菌落数

1、不同的测试机构，相同的测试样机，96小时后，巴氏杀菌乳的菌落增长倍数相差很大。请问这和测试机构选择的巴氏杀菌乳的不同有多大的关系？2、牛奶厂刚生产时出具的报告显示巴氏杀菌乳的菌落总数是900，而24小时后，检测机构开始测试时，菌落总数已达到27000，菌落总数增长倍数和原样的菌落总数两者有什么样定性和定量的关系呢？请各位大侠指点

香港消委会近日的一份“测试瓶装水卫生程度”的调查结果将几个高端水品牌纷纷拉下马。昨天，在调查中被检出菌落数超标的依云水向本报发来声明表示，其产品符合国际标准，微生物菌落总数并非检测项目，而是检测致病菌数。 　　香港消委会在其官方网站公布“测试瓶装水卫生程度”的调查结果。报告中称，香港消费会对40款瓶装水进行了测试，包括11款蒸馏水、4款矿物质饮品和25款天然矿泉水。其中8款天然矿泉水样本存在含菌情况，每毫升含有2至550个菌落。这其中就包括作为依云水。 　　依云水生产商达能集团昨天向本报发来声明称，在水中存在微生物菌落是天然矿泉水产品的固有特征，国际食品法典和中国国家质量监督检验检疫总局均不将微生物菌落总数纳入检测项目，而是检测致病菌数。 　　依云方面称，目前在中国市场和香港地区销售的依云天然矿泉水均符合以上检验机构发布的所有标准。

[font=宋体][size=16px]细菌菌落的特征描述应当包括：菌落的[b]大小、形态、颜色、光泽度、透明度、质地、隆起状态、边缘特征[/b]等。常用的描述词汇如下：[/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]大小[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：菌落覆盖的范围，一般描述菌落的直径即可。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]形态[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：指菌落的外观形状，常用词汇包括圆形、卵圆形、三角形、形状不规则等。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]颜色[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：包括正反面颜色，即气生菌丝和基内菌丝颜色，常用词汇包括：白色、乳白色、红色、粉色、黑色、无色等。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]光泽度[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：指表面有无光泽，可直接描述为菌落表面有光泽、无光泽、表面光滑、粗糙等。一般有荚膜的菌落表面有光泽，无荚膜的菌落表面无光泽。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]透明度[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：描述菌落透光的性质，常用词汇包括：透明、半透明、不透明。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]质地[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：指菌落的粘性、脆性等，常用词汇包括：蜡状、干燥、易挑起、粘稠感等。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]隆起状态[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：指菌落切面的形态，常用词汇包括：隆起、凸起、扁平等。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]边缘特征[/size][/font][/b][font=宋体][size=16px]：指菌落周边的形状，常用词汇包括：波状、完整、粉粒状、啮齿状等。[/size][/font] [font=宋体][size=16px] [/size][/font] [font=宋体][size=16px]一般对菌落的描述可以从以上几个方面进行，但[color=#e1755e]不必包括以上所有项目，只需要根据菌落的关键特征，挑取最关键的几项进行描述即可[/color]，一般情况下挑选4-6项就可以把菌落描述清楚，但有些特殊菌落可能还需要根据具体情况加入一些其他的描述语言。常见的细菌在一些特定培养基上的形成的菌落描述见下表：[img=,576,594]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409051236378687_349_6545943_3.jpg!w576x594.jpg[/img][/size][/font]

一、菌落总数介绍：　　菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。　　菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。　　菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。二、检验方法　　菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。　　基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。　　国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。　　检验方法参见：　　GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》　　SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》三、说明（一）样品的处理和稀释：　　1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。　　固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。　　用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。　　另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。　　2．无菌操作：操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的，不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。　　操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。　　3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。　　4．样品稀释误差：为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释液应充分振摇，使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管。　　在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。　　为减少稀释误差，SN标准采用取10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。　　5．稀释液：样品稀释液主要是灭菌生理盐水，有的采用磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。（二）倾注培养　　1．操作方法：根据标准要求或对污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。　　将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。　　待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。　　2．倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。　　倾注培养基的量规定不一，从12~20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察。　　3．为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过[

一固体样品作菌落总数测定，其中10-1平板菌落数多不可计，10-2平板菌落数为271,10-3平板菌落数为60，则该样品菌落总数( )个/g。 A、27000 B、27100 C、60000 D、43550

