酰胺类抗生素

【摘要】本文综述了β－内酰胺类抗生素高分子聚合物测定的国内外研究进展，介绍了聚合物测定的原理和具体方法，分析了目前在聚合物测定中存在的问题，并针对问题提出了处理建议。 【关键词】高分子聚合物、质控现状、测定方法 1、概述 抗生素是临床用量最大和较易发生不良反应的药物。其中最常见的一类不良反应就是过敏反应。多年来的研究已证明，在β－内酰胺类抗生素所致的速发型过敏反应中，药物分子本身只是半抗原，药物中存在的高分子聚合物才是引发速发型过敏反应的真正过敏原，因此严格控制抗生素中高分子聚合物的含量有着重要的意义。 本文综述了高分子聚合物测定方法在国内外的研究进展，对实际测定过程中遇到的问题作简单的分析和探讨。 2、高分子聚合物的分类 抗生素中的高分子杂质系指药品中分子量大于药物本身的杂质总称，其分子量一般在1000～5000Da，个别可达10000Da左右。β－内酰胺类抗生素中的高分子杂质按其来源通常被分为两类：外源性杂质和内源性杂质。 外源性杂质包括蛋白、多肽、多糖等类杂质或抗生素和蛋白、多肽、多糖等的结合物，来源于发酵工艺，如青霉素中的青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽等。 内源性杂质是指抗菌药物的自身聚合产物，聚合物既可来自生产过程，又可在储存中形成，甚至在用药时也可产生。对于现在的生产工艺，外源性的高分子杂质已经较少产生，对内源性聚合物的控制是当前抗生素高分子杂质质量控制的重点。 金少鸿等人的研究表明，高分子聚合物不仅能引发IgE介导的过敏反应，而且青霉素类的抗生素还能经胃肠道吸收而引发过敏反应。故对β－内酰胺类抗生素中的高分子聚合物进行严格的控制，可以保证临床用药的安全有效

最近在考虑用 荧光免疫法 检测乳品中beta-内酰胺类抗生素，具体抗体和荧光标记物质的选择有点模棱两可，比方说青霉素、氨苄西林等，各位朋友有什么好的建议？

一、实验目的 掌握氯化三苯四氮唑(TTC)法测定牛乳中抗生素残留的原理和方法。 二、实验原理 本法以氯化三苯四氮唑(TTC)作为抗生素残留量测定的指示剂。当乳中加入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)后，如果乳中不含抗生素，则嗜热链球菌生长繁殖，可将无色的氧化型TTC变为红色的还原型TTC，所以乳变红色。相反，如果乳中有抗生素存在，则嗜热链球菌不能生长繁殖或生长繁殖受到抑制，无色氧化型的1vrC不能转化成红色还原型的TTC，乳不变色。 三、仪器与试材 1．仪器与器材 恒温培养箱、恒温水浴锅等。 2．菌种 嗜热乳酸链球菌(Streptococcus thermophilus)。 3．试剂与溶液 TTC溶液(4％)：称取1g TTC，溶于5mL灭菌蒸馏水中，装入褐色无菌瓶内于4℃避光保存，临用时用无菌蒸馏水稀释5倍。如遇溶液变为黄色或淡褐色，则不能再用，需重新配制。 4．实验材料 2～3种鲜乳，各50mL。 四、实验步骤 1．菌液的制备 将菌种接种于灭菌脱脂乳(113℃无菌20rain)中，于(36±1)℃培养15h后，以灭菌脱脂乳1：1稀释，待用。 2．样品测定 (1)取鲜乳液样品9mL置于试管(18mm×180mm)中，80℃水浴加热5min，取出冷却至36℃。 (2)加入菌液1mL于乳液中，于(36±1)℃水浴培养2h后，再加0.3mL TTC溶液，(36±1)℃水浴培养30min后，观察颜色变化。 (3)如果样品变为红色，则表明抗生素残留为阴性；如果样品颜色不变，则应于水浴中保温继续培养30min后，观察，仍不变色者，则为阳性。 (4)在实验过程中，可以做阴性和阳性对照各一份。阳性对照管以8mL无抗生素的乳，添加1mL一定浓度的抗生素(如青霉素、庆大霉素)溶液、菌液和TTC溶液；阴性对照管为9mL无抗生素乳、菌液和TTC溶液。 3．结果报告 综合上述测定结果，并与对照管进行比较，分析样品中抗生素是否超标。 五、注意事项 1．嗜热乳酸链球菌菌种在脱脂乳培养基或在10％脱脂乳粉培养基中保存，并且不得含抗生素，每次转接间隔时间不能超过20d，否则可能会绝种。 2．在观察结果时，应该迅速并避免长时间光照。 3．TTC法对几种抗生素的检出限见表1。 表1 TTC法对几种卢一内酰胺类抗生素残留的检出限┏━━━━━━━━┳━━━━━━━━━┳━━━━━━━━┳━━━━━━━━━┓┃ 抗生素名称 ┃ 最低检出量／U ┃ 抗生素名称 ┃ 最低检出量／u ┃┣━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━╋━━━━━━━━━┫┃ 青霉素 ┃ 0．004 ┃ 庆大霉素 ┃ O．4 ┃┃ 链霉素 ┃ 0．5 ┃ 卡那霉素 ┃ 3 ┃┗━━━━━━━━┻━━━━━━━━━┻━━━━━━━━┻━━━━━━━━━┛

