银黄颗粒

[b][/b][align=center][b]银黄颗粒质量标志物评价研究[/b][/align][b] 摘要[/b]目的：以黄芩药材、金银花药材、黄芩提取物、金银花提取物、银黄制剂为研究对象，考察并优化了样本在前处理环节的回流提取溶剂的体积、回流提取时间和提取溶剂的温度等。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6mm × 250 mm，5μm）， Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6mm × 250 mm，3μm）和 Agela MP S/N。以乙腈一0.3% 磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.7 mLmin[sup]-1[/sup]，检测波长为235 nm。结果和结论：通过各方面的考察，确定了银黄颗粒、黄芩药材和金银花药材在样品前处理环节的工艺优化参数，为银黄颗粒质量标志物研究提供借鉴指导。结论: 建立的提取方法稳定、可靠，有效成分达到最大提取效率，可用于银黄颗粒溯源检测的质量控制和综合评价。[b] 关键词：[/b]银黄颗粒；质量标志物；高效液相；黄芩；金银花[b] [/b][align=center][b][color=#333333]Evaluation of Quality Markers of Yinhuang Granules[/color][/b][/align]Objective: To investigate and optimize the volume ofreflux solvent, reflux extraction time and temperature of extraction solvent inthe pretreatment of samples, taking Scutellaria baicalensis, honeysuckle,Scutellaria baicalensis extract, honeysuckle extract and Yinhuang preparationas research objects. METHODS: High performance liquid chromatography was usedwith Venusil MP C18 (4.6 mm *250 mm, 5 micron), Venusil MP C18 (4.6 mm *250 mm,3 micron) and Agela MP S/N as chromatographic columns. The gradient elution was carried out with acetonitrile-0.3% phosphoric acid solution as mobile phase.The flow rate was 0.7 mL/min and the detection wavelength was 235nm. RESULTS AND CONCLUSION: The process optimization parameters of Yinhuanggranules, Radix Scutellariae baicalensis and Flos Lonicerae in samplepretreatment were determined through various aspects of investigation, whichcould provide reference and guidance for the study of quality markers ofYinhuang granules. CONCLUSION: The established extraction method is stable andreliable, and the effective ingredients can reach the maximum extractionefficiency. It can be used for quality control and comprehensive evaluation oftraceability detection of Yinhuang granules.Keywords: Yinhuang granules quality markers high performance liquidchromatography Scutellaria baicalensis honeysuckle[b]一、前言[/b] 银黄颗粒组方由金银花和黄芩构成，具有清热疏风、利咽解毒的功效，用于外感风热、肺胃热盛所致的咽干、咽痛、喉核肿大、口渴、发热急慢性扁桃体炎、急慢性咽炎、上呼吸道感染等症。该复方原料金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，主产于山东、河南和河北等地。该复方原料黄芩为唇形科[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BB%84%E8%8A%A9%E5%B1%9E][color=windowtext]黄芩属[/color][/url]多年生草本植物，产于河北，河南，陕西，山西，山东等地。黄芩提取物的主要活性成分为黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素，金银花提取物是从金银花中提取的有机酸类活性成分。该制剂及其原料药成分复杂，生产厂家及产地众多，样品存在差异。中药质量标志物（Q-marker）已广泛应用于中成药的质量评价与控制。近年来越来越多的研究使用不同种类的分析仪器，密切联系中药有效性-物质基础- Q-marker研究，建立了丰富的中成药系统质量控制方法，为探讨建立中药全过程质量控制及质量溯源体系奠定了基础。[b]二、材料与方法1仪器与试剂、试药1.1仪器[/b] Waters e2695高效液相色谱仪（美国Waters公司），Waters 2998紫外检测器（美国Waters公司），Waters Empower色谱工作站（美国Waters公司）；AGBP210S电子天平（Sartorius公司）；MILLIPORE纯水机（MILLIPORE公司）；高速万能粉碎机（北京市永光明医疗仪器有限公司，FW-80型）；SB4200DTS超声波双频清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；KDM-A控温电热套（金坛市医疗仪器厂）；Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，5 μm）和Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，3 μm）。[b]1.2 试剂与试药[/b] 乙腈（上海星可高纯溶剂有限公司，色谱纯）；甲醇（天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱纯）；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。对照品来源：葛根素（批号:110752-200912）购自中国食品药品检定研究院。2样品的收集与前处理[b]2.1样品的收集[/b] 本研究从全国范围内收集黄芩、金银花药材各50批，分别制备相应的黄芩提取物和金银花提取物各50批，并制备银黄颗粒样品至少50批。（共计不少于250批样品）。[b]2.2黄芩、金银花药材的处理[/b] 对收集到的各批样品，均按照《中国药典》2015年版（第四部）药材取样法，四分法取样，1/4留样，剩余药材粉碎，使粉末分别过60目和20目筛，并按比例称重。所有黄芩、金银花药材样品均装袋密封，保存于冰柜（-20℃）中，备用。[b]2.3黄芩提取物的制备[/b] 取黄芩约100 g，置于1000 ml容量瓶中，加热回流两次，每次2 h，将滤液置于烧杯中浓缩至200 ml，用2 mol/L的盐酸调PH至1.0-2.0，80 ℃保温1 h，静置24 h.减压抽滤，沉淀加一倍量水混匀，用40 %氢氧化钠调节PH至7.0，加等量乙醇，搅拌溶解，滤过，滤液用2 mol/L的盐酸调PH 1.0-2.0， 60 ℃保温1 h，静置24 h，滤过，沉淀物加水洗至PH 5.0，95%乙醇洗至中性，挥尽乙醇，干燥，即得。[align=center]表1 黄芩提取物的提取[/align][align=center][img=,579,348]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091021374879_6392_3255306_3.png!w579x348.jpg[/img][/align][b]2.4金银花提取物的制备[/b] 称取金银花50.05 g置于圆底烧瓶中，加纯水回流提取三次，第一次8倍量水400 ml回流提取1 h，滤过，残渣加8 倍量水400 ml二次回流提取1 h，滤过，合并煎液，残渣加6倍量水300 ml，合并煎液，浓缩成浸膏，加浸膏量50%的淀粉混匀，置于烘箱中，60 ℃干燥，粉碎成粉，即得。[align=center]表2 金银花提取物的提取[/align][align=center] [img=,552,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091021550706_5584_3255306_3.png!w552x347.jpg[/img][/align][b]3供试品溶液方法考察的制备3.1供试品溶液制备方法考察3.1.1提取溶剂的选择[/b] 根据银黄颗粒的服用说明，该样品采用水为溶媒制备供试品溶液，由于临床应用中黄芩，金银花多采用水煎内服的用法，因此研究中以水作为提取溶媒，制备样品溶液。[b]3.1.2内标物溶液的制备[/b] 经查阅大量文献，本实验适用的内标物为葛根素。取葛根素对照品适量精密称定，以水超声溶解并定容制成浓度为30 μg*mL[sup]-1[/sup]的内标溶液[b]3.2银黄颗粒供试液制备方法考察3.2.1银黄颗粒不同料液比的考察[/b] 银黄颗粒研细后精密称取细粉1.0 g，称四份，置于100 ml或250 ml的圆底烧瓶中，分别精密加入煮沸的蒸馏水25 ml、50 ml、100 ml、150 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后0.5 ml等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表3、图1。[align=center]表3 银黄颗粒不同料液比单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center] [img=,289,425]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091023281381_1955_3255306_3.png!w289x425.jpg[/img][/align][align=center]图1 银黄颗粒不同料液比单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,289,123]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091023402582_6283_3255306_3.png!w289x123.jpg[/img][/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取体积为100 ml时值最大，最终选择回流提取体积为100 ml。[b]3.2.2银黄颗粒不同提取时间的考察[/b] 银黄颗粒研细后精密称取细粉1.0 g，称四份分别置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水25 ml于圆底烧瓶中，称重，分别加热回流20 min、30 min、40 min、60 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后0.5 ml等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表4、图2。[align=center]表4 银黄颗粒不同提取时间单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center] [img=,292,421]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091024007921_8570_3255306_3.png!w292x421.jpg[/img][/align][align=center][img=,577,251]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091024513811_6890_3255306_3.png!w577x251.jpg[/img][/align][align=center]图2 银黄颗粒不同提取时间单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取时间为30 min时值最大，最终选择回流提取时间为30 min。[b]3.2.3银黄颗粒冷热水的考察[/b] 银黄颗粒研细后精密称取细粉1.0 g，称两份分别置于250 ml的圆底烧瓶中，第一份精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，第二份精密加入100 ml常温蒸馏水，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表5、图3。[align=center]表5 银黄颗粒冷热水单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,287,427]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091025490101_4911_3255306_3.png!w287x427.jpg[/img][/align][align=center][img=,574,270]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091026003331_9248_3255306_3.png!w574x270.jpg[/img][/align][align=center]图3 银黄颗粒冷热水单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取溶剂为热水时值最大，最终选择提取溶剂为热水。[b]3.3黄芩药材供试液制备方法考察 3.3.1黄芩药材不同料液比的考察[/b] 按比例称取2 0～60目和过60目筛的黄芩药材粉末，共0.57 g，称取三份，置于100 ml或250 ml的圆底烧瓶中，分别精密加入煮沸的蒸馏水25 ml、50 ml、100 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min ，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表6、图4。