[color=#444444]西服碱做高分辨率质谱用什么离子源[/color]
目的:食品中某物质非定向筛查(即不通过标准品对比保留时间)确定是否含有目标物质仪器设备:超高效液相色谱,APCI离子源,飞行时间高分辨质谱流动相:甲醇,1%甲酸水提取方法:采用的定向分析该目标化合物的方法分析方法:参考的预期目标化合物在环境污染方面的定向筛查的仪器方法以及仪器条件。APCI负离子模式。目前疑惑:我通过超高效液相色谱与飞行时间高分辨质谱联用,打了一级质谱,但是质谱m/z中既没有出现目标化合物的M±1的峰,也没有经过查文献[M-16][M-30]的峰,而是很多数值和目标物质相差相当多的m/z峰。这是为什么呢?怎么准确找到准分子离子峰呢?高分辨质谱只能得到分子量么?能推断准确分子式么?能推断具体结构么?据我查阅文献所知[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url](EI)高分辨质谱有NIST数据库可以通过对比数据库确定化合物的分子式以及结构。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]有相关的数据库供查询对比么?本人是一名仪器分析初学者小菜鸟。希望各位老师不吝赐教,万分感谢
高分辨质谱与低分辨质谱不管在仪器上还是应用上都不一样,那我们就一起来谈谈这个问题吧本期主题:高分辨质谱与低分辨质谱讨论内容:1、高分辨质谱与低分辨质谱的分子量范围2、高分辨质谱与低分辨质谱的灵敏度差异3、高分辨质谱与低分辨质谱的定性定量...................等等相关的讨论筒子们,赶快参与吧,让新手也好对质谱有个全面了解~~~==========质=谱=比=较=帖=子=汇=总==========1、无机质谱与有机质谱的离子体形成区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120503/4012287/2、气质与液质的离子源区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120505/4016562/3、ICPMS、GCMS、LCMS气体的选择与使用http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120507/4019049/4、质谱的进样方式与进样接口的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120510/4025193/5、质谱质量分析器的类型、区别及特点http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120519/4042099/6、高分辨质谱与低分辨质谱的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120525/4053208/
[color=#333333]有没有某些化合物他的核磁氢谱和碳谱都正确,但是高分辨质谱却不对,该化合物的极性特别小,换了离子源也做不出来,这是什么情况?[/color]
我的化合物结构为含磺酸钠的结构,chemdraw中计算精准分子量2008.6826,高分辨质谱时能找到1986.7004的峰,但是这个峰是M-Na+H峰,另外也能找到M-Na峰,但是M-Na+H峰高于M-Na峰,我想问下在负离子模式下可能出现M-Na+H峰吗?或者换个说法,将结构中的Na换成H,那该结构的精准分子量1986.7006,而负离子模式下可能出现M峰?(离子源是ESI)。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/01/202201211614023078_7512_2360491_3.png[/img]
请问[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]和高分辨质谱和高分辨[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的区别是什么?本人要做未知水样的定性和定量,但不知道如何选择仪器,希望大家帮帮忙,谢谢。
岛津制作所(SSI)宣布发布新型高分辨气相色谱质谱联用仪GCMS-QP2020。该仪器的创新之处在于配备了专用多功能离子源、专利高速扫描控制和新超快分子涡轮泵。集这些创新点与综合数据库、多功能样品进样装置于一体的整体系统能够为环境、食品和法医等领域的实验室提供卓越的仪器性能和量身定做的配置需求。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601061626_580929_2984502_3.jpg GCMS-QP2020的质谱配备的新型大容量分子涡轮泵能实现更高效的抽真空功能。这一特点显著提升氦气、氢气、甚至是氮气作为载气时的仪器性能。泵的微分排气系统能在使用任何载气时实现分别排空离子源和四极杆系统以达到最佳仪器条件。 专利离子源技术使得GCMS-QP2020获得了稳定的高灵敏度分析能力。此技术为离子产生提供了稳定的空间,防止离子源交互带来的污染,并能够在不卸真空的情况下实现离子源模式切换。操作人员可在不浪费卸真空和换源时间的情况下做快速化学源分析(Quick-CI)。Quick-CI 功能使操作者在使用EI源时可通过引入试剂气体找到分子离子。另外,智能SIM(选择离子监测)功能可自动生成高灵敏度的多组分交互SIM分析程序。 “此系统的创新为研究者们带来了更多方便。在智能SIM功能提高了灵敏度的同时,Quick-CI给操作者带来了更长的运行时间。” 岛津制作所市场副总裁Terry Adams说。“系统不仅具有智能SIM、节能模式等特点,还结合有能配合各类载气的强劲新型分子涡轮泵、卓越的系统稳定性。用户可以通过使用此系统有效的节省资金并提高实验室效率。” 改进后的GCMS解决方案软件为GCMS-QP2020提供了更加直观的操控系统。专业并可供选择的数据库能够为大多数的色谱柱提供附加的保留指数。这些保留指数能够支持高精度的定性分析、定量方法开发和筛查。用户可根据需要选择进样设备来满足特定的分析需求。
苯醌做高分辨质谱,ESI负离子模式,仪器型号是[font=宋体]德国[/font][font='Times New Roman','serif']Thermo Scientific [/font][font=宋体]公司[/font][font='Times New Roman','serif']Q Exactive[/font][font=宋体]高分辨[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url],质谱出108,为M而不是M-1,求解?[/font][font=宋体][/font][font=宋体][/font]
杂质分子量为300.1,用低分辨全扫描的分子离子301.1,二级碎片为212.2和86.2,用高分辨定性时分子离子为301.1353,但二级碎片却与低分辨质谱不太一致,分别为198.0354和86.0902,这是因为仪器不一样导致的吗?低分辨是安捷伦三重四级,高分辨质谱为waters飞行时间质谱,同一物质二级碎片不一致是可以接受的吗?
离子源的性能决定了离子化效率,很大程度上决定了质谱仪的灵敏度。常见的离子化方式有两种:一种是样品在离子源中以气体的形式被离子化,另一种为从固体表面或溶液中溅射出带电离子。在很多情况下进样和离子化同时进行。本期主题:气质与液质的离子源区别讨论内容:1、气质与液质常用的离子源2、气质与液质的离子源在离子形成上主要区别在哪?筒子们,赶快参与吧,让新手也好对质谱有个全面了解~~~==========质=谱=比=较=帖=子=汇总==========1、无机质谱与有机质谱的离子体形成区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120503/4012287/2、气质与液质的离子源区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120505/4016562/3、ICPMS、GCMS、LCMS气体的选择与使用http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120507/4019049/4、质谱的进样方式与进样接口的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120510/4025193/5、质谱质量分析器的类型、区别及特点http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120519/4042099/6、高分辨质谱与低分辨质谱的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120525/4053208/
淘宝上有高分辨质谱测试150元,液质联用800元,提供正式发票,贵吗?下面链接就是:http://item.taobao.com/auction/item_detail.htm?item_num_id=9363245458http://item.taobao.com/auction/item_detail.htm?item_num_id=9363359904有更便宜的地方可以做吗?时间较宽裕,要求有发票,需要报销!