我用液相色谱测磺胺类抗生素和喹诺酮类抗生素（共五种物质），除了不到两分钟有两个溶剂峰，再也没有峰了，一直很平的直线。流动相是甲醇-水，还试过乙腈-水，均没有峰。求大神指导一下。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152854][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法测定牛奶中5种_内酰胺类抗生素.pdf[/url]摘要: 　[目的]　建立采用LC - MS - MS分析牛奶中阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、苯唑西林和青霉素- G残留量的方法。　[方法]　牛奶样品中加入内标青霉素- D7,经乙腈沉淀后,离心并吸取上清液。上清液吹干后,通过固相萃取柱净化,然后进行检测。在液相色谱分离系统中,通过A tlantis C18柱,采用0. 1%甲酸水溶液与乙腈不同比例混合的梯度流动相,根据以上各成分的不同质量数的碎片离子的强度,将5种抗生素分离并测定。　[结果] 　在2～20μg /L 范围内,与内标的峰面积比有良好的线性关系。相关系数(R2 )为0. 9943～0. 9981, 在5、10 μg /L 水平的标准加入回收率为88% ～127%。阿莫西林、氨苄西林、青霉素、氯唑西林、苯唑西林的最低检测限量分别为5、2、2、4、4μg /L (以信噪比为10∶1) 。　[结论]　该方法利用液- 液萃取和固相萃取相结合的方法,并加入同位素内标,有效地去除干扰因素,为该类抗生素的测定提供了可靠、实用的测定方法。

