝莱(Pura)的一个批次的脱脂牛奶被检测出细菌含量超标，几乎达到规定数量的1000倍。声明中说，这个批次的脱脂牛奶已经在香港的几个连锁超市中出售。　　宝莱是一个广受香港民众欢迎的乳制品品牌，因其奶源主要来自澳大利亚信誉度一直很好。进口宝莱的商家Nowaday International Development Ltd。表示，已经停售问题产品并开始召回，但没有透露有关问题牛奶总数量等细节。　　香港的两个最大连锁超市百佳(ParknShop)和惠康(Wellcome)说，已于本周早些时候接到Nowaday International的通知，停售问题牛奶，但没有具体提及已售数量。　　香港食物安全中心建议民众不要饮用保质期截止到5月26日的一升装宝莱脱脂牛奶。目前尚不清楚该批次脱脂牛奶是否有在内地销售。　　香港食物安全中心发言人在声明中说：总含菌量超出法例标准，显示产品的卫生情况欠理想，但并不表示饮用后会引致食物中毒的情况。声明中说，已通知澳洲当局，会监察受影响产品的召回情况，采取适当跟进行动。

美国食品药品管理局(FDA)目前正就国际乳制品协会(International Dairy Foods Association，IDFA)和国家奶类生产商联盟(National Milk Producers Federation, NMPF)发出的请愿书，考虑修订牛奶和17种其他乳制品(发酵乳、酸乳、甜炼乳、脱脂奶粉、强化维生素A和D脱脂奶粉、炼乳、干奶油、多脂奶油、低脂稀奶油、淡鲜奶油、酸奶油、酸化稀奶油、蛋奶酒、半奶半乳酪、酸乳酪、低脂酸乳酪、脱脂酸乳酪)的识别标准，为使用任何安全和合适的甜味剂提供选择，意见征询的截止日期为2013年5月21日。　　请愿者认为，拟议修正案将促进更健康的饮食习惯，并通过提供低热量乳制品减少儿童肥胖。

在近日由中国科协举办的&ldquo 科学家与媒体面对面&rdquo 活动中，多位专家用自己的专业知识破解乳品消费误区，希望开启中国乳品的信任之旅。　　问题一:牛奶好还是豆奶好?　　中国食品科学技术学会副理事长、中国农业大学食品科学与营养工程学院教授胡小松指出，牛奶的营养价值远远高于豆奶。人体对牛奶蛋白质的吸收要比豆奶好。虽然黄种人乳糖不耐受比例稍高，部分人在饮用牛奶时会产生腹泻，但目前并没有研究表明，中国人在营养方面不适合饮用牛奶。　　中国食品发酵工业研究院前院长孙熲也表示，喝牛奶是最好的补钙方法。据他介绍，牛奶目前往往加入&ldquo 3A&rdquo 物质，不同人群可以通过选用加入不同元素的牛奶满足自身需求。一是DHA(二十二碳六烯酸)，可以促进孩子大脑发育，特别是对婴幼儿视网膜发育有特殊功能 二是ARA(二十碳四烯酸)，主要促进儿童骨骼成长和脏器发育 三是EPA(二十碳五烯酸)，可以帮助老年人降低血脂，控制血小板凝聚速度，减少血栓形成。他建议，青少年在目前应通过喝牛奶、吃虾皮、多晒太阳等方式相结合加强补钙。　　对于选择母乳还是奶粉?孙熲指出，由于母乳中包含母亲身上很多抗体，但这些抗体做成奶粉后就丧失活性了，所以目前仍提倡母乳喂养。　　同时，面对是不是脱脂奶比全脂奶更健康的疑问，胡小松指出，虽然脱脂奶减少了脂肪，但同样减少了脂溶性维生素。他建议，对于四五十岁以下、没有严重脂肪肝的人没有必要刻意喝脱脂奶。　　问题二:我国乳品质量如何?　　专家指出，近年来，伴随着我国在乳品生产和监管方面做了大量工作，目前我国乳制品质量安全得到前所未有的提升，产品质量逐步提高。　　据国家乳业工程技术研究中心副主任姜毓君介绍，近年来我国出台了一系列乳品安全标准，从产品的覆盖面、产品标准、检测标准等都有了更严格的要求。以质监部门监督抽查对消费者特别关注的婴儿配方奶粉质量监测结果来看，国产奶粉检测不合格率为0.77%，相应一些进口乳品则为1.13% 同时，国产奶粉中三聚氰胺等非法添加物已达到零检出。　　胡小松也认为，近年来企业的自律和行业监管的加强致使乳品行业集中度越来越高。据悉，三聚氰胺事件前，我国拥有1600-1700家乳品企业 经过整治，目前中国乳品企业约为600家，其中超过百亿的企业3家，超过20亿的企业接近10家。约20家的企业占据整个乳品市场份额的90%。　　行业集中度的提高一方面使政府的监管更加容易，另一方面可以提升企业的质量控制能力。大型企业可以带来更好的技术、先进的管理，利用农业现代化解决中国农业产品问题。　　问题三:我国乳品标准偏低?　　对于我国乳品标准较发达国家偏低的疑问，胡小松指出，目前乳品标准相对偏低，的确存在进一步提升的空间，但此标准体系下的原料奶收购和产品生产过程是能够保证消费者安全的。　　胡小松认为，中国在解决温饱后不到20年的时间中，乳品业突飞猛进发展。需求的激增带来一系列问题，应正确看待国家制定的原料奶标准。　　据孙熲介绍，改革开放初期，我国人均牛奶消耗量为0.2公斤/年 到2006年时，北京人均消耗量为40-60公斤/年，上海可达到70-80公斤/年。1000万头奶牛中60%属于个人养殖。发展到如今，这种规模远不能满足现实需要。孙熲指出，目前乳品质量的提高靠一家一户的农民是解决不了的，需要大企业从源头开始系统解决，即从牧场开始，从饲养开始，包括饲料的研究和培育。　　国家食品质量监督检验中心副主任元晓梅也指出，国家已从标准制定的程序、原则、框架上与国际接轨，但考虑到我国社会经济发展水平和客观实际需要，目前的标准需要符合本国国情。　　何时才能重建消费者对乳品的信心?胡小松表示，要想把一种偏见改变过来，比建立这种偏见难百倍 要想对失去信心的事物重建信心，比最初树立信心难千倍。目前只能通过学者、媒体、企业、政府共同努力，全方位把产品展示给公众和消费者，信心才会慢慢建立。

&emsp &emsp 蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中经典和广泛为业界认可的一种,也是论文中常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们，实验做的焦头烂额。&emsp &emsp 那么如何做出一手漂亮的Western Blot实验结果呢，请小伙伴们跟随远慕生物的脚步，了解Western Blot实验的相关知识，let's go！&emsp &emsp Western Blotting实验原理：&emsp &emsp 蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot，简称WB。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术。&emsp &emsp Western Blotting实验步骤：&emsp &emsp -样品制备&emsp &emsp 样本制备是决定蛋白质免疫印迹是否成功的关键步骤之一。样本必须进行研磨、匀浆、超声处理。膜蛋白需用剧烈的方法抽提，低丰度膜蛋白可能还要分步抽提(超速离心)。还需要注意的一点就是组织中的蛋白酶活性强，需要加入PMSF抑制酶的活性。远慕为大家提供强、中、弱三种RIPA裂解液，以及适用于各种类型的蛋白酶抑制剂。&emsp &emsp -电泳分离&emsp &emsp 准备好样品后，第二步就是上样和电泳分离了，上样之前小伙伴们要做的必要步骤是确定蛋白质浓度，根据蛋白质浓度确定上样量。远慕给大家推荐BCA和Bradford两款蛋白浓度测定试剂盒，小伙伴们可以根据自己的实验需求自行选择。&emsp &emsp 测完了蛋白质浓度，接下来就是上样了。首先要制备凝胶，选用SDS-PAGE凝胶配制试剂盒（EC0003），简单省时。然后安装电泳槽，将胶片安置在电泳槽中，在电泳装置中加入SDS-PAGE电泳液。远慕提供10×的电泳液，稀释后直接使用，方便快捷。&emsp &emsp 上样结束后，设置电泳程序一般浓缩胶80V，分离胶120V，电泳时间一般为1-2小时，根据溴酚蓝指示位置选择停止电泳时间即可。&emsp &emsp -转膜&emsp &emsp 针对特定分子量大小靶蛋白而选择适当转膜条件（转膜时间，转膜缓冲液和必要低温环境）能够将 SDS-PAGE 胶上蛋白样品尽可能完全转移到印迹膜上，同时减少蛋白不必要的降解，这对于终获得清晰、可信结果也是需要考虑因素。转膜方式主要包括湿式电印迹法（佳转膜方法）、半干式电印迹（可选的替代转膜方法）以及干式电印迹（有限灵敏度的转膜方法）。根据实验室习惯和需求，小伙伴们可以自行选择转膜方式。&emsp &emsp 膜的选择&emsp &emsp 膜的选择主要从实验目的和实验要求来考虑，例如做分子量小于20kDa的小蛋白，0.45um的膜是不可取的，因为可能会使得蛋白因透过膜孔而造成膜结合的目的蛋白含量不确定，从而影响终结果的可靠性。通常小于20KDa的蛋白选择0.2um的膜，而大于20KDa的蛋白选择0.45um的膜。&emsp &emsp 转膜方式的选择&emsp &emsp 湿转：&emsp &emsp 通常我们在做湿转的时候，选择100V恒压（高强度，因为低强度时间较长，且效率较低），电流控制在120-350mA之间，分子量在60KD以下的60分钟即可，分子量在60KD以上的需要延长转膜时间60-150分钟才能确保高效率的转膜。所以如果你所研究的两个蛋白分子量差异比较大（如GAPDH 37KD，Ki67 358KD），你可以考虑将胶从中间分开，两部分分别采用不同时间转印，能达到你理想的效果。电转液一般可以重复使用3次，之后电流会过大，不适合再使用。&emsp &emsp 半干转：&emsp &emsp 对于半干转来说，也需要进行堆叠组装（滤纸，胶，膜需要放在转印buffer中进行预平衡）放在装置电极板的底部，盖上上极板，高强的电流通过三明治结构，转印速度较快，一般小于1h。&emsp &emsp 需要注意的是：低温对于膜的转印是至关重要的，尤其是在转印时间较长而无人监管的情况下。针对刚建的实验室平台或者一些新蛋白的研究，经过转印的胶和膜都要通过染色确定转膜效率（胶用考马斯亮蓝加热染色，膜用丽春红染色，均只需几分钟，并不耽误太多时间），不然后面的实验既费时也费抗体。&emsp &emsp -封闭&emsp &emsp 在做Western blot实验中，因固相载体(如NC膜，PVDF膜)表面有很多孔，通过电转，胶上的蛋白被转移到膜上，蛋白以机械填补(堆积)和吸附的方式结合于表面。蛋白塞进了表面孔里面，但是蛋白并不是连续的，而有很多空隙，抗体也是蛋白，也会被吸附在空的洞里，这样就会有很多非特异性的信号。&emsp &emsp 因为有“填补”和“覆盖”蛋白结合位点以避免一抗的非特异性结合，所以有“封闭”的说法。星博士在此介绍常见封闭液的一些特点，有助于大家选择：&emsp &emsp 常见的封闭液——BSA&emsp &emsp BSA是常用的封闭液，成分单一适用于大多数情况。若免疫原是偶联BSA的，BSA有很强的免疫原性，会导致产生很多针对BSA的抗体，为避免交叉反应，不能用BSA，脱脂奶粉封闭，可以选用酪蛋白或无蛋白的封闭液。&emsp &emsp 常见的封闭液——脱脂奶粉&emsp &emsp 脱脂奶粉大的优点是价格便宜，但由于成分相对复杂，所以适用范围要狭窄一些。针对磷酸化蛋白的检测不能用脱脂奶粉，脱脂奶粉含有酪蛋白，该蛋白本身就是一种磷酸化蛋白，使用会造成高背景磷酸化抗体也许会导致背景增加，此外，因为自身含有生物素，不能用于生物素标记的抗体系统。&emsp &emsp 封闭体系并不是一成不变的，不同的封闭体系往往会得到不一样的实验结果，由此可见，做Western Blot实验中，封闭液的选择也是需要谨慎的。&emsp &emsp 不同封闭体系结果的差异&emsp &emsp -抗体孵育&emsp &emsp 一抗一般按照说明书进行稀释后，室温孵育1-2h，或者4℃过夜。为了让抗体充分与蛋白结合，大多数实验室一般会选择4℃过夜。一抗孵育结束后TBST洗涤三次，用稀释后的二抗，室温孵育1-3小时，TBST洗涤三次。&emsp &emsp 抗体是决定Western Blot实验成败的关键因素，选择具有一定文献引用数的品牌不仅容易得到清晰可信的结果同时能够得到同行认可，针对一些表达峰度高且稳定的蛋白可以选择国产化抗体，既能保证实验结果准确性又可降低实验成本，抗体的保存往往也是大家容易忽略的一个环节，而因抗体保存不当造成实验失败的例子比比皆是。&emsp &emsp 保存温度和条件（仅供参考）&emsp &emsp 对于很多抗体而言，分装成小等份并冻存于-20℃或-80℃是佳保存条件。分装成小等份可大程度减少由冻融造成的抗体效价降低，以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需冻融一次，如有剩余，可将剩余物保存于4℃，建议一周内用完。在收到抗体时，在10000×g下离心20秒以沉积截留于试剂瓶螺纹的溶液，并以小等份转移至低蛋白结合微量离心管中。小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量。小等份应不小于10μl；等份越小，储液浓度因抗体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大。&emsp &emsp 在大多数情况下，收到抗体时在4℃下保存一至两周，然后再冷冻进行长期保存是可以接受的，但也许腹水液是例外，它可能包含蛋白酶，因而应该尽快冻存。不同品牌的抗体保存方式往往不同，具体保存方式需参考产品说明书。&emsp &emsp -检测&emsp &emsp 抗体孵育完，就到了Western Blot实验的后一步——检测了。&emsp &emsp 目前常用的检测方法是ECL化学发光法，主要针对HRP标记的二抗。远慕为大家提供极超敏和超敏两种ECL发光液供大家选择。一款合适的发光液能使你的Western Blot图片加美观

