细菌病

征集原创： 研究人员发现，冰箱沙拉屉里的细菌量达每平方厘米7850个细菌，是被认为的安全范围的750倍。这些细菌中包括潜在的杀手细菌大肠杆菌、沙门氏菌和李斯特菌。 希望大家能把自家的冰箱细菌含量测试一下，把测试过程记录，拍照发上来就是一篇不错的原创，看看大家的冰箱是否像报道中一样？是否够清洁！你家的冰箱清理了么？-----冰箱每平方厘米含8000个细菌

细菌性传染病预防控制现场遇到的问题怎样 处理了。

据台湾媒体报道，研究人员发现，冰箱沙拉屉里的细菌量达每平方厘米7850个细菌，是被认为的安全范围的750倍。这些细菌中包括潜在的杀手细菌大肠杆菌、沙门氏菌和李斯特菌。 http://file1.foodmate.net/file/upload/201110/25/08-57-25-42-543665.jpg 对在30个温度处于冰点以下的家用冰箱的沙拉屉里收集的样本进行检测，发现所含的细菌高的惊人，每平方厘米平均含有7850个细菌。收集的样本中有多达每平方厘米含12.9万个细菌的例子。 据标准电子商务建议（standardECrecommendation），"清洁"食品准备和储存表面的细菌量是每平方厘米0到10个。 英国斯塔福德郡坎诺克的保罗-麦克多内尔委托进行了该研究，他说："用冰箱的目的是保持食品安全，把细菌出现和滋生的机会降至最低，而令人担心的是，就像这项研究显示的那样，冰箱里的一些地方显然存在安全隐患。冰箱的性能在热天尤为重要，周围的高温环境意味着细菌滋生的可能性很大。只有经常清理，冰箱的低温环境才能抑制细菌生长。如果细菌在冰箱里站稳了脚跟，而你又不经常清理，它们的群体就会不断发展壮大。" 人们对冰箱清洁的态度正在变化。一些用户经常会把所有食品拿出来，然后清理擦拭冰箱内部。然而一些人却从不清理，这也许就为安全埋下了隐患。

各种生熟食品会把各种各样的细菌带进你的冰箱，我们该怎么防止细菌带来的危害？大家有啥好办法？

研究人员发现，冰箱沙拉屉里的细菌量达每平方厘米7850个细菌，是被认为的安全范围的750倍。这些细菌中包括潜在的杀手细菌大肠杆菌、沙门氏菌和李斯特菌。看来大家的冰箱现在成了细菌的乐园。千万不要把冰箱当成万能的，同时要注意清洗冰箱。

据国外媒体报道，科学家在冰川中发现了冻结数千年的细菌，它们可能有助于人类活到140岁。　　解冻自冰河世纪冻结的F杆菌之后，研究人员让老鼠和苍蝇的寿命成功延长一倍。这种细菌是检测冰川的研究人员在西伯利亚的雅库特北部地区马蒙托瓦山附近区域发现的，它们冻结在冰川中，科学家把从中提取的成份先对苍蝇后对老鼠进行了试验，结果把老鼠和苍蝇的寿命成功延长了一倍。他们相信使用同样的治疗方法能延长人类寿命，人们可能有望活到100岁到140岁。　　负责调查的科学家安纳托利亚布鲁斯科瓦表示，把从F杆菌的提取物注入老鼠和苍蝇体内的结果令他们惊讶。他说：“这还只是初期结果，不过如果这种细菌对老鼠与果蝇有效的话，那么就没有理由不适用于其他动物了。”　　该研究所的发言人纳德扎达米洛诺瓦说：“我们还让一组老鼠作为控制组，它们的平均期望寿命是589天。把细菌提取物注射到老鼠的肌肉中后，它们的寿命平均延长308天，而控制组的老鼠约在一年前就已死去。那些注入细菌提取物的老鼠的平均寿命为906天。”　　虽然给果蝇注射不可能，但是，给它们的食品中添加细菌提取物。他们注意到，果蝇变得似乎更健康更强壮也更活跃，科学家观察到这些苍蝇的肌肉活性增加了。布鲁斯科瓦博士说：“我们的下一步工作是解决我们如何开发这种提取物进行临床试验。我们希望知道，如何能够找到一种方法，最终对这种细菌进行测试开发药物。”(新浪科技讯 ）

电泳槽细菌测试流程如下。所用仪器：小冰箱、培养盘、温度控制在30摄氏度的细菌培养盘、无菌棉棒、可以长期保存的标签、可以自由处置的含90%的无菌水瓶。操作流程：1、打开稀释瓶倒入10ml电泳漆。2、塞上瓶塞并且轻摇瓶身，充分摇匀。3、将培养盘移出冰箱，并根据标签进行区分。4、将棉棒伸入稀释过的样品，滴三滴在琼脂上，进行测试。5、保持温度和湿度的稳定性。6、两天后定期做检查，7天后丢弃样品。根据以上实验，电泳漆的主槽要每周进行一次细菌含量的检测，当主槽进行过两次细菌测试时，对包括洗涤系统在内的整个系统进行UF或RO预处理；将主槽内使用的加仑数再加上软管中的加仑数（折合为主槽的10%），来计算增加的杀菌剂的数量。 先后用1.5%的Kathon EDC及硝酸银处理细菌。用在电泳槽以及洗涤槽内的杀虫剂必须是与存在的细菌是相配的。 在24小时内保持细菌的水平。

香港城市大学研究显示，每张人民币平均含菌量17.8万个，5角、1元、1角面额的纸币，每张附带的菌数更高达1800万个，在亚洲众多币种中“鹤立鸡群”。人民币在流通过程中接触人员众多，层次复杂，已成为致病细菌传播的重要途径之一。人民币上常见的细菌：大肠杆菌:钱币上的大肠杆菌多来自粪便，会随着钱币的流通进行繁衍和传播，造成致病性感染。多数大肠杆菌与人体是互利共生的关系。只有在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下，大肠杆菌才会致病，移居到肠道以外的地方，例如胆囊、尿道、膀胱、阑尾等地，造成相应部位的感染。金黄色葡萄球菌：金黄色葡萄球菌是钱币上的另一类重要菌类。金黄色葡萄球菌在自然界中广泛存在，如空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可检测到。钱币流通性强，与环境接触广泛，沾染金黄色葡萄球菌的可能性极大。金黄色葡萄球菌就是致病力较强的一种细菌，它能通过创口感染，引起化脓和毛囊炎，肺和血液感染，甚至引起败血症、脓毒症等。绿脓杆菌：人吐出的痰液里往往含有绿脓杆菌，这些痰液一旦沾到钱币上，绿脓杆菌就很容易通过钱币的流通进行传播。绿脓杆菌是一种致病力较低但抗药性强的细菌。绿脓杆菌感染可发生在人体任何部位和组织，常见于烧伤或创伤部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道，也可引起心内膜炎、胃肠炎、脓胸甚至败血症。沙门氏菌：不干净的食物中，往往含有沙门氏菌，人们在购买这些食品时，很容易将食品上的沙门氏菌沾到钱币上。沙门氏菌有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病。致病沙门氏菌能引起人体肠胃食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒。 庆幸的是，这些细菌只有在人体抵抗力弱的时候才能乘虚而入，正常情况下是不会因为这些细菌发生疾病的请大家养成勤洗手的习惯哦！！！！！！！！！！！！！！！！！！！

