当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

亲和色谱柱

仪器信息网亲和色谱柱专题为您整合亲和色谱柱相关的最新文章,在亲和色谱柱专题,您不仅可以免费浏览亲和色谱柱的资讯, 同时您还可以浏览亲和色谱柱的相关资料、解决方案,参与社区亲和色谱柱话题讨论。

亲和色谱柱相关的资讯

  • 东曹推出新的亲和层析填料及SEC色谱柱
    近日,东曹(TOSOH)推出了新的专为单克隆抗体的分离纯化而设计的亲和层析填料TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F,其特点是具有高吸附载量,和优异的耐碱性能,主要适用于单克隆抗体(IgG1为主)、IgM和Fc融合蛋白的分析。和之前的具备高机械强度、高流速的A-650F不同,HC-650F的优势在于高载量,对抗体的吸附载量可达到68g/L以上。   东曹还推出了新型的三款用于分析抗体药物中多聚体、二聚体、单体及抗体断片的硅胶基质SEC色谱柱,针对单抗类药物在其生产、贮存过程中容易形成二聚体或多聚体、抗体断片的问题,用于在药物研发以及纯化生产中检测和控制多聚体含量。   其中TSKgel SuperSW mAb HR使用硅胶基质的4&mu m粒径填料,具有高分离度,并与TSK经典款色谱柱G3000SW具有同样的分离范围,非常适合用于单克隆抗体的二聚体、单体及片段的分离分析。   TSKgel SuperSW mAb HTP适用于高速分离、高分离度的抗体分析。使用与SuperSW mAb HR相同的填料,仅需一半的时间就能达到相同的分离效果。   TSKgel UltraSW Aggregate使用硅胶基质的3&mu m粒径填料。分子量排阻界限更高,适合用来分析抗体药物中三聚体及多聚体这种大分子量的蛋白。
  • 东曹携新品TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱亮相analytica China
    仪器信息网讯 2016年10月10日,第八届慕尼黑上海分析生化展(analytica China 2016)在上海浦东新国际博览中心盛大开幕,业内众多知名企业参展并展出2016年度最新上市产品。东曹生命科学携新品TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱参展。东曹(上海)生物科技有限公司  近年来生物制药行业保持高速增长的趋势,目前全球销量排名前十的药物中生物制药占据8席,而其中6个为单克隆抗体药物。单克隆抗体药物的主要应用在癌症、免疫相关疾病的治疗领域。  对单克隆抗体药物研发和表征的分析,从研发初期到下游纯化均需要对IgG含量进行快速且精确的定量。多年来,Protein A层析填料一直被用于单克隆抗体纯化工艺过程中的捕获阶段,分析型的Protein A色谱柱则被用于对细胞培养上清液中抗体的定量分析。  2016年,东曹生命科学推出一款用于单克隆抗体药物分析的色谱柱——TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱。据介绍,该款色谱柱与亲和层析填料TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F具有相同官能团和相同的分离选择性,可应用于生物制药企业单克隆抗体药物的开发到生产每个阶段,帮助企业节省时间和成本。  据介绍,TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱采用了多孔亲水性聚合物基质填料,表面键合了重组Protein A官能团,可用于IgG的快速、高分离度分析,并且对IgG有很高的动态吸附载量,定量范围款。TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱柱身采用PEEK材质,大大减少非特异性吸附。TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱
  • 细胞膜色谱法,一种全新的生物亲和色谱
    p   药物与受体相互作用研究在药物研发过程中发挥着非常重要的作用,其研究方法的便捷程度以及准确度直接影响 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/industry-S22.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 药物研发 /strong /span /a 的效率。一般研究药物受体的相互作用均采用放射配基结合分析法和亲和色谱法,但因放射配基结合分析法操作复杂,需要制备特定的放射性配基,使应用受到一定的限制 而通常的亲和色谱法需要制备一定数量及一定纯度的受体,难度较大,且可能会影响受体对药物的选择性。 /p p   1996 年,西安交通大学贺浪冲教授提出细胞膜色谱法(cell membrane chromatography,CMC),经过20 年的不断发展,CMC法已逐步成为研究药物与膜受体亲和作用的有力工具之一。CMC系统将完整的细胞膜包覆于硅胶表面,在仿生理条件下制备成色谱柱进行成分受体相互作用研究,可以快速筛选中药复杂体系中的活性成分,并准确计算出其与受体间的配位亲和常数。 /p p   近日,西安交通大学王嗣岑教授等人在《药学进展》杂志发表文章“ 细胞膜色谱法用于药物与受体相互作用研究进展”,详细介绍了细胞膜色谱法的前世今生及相关应用。 /p p   传统的CMC方法经历了2 次“更新换代”:首先,原CMC 模型中分离鉴别采用离线方式完成,即通过筛选发现在特定细胞膜固定相上有保留的中药部位,采用人工方法将保留组分接收并进行下一步分离及鉴定。十几年来通过对CMC 模型的改造,现已成功构建集“ 活性识别- 色谱分离- 分析鉴定”于一体的CMC/HPLC(GC)/MS 在线二维分析系统 利用“ 双捕集环” 和“ 双富集柱”交替富集- 分析模式,将原有色谱系统成功改造为新的在线二维分析系统 并成功研制了在线阀控切换装置,真正实现了高通量筛选。其次,原CMC法中,靶细胞是通过生物组织和一般培养方法获得的,其细胞膜上的非“目标”受体的表达数量很多,而“目标”受体表达数量有限且不可控,由此建立的CMC 法对配体的特异性、敏感性和选择性受到了不同程度的限制。近年来,随着生物技术的不断发展,研究者利用现代分子生物学手段,利用外源重组质粒构建了稳定高表达野生型表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、血管内皮生长因子受体(vascular epidermal growth factor receptor,VEGFR)、成纤维生长因子受体-1 (fibroblast growth factor receptor-1,FGFR-1)等受体的人胚肾HEK293 细胞株,并以相应受体选择性拮抗剂为对照样品,成功建立了受体高表达CMC模型,发现了苦参、独活、虎杖、黄芪、川乌和红毛七中选择性作用于上述受体的活性组分 分子药理学实验证明筛选得到的化合物可以抑制相应受体蛋白的表达,并具有剂量依赖性。 /p p   药物-受体的亲和作用直接影响药物的代谢过程及药效学,细胞膜色谱作为一种全新的生物亲和色谱,实现了高效液相色谱分离和受体药理学的有机结合,用于表征药物- 受体的亲和作用并求解药物作用的解离常数。但这个过程往往不是几种简单理想的模型能够准确描述,所以如何避免测定中的干扰、增强方法的专属性是今后研究的重点所在。此外,细胞膜色谱有其特殊性,载体表面的细胞膜活性随时间不断衰减, 因此如何将亲和色谱理论应用到细胞膜色谱法中,在较短的时间内观察配体在细胞膜固定相上的保留特征,建立快速表征药物– 受体亲和作用的研究方法,也是一个非常重要的研究课题。 /p p br/ /p
  • 东曹Protein A亲和色谱柱荣获“2017 Pittcon Today” 卓越奖铜奖
    东曹生命科学(Tosoh Bioscience)在今年的2017美国匹兹堡分析化学和光谱应用会议暨展览会上,凭借其新推出的液相色谱柱产品——TSKgel Protein A-5PW 荣获“Pittcon Today” 卓越奖铜奖。 该奖项的设置旨在识别今年展会上的创新,并为参展商提供一个新的渠道以展示他们的研究进展和技术进步。本次奖项由来自学术、工业和贸易媒体组成的评委团评选,主要考察产品的独创性、创造力、实用和结果,以及该产品在行业和广泛公众中的影响力。评委们从80多份申报书中选定了最后的获奖名单。东曹生命科学美国公司的产品经理Cara Tomasek表示,“我们非常高兴Pittcon Today奖项的评委团能够认同TSKgel Protein A-5PW的创新性,并授予我们这个十分荣耀的奖项。由于抗体药物在初期研发阶段需要对细胞培养液中的IgG含量进行快速且精确的定量,所以越来越多的研发人员渴望借助一款能实现高通量分析的工具。东曹生命科学于去年推出的TSKgel Protein A-5PW 亲和色谱柱凭借其高流速高通量,以及相对较长的使用寿命,成为单克隆抗体分析的理想解决方案。”该款色谱柱已于2016年8月全球同步上市。铜奖: TSKgel Protein A-5PW 亲和色谱柱(Tosoh Bioscience LLC)
  • 东曹TSKgel FcR-ⅢA-NPR亲和色谱柱荣获“2019 PITTCON TODAY”卓越奖银奖
    2019年3月17日至3月21日,全球科学仪器行业内历史悠久、享誉盛名的Pittcon展会(匹兹堡分析化学和光谱应用会议暨展览会)在美国费城宾夕法尼亚会议中心盛大召开。 在第三届Pittcon Today卓越奖名单中,东曹公司的高效液相亲和色谱柱TSKgel FcR-ⅢA-NPR获得了银奖。该色谱柱是专为快速测定单克隆抗体的ADCC活性而开发。 Pittcon Today奖项的设置旨在识别今年展会上的创新,并为参展商提供一个新的渠道以展示他们的研究进展和技术进步。本次奖项由来自学术、工业和贸易媒体组成的评委团评选,主要考察产品的独创性、创造力、实用和结果,以及该产品在行业和广泛公众中的影响力。奖项根据各公司申报的销售额分为三个类别,分别评选出了金奖、银奖和铜奖。 东曹生命科学美国分公司的产品经理Cara Tomasek表示:“我们非常高兴Pittcon Today奖项的评委团能够认同TSKgel FcR-ⅢA-NPR的创新性,并授予我们这个十分荣耀的奖项。随着生物制药行业的发展,越来越多的研究人员在寻求一种可以在短时间内快速分离并且测定单克隆抗体的ADCC生物活性的方法。TSKgel FcR-ⅢA-NPR色谱柱正好满足了这一需求,不仅可以应用在研发前期的细胞株筛选、抗体发酵工艺条件优化,也可应用在过程监控分析和最终产品批次的质量控制中。”银奖:TSKgel FcR-ⅢA-NPR高效液相亲和色谱柱(Tosoh Bioscience LLC)
  • mAbs | 使用在线亲和色谱-质谱对影响抗体-FcγRIIIa V158 (CD16a)结合的属性进行非靶向表征
    大家好,本栏目供稿来自于中山大学李惠琳课题组,以后将定期为大家带来质谱新技术、新方法领域的前沿文献与工作交流,欢迎评论互动。本周为大家分享一篇发表在mAbs上的文章,Non-targeted characterization of attributes affecting antibody-FcγRIIIa V158 (CD16a) binding via online affinity chromatography-mass spectrometry1,通讯作者是美国加利福尼亚州Amgen公司的Pavel V. Bondarenko。Fcγ受体(FcγR)是免疫球蛋白(Ig)超家族的膜结合糖蛋白,存在于免疫系统的许多造血细胞表面。这些受体可以结合IgG免疫复合物,在免疫反应的调节中发挥重要作用。FcγRIIIa(CD16a)是一种低亲和力Fc受体,与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)有关。研究表明FcγRIIIa结合亲和力与治疗性单克隆抗体(mAb)的ADCC效力之间存在良好的相关性,测量这种相互作用的亲和力是体外评估单克隆抗体疗法ADCC效力的一个重要部分。Fc上保守N糖基化位点(N297)的聚糖组成对CH2结构域的构象动力学和灵活性有显著的影响,并进一步关系到该结构域与Fcγ受体的亲和力,这种亲和力的差异为区分单克隆抗体糖型提供了一种独特的方法。在文章中,作者描述了一种使用固定化FcγRIIIa受体的亲和层析方法,通过在线质谱(MS)和离线馏分收集,在单个非靶向大规模实验中研究影响FcγRIIIa亲和性的因素。一、基于Fcγ受体亲和层析的抗体糖型鉴别图1显示了利妥昔单抗的糖型分离。从个体保留时间来看,半乳糖基化在与受体的结合亲和力中起着重要作用,更高水平的半乳糖导致亲和力增加(图1b)。几种糖型在提取质谱图(XMC)中含有多个峰(图1c),例如G1F/G1F。这是因为可能存在质量相同的位置异构体(例如G1F/G1F和G0F/G2F含有相同数量的糖,但排列方式不同)。此外,一次只有一个Fc-聚糖与Fc-γRIIIa相互作用,因此不对称糖基化单抗的一侧比另一侧具有更高的亲和力,这可以表现为两个不同的亲和力峰。此外还检测到两种无核心岩藻糖基化物种(M5/M5和G0F/G0)。据报道,这些物种的亲和力和ADCC效价显著增加,但这似乎并未反映在本实验中的保留时间上。最值得注意的是,据报道,M5/M5糖型对FcγRIIIa的亲和力增加了4-6倍,但在所有糖型中洗脱时间最早。仅观察到相对于岩藻糖基化G0F/G0F,无岩藻糖基化G0F/G0糖型的亲和力略有增加,保留时间偏移的幅度与G1F/G1F糖型相当,而不是文献中报道的增加10-50倍。作者推测,与大多数已发表的结合研究中使用的糖基化FcγRs相比,这种偏离预期保留行为的现象可能源于柱上的FcγRIIIa受体是无糖基化的。观察到具有唾液酸化的抗体分子的洗脱时间比其无唾液酸化的对应物稍早。例如,在图1c中,糖型G0F/S1G1F的洗脱时间与G1F/G1F相同。G0F/S1G1F的结构类似于G0F/G2F,在一个半乳糖上带有末端唾液酸,但其洗脱时间更早(类似于G1F)。这表明唾液酸残基可能阻止或抑制第二半乳糖与FcγRIIIa的相互作用,使其更类似于G1F聚糖。图1 利妥昔单抗的FcγRIIIa亲和LC-UV-MS表征。(a) 整个样品的去卷积质谱;(b) 280 nm紫外检测的LC色谱图。星号表示A1G0F的洗脱。(c) 提取的质谱图(XMC)用于检测含有M5/M5、G0F/G0F、G0F/G1F、G1F/G1F、G1F/G2F和G2F/G2F聚糖的单个完整抗体分子。二、亲和层析结果与AlphaLISA结合分析结果的相关性 图2显示了根据平均加权保留时间(根据峰面积加权)排列的四种治疗蛋白质的亲和色谱图。图2b和c显示了平均保留时间与AlphaLISA结合试验的相对亲和力百分比之间的线性相关性。这两种试验报告了类似的趋势,其中糖基化Fc融合蛋白显示无结合,mAb3(IgG2)显示非常弱的结合,与mAb1相比,mAb2(具有高水平半乳糖基化的IgG1)的结合增加。这为使用FcγRIIIa亲和层析方法表征影响结合的产品属性的影响提供了验证。图2 (a) 四种具有代表性的治疗蛋白模式的FcγRIIIa亲和色谱图:无糖基化Fc融合蛋白(紫色)、IgG2单抗(红色)和两种具有不同糖基化模式的IgG1单抗(蓝色和绿色)。(b) 相关图显示了相对结合亲和力与平均加权保留时间之间的关系,去除了异常样本。(c) 相对结合亲和力与加权保留时间的相关图,包括异常样本。三、受体亲和力的差异导致IgG亚类效应器功能的变化IgG亚类(IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)的Fc区域具有高度的序列同源性,但在几个关键残基上有所不同,这决定了它们与各种Fc受体的亲和力。为了探究不同Fc结构域的角色,作者对具有相同Fab结构域,但Fc结构域分别来自IgG1、IgG2和IgG4的mAb2变体,以及一种工程化稳定效应器无功能变体(SEFL2)进行亲和分离(图3b)。SEFL2变体是一种无糖基化IgG1变体(N297G),带有额外的工程铰链二硫键,设计为不具有ADCC功能。保留时间数据表明,工程SEFL2-IgG1模式的亲和力最低,其次是IgG2、IgG4,然后是IgG1,这些样品的整体洗脱顺序与已有文献报道的结果一致。然而,IgG4变体的洗脱时间似乎高估了结合亲和力,洗脱时间仅略早于IgG1变体。这种增加的表观亲和力或许与柱上受体的糖基化性质有关,不应用于评估FcγRIIIa对IgG4亚类单克隆抗体的亲和力。图3 (a) 人类IgG重链CH2区域的对齐序列(EU编号)。参与FcγRIIIa结合的IgG Fc残基以绿色突出显示(本研究中通过实验测量),蓝色和红色突出显示(文献报道),二硫键以黄色突出显示。与IgG1序列不同的残基以粗体显示。(b) 具有相同Fab区和不同Fc区的四种mAb2变体的紫外色谱图(λ=280 nm),对应于IgG1(蓝色)、IgG2(品红)、IgG4(褐红色)和带有N297G突变的IgG1 SEFL2(黑色)。插图显示了AlphaLISA测量的相对FcγRIIIa结合亲和力值。亲和力是相对于mAb2参考标准物质的IgG1变体测量的。四、二硫化物异构体对IgG2单抗中FcγRIIIa结合的影响鉴于IgG2亲和色谱图的异质性,作者选择具有二硫化物变体的IgG2(mAb3)进行进一步表征。该IgG2单抗存在几种天然的二硫键结构异构体,它们可以影响疗效和Fc受体结合行为。对二硫化物异构体的反相和FcγRIIIa亲和分离的并排比较(图4)。有趣的是,亲和分离方法中使用的类天然条件仍然能够区分这些结构异构体,这表明这些异构体对Fc和FcγRIIIa的结合亲和力也存在一定影响。图4 (a) 在280 nm处进行紫外检测的反相色谱图,显示天然产生的IgG2二硫化物变体和富集IgG2-a和IgG2-B的纯化样品的混合物分离。(B)相同样品的FcγRIIIa亲和紫外色谱图,显示IgG2二硫化物亚型的部分分辨率。六、在应力条件下识别对FcγRIIIa结合产生负面影响的修饰对受体结合位点或其附近的残基进行化学修饰可影响抗体-受体相互作用的亲和力,从而导致ADCC和疗效的变化。这种修饰可以在各种应激条件下诱导。本研究使用热应激利妥昔单抗样品(40°C,持续6周),通过LC-MS/MS肽图谱检测到200多个修饰。对比具有温度应力的样品和保持在4℃的对照样品的亲和色谱图,每个样品的主峰收集为四个组分(F1–F4)。40°C下的应力导致FcγRIIIa结合的最低亲和组分F1的峰面积略有增加(2%~4%)。对每个收集的组分进行肽图谱绘制,以确定组分中修饰相对百分比的趋势(图5)。馏分被分别赋值为0.1、0.2、0.3、0.4,以便斜率与R2进行比较,并且斜率的R2与绝对值之和可用作评分。具有正斜率的修饰(如半乳糖基化和唾液酸化)表明对受体结合有有利影响,而具有负斜率的修饰(如去酰胺化)表明对结合有不利影响。应激后,组分中的化学修饰斜率(N329脱酰胺)更高(图5b、d、f),而应激前后糖类的斜率(图5c、e、g)保持相似,表明斜率主要由聚糖对受体亲和力的影响以及组分中存在的糖类来定义。图5 (a)亲和色谱图突出显示了在40°C下热应激6周后,相对于4°C对照样品,mAb1峰值强度的变化。(b–g)FcγRIII亲和组分F1、F2、F3和F4中所选修饰的相对丰度变化。(h,i)R2与4°C组分中PTMs的百分比变化斜率的关系。R2与斜率的关系由组分中所有检测到的PTMs的线性回归确定。在所有面板中,红色表示热应力样本(40°C,6周),黑色表示4°C对照样本。所有统计分析中确定的关键属性汇总如表1所示。选择六个指标来评估数据的显著性,以确定修饰是否对FcγRIIIa结合至关重要。评估显示,利妥昔单抗P231(EU P227)、N301(EU N297)和N329(EU N325)三个残基上的11个修饰对结合的影响具有统计学意义。作者进一步分析了这些残基的空间分布,结果显示每个已鉴定的残基都与IgG1到FcγRIIIa的结合域非常接近,为确认这些属性对结合有重要影响提供了额外的信心。表1 确定关键性属性的统计分析总结撰稿:夏淑君编辑:李惠琳文章引用:1 Daniel W. Woodall, Thomas M. Dillon, Kevin Kalenian, et al. Non-targeted characterization of attributes affecting antibody-FcγRIIIa V158 (CD16a) binding via online affinity chromatography-mass spectrometry. mAbs, 2022, 14(1): 2004982.