想做磺胺类抗生素的富集，应该用什么样的柱子，便宜又很好地富集，谢谢大神们了，要是想要购买HLB萃取小柱，应该去哪里购买，谢谢大神们了~~~急急急~~

在GMP法规中，对一些药物的生产厂房设施做出了特殊的规定，跟小伙伴儿们分享一下，青霉素类和头孢类两者之间有没有本质的区别。抗生素是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）产生、能抑制或杀灭其他微生物的物质。抗生素分为天然品和人工合成品，前者由微生物产生，后者是对天然抗生素进行结构改造获得的部分合成产品，头孢是属于抗生素类。这两者都属于β-内酰胺类抗生素。头孢菌素类（Cephalosporins）是由冠头孢菌培养液中分离的头孢菌素C,经改造侧链而得到的一系列半合成抗生素。其抗菌谱广,对厌氧菌有高效;引起的过敏反应较青霉素类低;对酸及对各种细菌产生的β-内酰胺酶较稳定;作用机理同青霉素,也是抑制细菌细胞壁的生成而达到杀菌的目的.属繁殖期杀菌药。（头孢菌素是青霉素近源的头孢菌属的真菌发酵液离而来。）青霉素一般是静脉滴注的，药效强，但抗菌谱窄，且半衰期短。1.笫一代头孢菌素第一代头孢菌素是60年代初开始上市的。从抗菌性能来说，对第一代头孢菌素敏感的菌主要有β－溶血性链球菌和其他链球菌、包括肺炎链球菌（但肠球菌耐药），葡萄球菌（包括产酶菌株）、流感嗜血杆菌、大肠杆菌、克雷伯杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌、志贺菌等。不同品种的头孢菌素可以有各自的抗菌特点，如头孢噻吩对革兰阳性菌的抗菌作用较优，而头孢唑林则对某些革兰阴性菌有一定作用。但是，第一代头孢菌素对革兰阴性菌的β-内酰胺酶的抵抗力较弱，因此，革兰阴性菌对本代抗生素较易耐药。第一代头孢菌素对吲哚阳性变形杆菌、枸橼酸杆菌、产气杆菌、假单胞菌、沙雷杆菌、拟杆菌、粪链球菌（头孢硫脒除外）等微生物无效。本代抗生素中常用品种有头孢唑林、头孢氨苄、头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢克罗等。其中除头孢唑林只能供注射外，其他的均可用于口服，也称口服头孢。头孢噻吩、头孢噻啶、头孢来星、头孢乙腈、头孢匹林等均已少用或不用。 2.笫二代头孢菌素第二代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能与第一代相近或较低，而对革兰阴性菌的作用较为优异，表现在：（l）抗酶性能强一些革兰阴性菌（如大肠杆菌、奇异变形杆菌等）易对第一代头孢菌素耐药。第二代头孢菌素对这些耐药菌株常可有效。（2）抗菌谱广第二代头孢菌素的抗菌谱较第一代有所扩大，对奈瑟菌、部分吲哚阳性变形杆菌、部分枸橼酸杆菌、部分肠秆菌属均有抗菌作用。第二代头孢菌素对假单胞属（铜绿假单胞菌）、不动杆菌、沙雷杆菌、粪链球菌等无效。临床应用的第二代头孢菌素主要品种有头孢孟多、头孢西汀（美福仙），头孢呋新（西力欣），头孢克罗等。3.笫三代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能普遍低于第一代（个别品种相近），对革兰阴性菌的作用较第二代头孢菌素更为优越。（1）抗菌谱扩大第三代头孢菌素的抗菌谱比第二代又有所扩大，对铜绿假单胞菌、沙雷杆菌、不动杆菌、消化球菌、以及部分脆弱拟杆菌有效（不同品种药物的抗菌效能不尽相同）。对于粪链球菌、难辨梭状芽胞杆菌等无效。（2）耐酶性能强对第一代或第二代头孢菌素耐药的一些革兰阴性菌株，第三代头孢菌素常可有效。常用有：头孢哌酮（先锋必素）、头孢三嗪（罗塞秦、菌必治）、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等。 4.笫四代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的作用弱，不能用于控制金黄色葡萄球菌感染。近年来发现一些新品种如头孢匹罗（Cefpirome）等，不仅具有第三代头孢菌素的抗菌性能，还对葡萄球菌有抗菌作用，称为第四代头孢菌素。关于第一至第四代的划分不仅适用于头孢菌素，其他的一些β-内酰胺抗生素也可按此分代。常用有拉他头孢、头孢匹罗、氨曲南等。1.青霉素和头孢菌素都属于β-内酰胺类抗生素。2.青霉素是青霉菌培养液中提取精致获得的，是一种窄普抗生素，其基本结构是母核6--氨基青霉烷酸（6-APA），其中β--内酰胺环对抗菌活性起重要作用。3.头孢菌素是一类来自头孢菌的广谱抗生素。4.头孢菌素和青霉素类都具有相同的β-内酰胺环，所不同的是头孢菌素系7--氨基头孢烷酸（7--ACA）的衍生物，青霉素由6--氨基青霉烷酸（6-APA），两者的区别只是青霉素母核中五元噻唑环换成头孢菌素的六元双氢噻嗪环。

