细胞储物柜系统

近几年来，3D（three dimensional）细胞培养系统开始成为生物学研究新的研究方法。使用3D系统培养系统能更好的模拟生物体内的真实生理环境，而2D（传统的贴壁培养）细胞培养系统不能有效的模拟细胞在生物体内的生理环境。3D细胞技术有很多种方法，使用多细胞形成的细胞团是其中主要的研究应用之一。细胞团是微小的细胞聚集簇，可以用来研究3D情况下向外生长的情况（细胞出芽）。

CloneSelect单细胞分离系统（CloneSelect Single Cell Printer）采用类似喷墨打印的技术，柔和地产生包裹细胞的液滴无接触地直接分配到微孔板中（图1）。同时，该系统借助智能图像分析，确认细胞数目，分析细胞的形态（大小和圆度）及荧光强度，联动的真空装置将不符合要求的液滴（如空液滴或者含多个细胞的液滴）直接吸走，而符合要求的细胞液滴则分配至微孔板，从而实现对单个细胞的分选和接种。单细胞分离系统是一种可比移液器操作的柔和的单细胞分离技术，而流式分选由于高的液体剪切力和电压的影响，会降低敏感细胞和部分受损细胞（如电转后的细胞）的成克隆率，因此单细胞分离系统更适用于基因工程细胞的克隆，维持细胞活力，并提供直接的单克隆性图像证据。

（1）系统采用的通道载玻片具有超薄底部及高质量光学性能，合适高端显微镜及获得优质的成像效果。（2）能实时观察细胞趋化情况，计算每个细胞的趋化速率（通过后期实验数据分析，根据细胞的运动轨迹和时间算出运动速率），用transwell是做不到这点的（因为transwell只能数最终穿到下室的细胞数量，细胞运动速度是没办法考察的）；（3）系统专门配置的通道载玻片适配器可提供加热，完整匹配显微镜系统，适合各种工作距离物镜。（4）这个系统做出的浓度梯度可以维持48小时，对快速迁移细胞和慢迁移细胞都适用；（5）除了做浓度梯度的细胞趋化实验，还可以做不同诱导剂的细胞趋化实验，观察细胞在不同诱导剂之间的选择，就是说，可以在两侧的三角形腔室放不同的诱导剂；（6）这个产品还有配套的图像分析，录下完整的视频，就能把数据整理出来，数据包括了目标细胞的所有运动轨迹，速率等，7-10个工作日出结果；（7）可进行2D和3D的细胞趋化实验

采用LaVision公司的显微粒子成像测速系统MITAS对双流体低剪切速率微流控系统中红细胞的聚集和对非牛顿血液粘度的影响进行了实验测量研究

白皮书《采用活细胞分析系统最大限度地洞察细胞生长》展示如何利用Incucyte系统的活细胞分析能力更快、更深入、更高通量地提供对生物学事件的新见解，从细胞凋亡、免疫细胞杀伤、神经突生长和吞噬作用，到3D 肿瘤球生长和活性等各种应用场景。

在存在或不存在免疫球蛋白 G 同种型特异性抗体的情况下，检测肿瘤细胞（作为靶细胞）对自然杀伤 (NK) 细胞活性（作为效应细胞）的反应，以确定能否使用 Agilent xCELLigence 系统研究细胞介导的细胞毒性（依赖于特异性抗体的细胞介导的细胞毒性 (ADCC)）。结果表明，在单层粘附肿瘤细胞上添加 NK 细胞悬液并未导致阻抗或细胞指数 (CI) 产生变化，因为 NK 细胞并不接触底层生物传感器。但是，这些非粘附 NK 细胞分泌的穿孔素和颗粒酶激活了 Caspase，导致肿瘤细胞凋亡。功能异常和垂死的肿瘤细胞脱离生物传感器，从而减少了生物传感器表面上存活和粘附的细胞数量。我们的发现为 Agilent xCELLigence 系统能够用于动态实时检测细胞介导的细胞毒性和特异性抗体的影响提供了令人信服的证据。