菌落总数的快速测定方法1 适用范围：可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。2 方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑（TTC）显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。3 操作方法3.1样品处理：无菌称取样品25g（或25mL）放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇（均质）做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。3.2接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。3.3培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。4 结果判断与计数：4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（10个～100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时，按实有数报告。大于100时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以10的指数来表示。4.2计数原则与报告方式4.2.1通常选择菌落在10个～100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见下表中例次1）。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL，cfu的含义为菌落形成单位。4.2.2若有两个稀释度的菌落数在10个～100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则采用稀释度小者报告（见下表中例次2和例次3）。4.2.3若三个稀释度的菌落数都有在10个～100个之内时，应选择二个低数值的平均数（见下表中例次4）。4.2.4若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值，或采用均大于数量标准的最大值（见下表中例次5和例次6）。 例次稀释度两稀释 度之比选定计数 稀释度报告方式 （个/g或 个/mL）10-110-210-31 2 3 4 5 6158 208 265 98 8 295

做菌数总数空白对照出现1~2个菌落，本次检测的数据还有效吗

为什么甜面酱微生物的检测测菌落总数时，-1的比-2的菌落数少？而且做了好几个样都这样。不知道为什么？哪位高手帮帮忙啊？

细菌：湿润，粘稠，易挑起放线菌：干燥，多皱，难挑起，菌落较小，多有色素酵母菌：湿润，粘稠，易挑起，表面光华，比细菌的菌落大而厚霉菌：菌丝细长，菌落疏松，成绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状，无固定大小，多有光泽，不易挑起细菌：一般形成较小的圆形菌落，颜色有白色、黄色等，表面光滑或不光滑放线菌：菌落背面有同心圆形纹路。这点可以和细菌菌落区分。酵母菌：菌落为淡黄色，光滑，半透明，比细菌菌落大。霉菌：菌落大型，肉眼可见许多毛状物，棕色、青色等，可见黑色的分生孢子群。转

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403080951006405_8602_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　表面菌落数快速检测仪是一种先进的科学仪器，旨在快速、准确地检测和计数物体表面的微生物菌落数量。这款仪器以其高效、便捷和精准的特点，在食品安全、医疗卫生、环境监测等领域发挥了重要的作用。　　表面菌落数快速检测仪采用了先进的生物传感技术和光学成像系统，能够非接触式地对物体表面进行扫描和检测。它可以在短时间内捕捉到微生物菌落发出的微弱光信号，并通过内置的高性能计算机系统进行数据处理和分析，从而快速得出菌落数量。　　与传统的菌落计数方法相比，表面菌落数快速检测仪具有更高的检测效率和更低的误差率。它不仅可以在短时间内完成大量的检测任务，而且可以在不需要专业人员操作的情况下进行自主检测，大大降低了检测成本和时间成本。　　此外，表面菌落数快速检测仪还具有广泛的应用范围。它可以用于检测食品、药品、医疗器械等物品的卫生质量，也可以用于监测环境中的微生物污染情况。通过使用该仪器，人们可以更加及时地掌握微生物污染的情况，从而采取相应的措施，保障人们的健康和安全。　　总之，表面菌落数快速检测仪是一种高效、便捷、精准的科学仪器，为食品安全、医疗卫生、环境监测等领域提供了强有力的技术支持。它的出现，不仅提高了检测效率和质量，也为人们的生活带来了更多的便利和安全保障。

在菌落总数的计数中有这样的描述:如果所有的稀释度的菌落数均30,则按最低稀释倍数的结果报告.现在有这样的一个结果:0,0[10-1]；0，0[10-2]；2，1[10-3]；3，0[10-4]；那么我最后报告的结果应是多少呢？

一般我们做液体样品的菌落总数检测，菌落在平板上都很细小，有时一眼看上去根本没有，非常仔细看才能看到很小的小点点在培养够48h的情况下，这样的算不算到有效菌落的统计里？如果要计数的话，很难判断是菌落还是别的什么，而且即使用菌落计数器数也很伤眼睛如果不计数的话，多培养几天后有些菌落会长大一点点，感觉的确是菌落那这些细小的点点算不算到菌落总数里呢

如题，各位老师们，最近在测室内空气中菌落总数时，书上说的是在一批现场采样中，应留有2个采样管不采样作为空白。我们是准备测宾馆里的菌落总数，按照书上说的，是同一批的话，是一个宾馆带2个空白，还是宾馆中每个要测的房间里都各带2个空白呀?请各位老师帮帮忙[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907291059348360_2018_3469239_3.png[/img]

想请问大家，在做产品菌落总数检验时有没有遇到过高稀释度平板上的菌落数反而比低稀释度平板上的菌落数多的情况？如果遇到这种情况，大家是怎么报告结果的？

1．菌落总数的测定：是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20％)，因而并不能测出每g或mL检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。2．鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。3．每种细菌都有它一定的生理特性，培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。因此，要得到较全面的细菌菌落总数，应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧气供应等。但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定，都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的，因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。

