稳定相

[b]1、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相概述 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相起什么作用？[/b] 色谱分离是基于待测物在流动相和固定相之间的分配平衡而实现的。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中流动相为气体，而气体分子间的相互作用力一般忽略不计，因此[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离中流动相对分离没有热力学上的贡献。于是，固定相就成了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离中的关键，不同固定相对待测物有不同的保留能力，保留能力的差异成为了分离的基础。.[b] 什么物质可以做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相？[/b] 从原理上来说，任何物质都具备做固定相的潜力，因为只要与待测物能够发生分子间的相互作用就能产生保留作用，只要保留作用有差异就能实现分离。但是大部分物质都缺乏实际用作固定相的可操作性，因为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的固定相必须具备热稳定性和化学稳定性。热稳定性是指固定相必须在使用温度下保持液体状态，既不凝固、又不挥发。固定相凝固将导致分子扩散缓慢，待测物难以达到分配平衡。挥发将导致流动相不断以蒸汽形式流失，这对其寿命是不利的，而且蒸汽与待测物一起流出也使得检测收到影响。化学稳定性是指固定相在使用过程中不会发生化学变化。高温使用过程中，固定相既不能自身发生分解，又不能与待测物发生反应，同时还要保证固定相与仪器中其他有接触的部分（例如载气、管路、载体等）都不会发生反应。另外，固定相还需要容易制备、易于使用、品质稳定，这样才能够被广泛使用。.[b] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相有哪些种类？[/b] 在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]发展的早期，曾被尝试用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相的物质有千余种。然而实践中发现，过于庞杂的固定相种类并不利于色谱分离方法的开发，因此只有少数性能优异的固定相得到了广泛的认可。早期固定相的代表品种是长链的烃类（角鲨烷、石油脂等）和高沸点酯类（如邻苯二甲酸二壬酯、癸二酸二辛酯等）。后来各种沸点更高的聚合物被广泛使用，例如二乙二醇丁二酸聚酯（DEGS）、新戊二醇己二酸聚酯（NPGA）等聚酯固定相，聚乙二醇、聚丙二醇等聚醚类固定相，甲基硅油、苯基硅油等聚硅氧烷类固定相。随着毛细管柱技术的发展，色谱柱的柱效显著提高，对选择性的要求有所降低，因此固定相的种类又进一步筛选、合并，只保留了主要的几种聚硅氧烷和聚乙二醇固定相。.[b]2、聚硅氧烷固定相2.1 甲基聚硅氧烷[/b][img=,188,153]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051035373744_6865_2204387_3.png!w188x153.jpg[/img] 甲基聚硅氧烷分子结构如图，分子量较低时呈粘稠油状，俗称甲基硅油；分子量较高时呈有弹性的半流动状态，俗称甲基硅橡胶。甲基是完全非极性基团且难以被极化，因此这种固定相是各种聚硅氧烷中极性最弱的品种。这种固定相的代表性型号是OV公司生产的OV-101、通用电气公司生产的SE-30、色谱科公司生产的SP-2100。SE-30是高分子量的橡胶态，使用温度可高达300℃以上；OV-101是低分子量的液体，热稳定性不如SE-30。制备毛细管柱时早期都直接使用这几种固定相进行涂覆，后来各个生产色谱柱的大公司逐渐进行改进，分别开发出了各自公司特有交联型固定相，热稳定性进一步提高，但在选择性方面与这几种传统固定相类似。.[b]2.2 苯基-甲基-聚硅氧烷[/b][img=,188,269]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051037142786_2031_2204387_3.png!w188x269.jpg[/img][img=,366,269]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051142316759_7988_2204387_3.gif!w366x269.jpg[/img][img=,366,377]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051142318471_1910_2204387_3.gif!w366x377.jpg[/img] 苯基-甲基-聚硅氧烷是甲基聚硅氧烷中部分甲基被苯基取代后的产物，取代度等于50%、小于50%、大于50%时对应的分子结构分别如图。其状态也与分子量大小有关，分子量较低时是粘稠液体、分子量较高时是半液体弹性体。苯基取代后偶极矩比甲基更大，而且苯基容易被极化，因此随着苯基取代度的增加，固定相的极性也相应增加，可覆盖弱极性到中等极性的范围。这种固定相的代表型号有通用电气公司的SE-52（取代度5%）、OV公司的OV-11（取代度35%）、OV-17（取代度50%）等多种，另外还有含少量乙烯基但其他性质类似的型号，如SE-54（取代度5%，含1%乙烯基）。毛细管柱生产厂家各自也生产独有的型号，但基本上与上述代表性的型号类似，常用-5、-35、-50（或-17）等类似的编号。 随着苯基取代度的增加，该固定相的热稳定性有所下降，特别是取代度超过50%时热稳定性下降明显。为了改善热稳定性，各大公司也进行了一系列改进，除与甲基聚硅氧烷类似的交联技术外，还有亚芳基改性技术。亚芳基改性是将聚硅氧烷中的Si-O-Si键部分替换为如图所示的亚芳基连接方式，Si-Ph键的连接方式更加稳定，而且不易发生水解，使用温度可比甲基聚硅氧烷更高。这种亚芳基改性的固定相具有高温低流失的特性，很适合用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]这种高灵敏度的检测中。.[b]2.3 三氟丙基-甲基-聚硅氧烷[/b][img=,366,278]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051143507121_9168_2204387_3.gif!w366x278.jpg[/img] 三氟丙基-甲基-聚硅氧烷是甲基聚硅氧烷中部分甲基被三氟丙基取代后的产物，取代度一般小于50%，分子结构分别如图。三氟丙基具有很大的偶极矩，因此这是一种强极性的固定相。而且三氟丙基有很强的极化能力，容易使不饱和化合物产生诱导偶极，在位置异构体和顺反异构体的分离方面有独特的作用。但较强的极性使这种固定相的热稳定性不如甲基聚硅氧烷。这种固定相的代表性型号有OV公司生产的OV-210、OV-215，色谱科公司生产的SP-2401等。毛细管柱生产厂家各自也生产独有的型号，但基本上与上述代表性的型号类似，常用-200、-210等类似的编号，部分厂家也有专用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]的高温低流失型号。.