细胞悬液

样品介绍：小鼠肺组织是实验研究中经常出现的实验组织。通过制备小鼠肺组织的单细胞悬液，可以将肺组织中的细胞分散为单个细胞，并保持其完整的细胞膜和细胞器结构。通过单细胞悬液的制备，研究人员可以对每个单个细胞进行分析，了解其基因表达、蛋白质水平、代谢状态等信息。

在肿瘤免疫学领域，单细胞技术可以帮助科学家们更好地了解肿瘤细胞的生长和扩散机制，以及免疫系统如何识别和攻击肿瘤细胞。然而，组织样本单细胞悬液制备是单细胞测序实验中至关重要的工作，其质量好坏直接影响了后续建库的成败以及测序数据产出质量。因此，单细胞悬液制备除了需要有经验丰富的人员来进行指导/操作，还得依靠靠谱的单细胞悬液制备仪来助力。

单细胞技术已经广泛应用于肿瘤，免疫，发育生物学，神经科学，细胞治疗，药物研发及动植物研究中。但并不是所有的组织都适用于单细胞RNA测序，现阶段单细胞RNA测序研究的一个极大的挑战仍是如何获得高质量的单细胞悬浮液。科研者单细胞悬液仪具有起始组织量小，时间短，细胞得率高，细胞活性高的特点。带加热功能，对样品的消化处理过程始终处在恒温状态，细胞得率高达90%，方便了对真核生物进行单细胞核RNA测序。

机械性或人工制备的单细胞，在某些性质上很可能已改变了原组织细胞特性，因此处理不同组织时，努力摸索方法，尽可能采用对细胞损伤小，产率较高的单细胞悬液制备方法，最da限度地保持细胞原有特性。

通过测量细胞培养液中氢离子活性，根据能斯特方程，离子活度与电极电位成正比，对待测细胞悬液建立起电极电位与活性的关系曲线，得出待测细胞培养液酸性、中性和碱性的数值。

基于单核细胞研究的必要性以及猴作为实验动物的优势，为满足客户需要，更好地助力生物药研发，IPHASE作为创新药体外研究生物试剂引领者，开发出了国内首家猴CD14+单核细胞阳选试剂盒！

细胞复苏-细胞传代-细胞冻存的注意事项应用。细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM完全培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。加入DMEM完全培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。

细胞学研究中一个很重要的课题就是细胞的分离纯化，尤其是需要对某种特定的细胞进行功能研究，如对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞因子、细胞共培养检测细胞功能等，都需要得到高纯度的目的细胞。因此，高效地分离所需要的目的细胞是进行细胞功能研究的先决条件。

在存在或不存在免疫球蛋白 G 同种型特异性抗体的情况下，检测肿瘤细胞（作为靶细胞）对自然杀伤 (NK) 细胞活性（作为效应细胞）的反应，以确定能否使用 Agilent xCELLigence 系统研究细胞介导的细胞毒性（依赖于特异性抗体的细胞介导的细胞毒性 (ADCC)）。结果表明，在单层粘附肿瘤细胞上添加 NK 细胞悬液并未导致阻抗或细胞指数 (CI) 产生变化，因为 NK 细胞并不接触底层生物传感器。但是，这些非粘附 NK 细胞分泌的穿孔素和颗粒酶激活了 Caspase，导致肿瘤细胞凋亡。功能异常和垂死的肿瘤细胞脱离生物传感器，从而减少了生物传感器表面上存活和粘附的细胞数量。我们的发现为 Agilent xCELLigence 系统能够用于动态实时检测细胞介导的细胞毒性和特异性抗体的影响提供了令人信服的证据。

IPHASE/汇智和源全新升级T淋巴细胞增殖试剂盒，为T淋巴细胞（CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞）体外刺激增殖提供简单、高效、便于操作的方法。从单细胞悬液中免疫分选出的高纯度淋巴细胞亚群在体外经信号分子特异性刺激，即可模拟体内淋巴细胞增殖过程，获得数量足够多的淋巴细胞，供细胞免疫研究领域后期使用。

制备动物细胞培养液体培养基（需加入血清，保证无菌无毒），将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。　　　　当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象时，用胰蛋白酶再次处理，并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。进行细胞计数。　　　　依照计数结果，分瓶培养，进行传代培养。获得细胞系或细胞株。

设备和试剂--6厘米细菌培养皿--M2培养基+1毫克/毫升牛血清白蛋白（sigma） --M16培养基+ 1毫克/毫升牛血清白蛋白（sigma） --BLS胚胎聚集针（DN-10 或DN-09）--ES细胞单细胞悬液--窄口移液管（处理细胞和胚胎）来自Pasteur移液管或其他合适的玻璃毛细管（移液管内径的应? 100μm ）--来自雌性促排卵的八细胞胚胎-- Tyrode’s液，酸性（ sigma） --CO2孵化器