请问结构鉴定时,通常用到高分辨质谱,高分辨质谱哪种类型的呢?傅立叶变换?离子阱?飞行时间?四级杆是不是很难达到呢?
[color=#444444]各位大侠,请问在做高分辨质谱的时候,负离子模式有没有结合OH-离子才显示负电荷的?[/color]
在进行未知物的一级高分辨质谱图扫描时,从扫出来的图谱上怎么样确定哪个质荷比(有多个质荷比)是准分子离子
请问api4000 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]是高分辨率质谱吗
各位大侠,如题,液相色谱与高分辨质谱联用应该如何确定LOD和LOQ?
所谓分辨本领,是指质谱仪分开相邻质量数离子的能力。质谱仪的分辨本领由几个因素决定:(i)离子通道的半径;(ii)加速器与收集器狭缝宽度;(iii)离子源的性质。质谱仪的分辨本领几乎决定了仪器的价格。分辨率在500左右的质谱仪可以满足一般有机分析的要求,此类仪器的质量分析器一般是四极滤质器、离子阱等,仪器价格相对较低。若要进行准确的同位素质量及有机分子质量的准确测定,则需要使用分辨率大于10000的高分辨率质谱仪,这类质谱仪一般采用双聚焦磁式质量分析器。目前这种仪器分辨率可达100000,当然其价格也将会是低分辨率仪器的4倍以上。
[color=#444444]对油品进行高分辨质谱分析对油品的量有什么要求?对油品需要预处理吗?[color=#444444](美国Thermo Finnigan DSQ[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪)[/color][/color]
[color=#444444]从事高分辨质谱分析多年,去年新安装一台布鲁克的高分辨质谱(FT-ICR MS,傅里叶变换离子回旋共振质谱),配备电喷雾、大气压化学电离等多个电离源,主要用于天然产物和复杂有机大分子组成分析,希望和大家交流。[/color]
一般在生活中肾脏是药物排泄的主要器官。但是药物排泄过程的正常与否关系到药效强度、药效维持时间以及毒副作用。所以,这是我们必须要借助一些科学例如高分辨质谱技术来助力药物。近年来,高分辨质谱成像技术的诞生为定位药物组织分布研究提供了全新的技术和思路。质谱成像是以质谱技术为基础的可视化方法,通过质谱离子源直接扫描生物样本,可以在一张组织切片上同时分析数百种分子的空间分布特征,已成为精确解析药物分子及其代谢产物组织空间分布的关键技术之一,应用于药物ADME的研究。本文将主要介绍TransMIT AP-SMALDI 10高分辨率质谱成像系统如何一步步揭秘伊马替尼在小鼠肾脏组织中的空间分布特征。TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统是目前少有的集高空间分辨率和高质量精度于一体的质谱成像系统。该系统采用常压基质辅助激光解吸电离技术,通过先进的准直光束聚焦实现了5μm的成像分辨率;质谱端搭载Thermo Scientific? Q Exactive?系列质谱仪,保证了离子分析的高质量分辨率和高质量精度。研究首先采用35μm中等空间分辨率分析了内源性物质和伊马替尼在小鼠肾脏组织中的空间分布特征。MALDI质谱成像能够准确的可视化肾脏组织中磷脂分子的组织分布特征:其中PC(32:0)(绿色)、PC(40:6)(蓝色)、PC(38:5)(红色)分别特异性分布于肾皮质、外髓质外带和外髓质内带。由此可见,质谱成像技术突破了传统H&E染色只能提供组织形态和变化特征的局限性。重要的是,在无需荧光探针或放射性同位素标记的情况下,质谱成像实现了伊马替尼的组织空间定位。根据质谱成像的检测结果,常容易判断出伊马替尼主要分布在小鼠肾脏的外髓质外带。为了获得更为精确的空间分布特征,随后采用10μm高空间分辨率对肾外髓质外带的局部组织进行了深度分析。高空间分辨率MALDI质谱成像为我们呈现了更为准确清晰的内源性物质和药物空间分布特征。研究结果发现,伊马替尼的空间分布和直小血管之间存在着紧密联系。此外,如图2D所示,由于原位分析不可避免的引入多种干扰因素,如果质谱成像设备的质量分辨率较低,图2D中两个相邻的质谱峰则无法区分,导致成像结果不准确。因此,高质量精度和分辨率是保证质谱成像结果准确可靠的必要条件。综上所述,研究成功的揭示了伊马替尼在重要排泄器官肾脏中的组织分布特征,同时也获取了组织中各种内源性化合物的空间分布信息,为研究药物分子的累积和排泄机制提供了可靠的科学依据。TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统集高空间分辨率、高质量分辨率和高质量精度于一身,不仅成为了药代动力学研究的利器,也应用于肿瘤标志物研究、植物次生代谢物研究、药用植物药效成分研究、微生物和单细胞研究等。未来,期待TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统为我国药物研发人员和各领域科研工作者带来更多的惊喜,加快研究进程,加速成果转化。
大神们,最近实验室在开展二噁英项目,购买了一台赛默飞的高分辨[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-高分辨质谱仪,在准备校准,但不知道得用哪个校准规范合适?是否可用JJF 1164-2006台式[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪校准规范?