食品中检出的菌落总数，就是否代表该食品上所有的细菌数？为什么？

食品接触面菌落总数与大肠菌群数的判断依据

[size=16px]　　表面菌落数快速检测仪故障排查与保养　　表面菌落数快速检测仪的故障排查与保养是非常重要的，以确保仪器的准确性和延长其使用寿命。以下是一些建议和步骤：　　故障排查：　　检查电源与连接：　　确保电源插头插好，电源线没有断开或损坏。　　检查电缆和电源插头是否有损坏或松动的现象。　　检查仪器操作：　　如果仪器在操作过程中突然停止运行，可能是由于内部某个部件损坏或温度过高。此时，应先检查仪器是否过热，如果是，则关闭仪器并让其冷却。　　如果问题仍然存在，可能是其他硬件问题，建议联系厂家寻求维修或更换故障部件。　　软件与校准检查：　　定期进行校准，确保数据准确性。如果发现校准不准确，可能是由于样品浓度不均匀或遗留的杂质导致的。此时，可以尝试调整校准设置、清除样品中的杂质、重新标定来解决这个问题。　　检查操作过程中是否有不当之处，如样品处理或操作错误，这些都可能导致得到的数据与实际情况不符。　　保养：　　清洁与消毒：　　使用合适的消毒剂定期清洗计数板和培养皿，建议每次使用后都进行清洁和消毒，以防止细菌和真菌的滋生。　　避免使用漂白水或强酸等刺激性化学品，以免损坏仪器表面。　　存储：　　将仪器存放在干燥、通风、无尘和避光的地方，以避免灰尘污染和紫外线照射。　　定期更换部件：　　根据使用频率和厂家建议，定期更换易损耗的部件，如滤纸和灯管等。　　总之，对于表面菌落数快速检测仪，定期的故障排查和保养是非常必要的，这可以确保仪器的准确性和可靠性，从而提高实验的准确性并减少污染风险。同时，如果遇到难以解决的问题，建议联系厂家或专业的维修人员进行处理。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403251048219590_7849_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

图中所示，用滤膜法做的总大肠菌群。100ml水样。国标规定的辨析特征描述为：1、紫红色、具有金属光泽的菌落。 2、深红色、不带或略带金属光泽。 3、淡红色、中心色较深的菌落。我的疑问是：图中1 所示，依据国标所述，紫红色具有金属光泽的容易看出，直径也较大。但是，除了那些紫红色较大的菌落外，其他的红色的直径较小的是不是总大肠菌群呢？图1 除了那些紫红色较大的菌落外，其他的红色的直径较小的是不是总大肠菌群呢？[img=690,520]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709051124_01_3295384_3.jpg[/img]下图2，另一个水样，没有明显的紫红色金属光泽，图2中所示，是不是都应该计数为总大肠菌群呢？[img=690,587]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709051134_01_3295384_3.jpg[/img]刚学微生物检测，请教各位帮忙辨认一下，在此感谢。