[align=center]表6 黄芩药材不同料液比单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,291,425]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091026251557_1424_3255306_3.png!w291x425.jpg[/img][/align][align=center][img=,567,260]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091026352391_8450_3255306_3.png!w567x260.jpg[/img][/align][align=center]图4 黄芩药材不同料液比单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取体积为50ml时值最大，最终选择50ml为最佳提取容积。[b]3.3.2黄芩药材不同提取时间的考察[/b] 按比例称取2 0～60目和过60目筛的黄芩药材粉末，共0.57 g，称取四份，分别置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水25 ml于圆底烧瓶中，称重，分别加热回流20 min、30 min、40 min、60 min ，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表7、图5。[align=center]表7 黄芩药材不同提取时间单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,289,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091027053867_9448_3255306_3.png!w289x424.jpg[/img][/align][align=center][img=,605,240]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091027125561_9333_3255306_3.png!w605x240.jpg[/img][/align][align=center]图5 黄芩药材不同提取时间单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取时间为40 min时值最大，最终选择40 min为最佳提取时间。[b]3.3.3黄芩药材冷热水提取的考察[/b] 按比例称取2 0～60目和过60目筛的黄芩药材粉末，共0.57 g，称取二份，置于100 ml的圆底烧瓶中，第一份精密加入煮沸的蒸馏水50 ml于圆底烧瓶中，第二份精密加入50 ml常温蒸馏水，分别称重，加热回流40 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表8、图6.[align=center]表8 黄芩药材冷热水单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,287,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091027401011_8981_3255306_3.png!w287x424.jpg[/img][/align][align=center][img=,619,293]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091027478961_1794_3255306_3.png!w619x293.jpg[/img][/align][align=center][/align][align=center]图6 黄芩药材冷热水单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取溶剂为热水时值最大，最终选择热水提取是最佳的。[b]3.4金银花药材供试液制备方法考察3.4.1金银花药材不同料液比的考察[/b] 按比例称取2 0～60目和过60目筛的金银花药材粉末，共0.5 g，称取三份，置于100 ml或250 ml的圆底烧瓶中，分别精密加入煮沸的蒸馏水50 ml、100 ml、200 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表9、图7。[align=center]表9 金银花药材不同料液比单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,358,511]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091031346401_7706_3255306_3.png!w358x511.jpg[/img][/align][align=center][img=,636,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091031349941_1562_3255306_3.png!w636x256.jpg[/img][/align][align=center]图7 金银花药材不同料液比单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取容积为100 ml，200 ml时值较大，100 ml与200 ml比较，两者的成分含量差别不大，所以选择100 ml提取较好。[b]3.4.2金银花药材不同提取时间的考察[/b] 按比例称取2 0～60目和过60目筛的黄芩药材粉末，共0.5 g，称取四份，分别置于250 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，称重，分别加热回流20 min、30 min、40 min、60 min ，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算各共有峰的单位质量的峰面积值，比较其差异，结果见表10、图8。[align=center]表10 金银花药材不同提取时间单位质量色谱峰面积比较[/align][align=center][img=,290,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091030005792_6136_3255306_3.png!w290x424.jpg[/img][/align][align=center][img=,555,215]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091030053727_8053_3255306_3.png!w555x215.jpg[/img][/align][align=center][/align][align=center]图 9 金银花药材冷热水提取单位质量色谱峰面积比较[/align] 由上述表图分析：各主要共有峰的单位质量峰面积在提取溶剂为热水时值最大，最终选择热水提取最佳。[b]3.5 黄芩提取物，金银花提取物供试液制备方法考察[/b] 通过实验得知黄芩提取物，金银花提取物供试液制备方法考察同银黄颗粒供试液制备方法考察一致。[b]3.6 含葛根素内标的银黄颗粒、黄芩药材、金银花药材、黄芩提取物、金银花提取物供试液配制方法的确定3.6.1含葛根素内标银黄颗粒供试品溶液的配制[/b] 银黄颗粒研细后精密称取细粉1.0 g，置于250 ml圆底烧瓶内，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml，称重，加热回流30 min（提前打开电热套预热），放冷，补重，过滤，取续滤液。另取葛根素对照品适量精密称定，以水超声溶解并定容制成浓度为30μg• mL-1的内标溶液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液。[b]3.6.2含葛根素内标黄芩药材供试品溶液的配制[/b] 从冰柜中取出黄芩药材粉末，放置室温。采用四分法取样，按比例称取2 0～60目和过60目筛的黄芩药材粉末，共0.57 g，置于100 ml圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水50 ml，称重，加热回流40 min（提前打开电热套预热），放冷，补重，过滤，取续滤液。另取葛根素对照品适量精密称定，以水超声溶解并定容制成浓度为30 μg• mL-1的内标溶液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液。[b]3.6.3含葛根素内标金银花药材供试品溶液的配制[/b] 从冰柜中取出金银花药材粉末，放置室温。采用四分法取样，按比例称取2 0～60目和过60目筛的黄芩药材粉末，共0.25 g，置于100 ml圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水50 ml，称重，加热回流30 min（提前打开电热套预热），放冷，补重，过滤，取续滤液。另取葛根素对照品适量精密称定，以水超声溶解并定容制成浓度为30 μg• mL-1的内标溶液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液。[b]3.6.4含葛根素内标金银花提取物供试品溶液的配制[/b] 从冰柜中取出金银花提取物粉末，按比例精密称取0.2 g，置于250 ml圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml，称重，加热回流30min（提前打开电热套预热），放冷，补重，过滤，取续滤液。另取葛根素对照品适量精密称定，以水超声溶解并定容制成浓度为30 μg• mL-1的内标溶液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液。[b]3.6.5含葛根素内标黄芩提取物供试品溶液的配制[/b] 从冰柜中取出黄芩提取物粉末，按精密称取0.04 g，置于250 ml圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml，称重，加热回流30 min（提前打开电热套预热），放冷，补重，过滤，取续滤液。另取葛根素对照品适量精密称定，以水超声溶解并定容制成浓度为30 μg• mL-1的内标溶液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液。[b]三、结论[/b] 实验考察了银黄颗粒在样本处理环节的回流提取溶剂的体积、回流提取时间和提取溶剂的温度等。最终选择回流提取体积为100 ml，选择回流提取时间为30 min，选择提取溶剂为热水。考察了黄芩药材在样本处理环节的回流提取溶剂的体积、回流提取时间和提取溶剂的温度等。最终选择50ml为最佳提取容积，选择40 min为最佳提取时间，选择热水提取是最佳的。考察了金银花药材在样本处理环节的回流提取溶剂的体积、回流提取时间和提取溶剂的温度等。最终选择100 ml体积提取溶剂，选择30 min提取是最佳的，选择热水提取最佳。本实验还确定了含葛根素内标的银黄颗粒、黄芩药材、金银花药材、黄芩提取物、金银花提取物供试液配制方法。[align=left][b]参考文献[/b][/align] 王亚丹，杨建波，戴忠，等.中药金银花的研究进展.药物分析杂志，2014，34(11):1928-1935 中国药典.一部.2015:1498 王彩芳，张楠，黄龙，等. 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[align=center][b]一种银黄颗粒HPLC指纹图谱的检测方法及其应用[/b][/align]摘要目的：本研究介绍了银黄颗粒及其原料药黄芩和金银花的指纹图谱的建立方法，包括供试品溶液的制备、高效液相色谱仪测定及对数据和图谱的处理，以及由该方法制备得到的相应指纹图谱。方法：使用Venusil MP C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm）+ Venusil MP C18（4.6 mm × 250 mm，3 μm）色谱柱在紫外235 nm吸收波长，选用流动相：乙腈(A)-0.3%磷酸(B)梯度洗脱，0~103 min，17%ACN 103~142 min，17%→27%ACN；142~156 min，27%→29%ACN；156~179 min，29%→41%ACN；179~219min，41%→80%CAN。结果：在测定的不同厂家 10 批次样品的色谱图中，选择90%以上批次样品均有的色谱峰为共有峰，银黄颗粒。黄芩药材、金银花药材分别确定了22，22，21 个共有峰。结论：为银黄颗粒定性鉴别提供借鉴。关键词：银黄颗粒；黄芩；金银花；指纹图谱[align=center][b]A Method for Detecting Fingerprint of Yinhuang Granules by HPLC and ItsApplication[/b][/align]Abstract Objective: To introduce the method ofestablishing fingerprint of Yinhuang granules and its raw materials,Scutellaria baicalensis and Lonicera japonica, including the preparation ofsample solution, determination by high performance liquid chromatography andthe treatment of data and chromatogram, as well as the correspondingfingerprint obtained by this method. METHODS: Venusil MP C18 (4.6 mm×250 mm, 5 mm) + Venusil MP C18 (4.6 mm×250mm, 3 mm) column was used at 235 nmultraviolet absorption wavelength. The mobile phase was selected: acetonitrile(A) - 0.3% phosphoric acid (B) gradient elution, 0-103 min, 17% ACN, 103-142min, 17% to 27% ACN, 142-156 min, 27% to 29% ACN, 156-179 min, 29% to 4% ACN.1% ACN 179 ~ 219 min, 41%80% CAN. RESULTS: In the chromatograms of 10 batchesof samples from different manufacturers, more than 90% of the samples hadcommon peaks, Yinhuang granules. Scutellaria baicalensis and Lonicera japonicahave 22, 22 and 21 peaks respectively. CONCLUSION: It can provide reference forthe qualitative identification of Yinhuang Granules.Key words: Yinhuang granules Scutellaria baicalensis Honeysuckle Fingerprint[b] 一、前言[/b]银黄颗粒组方由金银花和黄芩构成，具有清热疏风、利咽解毒的功效，用于外感风热、肺胃热盛所致的咽干、咽痛、喉核肿大、口渴、发热急慢性扁桃体炎、急慢性咽炎、上呼吸道感染等症。