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荧光色素

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  • 活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例
    活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)技术与荧光(fluorescence)技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,今天,生物发光标记物可以标记到任何一种基因上,使对基因功能的全面细致研究成为现实。而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记,利用荧光蛋白在外源光源或是内源发光照射下被激发产生的荧光作为检测信号。研究人员能够利用一套非常灵敏的光学检测仪器直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。 该技术可被广泛应用于标记细胞或基因的示踪及检测;基因治疗在活体动物体内直接的观察和检测;基因组、蛋白组学、药学及生物技术在活体动物内的研究;药物及化学合成药物的药物代谢及毒理学监测;食品菌落生长成像;皮肤医学中皮肤疾病的体内成像;法医鉴定;微孔板成像,例如:免疫分析、报告基因、基因探针和嗜菌作用分析等;荧光团的体内成像,例如:Alzheimer疾病研究中结合嗪的β-淀粉沉淀物分析;转基因植物中通过报告基因对生理周期节奏的研究;凝胶成像分析等等。 但在研究过程中,研究者们必须事先用基因技术进行荧光素酶基因标记,或者某种荧光报告基团标记。目前活体光学成像系统的知名制造商,如Berthold、GE、Xenogen、Photometrics、Carestream Health等,不仅为客户提供先进的仪器,也提供具体实验所需的整套解决方案,包括试剂、实验手册、特殊用途的质粒、细胞株、转基因动物、细胞处理和动物处理设施等配套技术支持。出色的多任务处理能力,人性化的整体设计,便捷精确的操作系统,使实验室影像分析领域进入了一个全新的时代。 下面以研究干细胞活体移植后的存活率为例,简介一两种内源性荧光色素标记的实验方法,供专业人士参考。 用荧光色素DiD标记 间充质干细胞 1. 先用胰蛋白酶消化待标记材料,使之成为一定密度的悬浮液; 2. 从细胞培养箱中取出间充质干细胞,吸取含原有培养基的细胞悬浮液进行标记; 3. 用10 ml Mg/Ca-free PBS (不含钙镁离子的磷酸缓冲液)清洗细胞,吸去PBS, 钙镁离子会影响胰蛋白酶的活性,必须小心; 4. 加入预热的0.05% 胰蛋白酶液,加液量以T75型瓶为例,每瓶加5ml, 确保瓶的表面被完全覆盖; 5. 在细胞培养箱中37° C 孵育约 5 分钟; 6. 然后在显微镜下确认细胞已经完全分散,如果有细胞贴壁情况,轻拍若干次或延长孵育时间直至酶解消化完全成功; 7. 加入等量含 10% FCS的培养基中和胰蛋白酶; 8. 用移液器反复吸取几次确保细胞均匀分散; 9. 然后移取细胞悬浮液至15ml 已灭菌的有盖聚丙烯离心管中; 10. 400 RCF离心5 分钟; 11. 小心移去上清液,不要扰动细胞; 12. 将细胞重新悬浮于DMEM 并进行计数; 13. 需要待标记细胞在无血清DMEM溶液中的密度应为1x106 /ml ; 14. 每ml细胞悬浮液加入5 ?L DiD 染色液; 15. 用移液器将染色液与细胞悬浮液混合均匀; 16. 在6孔低附着性细胞板上37 °C 孵育20分钟; 17. 孵育完全后移取细胞悬浮液至15ml 已灭菌的有盖聚丙烯离心管中; 18. 400 RCF离心5 分钟; 19. 小心移去染色液,不要扰动细胞; 20. 用PBS清洗细胞,用移液器反复吸取几次确保细胞均匀分散; 21. 重复洗三次; 22. 细胞重新计数并用台盼蓝染色法检测细胞活性; 23. 可以进行活细胞成像了! 用荧光色素ICG标记 人胚胎干细胞 1. 必须先准备好吲哚菁绿溶液(血容量、心输出量、肝功能测定剂)作为对照品 ,然后使之与转染试剂鱼精蛋白(抗凝血作用)混合; 2. 测出1ml吲哚菁绿溶液的活力,然后在100 ?L DMSO中溶解ICG; 3. 向混合物中加入 400 ?L Dulbecco的改良Eagles 培养基 (DMEM + 10% 胎牛血清), 震荡均匀,吲哚菁绿溶液终浓度为2mg/ml; 4. 加入转染试剂鱼精蛋白,鱼精蛋白作为对照品的载体,使之能够有效进入细胞; 5. 在300 ?L ICG 和 300 ?L 无血清Dulbecco改良 Eagles 培养基中混入 5 ?L 硫酸鱼精蛋白溶液, 使之终浓度为 10mg/ml,; 6. 震荡5分钟使之形成复合物,标记溶液制备完毕; 7. 从 hESC 10mm Petri 培养皿中移去原有培养基; 8. 加入5ml预热的 DMEM; 9. 加入制备好的鱼精蛋白/ICG 溶液, 37 °C下孵育1h; 10. 孵育完全后移去染色液; 11. 用5 ml PBS漂洗培养皿以清除染色液; 12. 移去 PBS 再加入 5ml 0.25 % 胰蛋白酶液,37 °C下孵育5分钟使之酶解,适当震摇培养皿效果会更好; 13. 用移液器反复吸取几次确保细胞均匀分散; 14. 加入等量含 10% KSR的培养基中和胰蛋白酶; 15. 然后移取细胞悬浮液至15ml 已灭菌的有盖聚丙烯离心管中,400 RCF离心5 分钟; 16. 在全培养基中悬浮细胞; 17. 如果还有细胞团块,可以移去原有培养基用10ml预热的全ESC培养基重新悬浮细胞,重复酶解再离心; 18. 在这一点上,鼠源饲喂细胞需从hESCs中分离; 19. 然后将细胞悬浮液移至涂布琼脂的10 cm 培养皿中; 20. 37 °C 孵育 45 分钟,注意不要晃动培养皿,如此鼠源饲喂细胞会贴壁而干细胞保持悬浮; 21. 从Petri 培养皿中移出已标记的单细胞人胚胎干细胞悬浮液; 22. 细胞重新计数并用台盼蓝染色法检测细胞活性; 23. 可进行活细胞成像了!
  • 北京工商局检测发现“发光猪肉”因含“荧光假单胞菌”
    工商局称与猪肉安全无关,未检出荧光增白物质 专家称加热数秒能杀死细菌   ■ “市场买回猪肉 半夜发出蓝光”追踪   猪肉为何会在黑夜里发出荧荧蓝光?昨天下午,北京市工商局对外揭晓“谜底”:通过抽检发现,这是一种叫荧光假单胞菌的细菌在“作祟”,与猪肉安全无关。   专家介绍称,该细菌并不可怕,对正常人群不具有致病性。   抽检未发现荧光增白物   近期,有几位消费者反映在建欣苑菜市场、八里桥市场等处购买的猪肉,夜晚会发出荧光,担心吃了可能对身体有害。而这些肉都是从正规屠宰场批发,且肉身上有检验检疫章(本报12月12日曾报道)。   近日,北京工商部门组织了抽检,由北京市食品安全监控中心对送检样本进行荧光增白物质和荧光假单胞菌检测,结果显示,送检样本均未检出荧光增白物质,不过都检出了荧光假单胞菌。   猪肉煮熟可杀灭该细菌   “荧光假单胞菌能产生黄绿色荧光色素而使猪肉发光”,中国农业大学微生物系教授王贺祥介绍,这种细菌在肉及肉制品、禽蛋类等蛋白质丰富的食品中,易生长繁殖。   王贺祥说,荧光假单胞菌属于革兰氏阴性嗜冷菌,广泛存在于土壤、水、植物、动物活动环境中,也是存在于人类肠道的正常细菌,对正常人群不具有致病性,不必对其恐慌。   如何杀灭猪肉上的细菌呢?王贺祥介绍,该菌在42℃就会停止生长,超过70℃,只需数秒即可杀死。   市工商局也表示,消费者购买到的“发光猪肉”,可能在屠宰、储存、运输、销售等过程中污染了荧光假单胞菌,只要猪肉本身没有腐败变质,可以通过焯、炒、煮等方式将猪肉熟制后食用,不会对人体健康产生影响。
  • 索尼以蓝光光盘技术开发两种细胞分析仪
    索尼意欲扩大其医疗业务,在最近接连发布了两款细胞分析仪。与其他公司的同类产品不同的是,索尼充分利用了该公司擅长的蓝光技术,实现了产品的差异化。   索尼新开发的是完全以光学测量手段对细胞的种类及大小实施分析的、名为流式细胞仪(Flow Cytometer)的设备。流式细胞分析术是一种基于细胞的尺寸、数量、外表层以及内部元素(如结构、功能和生物指标等)、利用光学测量对各种不同的细胞进行分析和分选的技术。该技术在血液学、免疫学和肿瘤学领域以及干细胞(如诱导性多能干细胞和胚胎干细胞)和再生医学等前沿研究领域发挥着重要的作用。鉴于在上述和其他临床领域的研究持续扩大,流式细胞分析术将有望得以进一步传播。   流式细胞仪通过向高速流过微细流路的细胞照射激光,检测细胞发出的散射光及荧光来掌握细胞的状态。其原理与利用激光读取高速旋转的光盘上的微细凹坑的光盘检测原理相似,所以索尼认为可在这一领域应用自已的技术资产。2010年,索尼收购了总部位于美国的从事细胞分析仪业务送往iCyt Mission Technology公司,开始涉足流式细胞术业务,开发融合两公司技术的新一代机型,Cell Sorter SH800是索尼的蓝光光盘技术与iCyt的细胞分选技术相结合的首个商业化产品。   将于2012年秋季开始受理订单的“Cell Sorter SH800”通过运用索尼的激光聚集技术及小型机构设计技术,实现了体积仅为以往产品约1/3的小型化(宽55mm x深55cm x高72cm),而且还为实现低价格化及作业自动化等进行了改进,相比现有的同类器材,SH800在价格上更具竞争力,它拥有实现基本细胞分选功能所需使用的最多四束激光和六色荧光的检测功能,具备完全自动化的激光束光轴调节和细胞分选电子计时功能,无需专业操作者进行复杂的设置和调整。索尼宣称即使没有专职操作人员的研究室也可轻松导入。采用一次性塑料芯片,而非原来那种又贵又难清洗的石英固定式芯片。   与使用价格昂贵的、固定的石英零部件且每次使用完毕都需进行清洗的常规细胞分选仪不同,SH800的测量通道中采用一种新研发的塑料细胞分选芯片。该芯片的生产基于索尼在光盘领域研发的精密加工技术。SH800还可以让操作者根据待测细胞的类型及大小而选择不同喷嘴直径、易于更换和安装的芯片。由于流过细胞的流路部分芯片采用便宜的一次性塑料产品,不但成本降低,而且使用更加方便,原来的产品大多使用昂贵的石英产品,而且使用后的清洗也很麻烦。   这一塑料芯片是应用了在蓝光光盘等领域培育出的微细加工技术开发而成的。据索尼介绍,其制造工序与采用层构造的光盘极为相似,比如将1mm厚的成型基板精密地贴合起来,等等。索尼医疗事业部生命科学事业部门生物科学事业室高级产品主管、部长篠田昌孝介绍说,实际上,该芯片“就是利用与蓝光光盘相同的设备制作的”。   除Cell Sorter SH800以外,索尼开发的另一款细胞仪是可分离众多荧光波形的细胞分析仪,无需原来必需的修正作业,提高了分析精度、再现性及处理速度等,是最高档机型。索尼医疗事业部生命科学事业部门生物科学事业室高级产品主管古木基裕表示,该产品“有望在不远的将来实现实用化”。   以前的流式细胞仪为了检测众多细胞发出的荧光等,需要使用满足数量要求的光学滤波器、检测器及荧光色素,而且还需要对混合在一起的荧光色素信息进行修正,将各个色素分离出来。此次索尼通过将新开发的棱镜与光电子倍增管组合使用,实现了荧光色素信息的自动分离。其原理是,用棱镜按照各色对混合在一起的荧光信息进行分离,然后通过光电子倍增管高精度测定各荧光色素的波形形状。   在使用这些仪器的再生医疗领域,随着技术的进步,研究活动日趋活跃,而且研究人员的数量也在迅猛增加。因此,索尼打算乘着这一势头,向再生医疗领域大力推广其产品及品牌。
  • 免疫荧光显微成像详解(上)——免疫荧光原理、步骤
    前言免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,它是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。直接法将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。间接法如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应,使之形成抗体—抗原—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为第一抗体,其它步骤的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,同于血清球蛋白有种的特异性,如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应,因此,制备标记抗体适用于任何抗原的诊断。一、实验步骤免疫荧光实验的主要步骤包括 样片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育、封片及荧光检测等。1、 样品准备对于单层生长细胞,在传代培养时,将细胞接种到预先放置有处理过(70%乙醇中浸泡)的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片即可,操作过程要小心,防止细胞脱片。对于悬浮生长细胞,有两种方式,一种是取对数生长细胞,制备细胞片或直接制备细胞涂片,把细胞片浸入封闭液中固定,封闭后滴加一抗和二抗孵育;另一种是先在悬浮液中进行固定和染色,离心洗脱后,用移液管移至盒式玻片进行后续抗体孵育。对于冰冻切片制备,建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散。组织一定要冷冻适度,切片时选用干净锋利的刀片,防止裂片和脱片。对于石蜡切片的制备,要先进行脱蜡和抗原修复的处理。2、固定做好切片并风干后立即用合适的固定液(固定液包括有机溶剂和交联剂,其选择取决于抗原的性质及所用抗体的特性)进行固定,尤其要较长时间保存的白片,一定要及时固定和适当保存。固定时间则取决于固定组织切片的大小和类型,对大多数组织,18-24h即可,而细胞的固定时间较短。3、通透针对胞内抗原,使用0.5% Triton X-100或丙酮等通透剂进行通透,这一步的目的是使抗体进入胞内。 4、封闭为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合,需要在一抗孵育前先用封闭液(一般包括与二抗同一来源的血清、BSA或者羊血清)封闭,减弱背景着色。封闭开始后,要注意样品的保湿,避免样品干燥,否则极易产生较高的背景。5、一抗孵育一抗孵育温度一般分为:4℃、室温、37℃,其中4℃效果更佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37℃孵育1-2h,4℃过夜(从冰箱拿出后37℃复温45min)。具体条件还要根据样品、稀释液等条件进行摸索尝试。6、荧光二抗孵育荧光二抗孵育一般在室温或37℃孵育30min-1h,该过程必须在避光环境下进行,防止荧光淬灭。荧光素标记的二抗随着保存时间的延长,可能会有大量的游离荧光素残留,需要注意配制时采用小包装并进行适当的离心。7、复染一般采用DAPI进行复染,目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位。8、封片为了长期保存,我们需要对样本进行封片,用吸水纸吸干爬片上的液体,一般用缓冲甘油等或专门的抗荧光淬灭的封片液。9、 荧光观察有条件的话最好立即用荧光显微镜观察拍照,若不能及时拍照,也要做好封片和封固,保持避光和湿度。荧光显微镜的成像能力对最终的结果也会造成很大的影响,好的荧光显微镜能够最大限度地收集荧光信号,并呈现高分辨率的图片,使细节更清楚,更易得到一张效果极佳的结果图。注意:切片清洗:为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色,所以适当地加强清洗(延长时间和增多次数)尤为重要,一般在一抗孵育前的清洗是3min*3次,而一抗孵育后的清洗均为5次*5min。(1)单独冲洗,防止交叉反应造成污染;(2)温柔冲洗,防止切片的脱落。可使用浸洗方式;(3)冲洗的时间要足够,才能彻底洗去结合的物质;(4)PBS的PH和离子强度的使用和要求(建议PH在7.4-7.6,浓度是0.01M;中性及弱碱性条件有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利于分解)。根据上述步骤完成免疫荧光实验后,就需要进行荧光显微成像,得到我们想要的结果。选择一款操作简单、成像清晰、效果卓越的荧光显微镜进行观察拍照,才能轻松得到更为理想的结果图,达到事半功倍的效果。Echo Revolve正倒置一体荧光显微镜Echo Revolve正倒置一体荧光显微镜作为一款电动化、智能化的显微镜,具有以下优势:☑ 正倒置一体快速切换:切片、细胞观察随心切换,无惧任何耗材;☑ DHR数字降噪功能:极大地降低了背景噪音和荧光干扰,提高图像锐度,加深细节,得到分辨率更高的图片;☑ 强大的Z-Stacking功能:通过高精度电动化Z轴层扫来扩大景深,解决厚样本观察问题,提高图像分辨率;☑ 500MP单色相机:能够采集更多荧光信号,助力低荧光强度样本观察;☑ 多通道荧光自动拍摄叠加功能:可自动进行多通道成像的叠加,个性化选择查看/保存各通道的组合图像。