[font=Arial,Helvetica,sans-serif]　最普通洗手皂和沐浴皂都含有化学成分,如酒精或氯,能杀死细菌。标示“抗菌”的香皂，含有额外的杀菌物质,如三氯苯氧氨酚或三氯卡班。密歇根大学公共卫生学院几个实验室研究表明,在使用了含三氯苯氧氨酚成分肥皂后，细菌对抗生素出现某种耐药性。经常使用含额外杀菌成分肥皂的人和使用普通肥皂的人相比，在防止传染病和降低疾病细菌水平上有效性较低。 　　该研究的作者呼吁美国食品及药物管理局(FDA)做进一步评估,对在广告中声称抗菌产品,特别考虑缺乏长期健康益处所使用的含三氯苯氧氨酚的肥皂，应用普通肥皂取代。 [/font][font=Arial,Helvetica,sans-serif] 根据疾病控制和预防中心(CDC)指出,脏手传播疾病的问题,并不是因为没有使用含额外杀菌成分的肥皂，而是因为公众洗手不充分。大多数人花在洗手上的时间不超过5秒，没有足够的时间来杀死细菌。摆脱有害细菌最好的办法是用温水洗手，并保持较长的时间。 　　“非常仔细洗手——用力搓手背、手掌和手指，是去除细菌和手上脏物最有效的方法。”新泽西口腔医科大学预防医学系副教授和社区小儿科健康的专家温格彼得说，“人体需要某些细菌帮助消化,同时抵御有害细菌。并非所有在你的手上的细菌都是有害的,你的身体需要细菌的平衡,保持一个对皮肤有益的健康环境。”[/font]

[b][color=#444444]我们是生产蛋卷的，都是人手做的，偶尔会有大肠菌群不合格，很少有细菌超标的，现在想问一下，如果超标怎么处理该批产品才好？另外如果大肠菌群超标了，你们是怎么处理才可以让产品复检的时候合格可以用呢？[/color][/b]

细菌对糖的分解是将多糖分解成丙酮酸。需氧菌则经过( )过程，进一步将丙酮酸分解成H2O和CO2。 A、发酵 B、氧化 C、三羧酸循环 D、EP途径

本报讯 在携带NDM-1耐药基因的“超级细菌”被报道两个多月之后，中国也分别在宁夏两名新生儿和福建一名老年癌症晚期患者样本中，检测到这一基因。其中，老年患者已因癌症去世，两名新生儿已治愈。　　三病例分别来自宁夏福建　　昨日，中国疾控中心疾控应急办不明原因疾病处置办公室主任倪大新，在通气会上通报了上述情况。　　近期，中疾控和中国军事医学科学院的实验室，在对既往收集保存的菌株进行NDM-1耐药基因检测，共检出3株NDM-1基因阳性细菌。　　其中，中疾控实验室检出的2株细菌为屎肠球菌，由宁夏自治区疾病预防控制中心送检，菌株分离自该区某医院的两名新生儿粪便标本。另一株由中国军事医学科学院实验室检出，为鲍曼不动杆菌，由福建省某医院送检，菌株分离自该医院的一名住院老年患者标本。　　不会在普通公众间传染　　浙江大学医学院第一医院、传染病诊治国家重点实验室教授肖永红说，携带NDM－1基因只是细菌获得抵抗能力，而不是获得新的攻击能力。它本身致病的能力或者传染性跟原来一样，并没有增强。只不过对抗菌药物的抵抗能力增强，因此，对一般的公众不会引起疾病的传染，他说，这一耐药菌主要对老弱病残人群容易受到感染，感染以后治疗困难。普通公众不用恐慌。　　■ 通报　　宁夏患儿病因不能确定　　【患者情况】　　宁夏两名患儿分别在3月8日与3月11日，在宁夏回族自治区某县级医院出生，为低体重儿。两名婴儿都在出生后2-3日出现腹泻和呼吸道感染症状，其中一名患儿还伴有缺氧表现，随即转入儿科病房治疗。　　中疾控传染病预防控制所所长徐建国说，在中国疾控中心传染病所和宁夏疾控中心合作中，从宁夏某县级医院里分离的疑似小肠结肠炎标本里，发现了有两株携带了该耐药基因，后经鉴定为屎肠球菌。　　“因为这是回顾性调查，是8月底到9月份开展的，那个时候两个孩子早已经治愈出院了，我们做了回访，现在检测的结果是这两个孩子已经没有这种（耐药）细菌。已经治愈。”徐建国表示。　　对于是否是“超级细菌”引起两名患儿患病的问题，倪大新解释说，屎肠球菌是人类肠道寄生的正常菌群之一，我们每个人都有，通常并不致病。两名患儿虽检出携带耐药基因的菌株，并不一定表明患儿所患疾病由该菌引起。　　而有专家也对记者说，从病原菌的角度来说，还没有肠球菌引起腹泻的情况发生。

耐药细菌会不会在人间传播？一直是人们最为关注的问题之一。26日，在中国疾病预防控制中心召开的携带NDM－1耐药基因细菌检测情况通气会上，有关专家表示，耐药细菌不会在普通人群中传播。卫生部全国细菌耐药监测网负责人肖永红介绍，国际上有许多国家已经发现携带NDM－1耐药基因细菌。国外相关研究资料显示，某些临床疾病已经治愈的出院患者仍可携带NDM－1耐药基因细菌，但由于这类耐药菌多为条件致病致病菌或人体正常菌群细菌，它们通常不会在社区环境内普通人群中传播。目前，各国通常不建议对这类已出院的“健康”带菌者进行“积极的”抗菌治疗，防止应用高级别抗生素引起病例体内菌群失调，甚至由于高级别抗生素的选择性压力，演变出耐药性更强的菌株。肖永红说，对这类带菌者，主要是在治愈原有疾病基础上，提高机体抵抗力。身体机能恢复正常后，使该种耐药菌自然在机体内消亡。同时，对携带者开展随访、检测，定期采集病例标本检测该菌。肖永红表示，由于该泛耐药菌主要是通过医院环境和医疗活动传播，因此，医疗机构在其住院患者中一旦检出该耐药菌，应启动主动监测，采取隔离防护和消毒的强化措施，遏制或减少传播的机会。同时，开展环境监测／检测，定期采集样品，评估消毒和医院感染控制效果。据介绍，卫生部将根据耐药监测网和传染病实验室监测网的调查数据，尽快研究制定进一步加强携带NDM－1耐药基因细菌预防控制的相关政策。

为确保春节期间市民酒店住宿的卫生安全，近日，瓯海区卫生监督所对辖区内10家旅店的公共用品用具开展卫生监测。检验结果显示，所送的样品中三成脸（脚）盆细菌总数超标。 此次行动，瓯海区卫生监督所卫生执法人员对10家住宿旅店的毛巾、茶具、床上卧具（床单）、脸（脚）盆、马桶坐垫、拖鞋做了随机采样，共采集120份样品。经过瓯海区疾病预防控制中心检验，毛巾、茶具、床上卧具（床单）的细菌总数、大肠菌群指标均合格。有4家旅店脸（脚）盆细菌总数超标，3家旅店马桶坐垫细菌总数超标， 2家旅店拖鞋霉菌超标。其中，景山锐思特汽车店的马桶细菌总数超出8倍；温州铜锣湾假日酒店有限公司脸盆细菌总数超标，拖鞋霉菌数超出正常值的56倍。 从监测类别看，脸（脚）盆合格率最低，为70%。其他公共用品用具合格率均在85%以上。合格率从高到低分别为毛巾、茶具、床上卧具、拖鞋、马桶坐垫、脸（脚）盆。

据美国媒体8月12日报道，在印度、巴基斯坦等南亚国家出现的一种新型细菌变种基因有可能在全球蔓延，拥有这种基因的细菌乎对所有的抗生素都有耐药性。有报道称，这种变种基因目前已经传播到英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国家。抗生素耐药性领域的医学专家将这种变种基因命名为NDM-1，最早出现在印度、巴基斯坦等南亚国家，后来有不少英美等国的游客前往这些南亚国家接受价格低廉的整形手术，使得这种基因得以传播。美国疾病控制和预防中心今年1月至6月间在美国发现3例这种病例，并建议医生们对在南亚接受过手术的病人特别加以关注。医学专家对NDM-1的出现感到“担忧”，担心它会在全球蔓延。不过也有医学专家持乐观态度。他们认为，尽管世界上存在多种对抗生素具有耐药性的细菌，但是其中并没有任何一种能够真正成为“超级细菌”和“食肉细菌”。纽约大学朗格尼医学中心负责人表示：“这些对抗生素具有耐药性的细菌无疑是带有危害性的，但NDM-1超级细菌比耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）更令人担忧吗？现在作出判断还为时过早。”MRSA是一种可以抵抗所有抗生素和药物的病菌，能够感染伤口和褥疮，引起各种感染，令免疫力弱的人死亡。MRSA呈多重耐药，是临床重点耐药性监测的多重耐药菌之一。===============================================这种超级细菌就是带有NDM-1的细菌，所谓NDM-1就是“新德里金属β内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase 1，简称NDM-1)”，这种酶存在于大肠杆菌等不同细菌DNA结构的一个线粒体上，并让这些细菌变得威力巨大，对几乎所有的抗生素都具备抵御能力。 去年，卡迪夫大学的研究者蒂莫西沃尔什首次在一名瑞典病人感染的大肠杆菌和肺炎杆菌中确认了这种酶的存在，并将之命名为NDM-1。[b]那我们怎么才能检测？假如大肠杆菌带有这种酶，怎么检测？用什么方法？用什么仪器？[/b]