近日，媒体爆出新西兰出产的部分牛奶和奶粉中检测出少量双氰胺化学残留物, 目前中国市场上进口的新西兰大包奶(包括脱脂奶粉、全脂奶粉)占到了中国总进口量的80%，而新西兰乳制品占到了中国全进口婴幼儿食品的40%左右。据了解，新西兰农民在牧场使用双氰胺主要用以防止硝酸盐等流入河流造成污染。然而, 双氰胺在食品中检出的相关国际和国家标准尚无，引发世界消费者的广泛关注和担忧！ 东西分析多年来一直致力于为食品安全领域提供强有力的产品、技术解决方案，为应对此次突发事件，东西分析分析中心建立了婴幼儿奶粉中双氰胺高效液相色谱分析方法，方法简便、快速，定量准确，灵敏度高，为广大客户提供最佳的支持！ 相关资料&mdash &mdash 《婴幼儿奶粉中双氰胺的测定》欢迎到资料中心下载。 北京东西分析仪器有限公司 2013.3.1

蛋白质印迹实验具体操作步骤 蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后，在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上，经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体 作为探针与之结合，经洗涤后，再将滤膜与二级试剂-放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶 偶联抗免疫球蛋白抗体 结合，进一步洗涤后，通过放射自显影或原位酶反应来确定抗原-抗体-抗抗体复合物在滤膜上的位置和丰度。 【蛋白质印迹实验所需试剂】 1.IgG 标准品 2.羊抗人辣根过氧化物酶（HRP）标记的IgG 抗体 3.转移buffer:Tris 3.03g,Gly14.4g,甲醇200ml,加三蒸水至 1000ml充分溶解，4℃冰箱贮存。 4.Tris buffer（TBS）：Tris 2.42g,NaCl 29.2g,溶于600ml三蒸水，再用1N HCl调至pH7.5,然后补加三蒸水至1000ml. 5.漂洗液（TTBS）：TBS液500ml,加 Tween20 250ul. 6.封闭液：5%脱脂奶粉。 7.抗体buffer:1.5g BSA溶于50ml TTBS. 8.显色液DAB（3.3-diaminobenzidine,3.3-二氨基联苯胺）配制：5mg DAB溶于10ml 柠檬酸buffer（0.01mol/L 柠檬酸2.6ml,0.02 mol/L Na2HPO4 17.39ml），加30% H2O2 10 &mu l（临用时现配）。 9.脱色液：甲醇250ml,冰醋酸100ml,加蒸馏 水至1000ml. 10.氨基黑染色液（0.1%氨基黑 -10B）：0.2g 氨基黑-10B 溶于200ml 脱色液中，充分搅拌溶解，滤纸 过滤。 【蛋白质印迹实验操作步骤】 一、样品的SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 按实验四操作步骤进行。加样时，注意在同一块胶上按顺序做一份重复点样，以备电泳结束时，一份用于免疫鉴定，一份用于蛋白染色显带，以利相互对比，分析实验结果。 二、转移印迹 1.转移前准备：将滤纸，硝酸纤维素膜（NC）剪成与胶同样大小，NC膜浸入蒸馏 水中 10-20min 后浸入转移buffer中平衡30min . 2.凝胶平衡：将电泳后的SDS -PAGE胶板置于转移buffer 中平衡 30-60min. 3.按图操作：逐层铺平，各层之间勿留有气泡和皱折。 4.开始转移，连接正负极，盖好盖子，接上电源，恒流 0.8mA/cm,室温下转移1h,转移后的凝胶再用氨基黑10B染色液染色20min ,然后脱色检测转移效果。 三、免疫染色 1.转移后的NC膜于5%脱脂奶粉中封闭，4℃过夜。 2.TBS洗膜1-2次，10min/次。 3.加HRP标记的抗体，室温1h . 4.TBS 洗3次，10min/次。 5.NC膜再转入DAB显色液中，置暗处反应，待显色反应达到最佳程度时，立即用三蒸水洗涤终止反应。

近日，广州市工商局公布了2012年第二季度第二次流通环节乳制品及含乳食品抽样检验结果，光明减脂芝士片、奶油两批次产品被检出菌落总数超标，这是光明乳业6月以来第三次被曝光质量问题。　　记者昨日(7月23日)走访了沪上多家超市发现，光明乳业生产的奶油和减脂芝士片仍在出售，但没有发现问题批次产品。　　光明乳业新闻发言人龚研奇在接受《每日经济新闻(微博)》记者采访时表示，此次检测出的问题只局限于广州市场，光明已将这一批次的产品全部进行下架处理，不影响全国其他地区该产品的正常销售。菌落总数超标的原因为长途运输过程中挤压受损、加上销售环境的温度不稳定所致。问题批次产品已经下架　　据广州市工商局抽检结果显示，由上海光明奶酪黄油有限公司梵古易乳制品分公司生产的50%减脂芝士片　　(200g/包，生产日期为2012年2月23日)及奥德华乳品(北京)有限公司生产的光明牌奶油(125g/盒，生产日期为2012年4月23日)均被检出菌落总数超标。　　记者昨日在上海中山公园家乐福超市看到了上述两种光明乳业生产的产品，其中芝士片的生产日期为5月26日，并且在进行买二赠一的促销活动 而奶油的生产日期为3月28日，与问题批次生产日期不同。　　光明乳业新闻发言人龚研奇昨日(7月23日)接受记者采访时表示，此次检测出的问题产品只局限于广州市场，并不影响全国其他地区该产品的正常销售。“接到抽查结果后我们非常重视，立刻对广州市场上销售的同批次产品进行了下架回收。并马上进行了过程原因分析，菌落总数超标的原因为长途运输过程中挤压受损、加上销售环境的温度不稳定所致。我们已经采取相应的措施，进一步加强运输过程中的监控管理，以防止类似情况的发生。同时，对市场上的同批次产品进行第三方送检，结果均为合格。”　　记者了解到，这是光明乳业今年6月以来第三次出现产品质量问题。　　今年6月15日，安徽颍上县两所小学部分学生在食用光明乳业配送的牛奶后出现呕吐等不适症状。6月25日生产、26日上市的批号为I17:15(E)的光明优倍奶混入了烧碱成分，随后光明乳业对该批次牛奶进行下架召回处理。　　一位不愿具名的乳业分析师向记者表示，光明出的问题多多少少都与管理有关系，此次的问题出在了流通环节，在包装、长途运输当中出现泄漏等都可能产品变质，也不排除生产环节出现问题，比如管理上的疏忽，或者是质检员个人失误等，但是这种可能性比较小。　　“乳业产品通过经销商进行分销，一旦企业将产品发给了经销商，企业对于产品的监管就出现了盲区。产品由经销商管理，就容易出现质量问题。”上述分析师向记者表示。　　该分析师指出，近几年，光明乳业快速增长，平均增幅在20%左右。年报显示，公司2011年营业总收入117.89亿元，同比增长23.16%，2010年营业收入同比增长20.51%。　　然而，近期连续出现的质量问题，让光明乳业安全可靠的品牌形象产生了影响。“但是具体究竟有多大，不太好说。”上述分析师表示。乳产品的上下游控制　　针对今年以来乳业频频曝出各种质量安全问题，乳业分析师陈连芳在接受《每日经济新闻》采访时表示，乳品行业产业链很长，每一个环节都相互依存，这中间任何一个环节出现差错都会导致产品出现质量问题。　　“现在企业整顿的重点可能在上游的奶源和中游的生产环节，可能下游的力度差一点。产品销售后的有些环节做得不到位，企业要改善加强管理，将漏洞补上。”陈连芳表示。　　乳业分析师王丁棉此前在接受记者采访时表示，解决中国奶业问题更重要的是在奶源方面进行合理规划和布局。“奶产品是快速消费品，应该在短时间内快速加工快速消费，而要做到这点只能在当地生产，做到近距离运输，保证产品的营养、降低生产成本。”　　记者了解到，工信部正在推进食品安全追溯体系建设，由乳制品行业协会牵头。工信部希望建立“覆盖原奶生产、流通、乳制品加工、市场流通和销售等各个环节的全面的乳品质量安全监控体系”。　　“如若将上述体系应用到乳产品中去，可以强化企业和政府的合作，有助于加强对乳产品质量的监管和管理。”上述不愿具名的分析师告诉记者。　　陈连芳认为，上述方案虽然动机很好，但可能落实起来有一定困难。“毕竟不是法律，但是约束企业的行为必须通过立法，只是倡议没有多大用处，很难落实。”　　2012年6月15日　　安徽颍上县两所小学部分学生在食用光明乳业配送的牛奶后出现呕吐等不适症状。光明乳业公告称，涉及产品目前正在送检过程中，出事产品的同批次产品均有出厂合格检验报告。　　2012年6月27日　　有消费者爆料称其购买的光明乳业产品“优倍”出现质量问题。光明乳业声明称，6月25日生产、26日上市的批号为I17:15(E)的光明优倍奶混入了烧碱成分。已在第一时间将相关产品全部召回。　　2012年7月20日　　广州市工商局网站公布了2012年第二季度第二次流通环节乳制品及含乳食品抽样检验情况，光明乳业产品上了黑榜。光明方面称，菌落总数超标的原因为长途运输过程中挤压受损、加上销售环境的温度不稳定所致。国产乳品信任危机助推洋奶粉涨价 此次光明、南山乳产品的质量问题，又将国产乳业食品安全问题推到了风口浪尖。国内乳产品市场正处于“冰火两重天”的状态，一方面国产乳产品频繁被曝产品质量问题，另一方面洋品牌产品纷纷涨价。　　洋品牌涨价的底气来自哪里?《每日经济新闻》记者对此调查后发现，洋品牌产品频繁 “更新换代”是直接原因，更深层原因是消费者对国产品牌信心不足，转而购买洋品牌奶粉。　　记者在上海市中山公园家乐福超市，达能旗下品牌多美滋适合1~3岁儿童配方奶粉400克价格，由之前的老包装68元变成了配方升级的75元，而其相对应的桶装900克奶粉价格由177元变成198元。照这样算来，升级的新一代产品比之前的价格上升了11%左右。　　对此，多美滋中国区相关负责人此前在接受《每日经济新闻》记者采访时表示，公司在7月中旬推出了新一代产品，因为相关成本的增加，新产品价格比原产品有一定增长，平均涨幅为10%，但配方进行了全面升级。　　记者发现，从去年以来，洋奶粉频繁“更新换代”，产品的价格也随之有不同程度的上涨。去年6月份，惠氏公司推出新的产品线，价格比老产品高10% 而在年底，其高端品牌进行配方调整，价格也随后上涨。今年3月份美赞臣以推出新品为由，部分产品价格提升10%。4月份，雀巢奶粉提价，涨幅在5%左右。　　事实上，从去年下半年开始，在全球原料奶普遍增产及国际需求下滑的双重作用下，国际牛奶价格开始下滑。公开数据显示，在三聚氰胺事件爆发前的2008年1月，进口脱脂奶粉价格为4281美元/吨，而至2011年12月，进口脱脂奶粉的价格却降至3750美元/吨以下，相较2008年初的价格下降近10%。乳业分析师宋亮曾向记者表示，最近进口脱脂最近已将降至在3000~3500美元/吨。　　一方面国际原料奶价格下跌，另一方面洋奶粉价格却不降反涨，洋品牌涨价的底气何在?　　乳业分析师陈连芳表示，一方面是因为奶粉是刚性需求，价格弹性不足 另一方面多个国产品牌奶粉都曾出现问题，让消费者对国产奶粉的信任度降低，纷纷选购洋品牌奶粉。中国婴幼儿奶粉市场的龙头位置全被洋品牌揽去，高端奶粉市场几乎九成被外资占据，因此洋奶粉再怎么涨价也不愁销量。　　陈连芳说：“这事对于有些国产品牌也不是坏事，因为国产品牌的价格可以跟着洋奶粉走。贝因美、伊利等高端品牌也有300元左右一桶。”　　 AC尼尔森数据显示， 2008年 “三聚氰胺”事件发生前，国产品牌奶粉的市场占有率是44%，而现在，中国国产奶粉的市场份额已下降到1/3，外资品牌的市场份额迅猛增长到2/3的市场份额。　　上海大学教授顾骏曾公开表示，中国的乳制品企业需要潜下心来重建信心体系，同时通过透明化生产过程等手段向国人证明自己的品质，增强高端消费市场竞争力，加大对进口奶粉的替代力度