[b]2.4 氰代烷基-甲基-聚硅氧烷[/b][img=,366,335]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051144231591_9048_2204387_3.gif!w366x335.jpg[/img] 氰丙基或者氰乙基是比三氟丙基极性更强的基团，除了极化能力外还具有形成氢键的能力，因此在氰代烷基取代度足够大（超过50%）时，可以获得极性最强的一类固定相。其中取代度最高的产品为OV公司生产的OV-275，以及色谱科公司生产的SP-2560，取代度接近100%。其他还有很多取代度稍低（88%或者90%）的型号，以及取代度50%的型号。即使取代度只有50%，其极性也强于其他常见固定相。顺反异构是最难的分离问题之一，很多时候必须用到这类最高极性的固定相。但这类固定相的热稳定性比较差，最高使用温度通常不超过250度，只有少数厂家掌握了进一步提高其使用温度的技术。.[b]2.5 氰丙基-苯基-甲基-聚硅氧烷[/b][img=,366,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051144379829_6445_2204387_3.gif!w366x388.jpg[/img] 氰丙基-苯基-甲基-聚硅氧烷是甲基聚硅氧烷中部分甲基被氰丙基和苯基取代的产物，其中氰丙基与苯基常成对出现。随着取代度不同，可以表现出从弱极性到强极性的不同特性。这种固定相既具有苯基可以被极化的特点，又具有氰丙基产生极化作用的特点，还可以形成一定程度的氢键，因此在很多方面都有应用。常见的型号有取代度6%（氰丙基3%、苯基3%）的OV-1301、取代度14%（氰丙基7%、苯基7%）的OV-1701、取代度50%（氰丙基25%、苯基25%）的OV-225。毛细管柱生产厂家各自也生产独有的型号，但常用的编号与上述类似，部分厂家也有专用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]的高温低流失型号。.[b]3 聚乙二醇类固定相3.1 普通聚乙二醇固定相[/b][img=,321,87]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051040459342_2235_2204387_3.png!w321x87.jpg[/img] 聚乙二醇分子结构如图，也称作聚氧乙烯，实际上具有聚醚的结构，具有较强的极性，并且很容易与醇、胺、酸等待测物形成氢键。随着分子量的增加，其极性略有降低，但热稳定性提高。聚乙二醇简称PEG，常用分子量为2万的品种，其常见型号为PEG-20M或者Carbowax-20M。部分产品中还在聚乙二醇分子中的端基上引入环氧基，使其能够在高温下发生交联，从而进一步提高热稳定性。国外毛细管柱生产厂家通常都是采用具有交联结构的聚乙二醇固定相，编号中通常使用wax表示。.[b]3.2 酸改性聚乙二醇固定相[/b][img=,690,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051040574186_5985_2204387_3.png!w690x191.jpg[/img] 将普通聚乙二醇与硝基对苯二甲酸进行缩聚反应可以获得一种酸改性的聚乙二醇固定相，其结构如图。这种固定相最早是为了分离游离脂肪酸而生产的，简称FFAP，也有用OV-351这一型号表示的。国外厂家制备毛细管柱的固定相通常也是在此基础上进一步交联，使用的型号通常也用FFAP表示。.[b]3.3 碱改性聚乙二醇固定相[/b] 这种固定相实际上与普通聚乙二醇固定相相同，但是在制备色谱柱时添加一定量的无机强碱。这种固定相在早期主要是为了防止载体表面的酸性硅羟基促进聚乙二醇分解，现在主要用于测定胺类等碱性物质，应用范围有限。.为了能够简单明了的了解各类固定相，我将各种常见类型和信号整理到了一张表中，以便查找。图片上传被压缩了可能看不清，请下载附件查看。[b]简表（包含固定相的种类和极性，以及USP编号和常见型号）[/b][img=,690,1017]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051123384989_1061_2204387_3.png!w690x1017.jpg[/img][b]详表（包括主要生产厂家的型号对照）[img=,690,487]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907051124005102_1401_2204387_3.png!w690x487.jpg[/img][/b]

前面的文章已经对常见固定相的种类进行了介绍，详见https://bbs.instrument.com.cn/topic/7247165。本次主要介绍固定相的适用温度范围。.[b][size=12.0pt]1[/size][font=宋体][size=12.0pt]、温度对固定相的影响[/size][/font][/b] [font=宋体]在色谱分析中，柱温是最重要的工作参数之一。我们总是需要通过调节柱温来改善分离效果。但是温度变化对固定相自身的影响常常被忽略。实际上，任何固定相都有一个适用的温度范围，我们在调节柱温时必须要考虑这一范围。如果超出这一范围使用，不仅无法达到预期的效果，还可能对色谱柱造成不可逆的损坏。[/font].[b] [font=宋体]高温对固定相有哪些损害？[/font][/b] [font=宋体]首先是挥发问题。固定相虽然是沸点很高的物质，但是在较高稳定性仍然具有一定的蒸气压，会随载气挥发。因此在检测器中检测到的信号实际上是固定相蒸汽与目标物共同产生的，只有当固定相蒸汽浓度远低于目标物时才能实现准确定量。如果固定相蒸汽浓度太高，就会导致较高的背景信号，噪声也随之增大，此时样品的微弱信号就被淹没在固定相蒸汽产生的背景噪声中，难以识别。[/font] [font=宋体]然后是分解问题。高温下，固定相自身的化学键会发生断裂，随着温度的上升，分解速率呈指数增长。同时样品和载气中的强极性杂质，如水、酸等，都容易与固定相发生反应导致分子链断裂，这种反应也是随温度升高而呈指数增长的。分解产生的气态小分子产物随载气流出，产生的影响与固定相蒸汽类似，都表现为较高的背景信号和较大的噪声，因此统称为“柱流失”或者“固定相流失”。有些分解产物在柱温较低时被保留，随着程序升温过程逐步流出色谱柱，就形成鬼峰，也会干扰测定。[/font] [font=宋体]以上两方面的问题，除了影响低浓度目标物的检测外，同时也是色谱柱寿命损失的主要原因之一。柱流失的直接结果就是使固定相总量减少、色谱柱的容量因子降低。通常容量因子减小[/font]10%[font=宋体]就说明色谱柱已经有明显的损坏了，因为固定相的明显流失意味着柱内壁涂层的破坏，会暴露出活性点从而产生吸附拖尾等问题。而且流失一旦开始，往往会加速发生，因为原有的化学键断裂之后，剩余固定相的稳定性就会越来越差。[/font] [font=宋体]另外，柱流失也是污染检测器的重要原因之一，这在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]中尤其突出，在使用其他检测器时也时有发生，比如[/font]FID[font=宋体]的喷嘴积碳、[/font]FID[font=宋体]收集极沉积二氧化硅等。