自8月11日英国著名医学杂志《柳叶刀》刊载有关超级细菌“新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM - 1)”的论文以来，超级细菌因其对大部分抗生素的抗药性，成为全球媒体关注的焦点。超级细菌会否成为人体健康的“终极杀手”？抗生素发明以来，为何细菌的抗药性也不断提高？如何防控超级细菌感染？都成为关注的焦点。　　10月17日(周日)上午，广州医学院第二附属医院感染病科主任叶晓光教授将赴广东科学中心，出席第三十二期“小谷围科学讲坛”，就上述问题一一道来。“超级细菌的出现并非世界末日，仍然是有办法控制的。”　　细菌产生抗药性是自然进化　　师从我国传染病学奠基人之一朱师晦教授的叶晓光，早年一直从事乙型肝炎防控方面的研究。研究生毕业后回到广医二院从事临床医疗和医学科研工作。　　在对乙肝等传染病的流行病研究中，叶晓光发现，随着抗生素使用量增多，病菌对抗生素的耐药性也越高。于是，叶晓光开始有意识地收集广医二院感染科等科室抗生素使用和耐药性方面的数据，并逐渐形成一个数据库。通过对数据库中各类病菌耐药性的统计分析，逐步成为该院在临床使用抗生素剂量的依据。　　2001年，叶晓光承担的广州市科技局攻关项目“医院感染的影响因素调查和控防措施的建立的系列研究”，对耐药性的研究也从临床统计分析逐渐发展到实验室研究。　　叶晓光说，超级细菌的出现，与抗生素的过量使用乃至滥用有直接的关系。细菌比人类的历史更悠久，伴随了整个人类发展史，大部分细菌都能与人类和平相处，只有少部分会对人体产生危害。人类医疗发展史，从某种意义上讲，就是与病菌的战斗史。　　在1920年左右，人类发明了抗生素，开始了抗生素治疗病菌传染疾病的历史。但实际情况却是，随着抗生素的使用，细菌对抗生素的耐药性也逐渐增强，乃至发展出对大部分已有抗生素都具有抗药性的“超级细菌”。　　“细菌对抗生素产生抗药性是一种自然进化现象。”叶晓光说，超级细菌的出现，与人类对抗生素的不恰当使用有关。比如剂量使用不当，治疗效果未达到不说，还“培养”了细菌的耐药性；或者抗生素管理缺位，导致除了医疗行业以外，其他商品中也存在剂量不等的抗生素，“锻炼”了细菌对抗生素的耐药能力。　　超级细菌出现并非“末日”　　尽管超级细菌因为其对大多数抗生素的耐药性，被不少人视为“末日”到来，但叶晓光认为其实没有那么恐怖。“超级细菌其实是一个笼统的说法，所谓超级细菌，其实也就是泛耐药细菌中的一种。”　　细菌按其耐药性可以分为一般细菌、多重耐药细菌、泛耐药细菌。泛耐药细菌并非是现在才出现的种类，比如上个世纪就有为学界广为关注的“耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M R SA )”，该类超级细菌也并非不可以杀灭，仍旧是有可以选择的抗生素种类的，比如我国尚未批准使用的多黏菌素、替加环素都是可以治疗 M RSA感染的。　　根据卫生部规定，对最高级别抗生素如碳青霉烯类抗生素具有抗药性的细菌即可称为超级细菌。实际上，临床上，已经发现的可以归入超级细菌类别的病菌已经很多，比如鲍曼不动杆菌、肺类克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠杆菌等。　　广医二院近期曾有一例颅脑损伤导致感染鲍曼不动杆菌的病例，虽然患者最终因此去世，但叶晓光表示，其实还是有办法治疗这种病菌感染的，可惜是“知道方法，却没手段”。　　抗生素不是人类抵抗病菌的唯一主角。叶晓光表示，病菌感染其实是综合因素作用的结果，比如提高人体自身免疫能力，改善病人自身微生态环境，对治疗病菌感染也是至关重要的。　　滥用抗生素已是不争的事实　　抗生素在中国的滥用已经是不争的事实。“比如普通的感冒，多喝水，多休息就可痊愈，但大多数病人和医生都倾向于使用抗生素”。更为严重的是，抗生素在中国并非严格监管的药品，医生可以对普通病菌开最高级别抗生素治疗，病人可以随便买抗生素类药物自行使用；同时，养殖饲料、日用化学品中添加抗生素类药品也早已广泛存在，这些都加大了超级细菌出现的可能。　　作为对抗病菌的一种最有效的武器，叶晓光表示，抗生素应特别强调合理用药，即在熟悉细菌的前提下，对合适的病人，选用合适的抗生素，给予合适的使用剂量。由于我国现在没有抗生素监管方面的法律，只有卫生部颁布的行业性指导标准《抗生素药物应用指南》，对医生和公众使用抗生素都缺乏监管。　　叶晓光建议，应尽快对抗生素的使用、监管进行立法，及时控制抗生素滥用的现状。同时，临床医生也应该多多了解病菌的特征，“我国已有北京、上海、广东三大细菌监测网，了解新的病菌特征并不难”。而医生若忽略对病菌认识和感染症状的详细了解，其结果是致命的。比如蜱虫和恙虫叮咬导致的立克次体感染，如果医生对病菌感染症状误诊和漏诊，则可能导致病人死亡。而一旦确定了症状，采用合理的抗生素治疗，是完全可以治愈的。摘自南方都市报~

http://file1.foodmate.net/file/upload/201104/08/11-08-12-32-564860.jpg 英研究新发现11种"超级细菌",有的对目前所有抗生素都有耐药性 英国研究人员7日在英国《柳叶刀传染病》杂志上报告说，在印度首都新德里的城市环境中大量存在"NDM-1超级细菌",这些细菌几乎遍布各种水体中，比如街头水池、河流中，甚至出现在新德里市区的自来水中。这是首次有证据显示"超级细菌"在医院以外的环境中传播，值得国际社会警惕并加强对"超级细菌"的监控。