  • 新品上市|高效样品前处理之法宝-复合型免疫亲和柱
    据世界粮农组织的调查,世界上每年有25%粮食受到已确认的霉菌毒素的污染。霉菌毒素是霉菌在食品或饲料里生长所生产的代谢产物,对人类和动物都有害。霉菌也称丝状真菌,是菌丝体比较发达但没有较大子实体的小型真菌的统称,是微生物中的高级生物,其形态和构造比细菌复杂。月旭科技现特别推出Welchrom® 新品复合型免疫亲和柱帮助大家轻松应对各种毒素的检测01 产品用途及原理Welchrom® 复合型免疫亲和柱用于从样品中分离、纯化真菌毒素,原理是基于抗原与抗体之间的特异性反应。免疫亲和柱中的抗体通过共价键作用悬浮在凝胶中,特异性吸附样品中的真菌毒素。如果供检测的样品中含有真菌毒素,样品通过免疫亲和柱时,毒素被抗体捕捉结合。所有其他物质,被从免疫亲和柱中清洗出去。甲醇作为洗脱液,将真菌毒素从抗体上洗脱。02 产品优势• 可同时测定多种真菌毒素含量,减少工作量。• 采用高特异性和高亲和力的的单克隆抗体。• 柱容量高,有效提高纯化效率。• 达到真菌毒素检测的国内外限量标准。• 良好的稳定性和可靠性,回收率高。• 纯化后直接用于ELISA法,高效液相色谱法,荧光光度法等。• 稳定性:12个月。• 可以用于复杂样品检测,包括食品、饲料、调味品等多种复杂基质。• 参考国家标准,检测结果准确可靠,满足客户的不同需求。03 样本处理步骤及亲和柱操作步骤(AOZ三合一免疫亲和柱为例)【样本处理步骤】(一)花生、玉米、大米、小麦及其制品、中药和饲料┅┅ 称取5g粉碎的样品,加入1g氯化钠,再加入甲醇-水(8:2)溶液20mL。┅┅ 涡旋或振荡提取20min。┅┅ 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤。┅┅ 取10mL滤液并加入40mLPBS混匀(中药材根据品种,可能需加入PBS-吐温20溶液),用玻璃微纤维滤纸过滤。┅┅ 取10ml过滤后液体过免疫亲和柱净化。稀释倍数:2(二)啤酒、黄酒等酒类┅┅ 称取脱气酒类试样(含二氧化碳的酒类样品使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,过滤或超声脱气)或其他不含二氧化碳的酒类试样10g,用PBS定容至50mL,混匀。┅┅ 以均质器高速搅拌(10000r/min及以上,均质器速度较慢时,应适当延长提取时间),提取2min;也可采用摇床(200r/min以上)振荡、超声提取和涡旋提取20min的方式进行提取。用玻璃微纤维滤纸过滤。┅┅ 取10ml过滤后液体过免疫亲和柱净化。稀释倍数:0.5(三)酱油和醋等液体样品┅┅ 称取25g样品,以甲醇-水(8:2)溶液定容至50mL。┅┅ 以均质器高速搅拌(10000r/min及以上,均质器速度较慢时,应适当延长提取时间),提取2min;也可采用摇床(200r/min以上)振荡20min、超声提取20min和涡旋提取15min的方式进行提取。┅┅ 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤。┅┅ 取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤。┅┅ 取10ml过滤后液体过免疫亲和柱净化。稀释倍数:1【亲和柱操作步骤】┅┅ 将免疫亲和柱连接于10mL注射器下。按照样本处理步骤的上样量进行过柱。┅┅ 将空气压力泵与注射器连接,打开亲和柱下帽,调节压力使溶液以约1-2滴/秒的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至液体排干。┅┅ 以10.0mL的PBS缓冲液淋洗柱子2次,弃去全部流出液,并通过5-10ml空气,吹干亲和柱。┅┅ 准确加入1.0mL洗脱液(甲醇-乙酸(98:2)溶液)洗脱,流速为1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。【结果判定】经免疫亲和柱净化后,收集到的洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测,也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。洗脱液中各种毒素的检测结果乘以相应的稀释倍数,即为样品中对应毒素的浓度。04 色谱图经过AOZ三合一免疫亲和柱处理过的样品,在各自液相条件下的图谱:05 适用范围及性能用于检测谷物、酒类、中药等食品和饲料等样本中的真菌毒素。柱容量:AFB≥200ng,OTA≥100ng,DON≥1000ng,ZEN≥1000ng。回收率:≥80%。06 贮藏条件贮藏条件:可于2-8℃储存,不可冻存。保存期:该产品有效期为12个月。07 免疫亲和柱小贴士┅┅ 真菌毒素危害极大,应戴手套操作。┅┅ 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。┅┅ 洗脱液可以直接使用色谱级甲醇洗脱,但可能会降低赭曲霉毒素A回收率。┅┅ 多毒素检测中,呕吐毒素因为是水溶性,过柱操作时免疫亲和柱对有机溶剂耐受性低,所以组合中包含有呕吐毒素的免疫亲和柱前处理方法会相应复杂一些。黄曲霉毒素、玉米赤酶烯酮、赭曲霉毒素A的组合,前处理方法基本一致。09 订货信息
  • 用亲和色谱法和四维蛋白质组学法系统鉴定血液中与顺铂结合的蛋白质
    大家好,本周为大家分享一篇发表在J Proteome Res.上的文章,Systematic Identification of Proteins Binding with Cisplatin in Blood by Affinity Chromatography and a Four-Dimensional Proteomic Method,该文章的通讯作者是华中科技大学药学院的杜支凤教授。以顺铂为代表的铂类抗癌药物广泛应用于治疗多种癌症肿瘤,如胃肠道癌、头颈部癌和卵巢癌等。在静脉滴注后,这些药物水解形成活性分子,与DNA结合并抑制DNA链的合成与复制,最终致使细胞死亡。然而,由于铂与硫醇的高亲和力,大多数铂在静脉注射后会与血液中的蛋白质结合;例如,人血清白蛋白 (HSA) 是含量最丰富的血清蛋白,也是血液中铂类药物的主要结合蛋白;另外,在红细胞中负责运输氧气的血红蛋白 (HB) 也被发现与铂结合,因此,有必要研究铂类药物在血液中的蛋白结合行为。先前的研究已经证明,利用质谱方法可以实现对高丰度蛋白质的可靠鉴定;然而,由于高丰度蛋白的干扰,占总蛋白的 80% 以上的低丰度蛋白则很少被鉴定。此外,由于缺乏足够信息,以及在胰蛋白酶消化过程中还原和烷基化剂的使用导致蛋白上的铂化位点无法被确定。更重要的是,目前排除假阳性结果的唯一方法是根据铂化肽的特征同位素模式,人工对比理论同位素和实验同位素,从而导致鉴定过程非常耗时并且具有较强的主观性。因此,有必要开发一种可靠、高效的方法来鉴定血液中铂类药物的结合蛋白质组。在血液蛋白质组学研究中,免疫亲和层析常用于消耗高丰度蛋白并富集低丰度蛋白。它有利于低丰度蛋白的鉴定和定量,从而可以提高血液中的蛋白质组覆盖范围。除了色谱分离外,离子淌度质谱 (IM−MS) 根据离子的迁移率差异进行分离,同样有助于低丰度蛋白质的分析。在金属化蛋白的鉴定中,金属化肽和游离肽的同位素分布模式明显具有差异,这有助于确定这些肽是否与金属药物结合。已经开发了一些数据处理软件程序来自动分配金属药物在已知蛋白质上的结合位点,如智能数字注释程序 (SNAP) 算法和 Apm2s 。本文结合高丰度蛋白分离和4D蛋白质组学方法 (IM-MS) ,系统、全面地鉴定了血液中顺铂的结合蛋白,并利用铂化肽的特征同位素模式和相似性算法来消除假阳性的识别。如图1所示,首先用超滤去除游离药物,然后使用多亲和去除柱分离血液样本中的高丰度和低丰度蛋白;用FAIMS Pro界面的nano-LC−MS/MS进行消化和分析;用MaxQuant对铂化的多肽和蛋白进行鉴定,用相似性算法Apm2s排除假阳性结果。在此基础上,采用基于平行反应监测 (PRM) 的方法测定了血浆中多肽与顺铂的结合率。本研究为系统鉴定血液中金属药物的结合蛋白提供了一种新方法,鉴定出的蛋白可能有助于了解铂类抗癌药物的毒性。图1 铂化蛋白的分离和鉴定以及用蛋白质组学方法测定顺铂与多肽之间的结合率的示意图本研究采用顺铂与人血浆的反应混合物建立了一种分析方法。为了与文献进行比较,样品的制备方法与文献中的制备方法相同1。选择CID作为碎裂方式,结果表明,从低丰度部分共鉴定出212个蛋白,从高丰度部分共鉴定出169个蛋白。在低丰度部分,共鉴定出1192个游离肽和208个铂化肽。其中,154个铂化肽被排除为假阳性结果,如文中表S1所示。高丰度部分的游离肽数和铂化肽数分别为1124个和169个,其中,144个铂化肽被排除为假阳性,如表S2所示。低丰度结合蛋白的鉴定在以往的研究中,由于高丰度蛋白的干扰,很少发现低丰度蛋白与铂的结合。本研究在高丰度蛋白被消耗后,从29个蛋白中共鉴定出54个铂化肽。APOA4中铂化肽的理论和实际质谱如图2所示,前体离子和铂化产物离子表现出特征的同位素峰。图片显示了关键的碎片离子的质谱图,用于分配铂化位点。在鉴定出的铂化蛋白中,CERU、FETUA、ITIH1和B4E1Z4有4个或更多的含铂肽,这表明铂可以与这些蛋白质的多条肽段结合。虽然低丰度蛋白只占血液中蛋白的一小部分,但它们具有非常重要的功能,对于维持正常生理活动不可或缺。例如,CERU可以将Fe2+氧化为Fe3+,并在铁代谢中发挥重要作用;B4E1Z4与补体激活相关。顺铂与这些蛋白的结合是否会对其功能产生影响仍有待进一步研究。图2 从低丰度蛋白部分鉴定出的铂化蛋白APOA4。(A)铂化肽的理论(左)和实验质谱(右);(B)铂化肽的MS/MS和指示铂化位点的关键碎片离子的质谱图高丰度结合蛋白的鉴定IGHG1中一个铂化肽的理论和实验质谱如图3所示,其前体离子和铂化产物离子表现出特征同位素峰。根据关键的碎片离子确定了铂化位点。在已鉴定的蛋白中,ALBU(白蛋白)和CO3(补体C3)有4个或更多的含铂多肽。HSA负责血液中药物和小分子的运输,CO3在补体系统的激活中起着重要作用。高丰度蛋白与顺铂的结合已被用于提高肿瘤化疗的疗效和选择性,而新发现的高丰度结合蛋白有助于相关研究。与低丰度组分鉴定的铂化蛋白相比,大部分与低丰度组分蛋白不同,两个组分中仅共同检测到FETUA和CFAH作为铂化蛋白,这表明亲和层析对高丰度蛋白和低丰度蛋白的分离效果较好。图3 从高丰度蛋白部分鉴定出铂化蛋白IGHG1。(A)铂化肽的理论(左)和实验质谱(右);(B)铂化肽的MS/MS和指示铂化位点的关键碎片离子的质谱图IM−MS分离铂化肽异构体如图4所示,通过nano-LC−IM−MS/MS成功分离了低丰度蛋白组分中FETUA的铂化肽异构体。同分异构体a和b是典型的铂化肽,由质谱图的同位素模式显示,它们被很好地分离。它们的MS/MS不同,根据关键碎片离子,异构体a和b的铂化位点分别被划分为M和H/T。这个例子显示了IM−MS对复杂样品的分辨能力。图4 用nanoLC−IM−MS/MS分离的低丰度蛋白组分中FETUA的铂化肽异构体。(A)m/z=764.67提取离子色谱和异构体a、b的质谱,理论质谱见中间;(B)异构体的MS/MS和关键碎片离子的质谱图结合蛋白的铂化位点在本文的两项研究中,His 和 Met 是首选的铂结合位点。此外,D、E、S和Y也被发现是铂结合位点。这也是合理的,因为血清蛋白的供氧氨基酸已被证明是顺铂的动力学首选结合位点。很少有Cys残基被鉴定为结合位点,这可能是由于没有还原和烷基化。肽的半胱氨酸常形成二硫键,不经还原和烷基化就无法识别,因此,序列覆盖率会很低。在未来的研究中,应使用替代还原剂来提高肽序列覆盖率。生物信息学分析 为了揭示铂化蛋白质的定位、功能和途径,将从高丰度和低丰度部分中鉴定的蛋白质组合起来并通过生物信息学工具进行分析。如图5A所示,GO分析表明大部分结合蛋白位于细胞外区域,发挥蛋白结合、金属离子结合、酶抑制剂等功能;因此,镀铂蛋白的定位证实了鉴定的可靠性。此外,这些蛋白质参与内肽酶活性、免疫系统过程、补体激活、炎症反应和凝血的负调节。为了阐明所涉及的途径,对鉴定的蛋白质进行了KEGG途径富集分析,结果表明最显着的富集途径是补体和凝血级联途径(图5B)。补体和凝血级联途径已被证明在造血干/祖细胞的动员中发挥关键作用,这对造血具有重要意义。顺铂的血液学毒性与其在补体和凝血级联途径中与血液蛋白的结合之间的相关性值得进一步研究。图5 (A)通过GO 分析确定的铂化蛋白的定位、分子功能和生物学过程;(B)铂化蛋白的富集途径血液蛋白与顺铂的结合率 由于未检测到一些铂化肽的游离形式,因此仅使用高丰度组分中的13种肽进行亲和力研究。可靠地计算了属于五种蛋白质的六种铂化肽的结合率。PRM分析中这些肽的信息见表S5,定量结果见图6。其中,富含组氨酸的糖蛋白的一种肽与顺铂的结合率最高,这可能是由于顺铂对含组氨酸和带负电荷的生物分子的高亲和力。Apoa1 蛋白的一个肽与顺铂的结合率最低。在本研究中可以确定结合率的铂化肽数量较少,这主要是由于某些肽的质谱响应低以及某些肽存在氧化形式。因此,这些肽的结合比率不能通过 PRM 方法确定。然而,与以往的研究相比,根据属于同一蛋白质的肽的质谱计数粗略估计某种蛋白质的丰度,这种方法可以更准确地确定高丰度肽与铂的结合率。图6 根据PRM分析多肽与顺铂的结合亲和力顺铂与血液蛋白的结合与其药代动力学、活性、毒性和副作用密切相关。然而,血液蛋白质组的复杂性限制了低丰度结合蛋白的鉴定。在本研究中,基于亲和色谱和nanoLC-IM-MS/MS 的 4D 蛋白质组学方法被用于分离低丰度和高丰度蛋白质并分析这两个部分。基于铂化肽的特征同位素分布和相似性算法,排除了假阳性鉴定。结果,共有 39 种蛋白质被鉴定为铂化蛋白质,这比之前研究中的数量要高得多。随后的生物信息学分析表明,这些结合蛋白位于细胞外区域,主要参与内肽酶活性、免疫系统过程、补体激活、炎症反应和凝血的负调控。最显着的富集途径是补体和凝血级联,这可能与顺铂的血液学毒性有关。高丰度部分的 PRM 分析表明,富含组氨酸的糖蛋白中的肽与高丰度组分中的顺铂的结合率最高。综上所述,本研究揭示了人类血液中与顺铂结合的蛋白质组,并计算了顺铂与血液蛋白的结合率。这种方法虽然在数据分析方面比较耗时,但它可以识别复杂系统中金属药物的低丰度结合蛋白,并且可以准确测量药物与血液蛋白的结合率。
  • 一种膜渗透的、固定化金属亲和色谱富集的交联试剂用于推进体内交联质谱分析
    大家好,本周为大家分享一篇发表在Angew. Chem. Int. Ed.上的文章,A Membrane-Permeable and Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) - Enrichable Cross-Linking Reagent to Advance In Vivo Cross-Linking Mass Spectrometry,该文章的通讯作者是德国莱布尼茨分子药理学研究所的Fan Liu教授。交联质谱 (XL-MS) 已被用于在全蛋白质组范围内表征蛋白质的结构和蛋白间相互作用。目前,由于能够穿透完整细胞的交联试剂和富集交联肽的策略的缺乏,体内交联质谱研究的深度远远落后于细胞裂解液的现有应用。为了解决以上限制,本文开发了一种含膦酸盐的交联剂-tBu PhoX,它能够有效地渗透各种生物膜,并且可以通过常规的固定化金属离子亲和色谱 (IMAC) 进行稳定富集。 文章建立了一个基于 tBu-PhoX 的体内 XL-MS 分析流程,在完整的人类细胞中实现了较高的交联识别数目,并大大缩短了分析时间。总的来说,本文开发的交联剂和 XL-MS 分析流程为生命系统的全面交联质谱表征铺平了道路。细胞蛋白质组通过广泛的非共价相互作用网络进行组织,表征蛋白质-蛋白质相互作用 (PPIs) 对于了解细胞的调节机制至关重要。交联质谱 (XL-MS) 是系统研究细胞 PPIs 的一种强有力的方法,在 XL-MS 中,天然蛋白质接触通过交联剂共价捕获,交联剂是一种由间隔臂和两个对特定氨基酸侧链具有反应性的官能团组成的有机小分子,交联样品经过蛋白酶水解后,可以通过基于质谱的肽测序来定位氨基酸之间的交联。由于交联剂具有确定的最大长度,检测到的交联揭示了蛋白质内部或蛋白质之间的氨基酸的最大距离。以上这些信息提供了对蛋白质构象、结构和相互作用网络的见解。虽然最初仅限于纯化的蛋白质组装,但如今 XL-MS 已经可以应用于复杂的生物系统——这是通过开发先进的交联搜索引擎、样品制备策略和交联剂设计而实现的。特别是,已进行的几项全蛋白质组范围的 XL-MS 研究表明,可以通过使用可富集的交联剂来改进交联产物的鉴定,例如,通过添加生物素或叠氮化物/炔烃标记,使得消化混合物中的交联肽段能够基于亲和纯化或点击化学富集。最近,一种基于膦酸的交联剂 PhoX 被引入作为现有生物素或叠氮化物/炔烃标记试剂的高效和特异性替代品。PhoX 可通过固定化金属离子亲和色谱 (IMAC) 实现交联富集,这是一种非常快速和稳健的富集策略。 然而,尽管 PhoX 已被证明可用于从细胞裂解液中进行交联鉴定,但它无法渗透细胞膜,因此不适合体内的 XL-MS检测。基于以上讨论,本文开发了交联剂 tBu-PhoX ,其中,膦酸羟基被叔丁基保护以掩盖负电荷(图 1)。为了检测 tBu-PhoX 的膜通透性,文章交联了各种膜封闭的生物系统,包括人 HEK293T 细胞、从小鼠心脏分离的线粒体和革兰氏阳性枯草芽孢杆菌,并在 SDS-PAGE 上监测了蛋白质条带的变化(图 2)。在SDS-PAGE中,观察到在交联剂浓度为0.5和1.0mM时,蛋白质向更高分子量的浓度依赖性迁移,这表明了有效的膜渗透和交联。相比之下,将 PhoX 应用于完整的 HEK293T 细胞将产生与非交联对照相同的条带模式。