空白菌落总数总是有针尖大小的菌落，是怎么回事？但是倒不加生理盐水，只加培养基是没有菌落的

出口食品平板菌落计数 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0168-92代替 ZB X09 001-86 Plate count for bacterial colonies in food for export 1　主题内容与适用范围　　本标准规定了出口食品平板菌落计数的方法。　　本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。2　设备和材料2.1 工作台：超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露15 min,每平板不得超过15个菌落。2.2　恒温培养箱：36±1℃。2.3　恒温水浴箱：45±1℃。2.4　均质器。 2.5　振荡器。2.6　吸管：1、10和25mL,具0.1mL刻度。2.7　平皿：直径为90 mm。2.8　稀释瓶：广口瓶或三角烧瓶,容量为200 mL和500 mL。2.9　玻璃珠：直径为5mm左右。 2.10 天平：感量0.1g。3　培养基和试剂 3.1　平板计数琼脂。3.2 75％乙醇。3.3　稀释剂：磷酸盐缓冲稀释液。4　操作程序 4.1　样品制备 4.1.1　以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内,如有包装,则用75％乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.1.2　制备样品匀液4.1.2.1　固体或半固体食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1～2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水冷却。4.1.2.2　干燥或干粉食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1 : 10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。4.1.2.3　液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2～4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。4.2　稀释样品匀液 4.2.1　用10 mL灭菌吸管准确吸取1:10的样品匀液10 mL,放入装有90 mL稀释剂的200mL, 稀释瓶中。按4.1.2.2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。4.2.2　分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如10**-3、10**-4、10**-5……。4.3　平板接种4.3.1　对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。 4.3.2　分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3 min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品液。4.3.3　分别加12～15mL平板计数琼脂(已放45＋1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平皿倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。同时将平板计数琼脂倾入加有1 mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min。4.4　培养 　　待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h。培养箱应 保持一定的湿度,经48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15％。4.5　菌落计数和记录4.5.1　培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25～250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将平板存放于0～4℃,但不得超过24 h。 4.5.2　如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。4.5.3　如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。4.5.4　当最低稀释度的两个平板上都少于25个菌落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*), 表明该数系从菌落数在25～250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)。4.5.5　当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4)(下表,样 品4)。4.5.6　如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低稀释倍数报告平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4条) (下表,样品5)。4.5.7　同一稀释度的两个平板中,一个有25～250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)。4.5.8　两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25～250个范围内,而另一个的菌落数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。 4.5.9　某稀释度的两个平板都有25～250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数在 25～250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条 (下表,样品8、9)。4.5.10 蔓延生长菌落 通常有三种不同类型的蔓延生长菌落。第一种类型是链状菌落,菌落之间没有明显界线,这些菌落是当琼脂和试验物混合时,一个细菌块被分散所致；第二种类型是在琼脂和 平皿底之间形成的水膜样菌落；第三种是在平皿边缘或琼脂表面形成的水膜样菌落。如果所选择的平板出现过量的蔓延菌落生长,以致a.被蔓延菌落盖住的地方,包括由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的50％,或b.由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的25％,这样的平板报告为“蔓延菌落”,不予计数。计数其他平板上的菌落数,将这些数值的算术平均值报告为平板菌落数（下表,样品10）。　　当有必要计数除以上a.和b.外的蔓延生长菌落时,将三种不同类型的蔓延菌落分别计数。对于第一种类型,如果仅有一条链,将它作为一个菌落计。如果有来源不同的几条链, 将每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。第二种和第三种类型的蔓延生长形成易于鉴别的菌落,即按一般菌落计数,把计数的蔓延生长菌落数同一般菌落数加在一起,计算平板菌落数。4.5.11 操作者对同一平板复核自己的计数结果,其差异应在5％之内,而其他人对这一平板重复计数,其差异应在10％之内。否则,应找出原因,加以校正。 4.6　计算和记录数字　　适宜稀释度的两个平板的菌落数平均值或两个稀释度的平板菌落数平均值乘以相应稀释倍数计算出每克(毫升)样品中平板菌落数。　　记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中平板菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的平板菌落数记录为10的指数形式(见下表中的例子)。5　结果报告 　　报告每克(毫升)样品中平板菌落数或估计的平板菌落数。　　　　　　　　　　　　　　平板菌落数计算 样品号 菌 落 数 平板菌落数/g(mL) 1:100 1:1000 1:10000 1 多不可计 175 16 多不可计 208 17 190000(1.9×10**5) 2 多不可计 224 25 多不可计 245 30 250000(2.5×10**5)* 3 18 2 014 0 0 1600(1.6×10**3)* 4 多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5100000(5.1×10**6)* 5 0 0 00 0 0 ＜100 (＜1.0×10**2)* 6 多不可计 245 23 多不可计 278 20 260000(2.6×10**5) 7 多不可计 225 21多不可计 255 40 270000(2.7×10**5) 8 多不可计 210 18多不可计 240 28 230000(2.3×10**5) 9 多不可计 260 30 多不可计 230 28 270000(2.7×10**5) 10 多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落 290000(2.9×10**5) 注:带星号*者为估计数。附 录 A 培养基制备 (补充件) A1　平板计数琼脂 　　胰蛋白胨　　　　　 5.0g 　　酵母浸膏　　　　　 2.5g 　　葡萄糖　　　　　　 1.0g 　　琼　脂 　　　　　　15.0g 　　蒸馏水 　　　　　　1000mL 　　将各成分加于蒸馏水中,煮沸溶解。分装试管或烧瓶,121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.1。A2　磷酸盐缓冲稀释液 贮存液：　　　　　磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g 　　蒸馏水　　　　　　 500mL 　　用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液：用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器,121℃高压灭菌15min。附加说明：　　本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。　　本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局、湖南进出口商品检验局负责起草　　　　本标准主要起草人李志培、邓明义。　　本标准主要参考美国食品和药物管理局(FDA)《细菌学分析手册》第6版第4章(1984年)。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实施