在人类征服病菌的道路上，可以说有2个转折点：６０多年前，当世界上第一个抗菌药物青霉素面市后，曾被誉为细菌的克星，当时正值二次世界大战，多少人的性命因此而被挽救。 但人类陶醉于对自然界的胜利没多久，就发现道高一尺，魔高一丈，细菌耐药产生的速度远远快于人类新药的开发速度，世界卫生组织的专家甚至担心：新生的、能抵抗所有药物的超级细菌，将把人类带回感染性疾病肆虐的年代。 细菌种类多、繁殖快、适应环境能力强，广泛分布于自然界，在水、土壤、空气、食物、人体和动物的体表、以及与外界相通的腔道中，都有各种细菌的存在。细菌在自然界的物质循环中起重要作用，不少细菌对人类有益，使人致病的细菌只是少数。 细菌为什么会耐药？其原因主要有三个：（1）产生β-内酰胺酶使β-内酰胺类抗生素开环失活，这是产生耐药的主要原因。目前发现的β-内酰胺酶已超过300种，它通过与β-内酰胺环上的羰基共价结合，水解酰胺键从而使β-内酰胺类抗生素开环而失活。（2）改变抗生素与青霉素结合蛋白（penicillin binding proteins，PBPs）的亲和力。当β-内酰胺类抗生素与PBP结合后，PBP就会失去酶活性，使细菌细胞壁的形成部位破损而引起溶菌，反之，则成为耐药菌。PBP基因的变异，使β-内酰胺类抗生素无法与之结合或结合能力降低，这是形成耐药的根本原因。（3）细胞膜和细胞壁的结构发生改变，使药物难以进入细菌内。如生物膜的形成。（4）细菌体内的能力依赖性主动转运机制，将已进入细菌内的抗生素泵出体外，也可导致耐药性。 而其中β-内酰胺酶为耐药性的罪魁祸首，是80%耐药性产生的原因。β-内酰胺酶在上世纪五、六十年代被国外，特别是美国科学家广泛研究，直到1984年美国乳品科学协会第79届年会，威斯康辛大学研究人员报道了β-内酰胺酶分解牛奶中抗生素残留的研究，β-内酰胺酶开始被用于添加在牛奶中，以分解残留的青霉素。然而，由于各种超广谱β-内酰胺酶的发现，以及其对细菌耐药性造成的严重影响，很快这种添加在国外被禁止了。 我国对β-内酰胺酶的研究也很早就开始了，学者们也注意到了其导致耐药性的机理，但是同时由于国家政策要求牛乳中抗生素要求限量，各个乳制品厂商便顺水推舟，大打“无抗”牌，声称其乳制品中无抗生素残留，而造成“无抗”的原因便是“解抗剂”——β-内酰胺酶。 因青霉素超标而在牛乳中添加β-内酰胺酶分解残留的青霉素以通过残留检测，于是青霉素的使用则更肆无忌惮，而乳牛因大量接受青霉素治疗而耐药性进一步严重。如此的恶性循环，造成了各种耐药菌株的肆意传播，同时，由于β-内酰胺酶的超量添加，更有可能诱导了本无耐药机制的菌株产生耐药性。 耐药性已经对人们的生命安全造成了重大的影响，尤其是对于那些抵抗力较差的新生儿。根据1994～2004年对505例新生儿死因回顾分析，发现由于肺部感染而导致窒息或者并发症而死亡的新生儿占70%之多，而又有临床数据表明12年间新生儿致病菌株对青霉素的耐药率高达83.1％，也就是说平均每2个死亡的新生儿中便有1个是由于细菌耐药，无法治愈而亡，这是多么恐怖的数字啊。 基于上述事实，国家已经明令禁止销售各类“无抗奶”，一来是为了抵制虚假广告，二来也是为了防止各类β-内酰胺酶的传播以及扩散所造成的影响。因此，对于β-内酰胺酶的检测以及监控也将是近年来的热点话题之一。

我在做毕业设计，请问有没有谁知道用高效液相色谱法（紫外光检测器）测河流中某一类抗生素的实验大概要做多久？难不难？步骤复杂吗？ [b][/b]我测的是喹诺酮类抗生素，本科毕业设计，不发表，但也要写好啊，呵呵，一万多字

我做的是鸡蛋中磺胺类抗生素的检测，用的提取溶剂是二氯甲烷，发现样品回收率极低，向各位讨教，谢了！！！

请问有用固相微萃取液相色谱法检测磺胺类抗生素的啊

有分析内酰胺抗生素液相分析的朋友不妨一看,有用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=70916] 内酰胺抗生素液相分析方法[/url]