本文利用电子鼻系统对三组含挥发性有机化合物的顶空癌细胞样品的挥发性生成模式进行了初步研究。由32个导电聚合物传感器（Cyranose 320）组成的商业化电子鼻用于分析三种类型的信号，这些信号是在培养基中生长的肺癌细胞、在培养基中生长的乳腺癌细胞和空白培养基（没有细胞）。应用基于神经网络（PNN）的分类技术，研究了电子鼻（E鼻）系统对癌肺细胞分类的性能。

介绍：CyBi-SELMA（CyBio品牌，德国耶拿公司）半自动移液工作站以其体积小、操作界面友好、兼容96或384孔板的特点，在低通量液体处理操作中非常适用。由于便于放入组织培养生物安全柜中，此设备非常适合在基于细胞的研究实验中应用，例如培养基更换、化合物浓度梯度筛选。iPSC制备的心肌细胞（iCell Cardiomyocytes）被《科学家》网站评选为2010年度生命科学领域的十大创新产品。位于美国威斯康星州麦迪逊市的Cellular Dynamics International (CDI)公司的研究人员将人类纤维细胞诱导生成多功能干细胞(iPSC)后，进一步对iPSC细胞进行重编程获得了人类心肌细胞产品iCell Cardiomyocytes，该细胞显示了活的心脏典型的电生理特征。这是目前第一个商业化的人类干细胞分化细胞系。iCell Cardiomyocytes为研究人员提供了最方便的细胞类型进行相关的特异性研究。此产品的主要目的是用于药物发现。药物毒性是药物研发中的一个严重问题，是药物退出市场的第二大原因。如何使药物更安全，甚至保全生命，是药物研发领域的很大机遇。 Chris Kendrick-Parker还介绍说，CDI公司每天都会制造、销售出数十亿的心肌细胞产品，在全球顶尖的20家制药公司中已经有一半的公司都成为了CDI公司的客户。这类人心肌细胞具有广泛用途，包括用于药物活性成分的心脏毒性研究。这种检测中的移液操作包括梯度稀释、化合物添加、细胞液添加，都是乏味、耗时，并且受到不同操作者在技术水平、准确度、重现性差异的影响。本实验采用Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell ViabilityAssay(CellTiter-Glo® 发光法细胞活力检测试剂盒)。是通过对ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质检测方法。ATP是活细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计，是进行自动化高通量筛选(HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂(CellTiter-Glo® 试剂) 直接加入含有血清的培养细胞中，无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在384 孔板上，加入试剂并混合后，10分钟内，该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为15 个。CyBi-SELMA用于一系列化合物的心脏毒性研究实验。对于SELMA自动化设备相比人工移液的操作友好性、快速、数据一致性进行评估。

探讨聚乙 烯亚胺( P E I ) 转染人神经母细 胞瘤细 胞 ( S H— S Y S Y ) 效果的影响因素。方法 利用 电泳 阻滞 实验测定 P E I 与 D N A形成 复合 物时所需的 比例 ， 通 过 M r r 法测定 P E I 对 s H— S Y 5 Y细胞 的毒 性 ， 采用流式细胞术检测细胞 转染效率 ， 探 索转基 因次数 对 P E I 转基 因效率的影 响。 结论： P E I 是 有效的体外真核细胞转 染剂 ， 可作为 S H— S Y 5 Y的基 因载体。