原标题：卫生部已采样检测新西兰乳品 最后结果还在论证过程中　　本报讯(记者胡笑红)新西兰奶粉检出双氰胺事件仍在发酵。尽管新西兰政府等各方面公开确保新西兰乳制品是安全的，但是中国消费者还是难以释然。昨天，卫生部官网发布消息，国家食品风险评估中心已在媒体报道后连夜组织建立检测方法，采集样品检测。　　卫生部　　检测结果还在论证　　据了解，在卫生部28日召开的媒体通气会上，国家食品安全风险评估中心的首席专家吴永宁表示，首先，双氰胺可以起到增肥作用，防止氮流失，并可以防止氮变成硝酸盐污染环境。中国的肥料登记当中已有登记。目前，国际组织没有官方限量。第二，媒体报道新西兰双氰胺发生后，国家食品风险评估中心连夜组织建立检测方法，采集样品检测，同时根据动物试验结果向国际专家顾问团发出咨询，最后的结果还在论证过程当中。　　除了卫生部，国家质检总局28日也表示对新西兰奶粉双氰胺事件“继续予以关注和调查”，并表示要求新西兰方面尽快提供奶粉的风险评估报告。同日，新西兰大使因停用双氰胺引起的疑惑向消费者道歉。　　恒天然　　并非食品安全问题　　据全球最大的乳制品出口商新西兰恒天然方面介绍，此前针对近100个批次的样品检测发现，全脂奶粉、脱脂奶粉和乳酪粉中发现了微量的DCD(二氰二胺)残留 而婴幼儿配方奶粉经过测试没有发现DCD。另外，仅是去年9月份的样品中被检出微量的DCD。　　恒天然集团CEO史毕根思表示：“此事从一开始就不是食品安全问题。”史毕根思称，2012年11月，新西兰政府组建专门工作组，应对DCD问题，恒天然是成员之一。“我们在少数产品样本中检测出了极其微量的DCD残留，其含量还不到欧盟食品安全限值的百分之一，新西兰初级产业部已经确认，这种微量的水平绝不会给人体健康带来任何风险。”

近日，备受瞩目的GB/T 22427.7-2023《淀粉黏度测定》标准正式实施，标志着淀粉行业在粘度快速测试领域迈出了重要一步。此次标准的发布，不仅为淀粉粘度的快速准确测定提供了科学、规范的方法，更凸显了快速粘度仪（RVA）法在提升检测效率和准确性方面的关键作用。在这场技术革新中，Perten RVA系列快速粘度分析仪以其卓越的性能和稳定的表现，发挥了重要的作用。淀粉，这一广泛存在于自然界的多糖类物质，在食品、医药、化工等诸多领域均扮演着不可或缺的角色。粘度作为淀粉的关键物理性质，直接反映了其在特定条件下的流动性和内摩擦力，是评估淀粉品质的重要指标。通过精确测定不同来源、不同品种淀粉的粘度，我们可以深入了解其纯度、结晶度、颗粒大小及结构特性，从而指导淀粉的选择和应用，提升产品质量和生产效率。Perten作为RVA技术的研发者和生产者，近40年来一直致力于为淀粉粘度测定技术的发展贡献力量。在GB/T 22427.7-2023《淀粉黏度测定》标准的制定过程中，Perten积极参与了数据验证工作，通过大量的实验验证和数据分析，确保了RVA法在标准中的准确性和适用性。这一成果的取得，不仅彰显了Perten在粘度分析领域的专业实力，也为行业的标准化和规范化发展做出了重要贡献。值得一提的是，新标准特别增加了快速粘度仪（RVA）法，进一步提高了淀粉粘度测定的效率。Perten RVA系列快速粘度分析仪凭借其独特的设计和先进的技术，能够在短时间内快速、准确地测定淀粉的粘度和糊化特性，为行业内的粘度控制与交流提供了有力支持。同时，该系列分析仪还具有高度的稳定性和可靠性，确保了测试结果的准确性和可重复性。随着GB/T 22427.7-2023《淀粉黏度测定》标准的正式实施和Perten RVA系列快速粘度分析仪的广泛应用，相信淀粉行业的粘度测定将迎来更加精准、高效的发展。这不仅有助于行业内淀粉粘度的准确控制，还将为食品、医药等行业的生产提供更加坚实的基础。 RVA系列快速粘度分析仪 RVA系列快速粘度分析仪是一款具有控温程序的旋转型粘度测定仪，仪器带有程序控温和可变的剪切力，以最佳条件检测淀粉、谷物、面粉和食品的粘度特性。RVA具有快速、精准、灵活和自动化的特点，特别适合产品的研发、 质量加工控制以及产品质量保证检验。仪器采用国际标准方法/国标或用户自定义的检测方法，检测样品量只需要 2-3g。仪器特点●检测速度快：搅拌值测定只需3分钟，淀粉糊化特性只需13 分钟 ●使用简单：自动分析糊化温度、峰值粘度、回生值、崩解 值、保持粘度、搅拌值 ●样品用量少：只需2-3g●坚实耐用：适用于实验室以及工厂的操作环境 ●可追溯性：采用标准化的校准方法，满足ISO9000质量体系要求●精准性：准确的搅拌速度和快速的加热冷却速度，确保结果重复性的稳定 ●符合ER/ES：满足电子注册与电子签名标准，生成可追溯的检测结果应用适合于生产、研发、质量控制、原材料检测和加工监控等 ●淀粉：标准的13分钟检测天然及变性淀粉的淀粉糊化特性 ●面粉加工和烘焙：检测淀粉质量、面筋质量、酶活性、气候损伤谷物 ●块茎类：检测小麦、玉米、稻米、高粱、马铃薯、木薯、甘薯等样品的淀粉质量 ●酿造：麦芽制造、大麦储藏、干麦芽、酿造辅料 ●膨化食品和饲料：快餐、早餐谷类、动物和水产饲料 ●蛋白质品质：小麦面筋、脱脂奶粉、乳清蛋白浓缩物和大豆蛋白 胶体：水解胶体和制剂的凝胶化与增厚过程 ●乳制品：奶酪、乳制品甜点和酸乳酪的质量控制

FDA 中LC-MS/MS法检测双氰胺方法简介 &mdash 默克密理博检测婴幼儿奶粉中双氰胺方法默克密理应用实验室2013-1-31 双氰胺极性较强，易溶于水，中性及酸性条件下易电离，适合使用默克密理博的两性离子型亲水作用(ZIC-HILIC)色谱柱分离。FDA 在Bulletin 4487中采用ZIC-HILIC色谱柱，建立了测定乳品、蛋白质等基质的样品中包括双氰胺在内的LC-MS/MS测试方法，现把该方法样品处理及检测条件简要列出。 同时默克密理博致力于分析方法的开发，为客户提供简便、快速的解决方案，我们采用ZIC-HILIC 色谱柱在HPLC-UV条件进行了摸索，为客户提供快速简便的测试方法。 默克密理博双氰胺检测专用柱应用规格描述货号HPLCZIC-HILIC (5 µ m, 200Å ) PEEK HPLC Column 250 x 4.6 mm1.50458.0001LC-MS/MSZIC-HILIC (5 µ m, 200Å ) PEEK 150x2.1 mm1.50454.0001 LC-MS/MS检测婴幼儿奶粉中双氰胺(FDA Bulletin 4487) FDA #4487方法[1]中建立了同时检测奶粉及高蛋白产品中可能存在添加的六种含氮物质(环丙氨嗪、双氰胺、尿素、缩二脲、三缩脲、脲基甲脒)分析方法。方法中采用2%的甲酸水溶液提取，再加入乙腈进行蛋白沉淀。提取物使用默克密理博的ZIC-HILIC色谱柱在液质联用(LC-MS/MS)仪器上分析，在脱脂奶粉、奶粉、大豆蛋白、面粉、麦麸和谷物基质中进行标样添加测试并进行了方法验证，该方法测试双氰胺 Dicyandiamide (DCD)的平均回收率为 98.1% ，RSD=5.6%，在脱脂奶粉中测试的检测限（LOD）为20ppb，定量限为60ppb. LC-MS样品处理方法[1-2]1.称取一定量的奶粉，加10倍温水溶解，得奶粉母液样品。称取奶粉母液样品(2.0± 0.02g)于50ml PP管中，方法空白样品量取2.0ml水；2.方法摸索的样品可在PP管中加入相当于1ppm的双氰胺对照品；.校准曲线用的样品可在样品管中分别添加相当于0.8-8.0ppm的双氰胺对照品；3.每根PP管中加入18mL 2%的甲酸水溶液，振摇60秒，使所有固型物分散开。为了方便快速移取溶液，可设置5.0mL的移液器量程到4.5mL，连续移取4次即得18mL。加入提取液的PP管超声30分钟，再振摇1分钟，放入离心机中离心20分钟（4500rpm）。4.移取离心后的上清液50ul，于1.5ml离心管中，加入950ul乙腈。在加入乙腈后，会有白色沉淀，可适当振摇30秒，再放入离心机中离心10分钟。离心后，吸取上清液，用0.20um PTFE膜过滤至2ml自动进样瓶中。必要时可取滤液100ul，加入500ul的乙腈-2%甲酸水溶液（95/5）稀释后再进行测试。 测试条件色谱条件色谱柱：ZIC-HILIC (5 µ m, 200Å ) PEEK 150x2.1 mm(货号:1.50454.0001)流动相：A: 95:5 乙腈:0.1%甲酸水溶液（含10mM甲酸铵）B: 50:50乙腈:0.1%甲酸水溶液（含10mM甲酸铵）流动相比例：0-5min，100%A.注:由于双氰胺保留时间在3.4min左右，可在5分钟内完成分析。无需运行文献[2]的梯度程序。必要时，采用100%的B相机进行色谱柱的冲洗。进样量：2-5ul（FDA方法中采用20ul)质谱条件离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫；检测方式：多反应检测（MRM）；去簇电压:36V；双氰胺的分子离子[M+1]+ m/z:85.0,子离子m/z:68.0,43.1.FDA方法测试结果双氰胺的保留时间tR=3.4min. 检测限LOD=20ppm，定量限LOQ=60ppb,加标回收率在93-101%，低、高两个浓度下的RSD值分别为5.9%和5.3%.我们采用LC-MS专用的色谱柱(ZIC-HILIC (5 µ m, 200Å ) PEEK 150x2.1 mm)在Agilent1260 HPLC上进行测试，218nm下的色谱图如下：双氰胺保留时间3.1.3min，其中蓝色-奶粉样品；绿色-奶粉加标；红色-双氰胺对照品(1.25ug/ml)。流动相：95:5 乙腈:0.1%甲酸水溶液（含10mM乙酸铵），进样量均为2ul. HPLC方法检测婴幼儿奶粉中双氰胺为了方便HPLC的用户，我们采用ZIC-HILIC HPLC色谱柱开发了相应的检测方法。样品前处理取婴幼儿配方奶粉2g于50mL PP管中，加18mL 2%的甲酸水溶液（2.2.4），加盖密闭。摇振60秒，再超声30分钟，取出，再摇振60秒，放入离心机中离心（4000转），20分钟。取出，吸取上清液50ul，于10ml PP管中，加入950ul乙腈，加盖密闭，振摇60秒，吸取溶液，过滤，即得供试液。或取婴幼儿配方奶粉2g于50mL PP管中，加20mL 乙腈-甲酸水溶液（2.2.4），加盖密闭。摇振60秒，再超声30分钟，取出，再摇振60秒，静置，吸取上层溶液，过滤，即得供试液。（快速处理方法）加标样品同法配制。样品配置方法亦可采用LC-MS/MS的处理方法。色谱条件流动相 (v/v): A-醋酸铵溶液（10 mM）,B-乙腈比例*：A:B=12：88(必要时在方法中设置冲柱程序)流速:1 mL/min进样量：20ul测试结果 图中蓝色为标样（1.25ug/ml）,绿色为奶粉空白，红色为奶粉加标(加入量10ug/g).采用ZIC-HILIC色谱柱，HPLC-UV下测试，无干扰，可用于双氰胺的快速检测。该方法处理方法简单，色谱峰型良好，方法重现性良好（RSD3%）,检测浓度在0.5-10ug/ml之间现行关系良好(R=0.999),加样回收率在95.6-101.5%之间。按照方法1的处理，LOD为1.3ug/g奶粉，按照方法2处理,LOD可达0.07ug/g。详细方法可参考：[1] FDA Laboratory Information Bulletin 4487(双氰胺检测方法)[2]Journal of Chromatography A 1220 (2012) 101&ndash 107[3]FDA Laboratory Information Bulletin 4421(三聚氰胺检测方法)其他相关详细方法，请联系默克密理博。直接下载FDA检测双氰胺方法文献英文原文

ELISA试剂盒实验封闭很重要封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用，因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会降低特异结合，产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液，后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同，是永久的。它们与开放位点结合并封闭，同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。ELISA试剂盒抗体浓度须优化我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤，但是如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。记住，非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。检测试剂要适量另一点也很显而易见：切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液。洗涤很关键洗涤步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料（如非特异结合的抗体或检测试剂）残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果ELISA试剂盒实验背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。