图1 tBu-PhoX交联剂图2 PhoX或tBu-PhoX交联HEK293T细胞的SDS-PAGE在证明了 tBu-PhoX 可渗透各种生物膜系统后,文章接下来开发了一种基于 tBu-PhoX 的体内 XL-MS 工作流程,相比于之前的全蛋白质组 XL-MS 策略,该工作流程提高了样品处理和交联富集的速度和效率(图 3)。首先,按照标准蛋白质消化方案将交联蛋白质消化成肽;其次,使用 IMAC 珠对消化混合物进行预清除步骤以去除内源性修饰(特别是磷酸化);第三,预清除的消化混合物(从 IMAC 流出)在稀释三氟乙酸 (TFA) 溶液中孵育以去除叔丁基并暴露膦酸基团以进行二次 IMAC 富集。第四,使用标准 IMAC 程序丰富交联产物,最后通过 LC-MS 分析以进行交联产物鉴定。图3 与tBu-PhoX进行体内交联和后续样品处理的工作流程接下来,文章优化了体内 XL-MS 工作流程的几个分析参数,以最大限度地提高交联检测的效率。首先,通过使用 IMAC 珠预清除评估了去除磷酸肽的效率;之后,使用 tBu-PhoX 交联完整的 HEK293T 细胞,经酶切成肽后,并应用预清除 IMAC 步骤去除内源性磷酸肽。在去保护步骤之后,利用 IMAC 富集交联,并通过单次 120 min LC-MS 运行测量富集的样品。通过测量 IMAC 洗脱液中磷酸肽和交联产物的数量,发现第二个 IMAC 中只有数百条磷酸肽,而预清除 IMAC 中有 4,128 条磷酸肽,这突出了通过预清除 IMAC 步骤去除磷酸肽的效率。此外,与单阶段 IMAC 结果相比,使用预清除 IMAC 的工作流程鉴定了 22% 以上的交联(1165 对 952 交联),证明了该两阶段工作流程去除干扰修饰肽的好处(图 4A)。其次,文章在肽水平上研究了膦酸盐去保护的功效。使用 tBu-PhoX 制备了体内交联的 HEK293T 样品,并分析了在不同的酸度(TFA 浓度)和孵育时间下,去保护后交联的数量如何变化。结果显示,不同浓度的 TFA 下获得了相似数量的交联。为简化处理(即在接下来的IMAC富集步骤中保持相对较低的样品体积),选择 0.5% TFA 的去保护条件,持续两个小时(图 4B,C)。第三,文章测试了 Orbitrap Tribrid 质谱仪的不同采集参数如何影响交联识别,即在高场非对称波形离子迁移率质谱法 (FAIMS) 中应用的电荷态选择和补偿电压 (CVs)。当考虑电荷状态 +3 和更高时,确定了最多数量的 tBu-PhoX 交联肽(图 4D)。图4 样品处理和LC-MS参数的优化文章将优化参数后的体内 XL-MS 工作流程应用于完整的 HEK293T 细胞。使用 180 min的 LC 梯度和优化后的分析参数,文章从体内 tBu-PhoX 交联的 HEK293T 细胞中获得了 9,547 个交联(图 5A)。基因本体分析表明,交联蛋白参与了广泛的分子功能、生物过程和细胞成分,表明 tBu-PhoX 可以揭示所有细胞区域的 PPIs(图 5A)。另外,文章还考察了完整细胞的体内 XL-MS 是否捕获了与细胞裂解液的 XL-MS 不同的 PPIs。为了验证这一点,从 HEK293T 细胞中制备 tBu-PhoX 交联裂解液,并使用与体内 XL-MS 实验相同的工作流程处理样品。 结果显示,从五个 SEC 部分中确定了 9,393 个交联。这表明 tBu-PhoX 允许以类似的效率进行裂解和体内 XL-MS。比较本文的体内和裂解数据表明,在体内 XL-MS 实验中,蛋白质间交联的数量更高,从而产生了更加相互关联的 PPI 网络(图 5B,C)。这种效应可以通过细胞环境的拥挤来解释,其中蛋白质紧密堆积并参与多种相互作用,这些相互作用被细胞裂解和稀释部分破坏。文章在 8 种选定蛋白质复合物的已知 3D 结构上可视化了 145 个体内检测到的交联(图 5C),另外,还观察到 96.6% 的交联在 35 Å 的最大距离限制内(图 5D),表明此 XL-MS 工作流程对内源性蛋白质复合物的体内结构分析的适用性。最后,文章比较了 tBu-PhoX 与 PhoX 在表征细胞裂解液的 PPI 网络方面的性能。使用与上述 tBu-PhoX 裂解液交联实验相同的交联条件从 HEK293T 细胞制备 PhoX 交联裂解液。为了去除内源性磷酸肽,在单阶段 IMAC 富集之前,用碱性磷酸酶处理消化的肽两小时。使用与 tBu-PhoX 相同的 LC-MS 方法进行 LC-MS 分析。该实验产生了 2,117 个交联,与使用 tBu-PhoX 识别的交联数量(1,942 个交联)相比略高。然而,基于 PhoX 的 XL-MS 流程需要更长的样品制备时间,因为需要进行碱性磷酸酶再处理和之后的额外脱盐步骤。行体内交联综上所述,本文开发并应用了一种新型的、可富集的、用于体内 XL-MS 的膜渗透交联剂 tBu-PhoX。在广泛使用的交联条件下(交联剂浓度为 1-5 mM),tBu-PhoX能够有效地穿透各种生物膜,为完整的细胞器和活细胞提供交联的机会。tBu-PhoX上的叔丁基基团使得高效的两阶段IMAC样品制备方案成为可能;首先,使交联剂对 IMAC 呈惰性,以促进基于 IMAC 快速而彻底地提取不需要的磷酸化肽,然后,通过去除叔丁基暴露膦酸基团,从而有效地二次 IMAC 富集交联剂修饰的肽。通过随后的 SEC 分馏,可以进一步富集交联肽段以进行 LC-MS 分析。XL-MS 在表征生命系统中的蛋白质结构和相互作用方面发挥着越来越重要的作用。为了促进这一发展,迫切需要有效的体内 XL-MS 方法。文章报告的体内 XL-MS 工作流程满足了这一需求,提供了与之前基于裂解液的 XL-MS 研究类似的交联识别能力,但需要的测量时间不到之前报告的十分之一。这一结果突出表明,本文开发并应用的 tBu-PhoX 交联剂和集成样品制备流程为推进体内相互作用组学和结构生物学提供了一种非常有前景的化学方法。
  • 普瑞邦推出多款多毒素检测复合免疫亲和柱
    应对霉菌毒素多毒素检测需求,普瑞邦推出多款多功能免疫亲和柱 Pribolab是面向全球提供霉菌毒素检测解决方案的服务商之一,针对霉菌毒素检测不断创新和研发检测新技术和新产品,近期举力推出多款使用价值较高的多功能/复合免疫亲和柱,包括:黄曲霉毒素,赭曲霉毒素多功能复合免疫亲和柱 3ml黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮,赭曲霉毒素多功能复合免疫亲和柱3ml呕吐毒素,玉米赤霉烯酮多功能复合免疫亲和柱3ml至此,普瑞邦公司真菌毒素免疫亲和柱形成的全系列产品:黄曲霉毒素总量免疫亲和柱、黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素B+G+M免疫亲和柱, 呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、伏马毒素、T-2/HT-2毒素免疫亲和柱;多功能复合免疫亲和柱包括:黄曲霉毒素总量/赭曲霉毒素多功能复合免疫亲和柱、黄曲霉毒素总量/赭曲霉毒素A/玉米赤霉烯酮复合免疫亲和柱、呕吐毒素+玉米赤霉烯酮复合免疫亲和柱。此次Pribolab公司推出的霉菌毒素多功能免疫亲和柱,在利用免疫技术上创新实现了同时富集、净化多种霉菌毒素检测的要求,与之前的霉菌毒素多功能净化柱比较,其优势在于不仅实现了同时净化多种毒素的过程,尤其是净化效果优异,快速准确、灵敏度高,检测成本低廉, 保证了检测的高重现性和可靠性,完全符合多毒素检测的样品处理方向,是食品安全检测领域领先的新技术和新方向。为进一步推进霉菌毒素检测新技术的应用和推广,我公司携手普瑞邦针对新老客户开展优惠促销活动。如果您对霉菌毒素多毒素检测有需求和兴趣都可参加我们的优惠试用活动。。多功能复合免疫亲和柱的详细信息敬请来电索取!北京泰乐祺科技有限公司 客服热线:400-688-5349 13311089404联系电话:010-63380700,63395349, 52453170,57491886 QQ咨询:772836971 网址:www.rapid-bio.com 邮箱:taileqi@rapid-bio.com 关于普瑞邦: Pribolab?(普瑞邦)是面向全球提供霉菌毒素检测解决方案的主要服务商之一,凭借强大的研发团队和专业的霉菌毒素检测技术的研究,为全球农业生产、食品加工与粮食、饲料等行业提供专业的霉菌毒素检测技术与产品服务。PriboFast?霉菌毒素免疫亲和柱PriboFast?霉菌毒素多功能免疫亲和柱PriboMIPTM霉菌毒素分子印迹固相亲和柱PriboFast?霉菌毒素多功能净化柱PriboSpinTM霉菌毒素快速纯化小柱PriboFast?酶联免疫检测试剂盒PriboFast?KRC 光化学柱后衍生装置Pribolab?真菌毒素浓缩器PriboVitaTM维生素检测免疫亲和柱和ELISA试剂盒更多产品请登录公司网站查询或咨询当地授权销售商.
  • 氨基糖苷类抗生素检测新方案 样本富集净化新选择——AGs免疫亲和柱!
    氨基糖苷类化合物(AGs)是由两个或两个以上氨基糖通过糖苷键与氨基环醇骨架连接而成的碱性低聚糖抗生素。这类抗生素包括:链霉素、新霉素、卡那霉素、庆大霉素、壮观霉素等。他们共同特点是水溶性好、性质稳定、抗菌谱较广,又因其价格低廉,在兽药领域应用广泛。AGs存在一定程度的耳毒性、肾毒性和神经肌肉阻滞作用。目前世界多个国家和组织建立了AGs在动物源食品中的相关限量标准,我国GB 31650-2019规定AGs在动物源食品中的限量如下所示:AGs检测方法及制约因素AGs分子中因富含氨基和羟基而呈强极性,其分子中缺少发色团和荧光团,反相色谱保留较差,因此动物源食品中 AGs的检测比其他抗生素更为复杂。目前 AGs的检测方法主要有免疫分析法、高效液相色谱-质谱/质谱法(HPLC-MS/MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS-MS),其中免疫分析法方便快速更适合定性筛查检测,HPLC-MS/MS、LC-MS-MS定量准确、灵敏度高更适合确证检测。在乳及乳制品中,GB/T 22969-2008《奶粉和牛奶中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量》,虽然只规定了链霉素、双氢链霉素和卡那霉素3种氨基糖苷类药物残留量的高效液相色谱-串联质谱测定的确证方法,但GB 31650-2019《食品中兽药最大残留限量》中还规定了其他氨基糖苷类药物包含大观霉素、安普霉素、庆大霉素、新霉素等,这些项目也是实验室对乳及乳制品安全检测过程的必检项目。目前HPLC-MS/MS、LC-MS-MS方法可对多种AGs进行同时检测,但是一次性不能对多种氨基糖苷类药物富集净化是提高检测效率的主要制约因素之一!在动物组织中,GB/T 21323-2007《动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定 高效液相色谱-质谱/质谱法》规定了动物组织中大观霉素、潮霉素B、双氢链霉素、链霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素、安普霉素、妥布霉素、庆大霉素和新霉素10种氨基糖苷类药物残留量的高效液相色谱-串联质谱测定的确证方法。但此检测AGs的方法前处理过程使用C18富集净化,检测限仅为20-100μg/kg。美正氨基糖苷类免疫亲和柱美正通过多年的积累,开发出一种使用氨基糖苷类免疫亲和柱前处理的方法,解决了动物源性食品中氨基糖苷类抗生素检测过程中前处理富集净化的难点。使用氨基糖苷类免疫亲和柱的前处理方法,可以将动物源食品中11种氨基糖苷类抗生素进行一次性特异性富集净化,能够更好地消除基质干扰,既提高了前处理富集净化效率又提高了分析的准确度和灵敏度。药物种类壮观霉素潮霉素B双氢链霉素链霉素丁胺卡那霉素卡那霉素安普霉素妥布霉素庆大霉素新霉素巴龙霉素产品特点特异性强:免疫学原理,对样本中AGs选择性高、特异性结合能力强;操作简单:可穿透式柱塞,使用便捷;性能优异:AGs加标回收率80-120%,准确度高样本类型动物源性食品,包括乳制品、动物组织及水产品等。药物残留类免疫亲和柱免费试用!美正在药物残留检测领域有更多的前处理富集净化方法,值美正十五周年之际,意向用户可对我司药物残留类免疫亲和柱进行免费试用。
  • 食品中杂色曲霉素的测定—免疫亲和柱净化+HPLC分析
    杂色曲霉素是一种霉菌毒素,因结构与黄曲霉毒素相似,其毒性和致癌性受到世界各国的高度重视。本报告参考食品安全国家标准GB 5009.26-2016,应用日立 Chromaster系统测定了食品中的杂色曲霉素。样品经免疫亲和柱处理后,通过反相色谱法分离,在紫外检测器325 nm波长下对样品中的杂色曲霉素进行了检测。 ■ 标准品测定例?杂色曲霉素标准溶液在5.0~100.0 μg/L浓度范围内r2 = 0.9999 ,线性关系良好;对75.0 μg/L的标准样品,进行6次连续测试,保留时间RSD= 0.06%,峰面积RSD=0.35%,重现性良好。■ 样品前处理根据食品安全国家标准GB 5009.26-2016进行样品前处理,具体操作流程如下图所示:?■ 样品测定例对市售的大米、花生、玉米和黄豆等样品进行了测定,在确认未检出杂色曲霉素后,对样品添加了杂色曲霉素的标准品后进行分析,结果确认检出了杂色曲霉素。杂色曲霉素的加标回收率符合GB 5009.26-2016要求。 综上所述,日立高效液相色谱仪Chromaster对食品中杂色曲霉素进行检测,在选定的条件下,对标准样品溶液进行连续进样测定(n = 6),重复性良好。标准溶液在5.0 μg/L ~ 100.0 μg/L浓度范围内有良好线性关系(r2 = 0.9999)。样品的加标回收率结果也满足国标要求。结果表明,该方法适用于食品中杂色曲霉素的测定。
  • 上海安谱-Beacon免疫亲和柱限时大促销-买一赠一
    下载: 上海安谱-Beacon免疫亲和柱限时大促销-买一赠一.pdf 上海安谱科学仪器有限公司 地址:上海市斜土路2897弄50号海文商务楼5层 [200030] 电话:86-21-54890099 传真:86-21-54248311 网址:www.anpel.com.cn 联系方式:shanpel@anpel.com.cn 技术支持:techservice@anpel.com.cn
  • 赛分科技推出填料新品-MabPurix亲和层析填料
    近日,赛分科技成功开发了首款亲和层析填料——MabPurix™ Protein A,该填料以琼脂糖凝胶为基质,表面键合配体Protein A,主要应用于生物制药领域——抗体的纯化。作为全球色谱产品最为完善的企业之一以及生物分离色谱的领航者,赛分科技十分重视新产品研发,目前的色谱分离填料已涵盖反相、正相、离子交换、手性、体积排阻、亲和、HILIC、离子排斥、配体交换等十几种类型,产品品种齐全,性能优越。其中,色谱填料产品包括硅胶基质和聚合物基质两大类,几十小类,可根据客户实际需要分别应用于不同的领域中。本次所开发的MabPurix™ Protein A填料是赛分科技推出的首款亲和层析填料,也是首次推出的以琼脂糖凝胶为基质的填料,此前,赛分科技的填料基质包括球形硅胶、不定形硅胶、聚甲基丙烯酸酯、PS/DVB等。与其它基质相比,琼脂糖基质填料具有更好的生物相容性。MabPurix™ Protein A的加入使得赛分科技的产品品种更加齐全,尤其对于生物分离色谱产品家族里,MabPurix™ Protein A的成功推出具有里程碑的意义。 赛分科技的聚合物基质填料家族 MabPurix™ 亲和层析填料 MabPurix™ 亲和层析填料专为大规模抗体纯化而设计,是由高纯度Protein A与高交联度琼脂糖偶联后的产物,用于从血清、腹水、细胞培养上清和细胞提取物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein A是金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,单链,它通过与免疫球蛋白的Fc区相互作用,可结合大多数哺乳动物的IgG,尤其对人IgG1、IgG2、IgG4,小鼠IgG 2a和IgG 2b具有高亲和力。MabPurix™ Protein A亲和层析填料具有高稳定性、高选择性、高效率的特点,是抗体纯化的优选。 ● 可根据用户的需要提供各种规格的预装柱;● 强化基质保证了高流速、低背压;● 特殊设计的定向键合技术保证了高的载量;● 可耐受苛刻的在线清洗条件;● 可以很容易的由小规模的实验室制备向大规模的工业化生产进行线性放大。 更多信息请登录:http://www.sepax-tech.com.cn/products/gytl/juhe/infinity/99.html 关于赛分科技 赛分科技有限公司(Sepax Technologies, Inc)总部位于美国特拉华州高新技术开发区,致力于开发和生产药物与生物大分子分离和纯化领域的技术和产品。赛分科技是集研发、生产和全球销售为一体的实业型企业。公司主要产品为液相色谱柱及耗材、固相萃取柱(SPE)及耗材、液相色谱填料以及分离纯化仪器设备。在液相色谱领域里,赛分科技已开发出了100多种不同型号的液相色谱材料,涵盖了反相、正相、超临界(SFC)、手性(Chiral)、离子交换、体积排阻、亲和、HILIC等各种类别,为世界范围内液相色谱产品最为完善的企业之一。 赛分科技的创新技术使之生产出具有最高分辨率及最高效的生物分离产品,包括体积排阻、离子交换、抗体分离、和糖类化合物分离色谱填料和色谱柱,可广泛地应用于单克隆抗体、各种蛋白、DNA、RNA、多肽、多糖和疫苗等生物样品的分析、分离和纯化。赛分科技先进的技术和完善的产品线已使赛分成为全球生物分离的领航者。 公司网站:www.sepax-tech.com.cn www.sepax-tech.com
  • 耶鲁大学医学院实验室的选择 | 月旭预装NTA和IDA镍亲和层析柱!