很多疾病都与细菌有关，高温杀菌是必须的，多少温度为最佳？

近日有报道称，一些赴印度接受治疗的患者感染了一种新型超级细菌，其含有一种叫NDM-1的基因。这种细菌对现有的绝大多数抗生素都“刀枪不入”，甚至对碳青霉烯类抗生素也具有耐药性，而碳青霉烯类抗生素通常被认为是紧急治疗抗药性病症的最后方法。　　目前，这种变种超级细菌已经传播到英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国家，并有可能在全世界范围内进一步蔓延。本月13日，比利时医疗人员证实，一名比利时人死于这种据信源自南亚的超级细菌，成为该菌致死“第一人”。　　“超级细菌的出现，是滥用抗生素的最直接恶果，而中国是全世界滥用抗生素最严重的国家。”广东省地中海贫血防治协会会长、南方医院儿科主任李春富表示，正常人体内有许多共生菌群，抗生素特别是广谱抗生素的不合理应用，打破了其平衡。每一种抗生素投入使用，没有被杀灭的细菌会迅速产生对这一抗生素的抗体，成为耐药菌。抗生素的滥用，使得细菌的抗药性越来越强，这类细菌统称为“超级细菌”。　　据统计，2007年我国门诊感冒患者约有75%应用抗生素，外科手术则高达95%，而超级细菌的出现是滥用抗生素最直接的恶果　　羊城晚报记者 张小磊 实习生 张莉 李翌　　新型超级细菌中含有ＮＤＭ—1基因，ＮＤＭ—1意思是“新德里金属蛋白酶—1”，是一种超级抗药性基因。这种脱氧核糖核酸结构可以在同种甚至异种细菌之间“轻松”复制。　　超级细菌研究人员认为，抗生素诞生之初曾是杀菌的神奇武器，但细菌逐渐进化出抗药性，近年来屡屡出现能抵抗多种抗生素的超级细菌。由于新型抗生素的研发速度相对较慢，对付超级细菌已经成为现代医学面临的一个难题。　　研制一种抗生素大约需要10年时间，而产生耐药菌素却在2年之内，抗生素的研制速度远远赶不上耐药菌的繁殖速度。许多大的制药公司越来越不愿意为研发抗生素埋单，其原因除了抗生素开发到一定程度后，再开发新的品种所需的研发费用越来越高外，更重要的是快速的失效使医药公司的巨大投入得不到产出补偿。　　现状　　探因　　中国每年有20万人死于药物不良反应，其中因抗生素滥用造成的死亡占到40%　　世界医学界流传着一句话：“美国枪支容易买到，抗生素很难买得到，而中国恰恰相反。”据2007年统计，我国的门诊感冒患者约有75%应用抗生素，外科手术则高达95%。世界卫生组织调查显示，中国住院患者抗生素药物使用率高达80%，其中联合使用两种以上抗生素的占58%，远高于30%的国际水平。　　复旦大学附属儿科医院的统计数据显示，该院每年销售收入排序前三位的药物均为抗生素。2001年，15种最畅销的药物中抗生素药品就占了11种。此外，静脉注射已经成了滥用抗生素的新途径。每天1000个呼吸道感染的门诊患者里，有将近2／3会接受静脉注射治疗。儿科医院静脉应用抗生素呈现出逐年增多的趋势：1996年注射用抗生素消耗金额占全部抗生素消耗金额的比例为46.7%，而2001年上升到53.6%。　　据统计，仅超前使用第三代头孢菌素，全国一年就多花费7亿多元。滥用抗生素的直接恶果就是耐药性的日渐严重。以中国细菌耐药性最为严重的地区之一上海为例，上海人群感染的金黄色葡萄球菌中，80%已经产生了对青霉素G的耐药性。一些药品的有效率已经跌到了20%。在一些地方，预防结核病的卡介苗的有效率只有30%。　　有一组数字，或许能说明问题：中国每年有20万人死于药物不良反应，其中，因抗生素滥用造成的死亡要占到40%。我国7岁以下儿童因为不合理使用抗生素造成耳聋的数量多达30万，占总体聋哑儿童的30%至40%，而一些发达国家只有0.9%。在住院的感染病患者中，耐药菌感染的病死率为11.7%，普通感染的病死率只有5.4%。　　李春富说，滥用抗生素的直接副作用是，患者体内的病毒会对抗生素产生抗体，之后重复使用抗生素，就会无效。“抗生素的副作用往往潜伏期长，要多年后才能表现出来。可推断，未来的10—20年内，抗生素滥用对人体的肾脏、肝脏等产生的副作用会慢慢明朗起来。现在可确证的是，很多三四十岁的‘黑牙’人群，就是因为多年前滥用四环素这种抗生素引起的副作用。”　　探因　　患者数量庞大，医疗投入不足，部分医生经验欠缺，患者“急功近利”等造成“滥用”　　抗生素为何如此疯狂滥用？这是中国国情、国家经费投入、医生自身、患者四方面综合博弈的结果。　　就我国国情而言，中国是人口大国，每天走进医院的患者自然不少。“和外国情况不一样，我们每天一个上午就常常要诊断几十个病人，在如此短的人均诊断时间里，我们根本没精力对每个患者进行详细观察、询问、讨论甚至病情跟踪。”李春富说，加之，国家在医疗方面的投入不足，医生的工资跟不上经济发展的速度，很多方面的福利都只有靠医生自己。因此部分医生为了牟利，便不断给病人开抗生素。“从这方面讲，医生只有好好看病，与钱无关，才可能避免”。　　同时，不少医生临床经验和判断力不足，加之怕承担风险，常常为了稳妥起见，采用普遍使用的抗生素进行治疗，形成诊断的惯性。因而，临床经验比较足的医生，对抗生素的依赖会有所减少。广东省人民医院儿科主任林晓源谈到一个病例，某位患者找到其之前，已经去过多家医院，开了很多药，吃了都不见好转。林主任诊断后，只给他开了6块钱的药，患者起初一直对此表示怀疑。但按照医嘱服药两天后，药到病除。“当时他的病情恰恰不是用大量价格贵的抗生素能够治好的”，林主任说，我结合自己多年的临床经验观察后，才敢这样下药，但一般医生不太敢冒险选择这样做。　　滥用抗生素另一个“元凶”是患者“急功近利”的就医心情。一般说来，感冒发烧是上呼吸道病毒感染，无需使用抗生素，通过患者自身抵抗就能治好，但不能在一两天内就马上痊愈。“我们遇到的许多患者往往也求愈心切，看到短时内发烧症状不消，就会抱怨医生，甚至质疑其医术。医生有理说不清，干脆应患者所需，采用抗生素，早早解除症状了事。”林主任说。　　另外，抗生素属于处方用药，国家对这类药品是有着严格的要求的，没有医生的处方，药店是绝对不可以卖给顾客的。但是，现实情况中，我们在全国的大街小巷都可以任意购买抗生素，相关部门的监管存在明显漏洞。虽然任何一家药店或者药房都非常醒目地写着“RP”凭医生处方购买等字样，但实际上，任何人到任何一家药店，根本无须医生处方便能买到抗生素（包括任何针剂）等处方用药。甚至，很多药店还配有护士，就在药房里面直接地为买药者进行静脉注射，致使药房里打针致死命案时有发生。　　求解　　落实相关规定，明确使用界限，扶持“私人医生”跟踪治疗，减少使用抗生素　　“普通感冒我从来不开抗生素。”中国工程院院士钟南山教授曾经在“世界哮喘病日”义诊活动中指出，目前广东人因滥用抗生素造成的后果相当严重，使用抗生素一定要慎重。　　有个中国人讲述他在美国生病治疗的经历时说，当时他开车在纽约到孟菲斯的路上，忽然觉得肚子很痛，便电话求救。美国急诊室医生赶到后，做完相关检查，没给他开任何药，只让他拼命喝水便离开了。到目的地后，医生打来电话询问病情，之后第二天早上、中午、下午，医生又分别电话询问病情，几天后，患者好了。　　“像国外一样，多做检查，多观察，多跟踪，少用药，是避免抗生素滥用的最佳方法。”李主任说，但是目前我国条件根本达不到。那么，呼吁中国大医院采取患者人数限制，培养扶持“私人医生行业”，将更多的患者分流到家庭和个人，才是解决问题的好办法。　　2004年，卫生部出台《抗菌药物临床应用指导原则》，这是针对我国抗生素临床应用的第一部指导性意见，它规定了抗生素需凭处方销售，哪些抗生素可以口服，哪些抗生素可以注射，以及哪些抗生素不能同时使用等，以最大限度防止抗生素滥用。　　但是，如何避免条文流于空泛？对此，相关部门应将笼统的规定落实化，由医疗界开展学术研讨，将抗生素的使用界限定清楚，达成如何使用，何种情况下使用的共识。“有了这个共识，门诊和临床的工作人员才可能改变滥用抗生素的惯性做法，有方向，有目标，规范去做。”李春富说。