该复方原料金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，主产于山东、河南和河北等地。该复方原料黄芩为唇形科[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BB%84%E8%8A%A9%E5%B1%9E][color=windowtext]黄芩属[/color][/url]多年生草本植物，产于河北，河南，陕西，山西，山东等地。黄芩提取物的主要活性成分为黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素，金银花提取物是从金银花中提取的有机酸类活性成分。该制剂及其原料药成分复杂，生产厂家及产地众多，样品存在差异。中药 HPLC 指纹图谱技术被认为是当前能较全面反映中药材及复方整体化学成分信息的方法，能更有效地评价中药的质量信息。本研究在分析上述研究背景的基础上，收集来源于不同产地的各50批金银花和黄芩药材，并制成银黄颗粒成品，再采用HPLC法同时建立金银花药材，黄芩药材和相应批次银黄颗粒的指纹图谱，选出各自的共有峰，从而确定不同产地，不同厂家的的药材共有物质及其数量。[b]二、材料与方法1仪器与试剂、试药1.1仪器[/b]Waters e2695高效液相色谱仪（美国Waters公司），Waters 2998紫外检测器（美国Waters公司），Waters Empower色谱工作站（美国Waters公司）；AGBP210S电子天平（Sartorius公司）；MILLIPORE纯水机（MILLIPORE公司）；高速万能粉碎机（北京市永光明医疗仪器有限公司，FW-80型）；SB4200DTS超声波双频清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；KDM-A控温电热套（金坛市医疗仪器厂）；Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，5 μm）和Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，3 μm）。[b]1.2 试剂与试药[/b]乙腈（上海星可高纯溶剂有限公司，色谱纯）；甲醇（天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱纯）；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。对照品来源：葛根素（批号:110752-200912）购自中国食品药品检定研究院。[b]2方法2.1 HPLC色谱条件的考察2.1.1不同流动相的考察[/b]比较了乙腈--0.05%甲酸、乙腈-0.4%甲酸、乙腈-0.3%甲酸的流动相系统进行洗脱。见图1。 [align=center][img=,671,271]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091124382201_5843_3255306_3.png!w671x271.jpg[/img][/align][align=center]乙腈--0.05%甲酸[/align][align=center][img=,610,288]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091124499241_4585_3255306_3.png!w610x288.jpg[/img][/align][align=center]乙腈-0.4%甲酸[/align][align=center][img=,690,286]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091124589941_1562_3255306_3.png!w690x286.jpg[/img][/align][align=center]乙腈-0.3%甲酸[/align][align=center][img=,610,286]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091125102591_3301_3255306_3.png!w610x286.jpg[/img][/align][align=center]图1 不同流动相系统下银黄颗粒指纹图谱[/align]结果表明，前二者分离度均相对较差，且乙腈-0.05%甲酸均基线噪音大。最终选用乙腈-0.3%磷酸作为流动相系统，所得色谱峰型较好，基线平稳，分离效果最佳。[b]2.1.2 梯度洗脱条件的选择[/b]本实验考察了不同比例的乙腈-磷酸的洗脱条件，尽可能多且全面展现银黄颗粒样品的峰信息，考察了以下4个洗脱程序。梯度条件一：流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸(B)梯度洗脱，0~70 min，17%ACN；70~100 min，17%→20% ACN；100~110 min，20%→25% ACN；110~140 min，25%→55% ACN；140~150 min，55%→70%ACN。梯度条件二：流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸(B)梯度洗脱，0~80min，17%ACN；80~139min，17% →34% ACN；139~159 min，34% →64% ACN；159~170min，64% →80% ACN。梯度条件三：流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸(B)梯度洗脱，0~103min，17%ACN；103~142min，17%→24%ACN；142~165min，24%→33%ACN；165~195 min，33%ACN；195~280min，33%→70%ACN。梯度条件四：流动相：乙腈(A)-0.3%磷酸(B)梯度洗脱，0~103 min，17%ACN 103~142min，17%→27%ACN；142~156 min，27%→29%ACN；156~179 min，29%→41%ACN；179~219min，41%→80%CAN。结果梯度条件四下的指纹图谱，色谱图中采集的色谱峰形好，峰数多且分离度良好，基线较平稳，能展现最多的谱图信息，故确定为最终梯度条件，见图2。[align=center][img=,607,284]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091125509322_7749_3255306_3.png!w607x284.jpg[/img][/align][align=center]梯度条件一[/align][align=center][img=,607,287]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091126035685_7140_3255306_3.png!w607x287.jpg[/img][/align][align=center]梯度条件二[/align][align=center][img=,608,287]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091126106612_24_3255306_3.png!w608x287.jpg[/img][/align][align=center]梯度条件三[/align][align=center][img=,690,282]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091126155801_3154_3255306_3.png!w690x282.jpg[/img][/align][align=center]梯度条件四[/align][align=center]图2 不同洗脱条件下银黄颗粒指纹图谱[/align][b]2.1.3 不同流速的选择 [/b]分别考察同一样品供试液，以梯度条件四下的方法，测定其流速在0.9 mLmin[sup]-1[/sup]、 0.8 mLmin[sup]-1[/sup]、 0.7mLmin[sup]-1[/sup]时的分离效果。结果表明，流速在0.9 mLmin[sup]-1[/sup]和0.8mLmin[sup]-1[/sup]时，130min附近两峰分离效果不理想，而0.7 mLmin[sup]-1[/sup]时峰形及分离情况均比较理想。综合考虑，选择0.7 mLmin[sup]-1[/sup]流速。见图3。[align=center][img=,690,283]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091126346021_2490_3255306_3.png!w690x283.jpg[/img][/align][align=center]流速：0.9 mLmin[sup]-1[/sup][/align][align=center][sup][img=,690,264]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091126456661_6012_3255306_3.png!w690x264.jpg[/img][/sup][/align][align=center]流速：0.8 mLmin[sup]-1[/sup][/align][align=center][sup][img=,690,286]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127029111_5432_3255306_3.png!w690x286.jpg[/img][/sup][/align][align=center]流速：0.7 mLmin[sup]-1[/sup][/align][align=center]图3 不同流速下银黄颗粒指纹图谱[/align][b]2.1.4 测定波长的选择 [/b]对同一银黄颗粒样品供试液在235～295 nm波长范围内，每隔20 nm测定一次，选择最佳吸收波长。其色谱图结果见图4。[align=center][img=,690,285]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127570951_5526_3255306_3.png!w690x285.jpg[/img][/align][align=center]235 nm[/align][align=center][img=,690,283]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091128103641_8767_3255306_3.png!w690x283.jpg[/img][/align][align=center]255 nm [/align][align=center][img=,690,284]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091128182679_3036_3255306_3.png!w690x284.jpg[/img][/align][align=center]275 nm[/align][align=center][img=,690,236]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091128256647_2872_3255306_3.png!w690x236.jpg[/img][/align][align=center]295 nm[/align][align=center] 图4 不同波长下银黄颗粒指纹图谱[/align]由图4结果可知，在235 nm时，色谱图中峰形佳，各峰间比例协调，基线较平稳，且呈现的峰信息量大。因此，选用235 nm作为测定波长。[b]2.2 不同色谱柱的考察[/b]考虑到银黄颗粒中主要是黄酮类成分，故选用C[sub]18[/sub]柱，对色谱柱进行考察，分别使用VenusilMP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，5 μm），Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，3 μm），Agela MP S/N.三根色谱柱及其不同组合，在同一梯度条件下分别对同一银黄颗粒供试液进行指纹图谱峰的采集，结果前四根色谱柱分离度相对较差，Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，5 μm）+ Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，3 μm）组合柱分离出的色谱峰较多，峰型较好，对流动相条件进行微调后，进行色谱图的采集。见图5。[align=center][img=,690,236]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091131336001_8004_3255306_3.png!w690x236.jpg[/img][/align][align=center]Agela MP S/N（4.6 mm × 250 mm，3 μm）[/align][align=center][img=,690,236]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091131265708_7298_3255306_3.png!w690x236.jpg[/img][/align][align=center]Agela MP S/N（4.6 mm × 250 mm，3 μm） [/align][align=center][img=,690,233]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091131195130_7680_3255306_3.png!w690x233.jpg[/img][/align][align=center]Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm× 250 mm，3 μm） [/align][align=center][img=,690,233]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091131092861_3850_3255306_3.png!w690x233.jpg[/img][/align][align=center]Agela MP S/N（4.6 mm × 250 mm，3 μm）+Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm× 250 mm,5 μm） [/align][align=center] [img=,690,285]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091130395070_4225_3255306_3.png!w690x285.jpg[/img][/align][align=center]Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，5 μm）+ Venusil MP C[sub]18[/sub]（4.6 mm × 250 mm，3 μm）[/align]图5 不同色谱柱银黄颗粒指纹图谱[b]2.3 方法学考察2.3.1 仪器精密度考察 [/b]取银黄颗粒同一样品供试液，10 μL进样，连续进样 5次，按“4.1”项下的色谱条件进样测定，以葛根素为参照峰，计算共有峰的峰面积和相对保留时间比值。