中国是新西兰乳制品最大的出口市场 目前进口的新西兰乳制品占到了全进口婴幼儿食品的40%左右　　事实上，中国市场上的新西兰奶源奶粉，并不仅仅只有可瑞康等新西兰奶粉品牌，光明旗下的培儿贝瑞奶粉等多个国产品牌也同样是“新西兰奶源”。　　新西兰官方近日证实，恒天然集团乳制品检测出双氰胺(DCD)残留。尽管据称这些残留物不会影响食品安全或导致健康问题，但由于市面上多个“洋奶粉”品牌对奶源标注含糊不清，用“100%进口”的标注模糊奶粉“血统”，还是引发了消费者的担忧。专家指出，应尽快填补双氰胺的标准，让消费者放心。　　乳业巨头陷入“双氰胺门”　　新西兰第一产业部官员25日证实，在新西兰出产的小部分牛奶和奶粉中检测出少量双氰胺化学残留物，但这些残留物不会影响食品安全或导致健康问题。　　针对新西兰部分奶粉中被检出双氰胺化学残留物的情况，国家质检总局已紧急与新西兰相关部门取得了联系，要求对方尽快提供详细信息，包括奶粉中检出双氰胺物质的含量，涉及的奶粉具体品牌、产地、批次等具体情况。　　据了解，乳制品是新西兰的主要出口商品，其95%的乳制品用于出口，中国是新西兰乳制品最大的出口市场。目前中国市场上进口的新西兰大包奶(包括脱脂奶粉、全脂奶粉)占到了中国总进口量的80%，而新西兰乳制品占到了中国全进口婴幼儿食品的40%左右。　　知名品牌奶源“说不清”　　专家指出，目前乳制品中的双氰胺尚没有国际限量标准。而新西兰作为乳制品的出口大国，向中国出口奶粉的除了新西兰本土的乳制品品牌外，更多的则是以新西兰为奶源地的众多“洋奶粉”和国产品牌。　　中商流通生产力促进中心乳业分析师宋亮表示，新西兰奶粉主要出口到海外作为奶粉制造商和供应商的原料粉来源。由于新西兰奶粉主要作为原料奶，全球60%的奶制品企业和乳品供应商采用新西兰奶源的奶粉。　　事实上，中国市场上的新西兰奶源奶粉，并不仅仅只有可瑞康等新西兰奶粉品牌，光明旗下的培儿贝瑞奶粉等多个国产品牌也同样是“新西兰奶源”。另一些“洋奶粉”则只对产品标称为“全进口”、“进口奶源”，对奶粉的具体“血统”更是多以含糊带过。比如，雅培0到12个月金装喜康宝婴儿配方奶粉，原料奶是“100%新西兰、美国、欧洲优质奶源”。　　美赞臣客服人员表示，中国市场上销售的婴幼儿奶粉产地包括新西兰、澳大利亚、荷兰等多国，对哪些奶粉产于新西兰则含糊带过，表示“消费者个人无法区分”，“如果消费者由此感到担心也是个人的自我选择”。　　“洋奶粉”安全关难过　　恒天然集团并不是第一个栽在安全关的乳制品企业。近年来，包括美赞臣“金属门”、日产奶粉“缺碘门”在内的“洋奶粉”安全负面事件层出不穷。　　国家质检总局从2011年7月到2012年8月公布的每月进境不合格食品名单上，先后有34个批次超过270吨不合格进口奶粉被销毁或退货，其中以婴幼儿奶粉居多。记者发现，包括德国产的“泓乐”、新西兰产的“可益多”、澳大利亚的“亨氏”在内的多个品牌产品均“黑榜有名”。

由北京市科委支持，北京出入境检验检疫局（现北京海关）牵头的 “国产分析仪器验证与综合评价市场化推广研究与实践”课题方案研讨会在京顺利召开。本次会议的召开标志着北京市第五届国产仪器验评项目正式启动。　　仪器验评小组公布了2018-2019年的验评名单，其中聚光科技（杭州）股份有限公司（以下简称“聚光科技”）的Expec 7000型ICP-MS将参加验评，Expec 7000将在一年的时间内经过专家老师的各项考核和验证。卸下“美颜”和“滤镜”，Expec 7000在这次专家验评中，将展现给大家最真实的“面貌”。　　此次ICP-MS仪器验评主要由北京海关技术中心、清华大学分析测试中心、北京疾病预防控制中心、北京食品安全监控和风险评估中心四家单位开展，对水质、土壤、脱脂奶粉、纯铜等不同基质的样品进行定量检测。并通过仪器性能检定、方法学评价、标物定值，对仪器的灵敏度、精确度、稳定性等做出验评。　　千里马需伯乐识，好仪器需专家鉴。Expec 7000 ICP-MS作为国产仪器的代表，凝集聚光科技多年研发心血，技术指标和可靠性达到国际主流ICP-MS商品仪器的较高水平。但是，自我的成绩毫无意义，专家和用户的肯定才是我们荣誉的奖章，我们相信通过此次国产仪器验评，Expec7000会在你心中C位出道。Expec 7000 ICP-MS　　提手式换锥设计能够极大的简化用户操作，保证用户在2分钟内更换双锥，换锥前后无需调整等离子体位置。 提手式换锥　　高精度四级杆及其驱动电路，能够实现高低分辨同时扫描；专利的双路射频电源闭环自适应调整技术提高电源的稳定度。 抗温湿交变的四极杆质量分析器　　系统软件支持HPLC联用，创造性的实现了在同一界面下的仪器反控、连锁保护、自动寻峰和自动/手动积分等功能；可视化的运行监控；关键运行参数实时显示；等离子体工作采用连锁保护（氩气、冷却水、排风、炬室、废液、湿度）。 智能化工作站

CEM 公司&mdash &mdash 全球领先的实验室仪器设备供应商，近日宣布AOAC（美国官方分析化学师协会）已经通过了Sprint蛋白质快速测定方法为官方正式方法2011.04，该方法依据蛋白质标签技术适用于猪肉、牛肉和家禽的原料肉和加工肉以及肉制品的蛋白质含量的快速测定。 &ldquo 我们非常高兴AOAC①国际协会能够认可并通过这些方法&rdquo ，CEM公司总裁兼CEO Michael J. Collins说，&ldquo 这确实是一项革命性的技术，非常有价值，可以广泛地应用在食品领域，但一直缺少官方认可。现在，随着这个方法的被公众的普遍接受，未来将会有更多的公司享受到Sprint带来的省时、准确、高效和绿色环保。 在该方法的批准进程中，CEM 公司的Sprint蛋白质快速测定仪被作为该方法研究的指定仪器。方法有效性和准确性的验证过程建立在蛋白质含量在9%-40%之间的牛肉、猪肉及家禽肉和肉制品等具有广泛代表性产品蛋白含量数据之上。 Sprint 采用了iTAG这种专门的、无毒的蛋白质标签溶液，该溶液可以和原料肉、加工肉中蛋白质的赖氨酸、组氨酸和精氨酸及N末端结合并自动计算出蛋白质含量。一体化、操作简便的Sprint机器可以在2分钟内快速测出多种产品的蛋白质含量。该方法比传统的凯氏定氮法更加安全，无需高温以及强腐蚀性化学试剂。2009年，Sprint蛋白质快速测定仪基于它的绿色环保的反应条件，被美国国家环保局（US EPA）授予&ldquo 总统绿色化学挑战者奖&rdquo 。 目前，Sprint 蛋白质快速测定仪广泛应用于乳品、谷物蛋白含量的检测并作为标准方法得到AOAC和AACC认可： AOAC Method 967. 12 液态奶、花色奶、调味乳饮料、咖啡伴侣、黄油等； AOAC Method 930. 33 冰激凌、速冻甜食、雪糕等； AOAC Method 930. 29 全脂奶粉、脱脂奶粉、营养强化奶粉、婴幼儿配方奶粉等； AACC② Method 46-14B 适用于谷物、宠物食品、动物饲料等。 ①AOAC------Association of Analytical Communities（美国官方分析化学师协会）的缩写.是一个拥有127年历史的非营利性科学组织，在分析结果领域赢得了世界的信任，是美国食品生产领域的权威标准机构.经AOAC批准通过的方法，对于方法结果的准确性是一种认可，对采用AOAC方法的厂家生产产品的安全性和合理性提供了一定的信任。②AACC------American Association of Cereal Chemist（美国谷物化学师协会标准是由美国谷物化学师协会）的简称，负责制订的谷物分析与测试方法标准。AACC标准自1922年问世以来，一直是谷物科技领域的重要检验依据。此外用这些方法分析的结果还常常被用作诉讼或司法的依据。 参考 http://www.cem.com/{e_BASE}page74.html更多详情，请联系培安公司：电话：北京：010-65528800 上海：021-51086600 成都：028-85127107 广州：020-89609288Email: sales@pynnco.com网站：www.pynnco.com

近年来，骆驼奶粉市场乱象频发，低成本乳清粉、豆浆粉充量，冒充“纯正”骆驼乳粉降低成本等问题层出不穷。更有甚者，产品主打营养驼奶粉，实则配料表中骆驼乳粉量只能排到第五位，甚至排在麦芽糊精后面！特色奶畜乳粉产业迅猛发展的背后，隐藏着标准缺失埋下的隐患。为顺应乳制品行业多元化的发展趋势，国家修订出台了GB 19644-2024《食品安全国家标准 乳粉和调制乳粉》（以下简称“新标”GB19644-2024.pdf），首次将牦牛、骆驼、驴、马等特色奶畜乳粉产品纳入国家标准监管。《新标》是对《食品安全国家标准 乳粉》（GB 19644-2010）的修订。在原标准的基础上，根据当前乳品行业生产经营情况，标准纳入了牦牛、骆驼、驴、马等特色乳畜的乳粉及其基本要求；明确调制乳粉是以单一品种生乳和（或）其全乳（或脱脂及部分脱脂）加工制品为主要原料，添加其它原料（不包括其他品种的全乳、脱脂及部分脱脂乳）、食品添加剂、营养强化剂中的一种或多种，经加工制成的粉状产品，其中来自主要原料的乳固体含量不低于70%；对于添加了活性菌种的产品提出了最低活菌数要求；增加了产品规范标识的基本要求；同步更新了标准中的检测方法以及引用的相关标准等。修订后的标准适用于乳粉（全脂、脱脂、部分脱脂）乳粉和调制乳粉两大类产品。标准范围覆盖了牛乳、羊乳、牦牛乳、骆驼乳、驴乳、马乳等多类乳畜来源的乳粉和调制乳粉产品，规定了不同种类乳粉和调制乳粉的原料、感官及蛋白质、脂肪、复原乳酸度等理化指标要求和微生物限量要求，污染物限量、真菌毒素限量、致病菌限量要求及食品添加剂和营养强化剂的使用要求引用了通用标准，明确了标签标识要求。本次修订有助于进一步规范我国乳粉产品市场尤其是小众乳粉市场的健康、有序发展，有助于更好地保障消费者权益。新标六大亮点1、特色奶畜乳粉纳入新标2024版乳粉和调制乳粉国家标准将旧版乳粉和调制乳粉定义中的“生牛（羊）乳”修改为“生乳”，范围覆盖了牛乳、羊乳、牦牛乳、骆驼乳、驴乳、马乳等多类乳畜来源的产品，并相应地对新增特色奶畜乳粉和调制乳粉的指标做出了细致规定，小众品类产品也将有标可依。（注：红色标注为旧标删除内容；绿色标注为新标增加内容。）2、进一步明确乳粉及调制乳粉的原料无论乳粉还是调制乳粉，新标明确规定产品原料用生乳必须为“单一品种”，强调了乳原料的单一性。此外，调制乳粉不得另外添加其他品类原料，且规定乳固体含量下限针对产品的“主要原料”，进一步规范了主要原料的纯度。新标施行后，骆驼乳粉等调制乳粉厂家通过掺杂其他乳清粉来降低成本的市场乱象将得到有力管控。3、修订乳粉部分感官要求新标施行后，乳粉的色泽、滋气味要求将从旧版的“呈均匀一致的乳黄色，具有纯正的乳香味”变更为“呈均匀一致的乳白色或乳黄色，具有固有的乳滋味、气味”，充分考量乳粉受乳脂加工等因素影响下的色泽变化。（注：红色标注为旧标删除内容；绿色标注为新标增加内容。）4、增设活性菌种产品的活菌数下限新标首次提出对于添加活性菌种的乳粉产品，其活菌数应至少达到106CFU/g，确保产品品质和功能宣称的真实性。CTT提醒企业注意添加活性菌种产品的活菌数达标情况，确保产品货架期内符合新标规定。（注：红色标注为旧标删除内容；绿色标注为新标增加内容。）5、新标表述、索引规范化新标更新了脂肪、复原乳酸度的检测方法，致病菌限量要求由单独规定转为直接索引（GB 29921-2021《食品安全国家标准 预包装食品中致病菌限量》），增强了标准的规范性、科学性和严谨性。6、新增产品标识要求为明确乳粉真实属性，保护消费者知情权，新标新增了乳粉和调制乳粉产品的标识要求，强调标明奶畜品种的信息，以推动行业规范化发展。具体要求为：牛乳粉可标识为“乳粉”或“奶粉”，其他奶畜来源的乳粉应标识奶畜品种，如“羊乳粉”或“羊奶粉”，调制乳粉亦作同样要求。新标的施行将进一步规范乳粉和调制乳粉的产品配方，有利于小众特色奶畜乳粉行业的健康发展，该类型进口产品的监管也将有标可依。乳粉质量检测高风险项目