[/font][font=宋体].[/font][b] [font=宋体]低温对固定相有哪些不利影响？[/font][/b] [font=宋体]受传质阻力的限制，固定相一般需要为液态（虽然吸附形固定相是固态的，也需要通过多孔结构来实现传质）。如果液态的固定相在较低温度下凝固，将导致传质阻力显著增加，其结果表现为保留能力显著减弱、峰形严重展宽，因此固定相的使用温度必然存在下限。这一现象在使用聚乙二醇固定相时尤其明显，当柱温低于聚乙二醇的熔点时，样品变得几乎不被保留，峰型也会异常变宽。对于一些粘稠固定相，比如分子量极大的[/font]OV-1[font=宋体]、极性很强的氰丙基硅氧烷、丁二酸二乙二醇聚酯等，在较低温度下即使不凝固，也会因粘度大而产生很大的传质阻力，柱效下降很明显，因此也不适合在较低柱温下使用。[/font] [font=宋体]当然，与高温的影响不同，低温产生的不利影响是可逆的，重新恢复正常柱温后，柱效可以完全恢复，不会造成损坏。因此本文后续主要讨论的是最高适用温度，最低适用温度仅作简要叙述。[/font][font=宋体].[/font][font=宋体][b][size=12.0pt]2[/size][font=宋体][size=12.0pt]、如何评价固定相的适用温度[/size][/font][/b] [font=宋体]能用或者不能用，看似很简单的问题，实际上要做出完全客观的判断却不容易。目前关于固定相使用温度的数据极为混乱，各类文献手册和产品资料给出的数据差别极大，究其原因就是缺少一个客观同一的评价标准。[/font] [font=宋体]早期进行的固定相探索实验中，最高使用温度往往通过主观感受来评价。比如有学者使用[/font]FFAP[font=宋体]固定相测定了游离脂肪酸，柱温最高达到[/font]250[font=宋体]度，于是后续文献就说[/font]FFAP[font=宋体]固定相的最高使用温度可达[/font]250[font=宋体]度。但是这种固定相在[/font]250[font=宋体]度使用的效果到底如何呢？是使用数百小时性能没有下降，还是使用一天后就明显变差了？使用时噪声很大，还是小到可忽略不计？这些问题实际上都没有体现出来，因此这个最高使用温度可达[/font]250[font=宋体]度的说法实际上是完全没有意义的。[/font] [font=宋体]又例如最经典的[/font]SE-30[font=宋体]固定相，有的文献报道最高使用温度可达[/font]350[font=宋体]度，在[/font]350[font=宋体]度的柱温下用[/font]TCD[font=宋体]检测器测定聚氧乙烯脂肪醇醚可以获得很好的效果。又有文献认为其最高使用温度不应超过[/font]300[font=宋体]度，在[/font]300[font=宋体]度的柱温下用[/font]FID[font=宋体]检测器测定邻苯二甲酸酯时就已经表现出比较大的流失和噪声了。这种矛盾的报道也是标准不统一引起的，因为[/font]FID[font=宋体]的灵敏度比[/font]TCD[font=宋体]高得多，使用高灵敏度的检测器时对固定相流失敏感得多。[/font] [font=宋体]到了毛细管柱普及的时代，这种不统一也是非常常见的。例如平时经常使用的[/font]PEG[font=宋体]柱（[/font]wax[font=宋体]柱），不同厂家标称的最高适用温度从[/font]200[font=宋体]度到[/font]290[font=宋体]度都有，这里面有产品质量的差异，但是更多的是因为质量标准不同得出了不同的指标。而处于商业利益和技术保密等方面的考虑，很多厂家根本没有公开质量标准，这使得各种商业宣传的指标更加扑朔迷离，甚至到了信口开河的地步。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]作为曾经的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]技术标杆，瓦里安在这方面做得是比较好的，以下是截取的瓦里安毛细管柱关于最高适用温度的质量标准，指标能够被客观的量化。[/font][/font][font=宋体][font=宋体][img=,685,989]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006301757436366_4857_2204387_3.png!w685x989.jpg[/img][/font][/font][font=宋体][font=宋体].[/font][/font][font=宋体][font=宋体] [font=宋体]上述质量标准都是根据固定相在高温下流失的程度来定义最高适用温度范围的。一方面是从固定相的总量方面考虑，连续使用[/font]6[font=宋体]个月后固定相流失一半的温度作为普通色谱柱的最高适用温度。也就是说该色谱柱在标称的最高恒温操作温度下连续工作[/font]4[font=宋体]千小时，固定相就会损失一半。显然，固定相损失到这种程度是肯定无法使用的。前面已经说过，固定相损失的程度可以通过容量因子降低的程度反映出来。一般实践表明，固定相损失[/font]10%[font=宋体]的时候柱子的性能就已经有明显缺陷了，需要及时更换，也就是说在标称的最高恒温操作温度下，色谱柱能够稳定工作的时间其实不到[/font]1000[font=宋体]小时。[/font] [font=宋体]另一方面是从固定相流失到载气中的浓度来考虑的。质谱、[/font]ECD[font=宋体]等高灵敏度的检测器对柱流失极为敏感，即使色谱柱的寿命没有受到明显影响，当流失的固定相蒸汽浓度增大到一定程度后，检测器噪声会显著增加，这对于微量物质的分析是不能允许的。因此，这类色谱柱（主要是低流失柱或者称作[/font]MS[font=宋体]柱）的最高恒温操作温度是柱流失水平不超过某一规定值的温度。在这一温度下固定相流失非常微小，色谱柱的寿命很长，连续使用数千小时后固定相总量也不会有显著的减少。柱流失水平一般是在[/font]FID[font=宋体]上测定基流随温度的变化而反映出来的。因为流失的固定相是有机蒸汽，进入[/font]FID[font=宋体]之后会使信号增加，增加的程度与流失的浓度几乎是成正比的。对于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]分析，通常要求柱流失对应的基流在几个[/font]pA[font=宋体]以内。以下是不同色谱柱高温流失产生的基流变化示意图，摘自安捷伦应用资料。[/font][/font][/font][font=宋体][font=宋体][font=宋体][img=,690,366]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006301758528671_6760_2204387_3.png!w690x366.jpg[/img][/font][/font][/font][font=宋体][font=宋体][font=宋体].[/font][/font][/font][font=宋体][font=宋体][font=宋体] 以上所列的瓦里安色谱柱的评价标准在行业内几乎是最为严格的。其他厂家的评价标准往往要宽松很多，因此在使用过程中经常会遇到产品标称适用温度很高，但是在低于标称温度的时候流失就已经很明显了。或者有时候遇到A厂产品标称温度比B厂产品高，但是实际使用时A的流失却比B更加明显。