通过测量细胞培养液中氢离子活性，根据能斯特方程，离子活度与电极电位成正比，对待测细胞悬液建立起电极电位与活性的关系曲线，得出待测细胞培养液酸性、中性和碱性的数值。

实验方法原理:取一定量的细胞悬液，先加入特异的第1抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。

安捷伦新一代 ICP-MS/MS 平台可以轻松准确测试单细胞中的痕量金属元素以及 P、S 元素含量。由于其高灵敏度和彻底消除一切干扰的特点，可以挑选 P 和 S 等 ICP-MS 难测定元素（也是生物学研究中的重要表征元素）来精准测试传输效率，用于单细胞中低含量或者困难元素的准确测定，为细胞生物利用性等前沿科研提供一种全新的技术手段。

生物创新药的开发是一个复杂的过程，而构建一个适合于生产的高表达稳定细胞株是第一步，也是关键的一步。挑选到理想的高表达克隆后，就要开始选择商业化培养基或者定制培养基进行细胞培养优化。高通量、标准化、自动化的细胞培养和工艺优化能帮助我们在获得更准确结果的同时加速细胞株开发进度。本应用中，介绍了如何使用Ambr® 15高通量全自动细胞培养系统和Octet® 非标记分子互作分析系统联合进行培养基筛选和工艺优化，加速细胞株开发工作流程，以超快速度筛选出高产量高质量的单克隆细胞株。

利用岛津现有的“细胞培养上清液分析方法包“直接分析监测细胞上清液中组分变化，无需方法优化，并可快速实现方法拓展，前处理方便，数据分析结果直观。

生物膜的研究发展迅速，要研究生物膜的组成、结构及功能，首先必须分离出纯净的细胞膜。分离状态下的哺乳动物的红细胞膜，一般称为“血影”。哺乳动物的红细胞中没有通常真核生物细胞内所含有的任何细胞器，容易制备得到纯粹的细胞膜，取材方面来源也十分方便，是研究细胞膜的好材料。

广东某生物医药企业需要培养多批抗药性细胞用于实验，为了获得背景更一致的耐药株，需要将细胞单克隆化，以徒手挑单克隆法做细胞分选筛选出满足要求的细胞。Mshot明美推荐了活细胞成像仪MCS21，支持明场、相衬和荧光观察，尺寸小巧节省空间，可以连接到手机、平板或电脑流畅成像，方便易用，操作舒适，效果得到用户认可。

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态，并保持细胞特性。通过冷冻方式保存细胞，可以在需要时进行复苏及继续培养。

介绍一个关于离心法应用于脑脊液细胞学检查的实验。液体细胞学检测对于中枢神经系统感染性炎性疾病，膜下出血和肿瘤细胞发现过程中起着重要作用。

介绍：CyBi-SELMA（CyBio品牌，德国耶拿公司）半自动移液工作站以其体积小、操作界面友好、兼容96或384孔板的特点，在低通量液体处理操作中非常适用。由于便于放入组织培养生物安全柜中，此设备非常适合在基于细胞的研究实验中应用，例如培养基更换、化合物浓度梯度筛选。iPSC制备的心肌细胞（iCell Cardiomyocytes）被《科学家》网站评选为2010年度生命科学领域的十大创新产品。位于美国威斯康星州麦迪逊市的Cellular Dynamics International (CDI)公司的研究人员将人类纤维细胞诱导生成多功能干细胞(iPSC)后，进一步对iPSC细胞进行重编程获得了人类心肌细胞产品iCell Cardiomyocytes，该细胞显示了活的心脏典型的电生理特征。这是目前第一个商业化的人类干细胞分化细胞系。iCell Cardiomyocytes为研究人员提供了最方便的细胞类型进行相关的特异性研究。此产品的主要目的是用于药物发现。药物毒性是药物研发中的一个严重问题，是药物退出市场的第二大原因。如何使药物更安全，甚至保全生命，是药物研发领域的很大机遇。 Chris Kendrick-Parker还介绍说，CDI公司每天都会制造、销售出数十亿的心肌细胞产品，在全球顶尖的20家制药公司中已经有一半的公司都成为了CDI公司的客户。这类人心肌细胞具有广泛用途，包括用于药物活性成分的心脏毒性研究。这种检测中的移液操作包括梯度稀释、化合物添加、细胞液添加，都是乏味、耗时，并且受到不同操作者在技术水平、准确度、重现性差异的影响。本实验采用Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell ViabilityAssay(CellTiter-Glo® 发光法细胞活力检测试剂盒)。是通过对ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质检测方法。ATP是活细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计，是进行自动化高通量筛选(HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂(CellTiter-Glo® 试剂) 直接加入含有血清的培养细胞中，无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在384 孔板上，加入试剂并混合后，10分钟内，该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为15 个。CyBi-SELMA用于一系列化合物的心脏毒性研究实验。对于SELMA自动化设备相比人工移液的操作友好性、快速、数据一致性进行评估。

