完整分子量

最近在考虑用ESI源测大分子蛋白的分子量的问题，总结起来有如下：1 用ESI源的质谱（比如常用的ESI-Q-TOF）测大分子完整蛋白（比如：BSA，分子量约64KDa）的分子量有哪些难点？对比测多肽来说有哪些不同的地方（参数设置，以某种质谱为例，毕竟不同的公司离子源的设计不一样）。2 现在用Q-TOF测完整蛋白分子量的比较多（AB,Waters的机器都有人做过），但用离子阱，或者离子阱串联的其它质量分析器很难（有文献报到，但是不多），为什么？大分子很难被离子阱囚禁？还是说大分子在离子阱内聚焦的时候容易被碰碎？大家畅所欲言哈，也欢迎各位兄弟关于这个主题（ESI源测大分子蛋白）提出自己的问题或者见解。

看过文献，除了氨基酸，蛋白质能以小分子多肽，甚至完整蛋白（母乳中抗体）被小肠吸收，那么，如果我有一种胶原蛋白，要酶解为多大的分子量，才能被完整吸收？

2006年、2007年前后，postnova公司与美国陶氏化学聚烯烃研发中心合作开发出来高温非对称流动场场流分离仪HTAF4，很快，postnova公司在此基础上持续研展了高温的分离通道膜和过滤膜，并且与英国PL公司合作，从而实现了高温场流仪的商业化生产。该产品主要针对聚烯烃样品的分子量分布测试，可补充高温凝胶渗透色谱仪HT GPC 的不足，在超高分子量聚烯烃领域甚至可以完全替代HT GPC 。在稀溶液（分散态）——牛顿流体——条件下，聚烯烃样品的分子尺寸/流体力学体积非常大，至少是同等分子量的聚苯乙烯的两倍以上，甚至更大些。而同时，其特性粘度也非常大，稀溶液状态下的分子密度非常小。所以，聚烯烃样品分子很容易在GPC柱子里面发生堵塞（体积大、超过了GPC柱子的分离上限）、剪切甚至降解（分子密度小、分子密实性差），再加上含有的超大分子量组分尺寸太大，GPC柱子无法分离而引起的共馏出等等，都使得聚烯烃样品不适合高温凝胶渗透色谱柱的分离分析。而HT AF4采用的没有固定相填料的分离通道则很适合聚烯烃这类大尺寸、低密度样品。此外，聚烯烃类样品往往含有凝胶物质，这部分组分与橡胶中的凝胶物质一样，也是部分交联、但是尚且能够溶解的超大分子量组分。这部分组分在GPC柱子里往往会与凝胶填料发生吸附作用，使得GPC的分子量分布数据中看不到他们。而这部分组分其实分子量非常大，对材料加工性能影响也非常大，即使其含量往往非常微小。附件中的论文，就介绍了一个标样，其含有的0.45%的超千万Dalton的超大分子量组分，就完全改变了这个样品的材料加工性，而HT GPC的分离分辨率不如高温场流仪，因此根本无法测出来这部分组分，当然也就无法计算出正确的分子量数据和分布数据了。所以，在聚烯烃的HT GPC分析中，出现分子量数据与流变仪等材料试验仪器拟合的分子量数据偏差很大、小很多的情况，是经常发生的。但是当采用HT AF4之后，这种情况就好多了，用户可以完整的、真实地看到聚烯烃的分子量分布，包括了凝胶物质。如果结合多检测器技术，那么分析测试的信息量将是非常大的。可用于HT AF4的多检测器，包括：示差、四毛细管粘度、多角激光散射、红外和红外光谱，可组成五检测器串联/并联方式的HT AF4+HT GPC并联仪，通过内置的电磁阀实现分析系统在高温场流分离通道与高温GPC柱子之间的自动切换，无需降温至室温！ 附件的论文中，我用黄色标注了这些内容，大家可以特别注意一下。近年来，postnova公司持续不断研发新型高温过滤膜，使HT AF4对聚乙烯样品的分离下限已经降至了大约1000Dalton，这已经非常接近HT GPC的分离下限了，基本上可以做到保证样品分子全部被分离并被检测了。另外，补充一下，有人看到高温场流仪包含一个PL220高温GPC的主机箱子，就误认为PL220是主机，这其实是个误会。所有的流动场场流仪——包含室温型、中温型和高温型，都是以交叉流泵为主机的，全部数据都是从交叉流泵传输到控制电脑上的。在HT AF4中，PL220的机箱实际上只是自动进样器和柱温箱的作用。