肉类抗生素检测仪器是一种专门用于检测肉类产品中抗生素残留的设备。该仪器利用现代化技术，如物化、生物化学和光电等方法，对肉类样品中的特定抗生素物质进行快速检测和分析。　　肉类抗生素检测仪器的工作原理通常包括样品制备、提取、反应和检测等步骤。首先，从肉类样品中提取出可能的抗生素残留物，然后利用特定的试剂或抗体与这些残留物发生反应，产生可测量的信号。最后，仪器通过检测这些信号的强度或数量来确定肉类中抗生素的残留量。　　肉类抗生素检测仪器具有多种特点：　　高效性：能够在短时间内完成大量样品的检测，提高检测效率。　　精准性：采用先进的检测技术和算法，能够准确测量肉类中抗生素的残留量。　　稳定性：仪器性能稳定，检测结果可靠。　　便捷性：操作简单，易于使用，不需要复杂的预处理步骤。　　肉类抗生素检测仪器广泛应用于食品安全检测领域，对于确保肉类产品的质量和安全性具有重要意义。它可以用于检测各类肉类产品，如猪肉、牛肉、鸡肉等，以及肉制品如香肠、火腿等。通过使用肉类抗生素检测仪器，食品生产企业可以及时发现并解决抗生素超标问题，保障消费者的健康和安全。　　此外，肉类抗生素检测仪器还可以用于监管部门的抽检工作，对市场上的肉类产品进行监测和评估，确保市场的食品安全。同时，该仪器也可以用于科研和教学领域，为相关研究提供准确的检测数据和科学支持。　　总之，肉类抗生素检测仪器是一种重要的食品安全检测设备，对于保障肉类产品的质量和安全性具有重要意义。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091057315400_8228_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

肉类抗生素残留检测仪具有多种功能，主要包括：　　快速筛查与检测：利用化学分析技术和光谱学技术，肉类抗生素残留检测仪能够快速、准确地检测肉类中的抗生素残留量。它具备高灵敏度和高特异性，能够在短时间内完成大量样品的检测。　　多种样品检测：肉类抗生素残留检测仪可以检测多种肉类产品中的抗生素残留，包括猪、鸡、鸭、羊、牛等畜禽肉产品，以及牛奶等乳制品。这使得它在食品安全监管和检验检疫领域具有广泛的应用价值。　　抗生素种类识别：检测仪能够识别多种抗生素类型，包括常见的青霉素类、头孢菌素类、四环素类等。通过特定的试剂或传感器进行反应或测量，仪器可以分析出样品中抗生素的种类和浓度。　　食品安全监管：肉类抗生素残留检测仪在食品安全监管领域发挥着重要作用。它可以帮助监管部门监测肉类产品中的抗生素残留情况，确保肉类产品符合食品安全标准，保护消费者的健康权益。　　数据存储与分析：检测仪通常具有数据存储功能，可以自动保存检测数据，方便后续的数据分析和追溯。此外，一些高级的检测仪还具备数据传输功能，可以将检测数据实时传输到监管部门或企业的数据中心，实现远程监控和管理。　　食品安全追溯：肉类抗生素残留检测仪还可以用于食品质量追溯和溯源。通过检测肉类产品中的抗生素残留情况，可以追溯出生产环节中可能存在的食品安全问题，从而采取相应的措施加以改进和防范。　　总之，肉类抗生素残留检测仪是一种高效、精准的检测仪器，它具备快速筛查、多种样品检测、抗生素种类识别、食品安全监管、数据存储与分析以及食品安全追溯等多种功能，为保障消费者的食品安全发挥着重要作用。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151145174806_5022_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