[align=center][font='times new roman'][size=16px]超高分辨傅立叶变换离子回旋共振质谱仪的应用[/size][/font][/align][align=center][/align][font='宋体'][size=16px]中广测配备了傅立叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR-MS),具有超高的质量精确度和分辨率,在未知化合物鉴定、食品保健品及化妆品的非法添加及掺杂筛查、药物分析及药物代谢研究、环境污染物及代谢物分析、聚合物分析、石油组分分析、生物组学应用等方面具有灵敏度高、准确性好、分析速度快等优势。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271052547320_8794_2862401_3.png[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=16px][color=#000000]美国布鲁克Solarix XR 7.0T FT-ICR-MS[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px][color=#000000]一、仪器信息[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]1.仪器名称:超高分辨傅立叶变换离子回旋共振质谱仪[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]2.英文名称:[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]Ultra High Definition Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance Mass Spectrometry[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]3.生产制造商:美国布鲁克?道尔顿公司[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]4.型号:Solarix XR 7.0T[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]二、主要技术参数[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]1.主要配置离子源:电喷雾源(ESI)、大气压化学电离源(APCI)、基体辅助激光解析源(MALDI)和实时直接分析源(DART),其中ESI源和MALDI源可直接快速切换。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]2.分辨率:1,000,000 (半峰宽)。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]3.灵敏度:S/N10(ESI:100 amol 泛素;MALDI:250 amol Glufib 多肽)。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]4.质量准确度:0.6 ppm (内标法);2.0 ppm (外标法)。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]三、应用领域[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]生命科学、环境健康、生物医药、食品安全、石油化工、新材料等领域。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]四、服务范围[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]1.复杂样本中小分子有机化合物的定性或定量分析:食品、保健品及化妆品中非法添加或掺杂分析;西药/中药成分分析;药物基因毒性杂质及其它痕量杂质分析;复杂生物样本中药物代谢产物分析;复杂介质中痕量环境污染物及代谢产物分析;有机合成物/化工产品的成分分析等。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]2.复杂样品中大分子有机化合物的分析与鉴定:蛋白质、多肽、多糖、低聚合物等。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]3.环境样品中天然有机物(NOM)、溶解有机物(DOM)等复杂多组分的高通量分析与鉴定。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]4.组学分析方法开发及应用研究:石油组学、蛋白质组学、代谢组学、脂质组学、糖组学等。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]5.未知有机化合物的分析鉴定:基于精确分子量、精细同位素和多级质谱分析,可确定化合物的分子式,并推测出可能的结构。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]五、应用案例[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]中广测已为中科院研究所、南开大学、香港科技大学等多家科研机构和高校提供相关分析测试服务。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]1.复杂环境介质中NOM分析[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]水样经固相微萃取富集后,直接注入FT-ICR-MS的电喷雾离子源(ESI)进行分析,可得到近万个DOM组分信息。利用FT-ICR-MS高分辨率、高精确度和高通量的特点,可有效表征水中DOM的分子特征,并应用于新型有机污染物的筛查和识别、环境迁移转化过程中有机物组成和物质结构变化等方面的研究。[/color][/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271052549082_3929_2862401_3.png[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=16px][color=#444444]水中DOM的高通量分析与组分解析示意图[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px][color=#000000]2.中药化学成分和指纹图谱分析[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]样品经提取和过滤后,无需经过色谱分离,直接注入FT-ICR-MS的ESI源,在1 min内即可得到样品的质谱信息;结合同位素精细结构判定方法,可以快速识别复杂体系样品中的各种化学成分。利用主成分分析和聚类分析等统计学手段,可对不同产地样品进行来源区分、真伪鉴别、质量一致性和稳定性评价。方法直接、快速、高效,在中药分析和质量控制领域有着良好的应用前景。[/color][/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271052550488_6697_2862401_3.png[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=16px][color=#000000]基于ESI-FT-ICR-MS指纹图谱的灵芝快速分析与质量控制过程示意图[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px][color=#000000]六、样品要求[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]1.固体或冻干粉末样品、透明溶液(需注明溶剂),复杂样品或生物样品需详细沟通[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]2.建议采用的离子化方式为ESI、APCI、MALDI或DART[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]3.提供待测组分的分子量范围、元素组成及样品已知的详细信息[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000]4.样品应尽量不含非挥发性的无机酸、无机盐、三氟乙酸、三乙胺和表面活性剂成分[/color][/size][/font]