  • 日本研发彩色医疗电镜 助力癌症转移早期诊断
    据日本时事通讯社28日报道,日本九州产业大学当天在福冈市成立了医疗诊断技术研发中心,研发世界首台彩色电子显微镜。据悉,此种显微镜有助于癌症转移的早期诊断。   据研发人员介绍,使用现在的电子显微镜观测用莹光色素染过色的活性组织标本时,莹光色素一碰到电子就会被破坏,所以只能拍摄到黑白的影像,这不利于病理诊断。他们在2003年开发出一种遇到电子之后稳定性也很高的莹光色素。目前,他们正在进一步强化此种莹光色素的性能,准备研发出分辨率更高的彩色电子显微镜。   预计2018年彩色电子显微镜将正式投入使用。届时,使用这种显微镜将能对染色的癌细胞放大图像进行分析,并在早期诊断其转移的危险性。
  • 日本研究H5N1禽流感病毒快速检测法
    人民网11月8日讯 据日本共同社消息,日本东京都医学综合研究所等研究小组日前开发出一种针对强毒性H5N1型禽流感病毒的新型检测方法,检测灵敏度是以往方法的50倍以上。该装置仅为手掌大小。日本北海道大学和熊本大学也参与了该项研究。这一检测方式将有助于防治禽流感。   据悉,只需提取被检测者鼻腔和喉部的粘膜,将其滴在检测装置上,15分钟左右就可诊断出结果。研究小组对孕检和流感检测中已被使用的“免疫层析法”进行了改良。新型检测机器可使H5N1相关抗体与微量荧光色素相结合,并对该色素进行高灵敏度检测。   之前的方法只能检测出部分H5型病毒,研究小组此次开发出了新抗体。经确认,新检测方式可以检测出各类H5型病毒。
  • 央视一套报道:藻类光合-碳中和研究技术
    在央视综合频道播出的纪录片《共同的家园》第3集共利中,中国科学院植物研究所匡廷云院士带领的研究团队长期利用硅藻开展光合作用机理研究及人工模拟,以提高太阳光能的利用率,减轻对化石能源的依赖。“基于自然的解决方案,坚实可靠地”实现“双碳”目标。北京易科泰提供的ET-PSI多功能藻类培养与在线监测系统、FKM多光谱荧光动态显微成像系统在纪录片中闪亮登场。点击以下视频一饱眼福吧。ET-PSI多功能藻类培养与在线监测系统由大型平板式培养器(标配25L,可选配100L或定制其它容积大小)、控制系统及在线监测系统组成,集成光养生物反应器技术、叶绿素荧光监测技术、水体/藻类光合呼吸监测技术、营养盐在线监测技术等先进科学技术,可广泛应用于藻类生理生态学研究实验、水体富营养化模拟实验、海水酸化控制实验、水体光合呼吸监测控制实验、藻类利用与有效控制研究、藻类生物质能源研究实验,以及其它藻类生物工程、生态工程、环境工程等实验研究。FKM(FluorescenceKineticMicroscope)多光谱荧光动态显微成像系统是目前功能最为强大全面的植物显微荧光研究仪器,是基于FluorCam叶绿素荧光成像技术的显微成像定制系统。它由包含可扩展部件的增强显微镜、高分辨率CCD相机、激发光源组、光谱仪、控温模块以及相应的控制单元和专用的工作站与分析软件组成。它不仅可以进行微藻、单个细胞、单个叶绿体乃至基粒-基质类囊体片段进行Fv/Fm、Kautsky诱导效应、荧光淬灭、OJIP快速荧光响应曲线、QA再氧化等各种叶绿素荧光及MCF多光谱荧光(multicolorfluorescence)成像分析;还能通过激发光源组进行进行任意荧光激发和荧光释放波段的测量,从而进行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等荧光蛋白、荧光染料以及藻青蛋白、藻红蛋白、藻胆素等藻类特有荧光色素的成像分析;更可以利用光谱仪对各种荧光进行光谱分析,区分各发色团(例如PSI和PSII及各种捕光色素复合体等)并进行深入分析。真核与原核藻类的光合固碳达到地球上光合固碳总量的一半,对缓解大气中CO2的积累起着重要作用。利用微藻固碳是世界上最主要、最有效的固碳方式之一,并具备经济可行、环境友好和可持续性等无可比拟的优势。北京易科泰生态技术有限公司致力于先进光生物反应器和藻类光合生理无损检测技术的推广、研发与应用服务,曾推出“微藻生物固碳研究仪器推荐”专题,助力实现“双碳”目标。仪器名称功能常用参数/程序在微藻固碳研究中的作用AquaPen手持式藻类荧光测量仪快速测量叶绿素荧光参数Fv/Fm、NPQ、JIPtest、LightCurve快速评估固碳候选藻种在高浓度CO2下的光合活力和光能转化效率AP-kit藻类光合生理检测盒快速轻松获得叶绿素荧光参数和光合呼吸速率参数Fv/Fm、NPQ、JIPtest、LightCurve、光合放氧速率综合评估固碳候选藻种在高浓度CO2下的光化学转化效率及CO2同化率MC10008通道藻类培养与在线监测系统8通道的精确控光培养及在线生物量评估培养周期及环境参数设定;OD680&OD720提供精确可控的培养环境(光、温度、气体),在线评估微藻生物量浓度(比色法),筛选优质固碳藻种FMT150藻类培养与在线监测系统精确控光培养及多参数调控监测培养周期及环境参数设定;OD680&OD720;Fv/Fm、ΦPSII;pH、溶解氧(选配)、溶解CO2(选配)提供精确可控的培养环境(光、温度、气体,可选恒化及恒浊培养),在线评估微藻生物量浓度,对微藻的光合生理状态、培养液溶解CO2浓度进行在线监测ET-PSI多功能藻类培养与在线监测系统25L、100L及以上容积的规模化藻类培养,精确控光培养及多参数调控监测培养周期及环境参数设定;OD680&OD720;Fv/Fm、ΦPSII;pH、溶解氧(选配)、溶解CO2(选配)提供精确可控的培养环境(光、温度、气体,可选恒化及恒浊培养),在线评估微藻生物量浓度,对微藻的光合生理状态、培养液溶解CO2浓度进行在线监测,培养优质固碳藻种及工业应用FluorCam叶绿素荧光成像系统高通量测定微藻叶绿素荧光参数Fv/Fm、NPQ、φPSII、qP、Rfd、ETR、LC曲线等高通量筛选光合突变体;高通量筛选高光化学效率、低热耗散的高效固碳藻种AOM藻类荧光在线监测系统微藻叶绿素荧光在线监测Ft、Fv/Fm、OJIP、FixArea(与藻类浓度线性相关)在线评估微藻生长状况及浓度
  • 新材料可瞬间检测出目标基因
    日本名古屋大学的科研人员最新开发出一种基因检测用新材料,利用这种材料能在几秒钟内检测出极少量血液中的目标基因。   目前基因检测的常用方法是从血液中提取DNA,并对可能含目标基因的DNA片段进行复制,以找出目标基因。但DNA片段的复制需要几小时甚至几十个小时,并容易出现误差。   名古屋大学科研人员开发出的新材料由不到1平方毫米的玻璃基板和上面如枞树叶般密布的金属丝组成。只需让一滴血流经这种新材料,DNA链就会分解成碎片,其中含目标基因的片段会和金属丝所含溶液中特定的荧光色素发生反应,从而被检测到。   如果这项新技术能投入实际应用,那么细菌引起的食物中毒等都能当场检测出原因。另外,作为癌细胞标志物的多个DNA片段以及蛋白质都能在短时间内一次性检测出来。   这一成果发表在新一期网络杂志《科学报告》上。
  • 快检流感病毒装置有了新突破
    日本制成 快检流感病毒装置   环球短讯   新华社东京2月8日电 (记者蓝建中)日本东京都医学综合研究所的一个研究小组发表报告说,他们开发出一种简易检测装置,能在发病12小时内迅速诊断人体是否患流感,其灵敏度比现有同类装置高多倍。   据这份发表在新一期美国在线科学杂志《科学公共图书馆综合卷》的报告介绍,目前对流感进行简易诊断多数是利用鼻咽拭取液来检查是否含病毒。原有的检查元件是利用抗体来捕捉病毒,但这种检测方式须等病毒在人体内增殖24小时后才能测出。   研究小组说,新开发的方法是利用带有荧光色素的抗体来捕捉病毒,即使是少量病毒也能发现。研究小组通过对200名流感患者进行测试,确认新技术能在患者发病12小时内就以97%的准确率测出病毒,整个检测过程最长只需约15分钟。由于它能较快发现病毒,医护人员因而能对患者迅速开展治疗。   研究小组表示,他们将争取使这一成果在下个冬季达到实用水平。如果该装置更换抗体的话,还可用于诊断致死率很高的禽流感、登革热和埃博拉等病毒。
  • 岛津成像质谱显微镜应用专题丨视网膜药物分析
    高分辨率成像质谱应用于大鼠视网膜中氯喹的分布分析 在药物研发过程中,候选化合物的体内药代动力学分析是非常关键的步骤。该分析不仅可以掌握其药效药理,还可以得到和毒性评价有关的信息。通常,使用放射性自显影技术(Autoradiography: ARG)和荧光色素标记细胞的方法进行分析。但是,使用ARG的方法成本高,而且一方面这些方法无法区别原药和代谢物,另一方面标记物质的行为可能与未标记物存在差异。 因此,最近成像质谱分析法,即不进行标记即可对候选化合物进行检测的方法备受瞩目。质谱成像法除了能够在无标记的情况下对各种物质的分布进行分析,还能够使用同一切片同时分析原药及其代谢物,有望在今后的药物研发领域得到应用,取得新的突破。本文为您介绍使用成像质谱显微镜iMScope TRIO对氯喹给药后大鼠视网膜进行检测的示例。 1.大鼠视网膜中氯喹的高空间分辨率成像在本次分析中,对给予抗疟剂药物氯喹的大鼠视网膜进行分析。图1为氯喹的结构式。使用氯喹标准品进行分析,对基质及测定模式进行优化,表1为组织切片的分析条件。图1 氯喹的结构式 表1 分析条件 使用成像质谱显微镜iMScope TRIO进行高空间分辨率成像,发现在约10μm厚的视网膜色素上皮周围有氯喹的分布(图2和图3)。 图2 组织切片上的MS/MS质谱图图3 光学图像和MS/MS质谱图像 在测定氯喹时,如果使用成像质谱分析法常用的MS模式,因受到生物体衍生杂质带来的离子抑制、干扰的影响,无法得到清晰的MS图像(此处数据省略)。在本次分析中,通过iMScope TRIO的MS/MS模式进行测定,提高灵敏度,能够获得10μm的高空间分辨率下的MS/MS图像。 2.大鼠眼球中氯喹的高速成像在药代动力学研究过程中,为了阐明药物分子在细胞及器官水平的特征分布区域,分别需要在高空间分辨率及中等空间分辨率获得药物分子的分布信息。本实验使用MS/MS模式测定在中等分辨率(50μm)下测定大鼠眼球整体的氯喹分布情况,分析条件如表2所示。 表2 分析条件图4 组织切片上氯喹的MS/MS产物离子质谱图,激光直径50μm 虽然使用了更大的激光直径,有可能带来存在噪音高、离子抑制等问题,iMScope TRIO依然能够检测得到具有较高信噪比的氯喹特征碎片,并获得清晰的质谱图像。成像质谱实验的采集速度取决于目标检测区域中所包含的点数。iMScope TRIO能够独立更改激光直径及采集间隔等参数,从而能够轻松控制采集速度及图像尺寸,并且不会影响数据质量。 3.基质涂敷方式的比较在氯喹成像质谱分析中,比较了2种不同的MALDI基质涂敷方式。图5显示了有升华法获得的成像结果(基质升华方式的示意图如图6所示)。基质升华有iMLayer升华仪自动完成,而喷雾方式由手动完成。喷雾方式获得成像结果如图7所示。对比两种方式的检测结果,升华法获得了更加清晰尖锐的氯喹分布图像,而喷雾的结果则看起来会有一些扩散,如图7所示。前处理方式的优化依然取决于组织切片的特性以及所使用的基质类型。如示例中的结果,前处理步骤对最终成像结果的图像质量有显著的影响,不仅仅是切片制备的条件同时基质涂敷的过程也很重要。图5 升华法获得的氯喹分布质谱图像图7 喷雾法获得的氯喹分布质谱图像图6 基质升华方式示意图 4.在相同切片上进行MS和MS/MS成像分析成像质谱分析中,在同样位置只能采集一次数据。但是,使用iMScope TRIO可以调整激光直径及采集间隔,因此可以在采集点之间留下未采集区域,从而实现更多次的成像分析。图8显示了使用激光直径为5μm,采集间隔为10μm时,在同一采集区域内进行4次成像分析的方式。 图8 在同一测定区域进行1次MS分析及3次MS/MS分析的数据采集设置方式示例 文献题目《High spatial Resolution Imaging by iMScope TRIO -Imaging of Chloroquine Distribution in Rat Retina-》使用仪器岛津iMScope TRIO 声明1、本文不提供文献原文。2、所引用文献仅供读者研究和学习参考,不得用于其他营利性活动。
  • 单项奖金1000万元!世界顶尖科学家协会奖 “生命科学或医学奖” 揭晓
    9月12日,2024世界顶尖科学家协会奖"生命科学或医学奖"在沪揭晓,约翰斯霍普金斯大学医学院分子生物学与遗传学、神经科学和眼科学讲席教授,霍华德休斯医学研究所研究员杰瑞米内森斯(Jeremy Nathans)获奖,奖金1000万元。获奖理由为"表彰他在发现人类颜色视觉的基因、调控和可塑性,以及阐明导致失明的疾病机制方面作出的贡献"。2024顶科协奖"生命科学或医学奖"遴选委员会主席、2013年诺贝尔生理学或医学奖得主兰迪谢克曼对杰瑞米内森斯的工作进行了解读。杰瑞米内森斯发现了颜色视觉的分子基础。1983年,作为斯坦福大学医学院的一名新进研究生,内森斯就独自先后克隆出牛和人类的视蛋白基因,该基因负责颜色视觉。这项工作揭示了首个感觉受体的序列。随后,在20世纪80年代的杰出工作中,内森斯阐明了色盲的分子基础。他发现,在染色体上串联排布的红绿感光色素基因会导致异常重组,从而引起基因缺失。在他自己的课题组里,内森斯证明了三色视觉的分子基础,他绘制了视蛋白的氨基酸序列图谱,这些序列使每种蛋白质吸收特定的光谱。随后,他的课题组又发现了一种精巧的调控机制,通过这种机制,位于特定视锥细胞的某个染色体区域只能激活绿色或红色基因中的一个。当内森斯开始研究遗传性视网膜变性患者时,人们对此一无所知,包括任何形式的视网膜疾病的分子基础。内森斯和撒迪厄斯德里亚课题组的独立研究发现,视紫红质基因突变是视网膜色素变性的首个已知病因。在与詹姆斯卢普斯基合作中,内森斯确定了斯塔加特病的致病基因。斯塔加特病是最常见的早发遗传性黄斑变性。在一项令人震惊的小鼠遗传和行为研究中,内森斯及合作者有力证明了,接受基因工程改造后的小鼠在通常只能识别两种三原色的基础上,能获得三色视觉的能力(该基因工程将长波长视蛋白基因导入了小鼠的染色体)。这一惊人发现凸显了视觉系统具有非凡的可塑性,佐证就是小鼠大脑适应了可以识别三原色的能力。内森斯具备广泛的好奇心,在视觉科学领域博闻广识,对其历史了若指掌。此外,他的思想深度以及研究方法的创新力,都使他跻身于世界上最优秀的神经科学家之列。