因此在比较不同色谱柱热稳定性时不能仅仅看标称的数值，而要在统一的标准下对比。[/font][/font][/font][font=宋体][font=宋体][font=宋体]. 实际应用中应以什么标准来判断色谱柱的适用温度范围？ 从以上讨论可以看到，即使按瓦里安比较严格的量化标准，也会出现多个不同的最高适用温度。那么实际应用中要按那个指标进行判断呢？根据我的经验和习惯，倾向于采用最严格的标准，也就是低流失柱（质谱柱）的最高操作温度定义方式。因为，即使在适用FID进行普通的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析时，固定相流失带来的较大的基线抬升和噪声增加也都是非常不利的，应该尽可能避免。而且，按连续工作6个月后固定相损失50%来定义的最高操作温度也并不适用于实际操作，因为这个温度下固定相已经在显著分解，色谱柱可以稳定工作的时间实际上不足1000小时（容量因子变化在10%以内），只有在比这个温度低20度左右使用才能获得长期稳定的使用效果。 其实日常应用中，很多人已经不自觉的在使用这个标准了，我们在询问色谱柱最高可以多少度用的时候，经常会听到这样的回答：比标称的比较低的那个数值再低20度使用。但是需要注意，前提是这个标称的数值一定不能是虚标的。然而遗憾的是，目前各个厂家虚标的现象非常普遍，即使没有恶意虚标，也有不少通过较为宽松的质量标准得到的虚高指标。因此，我在下面对一些常用固定相的适用温度范围进行了大致的整理，并简要归纳了变化规律。给出的温度数值不可能很精确，只能作为大致的参考，但是其基本规律在判断厂家标称的参数是否合理时可以作为佐证依据。.3、聚硅氧烷固定相的适用温度范围 聚硅氧烷固定相的最高适用温度普遍比较高，其影响因素包括分子量、取代基，以及交联情况等方面。 甲基聚硅氧烷的分子链是最为稳定的，因此其耐热性一般是最好的。但是随分子量不同，其性质有明显差异，适用温度也明显不同。低分子量的是油状液体，俗称甲基硅油，适用温度通常在200度左右。高分子量的是黏弹态橡胶状固体，俗称甲基硅酮胶，适用温度可达300度以上，例如OV-1固定相的标称适用温度为350度，是常规固定相中适用温度最高的一种，实践也表明这种固定相确实能在350度柱温下使用一定的时间。但是这种高分子量的固定相在接近室温时粘度非常大，只有柱温较高时才能获得较高的柱效，柱温太低时无法使用。分子量适中的表现为半流态弹性体，以SE-30固定相为代表，最高适用温度约为280~300度，随杂质含量不同略有差异。 对于其他取代基的聚硅氧烷，分子量变化也有类似的影响规律，但考虑到粘度的影响，除苯基取代的聚硅氧烷外，一般只使用分子量中等偏低的型号，因为其他极性取代基会导致粘度的进一步增加，分子量太高不利于使用。除少量苯基取代外，其他强极性的取代基都会使聚硅氧烷的热稳定性减弱，适用温度随极性的增强而降低。5%苯基取代的聚硅氧烷，如SE-52、SE-54、OV-73等，适用温度也可以达到280~300度，而高苯基取代度的聚硅氧烷，如OV-61、OV-17等，适用温度降低较为明显，通常只有250~260度左右。三氟丙基、氰丙基等强极性基团会使聚硅氧烷的热稳定性显著降低，取代度不太高的品种，例如OV-1301、OV-1701等，最高适用温度约为250度，取代度高的时候，适用温度降低更明显。例如OV-210一般在240度以下使用才能比较保险，OV-225、OV-275等品种的最高适用温度大约不超过220度。只有Xe-60这种分子量非常大的固定相才能在更高温度下使用，但通常也不能超过250度。另外，氰丙基取代度高的聚硅氧烷由于极性强、粘度大，因此在低温下柱效较低，最好在100度或者更高的柱温下使用。 总的来说，对于聚硅氧烷这一类固定相，最高适用温度至少应该符合两个规律：一是分子量大的挥发弱，适用温度应该更高；二是极性强的稳定性差，适用温度应该更低。明显偏离这个规律的数据肯定是值得怀疑的。. 这里必须指出，早期文献使用填充柱研究固定相性质，填充柱中固定相总量较大，少量流失也不至于明显损坏；而且当时的色谱仪灵敏度普遍不如现在高，因此对于固定相的流失不甚敏感；这两个因素导致的结果就是，报道的固定相适用温度普遍偏高，我们在查阅早期文献和手册需十分注意。而目前普遍使用了毛细管柱，负载的固定相总量少得多，少量流失就有损坏的可能，同时现在还普遍采用高灵敏度的检测器进行微量分析，对固定相流失问题必须有更加严格的要求。 而且早期文献年代久远，以讹传讹的现象层出不穷，例如著名的OV-17固定相，早期给出的最高适用温度是275度，而之后该数据多次转载，最后讹传成了375度并载入了各大专著和手册的数据表中。要知道，同类固定相的毛细管柱在近十几年才实现了350度左右的使用温度，难道色谱固定相技术开了几十年的倒车？这个显著错误数据在各大专著和手册中堂而皇之的存在几十年却无人指出，实在令人深思。其实这一问题在Walter Jennings的《玻璃毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]》专著中早就有所提及，作者也的指出OV-17固定相用于毛细管柱的最高使用温度实际上约为250度，但是仍然没有明确指出固定相表格中数据的错误。 还比如有的文献中给出的OV系列各种固定相的最高适用温度都是350度，甚至连OV-351这种聚乙二醇类的固定相也标称最高适用温度是350度，这显然也是不合理的。究其原因，可能是不经思考的采纳了产品宣传资料，因为在OV公司的产品介绍中有提到OV系列固定相的最高适用温度可达350度，其言下之意是只这一系列产品中最高的那一种可以达到350度的适用温度，而几经转载就变成了所有的品种都是350度的适用温度。 国产上试厂的固定相也出现过类似的以讹传讹的问题。最典型的是上试产的硅油（III）固定相，其实际使用温度上限为180度，但不知何时被弄错成了280度。为了对这一问题进行验证，我曾经买过数瓶不同批次的该产品进行实验，明确证明280度这一数据是错误的。但是这一错误数据还是一直被收入在《分析化学手册第五分册》和企业标准中，出厂的产品上也一直堂而皇之的写着“最高使用温度280℃，流失实验合格”。. 二十世纪八十年代以来，毛细管柱的一个重大技术进步是固定相的交联键合技术。这一技术使传统的直链聚合物固定相交联为网状聚合物固定相，不仅分子量成指数增加，分子链的锚固点也变得更多，稳定性大大增强。这一技术使原有固定相的最高适用温度普遍提高了20~30度左右。进入二十一世纪以来，各大厂商又基于亚芳基改性、碳硼烷改性等技术生产了低流失色谱柱（MS柱），使原有同类固定相的适用温度又进一步提高了20度以上。其中特别是含有35%亚芳基的固定相，其结构处于稳定性最佳的状态，适用温度提高最为明显，达到340度以上。在瓦里安被安捷伦收购之后，其他厂家也没有停止开发耐高温、低流失固定相的脚步，也纷纷推出了相应的产品，各种固定相的最高适用温度还在继续提高，例如Restek公司的Rxi系列，SGE公司的BPX系列，Phenomenex公司的ZB-plus系列，等。 下表列出了一些常见固定相型号的最高适用温度，温度的判断均以可长期连续使用、且不会检测到明显的柱流失这两个条件同时满足为标准，数据大部分来自于本人或者同行的操作实践，可能存在一定的上下偏差，但应该没有重大差错，可供实践使用中参考。.4、聚乙二醇固定相的适用温度范围 聚乙二醇固定相的适用温度范围一般来说比聚硅氧烷小得多，并且受到自身分子量大小和杂质含量的影响很大。