现代质谱(MS)面临的一个主要挑战是如何在高质荷比(m/z)区域实现高质量分辨率和高精度的分析。为了提高MS的实际应用能力,了解最新技术的局限性及其在应用科学中的地位至关重要。本综述总结了高分辨质谱(HRMS)中的重要仪器和相关的研究进展,这些仪器的前沿研究将其工作范围扩展到高m/z区域。[font=&][size=14px][color=#222222]高分辨质谱[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222](HRMS)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]在现代分析科学中具有不可或缺的作用,因为它具有精确识别未知化合物和定量样品中待测化合物的优越性能。[/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]质量分辨率[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222](MRP)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]、质量准确度、灵敏度和适用的质量范围是决定质谱仪性能最重要的属性。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]是量化离子峰锐度的因子,人们将其定义为观察到的质量[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222](m)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]与最大峰高的特定分数之比,在谱图中通常用质谱离子峰的半峰宽[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222](FWHM)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]高度或[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]δm[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]表示。[/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]具有较高[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]的质谱仪可以潜在地分辨更多的特征,因为它可以产生具有较高峰值容量的质谱图。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]另一方面,质量精度是指测定的[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]m/z[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]与其精确理论值的差值;[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]质量精度可以代表测量结果的正确性。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]高质量精度可通过几个基本要求获得,例如仪器需要具有足够的电子分辨率、高[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]、稳定的离子源和稳定的电气系统等。[/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]MS[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]的灵敏度是高质量应用中的另一个关键问题。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]它依赖于合适的样品制备和电离方法,例如电喷雾电离[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222](ESI)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]可以从水溶性样品中产生多电荷分子,基质辅助激光解吸电离[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222](MALDI)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]主要从固体样品中产生单电荷分子。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]旨在提高电离效率的研究十分常见,在这里我们鼓励读者查阅相关文献和综述文章。[/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]高分辨率仪器通常被认为是具有提供[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]10000[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]以上[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]的仪器。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]通过使用具有这种[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]的质谱仪,人们可以在低[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]m/z[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]范围内[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]([/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]即[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222] 1[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222],如图[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]1[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]所示。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]在高[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]m/z[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]范围内,这种分辨能力可以区分初级离子[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]([/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]即电离离子,如质子、钠离子等[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222])[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]、同位素、修饰[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]([/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]即翻译后修饰[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222][PTMs][/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]或标记[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222])[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]、微小的结构变异或与小分子相关的复合物。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]然而,为了实现独特的元素成分分配,所需的[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]要高得多[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]([/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]即[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]1/δm 100)[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]我们将在下文重点介绍[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]HRMS[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]在[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]m/z[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]范围内实现[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]10000[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]左右[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]MRP[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]的关键技术。[/color][/size][/font][img]https://file.jgvogel.cn/134/upload/resources/image/352869.png?x-oss-process=image/resize,w_700,h_700[/img][font=&][size=14px]图1 质量分辨率和相应分析能力的相关性[/size][/font][size=14px][color=#000000]高分辨技术[/color][/size][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]傅立叶变换(FT)和飞行时间(TOF)质谱是满足高m/z范围(MRP 10000和m/z 10000)中高MRP标准的两个主要质谱仪类别。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]离子回旋共振(ICR)和轨道阱(Orbitrap)质量分析器是FTMS系列的主要成员,而TOFMS系列由几个变体组成,包括线性分析仪、反射分析仪和多反射/多转分析仪。