随着我国市场经济的深入发展和药物研发能力的不断提高，每年向国家食品药品监督管理局申报的抗生素新品种的数量始终保持在较高的水平上，一方面为感染性疾病的治疗提供丁较多的手段，但另一方面，在经济效益的驱动下，我国新抗生素研发方面还存在以下几个误区：1．抗生素复方制剂的合理性有待进一步研究①磺胺增效剂——甲氧苄嘧啶(TMP)与非磺胺类抗生素组方磺胺类药物主要抑制了细菌的二氢叶酸(DHFA)的合成，而TMP则抑制了二氢叶酸还原酶(DHFR)的活性，进一步阻止了四氢叶酸(THFA)的合成，由于两者从不同途径同时阻断了细菌的叶酸代谢系统，故TMP起到了磺胺增效作用。但我国在抗生素复方制剂的研发过程中，把TMP作为万能抗菌增效剂，出现了TMP加头孢氨苄、TMP加四环素、TMP加庆大霉素、甚至TMP加黄连素等不合理的复方制剂。②β-内酰胺类酶抑制剂，如克拉维酸钾、舒巴坦钠和三唑巴坦钠，与各种头孢菌素的复方制剂不宜随意组合，应从各种头孢菌素固有抗菌谱及半衰期与酶抑 制剂的半衰期、毒性大小和两者的最佳配比去考虑组方的合理性。但现在却有开发各种头孢菌素与β-内酰胺类酶抑制剂的复方制剂如：头孢呋辛钠与舒巴坦钠、头孢曲松钠与三唑巴坦钠或舒巴坦钠，未从抗菌谱和两者的半衰期的差别予以全面考虑。

肉类抗生素残留检测仪在多个领域都有重要的应用场景，具体如下：　　食品生产企业：在食品生产过程中，企业需要严格控制食品中抗生素的残留量，以保证食品安全。抗生素残留检测仪可以帮助企业实现对食品中抗生素残留的实时监测，提高产品质量和安全性。　　餐饮机构：餐饮机构需要对所采购的食材进行严格的质量把关，确保食品中不存在抗生素残留。通过使用抗生素残留检测仪，餐饮机构可以方便地检测食材中的抗生素残留，保证食品安全。　　监管部门：监管部门需要对食品生产和流通环节进行监督和检查，以确保食品安全。通过使用抗生素残留检测仪，监管部门可以快速、准确地检测食品中的抗生素残留，提高监管效率和准确性。　　养殖场：在养殖环节中，养殖场可以定期使用肉类抗生素残留检测仪对肉类产品进行检测，确保产品质量符合食品安全标准。这有助于养殖场及时调整养殖管理策略，减少抗生素的使用，从源头上保障肉类的安全。　　屠宰场和食品深加工企业：这些场所也需要对肉类产品进行抗生素残留检测，以确保产品符合相关标准和法规要求。　　科研和教育机构：在科研和教育领域，肉类抗生素残留检测仪可以用于研究和教学，帮助科研人员和学生了解抗生素在肉类产品中的残留情况和检测技术。　　总之，肉类抗生素残留检测仪在食品安全监管、养殖、科研和教育等领域都有广泛的应用场景，为保障食品安全和维护人们的身体健康发挥着重要作用。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151146490913_7004_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