结果显示各共有峰的相对峰面积RSD＜3 %，相对保留时间RSD＜3%，表明仪器精密度良好。见表1、2。[align=center]表1 银黄颗粒指纹图谱精密度（相对峰面积）[/align][align=center][img=,348,494]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091132223573_3518_3255306_3.png!w348x494.jpg[/img] [/align][align=center]表2 银黄颗粒指纹图谱精密度（相对保留时间）[/align][align=center][img=,352,511]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091132363167_2471_3255306_3.png!w352x511.jpg[/img] [/align][b]2.3.2 重复性试验 2.3.2.1银黄颗粒重复性实验考察[/b]银黄颗粒研细后精密称取细粉1.0 g，称取五份分别置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算相对峰面积值和相对保留时间值，结果见表3、4的25个峰的RSD值都接近3%，由此可以得出结论，银黄颗粒的重复性良好。[align=center]表3 银黄颗粒指纹图谱重复性（相对峰面积）[/align][align=center][img=,294,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091133158091_6693_3255306_3.png!w294x424.jpg[/img][/align][align=center] 表4 银黄颗粒指纹图谱重复性（相对保留时间）[/align][align=center][img=,301,407]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091133264387_6060_3255306_3.png!w301x407.jpg[/img][/align][b]2.3.2.2黄芩药材重复性实验考察[/b]黄芩药材研细后精密称取细粉0.57 g，称取五份分别置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水50 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流40 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算相对峰面积值和相对保留时间值，结果见表5、6的15个峰的RSD值都接近3 %，由此可以得出结论，黄芩药材的重复性良好。[align=center][b] [/b]表5黄芩药材指纹图谱重复性（相对峰面积）[/align][align=center][img=,521,450]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091134133924_7231_3255306_3.png!w521x450.jpg[/img][/align][align=center]表6 黄芩药材指纹图谱重复性（相对保留时间）[/align][align=center][img=,526,450]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091134223683_8185_3255306_3.png!w526x450.jpg[/img][/align][b]2.3.2.3金银花药材重复性实验考察[/b]金银花药材研细后精密称取细粉0.5 g，称取五份分别置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算相对峰面积值和相对保留时间值，结果见表7、8的15个峰的RSD值都接近3%，由此可以得出结论，金银花药材的重复性良好。[align=center] 表7 金银花药材指纹图谱重复性（相对峰面积）[/align][align=center][img=,521,453]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091135202061_4447_3255306_3.png!w521x453.jpg[/img][/align][align=center]表8 金银花药材指纹图谱重复性（相对保留时间）[/align][align=center][img=,520,450]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091135276281_796_3255306_3.png!w520x450.jpg[/img][/align][b]2.4.3 稳定性试验 2.4.3.1银黄颗粒稳定性实验考察[/b]银黄颗粒研细后精密称取细粉1.0 g置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算相对峰面积值和相对保留时间值，结果见表9、10的25个峰的RSD值都接近3 %，由此可以得出结论，银黄颗粒的稳定性良好。[align=center]表9 银黄颗粒指纹图谱稳定性（相对峰面积）[/align][align=center][img=,284,411]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091135513432_6898_3255306_3.png!w284x411.jpg[/img] [/align][align=center]表10 银黄颗粒指纹图谱稳定性（相对保留时间）[/align][align=center][img=,285,423]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091135598981_6279_3255306_3.png!w285x423.jpg[/img][/align] [b]2.4.3.2黄芩药材稳定性实验考察[/b]黄芩药材研细后精密称取细粉0.57 g置于50 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流40 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算相对峰面积值和相对保留时间值，结果见表11、12的25个峰的RSD值都接近3 %，由此可以得出结论，黄芩药材的稳定性良好。[align=center] 表11 黄芩药材指纹图谱稳定性（相对峰面积）[/align][align=center][img=,534,451]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091136295090_8710_3255306_3.png!w534x451.jpg[/img][/align][align=center] 表12 黄芩药材指纹图谱稳定性（相对保留时间）[/align][align=center][img=,468,403]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091136437515_7524_3255306_3.png!w468x403.jpg[/img][/align][b]2.4.3.3金银花药材稳定性实验考察[/b]金银花药材研细后精密称取细粉1.0 g置于100 ml 的圆底烧瓶中，精密加入煮沸的蒸馏水100 ml于圆底烧瓶中，称重，加热回流30 min，回流后放冷，补重，过滤，取续滤液。将样品溶液与内标溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过后等体积混匀，作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照既定方法采集色谱指纹图谱，计算相对峰面积值和相对保留时间值，结果见表13、表14，25个峰的RSD值都接近3 %，由此可以得出结论，金银花药材的稳定性良好。[align=center]表13 金银花药材指纹图谱稳定性（相对峰面积）[/align][align=center][img=,452,406]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091137142831_7122_3255306_3.png!w452x406.jpg[/img][/align][align=center]表14 金银花药材指纹图谱稳定性（相对保留时间）[/align][align=center][img=,441,402]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091137227371_5231_3255306_3.png!w441x402.jpg[/img][/align][b]2.5 样品共有峰的确定[/b]对10 批不同厂家的银黄颗粒及黄芩和金银花药材供试液进行分析，采集指纹图谱，并以葛根素作为参考峰，银黄颗粒选取标定了22个共有峰，见图6。黄芩药材选取标定了22个共有峰，见图7。金银花药材选取标定了21个共有峰，见图8。[align=center][img=,690,265]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091137498881_3854_3255306_3.png!w690x265.jpg[/img][/align][align=center]图6 10 批次的银黄颗粒共有特征峰[/align][align=center][img=,690,259]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091138017531_1112_3255306_3.png!w690x259.jpg[/img][/align][align=center]图7 10 批次的黄芩共有特征峰[/align][align=center][img=,690,247]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091138139735_5366_3255306_3.png!w690x247.jpg[/img][/align][align=center]图8 10 批次金银花药材的共有特征峰[/align][b]三、结果与分析[/b]本研究介绍了银黄颗粒及其原料药黄芩和金银花的指纹图谱的建立方法，包括供试品溶液的制备、高效液相色谱仪测定及对数据和图谱的处理，以及由该方法制备得到的相应指纹图谱。在测定的不同厂家 10 批次样品的色谱图中，选择90 %以上批次样品均有的色谱峰为共有峰，银黄颗粒。黄芩药材、金银花药材分别确定了22，22，21 个共有峰。[b]四、讨论与结论[/b]本研究的指纹图谱构建方法操作简单，稳定可靠，精密度高，分离度好，指纹图谱的稳定性和重现性较好，且信息量大，采用指纹图谱找出不同产地，不同厂家的同一药材的共有峰为质量控制手段，既避免了因只测定一、两个化学成分而判定制剂整体质量的片面性，又减少了为质量达标而人为处理的可能性，通过对多个批次的样品进行系统分析，能更加全面、科学评价银黄颗粒的质量，从而使产品的质量和疗效得到保证。参考文献王亚丹，杨建波，戴忠，等.中药金银花的研究进展.药物分析杂志，2014，34( 11):1928-1935 中国药典.一部.2015:1498 王彩芳，张楠，黄龙，等. HPLC法测定不同厂家银黄颗粒中黄芩苷的含量.医药论坛杂志，2006，27 (24):27-28 王彩芳，黄龙，程茜，等.高效液相色谱法测定不同厂家银黄颗粒中绿原酸的含量.时珍国医国药，2007，18(5):1143-1144黄雄，黄嬛，王峻，等.银黄颗粒的HPLC特征图谱分析.药物分析杂志，2009，29(8):1320-1323 肖小河，王永炎.从热力学角度审视和研究中医药.国际生物信息与中医药论丛.新加坡:新加坡医药卫生出版社，2004:74 贺福元，罗杰英，刘文龙，等.中药谱效学研究方向方法初探.世界科学技术-中医药现代化，2004，6(6):44-50 赵渤年，于宗渊，丁晓彦，等.黄芩质量评价谱-效相关模式的研究.中草药，2011.42(2):380-383 高燕，赵渤年，于宗渊等.金银花抗流感病毒毒谱-效相关质量评价模式的研究.中华中医药杂志，2013.28(12):3508-3511 Ke Li， Wei Cheng， Xiao-Jian Liu，hu-Bin Li， En-Guang Hou， Yan Gao， Liang Wang， Qing Liu， Bo-Nian Zhao， Zong-Yuan Yu， Mathematical Modelling for the Quality Evaluation of Baikal Skullcap Root， Applied Mechanics and Materials， 2011 王荣梅，徐丽华，林永强.HPLC法同时测定银黄含片中6个咖啡酰奎宁酸类成分的含量.药物分析杂志，2012，32(1):57-60 高苏亚，范涛，王黎等.红外光谱技术结合化学计量学方法在中药研究中的应用.应用化工，2012，41(2):324-328 王鹏，王振国，薛付忠等.基于支持向量机法的中药性状与药性相关性研究. 江西中医药，2012，43(355):65-68 Cifford MN， Johnston KL， Knight S et al. Hierarchical scheme for [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url] identification of chlorogenic acids.J Agric Food Chem，2003 51(10):2900-2910张倩，张加余，隋丞琳，等. HPLC-DAD-ESI-MS/MS研究金银花水提工艺中绿原酸类成分的变化规律.中国中药杂志，2012 37(23):3564-3567 沈红，段金廒，钱大玮，等.黄芩及复方野马追胶囊中黄酮类成分的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析.药物分析杂志，2009 29(9):1425-1429 赵胜男，李守拙.黄芩药材中黄酮类成分的HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]研究.承德医学院学报2012 29(4):345-347 Chkoshi E， Nagashima T， Sato H， et al. Simple preparation of baicalin from Scutellariae Rdixi. J Chromatogr A，2009 1216(11): 2192 -2194高燕，吕凌，王亮，等.银黄颗粒HPLC指纹图谱与模式识别分析.中华中医药杂志，2017，32(09):4238-4242 丁晓彦，刘青，李岩，等.丹参脂溶性成分的HPLC指纹图谱及模式识别研究.中华中医药杂志，2016，3(6):2254-2256

