TLC鉴别黄铜类化合物组分中,有个与标准品的交叉薄层色谱,这个是怎么回事啊?注:TLC试验分为常规实验和交叉试验,只是两种试验的样品组成不同
如题 黄酮类化合物用DMSO打HMQC, HMBC谱 羟基氢能出相关峰吗?
植物黄酮类化合物的分离分析方法研究
急求乙烯中羰基化合物测定的相关标准,多谢!
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[align=center]从黄芩中提取黄酮类化合物的工艺研究[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]食品事业部:李灿[/align][b]摘要:[/b]探讨超声波辅助法提取黄芩中总黄酮的最佳提取条件及对提取物的抗氧化性活性研究,这为黄芩作为天然抗氧化剂和功能性食品的开发利用提供理论基础和实验依据。[b][/b] 通过设计正交试验,采用超声波辅助法提取黄芩中总黄酮的最佳工艺条件条件,并通过对羟自由基、超氧自由基和DPPH自由基的清除效果研究其抗氧化活性。[b][/b]超声波辅助提取黄芩中总黄酮的最佳条件为:乙醇浓度为50%,时间为25min,料液比为1∶10,温度为30℃,黄芩总黄酮的提取率为3.25%。并且研究了黄芩提取物中的黄酮类物质对O[sub]2[/sub]-• 、• OH和DPPH自由基的抗氧化性能。研究结果表明洋葱提取物中黄酮类物质的抗氧化性较VC强。在浓度为0.0125mg/ml下,对羟基自由基的清除率为88.30%,对超氧基自由基的清除率为90.01%,对DPPH自由基的清除率为93.87%。[b]关键词[/b]:黄芩;超声波提取;总黄酮;抗氧化活性 [align=center][b] Study on extraction technology of flavonoids from Scutellaria[/b][/align][align=center]Li Can[/align][align=center] (Department of Chemistry and Chemical Engineering, Xi′an University of [/align][align=center]Arts and Science, Xi′an 710065)[/align][b]Abstract: [/b]To investigate the ultrasonic assisted extraction optimum extraction conditions of total flavonoids from Scutellaria and to extract antioxidant activity, which is a skullcap as a natural antioxidant and functional food development and utilization of theoretical and experimental evidence provided . [b][/b] Through orthogonal experiment, the optimum conditions using ultrasonic assisted extraction conditions of total flavonoids from Scutellaria, and to study its antioxidant activity by hydroxyl radicals, superoxide radicals and DPPH radical scavenging effect. Optimal conditions . [b] [/b]Ultrasonic assisted extraction of total flavonoids from Scutellaria: ethanol concentration of 50%, the time is 25min, solid-liquid ratio of 1:10, the temperature is 30 ℃, extraction of total flavonoids was 3.25%. And studied the extract of Scutellaria flavonoids on O2-• , • OH and DPPH radical antioxidant properties. The results show that the onion extract antioxidant flavonoids than VC strong. At a concentration of under 0.0125mg/ml, hydroxyl radical scavenging rate of 88.30% for super-group was 90.01% scavenging of DPPH radical scavenging rate was 93.87%.[b][color=#2b2b2b]Key Words[/color][/b][color=#2b2b2b]:[/color][color=#2b2b2b] [/color][color=#2b2b2b]Skullcap [/color][color=#2b2b2b]U[/color][color=#2b2b2b]ltrasonic extraction [/color][color=#2b2b2b]T[/color][color=#2b2b2b]otal flavonoids [/color][color=#2b2b2b]A[/color][color=#2b2b2b]ntioxidant activity[/color][b]1 前言[/b]黄岑主要生长在陕西秦岭,为常用中草药之一,性寒,味苦。具有清热燥湿,泻火解毒,止血安胎[sup][/sup]等功效,它的主要成分为黄酮类化合物[sup][/sup],黄酮类化合物主要存在于双子叶及裸子植物的叶、果、实、根、皮中,在植物中主要与糖结合成苷的形式存在[sup][/sup]。目前从黄酮类物质有很多种,黄酮类化合物的结构特点是具有 C[sub]6[/sub]- C[sub]3[/sub]- C[sub]6[/sub]的基本骨架,根据中间三碳链的氧化程度、B 环( 苯基) 连接位置( 2-或3-位) 以及三碳链是否呈环状等特点,主要有黄酮醇,二氢黄酮,二氢黄酮醇,黄烷,黄烷醇,异黄酮等,被广泛应用在医药、功能食品添加剂、兽药和农药等领域。在医药方面,根据其在心血管系统、内分泌系统、抗肿瘤方面的药理作用,很多以黄酮类成分为主的制剂已作为成药上市[sup][/sup]。在食品中它们应用于功能性食品添加剂,如天然甜味剂、天然抗氧化剂、天然色素等;应用于功能食品,如生物类黄酮口香糖、银杏叶袋泡茶等防衰、抗癌、提高免疫力食品;在兽药、农药等领域,现已开发出些具有特效功能的含有黄酮类化合物药品和驱虫、杀虫剂等[sup][/sup]。目前国内侧重于对黄酮类化合物的研究,但他们常被当作残渣而扔掉,因而就造成了黄芩的浪费,没有使黄芩得到充分利用,本文主要针对黄芩总黄酮的提取方法及其抗氧化能力测定方法进行研究,以期为黄芩黄酮类成分的进一步开发利用从黄岑中提取黄酮类化合物的方法有很多种,传统提取方法有煎煮法[sup][/sup]、有机溶剂提取法[sup][/sup]、浸渍法、渗漉法、回流提取法[sup][/sup]、水提法等,新的提取方法有超声波提取法、微波提取法、索氏提取法、超临界萃取法、大孔树脂吸附法、酶解法提取[sup][/sup]。黄芩黄酮的提取主要为溶剂萃取法,包括无机溶剂萃取法和有机溶剂萃取法。其主要原理是利用黄芩黄酮能溶于碱水或甲醇等有机溶剂的特性来提取黄芩中的黄酮[sup][/sup],考虑到该法提取时间长,提取率较低的缺点,我们采用超声波辅助提取法。因为超声波提取法是一种新型方法,它具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点,在低温下可以强化水浸提效率,达到省时高效节能的目的,而且是目前广泛使用的方法。超声提取的主要理论依据是超声的空化效应、热效应和机械作用。当大能量的超声波作用于介质时,介质被撕裂成许多小空穴,这些小空穴瞬时闭合,并产生高达几千个大气压的瞬间压力,即空化现象。超声空化中微小气泡的爆裂会产生极大的压力,使植物细胞壁及整个生物体的破裂在瞬间完成,缩短了破碎时间,同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散和溶解,从而显著提高提取效率。