常用的PEG-20M是分子量2万的品种，最高适用温度可达200度以上，少数质量好的甚至可以在220度稳定使用很久，但是有些质量较差的却远达不到这么高的适用温度。同时要注意，分子量2万的聚乙二醇在55度时会凝固并逐渐结晶，因此其最低适用温度通常不低于60度。分子量小一些的聚乙二醇品种具有更低的凝固温度，但是最高适用温度也明显降低，因此使用不多。微量的酸性杂质和金属离子都会催化聚乙二醇链的断裂，这是纯度低的产品适用温度难以提高的主要原因，而向其中添加强碱则是提高其热稳定性的重要方法。 聚乙二醇与硝基对苯二甲酸发生酯化反应生成的缩聚物是针对游离脂肪酸分析的一种固定相，简称FFAP。由于缩聚使分子量进成倍增加，因此这种固定相的热稳定性更好，通常能在220度长期稳定使用。与聚乙二醇一样，FFAP固定相在较低温度下会凝固，最低适用温度约为60度。 交联键合技术在聚乙二醇固定相的毛细管柱中同样有广泛应用，实现交联后，最高适用温度提高了20度以上，达到240度左右。虽然在更高的柱温下也能短时间使用，但是聚乙二醇链断裂的问题是难以克服的，高温导致的寿命减少非常明显。交联限制了分子链的移动与重排，对抑制聚乙二醇在低温下结晶有一定作用，因此交联型的聚乙二醇固定相的最低适用温度也有不同程度的降低，不同产品在20~50度范围内不等。 近十几年在低流失的聚乙二醇柱方面也取得了技术进展，能在250度甚至更高温度下长期稳定使用的聚乙二醇柱已有好几个不同的型号，例如瓦里安的VF-WAXms、安捷伦的DB-HeavyWax等。还有一些厂家也声称开发了耐高温低流失的聚乙二醇固定相型号，但是尚未见到详细的流失测试和寿命测试报告，对其性能还需观望。.5、关于固定相最高适用温度，其他需要说明的问题 以上简要讨论的固定相的最高适用温度，给出了各种固定相的推荐值。但是实际应用中问题还要复杂得多，不能简单套用表中的数值。. 不同厂家的产品质量差异明显 固定相都是高分子材料，其分子量分布和微量杂质对性能影响很明显，不同厂家的产品看似接近，实际使用中却会显著不同。比如前面提到的聚乙二醇固定相，同样是分子量2万的产品，如果用普通分析纯试剂的聚乙二醇来当固定相使用，通常使用温度只能达到160~180℃，再升温就会很快分解殆尽，而使用专门色谱固定相级别的产品则可以在200℃稳定使用。又比如SE-30本来是一种工业硅油产品，低分子量杂质较多，后来有厂家对其进行了纯化得到专用的色谱固定相级别的产品，最高使用温度就有了显著的提高。对于键合固定相和低流失固定相也有类似的问题，不同厂家的同类产品，在同样温度下的流失水平有显著差异。以我自身使用的经验为例，同属5%苯基聚硅氧烷的MS固定相，VF-5ms、HP-5ms、RTX-5ms三者在同样温度下进行比较，VF-5ms的流失比另外两种要低很多。即使同一厂家的产品，不同系列之间也有明显差异。例如同属安捷伦，HP-5的流失明显比DB-5要高不少；又例如SGE公司的产品，AC系列的质量低于BP系列，最高适用温度相应的也会低一些。. 不能只看宣传资料上的数字 浮夸风、放卫星不是中国独有的，卖东西的人都有王婆卖瓜的习惯，因此选择色谱柱的时候一定不能只看宣传资料上的片面之词。还是以我使用过的VF-5ms与RTX-5ms为例，前者标称温度为325/350℃、后者标称温度为330/350℃，看似后者的指标更高，然而实际使用中后者的流失要比前者高数倍。再例如同属安捷伦旗下的HP-innowax和DB-wax，柱规格均为30m*0.32mm*0.25μm的情况下，前者标称温度为260/270℃，比后者高了10度，然而根据我实际使用的情况，二者的热稳定性不相上下，同温度下DB-wax的流失甚至还稍微低一些，而且实践证明HP-innowax想要长期稳定工作且不产生显著的基线噪声，柱温不宜超过230℃，比标称数值更低VF-WAXms还要差很多。那么这个标称的“260/270℃”算不算虚假宣传呢？这个确实很难判定，因为厂家只说可以用，没说能用多久，用三天就报废也算可以用啊（手动滑稽. 要注意柱规格产生的差异 前面讨论的是固定相的适用温度，但固定相都是做成色谱柱来使用的，因此我们更加关心色谱柱的最高适用温度。同样的固定相，只做的色谱柱长度、内径、膜厚不同，最高适用温度会有不少的差异。影响最显著的是膜厚，其他条件不变、膜厚加倍时，固定相的流失水平会增加一到二倍不等。而且膜厚太大的色谱柱制备更困难、容易出现交联不完全的问题。因此使用厚液膜（1.0μm或者更厚）的色谱柱时，允许的最高温度一般要降低10~20℃。柱内径增加、柱长增加时，固定相的流失也会有一定的增加，所以在使用大口径柱（0.53mm）、长柱（60m或者以上）时，也要注意将允许的最高温度适当降低。[/font][/font][/font]

在实验中，我们有时候会遇到液相色谱进同样浓度的样品，同样的方法，为什么信号响应值突然变低？是什么原因导致的呢？下面就简单为大家分析一下，逐一排除就可以找到问题所在了～～～响应值的问题主要来自进样器、检测器以及样品稳定性：（1）进样器故障引起的响应值不稳定：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504241325_543400_2452211_3.jpg（2）检测器故障引起的响应值不稳定：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504241325_543401_2452211_3.jpg（3）来自样品的问题：　　样品光解、水解、酸解、碱解、氧化等，以及由于作为固定相基质的硅胶金属含量太高促进了某些生化样品的分解。（4）来自基质的问题：　　在残留、药物代谢等分析中，样品基质比较复杂，与目标峰未分开的干扰物会影响目标化合物的定量。

[b]问题：[b][b][/b]如何确保毛细柱的化学稳定性？[/b]答案：[b]毛细柱化学稳定性：[/b] 键合和交联固定相不会因为样品中有水或有机溶剂而受到损环。如果分析结果不理想，有可能是有其它一些溶剂和固定相产生了作用，但对色谱柱一般没有什么损害。尽量不要使样品中含有无机酸（盐酸，硫酸，磷酸和硝酸等）和碱（氢氧化钾和氢氧化钠等），它们对固定相有很大的破环。如果出现了化学性的损害，截去柱前端0.5-1 米，一般都可以确保柱性能的恢复。 非键合相毛细柱在进样进程中极易流失，建议在色谱柱前加上3-5 米的预柱。这样可以最大限度地减少固定相的损坏，特别是在采用柱上进样和不分流进样时。[/b][align=center]=======================================================================[/align]【[b]活动内容[/b]】1、每个工作日上午10：00左右发布一个色谱问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【[b]活动奖励[/b]】[b]幸运奖：[/b]抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[b][color=#ff0000]2钻石币[/color][/b]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；[b]中奖名单：mengzhaocheng（注册ID：mengzhaocheng）999youran（注册ID：999youran）zengzhengce163(注册ID：zengzhengce163)yifan1117（注册ID：yifan1117）zgx3025（注册ID：v2844608）[img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707131502_01_708_3.jpg[/img][img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707131502_02_708_3.jpg[/img]积分奖励：[/b]所有回答正确的版友奖励[b][color=#ff0000]10个积分[/color][/b]（幸运奖获得者除外）。【[b]注意事项[/b]】同样的答案，每人只能发一次[align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align]