问题：迪马科技哪几款液相色谱柱满足2015药典银黄颗粒中的绿原酸的检测要求？答案：Leapsil C18 ，Diamonsil C18、Platisil ODS三款液相色谱柱【活动奖励】幸运奖（2钻石币）dahua1981（注册ID：dahua1981）——沙发langyabeilei（注册ID：langyabeilei）——9楼shudawang（注册ID：v2893540）——10楼积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511161507_573698_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511161507_573699_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================银黄颗粒中的绿原酸的检测样品制备制备方法1. 对照品：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。2. 供试品：取装量差异项下的银黄颗粒，研细，取10 g，精密称定，置50 mL棕色量瓶中，加50%甲醇50 mL，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30分钟，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件 色谱柱Leapsil C18 100 x 4.6 mm，2.7 μm (Cat#：86002)流动相A：乙腈 B： 0.4%磷酸溶液 梯度流速1 mL/min柱温30 ℃检测器UV 327 nm 进样量10 μL 色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511160946_573639_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子分离度 1 10.562 1087809173359 54008.959 1.002 --*药典要求理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511160948_573642_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 7.501 1806148 153782 8614.389 0.742 -- 2 10.445 3727483 458651 32615.111 0.923 10.614 3 11.355 2055645 283373 46607.279 0.943 4.121 4 20.011 751117 119505 185425.796 1.042 [align=