因此本实验拟决定用超声波提取法来提取黄酮类化合物。黄酮类化合物的测定方法也多种多样,目前有薄层扫描法、紫外分光光度法、液相色谱法等[sup][/sup]。但是以上方法测定黄芩提取液中总黄酮的含量都比较繁琐,非黄酮类物质干扰比较大。由于Al[sup]3+[/sup]仅与黄酮类物质有特征反应,使用这种显色方法可以使黄酮类化合物溶液在510nm左右出现吸收峰,采用紫外分光光度法测定黄芩提取液中总黄酮含量,方法简单快速[sup][/sup]。对于黄酮类化合物的抗氧化性研究,国内外所做研究也比较多。方法可分为体外抗氧化与体内抗氧化,其中体外抗氧化运用较为广泛,体外抗氧化还可分为直接清除活性氧自由基、抑制油脂过氧化反应[sup][/sup]等;体内抗氧化是用受试物连续喂饲大鼠或小鼠1个月~3个月,然后处死动物,测定其血或组织(如肝、脑)中各物质的含量,同对照组进行比较,间接地说明受试物的抗氧化活性。采用体外抗氧化性研究,常用到的自由基有OH[sup] [/sup],O[sub]2[/sub][sup]-[/sup], DPPH等,由于直接清除活性自由基的方法易行且效果直观,本次实验采用该种方法。本实验将从两个方面研究黄芩黄酮类化合物。第一部分为黄芩总黄酮最佳提取方法的研究。本环节采取超声辅助提取法,采用料液比(A),乙醇浓度(B), 超声时间(C),超声温度(D)作为研究因素,采用四因素三水平,选择L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])设计正交试验。用芦丁做标准曲线测定黄芩提取液中总黄酮的含量。第二部分为总黄酮类化合物抗氧化性的研究,采用对OH,O[sub]2[/sub][sup]-[/sup]自由基和DPPH自由基的清除作用研究其抗氧化性。[b]2 实验部分2.1 材料与仪器2.1.1 材料和试剂[/b] 黄芩(购于西安同仁堂大药房),芦丁(分析纯,上海试剂药品厂),亚硝酸钠(分析纯,成都市科龙化工试剂厂),硝酸铝(分析纯,成都市科龙化工试剂厂),氢氧化钠(分析纯,成都市科龙化工试剂厂),邻苯三酚(分析纯,成都市科龙化工试剂厂),盐酸(分析纯,天津市天力化学试剂有限公司),双氧水(天津市天力化学试剂有限公司),硫酸亚铁(分析纯,成都市科龙化工试剂厂),水杨酸(分析纯,天津市天力化学试剂有限公司),无水乙醇(分析纯,天津市天力化学试剂有限公司),三羟基甲基氨基甲烷(分析纯,天津市福晨化学试剂厂),邻二氮菲(分析纯,天津市福晨化学试剂厂),DPPH(购于阿拉丁试剂)。[b]2.1.2 仪器[/b] 高速粉碎机(FW80型,北京中兴伟业仪器有限公司);紫外可见分光光度计(722N,上海精密科学仪器有限公司) 电子天平(YP202W,上海精密科学仪器有限公司);循环水式多用真空泵(SHB-Ⅲ,郑州长城科工贸有限公司);超声波清洗机(11—1404,宁波新芝生物科技股份有限公司);智能型恒温鼓风干燥箱(CMD-20X型,上海琅轩试验设备有限公司);玻璃仪器气流烘干器(TH48SYBQ-1型,北京中兴伟业仪器有限公司)。[b]2.2实验方法2.2.1黄芩样品的制备[/b] 将黄芩在烘箱中60℃干燥8h,干燥后的黄芩用粉碎机粉碎成粉末,用分样筛(40目)筛分黄芩粉末,保证粉末均匀一致,密封保存,待用。[b]2.2.2 总黄酮的测定方法2.2.2.1 芦丁标准曲线的绘制[/b] 准确称取干燥至恒重的芦丁4.0mg 于小烧杯中,用50%乙醇溶解,并定容于25ml的容量瓶,摇匀,得浓度0.16mg/ml的标准液。准确吸取标准应用液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml 于6 个10ml容量瓶中,与上述容量瓶中分别加入5% NaNO[sub]2[/sub]0.3ml,摇匀,放置6min后,分别加入10% Al(NO[sub]3[/sub])[sub]3[/sub] 溶液0.3ml,摇匀,放置6min后,再分别加入4% NaOH 溶液4ml,加50%乙醇定容至10ml,摇匀,以试剂空白为参比,放置10~15min,用紫外可见分光光度计进行全波长扫描,在最大吸收波长510nm处测定吸光度,得到吸光度Y与芦丁浓度X(mg/ml)间标准曲线回归方程。[b]2.2.2.2 提取液总黄酮含量的测定 [/b]准确称取1.00g黄芩粉末,在不同的提取条件下提取黄芩总黄酮,提取液用乙醇稀释定容至50ml。准确吸取提取液1.0ml于25ml容量瓶,按上述方法显色后测定吸光度,代入标准曲线回归方程中可以得到黄芩中黄酮类物质的含量(mg/ml),从而计算出黄芩中黄酮类物质的提取率,即:黄芩中黄酮类物质的提取率= ×100%[b]2.2.3 单因素试验[/b] 主要研究料液比、乙醇浓度、超声波时间、超声波温度4个因素,在保持其他因素相同的条件下分别进行单因素试验,研究各因素对黄芩总黄酮提取效果的影响,筛选最佳的提取条件。 准确称取黄芩粉末,在不同的条件下进行超声提取,提取液冷却后用乙醇定容,按照2.2.2的测定方法,计算黄芩中总黄酮的含量。[b]2.2.4 正交试验[/b]在单因素试验基础上,选择料液比、乙醇浓度、超声时间、超声温度4因素,设计L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])正交试验,以总黄酮的含量为评价指标,确定黄芩总黄酮超声辅助法的最佳提取工艺。[b]2.2.5 总黄酮体外抗氧化性的研究2.2.5.1 对羟自由基清除作用的研究[sup][/sup][/b]原理:通过反应所产生的羟基自由基可将Fe[sup]2+[/sup]氧化为Fe[sup]3+[/sup], Fe[sup]2+[/sup]和邻二氮菲反应可产生有色络合物,向有色沉淀加入抗氧化剂后,其反应效果会相对减弱。羟基自由基对二价铁离子的氧化作用,会导致吸光值不断变化,从而评价样液消除羟基自由基的能力。步骤:取0.75 mmoL/L邻二氮菲溶液1 mL,加入不同浓度的样液,再加0.75 mmoL/L硫酸亚铁1 mL混匀,加0.75mmol/l的过氧化氢1 mL,于37 ℃ 水浴下,水浴60 min后,在536 nm处测其吸光度,所得吸光度A[sub]b[/sub]。 反应方程式:H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub] + Fe[sup]2+[/sup]=OH[sup]-[/sup] +OH + Fe[sup]3+ [/sup]清除率S(%)=「Ax- A[sub]b[/sub]]/[As- A[sub]b[/sub]] ×100% 其中 A[sub]b[/sub]:标准体系的吸光度 Ax:不含黄芩提取液的吸光度As:不含过氧化氢的标准体系吸光度本底吸光度[b]2.2.5.2 对超氧自由基清除作用的研究 [sup][/sup][/b] 原理:在碱性条件下,邻苯三酚能迅速发生自氧化反应,生成超氧阴离子自由和有色中间产物,且邻苯三酚自氧化速率与生成超氧阴离子自由基的浓度呈正相关,该有色中间产物在300nm处有一特征吸收峰。当加入抗氧化剂能催化超氧阴离子自由基与H[sup]+[/sup]结合生成O[sub]2[/sub]和H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub] ,从而阻止了中间有色产物积累,溶液在320nm 处的吸收减弱。因此可通过测定添加试样前后吸光度[i]A[/i]的变化来表示抗氧化剂对超氧阴离子自由基的清除效果。步骤:取0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH =8.2)4.5mL,置于25℃水浴中预热20min,分别加入0.1mL试样和0.4mL2.5mmol/L邻苯三酚溶液,混匀后于25℃水浴中反应4min,加入8mol/L HCl溶液两滴终止反应,于波长299nm处测定吸光度As,空白对照组以相同体积的蒸馏水代替样品,并计算清除率。 清除率计算公式: S(%)=[(1-(As-A[sub]0[/sub] )/A[sub]b[/sub]]×100%其中 A[sub]b[/sub]:不含黄芩提取物的标准体系吸光度 As:标准体系的吸光度值 Ao:不含邻苯三酚的标准体系吸光度[b]2.2.5.3 对DPPH自由基清除作用的研究[sup][/sup] [/b]原理:DPPH 在有机溶液中是一种稳定的自由基,其乙醇溶液呈深紫色,当 DPPH 溶液中加入自由基清除剂时,其孤对电子被配对,溶液颜色变浅,可由此来检测自由基的清楚状况,从而评价物质的抗氧化能力。步骤:将样品储备液适当稀释得到不同浓度的黄芩黄酮溶液。 