[size=4][font=黑体]我们都知道：菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内，所含能于某种固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。但在水质与食品检验中当细菌培养在平板无菌落生长时，为什么菌落总数报告方式不同？水质：若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以（未检出）报告之。食品：若所有稀释度均无菌落生长，则以小于l(1)乘以最低稀释倍数(l×10或lO)报告之。请各位朋友发表自己的看法或见解![/font][/size]

[align=center]平皿计数法测菌落总数验证[/align][align=center]化工室：张苗苗[/align]一、 范围及定义1、范围 本标准规定了用平皿计数法测定生活饮用水及其水源水中的菌落总数。2、定义 菌落总数是指水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养24h后，所得1mL所含菌落的总数。二、仪器1、高压蒸汽灭菌器2、生化培养箱3、菌落计数器4、pH计或精密pH试纸5、灭菌试管、平皿，刻度吸管，采样瓶等。三、检验步骤1、以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml以融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。2、待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于37℃培养箱培养24h，进行菌落计数，即为水样1mL中的菌落总数。四、菌落计数作平皿菌落计数时，可用菌落计数器检查，以防遗漏，在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。再求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其中一半中菌落数分布又很均匀，则可将此平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。五、计算和报告计数结果不同稀释度的选择1、首先选择平均菌落数在30～300之间者进行计算，若只有一个稀释度的平均菌落数符合此规范时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例1） 2、若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数（如表1中实例2）若其比值大于2应报告其中稀释度较小的菌落总数（如表1中实例3）。若等于2应报告其中稀释度较小的菌落数（如表1中实例4）.3、 若所有的稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例5）4、 若所有的稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例6）5、 若所有的稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例7）6、 菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告；大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数值以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示。 [b]表1 稀释度选择及菌落总数报告方式[/b][table][tr][td=1,2][align=center]实例[/align][/td][td=3,1][align=center]不同稀释度的平均菌落数[/align][/td][td=1,2][align=center]两个稀释度菌落数之比[/align][/td][td=1,2][align=center]菌落总数/（CFU/mL）[/align][/td][td=1,2][align=center]报告方式/（CFU/mL）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]10[sup]-1[/sup][/align][/td][td][align=center]10[sup]-2[/sup][/align][/td][td][align=center]10[sup]-3[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1365[/align][/td][td][align=center]164[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]16 400[/align][/td][td][align=center]16 000或1.6×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]2760[/align][/td][td][align=center]295[/align][/td][td][align=center]46[/align][/td][td][align=center]1.6[/align][/td][td][align=center]37 750[/align][/td][td][align=center]38 000或3.8×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]2890[/align][/td][td][align=center]271[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][td][align=center]2.2[/align][/td][td][align=center]27 100[/align][/td][td][align=center]27 000或2.7×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]150[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]8[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1 500[/align][/td][td][align=center]1 500或1.5×10[sup]3[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]多不可计[/align][/td][td][align=center]1650[/align][/td][td][align=center]513[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]513 000[/align][/td][td][align=center]510 000或5.1×10[sup]5[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]27[/align][/td][td][align=center]11[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]270[/align][/td][td][align=center]270或2.7×10[sup]2[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]7[/align][/td][td][align=center]多不可计[/align][/td][td][align=center]305[/align][/td][td][align=center]12[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]30 500[/align][/td][td][align=center]31 000或3.1×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][/table]对自来水的检测结果如下：[table][tr][td]接种量[/td][td]10[sup]-1[/sup][/td][td]10[sup]-2[/sup][/td][td]10[sup]-3[/sup][/td][td]10[sup]-1[/sup][/td][td]10[sup]-2[/sup][/td][td]10[sup]-3[/sup][/td][td]10[sup]-1[/sup][/td][td]10[sup]-2[/sup][/td][td]10[sup]-3[/sup][/td][/tr][tr][td]计数结果[/td][td]26[/td][td]10[/td][td]3[/td][td]23[/td][td]9[/td][td]3[/td][td]25[/td][td]10[/td][td]2[/td][/tr][tr][td]菌落总数CFU/mL）[/td][td=3,1]260[/td][td=3,1]230[/td][td=3,1]250[/td][/tr][/table]六、结论 此方法均符合GB/T5750.12-2006七、注意事项 1、所有玻璃器皿如试管、平皿，刻度吸管，采样瓶等都应灭菌。 2、做样品稀释的液体，每批都要有空白对照。 3、计数时应仔细观察