[b]以工业硅油DC710为原料制备高纯度色谱固定相摘要：固定相是色谱分离的核心技术。作为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相的聚硅氧烷需要有较高的分子量和较窄的分子量分布。如果固定相中低分子量的杂质较多，将导致固定相的热稳定性差、高温流失严重。本文以工业硅油为原料，提出以四氢呋喃为良溶剂、水为不良溶剂的沉淀分级方法，成功的将工业硅油中的低分子量杂质分离除去，获得了分子量高、分布窄的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相。将该固定相制备成填充柱进行评价，结果表明其热稳定性优于进口的色谱固定相OV-17，而分离选择性相似。1 引言[/b] 固定相是色谱分离的核心技术。聚硅氧烷是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法使用最广泛的固定相材料。常见的聚硅氧烷有甲基聚硅氧烷（俗称甲基硅油）、苯基甲基聚硅氧烷（俗称苯甲基硅油）、氰丙基苯基-甲基聚硅氧烷、三氟丙基-甲基聚硅氧烷等。 国内外生产聚硅氧烷产品的厂家很多，产品型号和规格也各有特色。但是能够用作色谱固定相的产品却不多，性能优异的种类则更少。作为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相，除了要有分离能力外，还要求有好的稳定性，一方面是化学稳定性，即不会与待测物发生任何不可逆的化学反应；另一方面是热稳定性，即高温下不挥发、不分解。普通的工业级硅油往往因为稳定性不够而无法用作[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相，这主要是因为工业硅油中一般含有小分子杂质和大量的低聚物。高温下这些杂质和低聚物逐渐挥发和分解，从而形成了基线漂移和噪音，使检测结果变差。虽然通过长时间的高温老化可以使低沸点组分流失的问题减轻，但是老化的代价是固定相总量的大量损失。经过这样的长时间高温老化处理后，实际使用时的固定相负载量（对于毛细管柱是液膜厚度）会显著低于制备色谱柱时的标称值。而专为色谱分析制备的聚硅氧烷一般都采用了独有的生产工艺，低聚物和小分子杂质很少，从而具有很好的高温稳定性，其代表产品主要有美国OV公司（Ohio ValleySpecialty Chemical Co.）的OV系列、美国色谱科公司（SupelcoInc.）的SP系列、美国通用电气公司（General Electric Co.）的SE系列等。上述进口聚硅氧烷固定相的热稳定都很好，例如甲基聚硅氧烷SE-30的最高使用温度达到300℃以上，苯基甲基聚硅氧烷OV-17的最高使用温度可达280~300℃。 国内的上海试剂厂也曾生产过聚硅氧烷类的色谱固定相，商品名为硅油I、硅油II等，目前仍在由国药集团销售。但由于生产技术不足，这些国产固定相的热稳定性普遍不太理想，最高使用温度只有200℃左右。正是由于国内技术的落后和国外大公司的技术垄断，导致色谱固定相价格昂贵。例如西格玛奥德里奇公司（Sigma-Aldrich）销售的OV-17固定相每25g售价高达8000余元。 苯甲基硅油是常见的工业产品，广泛用作导热油和扩散泵油，最具代表性的产品有美国道康宁公司（Dow Corning Co.）的DC710等，国内也有厂家生产同类产品。该类型的工业硅油具有与OV-17色谱固定相类似的分子结构和分离选择性，因此也有被用作色谱固定相的尝试。但是由于DC710的分子量较小且杂质较多，其耐热性不理想。即使是专供色谱使用DC710试剂，最高使用温度一般也只有220~250℃左右。 硅油的生产工艺较为复杂，想精确控制分子量不太容易。但是由于聚合物的分子量存在一个较宽的分布，既有高分子量的组分、又有低分子量的组分，因此我们可以通过高分子化学中特有的沉淀分级方法将工业硅油中低分子量组分和其他小分子杂质除去，从而实现纯化、获得分子量较高且分布较窄的高性能产品。.[b]2 实验2.1 原料[/b] 美国道康宁产DC710苯甲基硅油，上海国药产分析纯四氢呋喃，去离子水。[b]2.2 实验方法[/b] 称取DC710苯甲基硅油5.00g放入400mL高型烧杯中，加200mL四氢呋喃，磁力搅拌溶解。保持室温在25℃左右，向上述溶液中缓慢滴加纯水80mL，同时不断搅拌，得到乳浊液。加盖，继续搅拌30min，然后将乳浊液转入带塞的离心管中，以4000r/min的速度离心5min使两相分离。弃去上层液体，收集下层高分子相合并，加入10倍体积的四氢呋喃-水溶液（体积比2/1），加塞后充分振荡。再次离心分离，弃去上层液体，收集下层高分子相，再加入10倍体积的纯水洗涤一次。弃去水相，收集下层硅油，真空干燥得到产物3.55g，得率71%。 将上述产物按上述相同方法进行二次沉淀提纯，得产物2.46g，总得率49%。[b]2.3 产物表征[/b] 产物分子量和分子量分布用凝胶渗透色谱（GPC）测定，仪器为安捷伦1100色谱系统，色谱柱为安捷伦PLgel mixed-C（4.6mm*250mm），流动相为色谱纯四氢呋喃，流速0.350mL/min。分子量标样为单分散聚苯乙烯。 产物热稳定性用热重分析法表征，仪器为美国TA公司SDT Q-600综合热分析仪，高纯氮气保护下进行测定，升温速率为5℃/min。[b]2.4 产物的色谱分析性能评价[/b] 将产物制备成填充柱进行性能评价。将纯化产物用甲苯溶解涂覆到80~100目上试102（硅烷化）担体，负载量5%。均匀干燥后用真空抽吸法装填成1.5m*2mm（i.d.）的不锈钢柱。色谱柱通载气缓慢升温至260℃老化12小时后使用。 作为对比样的未纯化DC710和OV-17（英国CS公司产，上试厂分装）按同样方式制成色谱柱进行对照实验，其中DC710柱的老化温度为230℃。 所用色谱仪为山东瑞虹产SP7820，载气为高纯氢气，流速20mL/min。检测器为FID，灵敏度10[sup]9[/sup]，氢气流速20mL/min，补充气为氮气，30mL/min，检测器温度为280℃。.[b]3 结果与讨论3.1 纯化前后的分子量和分子量分布对比[/b] 聚合物的溶解性依赖于其分子量，在一定条件下通常是高分子量的溶解度小、而低分子量的溶解度大。选择一个良溶剂将试样溶解，然后逐渐加入不良溶剂，则分子量大的物质优先沉淀、而分子量小的物质保留在溶液中。本方法用四氢呋喃作为良溶剂溶解苯甲基硅油，让后加入纯水作为不良溶剂进行沉淀，高分子量的聚合物优先沉淀，低聚物和小分子杂质留在溶液中，从而达到分离纯化的目的。分别将一次纯化和二次纯化的产物进行GPC测定，结果见图1，对比样DC710和OV-17的GPC结果也见图1，根据聚苯乙烯标样计算出各样品的评价分子量和分子量分布见表1。从测定可以看出，DC710的分子量较小且分布较宽，在低分子量一侧有明显的肩峰，说明含有较多的小分子杂质。