  • 宁波材料所等在多色荧光高分子水凝胶构筑仿生皮肤研究中取得进展
    自然界中,许多生物体根据生存需要逐渐进化出独特的环境适应行为,例如变色龙、树蛙、章鱼等变色生物可以根据环境需要来自适应改变皮肤颜色和图案,以达到交流、伪装等目的。受此启发,科研工作者希望通过设计智能人工材料(特别是类生物组织的软、湿态高分子水凝胶材料)来复制生物体的环境刺激响应变色行为。仿生智能变色水凝胶新材料的发展有助于理解自然界的生物变色现象,并有望在传感检测、柔性显示、变色伪装皮肤、软体机器人等领域发挥应用价值。  与源于对外界光的吸收、反射或散射而产生的色素色或结构色不同,荧光色是一种发光色,色饱和度高,适用于夜晚、森林、海洋、河流等照明不足的环境,因此被认为是色素色和结构色的良好补充。然而,与能够在不同外界刺激环境中呈现丰富皮肤颜色变化的变色龙等生物相比,科研人员制备的多色荧光高分子水凝胶在外界刺激下的发光颜色变化范围仍较窄,难以利用单一水凝胶实现多重刺激响应的宽范围荧光颜色变化。  为此,中国科学院宁波材料技术与工程研究所智能高分子材料团队基于前期基础研究,提出了精确控制不同荧光团空间分布结构以实现高分子水凝胶荧光颜色有效调控的新策略。最近,宁波材料所研究人员和中科院过程工程研究所研究员周蕾团队合作,发展高分子水凝胶的分子结构设计,将聚集诱导发光的取代萘酰亚胺型蓝色荧光团和稀土配位型红、绿色荧光团分别引入同一水凝胶体系的不同高分子交联网络中(如图)。得益于这一创新材料结构设计,萘酰亚胺型蓝色荧光团和稀土配位型红、绿色荧光团的发光强度可以分别利用不同外界刺激进行独立且连续的调控,从而实现多重刺激(温度、pH、溶剂、离子、光等)响应的红、绿、黄、蓝、紫多色荧光变化。该工作显著拓宽了高分子水凝胶的荧光变色范围,有望应用于智能变色伪装皮肤、仿生智能软体机器人等重要领域。  该工作以Supramolecular Hydrogel with Orthogonally Responsive R/G/B Fluorophores Enables Multi-color Switchable Biomimetic Soft Skins为题,发表在Advanced Functional Materials上。研究工作得到国家自然科学基金、中科院前沿科学重点研究计划项目、国家重点研发计划、中科院青年创新促进会和王宽诚教育基金等的支持。
  • 创新融合,精准诊断 BCEIA 2021标记免疫分析分会圆满举办
    仪器信息网讯 第十九届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA2021)于2021年9月27-29日在北京中国国际展览中心(天竺新馆)盛大召开。作为BCEIA学术报告会的重要组成部分,9月29日,由中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会主办的BCEIA 2021学术报告会标记免疫分析分会在学术会议区E301举行,会议为期一天,旨在推动标记免疫分析领域的发展,为国内外同行提供充分交流的平台,吸引逾百位学者与会。会议现场本次会议主席,也是中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会委员颜光涛研究员为会议致辞。颜光涛研究员本次会议主题为“创新融合,精准诊断”,围绕“精准诊断新检测技术、新检验指标临床验证转化、检验质量控制、检验参考物质及溯源”4个专题方向,邀请了10位国内标记免疫领域权威专家,针对前沿热点领域的研究重点进行学术报告。以下是部分精彩报告摘要:上下半场会议主持人 (左上:崔丽艳 北京大学第三医院 右上:敬华 战略支援部队特色医学中心检验科 左下:陈建魁 解放军总医院第五医学中心 右下:徐国宾 北京大学肿瘤医院)张国军 首都医科大学附属北京天坛医院报告题目:一种新型缺血性卒中标志物(ACS)化学发光法及开发临床评价为了建立自动化学发光免疫分析法(CLIA)测定人体液中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的方法,探讨脑卒中患者血清ASC的临床意义,首都医科大学附属北京天坛医院张国军主任采用自行研制的CLIA法检测血清ASC浓度,评价新biomarker的临床意义。所在团队以磁性颗粒-FITC-FITC抗体为固相分离体系,FITC标记了一株抗ASC单克隆抗体,吖啶酯标记了另一株抗ASC单克隆抗体,建立了ASC自动CLIA检测方法。一共收集了167例急性缺血性中风(AIS)患者和238例健康对照者的血清。结果发现自行研制的ASC自动CLIA检测方法满足临床检测的要求。AIS患者血清ASC水平显著升高,是鉴别脑卒中患者的良好指标,可用于监测脑卒中的发病、治疗及预后。叶棋浓 中国军事科学研究院报告题目:肿瘤糖代谢基因表达控制癌症是严重威胁人类健康的常见疾病之一。葡萄糖代谢是最重要的代谢过程之一,包括葡萄糖的厌氧氧化、戊糖磷酸途径、三羧酸循环、糖异生和糖原合成。在恶性肿瘤转化过程中,糖代谢的重编程为癌细胞的生长和转移提供了能量和物质支持。中国军事科学研究院叶棋浓研究员在研究中发现,与正常细胞相比,肿瘤细胞葡萄糖摄取水平升高,需氧糖酵解和戊糖磷酸途径通量增加,三羧酸循环异常,糖异生水平下降。肿瘤细胞葡萄糖代谢的调节机制主要包括蛋白质的转录调控、转录后调控和翻译后修饰。癌细胞可以通过HIF-1、c-Myc、p53等转录因子调控糖代谢相关基因的表达。其所在团队发现SIX1是调控肿瘤糖酵解的关键转录因子,SIX1的翻译后修饰在调控糖酵解中发挥重要作用,SIX1是肿瘤诊断和治疗的候选靶标。刘向祎 首都医科大学附属北京同仁医院报告题目:新型质谱技术在临床检验实践核酸质谱技术已开始越来越被大家了解和熟悉,很多体外诊断产品在注册中。在报告中,首都医科大学附属同仁医院的刘向祎主任所在实验室利用MALDI-TOF技术,采用毅新博创的飞行时间质谱仪,在耳聋基因筛查、老年性黄斑变性和疫苗在人群有效性评估方面进行初步检测和评估,为尽快走向临床起到一定推动作用。周洲 中国医学科学院阜外医院 报告题目:高敏肌钙蛋白检测性能评价周洲教授主要研究方向为遗传性心血管疾病的分子机制研究及基因诊断方法开发。报告当天恰逢世界心脏日,中国医学科学院阜外医院周洲主任对高敏肌钙蛋白检测的性能评价等作了专业归纳与表述。周主任认为,高灵敏度肌钙蛋白检测方法的分析性能评价是临床应用的前提。评价标准应包括空白限、检出限、定量限、报告范围、印痕和一致性等,且不同样品类型和“目标”机器的一致性是必要的。宗金宝 青岛大学附属青岛市海慈医院报告题目:流式细胞术在淋巴细胞亚群及细胞因子检测的临床应用青岛大学附属青岛市海慈医院宗金宝主任对流式细胞术的原理及特点作了详细介绍。团队利用流式细胞术进行了淋巴细胞亚群检测,细胞内外细胞因子检测等一系列详实实验。结果表明流式细胞术是检测淋巴细胞亚群和细胞内细胞因子非常重要而且不可或缺的手段,此外流式细胞术也可以检测细胞外细胞因子,其中流式荧光技术将在细胞外细胞因子的检测中发挥重要作用。李海霞 北京大学第一医院报告题目:膀胱癌肿瘤异质性及液体活检的应用膀胱癌(BC)是一种异质性疾病,以基因组为特征,具有不稳定性和高突变率。液体活检技术是一项很有前途的技术,可以在多个时间点分析体液(如血液和尿液)中的肿瘤成分,并提供一种微创的方法,可以跟踪进化动态和监测肿瘤异质性。北京大学第一医院李海霞主任在报告中对膀胱癌基因组和转录水平上异质性的多重面,以及它们如何影响临床护理和结果进行了系统阐述。高艳红 解放军总医院第一医学中心报告题目:流式荧光技术在临床应用及发展精准医学模式对临床实验室诊断提出了越来越高的要求,要求其具有预防性、预测性、个体化以及参与性等。因此快速、灵敏、高通量对疾病的生物标志物进行定性和定量分析,是当今生命科学领域的研究热点。流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析的高新技术,是继化学发光、生物芯片技术之后的新一代高通量分子诊断技术平台。在报告中,解放军总医院第一医学中心高艳红详细介绍了流式细胞仪的基本原理以及在免疫学、肿瘤学等领域的应用。郭建巍 北京市第一中西结合医院报告题目:临床实验室助力肠癌的早期发现结直肠癌是全球发病率和病死率居首位的消化系统恶性肿瘤,平均每一分钟就有一人确诊结直肠癌,每两分钟就有一人死于结直肠癌。然而结直肠癌发生、发展需要十余年时间,所以早期筛查可以显著降低肠癌死亡率,让肠癌止步。传统的结直肠癌筛查方法使用粪便潜血试剂盒或者肠镜进行检测判断,但平均漏诊率高达41%。北京市第一中西结合医院郭建巍在报告中介绍了几类新型的结直肠癌筛查方法,并分别对比了其优缺点。最后他认为FIT+便DNA(单靶点或多靶点)模式为肠癌筛查的主要手段,DNA甲基化检测是主要方法,并号召提高医务人员认知,他认为这将在结直肠癌的防控中发挥不可或缺的重要作用。李永哲 北京协和医院报告题目:自身免疫病实验诊断技术临床应用进展北京协和医院李永哲主任介绍了自身免疫病实验诊断技术的临床需求,自身免疫病新标志物临床应用进展,检测技术临床应用现状及发展趋势。首先明确了检查的一些基本要素,如免疫细胞、免疫分子、基因分型、自然抗体等等。随后介绍了自身免疫指标的应用,作为伴随诊断提供疾病预警判断等。李永哲主任重点介绍了自身抗体在炎性疾病中的应用,自身抗体与中毒的关联性,狼疮脑病与类风湿关节炎等新型标志物,以及新冠病毒与自身抗体的关系。陆予非 安捷伦科技(中国)有限公司报告题目:超亮荧光蛋白拓展免疫检测新征程荧光藻胆蛋白(RPE)是由多个小亚基组成的生物大分子,是一种高吸收荧光分子,具有良好的检测性能。当高灵敏度对检测和准确性至关重要,荧光藻胆蛋白是首选的荧光色素。荧光藻胆蛋白偶联物用于流式细胞术、免疫测定、MHC四聚体测定和珠基测定。陆予非展示了安捷伦科技能够提供的链霉亲和素、藻胆蛋白和广泛选择的结合产品。会议设置颁奖环节,会务组为本次获得优秀论文的年轻科研学者颁发了荣誉证书。优秀论文获奖者合影部分报告嘉宾合影留念(一)部分报告嘉宾合影留念(二)
  • 抗色素干扰农残检测新技术研发成功
    近日,中国农业科学院茶叶研究所茶叶质量与风险评估创新团队在农药残留快速检测技术方面取得新进展,研发出近红外仿生荧光探针抗干扰检测农药残留新技术。相关研究结果发表于《生物传感与生物电子》(Biosensors and Bioelectronics)。据介绍,胆碱酯酶抑制法在有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测中具有广谱、便捷、高通量、低成本等优点,是农产品质量安全筛查的重要手段。然而,天然色素复杂多样且存在于几乎所有植物源性样品中,极易对光学检测造成干扰,因而开发一种通用、抗色素干扰的酶抑制检测方法具有重要实用价值。该研究根据天然色素光学背景特点,构建了一种能够靶向响应乙酰胆碱酯酶活性的近红外荧光探针,采用近红外激发策略实现了不同植物色素共存下荧光响应信号的准确测量,并在此基础上建立了灵敏度高、可靠性好的农药残留抗干扰快速检测方法。利用该探针,实现了对甜菜、胡萝卜、蓝莓、生菜等不同色系样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药的直接快速检测;对样品中敌敌畏的检出限(5.0 微克/千克)低于液质联用等常规仪器检测方法。该研究得到了国家自然科学基金、浙江省公益计划研究项目、中国农业科学院科技创新工程等项目资助。
  • 浅析光谱流式市场格局:玩家加速布局,成像技术/AI大势所趋——安捷伦细胞功能和表型业务总经理王小波博士
    前文回顾:新品光谱流式重拳出击,见证NovoCyte十年流式普及“里程碑”2024 年是 NovoCyte流式细胞分析平台全球推出10周年。多年来,NovoCyte产品系列中陆续加入了技术先进、功能强大的NovoCyte Quanteon、Advanteon与Penteon,帮助科学家不断拓展推进细胞分析前沿研究。上篇,在与安捷伦细胞功能和表型业务总经理王小波博士的采访交流中,我们了解到新品NovoCyte Opteon光谱流式细胞仪具有先进的光谱解析功能、友好的用户界面以及提供可定制的模块,能够满足研究人员特定的研究要求,并将在基础科研、生物技术以及工业领域发挥举足轻重的作用。本篇,王小波博士将继续围绕光谱流式的市场格局进行分享。——01——光谱流式市场格局+技术趋势仪器信息网:相比于传统流式,光谱流式技术有那些优势?现阶段的光谱流式市场竞争格局如何?王小波:流式细胞仪技术能够实现单细胞分辨率水平对与细胞表面结合的荧光标记抗体或细胞内蛋白进行检测。对于常规流式细胞仪,每个具有对应荧光染料的抗体都由一个荧光通道检测。例如,具有25个检测通道的 NovoCyte Quanteon可以测量多达25 种抗体,或者用于检测单个细胞的25种蛋白质或生物标志物。光谱流式细胞仪可以实现在整个荧光发射光谱中检测来自与单个细胞结合的所有荧光色素的组合荧光。通过光谱解混,可以分辨每种荧光染料的荧光贡献。光谱流式细胞仪可以为用户提供更好的功能来区分和检测具有相似发射光谱的荧光染料,去除自发荧光,并最终增加抗体/荧光染料组合的总体数量,以获得更深入的生物学见解。如上所述,自索尼生物技术公司于2013年推出第一台商用光谱流式细胞仪SP6800以来,光谱流式细胞仪已成为近年来市场上的技术趋势。索尼生物技术不断扩大其光谱流式产品组合,现在他们的分析仪产品包括7激光ID7000以及FP7000光谱分选仪。Cytek的光谱流式平台包括具备5激光的Aurora系列、具备3激光的 Northern Lights系列以及具有5激光Aurora CS光谱分选仪。BD拥有一款光谱流式分选仪S8和具备5激光的A5 SE。在 CYTO 2024上,贝克曼库尔特宣布计划推出具有6激光的CytoFlex mosaic,赛默飞世尔计划推出Attune Xenith 光谱流式细胞分析仪等等。安捷伦NovoCyte Opteon是一款高性能、高质量、高可靠性的仪器,具有NovoCyte平台的直观性、易用性和简单性——易于测量、易于分析、易于获得结果且易于维护。 我们相信NovoCyte Opteon具有将光谱流式带入日常实验室进行复杂、精密的单细胞分析方面的潜力。NovoCyte Opteon 光谱流式细胞系统品牌:安捷伦型号:NovoCyte仪器信息网:请您谈谈流式细胞仪器技术的发展趋势。流式细胞术亟待拓展的应用领域以及未来市场需求、技术挑战又如何?