中文名称: 罗伯特科赫 　 外文名: Robert Koch 　 生卒年: 公元1843年—1910年 　 洲: 欧洲 　 国别: 德国 　 省: 哈茨,克劳斯特尔城科赫,德国医生和细菌学家，世界病原细菌学的奠基人和开拓者。1843年12月11日科赫生於德国克劳斯塔尔。5岁时就能借助报纸自己读书，这预示着具有的超凡智慧及毅力。他在高中读书时表现出对生物学的浓厚兴趣。1862年科赫考入格丁根大学学医。1866年在德国格丁根大学学医毕业（获医学博士学位）后,赴柏林进行6个月的化学研究，在那里又受到Virehow的影响，在1867年科赫到汉堡作了一段时间的住院医师，然后先在Langenhagen开业，不久于1869年到Posen省的Rackwitz开业，在Posen他通过了地区医官考试。1870年婚后科赫到东普鲁士一个小乡村沃尔施泰因当外科医生,在那建立了一个简陋的实验室,并多年在此从事病原微生物研究。科赫在没有科研设备，也无法与图书馆联系，更无法与其他科研人员接触情况下开始研究炭疽病。他的实验室就在他的家里，他的科研设备除了他妻子送给他的显微镜外，其余都是他自己设法解决的。1876年他到布雷斯劳用3天时间以公开表演实验的方式证明炭疽杆菌是炭疽病的病因，并报告了炭疽病菌的生活史是从杆菌—芽孢—杆菌的循环，芽孢可以放置较长时间而不死。他认为每种病都有一定的病原菌,纠正了当时认为所有细菌都是一个种的观点,从而兴起了关於疾病生源的研究。1880年科赫应邀赴柏林工作,在德国卫生署任职。在这里他拥有了良好的实验室和助手。1881年他创立了固体培养基划线分离纯种法；应用这种方法,主要的传染病病原菌被相继发现。此后,他转向结核病病原菌研究。他改进染色方法,发现了当时未能得到的纯种结核杆菌。为了大量培养出纯种的结核菌,他又改用在凝固的血清上接种培养,并将培养出的纯种结核菌制成悬液,通过注射豚鼠的腹腔实验,4～6周后豚鼠即死於结核病。他用实验证明结核菌不论来自猴﹑牛或人均有相同症状。并进而阐明了结核病的传染途径。1882年3月24日结核杆菌是科赫在德国柏林生理学会上宣布结核杆菌是是结核病的病原菌。并研究出纯培养其菌的方法。1882年出版了有关结核杆菌的经典著作。1883年科赫被任命为德国霍乱委员会主席并。被派往埃及调查那里的霍乱暴发流行情况。1883年后,他到埃及和印度去调查那里的霍乱暴发流行情况。他和他的同事一起发现了霍乱病原菌是形如逗号的霍乱弧菌，并发现该菌可以经过水﹑食物﹑衣服等途径传播。根据他对霍乱弧菌的生物学知识以及其传播方式的了解，科赫提出控制霍乱流行的法则，这些法则于1893年被各大国批准并形成至今仍沿用的控制霍乱方法的基础。科赫因对霍乱研究作出的贡献而获10万德国马克奖金，他的这项研究工作也对保护饮水规划有重大影响。同时他还发现了阿米巴痢疾和两种结膜炎的病原体。1890年他提出用结核菌素治疗结核病。1891～1899年,他还在埃及﹑印度等地研究了鼠疫﹑疟疾﹑回归热﹑锥虫病和非洲海岸病等。1905年发表了控制结核病的论文,并获得诺贝尔生理学或医学奖。1910年5月27日因患心脏病卒於德国巴登。终年67岁。研究领域：医学领域中的病原细菌学科赫在病原细菌学方面作出了非凡的贡献：世界上第一次发明了细菌照相法；世界上第一次发现了炭疽热的病原细菌——炭疽杆菌；世界上第一次证明了一种特定的微生物引起一种特定疾病的原因；世界上第一次分离出伤寒杆菌；世界上第一次发明了蒸汽杀菌法；世界上第一次分离出结核病细菌；世界上第一次发明了预防炭疽病的接种方法；世界上第一次发现了霍乱弧菌；世界上第一次提出了霍乱预防法；世界上第一次发现了鼠蚤传播鼠疫的秘密；世界上第一次发现了睡眠症是由采采蝇传播的。制定科赫法则：（科赫为研究病原微生物制订了严格准则,被称为科赫法则,包括:一种病原微生物必然存在 於患病动物体内,但不应出现在健康动物内 此病原微生物可从患病动物分离得到纯培养物 将分离出的纯培养物人工接种敏感动物时,必定出现该疾病所特有的症状 从人工接种的动物可以再次分离出性状与原有病原微生物相同的纯培养物。）创立了固体培养基划线分离纯种法。曾获奖项：1、1905年荣获生理学或医学诺贝尔奖海德堡大学及2、柏林市、Wottstein市及他的老家Ctausthal市均授予他名誉市民称号3、获柏林市、维也那等学术团体的名誉会员称号4、被授予德国的皇冠勋章5、被授予红鹰大十字勋章（为医学界第一位获此荣誉者）6、因对霍乱研究作出的贡献而获10万德国马克奖金7、博洛尼亚(Bologna)大学授予以他名誉博士学位8、德国政府於1907年为纪念他的成就,设了一笔100万马克的基金9、1897年被选为英国皇家学会会员10、1903年被选为法国科学院院士

感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性]培养基[/url]中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型(如Amp[sup]r[/sup]等)得到表达，然后将此细菌培养物涂在含有氨苄青霉素的选择性[://]培养基[/url]上。重组质粒转化宿主细胞后，还需对转化菌落进行筛选鉴定。利用α互补现象进行筛选是最常用的一种鉴定方法。现在使用的许多载体都具有一段大肠杆菌β半乳糖苷酶的启动子及其编码α肽链的DNA序列，此结构称为[i]lac[/i]Z'基因。[i]lac[/i]Z'基因编码的α肽链是β半乳糖苷酶的氨基端的短片段(146个氨基酸)。任何携带着[i]lac[/i]Z'基因的质粒载体转化了染色体基因组存在着此种β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后，便会产生出有功能活性的半乳糖苷酶，在IPTG(异丙基β—D—硫代半乳糖苷)诱导后，在含有Xgal(5-溴-4-氯-3-吲哚-6-D-半乳糖苷)的培养基平板上形成蓝色菌落（半乳糖苷酶能将无色的化合物Xgal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4-靛蓝）。而当有外源DNA片段插入到位于[i]lac[/i]Z'中的多克隆位点后，就会破坏α肽链的阅读框，从而不能合成与受体菌内突变的β半乳糖苷酶相互补的活性α肽，而导致不能形成有功能活性的β半乳糖苷酶，也就不能分解Xgal而显蓝色，因此含有重组质粒载体的克隆往往是白色菌落。[仪器、材料与试剂](一) 仪器和材料 超净工作台、低温离心机、恒温摇床、恒温箱、恒温水浴、离心管、试管、培养皿、锥形瓶、接种针、玻璃涂棒、酒精灯、镊子、牙签、大肠杆菌DH5a 、质粒(二) 试剂0.1mol／L CaCl2溶液 LB液体培养基 LB固体培养基 氨苄青霉素(Amp)：用无菌水配制成100mg／mL溶液，置—20℃冰箱保存。Xgal：将Xgal溶于二甲基甲酰胺，配成20mg／mL，不需过滤灭菌，分装小包装，避光贮存于-20℃。IPTG：取2g IPTG溶于8mL双蒸水中，再用双蒸水补至10mL，用0.22um滤膜过滤除菌，每份1mL，贮存于-20℃。[实验步骤](一) 制备感受态细胞1、吸取15µl E.coil菌液，接种于20ml LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜，待OD600=0.5左右将该菌悬液以1：50接种量转于50ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20-30min测一次OD600，至OD600=0.6左右，停止培养。2、培养液转入离心管中，在冰浴10min，4℃下5000rpm离心10min。3、弃上清液，用4ml冰预冷的0.1M CaCl2溶液轻轻悬浮菌体至均匀，冰上放置30min。4、4℃下5000rpm离心6min。5、弃上清液，用2ml冰预冷的0.1M CaCl2溶液轻轻悬浮菌体至均匀，冰上放置片刻后即制成感受态细胞悬液。6、以上制好的感受态细胞悬液可在冰上放置，24小时内直接用于转化实验，也可加入15%高压灭菌过的甘油，混匀后，分装于1.5ml离心管中，每管100µ l感受态细胞悬液，置-70℃条件下保存。.(二) 质粒DNA转化大肠杆菌1、取100µl摇匀后的感受态细胞悬浮液（如是冷冻保存液，则需化冻后马上进行下面的操作），加入5µl连接产物，轻轻摇匀，冰上放置30min后，于42 IPTG水浴中保温90s，然后迅速在冰上冷却2min。2、加入900µl LB液体培养基，则总体积约1ml，混匀于37℃振荡培养90分钟使受体菌恢复正常生长状态并使转化体产生抗药性Amp[sup]r[/sup]。3、在预制的LB琼脂平板上，加40uL 20mg／mL的Xgal和4uL 200mg／mL的IPTG溶液，并用灭菌玻璃推子(酒精灯上烧后冷却)，均匀涂布于琼脂凝胶表面，37℃倒置吸收。4、将恢复培养的菌体4000rpm离心5min，移去上层900µl LB培养基，用余下的100µl重悬菌体至均匀。(四) α互补现象的检查将重悬菌体均匀涂布于含X-gal+IPTG+氨苄青霉素的LB平板上，37℃倒置培养12—24h，出现菌落。其中白色菌落从理论上讲为重组克隆。如果进一步验证，可挑取多个白色菌落分别接种到1ml含有氨苄青霉素的LB液体培养基中，37℃振荡培养6-8h，然后提取质粒酶切验证，或进行菌落PCR扩增鉴定。