    2020年2月29日,月旭科技董事长兼总经理屠炳芳先生、国际市场总监赵枭先生前往访问耶鲁大学医学院实验室(Yale University School of Medicine)。针对耶鲁大学医学院实验室使用月旭科技蛋白纯化系列产品进行研究的情况,与研究学者展开了深切的沟通和交流。具体探讨了关于研究过程中产品使用心得及建议等问题,并就未来如何更好的为海外提供优质的产品进行了讨论。本次耶鲁大学医学院实验室中,采用了月旭科技预装NTA和IDA镍亲和层析柱。柱子采用1/16英寸接口可以直接与AKTA蛋白纯化仪相配套使用,也可随实验条件不同与注射器、恒流泵或其他色谱系统配套使用,性能稳定,重复性好、使用简单。月旭PreCot Ni 6FF(NTA)5ml和PreCot Ni 6FF(IDA)5ml两款预装柱可以满足大多数实验室级别的小量纯化His-tag融合蛋白的需求。同时也可以根据客户的需求预装不同规格的预装柱,方便客户进行规模化放大。下面,就跟着小编一起来具体了解一下吧!层析柱参数NTA和IDA填料性能对比注:二价的镍离子有六个螯合价位,Ni-NTA螯合了四价,剩余两价;而Ni-IDA螯合三价,剩余三价,因此Ni-IDA结合能力要比Ni-NTA强,在同样条件下Ni-IDA的载量要比Ni-NTA的高,但Ni-NTA更稳定,耐受更强的还原剂,镍离子不易脱落。因此需要根据不同纯化条件选择纯化所需的镍柱,以达到纯化的zui佳效果。此次交流活动,不仅收获了耶鲁大学医学院实验室和科研学者对月旭产品的一致认可。也标志着月旭科技在开拓海外市场中迈出了更加成功的一步。正如我们所倡导和坚信的,国产仪器及产品在某些方面比进口产品更好。而月旭科技作为民族品牌,励志要将国产产品推出国门,并通过不断创新和自我勉励,生产出更优质的产品,为我国的科学仪器事业发展贡献出自己的一份力量!并将“让国货在海外的舞台上发光发亮”的愿景铭记于心,脚踏实地走好每一段奋斗拼搏的路!
  • 2020年色谱柱新品盘点:看看色谱柱的“新”风向
    仪器信息网讯 色谱柱技术始于上世纪50年代,随着填料和填充技术的发展,色谱柱技术日益成熟,功能也日趋完善,目前已被广泛应用于生命科学、环保、材料、食品、药物开发等领域。近几年,我国色谱行业发展迅速,色谱柱也迎来高速发展时代。尽管2020年新冠疫情肆虐,很多仪器厂商受到牵连,但色谱柱市场似乎并未受太大影响,各主流品牌竞争依旧激烈,瑞思泰康、岛津(上海)实验器材有限公司(SGLC)、纳谱、安捷伦、沃特世、月旭科技等厂家相继推出色谱柱新品与新技术。接下来,仪器信息网就将为大家介绍一下2020年上市的色谱柱新品,我们一起来了解下这些色谱柱都有哪些亮点?在此特别需要说明的是,由于篇幅有限,本次盘点不包括SPE柱,且本次盘点为不完全统计,如有遗漏,欢迎补充。(该排名不分先后)瑞思泰康:Raptor Polar X色谱柱2020年,瑞思泰康特别推出了新一代色谱柱——Raptor Polar X色谱柱,该款柱子的固定相可以通过两个保留机制之间的平衡,选择性地保留极性分析物。用户在进行实验分析的时候,只需要简单的改变流动相条件,就可以在两种保留模式间进行切换,从而保留各种极性化合物。SGLC:SHIMSEN Ankylo通用型液相色谱柱+SK系列高性价比气相色谱柱+ShimCap系列石化常用色谱柱2020年,岛津(上海)实验器材有限公司围绕着高柱效、高分离度和高性价比推出了三款新产品——SHIMSEN Ankylo通用型液相色谱柱、SK系列高性价比气相色谱柱和ShimCap系列石化常用色谱柱。SHIMSEN Ankylo通用型液相色谱柱SHIMSEN Ankylo系列通过优化的表面键合密度、更均一的填料粒径大小,在保证高分离度的前提下,使得化合物的洗脱更快,分析效率更高;该系列色谱柱具有10种不同固定相、两种孔径的选择,具有高分离度、高惰性、高柱效、耐污染等特点,并能在较宽pH范围、较高比例水相流动相条件下稳定使用,可广泛应用于食品、药品、环境等多个领域的分析检测项目。SK系列气相色谱柱SK(Shimadzu Krypton)系列气相色谱柱包含了日常分析常用及通用型色谱柱,例如5MS、624、Wax、FFAP等固定相的常用型号,可为客户提供高性能、高品质、高性价比的气相色谱柱。ShimCap系列石化常用色谱柱ShimCap系列气相色谱柱是岛津为石油、化工等应用特殊设计和定制的一类色谱柱,包括色谱分析常用的一些型号之外,还包括如硫化物分析、石油烃分析、气体分析以及定制分析系统(系统GC)涉及的OXY、Gaspro、氧化铝等色谱柱。纳谱: 生物大分子液相色谱柱+小分子分离液相色谱柱1、生物大分子液相色谱柱BioCore HIC-Butyl高性能疏水蛋白分离色谱柱BioCore HIC-Butyl是一款基于疏水相互作用分离原理的高性能蛋白分离柱,它采用先进的单分散大孔硅胶微球为基质,结合独特的表面键合技术,适用于单抗以及单抗偶联药物分子的分离表征。BioCore Protein A色谱柱BioCore Protein A是一款以单分散大孔高交联度PS/DVB微球为基质,表面涂覆中性亲水涂层后,再通过环氧反应键合一种特殊的耐碱型重组Protein A亲和基团制得的高性能Protein A亲和色谱柱,适用于单克隆抗体(mAbs)和Fc融合蛋白的高速效价分析。BioCore WCX色谱柱BioCore WCX是一款以先进的单分散无孔聚合物微球为基质,结合独特的表面键合技术而成的高性能弱阳离子交换蛋白分离色谱柱,适用于单抗、双抗以及单抗偶联药物中电荷异质体的分离,广泛地应用于生物制药、医疗、科研等领域。BioCore SEC-120BioCore SEC是纳谱分析推出的全新高性能体积排阻色谱柱系列。该产品采用高性能体积排阻分离介质,以孔道结构经过特殊设计的单分散多孔硅胶为基质,在硅胶表面键合中性亲水层以将分析物与固定相之间的相互作用降到最低。BioCore SEC-120色谱柱主要用于小分子化药及聚体,多肽、多糖、低分子量寡糖核苷酸和蛋白。2、小分子分离液相色谱柱ChromCoreTM系列的120C18-T、AR C18及BR C18液相色谱柱ChromCore AR C18色谱柱采用粒径高度均一的高纯硅胶微球,先进成熟的表面键合,无封尾处理,可在低pH条件下免受水解的作用,避免了因封尾试剂在酸性条件下易水解而改变C18选择性的问题,使其在酸性流动相条件下具有更出色的分离性能、稳定性和更长的使用寿命,特别适合在极低pH至中等pH条件下分离极性化合物。ChromCore BR C18色谱柱是基于在单分散硅胶微球表面首先进行有机硅胶层杂化处理,然后进行十八烷基多点键合和完全封端处理的键合相,可以在强碱性和强酸性条件下使用,广泛应用于制药、食品、环境、化工等领域。多环芳烃专用柱ChromCore PAH色谱柱是针对US EPA Method 610方法中16种多环芳烃(PAH)的检测而设计的专用液相色谱柱。具有良好的批次重现性和稳定性,基线分离EPA方法610中的16 种多环芳烃,适用于脂溶性维生素的异构体分离。阿卡波糖专用柱阿卡波糖专用色谱柱是纳谱分析基于《中国药典》中阿卡波糖含量项下方法研发出的专用色谱柱。该款色谱柱采用了独特的氨基键合技术,配合以专用的阿卡波糖保护柱使用,可有效增强色 谱柱的稳定性以及使用寿命。安捷伦:Poroshell 120 CS-C18 色谱柱2020年,安捷伦在慕尼黑展会上发布了Poroshell 120 CS-C18色谱柱。该款色谱柱将表面多孔型杂化颗粒与表面电荷技术相结合,既保留了高效低压的优势,又能耐受广泛的pH范围,满足LC和LC/MS方法开发高效快速的需求。沃特世:推出全新ACQUITY PREMIER色谱柱该系列色谱柱采用MaxPeak高性能表面(HPS)技术,不仅可配合各品牌的UHPLC系统使用,还能减少因分析物-表面相互作用导致的分析物损失,从而显著提升数据质量。此外,Waters ACQUITY PREMIER色谱柱采用MaxPeak HPS技术,这种有机/无机杂化表面技术能在样品与不锈钢色谱柱之间形成屏障表层。使得色谱柱灵敏度提高,可顺利检出以往因与金属结合而无法检出或观察不到的低浓度分析物;整体峰形和峰容量更出色,还能降低吸附损失,提高分离的重现性。月旭科技:Ultimate® OAA有机酸检测专用液相色谱柱等多款专用柱齐发2020年月旭科技不断丰富色谱柱产品线,共推出了7款新品。接下来介绍其中最具代表行的四款柱子:Ultimate® OAA有机酸检测专用液相色谱柱该款柱子是月旭科技推出的针对水溶性有机酸分子检测的反相专用色谱柱。通过独特键合工艺改进,OAA专用柱相较于常规反相C18色谱柱,色谱性能更佳,分离度更高,色谱峰更均匀,在分离羟基脂肪酸和芳香有机酸方面具有优异的性能。Blossmate® SAX草甘膦检测专用色谱柱这是一款针对草甘膦难点推出的全新阴离子色谱柱。该款柱子采用超高纯球形色谱硅胶为基质,键合高密度季铵基官能团,具有较高的机械强度,同时在测定草甘膦在高浓度进样条件下,连续运行500针以上,其色谱峰形依旧理想,具有出色的分离能力和良好的使用的寿命。Ultimate® Amino Acid Plus氨基酸分析专用柱该款柱子是月旭科技在原有的氨基酸分析专用色谱柱的基础上,进一步优化分析方法,推出全新的专用色谱柱,使用蒸发光散射检测器,不需进行氨基酸的衍生,可检测氨基酸种类更多,结果稳定性更高。Blossmate® PSV C18防腐剂分析专用柱Blossmate® PSV C18防腐剂分析专用柱在与诸如LC-MS等技术联用时也表现出十足的兼容性,可广泛应用于寡糖、氨基酸、小肽、核苷酸和有机酸等多种成分分析。Blossmate® PSV C18对于食品添加剂拥有很强的保留能力,改善拖尾效果明显,分离度也十分出色。此外,Blossmate® PSV C18在连续进样1000针以上,分离度依旧符合国标要求,柱压依旧没有明显升高,寿命依旧坚挺!
  • TSKgel色谱柱在单抗药物研发中的应用实例
    与传统小分子药不同,单抗类蛋白药是非均一性的结构复杂的大分子,因此使这类原研药或仿制药的研发与质控工作难度增大。通过液相色谱-质谱联用技术(LC/MS),结合蛋白分子量的测定、异构体、氨基酸修饰、糖基化修饰以及聚集情况分析等多种检测手段,可对单抗类药物进行全面的结构表征。 在文献《Physicochemical and Functional Comparability Between the Proposed Biosimilar Rituximab GP2013 and Originator Rituximab》中提到了将利妥昔单抗与其生物类似药(GP2013)之间,针对各项物化性质和功能性指标进行了对比分析试验。 利用尺寸排阻色谱法(SEC)的分子空间结构不同的原理可对抗体的多聚体、抗体片段以及PEG蛋白等进行有效分析。在该文献中,对原研和仿制药样品的非均一性分析(抗体聚集情况分析)时使用了TSKgel G3000SWXL色谱柱(请参照该文献2.12 SEC,CE-SDS,AF4部分)。 硼酸盐亲和色谱法多用于对糖或糖蛋白等生物分子进行分离。该文献中,使用了亲和色谱柱TSKgel Boronate-5PW对GP2013样品中糖基化和未糖基化的抗体异构体进行了分离。(请参照该文献2.13 Boronate Affinity Chromatography部分) 在该文献2.14 Glycan Analysis部分中,通过N-糖苷酶F来释放单克隆抗体Fc部分上的糖链,并对游离的N-末端糖链进行2-AB荧光标记后进行糖基化分析。其中使用到了TSKgel Amide-80(2.0 mm ID X 15 cm,3 um)色谱柱用来分离2-AB标记的糖链。 TSKgel Amide-80亲水相互作用(HILIC)色谱柱适用于亲水性低分子、核酸以及糖类等化合物的分离分析。在单抗药物分析应用上,TSKgel Amide-80常用来分析结合在抗体上的糖链的结构差异性。 为了满足广大色谱工作者对抗体药高效分析的需求,东曹公司作为分离纯化产品的生产商,不断致力于开发出在色谱分离度、灵敏度以及分析速度上具有革命性提升的色谱柱产品。特别是在对抗体药物质量控制中的HPLC检测方法上可以提供完备的解决方案。
  • 新品上市—纳鸥科技Origsil色谱柱
    纳鸥科技Origsil色谱柱一、产品创新点1、Origsil 色谱柱的填料是采用金属含量极低的超纯球形全多孔硅胶为基质制成,独特的键合封端技术显著增加了硅胶表面的配体覆盖率,并有效消除了分离中的未键合硅醇基的影响。2、更高的配体覆盖率可以使填料惰性、分离能力和稳定性得到极大改善,3、非常适合进行酸性、碱性及不同性质有机物分离的色谱柱,而且具有超长使用寿命。二、产品优势1、 超长的使用寿命,大大降低使用成本 2、 高柱效(理论塔板数9 万以上)3、 优异的选择性和分离能力 4、优异的批次重现性填料技术参数柱效测试三、产品实验结果通过柱效测试可以看出,经过Origsil 色谱柱分离后,各化合物理论塔板数均在9 万以上,同时峰形对称性非常好。Origsil 色谱柱具有高柱效和优异的峰形。四、产品寿命测试防腐剂作为食品添加剂的一种,一直是食品检测行业的重点关注对象。由于国标食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定(GB 5009.28-2016)中的样品前处方法非常简单,采用水提,去蛋白,过滤,离心的方法处理样品,并没有涉及去杂干净的SPE 方法,最终待测样品含有大量小分子杂质和颗粒物,极易污染色谱柱,导致色谱柱性能迅速下降,大部分品牌的C18 柱在500针左右出现压力升高,柱效明显下降,分离度大大降低等现象。严格按照国标方法,我们请第三方的用户,在实际的应用场景(各种食品基质,比如:糕点、饮料、牛奶、蜜饯等),用Origsil 色谱柱进行防腐剂的检测寿命测试,以下是Origsil 色谱柱分离度和寿命测试结果情况:第1 针第500 针第1000 针Origsil 色谱柱完全按照国标方法和色谱条件,可完美分离三种防腐剂,经过1000 针实际样品寿命测试,Origsil 色谱柱仍具有较好分离度和较高柱效。Origsil 色谱柱满足您对长寿命色谱柱的需求。Origsil 色谱柱除了应用在食品行业,较脏样品的检测(比如:防腐剂),对于其他行业,比如:中药材和医药中间体等检测,Origsil 色谱柱也非常适合。Origsil 色谱柱是一款广泛适用于酸性、碱性及不同性质有机物分离的通用色谱柱。北京纳鸥科技有限公司(简称:纳鸥科技),致力于为客户提供高品质实验室消耗品和常用实验室仪器,并可提供贴合客户需求的行业解决方案,让您的实验更简单、更高效。纳鸥科技集研发、生产、销售于一体,不断研发和引进更好、更先进的产品,解决客户在检测中遇到的困难,竭力帮助检测工作者优化检测效果、提高检测效率。实验室消耗品的高品质、可靠性、重现性对于实验室工作者而言至关重要,为此,纳鸥科技可为您提供的产品主要有:自主Anavo品牌的固相萃取柱(SPE)、QuEChERS、免疫亲和柱、样品瓶、滤膜滤器、热解析管、高纯溶剂;代理PE旗下ES Industries、Kromasil 等色谱柱,Dr.E、BePure、TRC等标准品,BCHP气源及相关仪器等。如您对 色谱柱等有其他需求,可通过仪器信息网 400-860-5168转4892联系我们!