王小波:除了上面讨论的光谱流式趋势外,最近成像技术已被纳入一些流式系统,包括BD的 S8、NanoCellect的Verlo以及Thermo Fisher的Attune CytPix。2004 年推出的第一台流式成像仪器是Amnis平台,凭借显微镜的分辨率和灵敏度,成像流式能够助力细胞分析更深入的研究。 最近的成像流式平台,如BD的S8和NanoCellet的Verlo,已经与分选功能相结合,允许用户根据形态或生物标志物对目标群体进行分选,从而提供重要的潜在价值。另一个技术趋势与人工智能在流式细胞术中的应用有关。ThinkCyte和 DeepCell都开发并推出了创新的无标记成像平台,用于对细胞进行成像、表征和分析,然后根据细胞特征进行细胞分选。这些技术可以为客户提供独特的价值,以分析缺乏成熟生物标志物的复杂细胞样品。 人工智能应用的另一个方面与高维数据分析相关,用于自动识别细胞免疫表型,特别是基于临床流式在疾病或恶性肿瘤样本诊断应用中,提高效率、减少错误的同时可能帮助使用者发现以前未被识别的关联的潜在生物学标志物或病理过程。流式细胞术是以数十万和百万个细胞进行高维多通路分析的最强大的技术,在生命科学研究和人类医疗保健方面具有巨大潜力。 更多参数、更多功能、更快、更高通量以及更温和的细胞处理和更强大的分析技术可能会涌现出来,并将其广泛应用于所有生物实验室。——02——设备更新下安捷伦细胞分析产品布局规划仪器信息网:在大规模设备更新的背景下,安捷伦细胞分析可以提供哪些设备更新整体解决方案呢?王小波:随着测量设备的技术更新,安捷伦细胞分析可以提供广泛的仪器组合,从常规的日常使用仪器,如微孔板洗板机和分液器、自动化微孔板检测仪,到相对复杂的仪器,如自动细胞成像仪、自动化微孔板培养箱,再到高端复杂的仪器,如 BioTek Cytation C10共聚焦微孔板成像检测系统,BioTek Cytation 7多功能微孔板成像检测系统,NovoCyte Opteon光谱流式细胞仪,xCELLigence实时细胞分析系统, 将实时细胞阻抗分析与活细胞三色荧光成像技术相结合RTCA eSight, 以及Seahorse 实时细胞代谢分析系统。安捷伦将帮助中国的科学家获得最新、最先进的仪器和解决方案,使他们能够推进细胞生物学、癌症研究、免疫疗法开发和临床诊断方面的研究和开发。Agilent BioTek Cytation C10品牌:安捷伦型号:Cytation仪器信息网:请分享安捷伦在细胞分析技术产品的布局和未来规划。王小波:通过多次收购,安捷伦建立了广泛的细胞分析产品组合,包括酶标仪、细胞分液及洗涤仪器、细胞成像平台、流式细胞术和其他技术独特的平台,如 xCELLigence RTCA实时细胞分析仪以及Seahorse实时细胞代谢检测平台。 广泛而差异化的产品组合使我们能够为复杂的研发项目和计划提供完整的解决方案。Agilent xCELLigence RTCA eSight 实时细胞分析仪品牌:安捷伦型号:RTCA安捷伦Seahorse XF Pro细胞能量代谢分析仪品牌:安捷伦型号:安捷伦Seahorse细胞作为生命的基本组成部分,成为免疫治疗和细胞基因治疗的研究基础。细胞分析在现代生命科学和治疗发展中发挥着越来越重要的作用。科学家们在细胞生物学基础研究过程中,对于采用高通量、高度多路复用和多重参数测量的技术来获取数据的需求不断增长,目的是以经济、高效且节省时间的方式,获得高质量的数据和更深刻的细胞生物学理解。未来,安捷伦细胞分析仍然要不断提高自身产品技术以及扩展在生命科学的应用和工作流程,贴近用户需求,为用户提供差异化和高价值的服务, 帮助用户取得更多高水平成果, 以期推动生命科学的进步和人类健康的发展。(编辑:刘立东)欢迎流式细胞仪技术研发、市场趋势、展会见闻感悟投稿。投稿邮箱:liuld@instrument.com.cn点击下图回顾上篇
  • 微型光谱仪之荧光检测
    p strong   1、技术简介 /strong /p p   当常温物质经入射光照射,吸收光能后进入激发态,并且立即激发并发出出射光,那么这种出射光就被称之为荧光。荧光测量是利用灵敏的探测器和高效率的滤光片,将检测样本发出的微弱信号光和高强度的激发光区分出来,并通过探测器对区分出来样本的微弱信号进行检测。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 1.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/11b65588-0ce5-42b6-987e-0bce221488ca.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图1 激发荧光原理图 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 2.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/41d8cfdc-78b6-4d8e-a895-6de1a119f3da.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图2 发射荧光能级图 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 3.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/d4ff43db-3d01-4622-a467-ebd934c94704.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图3 激发波长和发射波长重叠现象 /strong /p p strong   2、应用说明 /strong /p p   荧光激发光谱可以通过有效的荧光激发波长来进行表现,并能够得到荧光转化效率。利用稳定可靠的激发源和发光二极管作为激发光,虽然大多数情况下,激发波长和物质的发射波长会发生重叠,但当一个短波长的激发光在一点激发物质,我们就能在物质发散的其他位置观察到比激发光更长波长的光,以此区分出长波为荧光发射波长,短波段为激发波。 /p p   荧光光谱学分析对于调查性研究和分析性科学的应用是一个主要的工具。 /p p strong span style=" FONT-FAMILY: 楷体,楷体_GB2312, SimKai COLOR: #548dd4"   自然环境:宝石鉴定分析,矿石分析,叶绿素分析,原油残留等 /span /strong /p p strong span style=" FONT-FAMILY: 楷体,楷体_GB2312, SimKai COLOR: #548dd4"   法医鉴定:指纹和血液检测,分析纤维组织和其他物质 /span /strong /p p strong span style=" FONT-FAMILY: 楷体,楷体_GB2312, SimKai COLOR: #548dd4"   荧光体温度测量; /span /strong /p p strong span style=" FONT-FAMILY: 楷体,楷体_GB2312, SimKai COLOR: #548dd4"   基础研究:激光诱导荧光研究分子的电子结构和相互作用,燃烧,等离子,以及流体的浓度 /span /strong /p p strong span style=" FONT-FAMILY: 楷体,楷体_GB2312, SimKai COLOR: #548dd4"   生物:分子检测,细胞进程,细胞分类 /span /strong /p p strong span style=" FONT-FAMILY: 楷体,楷体_GB2312, SimKai COLOR: #548dd4"   医学诊断:分析癌症细胞,葡萄糖测定,DNA测序,细胞计数,凝胶电泳。 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" & nbsp /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 5.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/6371a89f-fb2d-40f3-8969-4d1a2eee695b.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图4 深海水母的荧光 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center"    img title=" 4.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/74d71648-cbe9-45f0-8129-28ee48afe4ef.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图5 荧光色素标记的癌变细胞 /strong /p p strong   3、典型产品和配置 /strong /p p   荧光检测配置: /p p   3.1 光谱仪:鉴于荧光较为微弱的特性,通常需要高灵敏度光谱仪进行检测,这类光谱往往采用背照减薄型CCD,部分还带有CCD制冷,以保证信噪比。 /p p   3.2 反射镜: 将更多发散的荧光耦合到光纤内。 /p p   3.3 聚光透镜:光纤出射的发散光,通过聚光透镜可以形成平行光,使得入射光效率提高。 /p p   3.4激发光源:激发光源的选择具有多样性,比如LED光源、激光等等。使用LED的中心波长最好接近激发光源波长 所选择激光的强度要能被光谱仪检测到,才能保证发射荧光被检测到。如果使用带宽光源(即连续光谱光源),需要添加单色滤光片滤出单色光。 /p p   3.5 滤光片:带通滤光片是窄化激发光源的最简单选择,该滤光片由长通和短通两块滤光片组成,通过调节短通滤光片的位置,可以实现单色激发光。如果荧光物质的激发波长未知,客户可使用可调线性滤光片,可以设置带宽20nm到100nm不等的单色波作为激发波长,还可以单独使用长通和短通滤光片,设置起始波长和截止波长。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 6.1.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/d11c1f9d-f05d-422d-8a02-f104790cc3a1.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 6.2.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/6b09a049-a558-4d4e-9b9b-42402ab2e91e.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图6 带通滤光片光谱图 /strong /p p   3.6 采样附件(光纤、荧光反射探头、比色皿卡槽等):模块化的荧光测量系统的优点在于使用单个激发光源和检测器的情况下,获得数据具有建议性、高效性、即时性。通过改变光纤的连接位置,可以实现0° , 90° 和180° 的不同收光角度进行不同形式的光学测量。使用荧光反射探头,可以直接接触样品表面测量高浓度的液体样品、固体或者粉末,获取样品的荧光散射光。 /p p   比色皿卡槽,更换其中的透镜可以提高样品荧光的聚集。使用比色皿,可以简便高效率地实现nmol浓度物质的荧光测量。使用配有4通道的比色皿卡槽,由于使用空间耦合的方式,具有高耦合效率。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 7.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/588ade66-fe63-4529-bf99-a30bb84073ca.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图7 比色皿卡槽 /strong /p p   3.7光谱仪控制软件:专用软件可以让使用者更好地使用光谱仪进行各种应用。当使用光谱仪控制软件进行荧光测量时,经常使用到两种测量模式:QuickView mode(快速扫描)和Relative Irradiance mode(相对辐射)。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 8.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/d29ee139-461e-46ea-8b7f-9683b1c0c73b.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图8 荧光检测典型配置图 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 典型产品:高性能微型光谱,激发光源,样品支架 /p p strong   4、应用文章 /strong /p p   4.1 纳米晶体的多个发射峰,成像和定量分析 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 9.1.jpg" style=" HEIGHT: 237px WIDTH: 450px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/a99e78dc-f64e-4c77-87f2-4ebcd29e2761.jpg" width=" 450" height=" 237" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 9.2.jpg" style=" HEIGHT: 208px WIDTH: 450px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/9d9d1668-15cd-48d8-b8a5-ee6835e5042b.jpg" width=" 450" height=" 208" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图9 上转换材料荧光光谱 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 10.jpg" style=" HEIGHT: 226px WIDTH: 450px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/44789453-8aff-44da-ad90-72ce287c3713.jpg" width=" 450" height=" 226" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图10 不同的光源测量核壳量子点发射光谱 /strong /p p   4.2 不同受力情况下压电陶瓷光谱检测 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 11.jpg" style=" HEIGHT: 333px WIDTH: 450px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/c2e7a5d3-7f7f-4ef1-a613-892c6da48d9d.jpg" width=" 450" height=" 333" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图11 不同受力情况下压电陶瓷光谱 /strong /p p   4.3 测量内嵌蛋白荧光的标准光谱工具 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 12.jpg" style=" HEIGHT: 326px WIDTH: 450px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/a858bf4f-40aa-48f8-af89-bd46a3704407.jpg" width=" 450" height=" 326" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 12 牛血清白蛋白荧光光谱(0.1 mg/mL) /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 13.