用细菌杀死细菌病菌对抗生素产生了耐药性怎么办？或许可以用另一种细菌来杀死它。新加坡研究人员利用合成生物学手段，通过基因改造使大肠杆菌分泌专门的毒素，成功杀死绿脓杆菌。 绿脓杆菌是一种生存能力很强、对多种抗生素和消毒剂有耐药性的细菌。 不同类型的绿脓杆菌之间因生存竞争而存在“内战”，它们会分泌称为绿脓菌素的毒素，彼此攻击。每种绿脓菌素只对特定菌株起作用。新加坡南洋理工大学的研究人员利用这种特性，给大肠杆菌植入基因，使其分泌可杀灭感染人类的绿脓杆菌菌株的毒素。 在这种大肠杆菌作用下，实验室中培养的绿脓杆菌只有1％能够存活，绿脓杆菌形成的生物膜也比正常情况下稀薄得多。生物膜是由细菌及其分泌的物质形成的膜状物，毒性和耐药性比单个细菌更强。 不过这一方法目前还有缺陷，离实用尚有距离。研究小组正在设法改进这种方法，并在培养另一种大肠杆菌菌株,用于杀灭霍乱弧菌。

一块肉反复冷冻解冻四次，最后测得的菌落数，竟然是未冷冻前的15倍？日前，央视记者做出这样的实验结论。那么，这种结果是否有可能出现？昨天，记者采访了中国畜产品加工研究会的刘登勇博士，刘登勇博士的专业是肉品加工和质量安全控制，他告诉记者，这种情况是有可能出现的，所以肉解冻完还是最好一次吃掉。反复冷冻解冻，肉变质更快？4次解冻实验后，细菌竟然飙升15倍近日，网上流传一种说法，称肉类反复冷冻解冻后，会加快肉类腐败变质，增加细菌含量。针对这种说法，央视记者找到上海一家实验室，将从市场上买来的鲜肉，在五天中，先进行冰箱冷冻，取出后进行解冻，观察细菌生长的趋势。经过反复四次冷冻和解冻后，最后一次测得的结果，是最初没有冷冻时测试结果的15倍左右，很令人吃惊。为什么低温没把细菌杀死？解冻时细胞膜破裂，流出液体滋生细菌那么，这一实验结果是否有可能出现？对此，记者采访了中国畜产品加工研究会的刘登勇博士。刘登勇博士告诉记者，反复冷冻再解冻，是有可能出现菌落总数增加的情况的，而根据实验所处具体环境的不同，菌落总数增加的情况也会有所不同，不能说就一定会增加15倍或其他倍数。在极低温的冷冻环境下，肉品中的微生物不是应该被冻死了吗？为什么把冷冻完的肉取出来之后，细菌又会滋生呢？这其中又有哪些奥妙呢？对此，刘登勇博士告诉记者，在极低温度的情况下，肉品表面的细菌并不会被完全冻死，只是活力被暂时抑制住了。一旦肉品被从低温环境下取出，细菌就会重新获得有利于其生长的环境。而在这种过程中，有一个因素尤其有助于细菌繁殖。“在冷冻过程中，肉品中的水分会形成很多细小的冰晶，反复多次冷冻和解冻会导致冰晶不断长大，这些冰晶会刺破细胞膜，导致细胞中的液体流出来”，刘登勇博士说，这就是为什么肉解冻后会有少量液体流出来的原因，这些细胞中的水分富含营养，会让细菌繁殖得飞快，而每冷冻一次，就意味着细胞膜被多破坏一次，解冻后流出来的养分就会增加，所以细菌总数也会相应增加。

1、目的：判明产品被细菌污染的程度，确保出厂产品符合客户要求。2、范围：本法适用于水溶性乳剂半固体状颜料中非无菌产品的细菌测试。3、设备和材料：3.1高压蒸气灭菌炉；3.2臭氧消毒箱；3.3培养箱30℃－35℃；3.4恒温水浴锅46℃±1℃；3.5冰箱；3.6天平；3.7 三角瓶；3.8灭菌刻度吸管（1ml.10ml）或一次性吸头（1ml.0.1ml）；3.9灭菌平皿（直徑9cm）；3.10吸耳球或移液枪；4、培养基和试剂： 4.1Caseinsoya bean digest agar（胰酶大豆琼脂）；　　　成分:Pancreatic digest of casein（胰蛋白胨）15.0gPapaicdigest of soya bean（大豆蛋白胨）5.0gSodiumchloride（氯化钠）5.0gAgar（琼脂）15.0gPurifiedwater 1000 ml　　　制法:将胰酶大豆琼脂干粉培养基按产品标签说明加与适量纯水中，溶解混匀后至高温灭菌锅中121℃[color=

细菌分类主要研究细菌分类的理论和方法。主要包括分类、命名和鉴定。 分类是人们认识事物的方法，是指根据细菌的相似性和亲缘关系，将细菌归入不同的分类类群，命名是根据国际细菌命名法规给细菌分类单元以科学名称，鉴定则是确定一个新的分离物质属于已经命名的分类单元的过程。

微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一，微生物检验中常用的生化反应介绍如下： 　　一、糖酵解试验　　不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。　　试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。接种后，置36±1.0°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培养物可呈弥散生长。本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫，溴百里蓝和An-drade指示剂。　　二、淀粉水解试验　　某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。　　试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20℃培养5天。然后将碘试剂直接滴浸于培养表面，若为液体培养物，则加数滴碘试剂于试管中。立即检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。　　淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性，以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。