新西兰乳品检出双氰胺事件追踪　　新西兰95%的乳制品用于出口 八成进入中国市场　　新西兰官方近日证实，恒天然集团乳制品检测出双氰胺(DCD)残留，据称这些残留物不会影响食品安全或导致健康问题。由于市面上多个“洋奶粉”品牌对奶源标注含糊不清，尽管用“100%进口”来模糊奶粉“血统”，但还是引发了消费者的担忧。专家指出，应尽快填补双氰胺的标准，让消费者放心。　　乳业巨头陷“双氰胺门”　　据报道，去年9月新西兰乳制品公司恒天然在对牛奶进行抽检时，发现有少量牛奶和奶粉中含有少量双氰胺化学残留物。经调查发现，大约有500个新西兰农场使用了含有双氰胺的化肥，用于促进草的生长。　　新西兰第一产业部官员韦恩麦克尼26日对新华社记者表示，从去年9月起新西兰的农场就不再使用含双氰胺的肥料，现在生产的新西兰乳制品不大可能含有双氰胺残留物，可放心食用。　　针对新西兰部分奶粉中被检出双氰胺化学残留物的情况，国家质检总局已紧急与新西兰相关部门取得了联系，要求对方尽快提供详细信息，包括奶粉中检出双氰胺物质的含量，涉及的奶粉具体品牌、产地、批次等具体情况。　　据了解，乳制品是新西兰的主要出口商品，其95%的乳制品用于出口，中国是新西兰乳制品最大的出口市场。目前中国市场上进口的新西兰大包奶(包括脱脂奶粉、全脂奶粉)占到了中国总进口量的80%，而新西兰乳制品占到了中国全进口婴幼儿食品的40%左右。　　双氰胺限量标准缺失　　专家指出，目前乳制品中的双氰胺尚没有国际限量标准。而新西兰作为乳制品的出口大国，向中国出口奶粉的除了新西兰本土的乳制品品牌外，更多的则是以新西兰为奶源地的众多“洋奶粉”和国产品牌。　　新西兰第一产业部发布的消息显示，在接到恒天然在牛奶制品中检测到微量残留物后，立刻成立了由初级产业部、恒天然和化肥公司组成的工作小组。工作小组的结论是，尽管残留物极其微量，尽管国际上没有有关双氰胺在食品中的含量标准，但牛奶产业是新西兰的支柱产业，新西兰对奶制品的标准是高标准、零容忍，因而决定停用双氰胺。　　中商流通生产力促进中心乳业分析师宋亮表示，新西兰奶粉主要出口到海外作为奶粉制造商和供应商的原料粉来源。由于新西兰奶粉主要作为原料奶，全球60%的奶制品企业和乳品供应商采用新西兰奶源的奶粉。　　事实上，中国市场上的新西兰奶源奶粉，并不仅仅只有可瑞康等新西兰奶粉品牌，光明旗下的培儿贝瑞奶粉等多个国产品牌也同样是“新西兰奶源”。另一些“洋奶粉”则只对产品标称为“全进口”、“进口奶源”，对奶粉的具体“血统”更是多以含糊带过。比如，雅培0到12个月金装喜康宝婴儿配方奶粉，原料奶是“100%新西兰、美国、欧洲优质奶源”。　　“洋奶粉”难过安全关　　恒天然集团并不是第一个栽在安全关的乳制品企业。事实上，近年来，包括美赞臣“金属门”、日产奶粉“缺碘门”在内的“洋奶粉”安全负面事件层出不穷。　　国家质检总局从2011年7月到2012年8月公布的每月进境不合格食品名单上，先后有34个批次超过270吨不合格进口奶粉被销毁或退货，其中以婴幼儿奶粉居多。记者发现，包括德国产的“泓乐”、新西兰产的“可益多”、澳大利亚的“亨氏”在内的多个品牌产品均“黑榜有名”。　　中国农业大学食品科学与营养工程学院副教授朱毅表示，根据目前已知情况分析判断，此次新西兰奶粉双氰胺残留事件并非是奶粉加工过程中蓄意添加，而是牧草使用了氮肥增效剂双氰胺，奶牛吃了这种牧草后，在奶中残留的。双氰胺毒性小于三聚氰胺，消费者不必太惊慌。　　但他强调，中外奶粉企业都应积极采取措施，在技术允许范围内最大限度地减少双氰胺残留值。同时他建议可以采取双氰胺婴儿奶粉每公斤1毫克的限量值标准来评估其安全风险。

ELISA实验的原理似乎很简单，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗涤和封闭。然而，即使是平淡无奇的洗涤和封闭，如果做得不太好，也有可能毁了整个实验。在实验结束时，我们是否能获得有意义的信息，ELISA试剂盒这在很大程度上取决于结果的信噪比。ELISA试剂盒背景噪音会影响您对结果的判断。如何降低ELISA的背景，下面有一些tips。洗涤很重要　　洗涤步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料（如非特异结合的抗体或检测试剂）残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。封闭更关键　　封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、ELISA试剂盒吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。　　ELISA实验最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用，ELISA试剂盒因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会降低特异结合，产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液，后者可协助洗涤过程中的封闭。　　蛋白封闭液则有所不同，是永久的。它们与开放位点结合并封闭，同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。抗体浓度须优化　　ELISA实验我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤，ELISA试剂盒但是如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。记住，非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。检测试剂要适量　　另一点也很显而易见：切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液。

沸沸扬扬的青海再现三聚氰胺奶粉事件，引发了全国乳制品行业一阵重新检查之风。作为向青海省民和县东垣乳制品厂提供问题乳粉原料的犯罪嫌疑人而被公安机关抓获的周忠林正是周忠华弟弟。　　7月19日晚，周忠华告诉记者，周忠林是经手销售往青海的三聚氰胺奶粉的中间人，他对该批奶粉含三聚氰胺并“不知情”，货是周忠林从一位孙姓行业人士处购得，而孙的货则来自河北，由一位戴姓奶粉生产方提供。“姓戴的应该是三鹿那边的，河北的奶粉生产原来都挂三鹿的。我今天听说，姓孙和姓戴的两人都被抓了，厂子也找到了。”　　而周忠林曾经的乳业漂泊经历折射出了中国乳业小企业的乱象与困境。　　乳业“漂泊者”　　1977年，周忠华从西北农大毕业后回到老家陕西泾阳县乡里的中学教书。次年底，咸阳市招干，他挤上“最后一班车”，凭借畜牧兽医专业的大学文凭来到了泾阳畜牧站，并使泾阳成为远近闻名的奶山羊县。此后，周忠华又在任兴隆乡副乡长期间大张旗鼓地搞起了奶牛养殖。　　此后的经历让周忠华成了泾阳县志中经济人物之一，县志中记载：“1993年，考虑到县域及邻近地区鲜奶加工能力不足导致群众‘奶贱杀牛’的实际，(周忠华)毅然辞去公职，开始租赁经营已经停办的咸阳市底张镇乳品厂，不到一年时间，企业起死回生。1999年，企业发展成为拥有1600万元资产，百余名员工，年产值1100万元的陕西省咸阳康华乳品有限责任公司。”　　故事的实际过程并不如县志中的描述这般顺风顺水。周忠华1993年离开畜牧站之后，接手了两家分别停产了3年和10年的乳品厂——后来改名为咸阳乳品厂的底张镇乳品厂和另一家名为“方里”的奶粉厂，在1994年又去山西接手了一个乳品厂。1994年，初中毕业后在外面做了几年炊事员的周忠林过来给周忠华帮忙。“饭做得不错”但字写得像“蚂蚁爬过去一样”的周忠林，就此管起咸阳乳品厂的奶粉销售。　　根据中国轻工业信息中心此前的数据，1999年乳制品行业内绝大多数亏损，有1200多家乳制品企业日加工能力在20吨之下。这些小企业不少均生产奶粉——生产奶粉的主要设备为浓缩设备和喷雾干燥设备，属于传统技术，易掌握。　　周忠华说，自己在咸阳乳品厂的经营理念经常被视为异端——“大家都反对，包括同行都反对。”反对者中就包括自己的弟弟周忠林——后者既反对比他大三岁的哥哥“搞奶粉也需要搞养殖、草地等一系列配套”的思路，也反对哥哥1997年上脱脂奶粉生产线的决策。　　原因很简单，周忠华自认为正确的理念并不能转化成看得见的利益。2001年年底，周忠林离开咸阳乳品厂，但与人合股搞的全脂奶粉厂半途停滞，他买下合伙人的股份销售了几年奶粉。　　在周忠华的描述中，周忠林接手的奶粉厂在渠道中拖欠的货款太多，“没赚几个钱”又在2007年卖出了厂子。而在此期间，周忠华的咸阳康华乳品有限责任公司(由咸阳乳品厂改名)也在阜阳“大头娃娃奶粉”风波中严重受损。　　周氏两兄弟都来成了乳业又一个赚不到钱也离不开的“漂泊者”。卖厂之后，周忠林在甘肃临洮县又跟人合伙办了一个厂，“刚办起来，时间不长就赶上三鹿这个事。”　　三聚氰胺风波后，地方政府希望周忠林的乳品厂持续生产以支持奶农，“政府要求他必须开厂，给政府解围，当时政府借了他150万让他继续生产，但很快就赔完了”。周忠林随后退出临洮的这个乳品厂。　　奶粉调拨与中间人　　一位乳业业内人士告诉记者，周忠林的经历在行业内非常典型——“大公司抢奶的时候，小奶粉厂得不到奶源就关门了。而等到大公司撤出这片地方的时候，奶农卖不出奶，小奶粉厂又开张了。”　　上述人士认为，近十年来高速增长又伴随着数年一次危机事件的奶粉市场，使得中国数以千计的中小奶粉厂开开停停，这导致了市场长期存在库存奶粉以及相应的奶粉调拨——奶粉厂买入奶粉“生产”奶粉，使得奶粉“掮客”应运而生。　　这些中间人许多都是曾在乳业中摸爬打滚过的“漂泊者”，他们不但可以买低卖高，向中小奶粉厂倒卖奶粉，甚至有机会把生意做到大奶粉厂。“许多(业内)人相信，原料奶粉即使有问题，稀释(奶粉厂加入其他来源的奶粉或食品经营者掺入其他原料)之后问题也不大。问题奶粉很难真正退出市场。”　　青海三聚氰胺奶粉风波之前，周忠林在北京找到一个合伙人，准备借康华的场地与部分设备搞碳化硅的太阳能项目，项目投产准备期间接到过去有往来的东垣乳制品厂来电，说需要一批奶粉。　　周忠华辩解说，周忠林把这单子交给了河北一个姓孙的人，还叮嘱后者“把质量弄好绝对不能出问题”。姓孙的中间人说：“‘没问题，这你放心，质量绝对没问题。’”　　6月25日，甘肃省质监局产品质量监督检验中心接受委托人刘西平送检的三份奶粉样品，要求检测三聚氰胺指标。检测结果，三份样品中三聚氰胺均严重超标。青海再现三聚氰胺奶粉事件由此揭盖。　　此后，周忠华发现，卷入这一轩然大波的弟弟，居然不清楚奶粉的实际来源，立即让后者停下手头的太阳能项目飞往河北，百般周折找到孙姓中间人。“最后给他做了半天工作，才把上线说出来了。”7月8日，周忠林带着接收奶粉款项的银行卡出门向质监局与公安局反映自己了解到的情况。同时，周忠林还背负着有200多万元个人借款与奶农欠款的厂房里进行着的尚未完工的新项目。　　“现在好多人见了我就说，忠华你那个时候如果搞房地产就好了，你当时搞房地产要比现在搞房地产发达的人条件可要好多了嘛。”周忠华自嘲自己的乳业经历说，“你门进错了嘛。”