向一系列 10 mL比色管中加入 3.5 mL 1.0×10[sup]-4[/sup]mol/L 的 DPPH 溶液和 0.5 mL 样品液,摇匀避光反应30 min,与波长517 nm下测定吸光度 A s。空白对照组以无水乙醇代替样品,并计算清除率。清除率计算公式: 清除率S(%)=[(1-(As-A[sub]0[/sub] )/A[sub]b[/sub]]×100% 其中 A[sub]b[/sub]:不含黄芩提取物的标准体系吸光度 A[sub]s[/sub]:标准体系的吸光度值 A[sub]0[/sub]:不含DPPH的标准体系吸光度[b]3. 结果与分析 3.1 芦丁标准曲线[/b]由图可得,芦丁在0.02—0.10mg/ml浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系,R[sup]2[/sup]= 0.9998。回归方程为Y= 11.47X+ 0.0554 [align=center]表1 芦丁浓度与吸光度的关系[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]芦丁浓度/(mg/ml)[/align][/td][td][align=center]0.02[/align][/td][td][align=center]0.04[/align][/td][td][align=center]0.06[/align][/td][td][align=center]0.08[/align][/td][td][align=center]0.10[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]吸光度(A)[/align][/td][td][align=center]0.288[/align][/td][td][align=center]0.514[/align][/td][td][align=center]0.736[/align][/td][td][align=center]0.976[/align][/td][td][align=center]1.204[/align][/td][/tr][/table][align=center] [/align][align=center] [/align][align=center] [/align][align=center][img=,463,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091813421003_7187_2904018_3.png!w463x249.jpg[/img] [/align][align=center]图1 芦丁标准曲[/align]Fig.1 Standard curve of rutin[b]3.2 总黄酮提取条件的优化3.2.1 料液比对黄酮类化合物提取效果的影响[/b]在料液比为1:6,1:8,1:10,1:12,1:14时,50%乙醇作为提取剂,超声波时间为20min,超声波温度为60℃,冷却后采用超声波提取法提取黄芩中黄酮类化合物含量,研究料液比对提取效果的影响。[align=center]表2 料液比与提取率的关系[/align][align=center][img=,394,250]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091815178933_5515_2904018_3.png!w394x250.jpg[/img][/align][align=center] 图2 料液比对黄芩黄酮提取的影响[/align][align=center]Fig.2 Solid-liquid ratio on the extraction of flavonoids from Scutellaria impact[/align]由图2可见,随着料液比的增加,黄酮类化合物的提取率也逐渐升高,当料液比为1:10时,黄酮类化合物的提取率达到最高值,继续增加料液比,提取率会有一定的降低。在一定范围内料液比的增加有利于物料中黄酮类物质的溶出,但料液比过大的时候,会导致溶液浓度太小,从而影响到黄酮类物质对超声波能的吸收,导致黄酮得率下降。因此选定料液比在1:10的条件下进行实验。[b]3.2.2 乙醇浓度对黄酮类化合物提取效果的影响[/b]当乙醇浓度为30%,40%,50%,60%,70%时作为提取剂,超声波时间为20min,超声波温度为60℃,料液比为1:10的条件下,冷却后采用超声波提取法提取液中总黄酮含量,研究料液比对提取效果的影响。结果如图2所示[align=center]表3 乙醇浓度与提取率的关系[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]乙醇浓度(%)[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][td][align=center]50[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][td][align=center]70[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]提取率(%)[/align][/td][td][align=center]2.08[/align][/td][td][align=center]2.44[/align][/td][td][align=center]3.18[/align][/td][td][align=center]2.15[/align][/td][td][align=center]1.28[/align][/td][/tr][/table][align=center][img=,457,289]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091815413326_3128_2904018_3.png!w457x289.jpg[/img][/align]图3 乙醇浓度对黄芩总黄酮提取的影响[align=center] Fig.3 The effect of ethanol concentration on the extraction of flavonoids from Scutellaria[/align]由图3可见,随着乙醇浓度的增加,黄酮类化合物的提取率逐渐升高,在乙醇浓度为50%时提取率最高,再增加乙醇浓度,提取率逐渐降低。这主要是随着乙醇浓度的增加导致溶液极性的改变,使提取液中杂质含量增加,因此选择50%的乙醇溶液作为提取剂。[b]3.2.3 超声波时间对黄酮类化合物提取效果的影响[/b]当超声波时间为5min,10min,15min,20min,25min,料液比为1:10,乙醇浓度为50%,超声波温度为60℃的条件下,冷却后采用超声波提取法提取液中总黄酮含量,研究料液比对提取效果的影响。[align=center]表4 超声波时间与提取率的关系[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]超声波时间(min)[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]15[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]25[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]提取率(%)[/align][/td][td][align=center]1.67[/align][/td][td][align=center]1.82[/align][/td][td][align=center]1.93[/align][/td][td][align=center]2.19[/align][/td][td][align=center]2.08[/align][/td][/tr][/table][align=center][img=,420,258]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091815572952_9256_2904018_3.png!w420x258.jpg[/img][/align]图4 超声时间对黄芩总黄酮提取的影响[align=center]Fig.4 Ultrasonic time of total flavonoids extracted[/align]由图4可见,随着超声波时间的延长,黄酮类化合物提取率逐渐升高,在20min时提取率最高,继续延长超声波提取时间提取率几乎不变,主要是因为在初期,黄芩中黄酮类化合物没有完全浸提到溶剂中,而随着时间的增加,黄酮类化合物逐渐完全溶于提取剂中,因此提取率几乎不变。