热原和细菌内毒素 一、热原(progon) 医院临床在使用药品注射剂时，常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡，这种症状称为热原反应。 为提高药品质量和用药安全，人们对热原进行了广泛的研究，直到1923年Seibert提出了用家兔检测热原的方法。在1942年美国药典首先将家兔热原检查项收入药典成为法定方法，中国药典1953年版开始收载该方法，随后的世界各国药典都以动物热原检查法作为药品质量监测的方法之一。 家兔热原检查法的优点，可在规定时间里观察到家兔的体温变化，相应反应了热原质引起哺乳类动物复杂的体温反应过程。所以，在半个多世纪以来热原检查法，为保障药品质量和用药安全发挥了重要作用。 但随着制药工业的发展和临床用药的要求，该方法的局限性越来越明显。这种热原检查法，只局限于某种药物进入体内（血循环）是否能引起体温变化或热原反应作为判断药品是否污染热原的方法，已不能满足医药工业发展的需要。其缺点： ①标准化程度低，无法判断检查样品中存在的热原质到底是什么或是哪一种物质。 ②由于试验动物家兔是处在被细菌污染的环境中，通过吸入或皮肤感染细菌内毒素而被免疫，导致动物的个体差异较大。 ③试验动物受到药品的药理活性干扰，而影响体温变化（如放射性药品、抗生素、生物制品等），实验结果难以判断。 ④设备及实验费用昂贵（如建设动物房、水电、动物饲料等耗费），做一种药品需要几百元/次，而鲎试剂仅几十元/次。 综上情况分析，鲎试验法可避免以上动物热原检查法的不足，该技术的成功和应用真可谓是药品质量监控一场大革命。 什么是热原？目前国内外仍未有统一的认识，但从国内外文献报道中，一个共同的意见，都普遍认为：它是指细菌内毒素的脂多糖。 欧洲药典委员会副主席J.Van Noordwijk提出：“严格地讲，不是每一种热原都具有脂多糖的结构，但所有已知的细菌内毒素脂多糖都有热原活性”。在药品生产质量管理规范（GMP）条件下，药品生产的质量控制一般可以接受的观点是：不存在细菌内毒素意味着不存在热原。 二、细菌内毒素（Endotoxin） 细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（Lipoply Saccharide）和微量蛋白（Protein）的复合物，它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物，而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。其化学成分广泛分布于革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、布氏杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌、沙门氏菌等）及其它微生物（如衣原体、立克次氏体、螺旋体等）的细胞壁层的脂多糖，其化学成份主要是由O-特异性链、核心多糖、类脂A三部分组成。(附图1) 、O—特异性链：位于脂多糖分子最外层的多糖链，是由3—5个单糖（一般不多于25个）连成为一个多糖链。其单糖包括戊糖、氨基戊糖、已糖、氨基已糖、脱氧已糖等，单糖的种类、位置和排列顺序和空间构型，因菌种不同而异。因此，它决定菌体热原的特异性。 核心多糖：核心多糖的变异性较小，位于类脂A和0—特异性链（内层）之间，在结构上分为内核心和外核心。外核心含有数种己糖，包括葡萄糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖等组成。内核心含有庚糖及特殊的酮糖（3-脱氧-D-甘露糖-辛酮糖KDO）。这部分结构对不同菌株的LPS基本相似，而且KDO是以不耐酸的酮糖链与类脂A的氨基葡萄糖连接，是构成内毒素脂多糖的核心部分。 类脂A：位于LPS分子结构的外层，是由氨基葡萄糖、磷酸和脂肪酸（10—18C）组成，故称之为糖磷脂，也是细菌外膜的一种，形成单体聚合物。具有疏水性（强）和亲水性（弱）的双相性。但是，类脂A可从O-特异链及核心多糖分离出来，游离的类脂A可自身凝聚成大分子的复合体而难溶于水，并具有生物活性。所以，类脂A（Lipida）是内毒素多种生物活性或毒性反应的主要基团。该基团没有种属特异性，所以各属细菌的类脂A结构相似，其毒性反应相似。如发热、血液流动力学改变、弥漫性血管内凝血，并导致休克等。 由于类脂A有4条主链和2条支链的脂肪酸与内酰胺连接组成，所以提纯的内毒素LPS是极为不稳定的。这就要求内毒素应在低温条件下保存，在工作中内毒素稀释应尽可能地缩短时间，并要现配现用。 三、内毒素的生物活性与疾病的相关性 据文献报道，在很早期（约19世纪末）的意大利学者Centanne通过菌属自溶的方法，从革兰氏阴性杆菌中提取出一种类似毒素的物质，因为这种物质对动物体产生致热活性的同时，亦产生出一种病理学病性反应，而被命名为致热毒素（Pyrotoxina）。同时由德国的Buchner也从多种细菌中提取到相似的致热毒素，并证实了这种毒素在导致白细胞数目的改变同时，具有增强机体对细菌感染时的免疫能力。因此建立了“发热疗法”。 在美国纽约的临床医师，William B• Coley用加热法杀死录杆菌和化脓性链球菌，将上清滤液用于各种恶性肿瘤（特别是肉瘤）的治疗，取得较好的疗效。他将这种细菌上清液命名为Coley氏毒素。此后murrayJ.Shear 证实Coley氏毒素中具有抗肿瘤作用的物质为内毒素。 直到1933年Boivin等学者在研究鼠伤寒杆菌的致病机理时，从鼠伤寒杆菌中提取出内毒素。在50年代以后，对内毒素的化学成分和化学结构的研究得到迅速发展。经过大量实验表明，内毒素具有极强的生物学活性，特别是革兰氏阴性菌感染和静脉注射提取的内毒素溶液时，可导致动物体发生内毒素休克和死亡。 内毒素的致病机理，主要是由于革兰氏阴性杆菌（如大肠杆菌、沙门氏杆菌、伤寒杆菌，布氏杆菌、变形杆菌金黄色葡萄球菌等）和其它微生物（病毒、立克次氏体、衣原体螺旋体等）感染时，这类菌属随病灶渗液进入血液循环，并扩散到各种组织器官和体液细胞内繁殖，这类菌属在体内死亡和解体后，才稀放出大量的细菌内毒素脂多糖（LPS），据初步实验表明，当机体内毒素浓度國值 0.005ng/ml时,可诱生内源性热原质如肿瘤坏死因子、白细胞介素和β2—干扰素等。这些因子刺激体温调节中枢导致机体发热，细菌内毒素直接或间接作用于肝脏和胰腺时，可使肝细胞损伤，使糖原异生酶（如葡萄糖—6—6磷酸酶、糖原合成酶）的活性降低，抑制糖原的异生和分解。同时内毒素作用于胰腺导致胰腺功能障碍，并形成胰岛素抵抗，造成血糖升高致使并发心肌炎和心肌肿大的系列高血糖症状。所以，革兰氏阴性菌属感染或在病灶中的细菌进入体液细胞繁殖，当其死亡或解体后产生的内毒素，可多次进入血液，引起反复发作，其病理变化极为广泛，几乎所有的器官和组织都可被侵犯，而引起各器官的功能障碍。其中以网状内皮系统最常见，淋巴、脾、肝、肾、骨髓中均有上皮细胞增生，形成肉芽肿，以肝脏有肉芽肿外，还可发生冲血、水肿和肝细胞坏死，最终导致肝硬化的发生。其它器官亦有相似的毒性反应。