经过一次沉淀提纯后，产物的分子量分布明显变窄、杂质的肩峰显著减小，说明沉淀纯化有很好的效果。与OV-17的GPC结构对比表明，一次沉淀提纯产物已经具有与色谱级OV-17接近的平均分子量和分子量分布。经过二次沉淀纯化之后，产物的分子量已经显著高于OV-17，分子量分布也显著更窄，杂质的肩峰也已经完全除去。上述结果都表明，本沉淀分离方法可以有效的获得分子量高且分布窄的硅氧烷聚合物。[align=center] [img=,303,223]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702462024_1150_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图1 纯化产物与对比样品的GPC分析[/b][/align][align=center] [/align][align=center][table][tr][td=4,1,106] [align=center][b]表1 纯化产物和对比样的平均分子量和分子量分布系数[/b][/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,95] [align=center] [/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]数均分子量[/align] [align=center]M[sub]n[/sub]/10[sup]3[/sup][/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]重均分子量[/align] [align=center]M[sub]w[/sub]/10[sup]3[/sup][/align] [/td][td=1,1,106] [align=center]分子量分布系数[/align] [align=center]M[sub]w[/sub]/M[sub]n[/sub][/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,95] [align=center]一次纯化产物[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]2.94[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1.98[/align] [/td][td=1,1,106] [align=center]1.49[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,95] [align=center]二次纯化产物[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]3.35[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]2.47[/align] [/td][td=1,1,106] [align=center]1.35[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,95] [align=center]DC710[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]2.45[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1.54[/align] [/td][td=1,1,106] [align=center]1.59[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,95] [align=center]OV-17[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]2.85[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1.92[/align] [/td][td=1,1,106] [align=center]1.48[/align] [/td][/tr][/table][/align][b]3.2 纯化产物的热重分析[/b] 将二次纯化的产物与两个对比样在同样条件下进行了热重分析，结果见图2。三者的热失重温度和失重率有显著差异，这显著表明了分子量分布改变后耐热性能的差异。DC710的分子量分布最宽、低分子量杂质最多，因此在较低温度下就表现出明显的失重。色谱级的OV-17由于有更高的分子量和更窄的分子量分布，因此失重温度更高、失重量更少。若以失重2%作为固定相流失的指标，则OV-17达到280℃左右，比DC710高30℃以上。而二次纯化的产物由于分子量比OV-17更高、分布也更窄，相应的也具有更高失重温度。同样以失重2%作为指标，二次纯化产物的温度达到约295℃，比OV-17的热稳定性更好。[align=center][img=,303,230]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702466568_157_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图2纯化产物与对比样品的热重分析[/b][/align][b]3.3 固定相的热稳定性[/b] 通过FID基流大小和噪音大小来评价固定相的热稳定性。高温下固定相的流失是导致FID基流增加的直接原因，基流增加的同时也将引起基线噪音的响应增大。将制备的色谱柱在不同柱温下达到平衡，记录基流的大小和基线噪音的大小，结果分别见图3和图4。从图中可以看出，DC710作为固定相的热稳定性是较差的，在220℃已有比较明显的流失，基流和基线噪音都出现明显增大的现象，柱温达到240℃时基流和基线噪音已经增加到无法使用的地步。因此DC710作为固定相的最高使用温度约为220~240℃。经过二次沉淀提纯后的固定相热稳定性显著提高，在柱温达到260℃时才观测到比较明显的流失现象，此柱温下的基流不到20mV、基线噪音不到0.04mV，对测定基本上没有不利影响。柱温进一步提高到280℃后流失现象才表现得比较明显，但基流和基线噪音仍然在可以使用的范围内。因此可以认为二次沉淀提纯后的固定相最高使用温度可达280℃以上。与色谱级OV-17固定相相比，本方法制备的固定相在相同柱温下具有更低的基流和基线噪音，这说明提纯后的固定相的热稳定性已经优于市售的OV-17试剂，高温流失更低、可使用的温度更高。[align=center] [img=,303,231]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702465407_4798_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图3 纯化产物与对比样品的FID基流[/b][/align][align=center] [img=,303,228]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702466915_2972_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图4 纯化产物与对比样品的FID基线噪音[/b][/align][align=center] [/align] 为了进一步考察固定相的热稳定性，对色谱柱进行了高温长时间使用的实验。