所以选择超声波时间为20min时进行实验。[b]3.2.4 超声波温度对黄酮类化合物提取效果的影响[/b]当超声波温度为20℃,30℃,40℃,50℃,60℃,料液比为1:10,乙醇浓度为50%,超声波时间为20min的条件下,冷却后采用超声波提取法提取液中总黄酮含,研究料液比对提取效果的影响。[align=center]表5 超声波温度与提取率的关系[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]超声波温度(℃)[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][td][align=center]50[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]提取率(%)[/align][/td][td][align=center]1.87[/align][/td][td][align=center]2.34[/align][/td][td][align=center]2.44[/align][/td][td][align=center]2.25[/align][/td][td][align=center]2.31[color=#ff0000] [/color][/align][/td][/tr][/table][align=center][img=,360,256]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091816171242_5784_2904018_3.png!w360x256.jpg[/img][/align][align=center] [/align][align=center] [/align]图5 超声温度对黄芩黄酮提取的影响[align=center]Fig.5 Skullcap ultrasonic extraction temperature on impact[/align] 由图5可见,随着超声波温度的升高,黄酮类化合物提取率逐渐升高,在40℃时提取率最高,继续升高超声波提取温度,提取率反而略有下降。高温提取的过程是先使物料升温,保持一定时间后,利用温度使细胞壁破碎,乙醇溶剂溶入细胞内部,黄酮充分溶解,再继续升高温度,反而使更多的杂质释放出来,导致黄酮提取率不再上升。所以选择超声波温度为40℃进行实验。[b]3.3 正交试验确定最佳工艺3.3.1 正交试验结果[/b]通过上述单因素试验,得出各个单因素的最佳条件,其中料液比为1:10,乙醇浓度为50%,超声时间为20min,超声温度为40℃。选择料液比、乙醇浓度、超声波时间、超声波温度4因素3水平,设计L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])正交试验,因素与水平见表1,试验结果见表2为了进一步判断上述4类因素对试验结果的影响是否存在,将以正交试验数据进行方差分析,找出这些因素中起主导作用的来源。表1 正交试验因素及水平表Tab 1 Factors and levels of the orthogonal tests[table][tr][td=1,2]水平[/td][td] 因素[/td][/tr][tr][td]A B C D料液比(g/ml) 乙醇浓度(%) 超声时间(s) 超声温度(℃)[/td][/tr][tr][td=2,1]1 1:8 40 15 302 1:10 50 20 403 1:12 60 25 50[/td][/tr][/table]表2 正交试验结果及分析 Tab 2 The results and analysis of orthogonal tests [table][tr][td=1,2]试验号[/td][td] 因素[/td][td=1,2]提取量(%)[/td][/tr][tr][td]A B C D料液比(g/ml) 乙醇浓度(%) 超声时间(s) 超声温度(℃)[/td][/tr][tr][td=3,1]1 1:8 40 15 30 2.622 1:8 50 20 40 2.903 1:8 60 25 50 2.764 1:10 50 25 30 3.255 1:10 60 15 40 2.626 1:10 40 20 50 2.507 1:12 60 20 30 2.408 1:12 40 25 40 2.589 1:12 50 15 50 2.85K[sub]1[/sub]/3 2.76 2.57 2.70 2.76K[sub]2[/sub]/3 2.79 3.00 2.60 2.70K[sub]3[/sub]/3 2.61 2.59 2.86 2.70R 0.18 0.43 0.26 0.06[/td][/tr][/table]由表1、2可知,主次因素由极差大小确定:B>C>A>D,即影响黄芩总黄酮提取效率的因素贡献率为乙醇浓度>超声时间>料液比>超声温度。以总黄酮含量为评价指标,得最佳提取工艺条件为A[sub]2[/sub]B[sub]2[/sub]C[sub]3[/sub] D[sub]1[/sub],即乙醇浓度为50%、超声时间为25min、料液比为1∶10、超声温度为30℃。最佳条件为正交表中的第四组,因此测抗氧化性实验选择此组数据。[b]3.4 总黄酮的抗氧化性3.4.1 对羟自由基的清除作用[/b][align=center]表6 提取液浓度对羟基自由基清除率[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]提取液浓度/(mg/ml)[/align][/td][td][align=center]0.0025[/align][/td][td][align=center]0.0050[/align][/td][td][align=center]0.0075[/align][/td][td][align=center]0.0100[/align][/td][td][align=center]0.0125[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]VC清除率(%)[/align][/td][td][align=center]20.54[/align][/td][td][align=center]42.88[/align][/td][td][align=center]59.39[/align][/td][td][align=center]74.44[/align][/td][td][align=center]79.09[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]黄酮清除率(%)[/align][/td][td][align=center]40.39[/align][/td][td][align=center]67.21[/align][/td][td][align=center]78.42[/align][/td][td][align=center]85.29[/align][/td][td][align=center]88.30[/align][/td][/tr][/table][align=center][img=,360,256]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807091816376703_5430_2904018_3.png!w360x256.jpg[/img][/align]图6 黄芩总黄酮对羟自由基的清除Fig.6 Scutellaria Flavonoids on Scavenging of Hydroxyl Radicals黄芩总黄酮对羟自由基的清除作用,结果见图6。由图6可知,黄芩总黄酮对羟基自由基具有一定的清除作用。在相同的浓度范围下,清除能力大小为:提取物VC溶液。在0.0025—0.0125mg/ml浓度下,各溶液的清除能力都随浓度的增大而增大。当提取液浓度为0.0125mg/ml下,黄芩提取液的清除率达到了88.30%。