  • 东曹将参展2019易贸生物产业大会并发布液相色谱柱新品
    2019年2月,东曹生命科学(Tosoh Bioscience)在全球范围内推出了其在生物制药领域的创新产品——用于抗体药物分析的高性能亲和色谱柱TSKgel® FcR-IIIA-NPR。该色谱柱是将重组人FcγIIIA作为配基,键合到非多孔亲水聚合物基质的填料上,并充填至PEEK色谱柱内。专为抗体药物糖链结构的分析和活性测定而开发。 抗体药物主要通过动物细胞培养进行生产。近几年的研究发现,抗体Fc段的糖链结构会对药效产生很大影响。这可以理解为糖链结构差异会影响抗体与引起免疫反应的效应细胞上的Fc受体之间的结合。因此,对抗体药物糖链结构的分析在质量控制中至关重要。TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱的产品优势:1、创新的分离技术:能够识别抗体Fc段N-糖链的结构差异,并根据抗体与Fc受体之一的FcγIIIA之间的亲和性来实现抗体分离。2、优异的稳定性:利用蛋白重组技术对Fc受体进行修饰,显著提升其化学稳定性。3、短时间内快速分析:由于FcγIIIA会特异性结合抗体Fc区,即使是含有杂质的细胞培养上清液也可以直接上样分析。 目前为止,传统的抗体活性检测方法主要有细胞ELISA法或SPR等手段,不仅需要昂贵的设备及繁琐的操作,且实验成本高耗时较长。TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱的推出将给抗体活性检测带来新的思路和方法。该色谱柱还能应用在研发前期细胞株的筛查、细胞培养条件的优化、以及对培养过程的质量监控等环节。 东曹将参加3月2-3日在南京举办的易贸生物产业大会,并在会议期间进行新品发布演讲,向广大用户介绍这款高性能色谱柱产品。 同时,欢迎大家莅临会场5楼的东曹展台,与我们的技术专家交流、获取最新的产品技术资料。新品发布 题目:抗体药物ADCC效应分析的新FcR色谱技术演讲人:潘明祥,副总经理,东曹(上海)生物科技有限公司时间:3月2日 10:50-11:10地点:国际青年文化中心5楼 中华厅
  • 小柱子,大市场——近一年色谱柱新品盘点
    p style=" text-indent: 2em " 近日,有国内研究机构发布报告,在全球市场,色谱柱的产量从2013年的3096.5千根已增加到2018年的3785.7千根,其中液相色谱柱产量比重最大。预计2019年到2024年,全球色谱柱的复合年增长率将达到4.14%左右,未来几年,色谱柱销售将呈现稳步增长的态势。色谱柱主要应用于生命科学、生物技术、化工、农药、食品饮料等行业。报告显示,近几年,全球范围内色谱柱市场主要受制于制药工业的推动,2018年,制药工业的应用占色谱柱消费总量的32.58%。 /p p style=" text-indent: 2em " 随着各领域的发展,色谱柱技术也面临着一些新的需求,包括更高的分离效率、更快的分离速度、更好的化学稳定性、更大的峰容量及更适宜的分离模式等。此外,针对痕量样品的分离分析,对检测灵敏度也提出了更高的要求。近年来,色谱柱技术发展迅速,取得了非常显著的发展。近一年,国内外耗材厂商根据市场需求相继推出了不少色谱柱新品,仪器信息网编辑特别将2018年6月至今的色谱柱新品进行盘点,以飨读者。在此特别需要说明的是,由于色谱柱新品较多,本次盘点的范围仅限收录于本网资讯新品栏目等的不完全统计。 /p p style=" text-indent: 2em " strong 岛津:实心核颗粒色谱柱+SHIMSEN· 甄选系列 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 2018年12月,岛津推出实心核表面多孔颗粒色谱柱系列Shim-pack Velox系列色谱柱和SHIMSEN· 甄选系列SHIMSEN VD C30色谱柱。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " strong Shim-pack Velox系列色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 与全多孔颗粒色谱柱相比,该系列色谱柱表面的多孔颗粒具有更高的通量和更快的速度,且可提供5种不同选择性的固定相,具有3种粒径选择。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Shim-pack Velox C18 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " Shim-pac Velox C18是一款通用型高效实心核颗粒反相色谱柱,具有较强的保留能力。适用于制药、食品、环境和临床等多领域样品分析需求。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Shim-pack Velox SP-C18 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 该色谱柱适用于在低pH值流动相条件下进行分析。SP-C18键合相采用异丁基侧链保护技术,进一步降低了硅胶表面硅醇基的活性,所以即使在非常严苛的酸性体系下,依然具有非常好的使用寿命。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Shim-pack Velox Biphenyl /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " Shim-pack Velox Biphenyl 色谱柱是键合二苯基固定相的实心核颗粒色谱柱,能够增强含有芳香基团的化合物的保留,因此适合用于生物样品分析中含有偶极作用,不饱和键和配位基团的性化合物分析。另外,联苯键合相增强了立体空间结构的选择性,对结构具有微小差异的化合物或者同分异构体也有非常好的分离结果。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Shim-pack Velox PFPP /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " Shim-pack Velox PFPP 能够提供与C18固定相不同的选择性,比较适合用于卤代化合物,位置异构体和带电碱性基团物质的分离,非常适合异构体的分离。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Shim-pack Velox HILIC /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 亲水性相互作用(Hydrophilic interaction chromatography ,简称HILIC) 模式目前主要用于极性化合物的分析,Shim-pack Velox HILIC 固定相填料是不键合任何基团的实心核硅胶,利用硅胶基团表面硅醇基的极性来提升极性化合物保留,流动相采用高比例乙腈配合低比例水或者挥发性缓冲盐水溶液,由于有机相比例高,所以可以显著提升MS检测灵敏度。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/ed2e8a27-12b0-4bce-b8db-f9bede9f548f.jpg" title=" 02 Shim-pack Velox实心核颗粒液相色谱柱_副本.jpg" alt=" 02 Shim-pack Velox实心核颗粒液相色谱柱_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH101849/" target=" _self" style=" text-decoration: underline color: rgb(0, 0, 0) " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i strong span style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline font-size: 14px " Shim-pack Velox实心核颗粒液相色谱柱 /span /strong /i i strong span style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline font-size: 14px " /span /strong /i i strong /strong /i /span /a /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " strong SHIMSEN VD C30色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 该款色谱柱是SHIMSEN· 甄选系列的第一款新产品,主要用于应对食品中维生素的检定,且保留时间稳定,峰型尖锐,分离度好。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/7618662b-68c2-48f3-9b78-64637fb1f05d.jpg" title=" 05 SHIMSEN系列_副本.jpg" alt=" 05 SHIMSEN系列_副本.jpg" / /p p style=" text-indent: 0em text-align: center " span style=" font-size: 14px " strong SHIMSEN系列 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " strong 东曹:FcR-ⅢA-NPR亲和色谱柱+UP-SW2000超高效液相色谱柱 /strong /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong TSKgel FcR-ⅢA-NPR亲和色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 2018年11月,东曹公司推出了一款高性能亲和色谱柱TSKgel & nbsp FcR-IIIA-NPR,该色谱柱是将重组人FcγIIIA作为配基,键合到非多孔亲水聚合物基质的填料上,并充填至PEEK色谱柱内。专为抗体药物糖链结构的分析和活性测定而开发,该色谱柱还能应用在研发前期细胞株的筛查、细胞培养条件的优化、以及对培养过程的质量监控等环节。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/a24db41f-ad79-420d-89bc-8d9b04b6ccc2.jpg" title=" 东曹FCR-A-NPR_1.jpg" alt=" 东曹FCR-A-NPR_1.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 14px " strong TSKgel FcR-ⅢA-NPR亲和色谱柱 /strong /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong TSKgel UP-SW2000超高效液相色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 东曹另一款耗材新品是TSKgel UP-SW2000超高效液相色谱分析柱,它是继东曹2017年推出UP-SW3000后的第二款UHPLC 色谱柱,粒径同为2μm。与UP-SW3000略有不同的是,UP-SW2000更适合用于分析多肽、酶等小分子蛋白。此款色谱柱与现有的SW系列产品有相同的填料表面特性,对蛋白质具有相同的分离选择性,峰形更尖锐,分辨率更高。可兼容于UHPLC和常规HPLC系统。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/cc3e40e4-e5de-41d1-aac1-0a8f6bd47c47.jpg" title=" 东曹SW2000_1.jpg" alt=" 东曹SW2000_1.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH101626/" target=" _self" style=" text-decoration: underline color: rgb(0, 0, 0) " span style=" text-decoration: underline color: rgb(0, 0, 0) " i strong span style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline font-size: 14px " TSKgel UP-SW2000超高效液相色谱分析柱 /span /strong /i /span /a span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i i strong /strong /i i /i i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i i strong /strong /i i /i i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i i strong span style=" color: rgb(178, 162, 199) font-size: 14px " /span /strong /i /span /p p strong Phenomenex:Zebron& reg & nbsp ZB-624PLUS& #8482 气相色谱柱+Luna& reg Omega SUGAR糖柱 /strong /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Zebron& reg & nbsp ZB-624PLUS& #8482 气相色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " Zebron& reg ZB-624PLUS& #8482 是Phenomenex公司于2018年7月推出的适合挥发性有机物分析的新款气相色谱柱。与上一代相比,该款色谱柱具有更高的惰性,温度限值可至300/320℃,其具有高灵敏度高和低信噪比,可提供良好的峰型。该色谱柱适合分析检测水、药物、食品、大麻和特殊化学样品中的溶剂和其他挥发物。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/4e486b96-d1d1-474b-a767-f5e947bc0a07.jpg" title=" Phenon Zebron_1.png" alt=" Phenon Zebron_1.png" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH104068/" target=" _self" style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i strong span style=" color: rgb(0, 0, 0) font-size: 14px " Zebron& reg & nbsp ZB-624PLUS& #8482 气相色谱柱 /span /strong /i /span /a /p p strong span style=" color: rgb(255, 0, 0) " Luna& reg Omega SUGAR糖柱 /span /strong /p p style=" text-indent: 2em " Phenomenex最畅销的色谱柱就是Luna系列。2018年7月,Phenomenex推出新的用于糖类物质分析的Luna Omega系列HILIC亲水色谱柱,是针对分离和分析食品、饮料和药物基质中的碳水化合物而设计。全新的Luna Omega 糖柱固定相由酰胺多元醇,交联氨基,还有极性封尾组成,通过相互作用机制显著地增强了极性保留能力。该色谱柱注重与HILIC亲水作用色谱分离,流动相使用乙腈和水,能够克服可能影响糖类分析物分离的问题。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/ca080459-1434-43ba-a766-38c2bf2bc8ac.jpg" title=" Phenomenex bioZen.jpg" alt=" Phenomenex bioZen.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 14px " strong Luna& reg Omega SUGAR糖柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " strong 沃特世:全新阳离子交换色谱柱 ——BioResolve SCX色谱柱 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 沃特世于2019年1月份推出的这款阳离子交换色谱柱BioResolve SCX及其专用消耗品,用于简化并改进单克隆抗体(mAb)治疗药物的表征和监测工作流程,可在生物制剂和生物类似药的发现、开发及生产应用中用于确认药物疗效和安全性。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/e4c42b5f-00c7-4a98-89fb-72e94715cffa.jpg" title=" Waters_1.jpg" alt=" Waters_1.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100287/" target=" _self" style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i strong span style=" color: rgb(0, 0, 0) font-size: 14px " BioResolve SCX色谱柱和Vanguard FIT保护柱 /span /strong /i /span /a /p p style=" text-indent: 2em " strong 迪马科技:聚合物基质液相色谱柱 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 在2018年10月31日举办的慕尼黑上海分析生化展,迪马推出一系列聚合物基质液相色谱柱。相比于硅胶基质氨基柱,聚合物基质液相色谱柱拥有更好的耐用性和重现性,特别适合于糖类物质的分析。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/4ff239da-2d10-469f-b3b3-3c43fb02c36c.jpg" title=" 迪马_1_副本.jpg" alt=" 迪马_1_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100707/" target=" _self" style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i span style=" color: rgb(0, 0, 0) font-size: 14px " strong 迪马聚合物基质液相色谱柱 /strong /span /i /span /a /p p style=" text-indent: 2em " strong 瑞思泰康:Raptor& nbsp ARC-18液相色谱柱 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 2018年7月,瑞斯泰康在中国市场推出一款1.8& nbsp μm& nbsp 的Raptor& nbsp ARC-18液相色谱柱,用于UHPLC分析。该色谱柱具备平衡良好的保留时间,但没有通用C18的使用缺点& nbsp ;封尾的配体能抵御苛刻的强碱性流动相,全生产过程考量保证了超级重现性,无注入次数和批次之分,理想用于高敏感性的质谱检测。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/5a5f643d-048e-43e8-baf5-7aa05e29fd88.jpg" title=" resta.jpg" alt=" resta.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH103664/" target=" _self" style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i span style=" color: rgb(0, 0, 0) font-size: 14px " strong Raptor& nbsp ARC-18液相色谱柱 /strong /span /i /span /a /p p & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " strong 月旭科技:Xtimate& reg lactose NH2色谱柱+ Xtimate& reg XB-SCX色谱柱 /strong /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Xtimate& reg lactose NH2色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 2018年下半年月旭科技成功推出专用于分离分析《2015版中国药典》收录的辅料品种乳糖的氨基色谱柱——Xtimate& reg lactose NH2柱。该款色谱柱采用独特键合工艺,极大程度地克服了因氨基基团易水解脱落而造成的色谱柱在使用过程中基线噪音大、乳糖峰面积不稳定、RSD值易超过2%等问题,是分离分析乳糖的极佳选择的色谱柱。 /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong Xtimate& reg XB-SCX色谱柱 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 同期,月旭推出的另一款Xtimate& reg XB-SCX色谱柱属于阳离子键合硅胶填料色谱柱,完全符合中国药典“磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂”的填料描述,主要用于盐酸二甲双胍的分离。该款色谱柱不仅能使三聚氰胺和二甲双胍的分离度远大于10,而且使双氰胺具有极佳的峰型,完全避免了溶剂峰对双氰胺的出峰干扰。该款色谱柱是用于分离《2015版中国药典》收录品种—盐酸二甲双胍的极为理想的色谱柱。 /p p style=" text-align: center " img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201907/uepic/2aa36655-1a9d-4ad0-ad93-6820d20e26da.jpg" title=" 月旭.jpg" alt=" 月旭.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100931/" target=" _self" style=" color: rgb(0, 0, 0) text-decoration: underline " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " i strong span style=" color: rgb(0, 0, 0) font-size: 14px " 月旭Xtimate& reg 系列色谱柱 /span /strong /i /span /a /p
  • 磐合科仪推出专用黄曲霉素M1免疫亲和柱
    针对奶粉厂家普遍关注的黄曲霉素M1检测问题,磐合科仪于今年年初新引进了黄曲霉素M1免疫亲和柱,配合专业的全在线真菌霉素专用分析系统,可实现黄曲霉素M1 的连续、快速检测。 事件回放:一、2014年7月底,德州禹城的奶牛养殖户普遍反映,连续十多天,牛奶质量检测黄曲霉素超标非常严重,导致当地牛奶厂拒绝他们的奶源供应。其直接导火线是奶牛饲料的黄曲霉素超标(该批饲料检测的黄曲霉素数值是39.6,而国家允许的数值仅为10);二、2014年七月初,半数花生酱样品检出黄曲霉素;三、2014年4月初,青岛海关破获14万吨花生走私案 ,其中强致癌物黄曲霉素超标;.......