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]大多数FT和许多TOF质谱仪都是混合仪器,前面有四极杆质量过滤器(即Q-TOFMS),便于串联MS分析。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]本文不讨论磁质谱,因为它们主要用于低质量数化合物的检测,尽管它们也提供较高的MRP。[/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]大多数质谱仪的MRP随着m/z的增加而下降。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]例如,傅里叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICRMS)的MRP随着m/z的增加而线性降低,而Orbitrap-MS的MRP与m/z平方根的倒数成比例。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]因此,尽管Orbitrap在m/z= 200时提供了140000的MRP,但在m/z在10000的范围内时,MRP会降低到16000。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]TOFMS与上述质谱仪呈现的规律不同,其MRP独立于m/z或在特定条件下随着m/z的增加而逐渐增加。[/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#222222]图2显示了基于MRP的商业化质谱仪的经验规律。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]在过去的十年中,这些技术的最大MRP已经有了相当大的进步,研究人员将这些仪器的MRP推向了另一个高度。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]表1总结了重要的商业化HRMS或其改进版本的分析特性,这些特性决定了仪器在高m/z范围内的适用性。[/color][/size][/font] [font=&][size=14px][color=#222222]我们还列出了制造商报告的低质量范围(m/z 10000的低分辨率数据。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]最近的一项研究表明,在基于Orbitrap的单粒子电荷检测(CD)技术中,人们通过在低离子计数条件下确定了大量单个离子的电荷和接近理论预测的高MRP,而这一方法以更长的采集时间作为代价。[/size][/font] [font=&][size=14px]关于大分子检测中其它电荷检测质谱法(CDMS)细节的文章可以在别处找到,这里不做赘述。[/size][/font][img]https://file.jgvogel.cn/134/upload/resources/image/352873.png?x-oss-process=image/resize,w_700,h_700[/img][font=&][size=14px]图4 在Orbitrap质谱仪上实施源内离子捕获以提高高质量结构分析能力的示意图[/size][/font][font=&][size=14px]A,仪器的修改用红色标明;B,传输平台的示意图;C,正常/源内离子捕获模式中的相对电位。该仪器实现了更有效的去溶剂化和碰撞冷却,从而提高了MRP和质量传输效率。[/size][/font][font=&][size=14px]FTMS需要复杂的长时间镜像电流瞬态测量(通常从几秒到几分钟)来获得大蛋白质的同位素分辨率,这对高通量分析是不利的。[/size][/font] [font=&][size=14px]然而,高分辨率并不总是必要的,也就是说,电荷状态的分化需要比识别细微PTM分化(例如磷酸化)相对更低的MRP。[/size][/font] [font=&][size=14px]此外,仪器需要保持超高的真空度,以确保振荡离子有足够的平均自由程;[/size][/font] [font=&][size=14px]或者,TOFMS是另一种通用的选择。[/size][/font] [font=&][size=14px]关于高扫描速度和自由空间电荷效应,我们将在下一节讨论。[/size][/font][font=&][size=14px][color=#021eaa][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#021eaa]3、飞行时间质谱[/color][/size][/font][font=&][size=14px]飞行时间质谱仪根据离子飞越无磁场区域的时间来分析离子,由此可以推断出它们的m/z。[/size][/font] [font=&][size=14px]在为离子提供势能(qU,其中U是离子源的电势)的电场下,离子源区域会产生离子。[/size][/font] [font=&][size=14px]在离子产生之后,离子被抽出并加速到封闭在飞行管内的无场区域。[/size][/font] [font=&][size=14px]加速过程将离子的势能转化为进入无场区域前的动能()。[/size][/font] [font=&][size=14px]在无场区域内,不同m/z的离子表现出不同的速度。[/size][/font] [font=&][size=14px]飞行时间(t)和离子质量(m)之间的简化关系为:[/size][/font][font=&][size=14px]其中L为无场区域的长度。[/size][/font] [font=&][size=14px]在TOFMS中,MRP可以转换为时间t/(2Δt)。[/size][/font] [font=&][size=14px]由于t随L呈线性变化,因此目前的共识是原则上飞行管长度越长,MRP越高。[/size][/font] [font=&][size=14px]根据定义,降低Δt可以实现更高的MRP。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]为了在飞行时间质谱中获得较高的MRP,电离时离子的能量和空间扩散需要最小化。[/size][/font] [font=&][size=14px]值得注意的是,能量扩散随着离子m/z的增加而增加。[/size][/font] [font=&][size=14px]提高飞行时间质谱仪MRP的两个最重要的技术是离子延迟引出和反射器技术。[/size][/font] [font=&][size=14px]离子延迟引出在Wiley和McLaren (1955)介绍的两级离子源中完成。[/size][/font] [font=&][size=14px]这种离子源的第一阶段是电离发生。[/size][/font] [font=&][size=14px]电离后,离子被引出,并被一个温和的电场推向第二阶段。[/size][/font] [font=&][size=14px]第二阶段用强电场将离子加速到它们朝向无场区域飞行的最终速度。[/size][/font] [font=&][size=14px]当进入无场区域时,不同m/z的离子通过它们到达检测器表面的时间而被分离。[/size][/font] [font=&][size=14px]延迟引出是在电离后的第一级施加较短的延迟电压,延迟范围在几十纳秒到低微秒之间的一种方法。[/size][/font] [font=&][size=14px]它有效地最小化了离子的初始能量扩散对到达时间的影响。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]另一方面,反射器使用飞行管中的环形电极堆来产生电场,以反射离子的轨迹。[/size][/font] [font=&][size=14px]反射器可以进一步补偿离子在反射过程中的能量差异,因为初始能量较高的离子会在反射器中传输更深,而初始能量较低的离子会传输更浅,如图5所示。[/size][/font] [font=&][size=14px]通过适当选择反射器后的飞行距离,具有相同m/z但不同初始能量的离子将同时到达探测器,实现飞行时间聚焦效果。[/size][/font] [font=&][size=14px]使用反射器的另一个优点是飞行距离的增加,这可以增加t和MRP。[/size][/font][img]https://file.jgvogel.cn/134/upload/resources/image/352874.png?x-oss-process=image/resize,w_700,h_700[/img][font=&][size=14px]图5 飞行时间质谱仪中反射器的示意图[/size][/font][font=&][size=14px]具有较高动能的离子在反射器中穿透得更深,促进了检测器的聚焦效果。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]自20世纪60年代以来,TOFMS一直是最受欢迎的技术之一。[/size][/font] [font=&][size=14px]在线性飞行时间质谱仪中,基本上不存在质量上限,因为离子经过电势加速后会沿着直线向检测器传输。[/size][/font] [font=&][size=14px]由于离子运动不受射频电场的控制,轨迹与m/z无关,常规线性模式飞行时间质量分析仪可以检测MDa水平的离子(即使用专用的基质分子,电荷检测器,或专门的低温离子探测器,如下所述),尽管其灵敏度和MRP都没有完全优化。[/size][/font] [font=&][size=14px]为了获得高分辨率光谱图,典型的TOF质谱仪是在反射模式下运行的,在低质量范围内提供大约10000–60000的MRP。[/size][/font] [font=&][size=14px]尽管其MRP在大多数质量范围内低于FTMS,但TOFMS的扫描速度比FTMS快2-3个数量级,可完美匹配联用分析系统。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]TOFMS中有几个变化进一步增强了MRP。