3.4.2 [b]对超氧自由基的清除作用[/b][align=center]表7 提取液浓度对超氧基自由基清除率[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]提取液浓度/(mg/ml)[/align][/td][td][align=center]0.0025[/align][/td][td][align=center]0.0050[/align][/td][td][align=center]0.0075[/align][/td][td][align=center]0.0100[/align][/td][td][align=center]0.0125[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]VC清除率(%)[/align][/td][td][align=center]26.77[/align][/td][td][align=center]43.09[/align][/td][td][align=center]61.73[/align][/td][td][align=center]78.69[/align][/td][td][align=center]80.20[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]黄酮清除率(%)[/align][/td][td][align=center]49.81[/align][/td][td][align=center]75.29[/align][/td][td][align=center]84.38[/align][/td][td][align=center]89.21[/align][/td][td][align=center]90.01[/align][/td][/tr][/table]黄芩总黄酮对超氧自由基的清除作用,结果见图7。由图7可知,黄芩总黄酮对邻苯三酚自氧化产生的超氧自由基有一定的清除作用,其清除率随浓度的增大而增大。在相同的浓度范围下,清除能力大小为:提取物VC溶液。各溶液的清除能力都随浓度的增大而增大。当提取液浓度为0.0125mg/ml下,黄芩提取液的清除率达到了90.01%。3.4.3 [b]对DPPH自由基的清除作用[/b][align=center]表8 提取液浓度对DPPH自由基清除率[/align][table][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]提取液浓度/(mg/ml)[/align][/td][td][align=center]0.0025[/align][/td][td][align=center]0.0050[/align][/td][td][align=center]0.0075[/align][/td][td][align=center]0.0100[/align][/td][td][align=center]0.0125[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]Vc清除率(%)[/align][/td][td][align=center]27.36[/align][/td][td][align=center]52.41[/align][/td][td][align=center]79.98[/align][/td][td][align=center]80.49[/align][/td][td][align=center]81.31[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]黄酮清除率(%)[/align][/td][td][align=center]55.7[/align][/td][td][align=center]82.3[/align][/td][td][align=center]89.78[/align][/td][td][align=center]93.74[/align][/td][td][align=center]93.81[/align][/td][/tr][/table][b] [/b]黄芩总黄酮对DPPH的清除作用,结果见图8。由图8可知,黄芩总黄酮对DPPH有一定的清除作用,其清除率随浓度的增大而增大。相同的浓度范围下,清除能力大小为:提取物VC溶液。各溶液的清除能力都随浓度的增大而增大。当提取液浓度为0.0125mg/ml下,黄芩提取液的清除率达到了93.81%。[b]4.总结[/b]1.通过单因素实验,得出各个单因素的最佳条件,其中料液比为1:10,乙醇浓度为50%,超声时间为20min,超声温度为40℃,为正交试验奠定了基础。然后用设计正交试验,确定了超声辅助法提取黄芩总黄酮的最佳工艺条件:乙醇浓度为50%、超声时间为25min、料液比为1∶10、超声温度为30℃。黄芩总黄酮的提取率为3.25%。2.本实验分别就黄芩提取物对羟基自由基,超氧阴离子自由基和DPPH自由基的抗氧化性进行了测定,并与VC进行了对比实验,得到如下结论:在0.0025—0.0125mg/ml浓度下,提取物对各自由基清除能力为:DPPH O[sub]2[/sub][sup]-[/sup]• • OH ,同浓度黄芩提取物清除能力普遍高于VC溶液,黄芩黄酮提取液和VC溶液对自由基清除率随其浓度的增大而增大。在浓度为0.0125mg/ml下,对羟基自由基的清除率为88.30%,对超氧基自由基的清除率为90.01%,对DPPH自由基的清除率为93.87%,由此可知黄芩总黄酮是一种天然有效的自由基清除剂。黄芩中黄酮类化合物的利用已经有一定的规模,但黄芩中黄酮化合物的提取方法和工艺尚未成熟,所以充分利用黄芩资源是我国药用研究的科学发展方向。基于提取率、成本等因素的影响,通过对各种因素的比较分析,从而探索开发出适合工业化生产应用的方案,提高黄芩利用率,仍是研究工作的重点之一。随着人们对健康的日渐重视,因黄芩中的黄酮化合物有着极高的药用营养及良好的保健作用,具有极为广阔的市场前景[b]。[/b]本文旨在研究黄芩中黄酮类物质的提取工艺及其体外抗氧化活性,为黄芩中黄酮类化合物作为天然抗氧化剂和功能性药品得到开发利用提供理论基础和实验依据。[align=center][b] [/b][/align] 刘雄,高建德.黄芩研究进展.甘肃中医学院,2007,24(2):46-50. 罗小文.黄芩中黄酮类成分提取工艺研究进展.中国现代中药.2010,12(7):5-8. 张睿,徐雅琴,时阳.黄酮类化合物提取工艺研究.食品与机械.2003,15(1):21-22. 梁丹,张保东.黄酮类化合物提取和分离方法研究进展.周口师范学院学报,2007,24(5):87-89. 龙春,高志强,陈凤鸣,等.黄酮类化合物的结构-抗氧化活性研究进展.重庆文理学院学报.2006,5(2):13-15. 刘雄,高建德.黄岑研究进展.甘肃中医学院学报,2007,24(2):46-50. 郭雪峰, 岳永德. 黄酮类化合物的提取-分离纯化和含量测定方法的研究进展. 安徽农业科学. 2007, 35(26): 8083- 8086.. 唐德智.黄酮类化合物的提取、分离、纯化研究进展.中药与天然产物,2009,21(12):101-104.. 张岩, 曹国杰, 张燕,等. 黄酮类化合物的提取以及检测方法的研究进展.天食品研究与开发,2008,29(1):154-157. 韩雅慧,陶宁萍.甘草黄酮提取及其抗氧化能力测定方法研究进展.山西农业科学,2010, 38(11):89- 93. 崔永明,余龙江,等. 甘草总黄酮的提取技术及其抑菌活性研究.中药材,2006, 29(8): 838-840. 孙墨珑, 宋湛谦, 方桂珍. 核桃楸总黄酮的提取工艺.东北林业大学学报, 2006, 34 (1) : 38 - 39. 徐清萍,钟桂,芳孟君. 抗氧化剂抗氧化方法研究进展.食品工程,2007,6(7):23-25. 安卓,贾昌喜.苦苣菜总黄酮提取、纯化工艺优化抗氧化活性研究.食品科学. 赵新淮.大黄醇提取物对三种自由基的清除能力的研究.东北农业大学学报.1998,29(3):284-288 杨立琛,李荣.花椒叶黄酮的微波提取及其成分分析.食品科学. CHI Ru-an,ZHOU Fang,HUANG Kun,ZHANG Yue-fei.Separation of baicalin form Scutellaria Baicalensis Georgi with polyamide.Key Laboratory for Green Chemical Process of Ministry of Education.2008,15(1):606-611.