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/e2ad070d-3baf-4e2c-9062-5480abbc5bb5.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图13 溶解酶吸光度光谱(0.1 mg/mL) /strong /p p strong   /strong  4.4 硫酸奎宁的荧光检测 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 14.1.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/7abd0f2f-b5c5-4ec6-bea4-da1a380c3e99.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" & nbsp /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 14.2.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/6117e637-b2a4-40ec-ac92-2b80ba87a745.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 图14 硫酸奎宁荧光光谱 /p p strong   /strong  4.5 切削油的荧光检测 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 15.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/7c89b306-207d-46b4-973d-3779feb2c989.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图15 不同样品切削油荧光光谱 /strong /p p   4.6 使用色氨酸荧光进行溶菌酶的构象分析 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 16.jpg" style=" HEIGHT: 256px WIDTH: 450px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201612/insimg/568ad720-d392-4b53-be35-33970c1f5cce.jpg" width=" 450" height=" 256" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 图16 磷酸盐缓冲剂天然和变性溶菌酶荧光光谱 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: right" & nbsp (内容来源:海洋光学) /p
  • 罗维朋/罗威邦发布TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装新品
    TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装 产品概述 Lovibond品牌一直以来都是液体颜色分析的佼佼者。100多年来,Lovibond也一直在专注和追求颜色分析的高精度化和最快捷化,从目视比色计,到全自动色度仪。而新近推出的Lovibond 多功能色差仪套装,更是专门针对多形态的样品色差分析而进行了创新。作为全新的色差仪套装,搭配多功能适配器,操作灵活,数据精确可靠。巧妙的设计和高性能的内部结构,使得英国lovibond这款色差仪将成为更多食品,化工,汽车,医药,化妆品等客户的首先考虑的选择。资料下载区 可获取TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装pdf版本 详细介绍 和 技术参数TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装 产品介绍• 采用独特设计的移动台式适配器,与Lovibond TR520/TR500主机联用。• 为液体,胶体,粉末和其他样品色差分析提供统一的照明环境和对应的样品比色皿。• 比色皿槽配有严密的遮光盖,避免环境光线干扰读数。• 支持多种样品测试,比色皿光程可选10mm,20mm 和30mm。• 配有白色参比板,以确保读数的一致性,在适配器内可快速进行仪器校正。• 全新人体工学设计,便于手持操作,新型、直观的界面图标• 独特设计的适配器适用于测量粉末,液体,凝胶,浆料,颗粒和固体材料。• 集成摄像头定位器易于观察,确保得到稳定、高重复性的测量结果• TR520允许您轻松切换孔径,测量大面积或小面积的样品• 标配的免费软件允许图形分析,统计控制过程,搜索色调、色差和颜色指数等• Bluetooth 蓝牙连接功能• 荧光材料可选择是否使用UV测量TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装 应用领域和测量原理广泛应用于各行各业,塑胶电子、油漆油墨、纺织服装印染、印刷纸品、食品、医药、化妆品、光学影像调试等行业,色差仪的原理主要是根据CIE色空间的Lab,Lch原理,显示出标准与被测样品的色差△E以及△Lab值。通俗的说就是如果单纯以一组Lab值来判断某个颜色并没有太大的实际意义,但是当人们对两个颜色进行比较时,人们可通过这两个颜色的Lab差值来判断出它们之间的差别。另外,通过两组Lab值人们可计算出两颜色间的色差,如果色差大于1人们的眼睛就可分辨出来。由此人们可事先设定一定的容差范围,在进行品质控制时,量测的样本与标准颜色之间色差值在容差范围内即为合格品,超出范围即为不合格产品。通过使用Lab色空间,人们的生产控制实现了数据化。TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装 技术参数技术参数TR 520TR 500光学结构d/8°积分球尺寸48mm光源组合光源 LED 和 UV组合光源 LED 分光模式分光模式 凹面光栅传感器256图像元 双阵列CMOS传感器波长范围400-700nm波长间隔10nm半带宽10nm反射率量程0-200%测量孔径双孔径模式:10mm/8mm & 5mm/4mm定制固定孔径: 8mm/4mm/1x3mm镜面反射SCI & SCE颜色空间CIE Lab, XYZ, Yxy, LCh, CIE LUV, Hunter Lab色差测量ΔE*ab, ΔE*uv, ΔE*94, ΔE*cmc (2:1), ΔE*cmc (1:1), ΔE*00v, ΔE (Hunter)其他颜色指数WI (ASTM E313, CIE/ISO, AATCC, Hunter) YI (ASTM D1925, ASTM 313, TI (ASTM E313, CIE/ISO),同色异谱指数 MI, 色牢度, 染色牢度, 颜色强度, 不透明度观测角度2° / 10°照明体D65, A, C, D50, D55, D75,F1, F2, F3,D65, A, C, D50, D55, D75, F2, F7, F11显示数据光谱图/光谱数据,样品色值,色差数据/色差图谱,合格/不合格标志,偏色测量时间2.6s重复性MAV/SCI: ΔE* ≤0.03MAV/SCI: ΔE* ≤0.05台间差MAV/SCI: ΔE* ≤0.15MAV/SCI: ΔE* ≤0.2测量模式单次测量,平均测量定位模式内置摄像机取景定位器电池锂离子电池. 5000 次测量,续航8小时尺寸184mm L x 77mm W x 105mm H重量600g光源寿命5年,超过300万次测量显示3.5 英寸 TFT- LCD彩色触屏数据接口USB, 蓝牙Bluetooth 4.0数据存储2000个标准样品, 20000个样品语言英语,中文,法语,德语,西班牙语,葡萄牙语操作环境0~40°C, 0~85% 相对湿度 (无冷凝), 相对高度 2000m存储环境-20~50°C, 0~85% 相对湿度 (无冷凝)标配配置PC OnShade软件, 黑白校准板,电源, 内置电池,用户操作手册选购配件多功能TR适配器 (用于液体,粉末和胶体)TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装 创新性产品设计TRA500 / TRA520 采用的多功能适配器,依照TR500 /TR520 分光色 差仪主机尺寸精确设计生产,优化人体工学装载角度,便于触屏操作和样品色差测量。 提供10, 20 和 30mm 光学玻璃比色皿,用于放置液体,胶状和粉末等不同类型的样品。TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装 订购信息403225 Lovibond TRA 520 403220 Lovibond TRA 500 (8mm aperture) 创新点:对于色差测定来讲,精度固然重要,但是仪器的广泛适用性同样决定了仪器的发展趋势。TRA520色差仪多功能套装,最大的创新点有以下两点:1. 独家研发设计的多功能适配器,将便携仪器瞬间切换为台式操作效果。2. 这款多功能适配器,设计简洁,集多个适配功能于一体,使得仪器应用从固体轻松扩展至液体,粉末和半固态样品,并能适用于不同比色皿光程。TRA520 分光色差仪/分光测色仪多功能套装
  • 基因治疗,如何走出泥潭
    基因本身是无法自己进入到细胞体内的,必须依靠一定的载体才行,而病毒就是最好的选择,因为病毒可以侵入人体。可是病毒插入染色体后的位置是随机的,谁也无法保证它不会突然触碰到某些癌基因,治病不成,反把它们给激活了。   ①将修饰的DNA注入载体   ②载体结合到细胞膜   ③载体通过囊泡进入细胞   ④囊泡解体释放出载体   ⑤载体将新基因导入细胞核内   ⑥细胞利用新基因表达蛋白   图片来源:百度图片   距离基因治疗的第一例人体试验已经过去二十多年了,然而,这项曾被寄予厚望的治疗手段至今难以真正在临床上实现应用,人们也经历了从开始的盲目乐观与热情到意识到其副作用时的失望与怀疑。也许,回归理性并坚持走下去,基因治疗才有前途。   据2012年12月24日BBC报道,英国科学家分析了20个具有肠癌家族遗传史的人的基因组,发现了两处会引起肠癌发病率显著升高的基因变异,分别是POLE和POLD1。POLE 和 POLD1是负责DNA损伤修复的基因,这两个基因功能异常会导致损伤的DNA积累,从而有可能引起肠癌。而这一结果也被认为有助于医生识别出肠癌高危人群,进行早期诊断和治疗。   事实上,从2000年“人类基因组计划”宣布有史以来的第一个人类基因组草图完成,到2012年“千人基因组计划”公布1092个高分辨率人类基因组遗传变异整合图谱,人类谱写的生命“天书”越来越精细,科学家们也试图从中读出遗传和致病的密码。然而,截至目前,美国FDI尚未批准任何一种用于临床的基因治疗药物或者方法,基因治疗并非如大众希望的那样可以成为一种常态化的治疗手段。   副作用让基因治疗跌入谷底   所谓基因治疗,就是把一个具有治疗作用的基因放到病人的细胞中,借此替换缺失和功能异常的基因,或者,借此过度表达好的基因,把坏的基因遮蔽住,最终达到治疗某种疾病的方法。   医生可以选择体内或者体外治疗,前者是直接将携带基因的载体注射到受损细胞所在区域,后者则是抽取病人的血液或者骨髓,分离出未成熟的细胞,接着将基因送入这些细胞,再重新注射到病人的血液中。这些细胞会移动到骨髓,在那边成熟并大量增殖,最终替换掉那些受损的细胞。   基因治疗在1990年第一次进行了人体试验,截至2004 年6月底,全世界范围内基因治疗的临床试验方案已有987 个。“基因治疗一度在欧美掀起了一股研究热潮。”中科院北京基因组研究所副研究员聂凌虎说。   可正当研究人员信心满怀之时,几起因基因治疗而诱发的事故顿时让这股热潮跌入冰点。   自2000 年以来,法国巴黎内克尔医院Fischer 教授对17 名患有严重联合免疫缺陷病的儿童实施基因疗法,正常的基因植入到患儿体内,修复有缺陷的免疫系统,当时疗效很显著,但是从2003 年开始,其中5名患者出现了类似白血病症状,后有一名患病儿童死亡。   至此,美国FDA开始意识到基因治疗可能具有潜在的、长期的副作用。大量基因治疗临床试验被搁浅,人们对于基因治疗的期望也跌入谷底。   基因载入不可控,一不小心搞破坏   其实,基因治疗产生副作用的“罪魁祸首”就是输送治疗基因到达致病靶点的载体。   基因本身是无法自己进入到细胞体内的,必须依靠一定的载体才行,而病毒就是最好的选择,因为病毒可以侵入人体。   理想的基因治疗应该能根据病变的性质和严重程度的不同,调控治疗基因在适当的组织器官内和以适当的水平或方式表达。可是,目前,科学家还不具备这样的掌控力。   聂凌虎说,病毒插入染色体后的位置是随机的,谁也无法保证它不会突然触碰到某些癌基因,治病不成,反把它们给激活了。   “因为癌基因被激活的原理之一就是外源DNA插入过程中破坏了其本身的结构。”复旦大学生命科学学院教授李瑶解释。   而让李瑶始终不看好基因治疗的,还在于肿瘤疾病几乎都是多基因疾病,致病机制非常复杂。   在肿瘤领域,p53被视为最有分量的抑癌基因,50%以上的肿瘤疾病都与这个基因的功能缺失有关。2004年,深圳赛百诺基因技术有限公司推出了p53 抗癌注射液(又名“今又生”),由我国SFDA批准上市,它也成为了全世界第一个正式用于临床基因治疗的药物。   但聂凌虎告诉记者,此后,因其疗效得不到业内的一致认可,开发者又陷入专利和股权官司,“今又生”并没有获得预想的口碑和经济收益。   “p53的重要性毋庸置疑,但癌症并不是一股只有单个决口的洪流,一旦发病就是诸多关口一齐崩溃,拦得住p53,也很难拦住所有。”他表示。   推进基因治疗,攻克“载体”难题是关键   目前,在基因治疗领域,学界主要攻克的对象就是载体,通过改造使其提高安全性和效率。其中,非病毒载体就是一种新的研究方向。   非病毒载体最初在基因治疗临床试验中的使用率很低,但它的生物安全性显然要高于病毒载体。随着脂质体、多聚物,以及它们的复合物等载体的出现,结合电脉冲、超声等技术,一定程度上可以提高导入效率和靶向性。因此,聂凌虎认为,很难说,现在的小众产品未来就不会超越主流的病毒载体。   而目前被认为最为理想的是一种被称为腺相关病毒(AAV)的载体,它没有毒性,不致病,宿主范围广,稳定性好。   美国费城儿童医院和霍华德休斯医学研究所以及宾夕法尼亚大学联合组成的一个研究小组已经在12名年龄介于8岁到44岁之间的利伯氏先天性黑内障(LCA)病人身上,使用了以这种无毒性小病毒为载体的基因疗法。   研究人员将正常的基因RPE65植入眼部,在眼球后面产生感光色素,取代了那些因病丧失的色素,从而恢复眼部的光敏性。尽管该疗法并没有让所有病人恢复正常视力,但是,有一半的人重见了光明。   不过,据聂凌虎介绍,国外还存在一种新的思路,那就是通过移植基因来改良造血干细胞。造血干细胞属于骨髓细胞,它可以产生血液和免疫系统中所有的细胞,被改良造血干细胞可以使宿主产生新的免疫系统,从而让肿瘤消失,这与直接移植造血干细胞的效果相似。同时,造血干细胞是悬浮的,即使是病毒载体进入,在整个循环系统里面,它们也能相对均匀地接触这些悬浮的细胞,避免冲撞到“要命”的细胞而产生副作用。   美国印第安纳州大学医学院研究人员在动物实验中就用通过改良的慢病毒载体将抗黑色素瘤T细胞受体基因插入到小鼠的造血干细胞中,并最终完全消除了肿瘤。   “基因治疗的突破也许会从造血干细胞开始。”他认为。   基因诊断更成熟,治疗主要靠引导   从开始的盲目乐观与热情到意识到副作用时的失望与怀疑,对于基因治疗,人们正在回归理性。正如李瑶说的,基因治疗的确有一定价值,尤其在一些单基因遗传病以及某些肿瘤疾病上,但它并不是万能的,在当前的认识和技术水平下,大多还在Ⅰ/Ⅱ期临床试验阶段,距离应用还差得很远。   不过,专家们一致认为,相较于基因治疗,基因诊断技术则要现实和成熟许多。据美国国家疾病控制中心基因检测部公开的数据显示,目前已存在1000多种疾病的基因诊断技术。   在那些已知致病基因的疾病诊断中,可以通过个人DNA的检测,观察是否存在染色体异常、对应基因有突变,或者基因表达程度问题,从而判断疾病是否发生。   目前应用非常广泛的应该是对新生儿单基因遗传病以及染色体异常的筛选,比如地中海贫血、唐氏综合症、色盲等等。   此外,对于成年人来说,还有例如线粒体基因突变糖尿病、镰刀型贫血症、老年性痴呆等等,当然还有人们熟悉的一些癌症,比如结肠癌、乳腺癌等等。   而在聂凌虎看来,乳腺癌的基因诊断和治疗模式是当前个体化基因医疗的一个理想模式。   BRCA1和BRCA2被称为是乳腺癌的易感基因,一个女性如果发现携带这种基因,在70岁以前她有65%的几率患乳腺癌,BRCA1和BRCA2基因检测在发达国家作为一项预防乳腺癌的手段早已进行。有意思的是,它们虽然“凶猛”,BRCA1突变者对化疗的临床反应率为100%,可以说非常敏感,化疗的治愈效果自然很好。   “这种模式,即通过基因诊断先使疾病层层分型,再针对每种类型进行对应的引导治疗。”聂凌虎坦言,单指基因治疗,目前在临床应用上也只能做到引导用药、治疗。
  • 造纸工业颜色测量使用在线分光色差仪提升质量
    造纸业在工业生产中起到核心作用,同时也是现代文化和技术创新的象征。随着技术的进步,纸张质量的标准变得更为严格,特别是颜色的控制。为确保纸张的颜色不仅满足实际应用需求,还能为用户带来愉悦的视觉体验,采用颜色测量技术成为了关键。这种测量确保了纸张颜色的一致性和优质性。为了在生产过程中维持纸张的颜色和亮度的恒定,行业已经开始使用在线纸张颜色测量系统。这种系统确保从原料到最终产品的每一个阶段都符合既定的质量标准。ColorXRA 45和ERX40分光色差仪是此系统中的核心技术,专为在线颜色和亮度测量而设计。这些先进的仪器能够实时监测生产线上纸张的颜色和亮度,确保每一卷纸都达到了高质量标准。一、关于ColorXRA 45白度仪ColorXRA 45白度仪,一个专为工业纸张和塑料产品设计的在线色彩测量设备。这款白度仪可以在生产过程中进行无缝的色彩测量,大大提高了生产效率,并减少了浪费。结合ESWin软件,它能自动调整色彩,降低重做次数,从而提高产出。其高标准的光学测量结构和实时的监测功能确保了整个生产过程的色彩精度和稳定性。此外,ColorXRA 45采用了高标准的45°:0°光学测量结构和1 nm的光谱分辨率,这确保了其在整个生产流程中都能维持出色的色彩精度。其还包括实时的温度和灰尘监测功能,能够及时警告任何可能影响最终产品色彩的外部因素。更为出色的是,该白度仪可以精确测量基本颜色和荧光增白剂的强度,确保在不同生产环境下,所有材料的色彩都得到了最佳的调整和优化。二、ERX40分光色差仪ERX40色差仪 是一款专门为纸浆生产环境设计的在线测量设备。这款仪器能在纸浆阶段就获取初步的色彩、白度和明亮度信息,以及检测光学增白剂(OBA)的活性水平。尽管这些初步数据与最终产品存在一定差异,这一早期阶段的测量却是诊断潜在问题的关键,能及时进行纠正,从而减少资源浪费和提高生产效率。这款色度仪的设计考虑了工业需要,采用不锈钢保护罩,并能通过旁路系统直接在纸浆中(浓度为3%-5%)进行在线测量。当与ESWin QC软件结合使用时,ERX40不仅能自动进行精确的色彩调整,还能提高生产效率和产品质量。ERX40带来多重益处,包括早期识别和纠正生产过程中的问题、实现不同生产线原材料的标准化混合、有效控制废物添加,以及优化染料使用。此外,其先进的双光束测量技术和自动波长调整功能确保了高度的测量准确性和长期稳定性。需要强调的是,这款仪器仅每4周需要一次外部调整,保证了设备的最佳性能和正常运行时间。总体而言,ERX40色度仪是纸浆制造过程中不可或缺的工具,是造纸机中ERX50在线测量系统的理想补充。三、在线颜色测量系统的重要性随着现代工业生产技术的持续进步,颜色在纸张制造过程中的重要性逐渐被凸显。这不仅关乎产品的外观和视觉吸引力,更是关于生产的质量和效率。颜色的一致性和优质性是保证纸张质量的关键指标,因此,在生产过程中对其进行实时监测和调整变得尤为重要。在线纸张颜色测量系统的应用确保了从原料开始,到最终产品出厂,整个生产过程中的每一步都严格遵循颜色和亮度的质量标准。其中,ColorXRA 45和ERX40分光光度仪作为该系统的核心部分,展现了技术特点和优势。它们为现代纸张生产提供了有效的在线颜色和亮度测量方案,确保了每一卷纸都能满足或超越预期的质量要求。ColorXRA 45的设计初衷是为工业用纸和塑料产品提供高精度的在线色彩测量。而ERX40则针对纸浆生产环境进行了专门优化。两者都可以与ESWin软件系统集成,实现自动化的颜色调整和优化,从而大大提高生产效率,并确保产品质量。总的来说,随着技术的进步和生产要求的提高,颜色测量技术在纸张制造中的角色变得越来越不可或缺。ColorXRA 45和ERX40等高端设备为纸张生产企业提供了有效的解决方案,帮助他们满足严格的质量标准,并为消费者带来更好的产品体验。“爱色丽彩通 ”总部位于美国密歇根州,成立于1958年。作为全球知名的色彩趋势、科学和技术公司,爱色丽彩通提供服务和解决方案,帮助品牌、制造商和供应商管理从设计到最终产品的色彩。如果您需要更多信息,请关注官方微信公众号:爱色丽彩通
  • 临床介导的 CD8+ T 细胞和 NK 细胞焦亡的发现揭示了黑色素瘤异质性
    黑色素瘤组织中,与细胞焦亡相关的基因(PRGs)GZMA、GSDMB、NLRP1、IL18和CHMP4A的阳性细胞比例低于正常皮肤。细胞焦亡是一种影响肿瘤微环境和肿瘤免疫治疗的新领域。然而,细胞焦亡的作用仍有争议,部分原因是由于黑色素瘤的细胞组成异质性。2023年8月,上海中医药研究院皮肤病研究所李斌教授团队在Cell Death& Disease杂志上发表题为 Clinical-mediated discovery of pyroptosis in CD8+ T cell and NK cell reveals melanoma heterogeneity by single-cell and bulk sequence 的研究论文。本文对黑色素瘤标本的单细胞转录组进行了全面分析。我们发现PRGs的表达在免疫细胞中,如CD8+细胞(代表CD8+ T细胞)和CD57+细胞(代表NK细胞)中失调。此外,免疫组化和多重免疫荧光染色实验结果进一步证实了GZMA+细胞和GSDMB+细胞主要在免疫细胞中表达,特别是在CD8+ T细胞和NK细胞中。黑色素瘤标本中,GZMA+合并CD8+ T细胞(0.11%)和GSDMB+合并CD57+细胞(0.08%)的存在量很少,而对照组分别为4.02%和0.62%。这些发现表明,肿瘤中免疫细胞的减少可能降低了细胞焦亡的能力,从而对抗黑色素瘤的特性构成了潜在的风险。我们根据单细胞和整体RNA-seq分析,构建了一个预后风险模型和个体化的预测模型(C指数=0.58,P = 0.002),提示PRGs在恶性黑色素瘤的预防中可能发挥作用。总之,通过实验验证鉴定了免疫细胞群和免疫基因模块,有助于我们更好地理解黑色素瘤中的细胞焦亡。实验部分本文中,研究者使用TissueGnostics公司TissueFAXS Spectra全景多光谱组织扫描定量分析系统获取图像。获取到图像利用StrataQuest软件进行定量分析。Panel 1 :DAPI,CD8,GZMA,GSDMBPanel 2:DAPI,CD57,GZMA,GSDMB虽然细胞焦亡对癌症的影响尚为有定论,但是也正因为如此,针对细胞焦亡的研究仍然有广泛的未知等待探索。考虑到细胞焦亡的研究和炎症反应过程密切相关,借助于TissueFAXS Cytometry技术,结合多色免疫荧光染色,不但可以精准识别焦亡相关特异性蛋白表达的细胞,还可以实现对细胞焦亡水平在组织中的空间分布、形态特征、与其他细胞类型的相互作用等方面的高通量、高精度、高信息量的定量分析。在单细胞定量水平上,先通过识别细胞核标记对细胞进行计数,继而借助于Tissue Cytometry的核扩张算法精准对细胞质/膜染色的形态进行识别。在获得单细胞真实染色的轮廓区域后,对每个细胞蛋白标记的所有像素强度进行统计分析,最终获得单个细胞蛋白表达的真实强度水平。这种方法用于阳性阈值的精准筛选划分,甚至更进一步鉴定了阳性细胞与相邻的阴性细胞的作用关系。在本文中作者还利用了多组学研究的思路,对黑色素瘤发病机制有关的细胞 - 细胞相互作用网络提出了新的见解思路,以CD8阳性T细胞作为研究线索观察到CD8细胞边缘浸润的失调,进一步为肿瘤免疫的相关机制研究拓展了研究领域的广度。除此之外,针对NK细胞、GZMA 细胞和 GSDMB 细胞也均进行了原位精准空间定量分析,为后续的深入研究奠定了扎实的基础。在这些研究中,在切片原位的多重免疫组化标记,针对不同表型细胞的蛋白表达及细胞分布分析,也都是利用TissueFAXS Cytometry技术来进行的个体化精准定量分析。Figure 1 GZMA+细胞和GSDMB+细胞由CD8+T细胞分泌。A:对照组和黑色素瘤组织的多色免疫荧光染色图像。DAPI(蓝色)、CD8(粉色)、GZMA(绿色)和GSDMB(红色)。B:CD8+GZMA+共定位和CD8+GSDMB+共定位散点图。Figure 2 NK T细胞分泌GZMA+细胞和GSDMB+细胞A:对照组和黑色素瘤组织的多色免疫荧光染色图像。DAPI(蓝色)、CD57(粉色)、GZMA(绿色)和GSDMB(红色)。B:CD8+GZMA+共定位,CD8+GSDMB+共定位,CD57+GZMA+和CD57+GSDMB+散点图。
  • 武汉大学药学院黎威教授课题组:可穿戴式自供电微针贴片用于增强深部黑色素瘤治疗
    黑色素瘤是一种与表皮层黑色素细胞密切相关的高度恶性皮肤癌。经皮递药是手术替代或者补充治疗皮肤癌的有效方法,它可使药物能够穿透皮肤屏障并直接作用于肿瘤部位。然而,随着黑色素瘤的进展,表皮黑色素瘤细胞会持续浸润真皮,形成皮肤深部黑色素瘤。深部皮肤肿瘤的有效治疗依赖于经皮给药系统中的增强药物渗透。虽然微针(MNs)和离子导入技术在经皮给药方面已展现出效率优势,但皮肤弹性、角质层的高电阻和外部电源要求等需求挑战,仍然阻碍了它们治疗深部肿瘤的有效性。基于此,武汉大学药学院黎威教授和姜鹏副教授课题组设计开发了一种集成柔性摩擦电纳米发电机(F-TENG)的可穿戴自供电载药微针(MNs)贴片,旨在增强深部黑色素瘤的治疗。微针由水溶性微针基质材料与带负电荷的pH响应纳米粒子(NPs)混合而成,其中纳米粒子中装载着治疗药物。该装置充分利用MNs和F-TENG的优势(F-TENG能够利用个人机械运动产生电能),治疗性NPs可以在MNs贴片插入皮肤后渗透到深层部位,在酸性肿瘤组织中迅速释放药物。在深部黑色素瘤小鼠模型对比实验中,使用集成的F-MNs贴片的治疗效果优于普通MNs贴片,预示这集成F-MNs贴片在深部肿瘤治疗的巨大潜力。该贴片通过摩方精密microArch® S240(10μm精度)制备完成,相关研究成果以题为“Enhancing Deep-Seated Melanoma Therapy through Wearable Self-Powered Microneedle Patch”的文章发表在《Advanced Materials》。武汉大学药学院博士研究生王陈媛、硕士研究生何光琴和博士研究生赵环环为共同第一作者,武汉大学药学院黎威教授和姜鹏副教授为共同通讯作者。首先,研究者采用气体扩散法合成了具有pH响应性质的Ce6@CaCO3 NPs, Ce6@CaCO3 NPs为100 nm左右均匀分布的球形结构,表面修饰PEG进一步增强纳米粒子的胶体稳定性。在pH = 7.4的中性环境中,纳米粒子维持稳定的结构,使得封装的药物难以释放。在pH = 5.5的酸性环境中,纳米粒子结构被破坏,可实现药物的快速释放(如图1)。图1 Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs的合成与表征a) Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs的合成和药物释放过程示意图。b)合成Ce6@CaCO3 NPs的TEM图像。c)游离Ce6、游离DOX和Ce6(DOX)@CaCO3-PEG的紫外可见光谱(蓝色和黑色虚线矩形分别表示Ce6和DOX的特征吸收峰)。d) DLS测定的Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs的粒径分布。e) Ce6@CaCO3和Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs的Zeta电位。f) Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs在不同pH值(7.4、6.5和5.5)的PBS中孵育0.5 h后的代表性TEM图像。g) Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs在不同pH值(7.4、6.5和5.5)的PBS中随时间变化的水动力直径变化。Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs在不同pH值PBS中h) DOX或i) Ce6的体外释放谱。每个点代表平均值±SD (n = 3个独立重复实验)。***p 图2 Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs的体外行为a) B16-F10细胞对Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs的摄取。b) Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs孵育4 h后细胞摄取量的定量测定c)激光照射下游离Ce6或Ce6@CaCO3-PEG孵育后B16-F10细胞的细胞活力。两种处理的Ce6浓度相当。d)游离DOX或Ce6(DOX)@CaCO3-PEG孵育后B16-F10细胞的细胞活力。两种处理的DOX浓度相当。e) 660 nm激光照射不同处理下B16-F10细胞内ROS检测。f)用Ce6@CaCO3-PEG或Ce6(DOX)@CaCO3-PEG NPs处理B16-F10细胞在激光照射或不照射下的细胞活力。g)不同处理后B16-F10细胞的活/死测定。这些处理具有相同的DOX或Ce6浓度。绿色荧光:钙素-AM 红色荧光:碘化丙啶(PI)。每个点代表平均值±SD (n = 3个独立重复实验)。*p . ns表示无显著性。同时,研究者通过硅橡胶和导电织物制备了一种典型的接触和分离模式的柔性摩擦电层F-TENG,可以通过接触通电和静电感应的耦合效应将生物机械能转化为交流电(AC)输出。然而,为了有效地为离子电泳系统供电,交流输出必须转换成直流(DC)。因此,作者制作了电源管理系统(PMS),将F-TENG的交流转换为直流,同时显著放大电流。最后将柔性的F-TENG与载药微针结合,制备成一种可穿戴的装置(如图3)。 图3 一种工作在接触分离模式下的柔性TENG (F-TENG)。a) F-TENG的原理图(左)和照片(右)。b) F-TENG工作机理示意图。c)短路电流,d)开路电压,e) F-TENG的转移电荷。f)连接整流桥和LED灯的F-TENG输出电流。g)连接电源管理系统和LED灯的F-TENG输出电流。(f)和(g)中的插图是15秒内电流峰值的放大视图和LED灯的光学照片。h)手动驱动F-TENG连接到PMS的电流。i)可穿戴式F-MN贴片原理图。可穿戴的F-MN贴片j)贴在人体手臂上之前和k)贴在没有皮肤穿刺的情况下的演示照片。 微针通过真空浇筑法,将载药的纳米粒子与水溶性基质PVA/suc混合后填入PDMS模具中制备得到,并用导电的PPy作为微针背衬填入。制备好的微针与F-TENG通过导电胶连接得到F-MN装置。此外,将偶联FITC荧光的葡聚糖作为模型药物被微针递送到到皮肤后,通过荧光分布可以看出连接F-TENG的微针装置具有更高效和深部的药物递送(如图4)。图4 F-MN贴片的制备与表征。a) MN贴片制作工艺示意图。b)制备的MN贴片的光学图像和c) SEM图像。d) FITC -葡聚糖负载MN贴片的代表性明场(左)和荧光显微镜图像(右)。e)右旋糖酐-MN贴片插入后大鼠皮肤代表性明场和荧光显微镜图像。f)荧光图像和g)植入或不植入F-TENG的大鼠皮肤后残余MNs的相应荧光强度(FI)。h)代表性显微镜图像,i)药物穿透深度,j)外用葡聚糖溶液或葡聚糖-MN贴片加F-TENG或不加F-TENG后大鼠皮肤组织切片对应的荧光强度。每个点代表平均值±SD (n = 3个独立重复实验)。*p 表示无显著性。微针尺寸:高850 μm,尖端直径10 μm,底座直径400 μm.而后,作者在小鼠体内观察F-TENG产生电流的能力以及在体内药物递送的效果。将F-MN装置应用在小鼠肿瘤部位后,F-TENG能够将运动产生的机械能转化为电能,在小鼠体内维持恒定的电流,有效促进微针中负载的药物向更深部的肿瘤渗透,同时也提高了药物在体内的递送效率和作用时间(如图5)。 图5 F-MN装置提高了体内给药效率。a)经F-MN贴片处理的荷瘤小鼠照片。(插图:治疗小鼠时,MN贴片被连接。正极连接小鼠左前肢,负极连接MN贴片)。b) F-MN贴片作用于肿瘤部位的示意图。c)治疗过程中通过MN贴片的电流。d)不同处理小鼠给药后24 h的荧光图像。红色虚线圈表示肿瘤部位。e)不同处理的荷瘤小鼠及肿瘤部位照片。f)代表性图像,g)相应的药物穿透深度,h)局部应用NPs或MN贴片或f -MN贴片后肿瘤部位组织切片在体内的相对荧光强度。每个点代表平均值±SD (n = 3个独立重复实验)。*p 图6 F-MN贴片在B16-F10黑色素瘤小鼠中的抗肿瘤行为。a)处理过程示意图。b)不同肿瘤深度荷瘤小鼠的代表性超声图像和c)肿瘤组织的组织学切片。d) (c)中的深度量化。e)五组不同处理小鼠的平均肿瘤生长曲线。f)第9天各给药组小鼠肿瘤重量。g)第9天各组离体肿瘤形态。h)各组小鼠治疗后体重。i)各治疗组小鼠存活率曲线。j)各组肿瘤组织切片H&E、Ki67、TUNEL染色分析。每个点代表平均值±SD (n = 5个独立重复实验)。*p 图7 F-MN贴剂的体内生物安全性评价。a)各组主要器官切片H&E染色分析。不同处理后小鼠血清生化指标b)丙氨酸转氨酶(ALT)、c)血尿素氮(BUN)、d)肌酐(CR)、e)总胆红素(TBIL)各组全血中f)白细胞(WBC), g)红细胞(RBC), h)血小板(PLT)的数量。数据以mean±SD (n = 5个独立重复实验)表示,ns表示无统计学意义。结论:在这项研究中,作者开发了一种与F-TENG集成的可穿戴自供电MN贴片,并首次用于治疗深部实体肿瘤。F-MN贴片能够通过可溶解的纳米颗粒将载药的纳米颗粒递送到皮肤中,并通过纳米发电机将个人机械运动转化为电能,从而提供足够的驱动力将治疗性纳米颗粒推进深部肿瘤,进而显著提高药物递送穿透效率。在到达酸性肿瘤位置后,pH响应性NPs表现出快速解离和释放化学分子(DOX)和光敏剂(Ce6),从而显示出强大的协同根除肿瘤细胞的能力。在小鼠深部黑色素瘤模型中,单次给药这种F-MN贴片能够实现明显的肿瘤生长抑制。此外,荷瘤小鼠的生存期明显延长,体内生物安全性令人满意,这表明了该贴片在临床治疗深部实体瘤方面具有很大的潜力。这种有效的装置具有出色的传输能力,可以很轻松地将生物大分子或治疗性NPs经皮输送到深部,将来也可局部或全身用于治疗其他疾病,如糖尿病。
  • 美国修改关于副球菌色素法规
    美国近日发出G/SPS/N/USA/1643/Add.1通报,美食品药物管理局[FDA]公布了一项色素修改的最终法规。允许安全使用副球菌(Paracoccus)色素作为一种三文鱼饲料的色彩添加剂。球菌色素是由一种副球菌(bacterium Paracoccus carotinifaciens)非病原性及非毒性杆菌热杀干细胞组成的,可以含增量的碳酸以调节虾青素的含量。法规规定当虾青素单独或与其它虾青素染色剂联合使用时,成品饲料内副球菌染料中的虾青素的含量不得超过成品饲料的80mg/kg(72克/吨)。   上述法规已获批准。
  • 从“红曲风波”认识软毛青霉酸、桔青霉素和红曲色素
    软毛青霉素及相关青霉菌毒素近期,日本著名药企小林制药被推上了风口浪尖,部分消费者在服用该公司含有红曲成分的保健品后,出现肾脏等方面的健康问题,导致小林制药已撤回8种红曲保健品作为功能性标识食品的备案,其中3种商品已经召回。图片图片来源:财经网一般情况下,红曲类保健食品会检测是否含有已知的真菌毒素—桔青霉素。小林制药表示,他们选择的红曲菌不携带能产生桔青霉素的基因,在原材料测试报告中也的确没有检测到桔青霉素。3月29日,小林制药公司向日本厚生劳动省报告,其红曲产品中导致问题的成分可能为“软毛青霉酸(Puberulic acid)”。软毛青霉酸是在发酵过程中由青霉菌产生的天然毒素。据文献报道,从青霉菌发酵液中已分离出软毛青霉酸(Puberulic acid)、密挤青霉酸(Stipitatic acid)及其三种类似物Viticolins A–C等环庚三烯酚酮类(Tropolone)毒素。青霉菌毒素具有耐高温和侵害实质器官的特性,加热烹调也很难使其毒性减弱。目前,有关软毛青霉酸等青霉菌毒素导致的肾脏毒性报道较少,仍需进行相关研究。由于红曲菌在发酵过程中并不能产生软毛青霉素,有专家推测小林制药的红曲产品可能因为原料受到了青霉菌的污染而产生了软毛青霉酸,但具体原因还需后续的调查确认。相信该事件的发生将进一步促进红曲类食品检测的加强,相关检测标准将在不远的将来应运而生。红曲及其用途图片来源:财经网红曲也叫红曲红、红曲霉、红曲米,其作为一种天然发酵产物,成分复杂,包括多种具有生物活性的物质。红曲可应用于制药、酿酒、食品着色等方面,具有悠久的历史和公认的保健价值,特别是在降血脂、降胆固醇方面具有积极效果。目前,国内生产的红曲主要有三类,分别是酿酒红曲、色素红曲和功能红曲。▶ 酿酒红曲的糖化力高、酯化力强、有独特的曲香,广泛用于各种黄酒、白酒、醋、酱的酿造;▶ 色素红曲的色价很高,是纯天然的食品着色剂,通常用于肉制品、腐乳等食品的着色。▶ 功能红曲是指以大米为原料,用纯培养的红曲菌发酵生成的莫纳可林K(又称洛伐他汀,结构式见下图)等生物活性物质的红曲,常被用作防治心血管疾病的保健品和药品的原材料。各大厂商包括小林制药已将红曲米类食品开发为具有降血脂、降胆固醇功能的保健食品。我国对红曲类产品的使用要求红曲色素,属于复合色素,常用红曲添加剂为大米的红曲酶发酵产物或其提取物,为多种天然色素的混合物。目前, 已确定出化学结构的红曲色素主要有6种,包括黄色素、橙色素和红色素,结构如下:随着科学认识的不断深入和对食品安全要求的提高,我国对红曲及其制品的应用和管理日趋严格。国家食品药品监督管理局在《关于以红曲等为原料保健食品产品申报与审评有关事项的通知》中规定,红曲推荐量每日暂定不超过2g,产品中洛伐他汀应当来源于红曲,总洛伐他汀推荐量每日暂定不超过10mg,且不适宜在少年儿童、孕妇、哺乳人群使用等;《GB 2760-2024食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》红曲米及红曲红作为着色剂可用于腐乳、碳酸饮料、果冻、糕点、配制酒等多种食品中,其中风味发酵乳中的最大使用量不得超过0.8g/kg,糕点中的使用量不得超过0.9g/kg,焙烤食品馅料及表面用挂浆不得超过1.0g/kg;另外,《GB 5009.150-2016食品安全国家标准 食品中红曲色素的测定》规定了对风味发酵乳、果酱、腐乳、干杏仁、糖果、方便面制品等食品中红曲红素、红曲素、红曲红胺3种红曲色素的测定方法。值得注意的是,红曲色素(又称红曲红)是发酵产生的多种天然色素的混合物,由于发酵工艺的不同,市售红曲色素所含的色素成分及其含量不尽相同,也并非上述所有常见成分均可检出。另外,GB 5009.150-2016和SN/T 3843-2014标准中将红曲红胺的CAS号3627-51-8写为126631-93-4,而后者对应的名称为N-芴甲氧羰基-8-氨基辛酸(N-Fmoc-8-Aminooctanoic acid),对应的结构式见下图。尽管该化合物的分子式和分子量与红曲红胺完全相同,导致二者在一级质谱的分子离子峰完全相同(均为[M+H]+ = 382, [M-H]- = 380),然而二者的化学结构却差别巨大,因此其核磁谱图和二级质谱上的碎片离子峰有显著差别,在HPLC上的出峰时间和UV吸收也有明显的区别。检测人员在标准物质选择、采购和使用中应多加注意,避免产生错误的检测结果。红曲在发酵过程中可能因菌株变异或污染产生桔青霉素,其有很强的肾脏毒性,摄入过量会导致肾损害,因此桔青霉素是红曲类产品必检项。《GB 1886.181-2016食品安全国家标准 食品添加剂 红曲红》中规定红曲红中桔青霉素的限量为0.04 mg/kg。《GB 1886.66-2015食品安全国家标准 食品添加剂 红曲黄色素》中规定红曲黄色素中桔青霉素的限量为1.0 mg/kg。阿尔塔科技作为被CNAS认可的食品安全检测有机标准物质生产制造商,根据科研单位检测热点,快速响应,积极研发软毛青霉酸、桔青霉素、红曲色素及其相关产品,助力食品安全检测,为守护广大消费者的身体健康保驾护航。 红曲发酵过程可能产生的相关毒素标准品:了解更多产品或需要定制服务,请联系我们
  • 美国FDA阐述色素添加剂法规
    色素添加剂在食品、药品、化妆品、和医药器械领域方面的添加要求要由美国食品及药品管理局批准。   根据特定的色素添加剂来控制类型和检测频率。对于绝大部分的色素添加剂来说,审批的程序是美国食品及药品管理局色素分批认证程序,逐批认证。为了给色素分类认证,制造商根据认证要求文件,提供给美国FDA一份色素添加剂的代表样品。然后由美国FDA分析这种色素添加剂的样品类型,确保符合该种色素添加剂的型号。   但是对于个别色素添别剂,这种色素分批认证是不合适的。注册公司协助企业通过执行添加剂法规来遵守美国FDA的色素添加剂的要求。与此同时,也公布了美国FDA公布的联邦公告,添加剂数据库,安全通知,标签指导和警示中的有关信息由美国FDA起草。
  • 日立UH5700 | 色素溶液的色度分析
    1. 前言色度分析传统上使用目视比色法,通过人眼比对标准物的颜色来确定,具有较大的主观性。紫外可见近红外分光光度计UH5700中的操作软件UV Solutions Plus标配峰值检测、半峰宽计算和四则运算功能。同时,通过UV Solutions Plus的选配程序包,可以直接进行色度计算。 此次实验,使用UH5700测定5个色素样品的吸收光谱,并依据日本标准JIS Z8781-3等计算色度。2. 应用数据紫外可见近红外分光光度计UH5700的选配程序包可以实现色度计算,包括三刺激值,XYZ表色系统、L*a*b*表色系统、Hunter Lab表色系统、L*u*v表色系统、黄变指数、色差等。图1 紫外可见近红外分光光度计UH5700以甲苯溶液为参比溶液,使用UH5700测定色素溶液的吸收光谱如下图所示。图2 色素溶液的吸收光谱利用 UV Solutions Plus 选配程序包,按照日本产业标准(JIS Z 8781-3:2016)中规定的CIE三刺激值,计算360~830 nm波长的色度。xy色度图如下所示。图3 五种色素溶液在XYZ表色系统中的色度图图中的曲线为光谱曲线,曲线上的每一点为单色波长,曲线中所包围的部分,其中任何一点即对应的颜色。如五种色素溶液在色度图中的位置如图所示。4号色素溶液和5号色素溶液的色调接近。 另外,通过在选配程序包中选择色度计算的波长范围和计算方法,能够同时计算多个样品的色度,并以表格一览显示。表1 色素溶液的色度计算结果3. 结论使用日立台式紫外可见近红外分光光度计UH5700可以根据不同的标准进行各种颜色计算,确保结果的准确性,助力科研人员定量分析物质的色度值和色差。除色度分析之外,UH5700的丰富附件还可满足液体样品的连续和微量分析,以及固体样品的透过率和反射率测定。
  • HunterLab测色仪在色素炭黑中的应用