  • 做色谱柱领域的“ACE”,助力中国生物制药创新——访艾万拓中国总经理王慕阳
    自2020年初新冠疫情爆发以来,mRNA疫苗技术得到迅猛发展,成为应对新冠疫情的关键生物技术。然而mRNA疫苗稳定性差,不利于全球运输和长期储存,识别出可能影响mRNA疫苗稳定性和疗效的杂质对于mRNA疫苗的长期使用至关重要。国际mRNA三巨头之一Moderna于2021年11月在Nature Communications发表了一篇关于脂质纳米颗粒给药系统(LNPs)中mRNA活性丧失新机制的文章,鉴于传统的mRNA纯度分析技术无法精确检测到脂质-mRNA反应形成的杂质,研究者采用反相离子对高效液相色谱(RP-IP HPLC)对此类杂质进行鉴定,识别出使mRNA无法翻译而导致蛋白质表达失败的原因。对于脂质和LNP的表征,文章中巧妙地使用RP-UPLC-CAD检测方法,色谱柱则采用Avantor® ACE® Excel 2 Super C18 2.1*150mm。它是一款基于超惰性碱性去活硅胶颗粒的C18色谱柱,相较于杂化颗粒,其显著优势在于拥有更高的柱效和具有更广泛的pH耐受范围。众所周知,液相色谱检测方法开发过程中,改变pH是优化选择性和鉴定样品杂质的常用手段。上述ACE Super C18系列色谱柱的pH耐受范围为1.5-11.5,满足用户在低、中和高pH条件下探索最佳检测条件的需求。为了进一步了解艾万拓色谱柱的产品特点和发展历史,近日,仪器信息网编辑专访了艾万拓中国总经理王慕阳女士,同时,也借此机会对艾万拓的中国市场战略进行了深入了解。王慕阳 艾万拓中国总经理ACE色谱柱的“前世今生”王慕阳首先向我们介绍了ACE系列色谱柱的发展历史,ACE系列色谱柱原属于英国老牌色谱分析产品制造商Advanced Chromatography Technologies Ltd.,简称ACT公司。2015年,ACT公司被VWR集团收购成为其旗下子公司。2017年,艾万拓为了扩大公司规模、拓展公司业务和优化全球经销网络,成功将VWR收购成为其全资子公司。至此,ACE系列色谱柱成为艾万拓产品家族的一部分。作为美国《财富》500强企业之一,艾万拓(Avantor)是一家为生物制药、医疗保健、教育和政府机构、先进技术和应用材料行业的用户提供关键任务产品和服务的全球先进供应商。王慕阳介绍说:“艾万拓能够给用户提供多样而全面的完整解决方案,包括分析化学、生物制药、食品安全检测等研究领域的解决方案。艾万拓生产的一系列领先UHPLC和HPLC色谱产品,其质量符合ISO 9001/ISO 14001英国认证生产标准,在全球多个国家畅销,备受好评。”艾万拓的色谱柱产品聚焦中高端市场,具有超高性价比,涵盖了最小的毛细管柱、分析柱、制备柱、定制化柱等,不仅满足用户的研发需求,同时帮助用户降低成本,而且独有新型固定相技术能帮助用户完成难度极高的方法开发。通过严格的质控,艾万拓色谱柱具备高稳定性和高重现性,保证用户方法在实验室之间的转移与重现。Avantor ACE系列是艾万拓色谱柱产品系列中的王牌,其采用的独特键合相能够达到其他色谱柱无法实现的分离效果。产品系列包括基于超惰性硅胶新型及常规固定相的多种色谱柱,为用户提供7种粒径、4种孔径和13种标准柱内径等多种选择,并且分析方法可放大至制备级,因此,能够满足用户多样化需求。Avantor ACE色谱柱产品线Avantor ACE色谱柱封装键合技术(EBT™ )示意图Avantor ACE色谱柱能帮助用户缩短研发周期,提高工作效率,节约成本,在越来越多行业里得到用户的认可。国内大型药企如恒瑞、正大天晴、华海,CRO企业如药明康德、科文斯、方达医药等用户都对艾万拓的色谱柱产品十分青睐。除了制药领域,Avantor ACE色谱柱同时也在环境、食品、化工、诊断等诸多领域,拥有广泛的用户群体。王慕阳表示:“艾万拓坚持延续ACE品牌的优秀设计和制造标准,源源不断地为用户带来高品质、性能卓越的Avantor ACE色谱柱,帮助用户解决研发生产中遇到的各式各样难题。”优异的生物药纯化性能——PROchievA™ 重组Protein A树脂随着全球人口老龄化加剧、慢性病患病率持续走高,医疗保健的需求正在迅速增长。单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,正在引领第二次生物医药产品浪潮。全球制药企业为提高效率、降低成本不断寻求优化单克隆抗体生产流程的工具。艾万拓新开发的BAKERBOND PROchievA™ 重组Protein A 亲和色谱树脂有效地解决了上述难题,其采用新型专有protein A配基,可为单克隆抗体、Fc融合蛋白和IgG抗体类型分子提供优异的纯化性能。新型J.T.Baker BAKERBOND PROchievA™ 重组Protein A树脂具体性能特点包括:具有出色的mAb动态结合载量和更高的蛋白质纯化能力,在实验室工艺开发和大规模生产方面,它比常用的protein A树脂具有更加出色的性能;采用精心设计的专有配基,能够在碱性条件保持稳定;可在多个纯化循环中保持其高动态结合载量,为多次纯化提供了经济高效的方案;采用安全且不易燃的缓冲液储存、运输,消除了繁琐的操作。王慕阳补充说:“PROchievA™ 重组Protein A树脂能够与J.T.Baker层析缓冲液和添加剂一起使用,为生物制药亲和层析提供更高的效率和纯度。”据悉,J.T.Baker品牌有140多年的历史,其高品质产品,优化的应用方案和功能性检测可以满足用户的高端应用需求,并确保高精度和高重现性的结果。持续加码中国市场,推动中国生物制药创新2010年,艾万拓将其全球专业技术引入中国市场,为中国市场提供驻场服务、采购服务、仪器设备管理服务、临床服务及数字化解决方案。凭借出色的产品和优异的服务体验,艾万拓在中国拥有一众忠实的用户和粉丝。艾万拓2021年全球净销售额为73.9亿美元,较2020年增长约15.5%。与此同时,中国区的业绩增长令人振奋,增长速率高达22%。王慕阳表示:“艾万拓十分看好中国市场。未来,中国市场将继续成为艾万拓全球战略投资和业务拓展重心。着眼于潜力无穷的中国市场,艾万拓将扩大在华制造工厂的建设,引入独特的解决方案,加强供应链安全性和提高区域产能,更好地服务于快速增长的中国市场。”中国已将生物技术列入“中国制造2025”的十大战略增长领域,明确了在创新、出口市场和进口替代产品等方面的具体目标,并通过诸如“健康中国2030”、“十四五”生物经济发展规划等方案,优先部署医疗健康产业,大力发展生物经济,使中国的生物制药行业处于前所未有的高速扩张中。王慕阳表示:“艾万拓未来在华投资战略布局中,将目光聚焦于具备高水平制造能力的生物制药企业,推动创新以满足生命科学市场日益增长的需求。艾万拓整合自身能力与优势,优化全球系统和业务流程,为中国生物产业领域的用户提供世界级的解决方案,包括单克隆抗体、细胞和基因疗法、mRNA以及COVID-19疫苗的生产等。”艾万拓提供的产品和服务包括J.T.Baker高精度耗材、Masterflex蠕动泵和一次性使用系统等,在研发、工艺开发和商业化生产中发挥了至关重要的作用。从新冠患者检测到疫苗开发和生产,再到疗法供应链,艾万拓在抗击新冠肺炎疫情的各个阶段为生物制药企业提供全方位支持,艾万拓的技术和质量标准也帮助中国新冠疫苗和制药公司走向全球。截止目前,艾万拓在全球设有12个创新中心,艾万拓上海创新与用户支持中心是在中国首个支持生物制药创新及用户服务的实验室和应用中心,旨在助力生物制药发展,为行业提供更多突破性的解决方案,提升艾万拓为在华用户提供专业服务的能力。王慕阳说:“上海创新及用户支持中心的落成印证了我们对中国成长为全球生物制药行业的创新枢纽充满信心,艾万拓将继续为中国企业带来优化的解决方案和先进的原料产品。”
  • 离子液体柱——脂质组学中分离脂肪酸的气相色谱柱
    编者注:傅若农教授生于1930年,1953年毕业于北京大学化学系,而后一直在北京理工大学(原北京工业学院)从事教学与科研工作。1958年,傅若农教授开始带领学生初步进入吸附柱色谱和气相色谱的探索 1966到1976年文化大革命的后期,傅若农教授在干校劳动的间隙,系统地阅读并翻译了两本气相色谱启蒙书,从此进入其后半生一直从事的事业&mdash &mdash 色谱研究。傅若农教授是我国老一辈色谱研究专家,见证了我国气相色谱研究的发展,为我国培养了众多色谱研究人才。 第一讲:傅若农讲述气相色谱技术发展历史及趋势 第二讲:傅若农:从三家公司GC产品更迭看气相技术发展 第三讲:傅若农:从国产气相产品看国内气相发展脉络及现状 第四讲:傅若农:气相色谱固定液的前世今生 第五讲:傅若农:气-固色谱的魅力 第六讲:傅若农:PLOT气相色谱柱的诱惑力 第七讲:傅若农:酒驾判官&mdash &mdash 顶空气相色谱的前世今生 第八讲:傅若农:一扫而光&mdash &mdash 吹扫捕集-气相色谱的发展 第九讲:傅若农:凌空一瞥洞察一切&mdash &mdash 神通广大的固相微萃取(SPME) 第十讲:傅若农:悬&ldquo 珠&rdquo 济世&mdash &mdash 单液滴微萃取(SDME)的妙用 第十一讲:傅若农:扭转乾坤&mdash &mdash 神奇的反应顶空气相色谱分析 第十二讲:擒魔序曲&mdash &mdash 脂质组学研究中的样品处理 前言   作为代谢组学的重要分支之一,脂质组学(Lipidomics)的研究对象是生物体的所有脂质分子,并以此为依据推测其它与脂质作用的生物分子的变化,进而揭示脂质在各种生命活动中的重要作用机制。脂质组学是总体研究和这些疾病有关的脂质化合物,找到昭示这些疾病的生物标记物。   前一篇讲述了脂质组学研究中的样品处理技术,一般情况下样品处理后可以直接用鸟枪法进行质谱分析,但是如果是一个成分复杂的系统,就要进行分离,可以用气相色谱、液相色谱、薄层色谱或毛细管电泳,本文介绍代谢组学研究中使用离子液体色谱柱分离脂肪酸的气相色谱方法。 1、基本情况   由于脂质分子是不挥发性的化合物,同时有些脂质分子受热易于降解,所以在脂质组学研究中使用气相色谱有些困难,逊色于薄层色谱和液相色谱。如果使用气相色谱进行衍生化是必须的步骤,但是很多情况下衍生化会丧失脂质分子种类特点的结构信息。但是由于气相色谱以其对异构体的高分离能力、高灵敏度、便于进行定量分析的能力,它仍然是脂质组学分析中的有力工具。通常气相色谱用于分析某些类别的脂质,可以获得很高的分离度和灵敏度,所以经过很特殊的萃取、用TLC 或 HPLC与分离、再经衍生化是用气相色谱进行脂质组学研究的基本方法。用气相色谱可以很灵敏地检测许多类别的脂质,如脂肪酸、磷脂、鞘脂类、甘油酯、胆固醇和类固醇。分析高分子量的化合物,必须使用高柱温,甚至需要400 C,近年Sutton等配置了高温气相色谱-飞行时间质谱,这一系统可以进行高分子量化合物(m/z达1850),进行在线质谱分析温度达430℃,这样的系统适合于长链脂质的分析。   近年把离子液体用作气相色谱固定相,用以分离脂质混合物,特别是脂质的异构体。Delmonte等讨论了脂肪酸顺反异构体的分离问题,一些单不饱和脂肪酸的几何和位置异构体可以得到很好的分离。使用这一方法对18:1 FFA的各种异构体可以分离出10个单独的峰,此后使用这一方法分析了人头发、指甲等实际样品,因此建议使用离子液体毛细管色谱柱分析全脂肪酸或脂肪酸甲酯,这种固定相适合于脂质组学,得到更多脂质分子的种类信息。(刘虎威研究组,Anal Chem, 2014, 86, 161&minus 175) 2、室温离子液体作气相色谱固定相   室温离子液体,是指室温或接近室温时呈液态的离子化合物,一般由体积相对较大的有机阳离子(如烷基咪唑盐、烷基吡啶盐、烷基季铵盐、烷基季膦盐)和相对较小的无机或有机阴离子如六氟磷酸根([PF6]-)、四氟硼酸根([BF4]-)、硝酸根(NO3-)、三氟甲基磺酰亚胺([{CF3SO2}2N]-)等构成。离子液体,早期称作熔盐,在一战时期(1914)发现的第一个室温离子液体为乙基季胺硝酸盐。第一个使用熔盐作气相色谱固定相的是Barber(1959年),他利用硬脂酸和二价金属离子的盐(锰、钴、镍、铜和锌盐)作气相色谱固定相,测定了烃类、酮类、醇类和胺类在156℃下的保留行为,具有特点的是用锰的硬脂酸熔盐作固定相可以很好地分离&alpha -甲基吡啶和&beta -甲基吡啶,而使用相阿皮松一类固定相则完全不能分离。1982年 Poole等研究了乙基季胺硝酸盐作气相色谱固定相的保留行为,发现这一固定相可在40-120℃范围内使用,是一种极性强于PEG20M 的具有静电力和氢键力的极性固定相,适于分离醇类和苯的单功能团取代衍生物,而胺类与固定相有强烈的作用,不能从色谱柱洗脱出来。就在这一年 Wilker 等报道了首例基于1-烷基-3-甲基咪唑为阳离子的室温离子液体,研究了它们的合成方法和在电化学中的应用。此后Armstrong等在1999年首先将六氟磷酸 1-丁基-3-甲基咪唑 ([BuMIm][PF6] ) 及相应的氯化物([BuMIm][Cl] )用作气相色谱固定相 ,通过分离烃类、芳香族化合物、醛、酰胺、醚、酮、醇、酚、胺及羧酸类化合物 ,发现离子液体固定相具有双重性质:当分离非极性物质或弱极性物质时表现为非极性或弱极性固定相 当分离含有酸性或碱性官能团的分子时 ,表现为强极性固定相,并测定了[BuMIm][PF6]和[BuMIm][Cl]色谱固定相的麦氏(McRynolds)常数。之后的几年里Armstrong等进行了一系列有关室温离子液体作气相色谱固定相的研究,奠定了室温离子液体固定相在实际中应用的基础。此后人们竞相研究室温离子液体用作气相色谱固定相的问题,最近两年由于Supelco公司承袭了Armstrong研究团队的研究成果,把室温离子液体固定相商品化,出现了几种性能优越的室温离子液体毛细管色谱柱,就促使许多研究者使用商品室温离子液体柱,分离一些复杂的难分离的混合物,因而也大大促进了离子液体气相色谱固定相的广泛使用。(傅若农,化学试剂,2013,35( 6): 481 ~ 490) (1).室温离子液体气相色谱固定相的特点   室温离子液在许多领域得到了广泛的应用,如有机合成溶剂、催化剂用溶剂、基质辅助激光解析/电离质谱的液体基质、萃取溶剂、液相微萃取溶剂、毛细管电泳缓冲溶液添加剂等,此外它们在分析化学领域得样品制备、分离介质中也得到充分的应用,气相色谱固定相是应用最多的一个领域。所以能得到如此广泛的应用是因为它具有许多特殊的性能,联系到气相色谱固定相,它们非常适应毛细管色谱柱的多方面要求: (a) 蒸汽压低   气相色谱固定相在使用温度下具有很低的蒸汽压是必要条件,室温离子液体具有很低的蒸汽压,它们能很好地满足气相色谱固定相的这一要求,例如现在使用较多的1-丁基-3-甲基咪唑二(三氟甲基磺酰)亚胺([C4mim][NTf2])的蒸汽压见下表1,从表中数据看出在在不到180℃下蒸汽压不到1 mm Hg柱,这完全符合气相色谱固定相的要求。 表1 [C4mim][NTf2]在不同温度下的蒸汽压 温度/℃ 蒸汽压/P× 102 (Pa) 184.5 1.22(0.92 mmHg柱) 194.42.29(1.72 mmHg柱) 205.5 5.07 (3.8 mmHg柱) 214.4 8.74 (6.6 mmHg柱) 224.4 15.2 (11.4 mmHg柱) 234.4 27.4 (20.5 mmHg柱) 244.3 46.6 (35.0 mmHg柱) (b) 粘度高   室温离子液体的粘度高,适合于气相色谱固定相的要求,而且在较宽的温度范围内变化不大,因为粘度低会影响色谱柱的分离效率和寿命,因为气相色谱固定相在温度升高时趋向于降低粘度使液膜流动,造成膜厚改变,降低柱效,甚至液膜破裂降低柱寿命,室温离子液体的黏度比一般溶剂高很多,例如二乙基咪唑二(三氟甲基磺酰)亚胺在20℃的粘度为34cP,n-己基-3-甲基咪唑氯化物在25℃的粘度为18000 cP,所以离子液体的粘度一般比传统溶剂高1到3个数量级 。 (c) 湿润性好   要使毛细管色谱柱的柱效提高,就要把固定相涂渍成一层均匀、牢固的薄膜,这样固定相对毛细管壁要有很好的湿润性,室温离子液体正好具备这样的特性,它们的表面张力在 30 到 50 dyne/cm 之间,例如1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐,1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐,和1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐分别为44.81, 39.02, 和 35.16 dyne/cm,这样的表面张力正好可以让固定相溶液湿润并铺展在未经处理的石英毛细管内壁上 。 (d)热稳定性好   大家都知道色谱柱的保留性能稳定性和柱寿命都与固定相的热稳定性有关,室温离子液体气相色谱固定相的热稳定性自然是十分重要的关键性能,离子液体的热稳定性随其阴阳离子的不同有很大的差异,离子液体的阴离子具有低亲和性及共轭键时(如三氟磺酸基,三氟甲基磺酰亚胺阴离子)就有很高的热稳定性,反之具有亲和性强的阴离子(如卤素基)其热稳定性就不好,一般像二烷基咪唑类离子液体固定相在220&ndash 250℃之间稳定,具有长烷基链的季鏻基离子液体可以在335&ndash 405℃之间稳定,Anderson等研究了双阴离子咪唑和双吡咯烷鎓基离子液体的热稳定性。极性强的室温离子液体气相色谱固定相(比如商品名为SLB-IL 111)的热稳定性虽然比不上二甲基硅氧烷的好,但是要比强极性固定相(氰丙基聚硅氧烷)的热稳定性要好,可是它的极性要比后者高,因而在分离脂肪酸甲酯的能力要大大优于后者。从图1可以看出商品离子液体柱SLB-IL82的热稳定性大大优于一些常用的极性固定相。 图1 几种离子液体色谱柱和常规固定相色谱柱热稳定性的比较 (e) 极性高   固定相的极性是极为重要的关键指标,目前表示固定相极性的有Mcrynolds常数,和Abrham溶剂化参数,离子液体的极性也仍然使用这两种方法表示,McReynolds常数是于120℃下以10种典型化合物测定所研究固定相的保留指数差(△I) ,用五种典型化合物(苯、正丁醇、2-戊酮、硝基丙烷和吡啶)的保留指数差(△I)之和来表示固定液的极性。Abraham表征固定相的方法是使用多种具有特殊作用力的标样来表征固定相和溶质 n-电子对及&pi -电子对作用能力、与溶质的静电和诱导作用能力、与溶质的氢键碱性作用能力、与溶质的氢键酸性作用能力、与溶质的色散作用能力。表 2 是几种商品离子液体固定相的极性,从表中数据看出,室温离子液体的极性要比极性最强的TCEP(1,2,3-三(2-氰乙氧基)丙烷)还要高,这样在分离脂肪酸甲酯和石油样品分析中就有特殊的用途。 表 2 几种商品离子液体固定相的极性 商品色谱柱 组成 McRynolds 极性(P) 相对极性数(p.N.)* SLB-IL 111 1,5-二(2,3-二甲基咪唑)戊烷二(三氟甲基磺酰基)亚胺 5150 116 SLB-IL 100 1,9-二(3-乙烯基咪唑)壬烷二(三氟甲磺酰基)亚胺4437 100 TCEP 1,2,3-三(2-氰乙氧基)丙烷 4294 94 SLB-IL 82 1,12-二(2,3-二甲基咪唑)十二烷二(三氟甲基磺酰基)亚胺 3638 82 SLB-IL 76 三(三丙基鏻六氨基)三甲氨(三氟甲基磺酰基)亚胺 3379 76 SLB-IL 69 未知 3126 70 SLB-IL 65 未知 2834 64 SLB-IL 61 1,12-二(三丙基鏻)十二烷-(三氟甲基磺酰基)亚胺-三氟甲基磺酸盐 2705 61 SLB-IL 60 1,12-二(三丙基鏻)十二烷二(三氟甲基磺酰基)亚胺(柱表面去活) 2666 60 SLB-IL 59 1,12-二(三丙基鏻)十二烷二(三氟甲基磺酰基)亚胺 2624 59 SupelcoWax 100%聚乙二醇 2324 52 SPB-5MS 5%二苯基/95%二甲基)硅氧烷 251 6 Equity-1 100%聚二甲基硅氧烷 130 3 *相对极性数=(Px x 100)/ PSLB-IL 100= McRynolds 极性乘以100再除以SLB-IL 100的 McRynolds 极性 (McRynolds 极性指标是上世纪60年代中期研究建立的一种气相色谱固定相极性量度指标,近半个世纪一直在使用,W O McReynolds.J Chromatogr Sci,1970,8:685-691) 几种离子液体色谱柱的结构和性能见表3 表3:几种离子液体色谱柱的结构和性能 3、几种商品离子液体色谱柱在脂肪酸甲酯分离中应用举例,见表4 表4 离子液体色谱柱在脂肪酸甲酯分离中应用 1 SLB-IL111 奶油中的脂肪酸 使用200m 长的SLB-IL111色谱柱可以很好地分离奶油中的脂肪酸,包括顺反和位置异构体 1 2 SLB-IL 82 和 SLB-IL 100 水藻中的脂肪酸 这两种商品离子液体柱用于分离水藻中的脂肪酸,具有很好的选择性和低流失,可以得到详细的脂肪酸分布,这是一种分析各种脂肪酸的色谱柱。 一维:聚二甲基硅氧烷 二维:SLB-IL 82 和 SLB-IL 100 2 3 SLB-IL100 鱼的类脂中反式20碳烯酸顺反异构体的分析 用60m长色谱柱可把C20:13和C20:11异构体得到基线分离,分离因子1.02,分离度1,57 3 4 SLB-IL111 分离16碳烯酸顺反异构体和其他不饱和脂肪酸 如果不使用SLB-IL111柱就不可能发现岩芹酸(顺式-6-十八碳烯酸),可以把cis-8 18:1和cis-6 18:1基线分离。证明岩芹酸在人的头发、指甲和皮肤中是内源性脂肪酸。 4 5 SLB-IL111 分离脂肪酸顺反异构体 SLB-IL111 可以很好地分离cis-,trans-18:1和 cis/trans 共轭异构体脂肪酸 5 6 SLB-IL100 牛奶和牛油中的脂肪酸顺反异构体 使用全二维GC,把离子液体柱用作第一维色谱柱 一维:SLB-IL100 二维:SGE BPX50 (50% 苯基聚亚芳基硅氧烷 6 7 SLB-IL 100(快速柱) 生物柴油中的脂肪酸甲酯(C1-C28) SLB-IL100是极性很高的固定相,可以排除样品中的饱和烴的干扰,减少了样品处理难度,免去使用全二维GC。 7 8 SLB-IL100 分离C18:1, C18:2, 和 C18:3顺反异构体 SLB-IL100是极性很高的固定相,可以很好地分离不饱和脂肪酸顺反异构体,优于二丙氰聚硅氧烷色谱柱 8 9 SLB-IL111 SLB-IL100 SLB-IL82 SLB-IL76 SLB-IL61 SLB-IL60 SLB-IL59 评价7种商品离子液体固定相分离37种脂肪酸甲酯的分离性能 IL59, IL60, 和 IL61三种色谱柱性能近似,不能分离C18:1脂肪酸的顺/反异构体,所有的色谱柱度可以基线分离C18:2 顺/反, C18:3 n6/n3, 和 C20:3 n6/n3异构体,IL82柱以5℃/min程序升温,可以把实验的37种脂肪酸甲酯分离开 9 10 SLB-IL59 SLB-IL60 SLB-IL61 SLB-IL76 SLB-IL82 SLB-IL100 SLB-IL111 用7种商品离子液体固定相分离脂肪酸甲酯的及和异构体 除去IL60柱以外所有色谱柱上对饱和脂肪酸的洗脱温度,随它们的极性降低而增加,当固定相极性增加是它们的等价链长急剧增加。