分享一个标准医用透明质酸钠凝胶，18角度激光光散射系统可以做重均分子量及分子量分布系数测定。

我现在在分析聚合物的分子量和分子量的分布，其中关于数均分子量和众均分子量的理解还是不太懂，请各位大侠赐教。

[font=&]分享一个标准医用透明质酸钠凝胶，18角度激光光散射系统可以做重均分子量及分子量分布系数测定。[/font]

我是做羟乙基淀粉的分子量与分子量分布的时候，已查到可以使用凝胶柱，用分子排阻法来检测。根据国家药典的要求，需要对该方法进行方法学研究，请教诸位大神，谁有过这方面的经验的？？

一些基础的问题请大佬帮忙解答一下：1、在相关查阅学习中，都提到了原子量和分子量是没有单位的，但是为什么质谱中又用Da（D）来作为原子量（分子量）的单位？2、“质谱中不能用平均分子量计算离子的化学组成，例如：不能用氯的平均分子量35.5，而是用35和37”，这里35.5不应该是氯的相对原子质量吗？所以这些基础的东西搞的傻傻分不清楚了，希望有老师帮忙解惑

聚甲醛分子量及分子量分布用GPC该如何测？现在还不知道分子量范围和常温下的溶剂，所以毫无头绪！如果有人测过或知道请告知！万分感谢！

最近一个客户参观向我们提出了分析样品的完整性的概念，我们非常迷惑，样品的完整性包括哪几方面的内容呢？向各位大侠求救了~~~[em0812] [em0812] [em0812]

化合物分子量为518，液相质谱测试LC-MS：+，应该是540.8，可是测试时出现了1057.6的分子量，这是怎么回事儿？

透明质酸钠是一种天然直链多糖，是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖结合而成的双糖结构单元所组成，广泛分布于动物和人体皮肤、皮下组织、眼组织及关节滑膜组织、滑液等结缔组织，无种属差异。根据透明质酸钠结构单元的特性，对其进行深加工后制成的医用透明质酸钠凝胶是一种无种属特异性、无毒、溶解性能好、生物相容性良好的新型生物材料，被广泛用于多种眼科手术、防治外伤性或退变性骨关节炎、普通外科、妇产科等腹、盆腔手术、预防术后肠粘连和盆腔粘连及肌健、关节和神经手术预防组织粘连。透明质酸钠作为一种植人体内的医用生物材料，需要有与人体正常注射部位透明质酸钠更接近的分子量，以确保产品使用的安全性和有效性。光散射法是测定高聚物绝对分子量的方法，高分子溶液可视为不均匀介质，当光通过它时，入射光就会发生散射，且其散射光强度远高于纯溶剂，并且与高聚物的分子链形态、溶液浓度、散射光角度和折光指数增量（dn/dc）密切相关。因此由光散射法测得不同浓度的高聚物溶液在不同散射角下的散射光强数据后，即可求得其重均分子量。采用激光散射-凝胶渗透色谱联用法（LLS-GPC）得到分子量分布系数。色谱柱可采用SD805/806、TSK5000pw TSK6000，流动相推荐0.1 mol/L硝酸钠-0.02%叠氮化钠溶液。样品用上述流动相溶解并稀释至适宜浓度，用0.22pm滤膜过滤。折光指数增量（dn/dc）的测定：采用流动相稀释透明质酸钠凝胶至不同浓度梯度，在室温下，用激光检测同一波长测定。将色谱柱与激光散射仪，示差检测器连接，流动相冲洗至基线平稳后，取适量样品溶液进样，在规定流速、色谱柱温度条件下检测样品的分子量及分子量分布。检测完毕后，通过仪器配套的色谱分析软件确定样品的峰面积，输入dn/dc 值，根据软件要求设置其他相关参数，计算分子量及分子量分布系数并输出报告。

用的是填充柱，苯系物7个元素，原来的完整出峰时间为10分钟，后做调试更改了柱箱温度，完整出峰时间就更改了，后来柱箱温度调回原来的温度，出峰时间也变不回去了，但是所有的峰都还是会出现。其他条件没有改变，载气压力没变，进样口检查没有漏气，有可能会是哪些原因导致的，怎么调回去。拜托诸位老师教下我。