本实验分别提取两年生、三年生无腺毛甘草主根、侧根、水平根及茎中的黄酮,并测定其含量,初步找出消长规律。以甲醇为提取溶剂,索氏提取法提取黄酮,分光光度法测定总黄酮含量。结果表明两年生无腺毛中主根、侧根、水平根及茎中的黄酮含量分别为1.28%、1.28%、1.56%、0.73%;三年生无腺毛中主根、侧根、水平根及茎中的黄酮含量分别为1.75%、1.46%、1.81%、0.41%。随着年限的增大,无腺毛甘草中根部的黄酮含量逐渐增大。同龄期无腺毛甘草中黄酮含量:水平根最高,主根和侧根次之,茎最小。 无腺毛甘草 黄酮 含量测定 消长规律1.前 言无腺毛甘草(Glycyrrhiza eglandulosa X.Y.Li)是石河子大学李学禹教授在新疆发现、1993年命名的新种,也是我国的特有种。它生长的环境条件比乌拉尔甘草(G. uralensis)更恶劣,因而更加耐干旱、耐盐碱,而且是很适合于低产地、弃耕地等恶劣环境条件下生长的抗逆性极强的甘草物种。这个种在形态分类系统学、细胞学、生态学都有研究,根据细胞染色体组型分析与形态数值分析,都证实它与乌拉尔甘草、光果甘草亲缘关系较近,但在化学成分方面未进行系统研究。根据资料报导,产于新疆的胀果甘草(G.inflata)、黄甘草(G.eurycarpa)及云南的云南甘草(G.yunnanensis)都发现过大量的具有生理活性的新的化学成分。由此可知:一个形态性状特异、分布于逆境条件下能正常生长的新物种,肯定具有抗逆性较强的基因所决定的代谢产物,肯定有特殊性。为此,我们拟从应用开发的角度,提取无腺毛甘草中黄酮类化合物,对其进行含量测定,并进一步研究其在不同龄期、不同部位黄酮类化合物的消长规律,为进一步研究其化学组成和结构打下基础,并且为退耕还草大面积栽培无腺毛甘草提供科学依据。2.实验部分2.1实验仪器、样品与试剂2.1.1实验仪器:紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公司),索氏提取器(自治区化玻站提供),烘干箱(湖北省黄石医疗器材厂),电光分析天平(上海棱光技术有限公司),精密PH计(上海雷磁仪器厂)。2.1.2实验样品:两年生、三年生的无腺毛甘草(石河子大学甘草栽培基地李学禹教授提供)。2.1.3实验试剂:柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定所),10%的氢氧化钾溶液,甲醇(AR)。2.2黄酮类化合物的提取分别称取3份两年生无腺毛甘草的主根粉碎后放入索氏提取器中,加入甲醇回流2h,冷却后分别将回流液转移至容量瓶中,提取两次,提取液合并,用甲醇定容。用同样的方法分别提取两年生无腺毛甘草的水平根、侧根和茎以及三年生无腺毛甘草中主根、侧根、水平根、茎中的黄酮。2.3黄酮类化合物的含量测定2.3.1对照品溶液的制备准确称取柚皮苷对照品适量,用甲醇溶解并定容于10mL容量瓶中,制得浓度约为1.0mg.mL-1的对照品溶液。2.3.2最大吸收峰的确定精确吸取柚皮苷对照品溶液0.5ml,加入5ml甲醇,再加入10%KOH溶液2.5ml,室温放置5min,用甲醇稀释至50ml[
花青苷和黄酮类(多酚类化合物Anthocyans and flavonoids)分子结构特点:含有苯并吡喃环,它们是植物组织中的水溶性色素的主要成分,具有各种色泽。常见有三种类型:花青苷素、黄酮类和儿茶素,均属于多酚化合物类,大量存在于自然界中。1.花青苷的色泽——红色(1)花青苷在酸性条件下呈红色,在中性条件下呈无色,在碱性条件下呈蓝色。(2)金属离子sn2+、Fe2+、Cu2+、Al3+与花青苷结合使花青苷呈蓝色。(3)亚硫酸盐类可以对花青苷进行漂白使之褪色,通过加热或酸化处理可去掉亚硫酸,使花青苷再生,重新恢复原来的红色。2.无色花青苷(Leucoanthicyanins)无色花青苷的结构与花青苷相似,以三聚体以上存在。自然界中无色花青苷存在于苹果、梨、葡萄和山楂等水果之中。它们与涩味有关,在无机酸中加热可以转化为花青苷,可参加酶促褐变反应。既可赋予食品(如酒、茶、香蕉、巧克力、越橘)以特殊的风味,也可影响食品的色泽,如使罐头果肉变红、变褐,在啤酒或其他酒中形成混浊物。3.黄酮类黄酮是一种多种多样,广泛存在着的呈无色至黄色的色素,其结构上与花青苷类不同之处在于它具有的是苯并吡喃酮结构。黄酮类的热稳定性比花青苷类好,热加工对它们的破坏不大。一些金属离子形成深色化合物,往往会造成食品的异常色泽。4.单宁(Tannin)来源:单宁存在于柿子、茶叶、咖啡、石榴等植物组织中,在未成熟时含量尤为多,它们的结构较为复杂,多是高分子多元酚类的衍生物,水解后可生成葡萄糖、没食子酸或其他多酚酸(鞣酸)。性质:①单宁与食品的涩味有关,能参加酶促褐变反应;②与Fe3+形成黑色物质;③与蛋白质形成不溶性沉淀可以用来对果汁的澄清;④含单宁高的植物可以作为制革工业中的植物性鞣质原料。