还研究了脂肪酸甲酯在这些色谱柱上Abraham 的保留能量线性关系 10 11 SLB-IL111 使用强极性离子液体色谱柱快速分离食用油中的反式脂肪酸 使用强极性薄液膜细内径离子液体毛细管柱(75 m × 0.18 mm i d , 0.18 &mu m)快速分离食用油(例如奶油)中的反式脂肪酸 11 12 SLB-IL111 使用强极性离子液体色谱柱分析食用油中顺反式硬脂酸 在120℃柱温下可以分离所有cis-C18:1位置异构体,把柱温提高到160℃可以分离反-6-C18:1 和 反-7-C18:1异构体 12 表中文献 1 Delmonte P, Fardin-Kia A R, Kramer J K G,et al, Evaluation of highly polar ionic liquid gas chromatographic column for the determination of the fatty acids in milk fat [J].J. Chromatogr.A,2012, 1233:137-146 2 Gua, Q , David F., Lynen F. et al., Evaluation of ionic liquid stationary phases for one dimensional gas chromatography&ndash mass spectrometry and comprehensive two dimensional gas chromatographic analyses of fatty acids in marine biota[J]. J. Chromatogr.A, 2011, 1218:3056-3063 3 Ando Y.Sasaki, GC separation of cis-eicosenoic acid positional isomers on an ionic liquid SLB-IL100 stationary phase[J]. J. Am. Chem. Oil Soc.,2011,88:743-748 4 Destaillats F.,Guitard M. Cruz-Hernandez C, Identification of _6-monounsaturated fatty acids in human hair and nail samples by gas-chromatography&ndash mass-spectrometry using ionic-liquid coated capillary column[J]. J.Chromatogr.A 2011,1218: 9384&ndash 9389 5 Delmonte P, Fardin Kia A-R, Kramerb J.K.G.et al, Separation characteristicsof fatty acid methyl esters using SLB-IL111, a new ionic liquid coated capillary gas chromatographic column[J]. J.Chromatogr.A, 2011,1218: 545&ndash 554 6 Villegas C.Zhao, Y.Curtis J M, Two methods for the separation of monounsaturated octadecenoic acid isomers [J].J. Chromatogr. A, 1217 (2010) 775&ndash 784 7Ragonesea C,Tranchidaa P. Q.,Sciarronea D.et al, Conventional and fast gas chromatography analysis of biodiesel blends using an ionic liquid stationary phase[J]. J. Chromatogr.A, 2009,1216:8992&ndash 8997 8 Ragonese C, Tranchida P Q, Dugo P,et al,Evaluation of use of a dicationic liquid stationary phase in the fast and Cconventional gas chromatographic analysis of health-Hazardous C18 Cis/Trans fatty acids[J]. Anal. Chem., 2009, 81:5561&ndash 5568 9 Dettmer K, Assessment of ionic liquid stationary phases for the GC analysis of fatty acid methyl esters,Anal Bioanal Chem ,2014, 406:4931&ndash 4939 10 Characterisation of capillary ionic liquid columns for gaschromatography&ndash mass spectrometry analysis of fatty acid methylestersAnnie Zeng X, Chin S , Nolvachai Y,et al, Anal Chim Acta , 2013 803:166&ndash 173 11 Inagaki S,Numata M, Fast GC Analysis of Fatty Acid Methyl Esters Using a Highly Polar Ionic Liquid Column and its Application for the Determination of Trans Fatty Acid Contents in Edible Oils,Chromatographia , 2015,78:291&ndash 295 12 Yoshinaga K,Asanuma M,Mizobe H et al,Characterization of cis- and trans-octadecenoic acid positional isomers in edible fat and oil using gas chromatography&ndash flame ionisation detector equipped with highly polar ionic liquid capillary column, Food Chemistry , 2014 160:39&ndash 45 有关离子液体固定相在分离脂肪酸时的一些选择性和分离特点在下一讲叙述。
  • 关注色谱与大健康 2019北京色谱年会举行
    p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " strong 仪器信息网讯& nbsp /strong 2019年12月12日,由北京理化分析测试技术学会、北京色谱学会共同主办的“2019年北京色谱年会”于北京世纪金源香山商务酒店成功举行。自2002年举办以来,北京色谱年会历经十七载,已成为了北京地区色谱工作者的年度盛会。2019的北京色谱年会,来自科研院校、应用单位、仪器企业等约300余名业内相关人士参加了本次会议。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 本次色谱年会的主题是“色谱与大健康”,与会专家分别就色谱技术在生命健康、环境、药物分析、食品分析等方面的最新成果与应用进展进行了分享。仪器信息网全程参与并报道了此次会议。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/e7ae82f5-874b-4530-bc3e-5d34539d0135.jpg" title=" 大会现场.JPG" alt=" 大会现场.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 会议现场 /strong /p p style=" text-align: center" strong img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/75a80d27-792a-42a7-815f-677b6cc7a513.jpg" title=" 刘虎威致辞.JPG" alt=" 刘虎威致辞.JPG" / /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 北京大学教授刘虎威致开幕辞 /strong /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/f909c88b-7d83-4a98-9015-591079c293e5.jpg" title=" 江桂斌.JPG" alt=" 江桂斌.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 中国科学院生态环境研究中心院士江桂斌 /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《细颗粒化学:从纳米到PM2.5》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 在报告之初,江桂斌院士首先介绍了细颗粒化学的概念以及细颗粒对人体的影响,并从纳米颗粒研究到PM2.5研究等角度介绍了细颗粒化学相关研究进展、挑战及问题。随着纳米科技发展,各类纳米颗粒在生活中广泛应用,其中纳米银应用繁多,并在环境中广泛存在。报告介绍了课题组在纳米银所做的三项研究,包括发展了一种结合毛细管电泳与ICP-MS联用的纳米银表征技术;关于纳米颗粒可天然生成的相关研究以及纳米银本身可以产生同位素分馏等。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 大气污染是我国目前及今后很长时期面临的重要环境问题,近年来,PM2.5污染严重,危害广泛。随着大气十条的颁布和实施,我国PM2.5污染得到了显著控制,但如何在2020-2030年将PM2.5控制到35μg/m3,还面临着严峻挑战。已有研究表明癌症发病率与雾霾天数有相关性,但是PM2.5健康危害机制认识仍不清楚。为此基金委细颗粒重大研究计划做了一系列工作。包括探查大气细颗粒毒性组分发现和溯源;细颗粒物污染长期和短期健康影响的研究以及细颗粒物生物学效应和毒理学机制的研究。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/ee5c4a75-1afc-48e3-bd6e-b2bce4a487b0.jpg" title=" 陈义.JPG" alt=" 陈义.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 中国科学院化学研究所研究员陈义 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《高重现毛细管电泳(hrCE)》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 毛细管电泳具有微量、高效、快速、环保、经济、通用等优点,在生物活体化学分析中有良好的应用前景。但目前毛细管电泳也面临着诸多挑战,报告介绍了陈义课题组在高重现毛细管电泳(hrCE)方面所做的研究工作,提出了hrCE具有完备分析能力的hrCE新方法,提升了其定性定量能力,并介绍了将该技术应用于血红蛋白病筛查、生物活体原位分析等应用的探索。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/2c478be9-b879-4bf7-b75b-0b9b718b2993.jpg" title=" 李攻科.JPG" alt=" 李攻科.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 中山大学教授 李攻科 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《复杂样品快速检测前处理方法研究进展》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 在样品分析过程中,样品前处理不仅耗费时间长,同时也对分析结果误差与否有着重要的影响,尤其是对于复杂体系的分离分析来说,如何快速进行样品前处理至关重要。中山大学李攻科团队一直以来从事复杂样品前处理相关研究,卓有建树,报告介绍了团队在复杂样品快速检测前处理方法相关研究进展, 包括场辅助同步萃取衍生化、膜保护同步固相微萃取衍生化微型阵列气膜分离衍生化等快速前处理方法研究,以及在食品、化妆品等复杂样品中痕量组分液相色谱分析研究。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/84a61670-678e-4b72-a547-60c649573775.jpg" title=" 冀峰.JPG" alt=" 冀峰.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 岛津企业管理(中国)有限公司 冀峰 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《岛津多维液相色谱技术在药物杂质鉴定中的最新应用》 /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/1e0d6f7d-5ac1-4e2d-9117-51bef80bcb9d.jpg" title=" 那顺.JPG" alt=" 那顺.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 安捷伦科技(中国)有限公司 那顺 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《全新安捷伦智能互联气相色谱系列》 /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/415c6855-29d4-4d1d-b7db-fcdd07e61f05.jpg" title=" 汪琼.JPG" alt=" 汪琼.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 汪琼 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《赛默飞色谱质谱技术在环境领域的最新应用》 /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/0410a307-6740-4d10-9a09-d565357ef4dd.jpg" title=" 刘震.JPG" alt=" 刘震.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 南京大学教授 刘震 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《亲和分离:更快、更高、更强》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 常规色谱追求最大限度地分离,而亲和色谱与之不同,更关心如何精准分离目标物质,是近年来生物学家最依赖的工具之一。刘震的报告,介绍了课题组10年来在硼亲和色谱方面的研究工作。针对亲和色谱亲和力、专一性不足等影响实际体验的问题,通过合成新的有机配基、共同单体间的团队协同、团体硼亲和、多位点协同作用、分子间相互作用机理以及分子印迹聚合物等研究,诠释了如何实现亲和分离更高、更快、更强,提升实际应用效果,并展示了团队研制的亲和识别材料在多个生命科学、疾病诊断等重要领域中的良好应用前景。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/df60baa5-8916-4b11-b702-df207b3b14e0.jpg" title=" 黄岩谊.JPG" alt=" 黄岩谊.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 北京大学教授 黄岩谊 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《如何消除DNA测序的错误》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 报告介绍了DNA测序技术的发展历程以及目前DNA测序技术存在的问题,并展示了多年来课题组在DNA测序技术方面的研究工作,发展一种全新概念的测序方法—纠错编码测序法(简称ECC),该方法采取一种独特的边合成边测序(SBS)策略,利用多轮测序过程中产生的简并序列间的信息冗余,大幅度增加了测序精度,是一种新的高通量、高精度DNA测序技术。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/54a58fe9-419e-492a-beb8-c4bd79cbdf3a.jpg" title=" IMG_6719.JPG" alt=" IMG_6719.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 中国科学院化学研究所研究员王铁 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《生命流动体系的分析检测》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 生命体内的痕量物质与生命过程、健康状况息息相关,可用于疾病诊断及病症监控。而如何在动态条件下,实时在线对生命流动体系中痕量目标物进行捕获及分析时一个科学难题。报告介绍了王铁课题组在生命流动体系分析检测研究上的方法思路以及相关研究进展。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/b4002fc4-a564-4f85-b46c-bd3f84c02b15.jpg" title=" IMG_6724.JPG" alt=" IMG_6724.JPG" / /strong /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 0em text-align: center " strong 北京妇产医院 曹正 /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《液相串联质谱如何帮助临床实验室?》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 报告主要通过临床检测中1,25(OH)2VD、甲状腺球蛋白、他克莫司、微生物A、多囊卵巢综合征以及疼痛药物管理等几项实际应用案例,从灵敏性、特异性、可用性、可负担性、灵活性和可能性等方面,介绍了液相串联质谱技术在临床实验室的应用前景广阔。 /p p style=" text-indent: 0em text-align: center line-height: 1.5em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/e19edb3e-5adb-4399-b64e-6b3aadd7e000.jpg" title=" IMG_6732.JPG" alt=" IMG_6732.JPG" / /p p style=" text-indent: 0em text-align: center line-height: 1.5em " strong 北京大学医学部教授 叶敏 /strong br/ /p p style=" text-indent: 0em text-align: center line-height: 1.5em " strong 报告题目:《色谱技术在中药分析中的应用》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 中医药是中国的十大国粹之一,中药现代化研究对于中药应用发展十分重要。中药的现代研究主要从两方面进行,单体成分以及提取物的研究,其中,提取物作为中药特色多组分复杂体系,其发挥药效有效化学成分是什么是其中非常重要的科学问题。报告主要介绍了叶敏课题组在该领域的研究进展,建立了中心切二维液相色谱以及多重中心切割二维液相色谱等多种中药色谱分析新方法以及对重要活性成分的阐释。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/f1a58436-cccb-45f9-bbf7-0d137503a5b3.jpg" title=" IMG_6740.JPG" alt=" IMG_6740.JPG" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 北京大学教授 刘虎威 /strong br/ /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 报告题目:《常压离子化质谱成像技术及其应用》 /strong /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 常压敞开式质谱可实现原位、实时、快速分析,但在检测灵敏度、空间分辨率等方面存在一定问题。报告介绍了课题组在常压敞开式质谱特别是实时直接分析离子化上进行的研究,发展了等离子体辅助激光解吸离子化(PALDI)和常压基质辅助激光解吸附离子化技术,以及利用常压离子化质谱技术在成像分析中的探索。并介绍了PALDI-MS成像用于印章、文物艺术品真伪鉴定以及中药材鉴定的应用。 /p p style=" text-align: justify line-height: 1.5em text-indent: 2em " 本届色谱年会受到了多家仪器厂商的赞助,包括岛津、安捷伦、赛默飞、北京捷安杰、日立高新、东曹、珀金埃尔默、海光、 span style=" text-indent: 2em " 成都科林、加拿大AFP、同田生物、利曼中国、北京伊诺凯、北京中兴汇利等。各家厂商在会议上展示了各自的产品,吸引了大量与会者驻足。 /span /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/746509ca-9bf2-4c9d-994b-0245a49c1725.jpg" title=" IMG_6681.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6681.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img style=" width: 300px height: 200px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/7da9d816-5c67-445c-8ada-cf69553e51ff.jpg" title=" IMG_6661.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6661.JPG" / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/1aa5e9f9-60d9-44fe-8195-b348032dd2ad.jpg" title=" IMG_6663.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6663.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/1c5e0329-ba42-4391-8817-00d31c2d84a7.jpg" title=" IMG_6676.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6676.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/5225fba1-a3a1-44fc-8ee4-d9aa0175cde9.jpg" title=" IMG_6662.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6662.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/a745aad3-a254-4e7c-833f-0c60fb02a56b.jpg" title=" IMG_6665.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6665.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/8906e8ff-5765-4db1-b66f-b159b0b56458.jpg" title=" IMG_6667.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6667.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/ebd01692-15e2-4209-8fe5-374397fa3da5.jpg" title=" 东曹.jpg" alt=" 东曹.jpg" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/2049bb71-a7e1-4eb6-9bdf-884f4dd7cbf0.jpg" title=" IMG_6674.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6674.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/6370b4e5-c91c-4f04-9598-2793f386c2f2.jpg" title=" IMG_6673.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6673.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/226c9d61-b058-4ac2-82ea-5f315f01f2bd.jpg" title=" IMG_6675.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6675.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/56faf735-004a-4282-b39a-6df66287aad5.jpg" title=" IMG_6677.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6677.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/f6a5ec42-2724-4016-85b6-3ef40c41630c.jpg" title=" IMG_6669.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6669.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201912/uepic/f5573a8a-a618-46ab-930a-1c9ea2651146.jpg" title=" IMG_6679.JPG" width=" 300" height=" 200" border=" 0" vspace=" 0" alt=" IMG_6679.JPG" style=" width: 300px height: 200px " / /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em " strong 参会厂商 /strong /p p br/ /p