药物名称：银黄颗粒。货号：86002/99503.今日抽奖结果：[align=center][img=,690,305]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911191642063188_2181_708_3.png!w690x305.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,302]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911191642077599_6361_708_3.png!w690x302.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,322]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911191642087632_8761_708_3.png!w690x322.jpg[/img][/align][align=center]=================================[color=#ff0000]活动规格[/color]====================================[/align][align=left][color=#ff0000]【活动时间】：每个工作日10:00-15:00【活动内容】：根据迪马产品资料：《药物检测应用文集》，每日会出一个化药或中药名称标题，版友根据标题找出相应迪马产品，将从回答正确者中利用抽奖软件抽取以下奖项。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]【活动奖励】：一等奖：3个钻石币（2人），二等奖：2个钻石币（3人），三等奖：1个钻石币（5个人）。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]【注意事项】：一定要在迪马产品资料《药物检测应用文集》中找出相应迪马产品。[/color][/align]

药物名称：银黄颗粒。货号：99503,86002.今日抽奖结果：[align=center][img=,690,277]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911080956424819_2938_708_3.png!w690x277.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,303]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911080956440609_8831_708_3.png!w690x303.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,313]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911080956460809_3682_708_3.png!w690x313.jpg[/img][/align][align=center]=================================[color=#ff0000]活动规格[/color]====================================[/align][align=left][color=#ff0000]【活动时间】：每个工作日10:00-15:00【活动内容】：根据迪马产品资料：《药物检测应用文集》，每日会出一个化药或中药名称标题，版友根据标题找出相应迪马产品，将从回答正确者中利用抽奖软件抽取以下奖项。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]【活动奖励】：一等奖：3个钻石币（2人），二等奖：2个钻石币（3人），三等奖：1个钻石币（5个人）。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]【注意事项】：一定要在迪马产品资料《药物检测应用文集》中找出相应迪马产品。[/color][/align]

问题：银黄颗粒中的黄芩苷的检测：用到了迪马哪几款色谱柱？答案：Platisil ODS，Diamonsil C18、Leapsil C18获奖名单：zengzhengce163（ID：zengzhengce163）翠湖园（ID：hhx050）梧桐（ID：mengzhou）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603251742_588287_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603251741_588286_708_3.jpg【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：抽奖软件，当天随机抽取3个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午3：00），每人奖励2个钻石币积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。银黄颗粒中的黄芩苷的检测样品制备 制备方法1. 对照品：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。2. 供试品：取装量差异项下的本品，研细，取适量（相当于金银花提取物33.3 mg），精密称定，置50 mL棕色量瓶中，加50%甲醇40 mL，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30分钟，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液3 mL，置10 mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件 色谱柱Platisil ODS 250 x 4.6 mm，5 μm (Cat#：99503)流动相甲醇：水：磷酸=50：50：0.2 流速1 mL/min柱温30 ℃检测器UV 274 nm 进样量10 μL 色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603251028_588172_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 14.437 1794249 90729 12097.640 0.970 -- *药典要求理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500供试品 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 14.437 1794249 90729 12097.640 0.970 -- *药典要求理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603251029_588174_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 14.330 10524368 535290 12024.531 0.970 -- *药典要求理论数按黄芩苷峰计算应不低于2500本品种同时使用了Diamonsil C18、Leapsil C18两款色谱柱，在药典规定条件下进行黄芩苷的检测，均满足药典要求。