[align=center][b][font=方正小标宋简体][font=宋体]β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条使用说明书[/font][/font][/b][/align][size=3][b][font=宋体]原理[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]β[/font][font=宋体]-[font=宋体]内酰胺类抗生素快速检测试纸条基于胶体金免疫层析技术，用于快速筛查β[/font]-[font=宋体]内酰胺类抗生素超标的牛奶。将检测液加入试纸卡上的样品孔，检测液中的β[/font]-[font=宋体]内酰胺类抗生素与胶体金垫上的金标抗体结合形成复合物，若β[/font]-[font=宋体]内酰胺类抗生素在检测液中浓度低于[/font]4ng/mL[font=宋体]，未结合的金标抗体流到[/font]T[font=宋体]区时，被固定在膜上的β[/font]-[font=宋体]内酰胺类抗生素[/font]-BAS[font=宋体]偶联物结合，逐渐凝集成一条可见的[/font]T[font=宋体]线；若β[/font]-[font=宋体]内酰胺类抗生素浓度高于[/font]4ng/mL[font=宋体]，金标抗体全部形成复合物，不会再与[/font]T[font=宋体]线处的β[/font]-[font=宋体]内酰胺类抗生素[/font]-BAS[font=宋体]偶联物结合，从而也就不显示[/font]T[font=宋体]线。未固定的复合物流过[/font]T[font=宋体]区被[/font]C[font=宋体]区的二抗捕获形成可见的[/font]C[font=宋体]线。[/font]C[font=宋体]线出现则表示免疫层析发生，即试纸是有效的。[/font][/font][/size][size=3][b][font=宋体]灵敏度[/font][/b][font=宋体] 4ng/mL[/font][/size][size=3][b][font=宋体]提供材料[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]1.10[font=宋体]份快速检测试纸卡（内带两个吸管[/font]1[font=宋体]包干燥剂）[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]2.10[font=宋体]份样品离心管[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]3.1[font=宋体]条微孔条（[/font]10[font=宋体]个反应小杯）[/font][/font][/size][size=3][b][font=宋体]所需材料[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]1.5mL[font=宋体]转头离心机（[/font]3000-8000[font=宋体]转[/font]/[font=宋体]分钟）[/font][/font][/size][size=3][b][font=宋体]注意事项[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]1.[/font][/size] [size=3][font=宋体]如果购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请不要使用。[/font][/size][size=3][font=宋体]2.[/font][/size] [size=3][font=宋体]所有试纸启封后一小时内使用。[/font][/size][size=3][font=宋体]3.[/font][/size] [size=3][font=宋体]本品为一次性产品，请勿重复使用。[/font][/size][size=3][font=宋体]4.[/font][/size] [size=3][font=宋体]样品不需要放入冰箱冷藏，室温保存即可。[/font][/size][size=3][font=宋体]5.[/font][/size] [size=3][font=宋体]请勿用饮水，自来水，纯水，冲调奶粉等做阴性对照，最好使用明确阴性鲜牛奶作对照；青霉素分解酶对结果产生干扰。[/font][/size][size=3][b][font=宋体]保存和稳定性[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]4-30[font=宋体]°[/font]C[font=宋体]阴凉干燥处保存，不可冷冻，避免日光直射，保质期[/font]18[font=宋体]个月。[/font][/font][/size][size=3][b][font=宋体]测试步骤[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]1.[/font][/size] [size=3][font=宋体]将采集的牛奶样品编号，置于常温（[/font][font=宋体]20[font=宋体]°[/font]C-30[font=宋体]°[/font]C[font=宋体]）室内。（低温牛奶应该放置至室温再进行检测）[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]2.[/font][/size] [size=3][font=宋体]摇匀牛奶，用吸管吸取[/font][font=宋体]1mL[font=宋体]加入到离心管中，[/font]7000[font=宋体]转[/font]/[font=宋体]分钟离心[/font]3-4[font=宋体]分钟至分离出脂肪层。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]3.[/font][/size] [size=3][font=宋体]再用吸管透过脂肪层，[b]准确吸取脂肪层下[/b][/font][font=宋体][b]5[font=宋体]毫米处液体（即脱脂牛奶）[/font][/b][/font][font=宋体]至吸管刻度线位置。[/font][/size][size=3][font=宋体]4.[/font][/size] [size=3][font=宋体]从微孔板上取下所需数目的小杯，撕去杯面上的密封膜，固定到支架上。[/font][/size][size=3][font=宋体]5.[/font][/size] [size=3][font=宋体]将吸管吸取的脱脂牛奶全部滴入反应小杯内，然后用另一支吸管对其进行反复吸放，直至小杯内的红色物质全部溶解并混合均匀后，等待约[/font][font=宋体]1[font=宋体]分钟，即得到待检样品。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体][b]*[font=宋体]注意[/font][/b][font=宋体]：本品灵敏度高低与混匀后等待时间成正相关（不超过[/font]3[font=宋体]分钟），要提高灵敏度可适当延长混匀后的等待时间（反应时间），建议等待[/font]1-2[font=宋体]分钟。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]6.[/font][/size] [size=3][font=宋体]取出试纸条，用滴管吸取待测样品，逐滴滴加[/font][font=宋体]3[font=宋体]滴于加样孔。[/font]5[font=宋体]分钟判读结果。[/font]10[font=宋体]分钟以后结果无效。[/font][/font][/size][size=3][b][font=宋体]结果解释[/font][/b][/size][size=3][font=宋体]阴性：[/font][font=宋体]C[font=宋体]线显色，[/font]T[font=宋体]线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]阳性：[/font][font=宋体]C[font=宋体]线显色，[/font]T[font=宋体]线不显色，判为阳性。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体]无效：[/font][font=宋体]C[font=宋体]线不显色，无论[/font]T[font=宋体]线是否显色，试纸均判为无效。[/font][/font][/size]