核磁共振波谱对一个黄酮化合物的结构分析与鉴定淡黄色粉末,mp 220~222℃。20D:-33.6(c,0.10,CH3OH);AlCl3反应呈阳性,提示该化合物为黄酮类化合物。ESI-MS谱给出准分子离子(m/z):421-;HRESI-MS给出+峰m/z:423.09159(计算值:423.09219),分子量为 422.08492,分子式为C19H18O11,不饱和度为 11.IR谱显示有酚羟基(3 356.9),羰基(1 649.4),苯环(1 602.2,1 472.7),碳氧键(1 288.4);http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301101_520798_2672081_3.png1H-NMR谱中,5.05(1H,d,J=7.5Hz)有一糖端基氢信号,δ 3.16~3.71 有糖上其它氢信号.http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301103_520799_2672081_3.png13C-NMR谱中,δ60~100 有一组糖信号,TLC原位酸水解检出葡萄糖,说明该化合物含有一分子葡萄糖。13C-NMR谱中,δ90~180芳香区有 14 个碳信号,减去一个葡萄糖端基碳,还有 13 个碳信号,根据有关文献,推断该化合物母核为黄酮类化合物。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301104_520800_2672081_3.pngDEPT谱表明该化合物含有 1 个亚甲基,9 个次甲基,9个季碳,扣除葡萄糖的 1 个亚甲基,5 个次甲基,剩下 4 个次甲基,9 个季碳,表明该酮有四个芳氢被取代。δ179.1 为羰基碳信号,δ162.2,163.4,154.5,144.0,156.9,151.2 应为与氧相连的碳信号,除母核上两个连氧碳外,剩余四个碳应连有含氧基团。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301105_520801_2672081_3.png13C-NMR谱中,除了一组葡萄糖信号和 酮母核信号外,未见其它碳信号,可以断定黄酮母核上的四个含氧取代基团均为羟基。1H-NMR谱中,δ7.38(1H,s)和δ6.88(1H,s)为两个孤立芳氢信号,δ6.62(1H,d,J=2Hz)和δ6.38(1H,d,J=2.0Hz)为一组间位偶合氢信号,说明黄酮母核两个芳环中一个被邻位取代,另一个被间位取代。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301106_520802_2672081_3.png由以上信息可知,该化合物含有一个葡萄糖,一个 1,3,6,7-四羟基—黄酮。通过HSQC和HMBC,对该化合物的碳、氢信号进行了归属(如:表格)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301109_520804_2672081_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301109_520805_2672081_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301109_520806_2672081_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410301109_520807_2672081_3.png结合HMBC谱发现,δ13.14 羟基氢与δ162.2(1 位碳)和δ98.2(2 位碳)及δ103.1(8b位碳)远程相关,证明此羟基连在 1 位碳上。δ6.38 氢与δ163.4(3 位碳)和δ162.2(1 位碳)及δ103.1(8b位碳)、δ94.2(4 位碳)远程相关,证明此氢连在 2 位碳上。δ6.6 氢与δ163.4(3 位碳)和δ156.9(4a位碳)及δ103.1(8b位碳)、δ98.2(2 位碳)远程相关,证明此氢连在 4 位碳上。δ6.88 [fon
做硝基呋喃类化合物检测用的标准品大家都是用的什么呀?有标准中说的是用对照品,有标准中用的是代谢物,不知道这其中有没有什么区别呀?大家都根据哪个标准做的呢?
请问大家,萜烯类化合物标准品哪里有买?
今天下了些黄酮的资料,为加强交流,互通有无,把我的一本关于黄酮书附上,无者下之,有者加勉!!![img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=101152]电子书:黄酮类化合物[/url]
请教黄酮类化合物的提取方法
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花生红色包衣中黄酮化合物分析,有做的吗?这个分析下来大概多少钱?
想鉴定某种植物里某种化合物的含量,前期有分离出该种化合物的纯品,但是后期做定量时,不同浓度的标准品的出峰时间有细微差别,且样品中的该化合物的峰要么是出峰时间与标准品不一样,要么就是分不开,是什么原因呢?还有基线总是跑不平(如图所示),流动性是乙腈比水为4:6,
污染物残留分析中,经常会遇见复杂基质样品,色谱图中出现与待测化合物标准品保留时间相近但又不完全一致的色谱峰,那么该如何确定其是杂质还是待测化合物色谱峰呢?如果判定为杂质峰,如何避免出现假阴性结果?
我现在想分离黄铜类化合物,包括金丝桃苷,槲皮素,芦丁,山奈酚,看有文献缓冲液用的是硼砂和磷酸二氢钠的混合溶液,这种缓冲液如何调节PH啊,还有二者的比例对分离度有何影响啊,大家有做过的分享一下经验
我采用岛津的气质联用仪测定挥发物,检测结果采用NIST系统确定化合物名称。现在投稿返回意见是核对化合物的中英文名称。我想知道有没有网站可以查询化合物,这些化合物没有错误,就是中英文名称让重新核对下,写其标准名称。如乙酸叶醇酯 3-hexenyl acetate这样的。谢谢!