[/size][/font] [font=&][size=14px]最有吸引力的解决方案是安装静电扇区或多个反射器,以增加飞行距离。[/size][/font] [font=&][size=14px]一个例子是多圈或螺旋飞行时间质谱仪,它可以很容易地将飞行距离延长到几十米以上。[/size][/font] [font=&][size=14px]对于m/z约为10000的离子,这种仪器的最大MRP超过20000。[/size][/font] [font=&][size=14px]虽然飞行时间质谱基本上没有质量上限,但最大可观测m/z仍然受到一些关键因素的限制,包括样品制备、电离、离子轨迹、检测器特性等。[/size][/font] [font=&][size=14px]这种仪器方面的限制主要是指用于检测大分子的离子检测器的灵敏度。[/size][/font] [font=&][size=14px]例如,传统微通道板(MCP)检测器的灵敏度随着离子速度的降低而降低。[/size][/font] [font=&][size=14px]由于较高的m/z离子表现出较低的速度,这种检测器对于大分子分析是低效的。[/size][/font] [font=&][size=14px]为了克服这一问题,其中一个有效的解决方案是用更灵敏的替代物取代MCP检测器,例如通过能量感应撞击离子的能量敏感型低温检测器。[/size][/font] [font=&][size=14px]低温检测器可以将飞行时间质谱的质量上限提高到大约2 MDa。[/size][/font] [font=&][size=14px]低温探测器的缺点是响应时间长,通常在微秒范围内,这会导致较高的δt产生。[/size][/font] [font=&][size=14px]响应时间比传统的MCPs长两个数量级以上,无法产生高分辨率的质谱图。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]TOFMS的另一个不可避免的问题是检测器偏向于检测低质量的离子,该问题主要是由于低质量离子导致的检测器饱和所致。[/size][/font] [font=&][size=14px]这种偏差源于MCP检测器在离子撞击表面后恢复其离子记录能力所需的时间。[/size][/font] [font=&][size=14px]在恢复时间窗口内,同一检测器区域的离子传输受到阻碍。[/size][/font] [font=&][size=14px]由于质谱通常存在低m/z的杂质离子,这些杂质离子可能是与基质相关的分子或较大离子的碎片,因此对高m/z离子的灵敏度要低得多。[/size][/font] [font=&][size=14px]人们可以通过改变检测器电压来调整增益效果,从而降低偏好程度;[/size][/font] [font=&][size=14px]也可以通过离子或检测器门控来使该问题最小化,以保持检测器在高m/z范围内的灵敏度。[/size][/font] [font=&][size=14px]有一种动态仪器优化方法被证明可以将灵敏度提高2-3倍。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]TOFMS的另一个限制是,质谱仪存在离子损失现象,反射器不适合分析高m/z离子。[/size][/font] [font=&][size=14px]这种损失可能是由于离子在进入反射器之前在飞行管中的亚稳态衰减,因此它们在不同的时间到达检测器。[/size][/font] [font=&][size=14px]反射器的另一个可能的问题是较高的m/z离子具有较宽的发散角,使得离子轨迹在反射后偏离检测器轴。[/size][/font] [font=&][size=14px]为了进行高m/z离子的检测,人们通常通过商用化的TOF仪以线性模式进行实验,但这不可避免地会降低光谱的MRP。[/size][/font] [font=&][size=14px]人们发展了一种综合的计算方法来预测线性飞行时间质谱仪的最终构型,这表明离子源区域的尺寸以及引出电压和延迟的组合在MRP的改进中起着关键作用。[/size][/font][font=&][size=14px][color=#021eaa][/color][/size][/font][font=&][size=14px][color=#021eaa]4、正交和四极杆飞行时间质谱[/color][/size][/font][font=&][size=14px]串联质谱(MS[/size][/font] [font=&]n[/font] [font=&][size=14px])是一种技术,该技术在概念上集成了两个或多个质量分析器,可以提高质谱破译复杂化合物信息的能力。[/size][/font] [font=&][size=14px]最初开发于20世纪80年代初的四极杆-飞行时间(Q-TOF) MS已成为高分辨率和高质量应用中最常见的混合仪器之一。[/size][/font] [font=&][size=14px]四极质量分析器包括四个平行的双曲线或圆柱形杆状电极,并通过调节直流(DC)电压和RF电压的频率和幅度来传输或存储特定m/z的离子。[/size][/font] [font=&][size=14px]四极质量分析器通常设计紧凑,且需要低真空,并且具有很高的离子容量。[/size][/font] [font=&][size=14px]四极杆质量分析仪兼容各种电离技术(如ESI和MALDI)以及离子激活方法(例如电子激活解离和光诱导解离)。[/size][/font] [font=&][size=14px]四极杆质量分析器的主要缺点包括对离子传输、质量检测范围和质量分辨能力(通常为单位质量分辨率)的限制。[/size][/font] [font=&][size=14px]混合Q-TOFMS得到了广泛的认可,因为它保留了双方的优点(分别是选择性和高MRP ),而没有增加缺点。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]离子传输效率的提高使得在Q-TOFMS中检测大分子化合物成为可能。[/size][/font] [font=&][size=14px]根据RF频率和振幅以及杆组件的直径,传统的四极杆质量分析仪可以在高达4000的有限m/z下运行。[/size][/font] [font=&][size=14px]Q-TOFMS通过增加四极杆区内的压力进而促进对大分子径向运动的碰撞冷却,导致了离子传输效率的提高。[/size][/font] [font=&][size=14px]Q-TOFMS通过将四极杆的射频频率降低至300 kHz,实现了更宽的m/z范围至40000(一种蛋白质复合物,m/z为38150的GroEL伴侣蛋白)。[/size][/font] [font=&][size=14px]在这种情况下,不同的真空泵保持着高压,包括紧挨在取样锥后面的一个室(10 mbar)、六极周围的一个金属套筒(局部压力为8×10[/size][/font] [font=&]3[/font] [font=&][size=14px] mbar)和一个碰撞室(1.5×10[/size][/font] [font=&]2 [/font] [font=&][size=14px]mbar)。[/size][/font] [font=&][size=14px]正交TOF区域中的离子传输效率也通过在离子透镜上使用低计数网格和较低重复率的离子反射器(即加速前的传输时间为410 μs)而得到提高。[/size][/font] [font=&][size=14px]可检测的m/z超过85000(碘化铯簇),在m/z约为84000时信噪比(SNR)为5。[/size][/font] [font=&][size=14px]在串联MS模式下,四极杆具有窄带质量过滤器,因此只有窄m/z范围内的(前体)离子被传输到TOF区域,从而提高了检测动态范围和信噪比。[/size][/font] [font=&][size=14px]理论上,四极杆质量分析仪传输的离子比设定值高4-5倍:[/size][/font] [font=&][size=14px]将离子传输的m/z设置为32000应传输m/z为128000-160000的离子。[/size][/font] [font=&][size=14px]随着电离和检测效率的进一步提高,Q-TOFMS可以继续检测超过90000的m/z离子。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]此外,在Q-TOF质谱仪中,离子光学已得到改进,以实现更好的MRP以及质量相关传输。[/size][/font] [font=&][size=14px]低温度系数陶瓷垫片的使用可以减少温度引起的质量漂移,该瓷片可以利用对称屏蔽对所有电极进行更好的离子聚焦;[/size][/font] [font=&][size=14px]与之前的模型相比,MRP提高了约35%。[/size][/font] [font=&][size=14px]离子从四极杆通过正交TOF转移至检测器,这进一步改变了离子光学设计理念。[/size][/font] [font=&][size=14px]更详细地说, “步进式转移时间”可以调整不同m/z的离子从碰撞单元行进到正交加速单元的时间。[/size][/font] [font=&][size=14px]使用较大的入口孔径和较高的加速场,探测效率提高了30%。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]最近,离子淌度谱(IMS)是一种集成到飞行时间质谱中的一种技术。[/size][/font] [font=&][size=14px]IMS的加入为大分子分析提供了另一个分离维度,在电场的影响以及缓冲气体的存在下,具有不同迁移率或平均碰撞横截面的离子根据不同的淌度信息被分离开。[/size][/font] [font=&][size=14px]与四极杆质量分析仪类似,离子淌度池具有减少能量分布、降低化学噪音、提高检测动态范围和传导MS[/size][/font] [font=&]n[/font] [font=&][size=14px]的优势。[/size][/font] [font=&][size=14px]IMS的各种设计,例如行波离子迁移谱(TWIMS)、捕集离子迁移谱(TIMS)和环形离子淌度(cIM),都被证明可以增强淌度分离和离子传输。