请教各位哪里可以测试水性胺类材料的分子量？分子量大约1000 - 2000 g/mol，实验室的GPC是THF流动相，聚苯乙烯的柱子，做测试时，拖尾严重，可能是柱子吸附材料所致。最好是在上海哪里可以做此类物质的分子量测试？欢迎联系，qf_yang1984@sina.cn

离心率与分子量的关系是否有一个确定的计算公式，实验中因为无法确定离心率所以无法确定用多大的转速进行离心分离，已知提取酶的分子量，但是分离过程中离心转速用多大该如何确定？还有分子量单位“kd”是多少呢？请专家告知一二，万分感谢！

请问相似结构，但分子量不同的化合物，要得到同一个碎片，分子量越大碰撞能量会更高吗？

大家都用什么方法测定羟乙基淀粉的分子量？可以讨论下子。附件中是从网上找的关于测定HES分子量的方法，我觉得写的还不错，要是大家觉得可以，请顶贴，呵呵，谢谢！

请教高手：我现在在用waters 2414 示差折光检测器 美国奥泰的SEC/GPC软件，测定羟乙基淀粉130重均分子量(Mw)标准中规定是用5个重均分子量(Mw)与保留时间做标准曲线，标准品和样品浓度都是5mg/ml,然后测定样品分子量(Mw)现在的测定结果普遍偏高（与原料厂家的检验报告单相比），厂家说是能校正下标准曲线是否正确：就是做完标准曲线后再回头去处理标准品图谱，计算出来的值(Mw)与标准品的分子量比较，我照他们说的做了发现会差到2万左右，且分子量越大的部分，误差越大但是软件的工程师说是这样校正本身就是有误差的，说是用标准曲线重新计算出来的结果(Mw)是片段积分得到的，与原来的分子量会有误差要是照工程师的说法，那这个方法本身是不合理的，个人理解还是应该用峰值分子量（Mp）与保留时间做标准曲线比较合理好像国内一般用的都是用重均分子量(Mw)做标准曲线，连中检所培训的都是北京龙智达的GPC软件都说是进样浓度不参与计算，与测定分子量无关，但个人认为凝胶色谱的原理是分子孔径使分子量从大到小依次流出，如果进样浓度过大，孔径填满后，小分子物质也不能被有效保留，从而与大分子物质一起流出，应该会产生检测误差，请教一般凝胶色谱的进样浓度是多少？请问有高手也碰见过这样的情况吗？请指点下小弟，不胜感激！！！

做多糖（平均分子量300，000-500，000）的分子量与分子量分布测定，应该选用什么样的凝胶色谱柱？

请教关于PAA（低分子量2000以下聚丙烯酸）的分子量测量缓冲液如何配置？流速在0.6ml/min情况下得到保留时间相差只有0.1－0.4分钟，能够说明分子量有显著变化么？

前辈们，关于分子量计算的校正曲线，在建立曲线时的曲线次数是什么意思，它有什么要求吗？还有校正曲线的相关系数大小对分子量计算的影响是怎么的！

[size=18px]在做GPC分析分子量和分子量分布时，溶样瓶买的哪种？[/size]

用GPC可以测样品的分子量和粘度参数；用粘度计可以测某些样品的粘度，再计算粘均分子量。两者在应用、测量范围和测量结果上有哪些区别呢？

[color=#444444]为什么分子量多24？[/color][color=#444444]我做了三个化合物，组成原子为C、H、O、N，进行分子量鉴定，质谱数据比理论上的分子量每个化合物都多24！我怀疑是质谱测试的系统误差，可是我不知道这个误差是怎么来的。请专家帮助我！谢谢[/color]

各位老师好 刚做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]，现在要开发甲钴胺的检测方法，甲钴胺的分子式是C63H91CoN13O14P,分子量是1344.40，用AB[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的软件算出来的分子量是1343.6，想请教下用Q1MS（Q1）扫描时如何确定母离子的分子量？例如：维生素B12分子量是1355.38，然后质谱设置的母离子是678.5，子离子是147.1和359.1，这个是已有方法的，可以照着设就可以。然后现在要开发甲钴胺的新方法，就是不知道如何确定母离子和子离子？

求大神指教，GPC测定分子量实物分子量（MW)370左右，测定结果为470左右，可以接受吗？怎么调整能够使测定结果与实际值一致？谢谢！

求 iso-17072-1-2011-英文 皮革中的重金属测定 标准的完整版。在论坛资料中下载的只有前面2页，缺了后面的分析过程重要部分。希望有这个完整版标准的版友帮忙！非常感谢！