出口食品平板菌落计数 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0168-92代替 ZB X09 001-86 Plate count for bacterial colonies in food for export 1　主题内容与适用范围　　本标准规定了出口食品平板菌落计数的方法。　　本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。2　设备和材料2.1 工作台：超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露15 min,每平板不得超过15个菌落。2.2　恒温培养箱：36±1℃。2.3　恒温水浴箱：45±1℃。2.4　均质器。 2.5　振荡器。2.6　吸管：1、10和25mL,具0.1mL刻度。2.7　平皿：直径为90 mm。2.8　稀释瓶：广口瓶或三角烧瓶,容量为200 mL和500 mL。2.9　玻璃珠：直径为5mm左右。 2.10 天平：感量0.1g。3　培养基和试剂 3.1　平板计数琼脂。3.2 75％乙醇。3.3　稀释剂：磷酸盐缓冲稀释液。4　操作程序 4.1　样品制备 4.1.1　以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内,如有包装,则用75％乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.1.2　制备样品匀液4.1.2.1　固体或半固体食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1～2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水冷却。4.1.2.2　干燥或干粉食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1 : 10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。4.1.2.3　液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2～4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。4.2　稀释样品匀液 4.2.1　用10 mL灭菌吸管准确吸取1:10的样品匀液10 mL,放入装有90 mL稀释剂的200mL, 稀释瓶中。按4.1.2.2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。4.2.2　分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如10**-3、10**-4、10**-5……。4.3　平板接种4.3.1　对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。 4.3.2　分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3 min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品液。4.3.3　分别加12～15mL平板计数琼脂(已放45＋1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平皿倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。同时将平板计数琼脂倾入加有1 mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min。4.4　培养 　　待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h。培养箱应 保持一定的湿度,经48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15％。4.5　菌落计数和记录4.5.1　培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25～250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将平板存放于0～4℃,但不得超过24 h。 4.5.2　如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。4.5.3　如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。4.5.4　当最低稀释度的两个平板上都少于25个菌落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*), 表明该数系从菌落数在25～250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)。4.5.5　当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4)(下表,样 品4)。4.5.6　如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低稀释倍数报告平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4条) (下表,样品5)。4.5.7　同一稀释度的两个平板中,一个有25～250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)。4.5.8　两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25～250个范围内,而另一个的菌落数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。 4.5.9　某稀释度的两个平板都有25～250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数在 25～250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条 (下表,样品8、9)。4.5.10 蔓延生长菌落 通常有三种不同类型的蔓延生长菌落。第一种类型是链状菌落,菌落之间没有明显界线,这些菌落是当琼脂和试验物混合时,一个细菌块被分散所致；第二种类型是在琼脂和 平皿底之间形成的水膜样菌落；第三种是在平皿边缘或琼脂表面形成的水膜样菌落。如果所选择的平板出现过量的蔓延菌落生长,以致a.被蔓延菌落盖住的地方,包括由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的50％,或b.由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的25％,这样的平板报告为“蔓延菌落”,不予计数。计数其他平板上的菌落数,将这些数值的算术平均值报告为平板菌落数（下表,样品10）。　　当有必要计数除以上a.和b.外的蔓延生长菌落时,将三种不同类型的蔓延菌落分别计数。对于第一种类型,如果仅有一条链,将它作为一个菌落计。如果有来源不同的几条链, 将每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。第二种和第三种类型的蔓延生长形成易于鉴别的菌落,即按一般菌落计数,把计数的蔓延生长菌落数同一般菌落数加在一起,计算平板菌落数。4.5.11 操作者对同一平板复核自己的计数结果,其差异应在5％之内,而其他人对这一平板重复计数,其差异应在10％之内。否则,应找出原因,加以校正。 4.6　计算和记录数字　　适宜稀释度的两个平板的菌落数平均值或两个稀释度的平板菌落数平均值乘以相应稀释倍数计算出每克(毫升)样品中平板菌落数。　　记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中平板菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的平板菌落数记录为10的指数形式(见下表中的例子)。5　结果报告 　　报告每克(毫升)样品中平板菌落数或估计的平板菌落数。　　　　　　　　　　　　　　平板菌落数计算 样品号 菌 落 数 平板菌落数/g(mL) 1:100 1:1000 1:10000 1 多不可计 175 16 多不可计 208 17 190000(1.9×10**5) 2 多不可计 224 25 多不可计 245 30 250000(2.5×10**5)* 3 18 2 014 0 0 1600(1.6×10**3)* 4 多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5100000(5.1×10**6)* 5 0 0 00 0 0 ＜100 (＜1.0×10**2)* 6 多不可计 245 23 多不可计 278 20 260000(2.6×10**5) 7 多不可计 225 21多不可计 255 40 270000(2.7×10**5) 8 多不可计 210 18多不可计 240 28 230000(2.3×10**5) 9 多不可计 260 30 多不可计 230 28 270000(2.7×10**5) 10 多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落 290000(2.9×10**5) 注:带星号*者为估计数。附 录 A 培养基制备 (补充件) A1　平板计数琼脂 　　胰蛋白胨　　　　　 5.0g 　　酵母浸膏　　　　　 2.5g 　　葡萄糖　　　　　　 1.0g 　　琼　脂 　　　　　　15.0g 　　蒸馏水 　　　　　　1000mL 　　将各成分加于蒸馏水中,煮沸溶解。分装试管或烧瓶,121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.1。A2　磷酸盐缓冲稀释液 贮存液：　　　　　磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g 　　蒸馏水　　　　　　 500mL 　　用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液：用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器,121℃高压灭菌15min。附加说明：　　本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。　　本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局、湖南进出口商品检验局负责起草　　　　本标准主要起草人李志培、邓明义。　　本标准主要参考美国食品和药物管理局(FDA)《细菌学分析手册》第6版第4章(1984年)。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实施