pspan style="color: rgb(255, 0, 0) "strong　　一、引言/strong/span/pp　　乳制品含有的蛋白质、脂肪、乳糖和其他固形物等具有较高的营养价值，是促进人体生长发育及维持健康水平的必需营养成分。目前市售的奶粉品种众多，质量参差不齐，在巨大的经济利益驱动下，出现了“阜阳奶粉事件”、“还原奶事件”、“光明牛奶回奶事件”、“雀巢奶粉事件”以及“三聚氰胺事件”，这些都说明了牛奶质量控制的重要性和紧迫性。那么如何为牛奶生产厂家确保原料奶的质量，并准确、快速地对流水线生产中的各个关键点进行控制?/pp　　传统的奶制品质量检测用化学分析方法，主要有气相色谱、液相色谱、电泳、PCR和免疫ELISA等，取样化验过程复杂，实时性较差，大大影响了生产效率，而且往往涉及专用仪器与分析方法、耗费时间较长、分析过程繁琐、分析费用高，增加了现场检测及在线质量控制的难度。国家也出台了一系列相应的国家标准检测方法，如原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法(GB/T22388-2008)和原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法(GB/T22400-2008)等。面对目前日益增长的市场需求，传统化学分析方法的效率已经明显滞后，开发快捷灵敏、无损易行的现代分析技术，对乳品生产的质量监控具有重要的意义。/pp　　分子光谱技术(包括近红外，中红外等)是20世纪80年代后期迅速发展起来的一项测试技术，在欧美等国，它已成为乳制品成分分析的重要手段，并为乳品权威分析机构，如国际乳品联合会 (IDF)以及美国分析化学家学会(AOAC)等权威机构所认可。随着我国乳品行业的发展，采用快速、准确、可靠的乳品分析技术以适应WTO的要求已成为当前乳品企业发展的关键所在。目前，国内外许多乳制品厂家，如蒙牛、伊利、雀巢，光明、君乐宝等已经将FOSS公司的分析解决方案(包括中红外和近红外光谱分析仪)用于原奶收购和生产过程的质量监控。/ppstrong　　span style="color: rgb(255, 0, 0) "二、红外/近红外分析技术在乳品行业的使用现状/span/strong/pp　　随着社会对乳制品质量安全的不断重视，目前乳品企业对奶粉的质量把控越来越严格，奶粉的理化指标，如脂肪、酸度、乳糖、蛋白、蔗糖、水分和灰分等通常决定了奶粉的类别和质量，只有在生产过程中严格检测和把控这些指标才能生产出合格的奶粉。目前传统的奶粉检测方法对于这些理化指标的检测耗时长且繁琐，而奶粉的生产过程是一个连续的过程，长时间的分析检测无法满足奶粉生产过程中的有效控制。红外/近红外光谱分析技术以其快速、多组分和无损分析的特点在农牧业食品石油化工等行业中被广泛应用，同样在奶粉的检测中潜力巨大。/pp　　目前国内奶粉的生产工艺一般包括原料乳验收→预处理与标准化→浓缩→喷雾干燥→冷却储存→包装→成品，在整个过程中有多个关键控制点需要检测多个指标，而这些点非常适合使用红外/近红外光谱分析技术进行快速分析。据了解，国内目前约有90%以上的规模化生产的乳粉企业都在采用红外/近红外光谱技术对其从原料奶、中间配料以及最终的奶粉实现全程化的监控和控制。目前国内几家大的乳粉企业，如伊利、蒙牛、雀巢、君乐宝、飞鹤等均已将这些红外/近红外的快速检测技术应用于如下几个环节的监控中，取得了不错的效果，既保证了产品质量的一致性，又最大程度的节约了生产成本。/ppstrong　　1. 原料乳验收/strong/pp　　原料奶位于乳业产业链的最上游, 其质量安全将直接影响到乳品的质量与安全, 从这个意义上讲, 能否从源头上紧抓原料奶的质量控制, 将直接关系到整个乳业的质量安全。通常在牛场仅对牛乳的质量做一般的评价，在到达乳品厂后需要通过若干检验对其成分和卫生质量进行测定。乳品企业一般实行“以质论价，优质优价”的政策或办法，可以鼓励奶农自觉改善饲养管理，提高原料乳质量，同时有利于企业对原料乳的分级处理。/pp　　我国部颁标准规定原料乳验收时的理化指标包括脂肪、蛋白质、酸度、密度、抗生素等等。为了防止牛奶兑水，通常会检测液体乳的冰点，因为兑水后的牛奶冰点会升高。目前，对于液体原料乳中脂肪、蛋白、酸度等的检测，大多数乳企使用基于傅里叶变换的中红外光谱分析技术 (a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C193216.htm" target="_blank" style="text-decoration: underline "span style="color: rgb(0, 112, 192) "如FOSS的MilkoScan FT1乳品分析仪/span/a)，这种检测方案不仅仅用于原料乳的按质论价，同时也应用于液体乳制品生产过程以及成品控制。同时，中红外光谱技术还可以通过与天然鲜奶拥有的特定光谱进行比对，迅速发现可疑的鲜奶样品，对提高乳制品的质量和保护消费者的利益具有重要的意义。/pp　　strong2. 预处理及标准化/strong/pp　　在全脂奶粉的生产中，标准化主要是通过对原料乳的脂肪含量调整，使之达到成品的标准要求(即原料乳中的脂肪含量与无脂干物质含量的比值达到乳粉的标准化值)。/pp　　在配方奶粉生产中，通常需要根据目标人群进行配方设计，调整宏观成分含量，并在对液体乳进行预处理后，加入一定的添加剂，如婴幼儿配方粉需要尽量调整乳品中各组分的含量模拟母乳。在这个过程中，营养组分的调整，添加剂量的控制都会影响最后生产的乳粉是否合格。而检测不合格的产品通常会要返工处理，提高了生产成本和时间成本。在这个处理过程中，有效的监督检测手段必不可少，目前全球有超过85%的大中型乳品企业(如Arla Food，Nestle, Fonterra，以及国内的伊利、君乐宝等)已经使用了Milkoscan FT1乳成分分析仪进行旁线分析，实现标准化过程中快速分析反应，有效的减少了产品的波动，即时调整配方配比，提高了生产效率，产品稳定性也大大提升。/pp　strong　3. 真空浓缩与喷雾干燥/strong/pp　　从液态奶变成固体奶粉，需要进行干燥工艺，首先对液态乳进行真空浓缩，真空浓缩能够节省能量，对奶粉颗粒的物理性状有显著影响。液态乳经过浓缩后，喷雾干燥时，粉粒较粗大，具有良好的分散性和冲调性，能迅速复水溶解，可以改善乳粉的保藏性等。所以在真空浓缩时原料乳浓缩的程度直接影响乳粉的质量，特别是溶解度。在真空浓缩时，通常要求浓缩程度越高越好，因为一般真空浓缩的时间要比喷雾干燥节省至少10倍，但是浓缩至太高的浓度对于后续的喷雾干燥又存在不利影响，因此对真空浓缩水分的实时控制能够节约生产成本，提高生产效率。/pp　　浓缩后的乳打入保温罐内，立即进行喷雾干燥。喷雾干燥直接影响乳粉的溶解度、水分、杂质度、色泽和风味，对产品质量影响很大。喷雾干燥过程中对乳品水分的控制非常重要，奶粉要求水分为2.0～5.0%，若为4.0～6.0%，也就是水分提高到3.5%以上，就会造成奶粉结块，则商品价值就低，同时，水分提高后奶粉易变色，贮藏期降低 当乳粉水分含量提高至6.5～7.0%时，储存一小段时间后，其中的蛋白质就有可能完全不溶解，产生陈腐味，同时产生褐变。此外，奶粉的水分含量过高，还可能导致营养素损失、微生物滋长、奶粉结块变质等问题。但乳粉的水分含量也不宜过低，否则易引起乳粉变质而产生氧化臭味，一般喷雾干燥生产的乳粉水分含量低于1.88%时就易引起这个缺陷。/pp　　常规的水分检测方法测量速度和准确度一直存在一定的矛盾，而水分对于乳粉生产非常重要。为了解决这个问题，目前乳品企业常使用近红外光谱分析技术(a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C132525.htm" target="_blank" style="color: rgb(0, 112, 192) text-decoration: underline "span style="color: rgb(0, 112, 192) "如FOSS的近红外分析方案NIRS DS 2500/span/a) 进行干燥过程的控制。/pp　　与传统方法相比，近红外光谱分析技术具有测量速度快、操作方便、不破坏样品、不用前处理试剂等特点，目前，乳企使用近红外光谱仪做旁线检测，检测一个样品时间小于1分钟，检测速度频率大幅提高，控制基本实现实时性 而且近红外仪器稳定，具有IP65防水防尘级别，能适应车间环境 现场操作非常简单，样品直接装入样品杯中，装样简单不易出错，多组分结果直接显示，不需要专业的人员对数据结果进行分析，生产线普通工人都能进行分析操作。大大提高了生产效率，节约了生产成本，提高了产品质量。/pp　　除了旁线分析外，现在逐渐流行的在线检测能够实现生产过程真正的实时质量监控，能做到有问题即时发现，如果与生产控制系统直接对接，能实时调整喷雾干燥生产工艺，对奶制品质量控制有着重大的意义。目前国内已有乳粉生产企业(如君乐宝，飞鹤乳业)引入a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100345/C335078.htm" target="_blank" style="color: rgb(0, 112, 192) text-decoration: underline "span style="color: rgb(0, 112, 192) "FOSS的Profoss/span/a近红外在线检测解决方案，在乳粉生产中进行高频率、高分辨率的生产过程控制，控制水分的含量，获得稳定的水分、脂肪和蛋白含量，使生产更接近于目标规格，提高了产量，获得了最佳的物质平衡。而且，减少了返工、开工波动，以及不必要的重复劳动，生产效率得到极大的提高，基本上在一年左右能收回投资。/pp　　strong4. 成品质量控制/strong/pp　　在喷雾干燥冷却后乳粉便要进行包装出厂，包装出厂的乳粉必须经过检测分析合格后才能出厂销售。如婴幼儿配方奶粉，通常需要检测蛋白质、脂肪、水分、乳糖、酸度和灰分等等理化指标，这些理化指标使用常规检测方式进行全部检测需要几天的时间，费时费力，而且受化验室人员化验水平影响较大。目前乳品企业使用近红外光谱仪，进行成品分析，可以快速测定婴幼儿配方奶粉中的水分、蛋白、脂肪、酸度、灰分、乳糖等指标，单个样品测量耗时在1分钟内，以上所有指标同时测出，快速高效，同时也避免了由于人员操作误差导致的检测一致性差的问题。/pp　　综上所述，在奶粉的整个生产工艺中各个关键控制点，几乎都可以使用红外/近红外光谱技术进行分析检测，通过使用红外/近红外分析技术对奶粉生产过程的监控能有效提高产品的合格率，在企业的成本控制，以及为消费者提供安全合格乳制品方面具有非常好的实际效果。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 305px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/3663ffed-3880-4cfd-bc5a-2087797f79f1.jpg" title="微信图片_20190812103309.png" alt="微信图片_20190812103309.png" width="600" height="305" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center "strong红外/近红外技术用于乳粉生产过程中的检测控制点/strong/pp　　红外/近红外技术以其快速，操作简单为乳企的整个生产链条提供了巨大的便利，但在实际使用红外/近红外技术进行从原料奶到成品奶粉的检测过程中，采用的检测模块或者模型的准确性显得尤为重要。一个预测性能良好的模型一定是基于前期大量数据库的积累而来的，建模数据的指标范围，建模数据对应的样品量，以及采用的建模方法等均决定了后期模型的准确程度，所以在目前的红外/近红外推广和使用过程中，提供硬件性能可靠的红外/近红外检测方案的同时，配备的检测模块或者模型的预测性能显得尤为重要。以a href="https://www.instrument.com.cn/news/20190812/490937.shtml" target="_blank"DS 2500/a近红外检测分析仪在奶粉检测中所配备的数据库情况为例， 从目前主要客户的使用效果来看，预测效果好，数据准确性高，能够帮助客户很好的指导生产。/pp　　目前a href="https://www.instrument.com.cn/news/20190812/490937.shtml" target="_blank"DS 2500/a近红外分析仪配备的配方奶粉、脱脂奶粉、乳清粉等奶粉模型预测性能如下：/ptable border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="551" align="center"tbodytr class="firstRow"td width="93" rowspan="8"p style="text-align:center "全脂奶粉及婴幼儿配方奶粉/p/tdtd width="66"p style="text-align:center "成分/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "定标范围/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "定标误差(SECV)/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "定标样品数量/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "相关系数/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "水分/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "1.54-4.50/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.17/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "4640/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.90/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "蛋白/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "9.50-31.02/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.35/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "4468/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.99/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "脂肪/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "5.09-39.31/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.40/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "4313/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.99/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "酸度/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "4.91-14.91/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.89/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "3785/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.75/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "灰分/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "2.55-6.10/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.07/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "1373/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.99/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "乳糖/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "33.44-58.22/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.54/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "1151/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.98/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "蔗糖/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "0- 18.81/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.42/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "1267/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.98/p/td/trtrtd width="93" rowspan="3"p style="text-align:center "脱脂奶粉/p/tdtd width="66"p style="text-align:center "水分/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "2.67-4.34/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.11/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "1425/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.85/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "蛋白/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "31.23-38.59/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.22/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "898/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.97/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "脂肪/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "0.37-1.13/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.02/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "558/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.97/p/td/trtrtd width="93" rowspan="5"p style="text-align:center "乳清粉/p/tdtd width="66"p style="text-align:center "水分/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "2.43-6.69/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.46/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "494/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.80/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "蛋白/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "60.02-90.26/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.92/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "596/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.97/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "脂肪/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "3.44-9.88/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.13/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "379/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.99/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "灰分/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "2.09-5.44/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.03/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "362/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.99/p/td/trtrtd width="66"p style="text-align:center "pH/p/tdtd width="102"p style="text-align:center "6.4-6.95/p/tdtd width="75"p style="text-align:center "0.02/p/tdtd width="124"p style="text-align:center "486/p/tdtd width="91"p style="text-align:center "0.96/p/td/tr/tbody/tablepstrong　　三、红外/近红外分析技术在国内乳品行业的应用前景/strong/pp　　前已述及，红外/近红外分析技术不需要样品的准备过程，是一种无损化的分析技术，同时该项技术具有快速准确的特点，能够满足实时、快速分析的要求。只要提供稳定可靠的定标，就可以对待分析样品给出准确的分析结果。随着我国乳品行业的发展，红外/近红外光谱分析技术必将逐步取代目前在国内占主流的传统化学分析方法，在乳制品及其相关行业发挥越来越大的作用。另外，随着乳品行业有关红外/近红外相关标准的逐步引入，未来红外/近红外技术在乳品行业也必将像饲料、粮油和纺织等其他行业有章可依、有据可鉴。/pp　　基于近几年乳品行业发展的特点，个人认为未来国内红外/近红外技术在乳品行业的应用有以下两方面需求：/pp　　其一，目前在国内，红外/近红外技术在乳品行业的应用以液态奶和乳粉的快速检测为主，主要因为国内目前乳品行业的消费产品类型(只包括液奶和乳粉)相对比较单一。在欧美诸多国家，红外/近红外技术在奶酪、黄油、稀奶油、浓缩乳清等类型样品的检测中已经发挥着很大的作用，可以预期随着国家由“喝奶”向“吃奶”的消费导向的普及，国内消费者对于奶酪，黄油等的消费需求会有所上升。后期，红外/近红外技术应用于奶酪、黄油以及浓缩乳清等样品的检测也必将逐渐深入。/pp　　其二，国外的液体乳主要以保鲜的巴氏奶为主，这与其完善的冷链系统及经济水平有关。近几年我国的液体奶市场增长迅速，但主要以保质期较长的UHT奶为主。随着我国乳品工业的发展和人们对液体乳新鲜度的要求，近几年，国家大力推广“优质乳工程”，倡导企业生产新鲜度更高，营养更丰富的优质乳。/pp　　加入国家“优质乳工程”的企业对奶源有了更高的要求，如更低的体细胞和细菌数，更高的蛋白和合理的脂肪含量，同时，对一些功能性指标(如乳铁蛋白，糠氨酸等)的检测也提出了要求。由此可见，随着国家“优质乳工程”的实施，企业自身的检测需求必将促使红外/近红外快速检测技术朝着准确度要高，检测指标更全面等方向进行改进和提高。可以预期，未来的红外/近红外检测技术不仅要准确地检测脂肪、蛋白、总固等常规指标，而且也需要具有检测一些功能性新指标，如巴氏奶和鲜奶中的乳铁蛋白，以及UHT奶中的糠氨酸等方面的检测能力。/pp style="text-align: right "span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strong（供稿：FOSS 罗海峰）/strong/span/p