  • 用户评价︱小分子抗体纯化用亲和填料的智慧之选
    文/Tosoh Bioscience应用专家Jonas Wege 单克隆抗体是目前生物制药行业中成熟的靶向分子,适用于治疗各种疾病,且生产便捷、易于放大。然而,生物制药的创新者并没有安于现状,而是不断推动当前疗法背后的科学进步。抗体片段是目前最具前景的一种形式,不仅能够改善靶向点位,还能够提高亲和结合力。另外,工程技术的不断进步也推动了抗体片段重组生产变得更加经济。抗体片段是相对较新的技术,正确的分析和纯化对于为患者提供安全、有效的治疗至关重要。我们的生物制药合作伙伴不仅信赖Tosoh Bioscience高质量的色谱解决方案;他们还相信我们的专家能够帮助他们开发最具性价比效益的工艺流程。 减轻负担生物制药厂家一直致力于在抗体捕获阶段生产更高浓度的产品,继而保证后续所有操作(包括精制)具有更高的成本效益和时间效率。然而这是一个史无前例的挑战,因为片段无法与Protein A(依赖于Fc结合)等传统层析填料结合。目前来说,Protein L是应对这类纯化挑战的第一选择。Protein L填料基质表面的蛋白质通过Kappa轻链(存在于许多抗体片段中)与抗体结合来清除杂质。尽管Protein L非常适合纯化抗体片段,但与Protein A相比,Protein L仍然属于一种新型的层析介质。开发人员报告称,传统的Protien L填料表现出的动态吸附载量更低。简而言之,最终只有少量的靶向分子能够吸附到层析柱中,进而限制了层析柱的性能,导致抗体捕获步骤更加昂贵、更加费时。制造商面临的另一个潜在难题是填料在重复清洗过程中的化学稳定性较低。层析柱运行后,通常需要使用碱性溶液进行清洗。然而,传统Protein L填料化学稳定性差,往往会导致性能部分损失。为应对该问题,就需要在清洗少量次数后更换填料,导致成本升高、工作量增加。 为了应对挑战,东曹开发了一种行业领先的耐碱性Protein L层析填料——Toyopearl AF-rProtein L-650F。其设计首先考虑到了高动态吸附载量,意味着层析柱中的填料能吸附更多蛋白,纯化相同数量靶向分子需要的运行次数更少。事实上,我们的Protein L亲和填料对Fab的动态结合载量在任何驻留时间内都至少是其他市售填料的两倍以上,这显然更有助于提高生产效率和生产力。我们不仅研究了填料在抗体片段捕获步骤中的性能,还探讨了填料在整个纯化过程中的可重复使用性。由于提高了填料的耐碱性,因此可以在同一色层析柱上运行多次纯化循环。最后,我们还针对不同的清洗方案进行了广泛的试验,加上我们在填料方面的专业知识,极大地提高了产品的纯度和填料的寿命。因此,我们的生物制药合作伙伴所需的填料更少,能够将更多资源用于开发最有效的工艺过程,并且借助我们的专业知识尽快完成工艺开发。 成功背后的科学虽然我们的Protein L填料促进了抗体片段捕获工艺的革新,同时我们也认识到了持续改进的迫切性,对东曹来说,这意味着我们将持续专注于高质量的研发。事实上,不论是我们内部的独立研究,还是与外部伙伴的合作,我们一直奋战于多个更加广泛的研究项目,旨在优化整个工艺流程的生产效率。比如,目前我们正在评估如何将Protein L介导的捕获步骤转移到连续流色谱中。我们期望这种具有成效的、高效的选择能够为我们的客户带来无限可能。 最重要的是,东曹始终致力于开发更加高效的抗体片段纯化解决方案。凭借悠久的历史经验和丰富的技术专长,我相信我们是寻求节省成本和提高生产率的药物研发公司的最佳合作伙伴。解决方案 Wacker Biotech(瓦克生物技术)是WACKER Group下属的负责生物制药业务的公司。该公司在使用大肠杆菌作为表达系统生产抗体片段方面有着多年的经验。但这一过程并非没有挑战。这里,Wacker Biotech的业务发展经理Ilona Koebsch和下游工艺专家Thomas Walther就该公司面临的一些生产挑战,以及东曹是如何协助其开发解决方案方面进行了阐述。 最有趣的抗体片段亚型是什么? Koebsch:抗体片段的尺寸、结构和功能各不相同。但是,从治疗角度来看,Fab和所有包含抗原结合位点的变体算得上是最有趣的抗体片段技术的代表。值得注意的是,片段尺寸足够小,才能穿透组织,这对于许多治疗和免疫组织化学来说是必不可少的。另外,由于这些片段相对较小,使用原核表达系统(如大肠杆菌)进行生产也更加容易,更加经济。生产Fab面临的主要挑战是什么? Walther:根据结构的不同,Fab既可以是可溶性的,也可以组装成包涵体(聚集的结合蛋白)。生产厂家还必须在发酵及下游工艺中保持其折叠和结构,确保Fab具有生物活性。对于上游工艺,主要任务始终是找到表达系统(宿主和质粒)和培养参数的最佳组合,以实现高效、稳健的生产工艺。但是,在我看来,最关键的挑战是找到合适的模型来模拟特定结果,或是在实验室规模下模拟大规模生产过程。在下游工艺中,挑战主要包括样品结构的复杂性、开发时间的长短以及亲和填料对大多数常见清洗方案的低耐受性。WACKER是如何应对这些挑战的? Koebsch:WACKER开发了两种独特的基于大肠杆菌的表达系统,能够高效生产不同的抗体片段。ESETEC® 是一种独特的表达系统,可控制发酵液中正确折叠的重组蛋白产品的分泌。简而言之,这有助于简化初级回收和纯化过程,从而降低产品成本。我们还针对疏水性抗体片段开发了FOLDTEC® 技术。该技术包括高效的大肠杆菌菌株、不含抗生素与噬菌体的质粒保持系统,以及全面的复性技术。我们没有相关的专利技术来解决下游工艺中存在的难题。高通量、良好的分辨率、低背压、易于操作(就柱填料而言)、洗脱时间短、使用寿命长、非特异性吸附低,这一切对于层析填料来说都是必不可少的!东曹是如何协助WACKER应对这些挑战的? Walther:我们在一个项目中使用了我们以前的首选填料,但由于吸附载量太低而失败了。此时,我们在WACKER其他分公司同事的推荐下,使用了东曹的AF-rProtein L-650亲和填料。我们将东曹的填料与其他三种声称可以特异性结合Kappa轻链的填料进行了比较。我们发现,AF-rProtein L-650填料的结合能力明显高于竞品(约3倍),而且目标蛋白的回收率也更高。同时,蛋白杂质的含量也是测试填料中最低的。最后,AF-rProtein L-650的流速也明显优于其他测试填料,这使我们能够用更小的柱体积来装填填料,为我们的客户带来了真正的成本优势。我们还得到了东曹填料和技术销售专家的大力支持,在为填料产品选择合适型号的层析柱方面获得了建设性的建议。很明显,东曹Protein L对于其他同类填料是一个强大的竞争对手,它应该会让其他供应商重新考虑他们当前的产品阵容。文章来源:The Medicine Maker:https://themedicinemaker.com/fileadmin/issues/1021_TMM_Issue.pdf
  • 关注离子色谱分析的关键技术——访清华大学丁明玉教授
    近日,第十八届全国离子色谱学术报告会暨第六届离子色谱专家组成员大会在海南省海口市成功召开。本次大会为期3天,共邀请超过20位专家,吸引150多位国内外著名专家、学者,就离子色谱及相关技术领域的新成就、新进展进行了学术交流并展开了专题讨论。仪器信息网作为大会合作媒体出席了本次离子色谱学术报告会。大会现场,仪器信息网有幸采访到了清华大学的丁明玉教授,不仅请他讲述了自己近期的一些研究成果,也对离子色谱未来的发展领域进行了交流。以下为采访视频详情: 丁明玉老师提到本次会议与以往有很大变化,主要体现在3个方面:一个就是参会人员新面孔多了起来,研究人员逐渐年轻化;二是研究领域也不局限于离子色谱的应用,而是范围更广,涵盖色谱柱、抑制器、检测器等基础技术研究;最后是近年来也有越来越多的厂家关注离子色谱仪,推出多型号多系列具有创新性的离子色谱仪。丁明玉,本科和硕士就读于中国地质大学(武汉),并国家公派留学日本,获日本山梨大学生物工学专业博士学位。1995年入职清华大学,现任清华大学化学系教授,博士生导师。长期从事分析化学领域的教学与科研,主要研究方向为色谱分析、天然产物化学和新型分离材料的研究。分离材料则以生物大分子的选择性分离富集和分析样品前处理为目标,主要涉及介孔材料、分子印迹材料、金属有机骨架材料和生物亲和材料。共承担过国家自然科学基金项目、北京市科委重点项目和企业合作项目共计20多项。在国内外学术期刊共发表研究论文200多篇。主要学术兼职有样品制备专业委员会秘书长;中国色谱学会理事;中国仪器仪表协会分析仪器学会常务理事。
  • 东曹独家赞助生物医药色谱会“论文奖”,支持优秀青年科研人才
    2018年4月17日,第十二届全国生物医药色谱及相关技术交流会在贵阳召开。该学术会议两年一届,为广大生物医药色谱行业内人士提供了交流、学习和展示的平台。此次会议为期两天,吸引了来自生物医药色谱领域的近500位专家学者、企业代表参加,就生命科学、生物技术、医药、食品及环境等相关领域中的色谱理论与技术应用进行广泛研讨。 东曹作为银牌赞助商,在会议中展台展示了生物制药分离与纯化领域的最新解决方案,东曹技术中心应用开发部的张琳博士还发表了《TSKgel 色谱柱在抗体药物分析与表征中的最新应用》技术报告。在报告中张博士通过具体实例数据,介绍了最新的高分辨率UHPLC色谱柱TSKgel UP-SW3000在抗体多聚体、片段高通量分析上的优异性能,且在SEC/MS连用中可用于抗体精确质量数的测定。 此外,张博士还举例了其他分离模式的色谱柱在抗体药物分析中的应用。例如,阳离子交换色谱柱TSKgel CM-STAT、TSKgel SP-STAT可以对抗体电荷异构体进行高分辨率分析;疏水作用色谱色谱柱TSKgel Butyl-NPR具有杰出的分辨率和的回收率,在ADC药物分析中,可进行药物抗体结合比率(DAR)的测定;亲水作用色谱柱TSKgel Amide-80可以对抗体聚糖进行高分辨率分析,配合HILIC/MS连用,可用于抗体聚糖谱的表征;亲和色谱柱TSKgel Protein A-5PW可用于细胞培养上清中抗体滴度的高通量、宽线性范围定量分析,TSKgel FcR-IIIA-NPR可用于抗体的抗体依赖细胞介导细胞毒性作用(ADCC)活性表征与细胞系筛选。 东曹公司还连续五年独家赞助大会的“优秀青年论文奖”奖项,今年也不例外。在18号下午的大会闭幕式上,组委会公布了“青年论坛优秀奖”、“青年论坛鼓励奖”以及“优秀墙报奖”获奖名单。东曹(上海)生物科技有限公司的总经理二木研辅先生为24位获奖青年学者进行了颁奖并致辞,二木先生表示:“东曹希望通过赞助大会论文奖以支持生物医药色谱领域的青年学者的科研工作,为整个行业创造更大的价值。”东曹展台张琳博士做《TSKgel 色谱柱在抗体药物分析与表征中的最新应用》技术报告东曹奖颁奖仪式东曹(上海)生物科技有限公司总经理二木先生颁奖并致辞
  • 纳谱分析董事长刘晓东:困境下液相色谱柱如何破局
    大约没有哪一年像2020年那样,太多人对它的期待是重启。如今,2020年终于画上了句号,当以后的某一天再回首,新冠、隔离会成为回忆,也会成为难忘的时代记忆。对于色谱耗材圈来说,过去的一年是那么的不平凡,疫情下经历了一次又一次的考验;同时,也是充满机遇的一年,医药领域的巨大需求使得下半年色谱耗材行业逆风而上。回顾2020年,艰难,却并不乏机会;展望2021年,变数仍在。过去的一年,色谱柱/填料行业有哪些事让我们刻骨铭心?未来这个行业又会出现哪些新变化?仪器信息网特别策划了视频/文字微访谈——“大咖访谈录之色谱耗材的昨天、今天与明天”,此次,我们特别邀请纳谱分析技术(苏州)有限公司董事长刘晓东谈一谈纳谱分析色谱耗材的过去和未来。纳谱分析技术(苏州)有限公司董事长刘晓东仪器信息网:请您认为2020年的色谱耗材圈关键词有哪些?刘晓东:2020是充满意外和挑战的一年。由于新型冠状病毒(“新冠”)疫情在全球范围内的传播以及中美关系的种种挑战,对世界格局和商业运作模式产生了深远影响。新冠疫情的肆孽极大地促进了新冠疫苗的研发,在全球范围内影响了生物制药的格局,其中基因治疗更是在反击新冠疫情中大放异彩:在2020年内已获美国FDA紧急使用授权的Pfizer和Moderna的新冠疫苗都是基于基因治疗的原理。Moderna COVID-19疫苗含有信使RNA(mRNA)。该疫苗含有一小段SARS-CoV-2病毒的mRNA,该mRNA指示体内的细胞产生该病毒的独特“尖峰”蛋白。人体收到这种疫苗后会产生刺突蛋白的副本,该蛋白不会引起疾病,但会触发免疫系统学习防御性反应,从而产生针对SARS-CoV-2的免疫反应。2020年在与生物制药企业和国家食药检单位的沟通中,色谱耗材的进口替代越来越多地被提及,除有成本上的因素之外,更多的是供应保证上的原因。举个例子,在生物制药的质检和研发中所需的液相色谱柱往往被一两家国外公司垄断,由于疫情和国与国之间的政治贸易冲突,这些色谱柱的生产质量和稳定供应受到波及,已严重地影响了项目进展。因此,色谱耗材的“高端”进口替代刻不容缓。仪器信息网:对于2020年,给您留下印象最深的事是什么?刘晓东:基因治疗的快速发展:基因治疗(gene therapy)是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病,达到治疗目的。基因治疗可以对包含血友病、帕金森症、老年黄斑变性、肌萎缩侧索硬化症、遗传性血管水肿、嗜血细胞综合征、法布里疾病等适应症多种遗传病和老年性以及恶性疾病提供有效的解决方案。然而,目前业界对基因治疗药物和相关物质的分析表征还处于探索阶段,其中液相色谱是重要的分析表征手段之一,需要色谱柱和色谱仪厂家与药物研发人员和单位的密切合作,开拓出全新的色谱表征体系。 生物制药需要性能和稳定性更好的色谱耗材:抗体类生物药物是以往十年也将是未来十年的热点。由于抗体类生物分子稳定性和结构复杂性,其色谱表征极具挑战性。目前国内生物药物研发和生产质检不可或缺的生物色谱柱几乎完全依赖进口,生物色谱柱成本和稳定供应方面具有不确定性。尤其值得关注的是:当前公认的最好的生物色谱柱经常无法满足生物药物的研发和生产所需要的分离性能和稳定性,因此需要色谱柱厂家和生物制药企业通过紧密合作和创新,不断地开发出性能和稳定性更好的液相色谱耗材。 混合机制色谱柱的“兴起”:混合基质类型的色谱柱(填料)上世纪八十年代首次出现,而其规模商品化则是在2003年以后,主要生产厂家为SIELC和Dionex (2011年被Thermo Fisher收购)。SIELC混合机制色谱柱的开发策略以取代通用型液相色谱柱为目标,产品包括PrimeSep和Obelisc系列;Dionex则是以解决色谱分析中的疑难问题为重点,从而开发出一系列专用色谱柱,例如Acclaim Mixed-Mode、Acclaim Trinity、Acclaim Surfactant和GlycanPac AXH等,其中Acclaim Mixed-Mode WCX、Acclaim Mixed-Mode WAX作为全新的色谱柱类型已被美国药典收录为L78和L85。混合机制色谱柱具有选择性独特、可调的特点,对离子性物质的分离具有很好的适用性,但由于各种原因一直没有得到市场的重视。值得注意的是全球液相色谱柱的龙头Waters 新近推出了它的首款混合机制色谱柱Atlantis PREMIER BEH C18 AX,预示着这一独特的分离模式将受到更多的关注。仪器信息网:您认为明年的色谱柱/填料市场将有哪些新需求?贵公司将重点在哪些领域发力?是否会有相应的新产品推出?刘晓东:我认为2021年液相色谱柱的市场需求主要为三个方面:1)针对单抗、多抗和ADC异质体分离的高性能分离色谱柱;2)针对基因治疗药物及相关物质表征的色谱柱;3)针对市场“痛点”或标准方法的专用色谱耗材。对应上述需求,纳谱分析重点发展领域为:1)完善单抗类生物大分子表征用色谱柱体系;在目前已商品化的BioCore Protein A亲和柱、BioCore SEC体积排阻柱、BioCore WCX和BioCore SCX阳离子交换柱以及BioCore HIC疏水作用柱的基础上,进一步开发出BioCore 阴离子交换色谱柱、BioCore Glycan寡糖色谱柱、BioCore RP完整蛋白或蛋白片段色谱柱。2)针对基因治疗药物及其相关物质的色谱表征用色谱柱及方法的开发:推出DNACore系列色谱柱。3)针对目前分析分离痛点的“专用”色谱柱,包括ChromCore PEI 聚乙烯亚胺分析专用柱、ChromCore SAA表面活性剂分析专用柱、ChromCore PAH多环芳烃分析专用柱、ChromCore vADE维生素A、D和E分析专用柱等产品。 仪器信息网:新的一年,您对行业发展有哪些新期待?请问公司设立了哪些小目标?刘晓东:2021是充满挑战、也是充满希望的一年。纳谱分析期望在以下三个方面取得实质性进展:1)不断深化进口液相色谱耗材的高端国产取代,让不同领域的广大色谱分析工作者有性能优良、价格合理、供应保证的产品可以选用;2)重点发展生物制药研发和生产中不可或缺的液相色谱柱业务,通过不断创新和完善产品线而成为这一细分领域的引领者之一;3)运用先进的色谱填料技术和设计理念,研发出针对性强的专用色谱柱用以解决当前液相色谱分离中的“痛点”问题,从而建立纳谱分析在液相色谱分离填料技术方面的领先地位。从2018年成立以来,经过近三年的努力,纳谱分析在研发、生产和推广先进的色谱耗材产品和色谱技术理念等方面取得了显著进展:建立多个核心技术平台,申请14项发明专利,并以此为基础研发出了包括生物大分子分离(BioCore)、小分子分离(ChromCore)、手性分离(UniChiral)液相色谱柱以及样品前处理产品(SelectCore)等四大系列、近千个品规的产品,并逐渐受到越来越多色谱用户的认可。我们希望通过自身的努力和广大用户的支持,争取2021年的业务与2020年相比有80%以上的增长。此外,我们希望有机会与业界的同行合作互惠,共同为提高中国液相色谱产业化水平、为广大液相色谱用户提供优质的服务尽一份力,正如纳谱分析的公司愿景所述:成为“最可信赖的色谱分离合作伙伴和创新引导者”。 【背景】液相色谱是一种重要的科学分析手段,主要应用领域包括制药、生物技术、食品安全、环境监测、化工等行业和科研中的分析检测。液相色谱的核心元素是“色谱柱”。目前全球液相色谱柱每年约有300-400万根的需求量,折合15-20亿美元的销售额,并呈稳步增长的态势。其中(生物)制药的应用是推进液相色谱柱发展的重要动力,约占液相色谱柱销售总量的三分之一。在全球范围内,液相色谱柱主要被国外厂家垄断,其中Waters 、Agilent和Phenomenex三家占有50%以上的市场份额。中国色谱柱市场需求占全球市场10%左右。然而,与坚挺的市场需求相比,国产色谱柱只占全球市场份额的2%。目前中国液相色谱柱市场主要被Agilent、Shimadzu、Waters和Thermo Fisher等国外厂家垄断,国产色谱柱在国内市场占有率仅为20%,其中绝大部分国产液相色谱柱的色谱填料或微球原料依赖进口。从色谱柱的品种来看,国产液相色谱柱品规较为单一,尤其是生物制药中研发和生产质检不可或缺的生物色谱柱基本完全依赖进口。此外,国产液相色谱柱与进口产品相比在性能和质量方面尚有明显差距。国产液相色谱柱大都集中在质量要求不高而价格敏感的应用,缺乏核心竞争力,导致其发展受到局限。因此,液相色谱柱的国产化,特别是国际水平的国产化势在必行。纳谱分析技术(苏州)有限公司旨在打造一个世界领先、自主创新的液相色谱柱的中国品牌,实现液相色谱柱及色谱材料的高端国产化,打破外国公司在核心技术和产品上对该领域的长期垄断。在此过程中,培养一批液相色谱分离材料、色谱柱装填和应用开发的专业技术人才,和一个世界一流水平的产业化团队,助力中国液相色谱产业化水平的提升,为包括生物制药在内的广大用户提供高质量的产品和优质的服务。 【嘉宾介绍】刘晓东,纳谱分析技术(苏州)有限公司联合创始人/首席科学家/董事长。美国爱荷华州立大学化学博士。曾任世界500强科学仪器公司色谱耗材全球研发总监,具有丰富的研发管理、研发创新和战略规划经验以及广阔的国际视野;资深色谱分离技术专家,专注液相色谱分离材料和色谱柱研发20余年,擅长色谱填料顶层设计、表面化学修饰、色谱柱装填和应用开发,独立完成或主导了40余个新型液相色谱分离产品的研发和生产转移;拥有80余项发明专利,撰写50余篇相关技术论文和3篇液相色谱专业书籍章节,并在各种国际大型色谱会议上作50余篇报告。2018年回国创立纳谱分析技术(苏州)有限公司,致力于液相色谱柱的创新以及国际水平的产业化。刘晓东博士的创业项目受到江苏省各级政府的大力支持,已获2018年苏州工业园区创业领军人才、2019年姑苏创业领军人才、2019年江苏省双创创业人才、江苏省海外高层次人才等荣誉。
  • 探索抗体蛋白的奥秘|亲和色谱,抗体药物滴度分析优选
    SHIMSEN Ankylo Protein A在单克隆抗体(单抗)药物的生产过程中,需要测定细胞培养上清液中的单抗滴度或者浓度,以筛选出高产品的单抗药物。岛津最新推出SHIMSEN Ankylo Protein A色谱柱,采用高交联度PS/DVB基质,键合重组Protein A蛋白,适用于单克隆抗体(mAb)和Fc融合蛋白的高速效价分析。极强耐碱性高载样量吸附低、优异的重现性峰形对称优异的重现性良好的重现性吸附低、优异的线性高载样量产品信息SHIMSEN Ankylo Protein A(15μm,2.1x30 mm)货号: 380-01215-74立即询价点击立即查看最新药斯卡排行榜
  • 新品发布会 | 全新Dianthus携光谱位移技术横空出世,1分钟击破亲和力筛选难点!
    问新品Dianthus有哪些优势?答: 我们都知道,重要靶点和候选药物的亲和力筛选非常具有挑战性。当您的亲和力筛选项目涉及到PROTAC二元和三元复合物,片段化合物库及固有无序蛋白时,需要进行样品固定的SPR技术和样品消耗量大的ITC技术的检测难度会大大增加,而这些应用则是Dianthus所擅长的。问新品Dianthus具有怎样突破性的技术?答: Dianthus是首个使用光谱位移技术(Spectral Shift)的亲和力筛选平台。检测流程相当简单,您只需要对其中一个分子进行荧光标记,然后将其与梯度稀释的配体混匀。在用590nm的光激发样品后,仪器会同时监测双波长(650nm和670nm)下配体结合引起的光谱位移,通过双波长的荧光强度比值与配体浓度拟合,仅需1分钟即可精确计算样品间的kd值!问光谱位移技术对于实验筛选项目有什么好处和价值?答: 直击五大实验痛点,为您保驾护航。● 可在33分钟完成384孔板检测。● 可控平衡状态的溶液中检测,避免固定对样品的影响。在表征三元复合物时,二元复合物处于稳定状态,非常适用于PROTAC项目。● 检测不依赖于分子量,无需担心分子量过低而漏掉有价值的hits。● 样品均在溶液中独立检测,筛选共价结合配体时无需昂贵的耗材和繁琐的操作。● 基于微孔板检测,无微流控系统,无需清洗维护。Dianthus新品发布会邀您参与主题:突破性的光谱位移技术助您解决亲和力筛选的终极挑战概要:1.亲和力筛选面临的挑战2.光谱位移技术原理3.PROTAC三元复合体/共价结合配体/膜蛋白检测案例4.实验流程简介讲师:NanoTemper应用专家 张玺直播时间:2022年4月20日 (周三)14:00-15:00参加新品发布会方式:微信搜索并关注NanoTemper即刻预约可获得精美礼品!惊喜奖:高级旅行茶杯幸运奖:幸运小熊玩偶
Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制