    一、炭黑的特性 1、黑度与粒径 黑度直接与炭黑的粒径相关,粒径越小,比表面积愈大,炭黑的黑度越高。这是因为尽管原生粒子已熔合成原生聚集体,但是其比表仍能起作用,原生粒子细,则凝聚体的比表面积越大。所显现的颜色更黑,防紫外线作用更佳。由于细粒子炭黑的吸光率比粗粒子炭黑的更高,所以着色力更强。但是当粒径减小时,由于蓝光被优先吸收,为此色调变成棕相。细微原生粒子赋予炭黑更大的比表面积,同时增加分散难度,一般通过表面处理可调整润湿性和改善分散性。 2、结构 炭黑粒子不仅以原生粒子形式存在,而且在生产熔结成凝聚体。这种凝聚体是由原生粒子经化学键结合。在凝聚过程中,由大量链枝的原生凝聚体构成的炭黑称为高结构炭黑。而原生凝聚体由较少链枝原生粒子组成的炭黑,则称为低结构炭黑。 3、表面化学性 炭黑的生产方法不同其表面化学性能各异。炭黑表面具有不同的含氧官能团(如羧基、内脂基、酚基、羰基等)。一般含氧官能团高的炭黑,挥发份高,其色调可调性能好,其流动度也较高。炭黑样品加热至825± 25oC后以百分重量损失表示炭黑挥发份。炭黑含氧基因越多,挥发份也越大。 4、吸湿性和密度 炭黑是一种表面积大的物质,因此有一定的吸湿性。炭黑的吸湿量主要由表面积大小来决定。可加强措施,尤其在包装、贮存和运输的过程采取办法以减少产品的吸湿性。因为水分(吸湿量)过高会对加工过程带来麻烦,所以要求对某些品种炭黑有特殊包装。粉状的色素炭黑还是粒状的色素炭黑用于给定的塑料掺混物取决于分散的类型和树脂的特性,但加工能力也是很重要的因素,目前多数分散设备都能发挥剪切力,足以将粒状分散均匀。 二、炭黑在塑料行业中的应用 在选择之前,必须确定其用途,例如用于着色、防紫外光、或导电等等。 1、着色用炭黑 色素炭黑一般都能较好的给塑料着色,可根据着色特性或物化性能选用色素炭黑,着色用炭黑的品种的选择基本上都是随成品必须达到的黑度而定。 用极细的色素炭黑可以完成黑度要求特别高的着色; PE垃圾袋,塑料袋,电缆材料之类产品只需中等水平黑度,可以用比表面积较低,结构较高的炭黑品种;塑料调色时,炭黑称量和配料时出现的微小误差,均会导致明显的色差,因此,宜采用粒径较大,着色力较差的低色素炭黑,这样炭黑用量可以稍大,称量误差相对小些,并有分散性较好、价格较低的优点。对于灰色塑料,采用细粒色素炭黑往往呈现棕相灰色,而采用粗粒子色素炭黑可产生蓝相灰色。与其它有机颜料相比,炭黑除分散较困难外,其他性能均较好。科学的炭黑配合量,可提供较好的抗静电或导电性。 炭黑基本上是无毒的,但较易飞扬和污染,故常以色母粒形式供塑料行业使用,在消除污染的同时也改善了炭黑在塑料中的分散。炭黑作为塑料用颜料,常用的剂型有粉状和粒状。粒状炭黑飞扬较少,但分散较难,故在塑料着色中采用粉状炭黑。 2、紫外线防护性的应用 炭黑在塑料工业中用途之一是防紫外光老化,由于炭黑有较高的吸光性,因而能有效的防止塑料受阳光照射而产生光氧化降解。炭黑作为紫外光稳定剂在塑料中所起的作用有:把光能转化为热能;保护塑料表面而免遭一定波长的射线照射;截取原子团而产生防老化作用,从而阻止催化降解。紫外线对聚烯烃特别有害,试验证明当一定细度的炭黑的浓度为百分之二时可以达到完美的紫外线屏蔽作用。炭黑对塑料的紫外线老化的防护作用,取决于炭黑的粒径、结构和表面化学性。炭黑的粒径较小时,因表面积增大,其吸收光或遮光能力增加,故紫外线防护作用增强,但粒径小于20nm,其防护作用趋于同一水平,原因是当粒径过小时,逆向散射减小,而继续向前的光会威胁聚合物的稳定性。结构较低,即聚集体尺寸较小时,因聚集体几何体积较小,会增强对聚合物的防护作用,这也是结构较低的炭黑较黑的原因。炭黑表面含氧基团较多,即挥发份较高时,能消除聚合物分解时产生的基因,因此防护作用也增强。 三、HunterLab测色仪(着色强度测定仪)在炭黑中的应用 1、表面特征的影响 在测配色时,光泽和表面平整度对色差的影响最大。当光线照射到凹凸不平的表面时,在表面产生反射、散射和吸收。粗糙的表面散射大,反射和吸收少,所以人眼的反应光泽就低,而高光的涂料表面平整,反射大,散射少,人眼对光泽就特别敏感,光泽就高。从实际生产的经济性考虑,我们根据用途选择合适粒径的消光剂,它决定了消光剂的用量,一般消光剂用量越多,光泽越低。HunterLab测色仪(0o/45o或45o/0 o)对黑颜色和白颜色光泽的敏感性特强。以高色素炭黑为例,光泽从20降到10时,△E要相差1左右(用类似人眼的0o/45 o测量),而其他品牌的测色仪测相同的黑板时,△E误差在0.3以内。其他颜色光泽在± 1.0度范围内变化时,△E一般在允许误差范围以内。当然在生产中颜料的耐高温性和烘烤的时间和温度也会对△E产生较大影响,这是在实际生产中要特别当心的问题。 2、台式、手提式设备一应俱全 台式测色仪LabScan XE和新款手提式测色仪MiniScan EZ,他们有其独特的优势,测试结果保持与人眼一致, MiniScan EZ轻巧、携带方便,可直接测量读取数据,也可以连接到电脑上输出数据。特别在生产线或与客户交流时,可以充分发挥其携带方便的优势。
  • 美国FDA修订色素添加剂规例
    美国食品药品监督管理局(FDA)近日修订了色素添加剂规例,提供来自干燥的蓝藻提取液的安全使用,以作为一种色素添加剂用于糖果和口香糖,并将于9月13日开始生效。螺旋藻作为一种食物在许多国家有悠久的历史,是一种蓝绿色丝状蓝藻,常自然长于淡水和海洋栖息地。   FDA指出,螺旋藻必须不含任何杂质,在某种程度上来说可通过良好生产规范避免。此外。螺旋藻还不应含有超过2毫克/千克的铅,2毫克/千克的砷或1毫克/千克的汞,同时微囊藻 (Microcystin) 毒素测试必须为阴性。针对该物质的色素添加剂认证对于保护公众健康是没有必要的,因此根据联邦食品药品化妆品法《FD&C》法案第721(c)部分认证要求可获得豁免。   【原标题】美国FDA修订色素添加剂规例允许使用螺旋藻提取液
  • 正投影机光色参数快速测试仪用于大屏幕投影机光色参数的快速测量仪器
    正投影机光色参数快速测试仪 投影机光色参数检测仪 型号:HAD-XYI-XI正投影机光色参数快速测试仪用于大屏幕投影机光色参数的快速测量仪器,特别适用于投影机生产线上的自动调校。其测量对象包括屏幕光通量、屏幕的光通量不均匀性、对比度、色品坐标和色温。 仪器预设标准A光源及D65光源文件,并可根据用户需求,由用户意设定存储标准光源。仪器可根据不同参考光源自动修正探测器的光谱参数误差,达到屏幕的总光通量、屏幕的光通量不均匀性、色品坐标和色温的密测量。其测量度达到际水平。 仪器软件运行于Windows98/NT环境,具有友好的图形界面、能强大。采用图形化实体数据显示,可以行柱形图和亮度图切换及数据打印输出。仪器同时具有实时通讯能,适用于屏幕参数的在线测量及控制。正投影机光色参数测量,9点照度测量,颜色参数测量术标: 光通量测量范围:0-8000lm(按4m2计算) 仪器度:优于±4% 分辨率:0.05%(满量程) 线性:±1% 作温度:0-50℃ 投影屏幕测试探测器:1-9探测器为照度探测器,5、10、11探测器为色度探测器(根据用户要求仪器也可附带15个探测器) 探测器V(λ)匹配达家照度计标准 具有色温修正软件, 可确测量不同色温的光通量及色品坐标 总光通量自动计算和屏幕光通量不均匀性计算及其相关软件 微机控制及上位机通讯。 刷新频率:3次/s 供电电源:220V交流电 保修期:1年 随机附件:相关软件和说明书
  • 饭店厨房变“化工厂” 色素染出鲜亮三黄鸡
    中餐自古就讲究色香味俱全,如今餐馆为了在色上吸引顾客,不惜走捷径,用化学色素来调色。"有些小餐馆在做三黄鸡的时候,将大量的柠檬黄等色素涂到鸡皮上面,看上去颜色很诱人,在糖醋里脊、红烧肉等传统名菜中也越来越多地用化学色素来塑造颜色。"4月10日,青岛酒店管理学院的王志兴讲师为记者展示了餐馆中四道常见菜:三黄鸡、糖醋里脊、红烧肉、桂花糖藕的自然烹饪方法和添加色素的烹饪方法,其中的颜色对比效果非常明显。   现状   中餐也用上合成色素   走在超市随便拿起一个果冻、饮料,上面都会写着这样那样的色素和香料,很多消费者也意识到这个问题 ,但是出现在饭店餐桌上的色素却是没有任何说明,让人防不胜防。   " 目前在蛋糕的制作中,化学色素的使用比较普遍,像糕点中的一些水果点缀比如巧克力、草莓、猕猴桃等都是用色素调制出来的。"一位业内人士告诉记者,更有甚者这些色素的使用逐渐蔓延到了中餐领域,像玉米馒头、红烧肉、三黄鸡等菜品都添加了合成色素。以前最普遍易用的发色剂是亚硝酸盐,在做肉菜之前,将亚硝酸盐放入肉里,炒出来的肉会很鲜嫩,颜色看上去也很鲜艳。   根据资料显示,被称为"食品化妆品"的色素已经越来越广泛地使用在食品领域,在这些添加到食品的色素中,天然色素只占不足20% ,其余的均为合成色素。   赤橙黄绿啥色素都有   "现在大多数小餐馆里都会使用化学色素。"在市南一家机关食堂工作的高师傅告诉记者,"特别是一些讲究颜色的菜品,厨师往往为了塑造出鲜艳的颜色,都会大量使用化学色素。"而这些餐馆中化学色素的来源也大多都是从南山市场上买到的。   记者调查发现,在台东南山市场,随便一家调味品专卖店都可以买到不同种类的色素,有专门用来做菜的,还有专门用来做糕点的,再就是添加在冰激凌和饮料当中的。"做热菜和做凉菜也不一样,一种是粉末状的,这个价格比较贵,但做出来的效果比较好,适合各种菜品,另一种是固体状的,这个价格便宜,适合做热菜,不过凉了之后会有凝固。"南山市场一位老板向记者介绍道。   大多数调味品店的老板甚至对于各种颜色的化学色素的用途都熟稔在胸,只要你说做什么菜,他们大多都会脱口而出告诉你该使用哪种颜色的色素。"要是做红烧肉等给肉类添色的,就用这种橙红色素,做出来是亮红的,要是做三黄鸡等腌卤的鸡鸭类,就用合成色素柠檬黄,做糕点上那些绿色点缀,或者做凉菜等,可以用绿色素。"老板谈起他店里的色素归纳道,"总之,赤橙黄绿青蓝紫各种各样的颜色都有。"   餐馆一次买回去4桶   实际上,南山市场的化学色素大多没有光明正大地摆放在架子上,而是只有顾客有需要时老板才会拿出来,而且一些比较警惕的老板只卖给熟人。   4月9日上午10时左右,南山市场一家调味品商店里,各种不同的调味品摆满了架子,甚至包括之前一直热炒的一滴香。记者正在参观时,来了几个年轻人,看上去跟老板很熟悉的样子。"黄的和红的来3桶,绿色的来1桶。"原来这几个年轻人是一家餐馆的工作人员,正是来买做菜时添加的化学色素。   事后,记者在另一家店铺里得知,装的化学色素一桶1斤,85元,是很多餐馆里做菜常用的化学色素。"做菜用的色素有,只不过没有摆出来。"另一家调味品店的老板说,一般来说红色和黄色的色素卖得最好。"红色和黄色可以调配出不同的颜色,既可以单独使用,还可以混合使用。这两种颜色每天能卖一二十桶。"   "做菜的都清楚怎么用"   记者致电东莞市添之彩食品厂了解瓶装色素里的具体成分,对方告诉记者,以一瓶柠檬黄为例,里面的成分是合成柠檬黄色素、水、葡萄糖浆、山梨酸钾、甘油和黄原胶等成分。至于具体色素含量,对方称"这个是秘密,不能透露。"而至于具体用法,对方则直接称,"厨房里做菜的师傅都清楚怎么用,你放心好了。"   既然对方称这是可以使用的色素,那为什么市场上还一直藏着掖着呢?"这些化学合成色素是不能添加的,而且之前也查处过一些非法使用色素的餐馆。"青岛市卫生监督局一位工作人员告诉记者,不过现在这部分的管理职能已经交给食药监局了。随后记者又致电食药监局,工作人员称"国家有规定,餐馆中不能添加使用有关色素。"但至于具体的处罚措施,对方称并不清楚。   中国农业大学食品学院营养与食品安全系主任何计国表示,化学合成色素是有一定毒性的,使用时量最好控制在一定范围内。记者了解到,一般使用的色素分为天然色素和合成色素。而由于化学合成色素有性质稳定、染色效果好、价格便宜等诸多优点,所以市场上常见的大多都是化学合成色素。它的生产方式从煤焦油中提取,或以苯、甲苯、萘等芳烃类化合物为原料合成,其化学构成物质本身对人体有害,同时在合成过程中产生的杂质如砷、汞、苯酚、苯胺、铅等均有不同程度的毒性。   实验   化学色素对比传统做法   既然化学色素的应用这么普遍,那么究竟添加了化学色素的菜品跟自然烹饪的相比颜色有什么变化呢?   4月10日上午,记者带着从南山市场买到的橙红色、柠檬黄、亮绿色三种化学色素来到青岛酒店管理学院进行了烹饪实验,烹饪学院招生就业实训办公室主任讲师王志兴展示了餐馆中四道常用菜三黄鸡、糖醋里脊、红烧肉、桂花糖藕的自然烹饪方法和添加色素的烹饪方法,其中的颜色对比效果非常明显。
  • “民以食为天,食以安为先”:配制酒中的色素分离方法
    民以食为天,食以安为先近年来,随着人民群众对各类食品的风味和健康要求越来越高,大家逐渐发现,很多包装食品或饮品中都会包含大量成分繁多复杂的食品添加剂,不少人开始对这些食品添加剂的安全性提出质疑。诚然,如果食品厂家都能严格遵守国家的有关规定使用食品添加剂,那它们不仅是安全的,更能为我们提供更美味更便宜的食品。然而,总是存在一部分不法商家,违规使用食品添加剂试图达到以次充好的假象:例如,根据国标GB2760,只有配制酒和预调酒允许按照一定的最大使用量要求添加少量人工合成色素,其他酒类严禁添加人工合成色素。而那些不法商家为了将自家的低价配制酒卖出高档酒的价格,便会大量添加各类人工合成色素以模拟酿造多年的天然酒的颜色以迷惑消费者,这势必会影响消费者的身体健康。针对这类食品添加剂的检测方法最常用的是液相色谱法,而对样品的前处理则可以采用SPE固相萃取法。比起使用聚乙酰胺吸附再酸洗、水洗、碱洗的一些传统方法,固相萃取法的操作更加简便,损失更小,减少了操作人员对有毒有害溶剂的接触,有助于改进分析结果的重复性,提高样品处理效率。步琦公司的平行定量浓缩仪Syncoreplus,不仅可以通过减压蒸馏快速完成样品的蒸干或定容浓缩,还支持添加SPE高级模块等各类扩展模块实现固相萃取等更多其他功能。以下是使用步琦Syncoreplus搭配SPE高级模块分离意大利金巴利酒中的食用色素的实验全流程。1仪器设备步琦SyncoreplusAnalystR-12与SPE高级模块玻璃件:12根步琦Analyst样品管,1.0m残留体积真空泵:带I-300Pro控制器的V-300真空泵,需连接自来水冷却或搭配步琦冷水机F-308冷水机2材料和试剂C18SPE柱(SPE-R30130B-06P)富含偶氮玉红(E122),酒石黄(E102)和亮蓝FCF(E133)的金巴利酒巴斯德吸管酒石黄(E102)偶氮玉红(E122)亮蓝FCF(E133)3实验步骤在样品架的每个位置加入15mL水,关闭盖子并旋紧螺母样品制备:不需要3.1SPE步骤SPE模块选用C18柱,将所有的旋塞阀拨到中间位置,设置压力在800mbar(如图1)滴10滴乙醇和5mL去离子水来平衡柱子(5mL是柱子的容积)将旋塞阀调节到右边位置,转移液体到废液瓶,之后将旋塞阀调回到停止位置吸取5mL金巴利酒到柱子里(如图2)转移液体到废液瓶(如图3)用10滴乙醇和5mL去离子水冲洗液体到废液瓶将旋塞阀旋到左边位置,用5mL乙醇直接洗脱馏分到Syncoreplus样品管图1图2图3经过SPE模块步骤之后,洗脱的黄绿色馏分直接用Syncoreplus蒸发浓缩到一定的体积,参数设置见下表:分离结果如下图,红色的偶氮玉红不能被吸附在柱子上,直接被洗到容器里(右侧),其它被洗脱到接收瓶(左侧),蒸发完之后,分馏的样品被浓缩到一定的体积,使用Syncoreplus的SPE高级模块的便捷高效的样品前处理过程至此就已完成。
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