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]首个市售的IMS-Q-TOFMS于2006年推出(Waters,Synapt high definition MS[HDMS])。含有TW堆叠环形离子导向器的离子淌度池取代了六极杆,有效地将离子从离子源区域桥接至四极杆质量分析器,并消除了不需要的中性物质。在该系统中,位于四极杆和正交TOF之间的“TRIWAVE”系统(捕集、IM和转移池)不仅能实现淌度分离,还能激活离子,因此有利于定量结构分析。TIMS的工作原理是通过使用电场推动离子与逆流的中性漂移气体分子不断碰撞,从而分离离子。TIMS质谱于2016年才商业化,并因其对天然大分子组装体的结构解析能力而广受欢迎。现代的IMS-Q-TOFMS可以在m/z 10000以上提供平均50000的MRP[/size][/font] [font=&][size=14px]。[/size][/font][font=&][size=14px][color=#021eaa][/color][/size][/font][size=14px][color=#000000]5、数据处理技术[/color][/size][font=&][size=14px]由于数据复杂性和分析要求的增加,数据处理是HRMS的另一个重要部分。[/size][/font] [font=&][size=14px]与仪器的重大发展相反,数据处理可能是提高数据质量的一种有效而方便的手段。[/size][/font] [font=&][size=14px]在傅立叶变换质谱(FTMS)中,数据处理尤为重要,因为在傅里叶变换之前对原始数据进行校正、滤波和变迹是获得谱图的常见做法。[/size][/font] [font=&][size=14px]例如,人们发现相位校正可以显著提高FT-ICRMS的光谱质量,包括SNR、MRP和质量准确度。[/size][/font] [font=&][size=14px]在其他质谱数据中,离线或采集后处理提高了分子鉴定的谱图质量。[/size][/font] [font=&][size=14px]例如,人们可以通过波变换、翘曲函数以及其他方法提高峰值检测和降噪的效率。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]研究表明,充分的校准可以将质量准确度提高一个数量级以上。[/size][/font] [font=&][size=14px]另一方面,采集后数据校准可以通过比较多个光谱以自校准方式进行。[/size][/font] [font=&][size=14px]复杂光谱中蛋白质的鉴定也可以通过使用多峰拟合和模拟技术提高蛋白含量来实现。[/size][/font] [font=&][size=14px]相比之下,人们通过使用简单的峰对齐算法(而不是使用复杂的校准函数),就可以实现在线的自校准[/size][/font]
[color=#444444]求教各位大神,我在负离子模式下做的高分辨质谱,主体和F是1:1配位,现在质谱结果显示加乙酸分子量刚好和模拟的一样,请问大神像这样直接加乙酸合适不,这个图能用不[/color][color=#444444][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905141601250821_6373_1676638_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/color]
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]连用中的质谱离子源是不是都是EI
随着质谱技术的发展,质谱仪的分辨率和灵敏度不断提高,高分辨质谱仪逐渐被推广应用。用高分辨质谱进行样品分析,可获得丰富的结构信息,特别是其出色的质量精度和准确度,使通过准确质量法推导化合物分子式更加准确。而通用的NIST谱库更是提供了一种仅需要比较结果谱图就能得到分子式的方法,极大地简化了数据处理流程,减少了数据分析工作量,降低了分析难度,成为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-高分辨质谱的重要优点之一。但是,把高分辨质谱数据交给数据处理软件进行分子式推导和谱库比对并非一蹴而就的事,要获得准确的定性分析结果,对结果进行仔细筛选和确证是必不可少的步骤。本文以高分辨[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]数据处理为例,简要介绍高分辨质谱数据分析中的应注意的问题。1.NIST质谱库收录的是在70 eV EI源下分析纯化合物获得的质谱图,为保证比对结果的准确性,要求样品质谱图尽可能纯净。准备样品时,应选择适当的样品浓度,尽量降低本底,对复杂混合物样品进行纯化,使待测化合物尽可能纯净。分析仪器要求灵敏度、分辨率高,采集到的质谱信息全面、准确、清晰。在TIC图上选取质谱图时也需进行一定的处理,扣除仪器背景,最好选择TIC出峰的上行或下行段,得到平均质谱图,以避免TIC峰顶离子浓度饱和或某一时间点出现偶然误差。2.数据处理软件对库结果会给出“质量误差”这一参数,它是判断结果准确性的重要参数之一,但是,质量误差最小的结果未必是最准确的结果。尽管高分辨质谱能提供很高的质量精度,但这并不意味着它可以得到绝对准确的质量值。当待测化合物元素组成复杂、分子量大时,质量误差的偏差对结果的影响更为明显,此时同位素峰信息往往比质量信息具有更强的鉴别能力。3. 虽然谱库检索简单可靠,但仍有其局限性。以NIST谱库为例,检索只利用碎片离子及其丰度这一信息,没有利用高分辨质谱提供的全部信息。实际应用中,同系物往往有相似的碎片离子组成,在这种情况下,匹配度最高的结果不一定是准确的。不过NIST谱库也收录化合物的保留指数,如果在对库时加入保留指数,则可缩小结果范围,得到更准确的结果。通过降低EI源电压或用CI源确定待测化合物的分子离子峰也有助于验证结果的准确性。4. 虽然数据库收录大量种类繁多的化合物信息,但相对于有机化合物总数而言,仍然只是很小的一部分。如果待测物是未被数据库收录的化合物,则谱库检索无法获得准确结果,此时质谱法只能推导出可能的分子式,需要结合其他分析手段推导化合物结构。综上而言,高分辨质谱及其配备的数据处理软件为未知样品的定性分析提供了简便可靠的手段,但要获得准确的结果,必须对数据进行谨慎的筛选和确证。完全依赖数据库比对结果不可取,在实际应用中,最好综合考虑数据库比对结果、色谱保留指数和同位素峰等信息,有条件的话,用标准品来验证无疑是最可靠的方法。
[i][b]草药成分分析是一项复杂和困难的工作,其化学成分是中药发挥药效作用的物质基础,是实现中药现代化的关键所在。然而,中药有效成分的结构鉴定是其成分分析的瓶颈,如何快速发现中药中的有效成分,并鉴定其结构?本文应用AB SCIEX TripleTOF[sup][/sup] 高分辨质谱仪对人参中有效成分分析进行了研究。[/b][/i] 如何在高分辨数据中,快速发现和鉴定目标结构的化合物, 已成为中药成份研究的限速挑战。近年来,LC/MS 凭借其高通量、高灵敏度以及强大的定性、定量能力等特点,逐渐成为中药分析的主流仪器。不同类型的LC/MS 具有特定的工作流程,AB SCIEXTripleTOF[sup][/sup] 高分辨质谱仪是具有高分辨定性能力和三重四极杆定量能力的新一代高分辨串联质谱仪。运用特有的动态背景扣除(DBS)、质量亏损(MDF)、中性丢失(NL)数据采集功能,一次进样可同时获得高质量的TOF MS和TOFMS/MS,从而完成化学成分的分析和确证。结合PeakView[sup][/sup]软件中简单快捷的XICManager 进行目标化合物的筛查和确证,能够提高数据分析速度和数据结果的准确度,成为中药成分分析和鉴定方面得心应手的工具。[align=center][/align][b] 实验内容[/b][i][b] 仪器和试剂[/b][/i] 甲醇、乙腈均为色谱纯,其他有机试剂为分析醇 人参50% 甲醇提取液,经SPE 处理后获得人参提取液 ABSCIEX TripleTOF[sup][/sup]5600 质谱系统,岛津公司LC-20A [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]。[i][b] 采集方法与实验条件[/b] ■质谱采集方法[/i] Tr ipl eTOF[sup][/sup]5600,TOF MS-IDA-MS/MS 负离子测定 TOF MS,m/z 100~1600,200 ms TOF MS/MS-10 MS/MS,m/ z 50~1300,80 ms,IDA 动态背景扣除(DBS)开启。[i] ■ 质谱参数[/i] 喷雾电压(IS):-4500 V 去簇电压(DP):-70 V 辅助加热气温度(TEM):500℃ 雾化气(Gas1):50 psi 辅助加热气(Gas 2):50 psi 气帘气(Curtain gas):30 psi。 ■[i] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]条件[/i] 流速:0.2 ml/min 流动相:A 相:0.02% 甲酸水溶液 B 相:0.02% 甲酸乙腈溶液。色谱柱: Phenomenex Luna5 μm, 2.1×150 mm),梯度洗脱。[i][b] 数据处理工作流程[/b][/i] 通过智能DBS-IDA 采集方法,一次进行获得高分辨的TOF MS 和TOF MS/MS,高分辨的TOF MS 通过PeakView[sup][/sup] 进行目标化合物以及非目标化合物的提取或结构特征提取发现可能的中药成分,通过FormulaFinder 计算其分子组成,再结合高分辨TOFMS/MS 进一步做结构分析,以确定化合物,分析流程如图2 所示。[b] 结果与讨论[/b][i][b] 目标化合物的筛查与鉴定[/b][/i] 人参主要成分为三萜皂苷类,在负离子模式下,很容易产生加合离子,本实验的流动相中含有甲酸,人参皂苷的分子离子为加合醋酸的离子,根据苷元的不同分为二醇型皂苷和三醇型皂苷,其在负离子条件下产生三醇型皂苷特征性碎片475.38,二醇型碎片459.38,结构特点如图3所示。 使用PeakView[sup][/sup] 软件中的XICmanager 对人参皂苷目标化合物筛查,将人参皂苷目标化合物序号或名称和分子式信息导入到软件中的XICmanager,即可筛查目标化合物,可根据4 大标准(保留时间、质量精度、同位素比例、谱库)判断筛查到的色谱峰是否为目标化合物。