在评估细胞对药物、环境污染物、营养物质和/ 或纳米粒子的摄入行为时，检测单细胞中的金属元素可以为了解细胞机理提供一种全新有效的方法。传统的做法是溶解大量的细胞，假定细胞群中的每一个细胞包含等量的金属，从而量化细胞中的金属含量，或者利用光学或电子显微镜为细胞中的金属成分定性。这些方法不仅耗费时间，而且只能表征细胞群中的一小部分细胞。珀金埃尔默公司的技术人员将实际检测数据和数学模拟相结合，开发出了一套专利的单细胞进样系统和专用软件——Syngistix ™ 细胞应用软件模块。该应用软件模块是实验室分析细胞金属含量的理想工具，包括分析细胞的金属摄入行为（金属离子或纳米颗粒）以及测量细胞的内在金属含量。这款独特的应用模块可以区分同一种待测元素在细胞外部和细胞内部的含量，并对其进行量化。我们无需进行后续数据处理就可以在单次分析中测定下列信息：每个细胞中金属的含量、细胞群落中的金属含量分布、含金属或纳米颗粒的细胞浓度和每个细胞的纳米颗粒数量。配合NexION 系列ICP-MS 仪器，Syngistix 单细胞应用软件模块是世界上第一款单细胞ICP-MS 专用分析软件，在速度、功能、自动化和易用性等方面均首屈一指。

红外一直以来都是一种经典的结构分析的光谱手段，它能够有效反映分子在组分中的分布，并且无需标记。但是由于其制样困难、信噪比差、无法观测溶液中的样品等缺点，使得红外在生物领域上难以满足科研工作者的需要。 mIRage是PSC公司新研发的非接触式、亚微米分辨、高信噪比的新型红外拉曼同步测量系统。它较传统的FTIR显微镜来说分辨率有了显著地提升。其分辨率可达400~500 nm。更难能可贵的是，它特的热膨胀红外测量技术，能够做到真正的环境友好，能够在溶液中直接分析细胞、组织、材料表面的红外光谱。此外，mIRage还可搭配拉曼光谱模块，通过红外光谱与拉曼光谱的共同分析，能够帮助研究人员快速准确地确定样品组成结构信息，突破传统荧光分析的限制。

SpectraMax? MiniMax? 300细胞成像系统和SoftMax? Pro软件为EarlyTox细胞完整性试剂盒的应用提供了成像和数据分析的整套硬件软件工具。使用仪器的双通道荧光成像功能以及软件的单细胞分析功能，可在5分钟内分析一块96孔板细胞活性。特点信号强，缩短曝光时间，成像速度更快适用于各种细胞类型，应用广泛拍照和分析一体完成，流程简化

细胞迁移在肿瘤形成、免疫作用以及伤口愈合等过程中发挥重要作用。不正常的细胞迁移是心血管、癌症等疾病的一个重要特征。CloneSelectImager系统可以在体外定量客观检测治疗药物的效果、细胞培养基对细胞迁移的影响以及研究细胞和细胞之间的相互作用。系统配备的迁移软件模块可以基于细胞识别客观检测细胞迁移的速率。

FLIPRTETRA系统可用于完成多数细胞基础的实验研究。本篇应用研究推荐了细胞内PH值检测实验在FLIPR上运行的基础方案。实验在贴别细胞上完成，同时还讨论了一些重要参数的优化。因为每种细胞系都有其独有的特性，每个研究人员在进行自己的实验时都需要进行单独的优化。

近期，耶鲁大学成功安装了非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage，并在活细胞脂肪代谢研究中取得了新的进展！非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage在细胞成像中具有优异的潜力，可以提供脂质种类的信息，提供对低浓度物质如游离脂肪酸的定位，并允许对每个样品的脂质和蛋白质光谱特征进行全面位置光谱分析，并且能够应用长时间观测。这项技术未来将可以用于绘制细胞系和细胞内DNL的比率、疾病状态，进一步揭示DNL 导致代谢紊乱的原因。在评估针对调节DNL和治疗疾病的药物方面提供诸多帮助。

本文重点描述了CloneSelect Imager系统如何使用简单直观、客观、非侵入性方法代替传统主观、费时的显微镜观察，在不同时间点快速准确检测细胞密度。优势：不需要对DNA进行染色标记，整板整孔成像，数据更加客观。客观，定量评估细胞 生长CloneSelect Imager系统使用非侵入性方法，通过白光成像快速、定量检测细胞密度，产生每个孔的细胞生长曲线。快速获得结果：? 代替费时的人工观察? 获得可靠、以图像为依据的结论? 每个96孔板，90秒即可获得一致的结果