将色谱柱在260℃的柱温下长时间连续使用，并间隔一段时间以邻苯二甲酸二正辛酯（DnOP）标样测定容量因子。随着高温使用时间的延长，容量因子的变化如图5所示。在初始时间，OV-17柱的容量因子就略低于二次沉淀提纯的固定相，这主要是因为OV-17固定相本身仍然含有较多的低分子杂质，在色谱柱制备初始的老化阶段就有比较明显的流失，实际所得的负载量小于初始配比。而提纯的固定相杂质较少，在色谱柱制备初始的老化阶段流失不多，实际所得的负载量更接近初始配比。随着使用时间的延长，OV-17固定相仍有不断的流失，因此DnOP的容量因子持续减小，使用48h后减小了约4%。而二次沉淀提纯的固定相几乎没有进一步的流失现象，使用48小时后DnOP的容量因子变化不足1%。[align=center] [img=,303,233]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702471368_4040_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图5 容量因子随使用时间的变化[/b][/align][align=center]柱温260℃，以邻苯二甲酸二正辛酯（DnOP）测定。[/align][b]3.4 固定相的分离选择性[/b] 沉淀分离提纯只改变了聚合物的分子量分布，对于基团组成没有影响，因此固定相的极性强弱和分离选择性不会发生变化。测定了几种不同结构物质在这几种固定相上的保留指数，结果见表2。二次沉淀提纯的固定相对各种物质的保留指数都与DC710和OV-17两种固定相接近，这表明纯化后的固定相具有与OV-17基本一致的分离选择性，一定程度上可以替代OV-17固定相。[align=center] [/align][align=center][table][tr][td=4,1,95] [align=center][b]表2 几种物质在纯化产物和对比样上的保留指数[/b][/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,113] [align=center] [/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]DC710[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]OV-17[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]二次纯化产物[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,113] [align=center]甲基丙烯酸丁酯[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1035[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1042[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1045[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,113] [align=center]己酸乙酯[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1045[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1061[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1058[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,113] [align=center]正辛醇[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1182[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1176[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1188[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,113] [align=center]硝基苯[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1266[/align] [/td][td=1,1,76] [align=center]1247[/align] [/td][td=1,1,95] [align=center]1259[/align] [/td][/tr][tr][td=4,1,95] 注：柱温140℃[/td][/tr][/table][/align] 尝试用二次沉淀提纯的固定相分离测定三硝基甲苯、邻苯二甲酸酯等高沸点物质，获得了较好的效果，见图6、图7。[align=center] [img=,303,229]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702470208_3906_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图6 三硝基甲苯的色谱图[/b][/align][align=center]三硝基甲苯（TNT）浓度0.10g/L，溶剂异丙醇，柱温180℃，进样口220℃，其余条件同2.4。[/align][align=center] [/align][align=center] [img=,303,225]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181702474582_4789_2204387_3.png[/img][/align][align=center][b]图7 邻苯二甲酸酯的色谱图[/b][/align][align=center]邻苯二甲酸二异丁酯（DiBP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸丁苄酯（BBP）、邻苯二甲酸二（2-乙基-己基）酯（DEHP）、邻苯二甲酸二正辛酯（DnOP）浓度均为1.00g/L，正己烷溶剂，进样口240℃，其余条件同2.4。[/align][b]4 结论与展望[/b] 本文采用较为简单的沉淀分级方法分离纯化工业硅油，获得了性能优良的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相，其高温稳定性优于进口的OV-17固定相，分离选择性与OV-17类似。 近年来国内的色谱技术有了不小的发展，色谱仪器的国产化率显著提高，但一些核心技术，例如高精度的流量控制阀、高惰性的毛细管柱、耐高温的色谱固定相、耐高温的高分子密封材料等方面，与国外还有很大差距，甚至有些技术完全由国外大公司垄断。本文的尝试为解决上述问题提供了一定的思路和参考。只要敢于尝试和创新，并且有求精务实的精神，打破国外的技术垄断、掌握自己的核心技术并非不可能的。.