[color=#444444]最近在做四环素类和磺胺类抗生素的测定实验，对于几个实验细节不太清楚，麻烦各位有经验的前辈能够解答一下，谢谢了！[/color][color=#444444]1.标准曲线的配置的过程中，标准品的称量必须要用百万分之一天平吗？万分之一够用吗？[/color][color=#444444]2.前处理过程中要用到的玻璃仪器比如旋蒸用的球瓶应该怎么清洗啊，用酸缸还是碱缸浸泡啊，之后需要用马弗炉烧吗？玻璃仪器再用的时候应该用什么有机溶剂润洗啊，我这有甲醇和乙腈，这两种可以吗？[/color][color=#444444]3.出峰顺序的确定，因为液相后面没联质谱，想问一下应该怎么确定出峰顺序啊？[/color]

小弟用三重四级杆液质联用检测四环素类抗生素，结果发现TC、CTC、OTC的峰型都很差，就是峰太宽，峰高低，而且峰呈锯齿形，导致信噪比小，难以检测。同步检测的其他抗生素如磺胺类和大环内酯类是没有问题的。样品用磷酸盐乙腈混合溶液提取，色谱条件是C18柱，A：0.1%甲酸水溶液，B：甲醇，梯度洗脱。请教做好这方面实验的兄弟姐妹们LC-MS检测四环素要注意什么？是否出现过上述情况？大家用的色谱质谱条件怎样的？多谢。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=25638]大环内酯类抗生素的分析方法[/url]

HELP~~~我把100ppb的四环素类和磺胺类抗生素的混标1ml稀释到50ml，过6ml的HLB柱子之后用20ml甲醇洗脱，氮吹浓缩到1ml，上LCMSMS检测，发现磺胺类的只有一半量还不到，四环素类的几乎就是没有，这是什么原因呢？难道是之间的氮吹浓缩时间太长，导致四环素类发生变化无法被检出？TAT我现在是按照文献上方法做的，可是结果总不好，如果连检测都成问题的话，接下去实验就没法做了。。。前辈们对此有没有什么建议？

想要检测抗生素发酵生产菌渣中残留的抗生素含量，用三氯乙酸对菌渣中抗生素进行了提取，想要用固相萃取柱对提取液进行净化提纯，目标物是硫酸新霉素，极性很大，属于氨基糖苷类抗生素。请问该如何选择固相萃取柱？

大家做过乳制品中青霉素类抗生素的谈谈自己的经验以及遇到的各种问题，是用的那种方法，对GB/T 21315-2007 动物源性食品中青霉素族抗生素残留量检测方法-液相色谱-质谱质谱法以及GB/T 22975-2008牛奶和奶粉中阿莫西林、氨苄西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林和双氯西林残留量的测定-液相色谱-串联质谱法这两种方法的检测有什么看法，回收率怎么样？基质干扰明显嘛？样品测定液干净吗？大家共同来探讨一下，分享经验，共同进步！

做的是磺胺、喹诺酮、四环素三类抗生素，分三个浓度做回收，每个浓度做三个样，有时RSD挺小，有时很大。有时又表现为某类抗生素RSD小，某类抗生素大。感觉和最后氮吹有关，有的样吹得干一下，有些不那么干。想问问各位老师的建议

先后使用0.1%甲酸、0.01M乙酸铵、0.01M乙酸铵（含0.1%甲酸）、0.01M甲酸铵、0.01M甲酸铵（含0.1%甲酸）作为水相进行实验，有机相使用乙腈，也曾往乙腈中添加0.1%甲酸。这四种抗生素的灵敏度就是上不去http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09509.gif，敢问同行们做此类抗生素时的仪器条件能分享下吗？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09501.gif

想请教一个问题，就是英国和欧洲药典中，在很多头孢类抗生素控制标准中都列出了几个有关物质的结构图和化学名称，想知道这些有关物质的结构应该是经过研究确证过的，才可能给出来，那这些研究文献有没有公开呢？在什么地方可以查到呢一般？英国药典本身没有什么信息，只给出部分有关物质的结构，没注明出自哪里？

RT,水样中四环素类抗生素的检测该如何做?