作为生命科学的重要分支，动物科学的基本任务是在认识和掌握动物遗传变异、生长发育、免疫学、繁殖消化代谢等生命规律的基础上，为人类提供质优量多的动物产品。而其中的免疫学研究对于贯穿整个动物科学起到了中枢纽带的作用。 谈到免疫学，映入大家脑海中的一定是生物体抵抗各种细菌和病毒的场景，没错，大家的直觉很有道理！其实，免疫学是一门研究生物体对抗原物质免疫应答性及其方法的重要科学，也是各种生物疾病防治的基础。小O同学对此也一直甚有兴趣，恰巧今天有幸跟免疫实验室来一场近距离接触，快来一起看看吧！ 趣味源自深奥之免疫实验室 我们要参观的是位于我国东南沿海地区的一所农林高校，这是全国建校最早的农林院校之一，也是福建省重点建设3所高水平大学之一，小O同学将带领大家在神秘的动物科学学院开启我们的发现之旅。 在动物科学的免疫学研究中，酶免疫测定（Enzyme Immunoassay，EIA）是一种对液相内微量物质至关重要的测定技术，其分为酶联免疫吸附实验（ELISA）和酶免疫组化技术，前者用于测定可溶性抗原或抗体，后者用于测定组织或细胞表面的抗原。我们要讲的故事将围绕酶联免疫吸附试验（ELISA）展开。 ELISA是酶免疫测定技术中应用最广的技术，其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的ELISA法有双抗体夹心法、直接法、间接法等。接下来，实验室的老师将采用检测抗体最常用的间接法为你展示精彩的ELISA实验。 首先，抽取鸡的新鲜血液，离心后取上清液，并使用磷酸缓冲盐溶液（PBS）进行1:100的稀释，静置； 接下来，进行包被抗原，即将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原，保持4℃过夜孵育，然后加入5%的脱脂奶粉进行封闭，洗涤三次，除去未结合的抗原及杂质； 第三步，加入待检血清（一抗），保持37℃孵育1小时，之后加入PBS在室温条件下进行5分钟的洗涤，抛干； 第四步，加入酶标抗体（二抗），保持37℃孵育1小时，之后加入PBS在室温条件下进行5分钟的洗涤，抛干； 最后，加入底物显色，保持37℃反应30分钟，并加入2 mol的硫酸溶液进行终止。然后就可以用ELISA检测仪测定OD值（光密度），并计算出P/N比值（阳性血清与阴性血清之比）。卓越实验的完美主义者——奥豪斯微孔板摇床 在整个ELISA实验过程中，有多个过程需要进行摇荡混匀的操作，首先是样品和试剂的混匀，包括稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证实验的持久性和均一性；其次是洗板洗涤的过程，需要将特异结合于固相的抗原或抗体与反应孵育过程中吸附的非特异成份分离开来，以保证ELISA测定的特异性。洗板对于整个实验过程也是极其关键的一步，洗液尽量不要溢出孔外，这就对于摇荡的稳定性有很高的要求。 之前该实验室采用的摇荡混匀方法效果欠佳，尤其是稳定性和可控性不能保证，经常会出现样品稀释地不均匀，或在洗涤过程中由于设备振动发生洗液溅出孔外的现象，从而造成操作台污染。这对于敏感性和清洁性要求很高的ELISA实验显然是不能接受的。 潜移默化源于亲密接触。一切陈旧糟糕的实验效果自一个身手敏捷的小家伙初次光临实验室的那天起戛然而止，可不要小瞧，它不光极大地提高了环境适应性，更重要的是有效地保障了实验安全性，带来的“化学反应”都令实验室的工作人员们叹为观止。看到下面这台仪器了吗？没错，我们说的就是它——奥豪斯数显控制轻负载微孔板摇床！扁平的机身设计占用空间更少，可轻松放入大多数通风橱或培养箱，橡胶吸盘基座提供了更高的耐久性和稳定性。同时，反应灵敏的“神经中枢”——微处理控制器和功能强大的心脏——三偏心轴平衡驱动的无刷直流电机能够确保一致均匀的摇荡动作可靠运行，并对摇荡过程中任何突发情况进行灵活有效的应变。尤其是缓慢升速设计能将速度缓慢安全地提升至目标设定值，以免微孔板的样品溅出；另外，当系统检测到障碍物或托盘过载时，将发出声光信号警报。整款产品的智能性大大提高了实验的自主权，从而节约了人工辅助操作的成本。 俗话说，工欲善其事，必先利其器。一台性能优异的实验室设备对顺畅的实验流程可是至关重要。如果您想了解更多摇床系列或奥豪斯其他实验室设备的产品信息，或正在寻求更专业细致的选型指导，请速速联络我们，我们专业的工程师们欢迎随时来骚扰哦！

双十一结束小奥的购物车都清空了没法儿给你抄了我借ELISA实践笔记给你抄快到期末/年底了实验汪们可要抓紧搬砖咯前面三份笔记拉到文末看哦以下，可都是尖货儿哟！??Part 1 —— 前 言 | ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是最为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法，其实质是亲和力测定方法的一种变种，其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法，用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点：1.待测样本极具多样性，且单一样品通常也是混合物，有很大的可能存在非特异吸附；2.不同的待测样品之间可能存在较大的浓度差异，浓度的大小和亲和力的大小均会对检测结果产生影响。在进行杂交瘤和噬菌体展示筛选方法开发时，需要选择合适的条件使信号值主要能够表征亲和力的大小而一定程度上忽略浓度差异造成的影响。本文是ELISA定量测定方法开发和亲和力测定方法开发的进阶版本，配体受体反应的基本原理解析，和两种应用的差异性区分是进行ELISA筛选方法的开发的基础。 Part 2 - 原理解析 - ELISA信号值和亲和力大小的关系 无论是进行杂交瘤的筛选还是噬菌体展示的筛选，其化学原理的实质是抗体和抗原可逆的相互作用，John McCafferty在Phage Display of Peptides and Proteins A Laboratory Manual一书的第七章节Phage Display：Factors Affecting Panning Efficiency中对可逆反应的数学原理有过理论的推导和实验的验证，简而概之可以用下面的公式进行描述：Abinput代表可逆反应中抗体的加入量，Aginput 代表可逆反应中抗原的加入量，Kd代表Ab和Ag的亲和力大小。由公式可知，当反应完成时，形成的抗原抗体偶联物占抗体的加入量的比值（proportion bound），是一个与抗原的加入量和亲和力大小这两个参数相关的特征函数。具体在ELISA测定过程中当抗体的加入量是恒定值时，proportion bound可以用检测的信号值来等价表示，在ELISA反应中抗原的加入量和Kd将决定信号的大小。相同浓度的抗体，因为亲和力不一样，在同一抗原浓度下其proportion bound的比例也不一样，用具体的图形演示如下图：红色实线是亲和力为1nM的抗体Ab1随抗原浓度变化其proportion bound的函数曲线，蓝色实线是亲和力为10nM的抗体Ab2随抗原浓度变化其proportion bound的函数曲线，绿色虚线为在相同抗原浓度下，Ab1/ Ab2 proportion bound的比值。在抗原浓度为10nM的条件下，90%的Ab1(Kd=1nM)和50%的Ab2(Kd=10nM)能够形成抗体抗原偶联物，作为ELISA检测的信号值，Ab1，Ab2亲和力10倍的差异反应到ELISA信号值上1.8倍的信号差异；在抗原浓度为1nM的条件下，50%的Ab1(Kd=1nM)和9.1%的Ab2(Kd=10nM)能够形成抗体抗原偶联物，作为ELISA检测的信号值，Ab1，Ab2亲和力10倍的差异反应到ELISA信号值上5.5倍的信号差异；在加入的抗体浓度是相同的情况下，加入反应的抗原的浓度越少，ELISA信号比值的差异和抗体亲和力比值的差异更具相关性。抗原的浓度决定了ELISA筛选方法的选择性！以上是关于杂交瘤和噬菌体展示筛选理论状态的推导，也是ELISA筛选结果出来了做出客观解读的理论依据，在实际的筛选应用过程中由于不同的待测抗体样品之间可能存在较大的浓度差异。在抗原浓度较高的情况下ELISA信号差异很多情况下由于抗体样品的浓度差异导致的，ELISA信号值对于亲和力大小不具有选择性；只有在抗原浓度较低时，信号值主要能够表征抗体亲和力的大小而一定程度上忽略浓度差异造成的影响，而在ELISA方法开发时当抗原浓度较低时，相对于抗原浓度较高时，其ELISA信号值要弱很多，提升ELISA方法信号的灵敏度，如何通过优化酶联抗体的浓度，挑选显色液和选择显色时间以增强ELISA检测的信号值是一个有区分度的ELISA筛选方法的关键。当ELISA检测的信号值得到提升时，由于筛选样品复杂性，往往其背景信号也会极大的提升，如何通过封闭液，酶标板材等降低背景信号值，得到好的信噪比是一个高质量的ELISA筛选方法的另一个关键。Part 3 - 实例分享 - ELISA用于噬菌体展示筛选布 局——————(Note 1)一 般 操 作 流 程1.酶标板的制备取浓度为100 ug/ml抗原，室温溶解，混匀用包被液按如下步骤稀释至0.2ug/ml，0.5ug/ml，1ug/ml，按加样布局表加入100ml/孔，分别加入酶标板条中 (Note 2)，其中加入包被液做包被抗体的空白对照，2-8℃过夜。2.用洗涤液洗板3次，拍干，加入300ml/孔封闭液(Note 3)室温封闭1小时；洗涤液洗板3次，拍干待用；3.取出包含有阴性对照和阳性对照过夜孵育制备含有噬菌体的深孔96孔板，在奥豪斯高速离心机中2000g离心15min，取上清，稀释10倍，一一对应加入包被好酶标板中。(Note 4)4.放入奥豪斯微孔板振荡器内 (如ISLDMPHDG- 30391935)，设置37℃、600rpm振荡1小时； 5.用洗涤液洗板3次，拍干；6.抗M13 p8酶联抗体稀释到合适的浓度（Note 5），在漩涡混合器上（如VXMNFS-30392112）混匀，100ul/孔。7.放入微孔板振荡器内，设置37℃、600rpm振荡1小时； 8.用洗涤液洗板4次，拍干；9.取酶联抗体对应的TMB显色液，临用前20分钟拿出平衡到室温，在漩涡混合器上混匀；（Note 6）10.使用8道排枪以100 ml/孔加入TMB显色液；11.显色液室温避光放置10-30分钟 （Note 7）；12.使用8道排枪以100ml/孔加入终止液终止反应；13.用酶标仪测定信号值；14.结果分析（Note 8）。Note1：由于不同的噬菌体样品有不同的亲疏水性，其对酶标板材的非特异吸附强度不一样，做一块没有抗原包被的阴性对照板是十分有必要的。Positive和Negtive是和样品有同样噬菌体制备过程，Positive Stock为早已经制备好的分装保存的阳性噬菌体，前者目的是监控在不同时间内噬菌体样品制备过程的差异，后者是监控在不同时间内ELISA检测操作的差异。Note2：在包被过程中，建议选择疏水性酶标板材（polysorp）,这样可以极大的减少背景信号值，提高整个方法的信噪比。在实验初期包被的抗原浓度需要少量0.2-1ug/ml，然后根据不同包被条件下同一样品信号大小来进行判断优化。一个已知亲和力的展示阳性抗体的噬菌体是十分有必要的，根据该阳性展示噬菌体样品的信号值来确定最终筛选过程中抗原的包被浓度。抗原直接包被酶标板材上会屏蔽部分结合位点，造成部分假阴性的结果，如果条件允许可采用生物素化抗原，首先5ug/ml的链霉亲和素包板，然后加入0.05-0.2 ug/ml不等的生物素化抗原。抗原直接包被和间接包被其效率不太一样，采用间接包被可适当降低生物素化抗原的包被浓度。Note3：在有生物素化抗原参与的ELISA实验中，不要加入含脱脂奶粉的封闭剂，脱脂奶粉含有微量生物素，会干扰整个检测体系。Note4：噬菌体上清液的稀释比例，可提前根据阳性噬菌体样品做好稀释预实验进行确定。Note5：应选择抗噬菌体的P8蛋白的酶联抗体，噬菌体有2000个以上的P8蛋白，适当的增加酶联抗体的浓度可以提高方法的灵敏程度，笔者曾增加5倍的酶联浓度得到了3倍的信号提升。Note 6：市面上TMB底物最低和最高有10倍的显色差异，建议选择市面上最强的TMB显色底物。需要提前确认检测仪器的信号线性范围，比如一般的酶标仪吸光度值的信号线性范围在0-3，吸光度值在3-4之间为非线性的，信号值超过3时，信号和亲和力的相关性变差。Note 7：显色时间可适当的延长，一般来说在30分中内显色的信号值和显色的时间成线性。Note 8：条件的选择最终是通过阳性噬菌体的信号值决定的，阳性噬菌体的亲和力大小是一个非常重要的选择参数。如阳性噬菌体的亲和力为1nM时，筛选的目的是得到高亲和力的抗体，可以选择阳性噬菌体的信号在OD值为0.5时的条件作为最终的筛选条件，这样很多OD值很小的低亲和力的抗体均被过滤掉；筛选的目的是尽可能得到多的亲和力抗体，可以选择阳性噬菌体的信号在OD值为2-3时的条件作为最终的筛选条件，低亲和力的抗体在OD值上也不会太小，可以得到体现。不论如何抗原的浓度大小决定了选择性，选择较小的抗原浓度进行反应是信号和亲和力大小匹配的关键和趋势性选择，信号大小的调节可以通过酶联抗体浓度，高显色能力的显色液和显色时间进行调节。如果在一块板的检测中未知样品的信号值大小呈合理的分布是ELISA条件较好的表现。Part 4 - 总结 - ELISA用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是ELISA用于亲和力测定方法的一种变种，想要得到好的信号和亲和力大小的相关性，低抗原浓度条件下进行方法学开发是必须的。低抗原浓度条件下会有低的信号值，通过增加酶联抗体浓度，选择高显色能力的显色液和延长显色时间，增加ELISA灵敏程度是ELISA优化的技术方向。由于检测样品的多样性和复杂性，高灵敏的ELISA检测体系必然会导致背景信号的增加，无法得到很好的信噪比，疏水性的酶标板条，尽可能低的样品的稀释倍数是解决这个问题的关键。一个稳健的能用于杂交瘤和噬菌体展示筛选方法是ELISA各种耗材，试剂和实验条件的完美组合，需要对试剂耗材的多种可能进行探索，也是平台经验的系统汇总，以下是用于筛选方法的优化方向的汇总。 以上，就是小奥带给大家的第四篇ELISA方法学开发的干货内容！我们下期再见哦！