根据《中华人民共和国药品管理法》，《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》，2015年版）经第十届药典委员会执委会全体会议审议通过，现予发布，自2015年12月1日起实施。　　迪马科技严格按照2015版《中国药典》公示的“银黄口服液中的绿原酸的检测”方法，率先进行了此项目的检测。　　该方法使用Leapsil C18、Diamonsil C18、Platisil ODS三款色谱柱，在同等条件下进行银黄口服液中的绿原酸的检测，均可以达到药典要求。下面以Leapsil C18检测方案为例，大家快来分享吧！商品名称：银黄口服液组成：金银花提取物，黄芩提取物。功能主治：清热解毒，消炎。样品前处理：对照品：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1 mL含40μg的溶液，即得。 供试品溶液：取装量差异项下的银黄颗粒，研细，取10 g，精密称定，置50 mL棕色量瓶中，加50％甲醇50 mL，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30分钟，放冷，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。色谱条件：色谱柱： Leapsil C18 100*4.6 mm，2.7 μm (Cat#：86002) 流动相： A：乙腈 B： 0.4％磷酸溶液 流速： 1 mL/min 柱温： 30 ℃ 检测器： UV 327 nm 进样量： 10 μLhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604051527_589041_2452211_3.png2015药典要求理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000，而Leapsil C18检测的理论塔板数为54008.959，远远高出药典要求。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604051527_589042_2452211_3.png2015药典要求理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000，而Leapsil C18检测的理论塔板数为51183.057，远远高出药典要求。

问题：银黄口服液中的绿原酸的检测对照品分析中绿原酸的理论塔板数是多少？答案：54008.959【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：抽奖软件，当天随机抽取3个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午3：00），每人奖励2个钻石币中奖名单：莫名其妙(注册ID：moyueqiu)捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）大川之子,纵横四海(注册ID：chuangu120) http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603291519_588535_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603291519_588536_1610895_3.png 积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================银黄口服液中的绿原酸的检测样品制备制备方法1. 对照品：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。2. 供试品：精密量取银黄口服液1 mL，置50 mL棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件色谱柱Leapsil C18 100 x 4.6 mm，2.7 μm (Cat#：86002)流动相A：乙腈 B： 0.4%磷酸溶液 梯度流速1 mL/min柱温30 ℃检测器UV 327 nm 进样量10 μL 色谱图对照品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667769_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 10.562 1087809 173359 54008.959 1.002 -- *药典要求理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016032910081422_01_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 7.573 1251455 176279 22456.189 0.961 -- 2 10.512 1518511 233095 51183.057 0.974 15.154 3 11.407 1150311 192094 68290.122 0.994 4.962 4 19.980 405526 63980

摘要： 目的 建立茵栀黄颗粒中栀子苷和绿原酸的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱：Kromasil C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈-0.1%甲酸（10：90）；流速1.0ml/min；柱温：35℃；检测波长：238nm、325nm。结果：对茵栀黄颗粒中栀子苷和绿原酸进行含量测定。 栀子苷在10.43～52.15μg范围内呈线性关系（r=0.9999 ,n=6），线性方程为y=123721821.7x-6951.8(r=0.9999)。平均加样回收率为97.21% RSD为1.62% （n=6） 绿原酸在10.74～53.70μg范围内呈线性关系（r=0.9999 ,n=6），线性方程为y=29447356x-25436(r=0.9999)。平均加样回收率为96.61% RSD为1.35% （n=6）结论 该方法操作简便，结果可靠，可用于茵栀黄颗粒中栀子苷和绿原酸的含量测定。 清茵栀黄颗粒，清热解毒，利湿退黄。有退黄疸和降低谷丙转氨酶的作用。用于湿热毒邪内蕴所致急性、慢性肝炎和重症肝炎（I型）。也可用于其他型重症肝炎的综合治疗。由陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、金银花提取物组成。为了进一步控制药品质量，我们对其中的进行了栀子苷和绿原酸含量测定，以期为后续进一步研究奠定基础！关键词：HPLC；DAD；茵栀黄颗粒；栀子苷 ；绿原酸1 仪器与试药1.1 仪器 岛津LC-20AT高效液相色谱仪，SPD-M20A检测器， LCsolution色谱工作站， Metteler AB265S（0.01mg）；Sartorius BS124S（0.1mg）)，必能信超声波清洗器(必能信超声有限公司)1.2 试药 绿原酸对照品（批号110753-201314）、栀子苷对照品（批号：110749-201115），均购自中国食品药品检定研究院；乙腈(色谱纯)；其它试剂均为国产分析纯，蒸馏水自制。2 实验方法与结果2.1 色谱条件与图谱 色谱柱: Kromasil C18柱（4.6mmx250mm，5um）； 检测波长：238nm；325nm 流速：1.0ml.min-1； 流动相：乙腈-0.1%甲酸（10：90）； 柱温：35℃。2.2 溶液制备2.2.1对照品溶液 取栀子苷和绿原酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 分别含0.1043mg和0.1074mg 的混合溶液，即得。2.2.2供试品溶液 取本品，研细，取约0.5g，精密称定置50ml量瓶中，精密加入甲醇40ml,称定重量，超声处理30min ,再称定重量，用甲醇补足减失的重量，定容至50ml,摇匀，滤过，即得。2.3 线性关系考察 精密量取各对照品溶液，制得5个系列不同浓度的对照品溶液，各取10微升依次进样，按上述色谱条件测定峰面积，以对照品峰面积Y为纵坐标，浓度X(mg·mL )为横坐标，绘制标准曲线，结果栀子苷在10.43～52.15μg范围内呈线性关系（r=0.9999 ,n=6），线性方程为y=123721821.7x-6951.8(r=0.9999)。绿原酸在10.74～53.70μg范围内呈线性关系（r=0.9999 ,n=6），线性方程为y=58134683.4x-7988.3(r=0.9999) http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/10/201510020006_569010_1839779_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015100200003568_01_1839779_3.png2.4精密度试验 精密吸取同一供试品溶液，重复进样6次，计算栀子苷和绿原酸对照品 峰面积的RSD分别为0.4％ 和1．4％ 。2.5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，分别于0，2，4，8，16，24 h测定，结果表明：栀子苷和绿原酸对照品在24 h内稳定，RSD分别为1．1％ 和1.5％ 。2.6 重复性实验 取同一批次的茵栀黄颗粒平行6份，制成供试品溶液，在上述色谱条件下分别进行HPLC分析，计算栀子苷和绿原酸对照品峰面积的RSD分别为1.2％和1.4％ 。2.7 回收试验 取同一批茵栀黄颗粒，约取0.25g，共计6份，精密称定，按上述色谱条件进样测定，用回归方程计算回收率。2.8 样品含量测定 取3个批号的茵栀黄颗粒，配制成供试品溶液，在上述色谱条件下进行测定，栀子苷和绿原酸对照品的含量，结果见表。样品编号栀子苷（mg/g)20150729 2.54201410032.61201502162.65样品编号绿原酸（mg/g)20150729 1.04201410031.16201502161.12http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015100111035245_01_1839779_3.bmp 图1 茵栀黄颗粒的HPLC图谱（238nm)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015100111125995_01_1839779_3.bmp 图2 栀子苷的HPLC图谱（238nm)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015100111105517_01_1839779_3.png 图3 茵栀黄颗粒的HPLC图谱（325nm)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015100111150072_01_1839779_3.bmp 图4 绿原酸的HPLC图谱（325