如何看出细胞培养液体中存在支原体？1. 观察细胞的形态和生长特征:支原体污染比较严重时可出现生长减慢，有的培养基pH明显变酸，并出现细胞病变，以此可依次对支原体污染进行检测，但有些情况下支原体污染引起的病变特征与病毒感染相似，因此不能准确诊断。

CloneSelect单细胞分离系统（CloneSelect Single Cell Printer）采用类似喷墨打印的技术，柔和地产生包裹细胞的液滴无接触地直接分配到微孔板中（图1）。同时，该系统借助智能图像分析，确认细胞数目，分析细胞的形态（大小和圆度）及荧光强度，联动的真空装置将不符合要求的液滴（如空液滴或者含多个细胞的液滴）直接吸走，而符合要求的细胞液滴则分配至微孔板，从而实现对单个细胞的分选和接种。单细胞分离系统是一种可比移液器操作的柔和的单细胞分离技术，而流式分选由于高的液体剪切力和电压的影响，会降低敏感细胞和部分受损细胞（如电转后的细胞）的成克隆率，因此单细胞分离系统更适用于基因工程细胞的克隆，维持细胞活力，并提供直接的单克隆性图像证据。

轻柔分选：鞘液压力2psi，提高分选细胞活性灵活分选：样本浓度范围10 ~ 10^8 cell/ml；可挑选含量低至百万分之一的样本无菌分选：一次性芯片，保证样本之间完全隔离；仪器体积小巧，可置于超净台中高效分选：96孔板分选不到1min，384孔板4min以内，单克隆率超过95%轻松分选：仪器操作简单，无需专人操作维护

本研究描述了在线固相萃取高效液相色谱- 紫外吸收检测法，用于测定细胞裂解液中的替加环素，由变色龙软件控制的 UltiMate 3000 HPLC 双泵系统进行测定。方法检测限为3.0 μ g/L，是测定经替加环素处理的细胞中的微量替加环素的简便、灵敏的方法。

随着我国生物医药企业的高速发展，培养基作为生物制药的重要原料也逐步被一些生物医药、生物制品企业所关注。培养基虽不是细胞培养中唯一重要因素， 但确实是最重要的一种，其作为抗体、重组蛋白类药物研发和生产中原材料之 一，直接影响产物的质和量，对细胞培养基中个组分的含量以及细胞培养过程中培养液组分含量的变化进行监测，对细胞高效培养过程的建立具有重要意义。为了快速全面分析细胞培养基、细胞培养液、胞内中的成分，开发了一种“细胞 培养基、培养液组分分析方法包”，该方法包中包含上百种化合物，分两个液相方法分析测定。方法1主要分析氨基酸类、维生素类、核苷嘧啶嘌呤类、有机酸 类，单磷酸核苷酸类、多胺类以及糖化合物，方法2主要分析核苷酸类化合物。 由于化合物种类繁多，化合物性质差异较大，传统的检测方法过于复杂，需要使用不同的仪器、不同的样品前处理方法进行测定，已不能满足工业化高通量、标准化要求。而采用超高效液相质谱联用系统，为细胞培养基、培养液以及胞内组分分析提供一个快速、专属性强的检测手段。

单核细胞（monocytes）是体积最大的白细胞，直径14~20μm，呈圆球形，约占血液中单个核细胞数的10~30%。单核细胞是重要的天然免疫效应细胞，在感染过程中能快速从外周血迁移到组织中，参与病原体的识别和清除。同时，单核细胞还是巨噬细胞和树突状细胞的前体细胞。

干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义，而准确的干细胞绝对计数对于干细胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗计数为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。细胞表型是细胞基本生物学性质之一。在细胞生物学的研究中，细胞表型反应出细胞群均质程度、细胞生物学功能、细胞分化程度、细胞衰老程度，是细胞产品的最为重要的质量标准。流式细胞术是检测细胞表型的通用技术。

目的:通过制片与观察加深理解细胞的运动、吞噬等生理活动。1.细胞的吞噬活动:实验原理:白细胞是机体防御系统中能游走的单位。它分为粒细胞系、单核细胞系、淋巴系三类。它们有许多生理功能，如游走性、变形运动、趋化性、吞噬异物等。在白细胞中，以粒细胞、单核细胞的吞噬活动较强，故称此二类细胞为吞噬细胞。单核细胞由血液进入组织后逐渐演变成巨噬细胞。吞噬细胞主要靠吞噬来处理异物。吞噬细胞首先由于趋化作用而向异物游走，然后伸出伪足包围异物，并发生内吞作用形成吞噬泡将异物吞入细胞，继而溶酶体与吞噬泡融合消化异物。