水质样品检验与食品样品检验，如果同时是1/10稀释液平皿上未出现菌落生长，菌落总数结果报告有何区别？各如何(表述)报告结果呢？请连接：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120104/3777936/“检验固体食品样品时，1/10稀释液平皿上未出现菌落生长，菌落总数应如何报告？”的话题。

[b]菌落计数的计数和培养步骤[/b] [align=center] [/align][b][font=宋体][size=16px][color=#535053]样品的稀释[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#535053][/color][/size][/font] [font=宋体][size=16px][color=#535053]固体和半固体样品[/color][/size][/font][/b] [font=宋体][size=16px]称取25 g置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min均质1min～2 min，或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中，用[color=var(--weui-LINK)]拍击式均质器[i][/i][/color]拍打1min～2 min，制成1:10的样品匀液。[/size][/font] [align=center][b][font=宋体][size=16px][color=#535053]液体样品[/color][/size][/font][/b][/align] [font=宋体][size=16px]以[/size][/font][font=宋体][size=16px]无菌吸管[i][/i][/size][/font][font=宋体][size=16px]吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。[/size][/font] [img=图片]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/fKutukicS8AY5sOWJb7yIaHibr1icWrdc7T0zUghd7XcjY8WtDUAqo0jItIA55dbqMiccNRa9L1ibwcMiaFnO3AIr57g/640?wx_fmt=other&wxfrom=5&wx_lazy=1&wx_co=1&tp=wxpic[/img] [font=宋体][size=16px]上步完成后，用1mL无菌吸管或微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url]吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。[/size][/font] [font=宋体][size=16px]移液过程使用的器具，都应避免微生物污染。使用耐高压[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url]，核查洗耳球无菌程度，避免[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url]触及[color=var(--weui-LINK)]均质袋[i][/i][/color]或试管内壁……[/size][/font] [font=宋体][size=16px]样品匀液完成后，可按相同操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。[/size][/font] [font=宋体][size=16px]根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取1 mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1 mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。[/size][/font] [font=宋体][size=16px]之后，及时将15 mL～20 mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。[/size][/font] [b][font=宋体][size=16px]培养和计数[/size][/font][/b] [font=宋体][size=16px]样品稀释完成后，就要进行培养和菌落计数了[/size][/font] [font=宋体][size=16px]待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。[/size][/font] [font=宋体][size=16px]如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养[/size][/font][font=宋体][size=16px]基 （约4mL），凝固后翻转平板，按相同条件进行培养。[/size][/font] [font=宋体][size=16px]培养完成后，就要进行菌落计数了，计数可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录[color=var(--weui-LINK)]稀释倍数[i][/i][/color]和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units, CFU）表示。[/size][/font] [font=宋体][size=16px][back=url(&]选取菌落数在30 CFU～300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 CFU的平板记录具体菌落数，大于300 CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。[/back][/size][/font] [font=宋体][size=16px]大片菌落[/size][/font] [font=宋体][size=16px]其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。[/size][/font] [font=宋体][size=16px]链状生长[/size][/font] [font=宋体][size=16px]当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。 [/size][/font] [align=center][b][font=宋体][size=16px]结果与报告[/size][/font][/b][/align] [font=宋体][size=16px]为了生成结果和报告，需要根据计数结果和公式计算出菌落总数。需要注意的是，对于菌落数量不同的培养皿，[color=var(--weui-LINK)]计数原则[i][/i][/color]有所不同。 [/size][/font] [font=宋体][size=16px][back=url(&]若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。[/back][/size][/font]