一、什么是食物中毒食物中毒是由于食用含有某种细菌、细菌毒素或混有重金属、农药或其他毒物的食物，以及食用有毒的动植物之后所引起的急性中毒。细菌中毒传染型一般症状为腹痛、呕吐、腹泻、发热等，严重的能引起昏迷和虚脱，甚至死亡。非细菌性中毒的症状，则视毒素的性质而异。二、食物中毒的分类按病原物质分类可分为： 细菌性食物中毒 是指人们摄入含有细菌或细菌毒素的食品而引起的食物中毒。引起食物中毒的原因有很多，其中最主要、最常见的原因就是食物被细菌污染。据我国近五年食物中毒统计资料表明，细菌性食物中毒占食物中毒总数的50％左右，而动物性食品是引起细菌性食物中毒的主要食品，其中肉类及熟肉制品居首位，其次有变质禽肉、病死畜肉以及鱼、奶、剩饭等。 食物被细菌污染主要有以下几个原因： 1、禽畜在宰杀前就是病禽、病畜 2、刀具、砧板及用具不洁，生熟交叉感染 3、卫生状况差，蚊蝇滋生 4、食品从业人员带菌污染食物 并不是人吃了细菌污染的食物就马上会发生食物中毒，细菌污染了食物并在食物上大量繁殖达到可致病的数量或繁殖产生致病的毒素，人吃了这种食物才会发生食物中毒。因此，发生食物中毒的另一主要原因就是贮存方式不当或在较高温度下存放较长时间。食品中的水分及营养条件使致病菌大量繁殖，如果食前彻底加热，杀死病原菌的话，也不会发生食物中毒。那么，最后一个重要原因为食前未充分加热，未充分煮熟。 细菌性食物中毒的发生与不同区域人群的饮食习惯有密切关系。美国多食肉、蛋和糕点，葡萄球菌食物中毒最多；日本喜食生鱼片，副溶血性弧菌食物中毒最多；我国食用畜禽肉、禽蛋类较多，多年来一直以沙门氏菌食物中毒居首位。引起细菌性食物中毒的始作俑者有沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、肉毒杆菌、肝炎病毒等。这些细菌、病毒可直接生长在食物当中，也可经过食品操作人员的手或容器，污染其他食物。当人们食用这些被污染过的食物，有害菌所产生的毒素就可引起中毒。每至夏天，各种微生物生长繁殖旺盛，食品中的细菌数量较多，加速了其腐败变质；加之人们贪凉，常食用未经充分加热的食物，所以夏季是细菌性食物中毒的高发季节。 真菌毒素中毒 真菌在谷物或其他食品中生长繁殖产生有毒的代谢产物，人和动物食使用这种毒性物质发生的中毒，称为真菌性食物中毒。中毒发生主要通过被真菌污染的食品，用一般的烹调方法加热处理不能破坏食品中的真菌毒素。真菌生长繁殖及产生毒素需要一定的温度和湿度因此中毒往往有比较明显的季节性和地区性。 动物性食物中毒 食入动物性中毒食品引起的食物中毒即为动物性食物中毒。动物性中毒食品主要有两种；①将天然含有有毒成分的动物或动物的某一部分当做食品，误食引起中毒反应；在一定条件下产生了大量的有毒成分的可食的动物性食品，如食用鲐鱼等也可引起中毒。近年，我国发生的动物性食物中毒主要是河豚鱼中毒，其次是鱼胆中毒。 植物性食物中毒　 主要有3种。①将天然含有有毒成分的植物或其加工制品当作食品，如桐油、大麻油等引起的食物中毒；②在食品的加工过程中，将未能破坏或除去有毒成分的植物当作食品食用，如木薯、苦杏仁等；③在一定条件下，不当食用大量有毒成分的植物性食品，食用鲜黄花菜、发芽马铃薯、未腌制好的咸菜或未烧熟的扁豆等造成中毒。一般因误食有毒植物或有毒的植物种子，或烹调加工方法不当，没有把植物中的有毒物质去掉而引起。最常见的植物性食物中毒为菜豆中毒、毒蘑菇中毒、木薯中毒；可引起死亡的有毒蘑菇、马铃薯、曼陀罗、银杏、苦杏仁、桐油等。植物性中毒多数没有特效疗法，对一些能引起死亡的严重中毒，尽早排除毒物对中毒者的预后非常重要。 化学性食物中毒 主要包括：①误食被有毒害的化学物质污染的食品；②因添加非食品级的或伪造的或禁止使用的食品添加剂、营养强化剂的食品，以及超量使用食品添加剂而导致的食物中毒；③因贮藏等原因，造成营养素发生化学变化的食品，如油脂酸败造成中毒。食入化学性中毒食品引起的食物中毒即为化学性食物中毒。化学性食物中毒发病特点是：发病与进食时间、食用量有关。一般进食后不久发病，常有群体性，病人有相同的临床表现。剩余食品、呕吐物、血和尿等样品中可测出有关化学毒物。在处理化学性食物中毒时应突出一个“快”字！及时处理不但对挽救病人生命十分重要，同时对控制事态发展，特别是群体中毒和一时尚未明确的化学毒物时更为重要。 食物中毒是由于进食被细菌及其毒素污染的食物，或摄食含有毒素的动植物如毒蕈、河豚等引起的急性中毒性疾病。变质食品、污染水源是主要传染源，不洁手、餐具和带菌苍蝇是主要传播途径。 此病的潜伏期短，可集体发病。表现为起病急骤，伴有腹痛、腹泻、呕吐等急性肠胃炎症状，常有畏寒、发热，严重吐泻可引起脱水、酸中毒和休克。本病处理主要是对症和支持治疗，重症可用抗生素。及时纠正水、电解质紊乱和酸中毒。肉毒中毒者可及早给予肉毒抗毒血清。

一、细菌的分布： 微生物种类繁多，繁殖迅速，分布广泛，不论自然界的空气、土壤、水，生活中的食物、各种物体和器械表面，以及动物和人的皮肤粘膜、与外界相通的腔道中都广泛存在着数量极其庞大的各种微生物，其中以细菌、放线菌最多。因此，了解微生物在自然界及正常人体的分布，对于在医疗实践及某些科学实验中树立无菌观念有着重要的意义。 （一）空气中细菌的检查（设计性实验选题） （二）水中细菌的检查（设计性实验选题） （三）人体皮肤表面细菌的检查（设计性实验选题） 【附录】细菌菌落的计数方法 ①选择生长均匀，无片状菌苔生长的平皿观察。一般先用肉眼观察，用记号笔在平板底上进行点数（以免遗漏），然后再持放大镜检查有无遗漏的微小菌落。 ②如菌落多而密集，可用分区法或菌落计数器计数。分区法是用记号笔在平皿底部通过圆心做垂直线，分为http://www.bbioo.com/bio101/UploadFiles/200611/20061113123705956.gif四区，再分别选择菌落密集和稀疏的两个区，再做平分线，使每一小区为平皿面积的1／8 或1／16，然后再分别挑选菌落稀疏和密集的两小区 进行计数，所得数乘以8或16，即为该平皿的菌落总数。（图４-1） ③简易的菌落计数器是一块玻璃板上刻划有144个面积为1平方厘米的正方形小格。将长有菌落的培养皿放上，计算10个小方格内的菌落数，如为30个，则平均1小方格为3个菌落。若培养皿直径是9厘米，则半径为4.5厘米，整个培养皿上的菌数是3个×3.1416×（4.5）2=191个菌落。二、外界因素对细菌的影响微生物和外界环境有密切的关系，当外界环境适宜就能进行正常的新陈代谢生长繁殖；当外界环境条件发生巨大改变，可导致微生物的主要代谢活动发生障碍，生长停顿，甚至死亡。在医学上常用人工的方法造成对微生物不利的环境，来抑制或杀灭微生物，以达到消毒灭菌的目的。其方法大致可分为物理、化学和生物三大类。 （一）物理因素对细菌的影响 1、温度对细菌的影响2、紫外线杀菌试验 （二）化学因素对细菌的影响 化学消毒剂的杀菌作用（三）生物因素对细菌的影响 噬菌体的特异性裂解细菌试验 【材料】大肠杆菌、痢疾杆菌的肉汤培养物、痢疾杆菌噬菌体、普通肉汤、普通琼脂平板。 【方法】 （1）将琼脂平板划分成三等份，注明1、2、3。 （2）分别以接种环取菌后，在1、3处涂布痢疾杆菌，2处涂布大肠杆菌。http://www.bbioo.com/bio101/UploadFiles/200611/20061113123903343.gif（3）分别沾取一接种环的痢疾杆菌噬菌体加于1、2处中央，（注意不要交叉污染），另取一接种环的肉汤放于3处中央。 （4）置37℃孵育24小时后取出，观察噬菌斑出现的位置（见图4-2），并记录之。 （四）细菌对抗生素的敏感性试验---纸片扩散法 　　又称Bauer-Kirby法。是将干燥的浸有一定浓度抗菌药物的滤纸片放在已接种一定量某种细菌的琼脂平板上，经培养后，可在纸片周围出现无细菌生长区，称抑菌圈。测量抑菌圈的大小，即可判定该细菌对某种药物的敏感程度。体外药敏结果可作为病人治疗选用药物的参考。 【材料】金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌18～24小时培养物、普通琼脂平板、小镊子；含有青霉素、庆大霉素、红霉素、复合磺胺、链霉素等抗生素的干燥滤纸片。 【方法】 （1）将金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌培养物密集均匀地涂布整个平板。 （2）将含有抗生素药物的滤纸片用烧灼灭菌的镊子分别贴于平板表面，相互间应间隔一定距离。 （3）37℃培养24小时后，观察结果。 【结果】 根据药物纸片周围抑菌圈直径的大小来判断该菌对各种药物的敏感程度。判断标准见表4-1 （五）中草药对细菌的抑菌作用测定