伤口愈合实验是体外研究细胞迁移的一个有用的实验。原理是人为的在铺板的单层细胞中制造一个空白的无细胞的地带，然后对这个无细胞地带的边缘的细胞进行观察；这些边缘的细胞会开始进行迁移活动，并且最终覆盖整个无细胞的区域，重新互相接触在一起。

杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。而这两种细胞分贝是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是他的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才是具有持续增殖能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞。

杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。而这两种细胞分贝是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是他的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才是具有持续增殖能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞。

EVIDENT共聚焦助力Cell封面发文揭示无膜细胞器异常导致周围神经病的关键机制

抗体和蛋白生产的细胞系开发，特别是用于治疗性目的，确保细胞系起源于单个细胞或者单细胞繁殖是非常关键的。传统的克隆方法，例如有限稀释法和FACS，都是用统计分析方法确定单克隆性的可信度。本文重点介绍了CloneSelect Imager成像系统基于客观的成像图片更直观、准确地证实细胞系的单克隆性。

ClonePix 2是最新一代的高效细胞克隆筛选系统(图 1)，主要用于抗体和蛋白类药物研发，适用于杂交瘤细胞的筛选，以及稳定高表达细胞株的筛选。ClonePix系统的全球装机量已经超过300套，其中排名前十的生物制药企业都是ClonePix系统的用户。相比涉及大量手工操作的有限稀释法，ClonePix 2系统利而更快速地获得优质克隆。在争分夺秒的抗体药物研发竞赛中，ClonePix 2系统可以帮助获得更多的时间和生产成本优势，最终获得更大的市场。用半固体培养基和荧光原位成像技术允许对更多克隆进行筛选，从

调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs )，早期亦称为Suppressor T cells，是一群以表达Foxp3、CD25、CD4为细胞表型特征的T细胞亚群，是维持机体免疫耐受的重要因素之一。胸腺是Treg细胞发育的主要部位。

通过使用C2MAP对培养上清液的多种成分进行同时分析，分别鉴定出了Kynurenine、2-Aminoadipic acid，作为在未分化iPS细胞、外胚层分化细胞中表示特征性波动的标志物成分。结果表明，所鉴定出的标志物成分是与细胞的未分化/外胚层分化状态密切相关的因子。因此，通过使用本系统，可以对细胞状态进行非侵袭性的评价。

本解决方案采用定制活细胞及图像处理软件及定制配件，灵活组合各显微成像配件，提供了一种功能强大，成本低廉，扩展性强的显微镜活细胞成像解决方案。也可以在现有的显微镜系统上升级，从而用最少的成本获得功能全面的显微镜成像需求。

利用细胞的特性（尺寸、密度等）可以用各种方法分离和纯化细胞。本文将介绍如何使用不同的离心方法进行细胞分离。

细胞培养中常见的“颗粒”可分为胞内和胞外两种，很多小伙伴因为不清除这些“颗粒”的来源，害怕污染而将细胞丢弃，不仅浪费心力，还耽误实验进度，接下来我们逐步分析这些“颗粒”产生的原因。

优势：1.带细胞成像系统的功能模块扩展了微孔读板机的检测应用2.方便检测每个细胞或每孔的标签蛋白的表达水平3.按照一般微孔读板机的简单流程4.细胞可视化数据输出，增加了数据可信性

如何看出细胞培养液体中存在支原体？1. 观察细胞的形态和生长特征:支原体污染比较严重时可出现生长减慢，有的培养基pH明显变酸，并出现细胞病变，以此可依次对支原体污染进行检测，但有些情况下支原体污染引起的病变特征与病毒感染相似，因此不能准确诊断。

采用钙离子荧光探针对细胞内钙离子等信使物质进行定量测定是研究细胞分泌活动的重要技术手段。其基本原理是 : 用荧光探针标记样本中的钙离子，根据样本中的荧光探针特性单色光源发出单色光，诱发出荧光。然后根据传感器检测到的荧光特性即可分析样本中的钙离子浓度。