利用已知的68 种人参皂苷类成分,筛查到37 种人参皂苷类成分,提取离子流色谱图、测得的精确质量数以及保留时间、强度和质量准确度简单直观显示出来,并同时根据获得的高分辨TOFMS 和TOF MS/MS 进一步的确证,筛查结果如图4 所示。 人参皂苷中有多种同分异构体,仅通过高分辨的TOF MS 不能确定,如人参皂苷Re & Rd 分子组成均为C49H84O20, 必须通过高分辨的MS/MS 进一步确定结构。图5 展示了根据人参皂苷的结构特点,并结合高分辨MS/MS 对人参皂苷结构的推测。 PeakView[sup][/sup] 软件解析化合物的结构根据一级质谱的质量精度、同位素比例、不饱和度等信息, 运用PeakView[sup][/sup] 软件推测可能化合物分子式,同时也能给出MS/MS 的分子组成。在PeakView[sup][/sup] 软件中导化合物结构式,可对二级碎片结构进行预测。[i][b] 查找结构相关化合物(NLF, PIF)[/b][/i] 中药成分中同一类成分都具有相似的母核或结构特征,如会产生相同的碎片或具有相同的中性丢失部分,因此可通过中性丢失过滤(NLF)和产物离子过滤(PIF)查找结构相似的化合物。根据人参皂苷的结构特点,人参三醇苷能产生475.3 的碎片以及人参二醇苷能产生459.3 的碎片,可通过PIF 找到满足特点的人参皂苷,同时可通过人参皂苷上结合糖的部分在ESI模式下,很容易中性丢失糖 162.053,146.058,可通过NLF 来找到满足中性丢失六碳糖的皂苷类成分,满足这些特征的离子提取,同时满足条件的离子在TOF MS 上会以红色标记,同时得到的MS/MS 可进一步进行确认,从而能够全面地完成人参皂苷类成分的分析鉴定。通过目标代谢物以及PIF、NLF 方式,共鉴定出人参皂苷类成分45 种,结果如表1 所示。[b] 小结[/b] 高分辨质谱具有简单的数据采集流程, 可应对中药成分分析的要求,但如何在高分辨数据中快速发现和鉴定目标结构的化合物,已成为中药成份研究的限速挑战。凭借TripleTOF[sup][/sup]5600系统的高扫描速度、高分辨以及高质量准确度,可同时获得高分辨的TOF MS 和TOF MS/MS,能通过目标化合物提取以及PIF、NLF 处理获得的高分辨数据,快速简便地查找到目标化合物。实验结果表明:所获得的各成分均具有较高的质量准确度,质量准确度均小于2 ppm
[color=#444444]我做有机催化方法学的,化合物做质谱,只允许高分辨小数点后第四位有差异。最近做了两个样品,和别的样品的区别就是同时含有乙酰基保护的氮和一个较远的双键,高分辨做出来,加了钾离子还差2,如果是加钠离子和一个中性水分子就是对的,但是在做高分辨质谱的过程中有没有可能引入水分子的情况呢?这点很不解呀,请教这方面专业的,能不能告诉我一般情况下会加哪些阳离子或者中性分子呢?[/color]
高分辨特点,使之具有分离同位素干扰与背景化学噪音的选择性; 灵敏度高,获取极低的检测范围; 宽线性动态范围,允许在一定的浓度范围内进行实验; 精确质量MS测量能力,可给出元素组成信息,用于鉴别被分析物;可同时获得分子离子与碎片离子的精确质量,从而简化谱图解释过程; 多种离子化选项,适合于各种化合物的分析,包括支持直接进样杆与GC进样口的离子源; 多种数据处理软件选项,进行各种应用。 分辨率与精确质量 采用常规小于5ppm RMS质量数测定,鉴别小分子的元素组成; 使用i-FIT?软件,结合精确质量与同位素分析模型,获得准确的分子式信息; 超过7000FWHM分辨率,可实现从干扰离子与分析物的分离。采用这种高分辨选择性能,可有效降低化学噪音,获得较低的检测限度。 多种操作模式 在不同EI、CI、FI离子源之间切换,进行GC/MS分析; 可选择不同的进样方式,包括DCI、FD、固体直接进样杆; 识别窄色谱峰,光谱采样速率20采样点/秒; 采用增大的线性动态范围,适用于宽范围的分析物浓度的实验; 灵敏度 采用全光谱高灵敏的oa-TOF技术,分析痕量物质的组分
高分辨质谱 用低分辨质谱测定时,分子的质量数都是整数表示,如CO、N2、C2H4和CH2N的质量都是28。如果用高分辨质谱测定就能得到如C2H4=28.031299,CH2N=28.018723,因此,根据高分辨质谱所测得的精密质量就可以对结构加以剖析和区别 小分子化合物确定结构式有多种方法,NMR,高分辨质谱(由于每个元素的原子量实际都是小数的,通过高分辨质谱可以直接获得化学式! 其中高分辨质谱我们强烈推荐THERMO LTQ ORBITRAP Orbitrap具有高分辨率[最高可达45万半峰全宽(FWHM)],高质量精度(0.1×10-6~1×10-6),质量范围宽,动态范围广的优点,可提供大范围的定性和定量分析,并且克服了其他高分辨质谱如傅里叶变换离子回旋共振(FTICR)质谱、飞行时间(TOF)质谱的尺寸大,维护与操作复杂的缺点。 在药物分析的应用 此段摘取贺美莲 郭常川 石峰 姜玮 所著的《Orbitrap高分辨质谱技术在药物分析领域中的应用进展》 在药物代谢方面的应用 Orbitrap高分辨质谱可以在很宽的质量范围内生成全扫描数据,同时提供组分的定性和定量分析[21]。此外,在各种生物基质(如血浆、血清,尿液等)中的药物代谢物分析需要复杂的前处理过程,而Orbitrap质谱对于复杂生物基质中的痕量分析物也可进行准确的分析,从而简化了样品前处理过程。基于这些优势,Orbitrap质谱已成为药物代谢研究中强有力的分析工具 在中药组分分析方面的应用 Orbitrap串联超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]实现单针进样即可高通量获取中药中的成百上千化合物的定性和定量信息,能够显著提高中药复杂体系中化学成分的快速分析鉴定能力。 中药由于成分复杂,对于其真正起治疗作用的化学成分往往不够清晰。应用二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联LTQ-Orbitrap质谱对丹参中的酚酸和双萜类成分进行定性和定量分析。根据裂解机制和高分辨MSn数据,共鉴定或初步表征了102个化合物,同时检测到丹参样品中的14个生物活性化合物,其中10个酚酸类和4个双萜类,这些成分是丹参发挥心血管疾病治疗作用的主要成分。 从中药中探索新的化学实体是筛选候选药物的重要来源。采用Orbitrap高分辨质谱鉴定蛇麻花中具有潜在抗菌活性的化合物,对钩藤中的92个吲哚生物碱进行系统表征并发现56个新的潜在生物活性分子,进一步明确了钩藤治疗作用的物质基础。 在药品杂质检查方面的应用 杂质检查是药品质量安全评价的重要环节。得益于其强大的定性和定量分析性能,Orbitrap技术可为原料药中杂质和药物降解产物研究提供强有力的支持。采用超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联紫外检测器和高分辨质谱检测器(UPLC-UV-LTQ-Orbitrap)对左旋甲状腺素的氧化降解杂质进行鉴定,利用时间分辨的高分辨质谱数据和自动数据处理的结合能够推断出单个化合物基础上杂质形成的动力学及其形成机制;通过比较降解曲线,总共识别了4个主要类型的甲状腺素降解杂质的产生路径。 采用超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联Orbitrap质谱仪对伊潘立酮降解杂质进行分离和鉴定,通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析共鉴定了7种降解杂质,并发现在水解和氧化条件下,伊潘立酮是不稳定的。 在中成药非法添加筛查方面的应用 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联高分辨质谱技术不仅可以用来筛查已知的非法添加成分,还可以发现并鉴定复杂基质中的未知成分,先后对中成药中非法添加的磷酸二酯酶-5抑制剂、降糖药和糖皮质激素的筛查和鉴定进行了研究。在63批次中成药和34批次保健品样本的检测中,共有7批保健品检测到降糖药,涉及二甲双胍、苯乙双胍和格列本脲等在非法添加糖皮质激素的检测中,分析物响应与质量浓度(1.0~1 000 ngmL-1)呈良好的线性关系,回归系数(r2)大于0.999 0,所有分析物检测下限(LODs)为1.0 ngmL-1,在42批中成药中共有22批样品检测到醋酸泼尼松,其中1批样品同时检测到了泼尼松和醋酸氢化可的松。 在蛋白质组学的应用 目前广泛使用的用于蛋白质鉴定的质谱分析主要使用两种类型质谱:一种是MALDI-TOF直接对分子量进行测量;另一种是使用ESI-MS高分辨率质谱分析电喷雾得到的多电荷信号,然后对信号进行去卷积分析,获得精确分子量数值。这两种方法各有其优点及适用的领域 采用直接MALDI-TOF进行分子量测定的主要问题是,MALDI-TOF质谱仪在不同质量区域内分辨率差别很大,分子量越大,分辨率越低。因此当样品为大分子蛋白质样品(比如抗体类药物)时,MALDI-TOF无法测得精确分子量,更不用说对蛋白质的糖基化等修饰形式进行分析。 (1) 抗体类蛋白质药物的精确分子量测定 抗体类蛋白质药物是生物医药界非常重要的一类样品,这些蛋白质分子的分子量非常大,一般情况下150KDa左右。因此在没有高分辨率质谱仪的情况下,要对这类蛋白质进行精确分子量测定是困难的。 在高分辨率质谱仪,特别是orbitrap原理的质谱仪出现以后,抗体类蛋白质的去卷积分子量测定变得容易实现。 (2) 还原后抗体类样品的不同亚基精确分子量测定 抗体类蛋白质样品通过还原,可以将轻链和重链分开,然后通过HPLC分离,在线进行MS分析得到亚基的精确分子量。 (3) 小分子量(25KDa)蛋白质样品的精确分子量测定 常用蛋白质样品包括抗体类蛋白质(150 KDa),同时也包括一些相对较小的蛋白质分子。对着这些相对较小的蛋白质,进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]分析,并去卷积分析得到精确分子量,不需要太高的分辨率即可实现(早期的离子阱,如LTQ就可以实现对小分子量蛋白质的分子量测定)。 高分辨率质谱可以对蛋白质样品(约10-150KDa)进行精确分子量测定,精度达到1Da左右,可以满足分析蛋白质的修饰状态(比如糖基化、磷酸化、氧化、C末端K缺失情况等),并可以对这些修饰情况进行定量分析