一、综合类 （一）美国国会提出新法案优先采购美国货 　　2009年1月28日，美国国会众议院表决通过了总额达8190亿美元的《美国复兴与再投资法案》（简称“经济刺激法案”）。该法案的“使用美国钢铁条款”（简称“购买美国货条款”）规定，法案中的资金用于公共建筑或公共设施的建设、改造和维修时，所有钢铁都必须为美国制造。但以下情况例外：购买美国钢铁不符合公共利益；美国钢铁数量不足或质量不够；购买美国钢铁将导致项目成本增幅超过25%。“经济刺激法案”的参议院版本要求将钢铁产品扩大到“所有制成品”，但在2月3日的参议院首轮投票中未获通过。2月4日，美参议院口头通过对“购买美国货条款”的修改，要求该条款的适用应符合美国在国际协定中的义务。 （二）厄瓜多尔对多类进口产品采取限制措施 2009年1月19日，厄瓜多尔外贸和投资委员会通过第466号决议，决定对600多种进口产品采取限制措施。厄方称采取该措施的目的是为了应对国际金融危机，改善收支平衡。进口限制措施分为3类：对部分产品加征30～35%的关税，涉及糖果、饮料、酒类、化妆品、瓷砖、手机、音响设备、家具和玩具等产品；对3种产品征收特别关税，包括陶瓷器皿0.1美元/千克、鞋类10美元/双、服装12美元/千克；对部分产品设置进口配额，允许进口2008年进口CIF价总额的65～70%，具体包括：汽车配件、香水、水果蔬菜、食品、卫生纸、旅行包、冰柜、家用电器、乐器、电扇和地毯等。 （三）印尼限定港口进口5类消费品 印尼贸易部颁布条例，规定成衣、鞋、儿童玩具、电子产品及食品饮料等5类消费品，只能通过丹戎不禄、丹戎埃玛、丹戎北朗、勿老湾和锡江苏加诺－哈达这5个港口进口，进口商需在贸易部进行注册登记，进口相关产品须在装船前进行核对，费用自负。上述条例已于2008年12月15日开始生效，有效期为2年。 二、食品土畜类 （一）美国拟加强对进口鲶鱼的监控 美国农业部（USDA）拟于2009年出台针对进口鲶鱼的新监管措施，要求有关鲶鱼出口国完全满足美国国内对禽肉监控的相关标准，才能获得市场准入。此前，进口鲶鱼一直由美国食品和药品管理局（FDA）负责监管，但美国2008年通过的《粮食、保存和能源法案》改为授权美国农业部监管。 （二）欧盟对奶制品给予出口补贴 欧盟宣布自2009年1月下旬开始，重新对黄油、奶酪、全脂和脱脂奶粉实施出口补贴。 （三）美国发布强制性原产地标签最终法规 2009年1月15日，美国农业部发布了强制性原产地标签（COOL）计划最终法规，要求对以下产品实施强制性加贴原产地标签：牛（包括小牛）、羊（山羊）、鸡和猪肉；牛、羊、鸡和猪肉糜；野生及人工养殖的鱼和贝类；易腐农产品（新鲜和速冻果蔬）；澳洲坚果、美国山核桃、人参和花生。按照该法规规定，野生及人工养殖的鱼和贝类须标示生产方式、养殖方式（野生或人工）等内容，但加工食品除外。此外，该法规还对涉及多个国家原产地的标签、零售商及供应商提交产品保存记录及相应的处罚做出了规定。该法规生效日期为2009年3月16日。 （四）欧盟禁止在农药中使用22种有毒物质 欧盟拟从2009年起禁止使用22种有毒物质制造农药，包括8种除莠剂成分、11种杀真菌剂成分，以及3种杀虫剂成分，涉及杀草强、典苯腈、得杀草、异菌脲、灭特座及噻虫啉等。截至目前，欧盟市场已禁止销售472种农药。 三、其他 （一）美国企业对进口葡萄糖胺（非贝壳类）产品提起337调查申请 　　2009年1月28日，美国嘉吉公司（Cargill）向美国际贸易委员会（ITC）提起申请，指控中国及美国6家企业生产、进口和在美销售的葡萄糖胺（非贝壳类）产品（Non-Shellfish Derived Glucosamine and products containing same）侵犯了其第7049433号专利，要求ITC对被申请人启动337调查，并发布普遍排除令和禁止令。江苏南通外贸医药保健品有限公司、天津天成制药有限公司洛杉矶分公司和上海技源科技（中国）有限公司涉案。 （二）俄罗斯提高进口车辆关税 　　自2009年1月12日起，俄罗斯将提高拖拉机、载重汽车和轿车的进口关税，其中排量在1.5～2.3L的轿车的进口关税由25%提高至30%，3年以下的旧车进口关税调整为30%，3～5年的旧车进口关税调整为35%。新关税措施的实施期限为9个月。 （三）印度禁止进口中国玩具 2009年1月23日，印度商工部外贸总局发布第82号公告，宣布自即日起禁止进口海关税号9501、9502和9503项下的中国玩具，为期6个月，直到下一公告发布。该公告未注明印方对中国玩具实施禁止进口措施的具体原因。 （四）白俄罗斯修改外汇支付规定 2009年1月15日，白俄罗斯央行对禁止在外汇交易市场之外购汇支付货物和服务进口预付款的规定进行了部分修改，允许进口商使用其出口获得的自有外汇对进口原料支付预付款，但对在本国外汇市场购汇用以支付进口预付款的规定维持不变。

我国奶农的特点是小而散，他们的营生取决于“一手交奶一手交钱的一锤子买卖”。他们面对的，多为号称“龙头企业”的各种代理人，因此缺少话语权。他们的难处，常常在有关部门组织调查时，由别人为他们说出来但不一定能说清楚。其实在他们“卖奶”的过程中存在着一个难点：谁检验？　　目前是由加工企业单方面在检验。在买卖双方的博弈中，企业是典型的“既当教练员又当运动员”，企业还有权单方面决定检验的项目和指标等一切内容，奶农没有发言权。因此早就有人强烈呼吁：生奶收购应实行“第三方检验”，然而全国仅上海等极少数几个地方有。原因是需要新的投资，但回报不高而且申办程序复杂，出具公证性数据更需要经过“计量认证”等，总之投资风险大。其实，是否由第三方检测，仅仅是问题的一个方面。　　所谓的“第三方检测”其实是一种具有社会中介服务性质的机构。买卖双方系利益相关当事人，从公平交易的角度出发，在法律上都需要回避单方面检测的“嫌疑”，所以凡是商品交易都离不开第三方检测。在这个层面上，第三方检测不仅是对奶农（销售方）利益的保护，同时也是对加工企业（收购方）利益的保护。　　“第三方检测”直接解决的是市场经济下买卖公平的问题，至于能否“合理定价”和产生“对提高原奶质量”的作用，笔者认为关键取决于“检测内容”，以及如何决定这些“内容”的一个运作程序。国际奶业界将此称为“生奶的按质计价程序”，最早形成整套思路的是上世纪60年代丹麦奶业联合会在BentOlesen先生领导下的工作小组。　　当时他们首先按照传统，确定乳脂和乳蛋白质的含量作为两大基础指标。其次根据不同产品制造工艺的需要，增设例如感官评定、细菌总数、冰点、抗生素残留、黄曲霉毒素M1、体细胞计数等辅助指标。基础指标的检测结果决定交易生奶的基础价格，然而确定基础价格的依据不仅仅是饲料等饲养成本，更重要的因素是国际市场上的奶油和脱脂奶粉的实际价格。辅助指标的检测结果决定交易生奶的辅助价格，有的具有“一票否定”作用，例如抗生素或黄曲霉毒素M1超标；有的具有增减成交价格“权重”的作用，例如感官评定、细菌总数或体细胞计数等设立分级限值，对基础价格按一定的百分比值加价或扣款，其中还包括生奶的季节性差价在内。　　至于能否产生提高生奶质量效果的第一个关键，是选择哪些指标进入计价程序检测，以及确定指标限值、测试频率等的原则。绝对不是任意套用现有国家标准就能奏效的，因为国家标准是最低要求的标准，它们必须结合市场要求、具体产品的加工工艺和奶牛饲养工艺的实际水平来建立并适时进行调整。　　以设定微生物指标的限值为例说明如下：　　首先选定这个指标的理由是保证安全和质量。在某种杀菌强度已经确定的前提下,客观上存在着“允许的最大值”，例如对于145摄氏度/2秒的UHT灭菌工艺来说,原料乳细菌总数的极限是每毫升50万个；细菌数越低产品的品质越好；如果生奶的细菌数高于极限，则品质低劣而且可能无法保证灭菌效果。又如以巴氏杀菌鲜奶等短保质期产品为主的，可辅选耐热菌计数指标，而以灭菌奶等长保质期为主的可辅选适冷菌和耐热芽孢菌计数等指标，反之则不合适。然后组织摸底调查，即以某种频率对计划纳入实施的牧场采样测试，得到一套切合实际的生奶细菌总数分布数据。最后对分布数据进行统计处理，一般以85%能够达到的作为合格底线，以15%能够达到的作为鼓励底线，处于中间状态的则另行划线分配奖罚系数。　　必须强调的是，即将实施的按质计价程序检测所采用的取样、保存、运输和测试的方法、工具、频率等条件，应该和摸底调查时的完全一致，以确保“按质计价程序检测”处在相同的“系统误差”范围内，否则就失控了。从这个意义上来说，“独立、透明、公正”的第三方检测也是一个必要条件。　　能否产生提高生奶质量效果的第二个关键是必须要有一个畜牧兽医专家组，针对检验结果显示的现象，到养牛场去帮助奶农寻找和解决实际存在的问题。　　一般来说，一套程序运行三年左右就得重新调整。因为两个15%的底线在“价格杠杆”的作用下必然发生变化，激励作用将被弱化。那就需要再次启动摸底调查的方法，或提高指标限值，或增加新的检验指标，形成新的按质计价程序，促进生奶质量朝着人们所希望的方向不断提高。　　如此系统的测试需要每天处理大量的样品，决非人工检验所能胜任。因此针对生奶的各种自动检测仪器首先在丹麦应运而生，今天我国也向丹麦的福斯（FossA/S）公司引进了其中的部分设备。20世纪70年代丹麦奶业联合会曾设立过6个检验中心，分别配备畜牧兽医专家，承担了全国所有“生奶按质计价程序”的检验任务。随着速度更高的自动分析仪器的开发，90年代时其中的5个被撤销了，2000年时随着瑞典和丹麦跨国奶农合作社“阿拉（ArlaFoods）”的建立，最后留下的这个测试中心同时承担了两国奶农的“生奶按质计价程序”全部测试工作。　　上海乳业在1985年筹划引进一个相当于当时丹麦规模的检验中心并派员出去学习。建成后得到了市政府的支持，于1987年起开始分步实施“生奶按质计价程序”。至今计价程序已经过三次集中调整，取得了明显效果。目前就细菌总数来看，上海地区生奶总量的90%均在每毫升40万个以下，其中约有1/3在10万个以下。当然上海乳业如果要率先实现现代化的目标，依然需要付出巨大的努力,因为国外的生奶细菌总数多在5万个以下，北欧等先进地区则普遍在1万个上下。　　鉴于目前各地政府机构和所属事业单位里的检验检测机构大多任务不足，仪器和人员闲置的不少，建议将其中的一部分加以改制成为生奶收购的第三方检验站。当然改制就会碰到问题，尤其在我国目前“第三方机构”普遍发育不良的大环境里。首先是机构的所有制要改变，第三方机构应属于“非政府机构（NGO）”而完全进入市场。其次是经济效益的稳定性，与附属在政府体制内的环境相比，需要付出更大的努力。然而，这是符合当前情况既经济又合理的一条道路，值得各级政府研究并积极推广。