药物名称：银黄胶囊。货号：86002,99503.今日抽奖结果：[align=center][img=,690,315]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912051711185210_5620_708_3.png!w690x315.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,315]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912051711198771_9185_708_3.png!w690x315.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,322]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912051711198508_5207_708_3.png!w690x322.jpg[/img][/align][align=center]=================================[color=#ff0000]活动规格[/color]====================================[/align][align=left][color=#ff0000]【活动时间】：每个工作日10:00-15:00【活动内容】：根据迪马产品资料：《药物检测应用文集》，每日会出一个化药或中药名称标题，版友根据标题找出相应迪马产品，将从回答正确者中利用抽奖软件抽取以下奖项。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]【活动奖励】：一等奖：3个钻石币（2人），二等奖：2个钻石币（3人），三等奖：1个钻石币（5个人）。[/color][/align][align=left][color=#ff0000]【注意事项】：一定要在迪马产品资料《药物检测应用文集》中找出相应迪马产品。[/color][/align]

问题：2015药典银黄口服液中的黄芩苷的检测要求理论塔板数是？答案：【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：吕梁山（ID：shih20j07）langyabeilei（注册ID：langyabeilei）999youran（ID：999youran）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512031626_576208_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512031626_576209_1610895_3.jpg积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================银黄口服液中的黄芩苷的检测样品制备 制备方法1. 对照品：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。2. 供试品：精密量取本品1 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取3 mL，置25 mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分析条件色谱柱Platisil ODS 250 x 4.6 mm，5 μm (Cat#：99503)流动相甲醇：水：磷酸=50：50：0.2 流速1 mL/min柱温30 ℃检测器UV 274 nm 进样量10 μL 色谱图对照品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512031003_576131_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 14.437 1794249 90729 12097.640 0.970 -- *药典要求理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512031003_576132_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 14.373 1886953 90922 11499.957 0.944 -- *药典要求理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500本品种同时使用了Diamonsil C18、Leapsil C18两款色谱柱，在药典规定条件下进行黄芩苷的检测，均满足药典要求。

今天在药店见到好多小儿氨酚黄那敏颗粒（检测标准见40楼），包装精美图案精致，各个厂家对包装上是下了不少功夫了？土豆想：一个品种这么多药厂生产，大家都符合药典规定，质量上无法分出高低，只好在别的方面一较高下了。最近搜集好妹妹上瘾了，看到不同的小儿氨酚黄那敏颗粒我就拍下来，也向各位征集图片了，凡是能提供和我这不重复的小儿氨酚黄那敏颗粒图片的，一张图加10分，十分啊！！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/08/201108251407_312180_1645752_3.jpg好可爱的小宝宝啊，是不是？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/08/201108251407_312182_1645752_3.jpg这是个小鸡还是小龙人的卡通图案呢？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/08/201108251408_312183_1645752_3.jpg宝宝看到这么可爱的图案，一定减少了吃药的抗拒性了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/08/201108251409_312184_1645752_3.jpg这个卡通好像不太可爱了http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/08/201108251410_312186_1645752_3.jpg佩夫人登场-----

作者：王朋义; 张海鸣; 王成芳; 曹杰; 杜树山;（内蒙古伊泰药业有限责任公司; 北京师范大学资源学院教育部资源药物工程研究中心;）摘要：目的建立艾芩止咳颗粒中盐酸麻黄碱的高效液相含量测定方法。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.025 mol/L磷酸溶液(10∶90)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为210 nm,柱温30℃。结果盐酸麻黄碱含量测定的线性范围为0.13～0.77μg(r=0.99992),精密度试验RSD=0.11%。平均加样回收率为97.87%,RSD=1.68%。结论本方法快速、简便、准确、重复性较好,结果可靠,可为艾芩止咳颗粒的质量评价提供有效手段。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061422_381882_1606903_3.jpg

作者：黄妙婵(东莞市人民医院 药剂科, 广东 东莞 523018)摘要: 目的建立柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定方法。方法采用迪马钻石C18(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,以甲醇-0.4%磷酸(55∶45)为流动相,检测波长为280nm。结果黄芩苷在0.131μg～1.309μg范围内呈良好的线性关系,r=1.000,平均加样回收率为100.95%,相对标准偏差值(RSD)=1.38%。结论本法操作简便,结果准确、可靠、重现性好,可用于柴黄颗粒的质量控制。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207161426_377871_1606903_3.jpg

最近实验室做了一红枣浓缩汁的饮料，用pp瓶包装，106℃杀15min，放置一周后发现有一瓶里面有黄色颗粒，但测得饮料的ph为4.0、固形物为10.0，与正常饮料数据一样，请问这种黄色颗粒是什么？还有就是什么原因产生的，谢谢。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406240846_502836_2433088_3.jpg

【作者】：雷 鹏 ，李 媛，李新中，黄 义【摘要】：目的 建立 Q7W- 法同时测定四物汤中没食子酸、D E 羟甲基糠醛含量的方法，并比较四物汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂中没食子酸、D E 羟甲基糠醛的含量。方法 1(&8*+0(, -G# 色谱柱 H !B " 88 X ;D 88，D !8J ；流动相：甲醇 E

【作者】 熊胜元； 李洪刚； 李洪斌；【机构】 重庆市涪陵区药品检验所； 重庆市涪陵区药品检验所 重庆涪陵408000； 重庆涪陵408000； 重庆涪陵408000；【摘要】 目的建立测定银翘解毒颗粒中连翘苷的高效液相色谱分析方法。方法以DiamonsilC18柱(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水(25∶75)为流动相,检测波长为277nm,流速为1.0mL/min,柱温为25℃。结果样品中连翘苷得到了很好分离。连翘苷进样量在0.2～2.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=558.59X-1.683,r=0.9997,回收率为98.77%,RSD为0.64%。结论反相高效液相色谱法简便、快速、灵敏、准确,重现性好,可用于银翘解毒颗粒中连翘苷的含量测定和质量控制。 更多还原http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271618_386480_2379123_3.jpg

问题：鼻渊通窍颗粒中麻黄碱的检测：盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的分离度是多少呢？答案：2.362幸运奖获得者：吕梁山（ID：shih20j07）dahua1981（ID：dahua1981）梧桐(ID：mengzhou)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511251525_575036_1987954_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511251525_575037_1987954_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511251526_575038_1987954_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511251526_575039_1987954_3.jpg【活动奖励】幸运奖（2钻石币）：抽奖软件，当天随机抽取3个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午3：00），每人奖励2个钻石币积分奖励：所有回答正确的版友奖励10个积分（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。鼻渊通窍颗粒中麻黄碱的检测样品制备 制备方法对照品：取盐酸麻黄碱对照品、盐酸伪麻黄碱对照品适量，精密称定，加水制成每1 mL含盐酸麻黄碱15 μg、盐酸伪麻黄碱5 μg的混合溶液，即得。 分析条件 色谱柱Diamonsil C18 150 x 4.6 mm，5 μm (Cat#：99901)流动相乙腈：0.2%磷酸溶液：三乙胺=3.8：96：0.2流速1.0 mL/min柱温30 ℃检测器UV 210 nm进样量20 μL色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511251003_574998_1987954_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 10.792 447325 24164 7959.165 0.957 -- 2 11.976 150547 7676 8532.069 0.948 2.362 *药典要求理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000，盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的分离度应符合要求。本品种同时使用了Diamonsil C18(2)色谱柱，在药典规定条件下进行麻黄碱的检测，满足药典要求。