请问那位有自动菌落计数器SC6型中文说明书？或是自己翻译的中文说明书也行，如果有的话，能否发送一份到我的邮箱：hzsjczx@yahoo.com.cn，不胜感激！[em61] [em61]

[align=center][font='calibri light'][size=21px]浅谈水中菌落总数的检测方法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之前在研究奶中菌落总数的检测方法的时候，偶然看到了水中菌落总数的方法，就想到既然都是液体，那是不是可以尝试用检测水中菌落总数的方法去检测牛奶中的菌落总数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]我们先来看看水中菌落总数检测的方法。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第一种：平皿计数法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]这个计数法是通过数菌落，一个单菌落就代表原样品中的一个单细胞。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法：样品10倍稀释→1ml稀释样品+15ml营养琼脂（45℃）混合→冷却凝固→37℃，48h培养。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之后根据稀释倍数和取样接种量换算样品含菌数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第二种：酶底物法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]原理：不同细菌分泌的不同产物可分解不同底物产生同一种信号——荧光，此信号可以在366nm的紫外灯下显示，数对应荧光孔数查MPN表得结果，稀释水样范围＜738MPN/mL。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法：1mL待测水样+9mL无菌水摇匀（培养基）→倒入定量盘，水平摇晃将液体充满孔槽→竖盘，棉条吸取多余水分→反向放置→37℃，48h培养→用366nm紫光灯照射，数带有荧光孔的数量。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]当时看到这个方法之后，就想到是不是能用这个方法检测牛奶的细菌总数，然后询问了一下师傅，才知道平皿计数法可以用于牛奶细菌总数的检测，但是酶底物法不太合适。因为水中除了细菌分泌产生的东西外，没有其他的物质。但是牛奶不一样，牛奶中含有脂肪，蛋白质，乳糖，矿物质等其他的物质，如果使用酶底物法会产生较大的误差，不适合牛奶的细菌总数的检测。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]虽然没有发现新的检测牛奶中细菌总数的方法，但是也学会了水中菌落总数的方法，希望能够对各位朋友提供帮助。[/size][/font][/align]

全自动菌落计数器因其计数准确、自动化程度高、可留存样品信息、使用方便，一般可在数秒内统计出样品菌落数、性价比高等优点，而受到众多企业、医院、科研院所的喜爱，但是由于全自动菌落计数器的科技含量较高，如果选型出现问题，对日后的检验、科研工作会带来很大不便，所以最好的办法就是在挑选时一定要挑选一台满足使用需求的菌落计数器，那如何选购一款优质的菌落计数器呢? 　　一、根据实际使用需求来确定CCD传感器的档次 　　很多用户偏向于选择像素高的菌落计数器，却没考虑到检验和科研的实际应用需求，所以用户在选购前就要确定好自己要买多少像素的CCD传感器。 　　二、看图像采集通道功能，指标越多越好 　　所谓"图像采集通道"，就是菌落计数器对于样品信息的获取能力，也就是标志着菌落计数器开始计数统计前的初始信息是否真实可靠。如果图像采集通道功能过于单一，那当后期计数时时会很容易出现误判，所以"图像采集通道"指标越多越好。指标响应时间越小，则标志着该菌落计数器获取样品信息的能力越强。 　　三、看最小菌落分辨率为多少 　　一般入门级菌落计数器最小菌落分辨率多半有0.1mm左右的效果，中等机型有0.05mm的水准，若实际比较入门、高阶机型的图档显示能力，拥有高分辨率的计数器，在菌落较小时效果会更明显。 　　四、看有没有数据及报表管理功能 　　在选购菌落计数器时一定要选有具有数据及报表管理功能的设备，于由微生物的不可复检性，对于以往检验数据的管理和回溯极为重要，不然在实际开展工作时繁杂的统计数据和报表管理会耗尽科研人员的精力。 　　五、不要指标高的，就要效果好的 　　现在有些菌落计数器在给用户介绍时，会宣传他们的产品有多少多少功能，多高多高的指标，实际上等真正买回家，根本用不到这么多功能，最重要的还是要统计菌落的实际效果好不好，不能为了过多的功能而买一个效果不是很好的设备。而统计效果的好坏关键在于算法是否合理。 　　六、看使用是否方便 　　全自动菌落计数器的一个主要优点在于它降低了人工统计菌落的工作量，减轻了工作人员的工作强度，但由于菌落形态和样品状态的不确定性，市面上大多数菌落计数器都较为强调通过人工干预来提高准确度。用户在选购设备时应注意操作是否简便、是否符合工作人员的操作习惯和操作思路。一般来说，需要的人工干预越小，使用越简便。