2013年12月11日消息,欧盟社会经济分析委员会(SEAC, Committee for Socio-economic Analysis )通过了铅及其化合物限制提案的意见草案。草案中的限制条件主要包含以下几点:1.物品或物品的可接触部件,供给一般公众以及能被儿童放入口中,如果其产品或者产品部件中铅(以金属计)浓度大于等于0.05%,不得投放市场。2.条款1中可被儿童放入口中的物品指,该产品某一维度、可分离部件或者突出部分的尺寸小于5cm,即被认为可被儿童放入口中。3.条款1中限制的产品或产品部件不包括:在合理可预见的使用中不会被儿童接触的。在合适的情况下也可以使用欧盟标准EN 71-1中的相关要求来判断是否可放入口中。4.作为豁免条款,条款1不适用于:I.理事会指令69/493/EEC(*)的附件I 中水晶玻璃的定义(第1,2,3 和4 类);II.非合成或再造的宝石,次等宝石(CN 代码7103,法规(EEC)2658/87 中确定的),除非他们已经用铅或其化合物或含有这些物质的混合物进行了处理;III.瓷釉,即在至少500℃的温度下,经过熔化,上釉或矿物烧结而成的可制成玻璃的混合物;IV.钥匙和锁 ,包括挂锁和乐器 ;V.由黄铜合金制成的产品,其黄铜中铅含量(以金属计)不超过0.5%;VI.书写设备的尖端VII.其他以及由欧盟法规规定了相关铅含量以及迁移量的产品。5.作为豁免,条款1不适用于第一次投放时间早于......(法规生效12个月以后)
求老师们推荐些关于黄酮、多酚类化合物的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]数据库。谢谢老师们
Introduction 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A环和B环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物,其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。黄酮类小部分以游离态(苷元)的形式存在,多数与糖结合成苷。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物,它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方起着重要的作用。 本实验研究对象为某中药中一个黄酮类化合物的代谢,本次发表的为代谢产物某流分的定性分析,该流分含有3个代谢产物,我们用Ultimate XB-C18柱和国外某名牌色谱柱对该流分进行了定性分析比较。1.Chemical and reagents 甲醇(色谱纯,天津大茂),水(哇哈哈纯净水,杭州),三氟乙酸(TFA, Dikma, USA),其它试剂均为分析纯。2.HPLC analysis of an unknown sample Waters 高效液相色谱系统,由Waters Model 600 controller液相色谱,Millennium 32 工作站,Model Delta 600 泵,以及Waters 996 DAD检测器组成。 色谱柱:Ultimate XB-C18柱(5μm, 4.6x250mm)和国外某品牌色谱柱(5μm, 4.6x250mm)(用column X表示,投入使用约半年) 流动相:A通道:甲醇,B通道:水(0.05%TFA)=(45:55, v/v)或A通道:甲醇,B通道:水(0.05%TFA)=(40:60, v/v) 流 速:0.6mL/min 柱 温:35℃ 检测波长:190-400nm扫描 进样量:20μL3.Sample preparation 因为涉及保密内容,此部分略去。4.Results and discussionhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105181521_294755_2160661_3.jpgFig.1 Chromatogram of sample solution analyzed by column Xhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105181522_294756_2160661_3.jpgFig.2 Chromatogram of sample solution analyzed by Ultimate XB-C18 columnhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105181523_294757_2160661_3.jpgFig.3 Chromatogram of sample solution analyzed by column X(Fig.1的局部放大图)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105181524_294758_2160661_3.jpgFig.4 Chromatogram of sample solution analyzed by Ultimate XB-C18 column(Fig.2的局部放大图)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105181525_294759_2160661_3.jpgFig.5 Chromatogram of sample solution analyzed by Ultimate XB-C18 column(流动相比例降低后) 从图1和图2比较结果可以看出,该样品共含有3种黄酮类成分,DAD检测器给出其最大紫外吸收~270nm,~310nm,从紫外吸收还可以看出,这3种成分结构相似,其保留时间也很近。我们可以看出Ultimate XB-C18柱表现出了更好的分离度,而且展现了更好的峰形。 图3和图4是图1和图2的局部放大图,可以观察到色谱峰的保留时间,图5是将流动相比例降低后用Ultimate XB-C18柱再次分析的结果,虽然没有完全达到基线分离,但结果也是不错的。 该实验只是对代谢产物某流分中的3种黄酮类化合物进行定性分析,没有进行其它条件的考察,比如流动相加不同的酸,加酸的量(pH),以及在乙腈水系统下进行考察,这些将在后续实验中补充。5.Conclusions 我们通过一个简单的定性实验,即中药某成分代谢产物的分析,比较了2种色谱柱对该流分中3种黄酮类化合物分离能力的研究,结果显示Ultimate XB-C18柱丝毫不落下风,反而表现出了神勇的分离能力。在未来的实验中,Ultimate色谱柱会一直伴随该项目的研究,我们会有更加精彩的结果发表出来,供大家分析讨论。
黄芩中黄芩苷的测定色谱柱/前处理小柱:Diamonsil C18(2) 5u 250 x 4.6mm样品前处理:取在60 ℃下减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 ml含60 ug的溶液,作为对照品溶液。取本品中粉约0.3 g,精密称定,加70%乙醇40 ml,加热回流4小时,放冷,滤过,滤液置100 ml量瓶中,用70%乙醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤入同一量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀。精密量取1 ml,置10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,既得。色谱条件:检测器: UV 280 nm流动相: 甲醇:水:磷酸=47:53:0.2流速: 1.0 mL/min柱温: 40 ℃进样量: 10 μL图例:黄芩苷http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/huangqinduizhao.gif甜菊甙的检测样品前处理:制备方法: 取样品适量(50-100mg),7:3的水乙腈溶解,定容到50ml,即得。色谱条件:分析条件色谱柱: Diamonsil C18(2),250×4.6 mm,5 μm (Cat#:99603)流动相: 0.01 M磷酸二氢钠:乙腈=68:32流 速: 1.0 mL/min柱 温: 40 ℃检测器: UV 210 nm进样量: 5 μLhttp://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/tianjudai.PNG 银杏叶提取物中的黄酮甙色谱条件:色谱柱:PLATISIL(铂金)ODS 5um, 250 x 4.6mm流动相:甲醇/ 0.5% 磷酸溶液=57/43流速:1.0mL/min检测:UV=360nm柱温:室温化合物:1. 槲皮素2. 山奈素3. 异鼠李素http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/11(15).jpg 黄苓苷色谱条件:色谱柱:PLATISIL(铂金)ODS 5um, 150 x 4.6mm流动相:甲醇/ 水/ 磷酸=47/53/0.2流速:1.0mL/min检测:UV=277nm柱温:室温1. 黄苓苷http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/33(14).jpg
做HJ 648 水质中硝基苯类化合物的检测,15种标准品的色谱峰拖尾,DB-1701柱子,30×0.32×0.25,进样口250°,检测器300°,柱子流量1ml,初温50°保持2min.,以每分钟10°升到200°,保持1min.,再以每分钟12°升到250°,保持2min.,换过非极性的柱子OV-101,分离效果更差,请问这里有没有做过这个标准的老师指导一下。[img=,690,322]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812140954328263_5265_1620184_3.png[/img]
各位高手: 现急需一种化合物的标准图谱,CAS:5549-23-5,在中科院上海化学所的数据库中没查到! 谢谢各位!
有哪位大侠有,三聚氰胺甲醛模制化合物的标准规范 标准号:ASTM D 704-1999。中文,英文的都可以。 谢谢
日前,欧盟通过了决议2009/425/EC,进一步限制对有机锡化合物的使用。决议2009/425/EC指出自2010年7月1日起欧盟将在所有消费品中限制使用某些有机锡化合物。 新的欧盟指令(2009/425/EC)关注的三取代基有机锡化合物(TBT &TPT) ,二取代基有机锡化合物(DBT & DOT),被广泛的应用于消费品中。例如鞋的内底,袜子和运动衣的抗菌整理,聚氨酯泡沫生产过程中的添加剂,PVC生产过程中的稳定剂或硅橡胶生产过程中的催化剂等。由于有机锡化合物对人类健康和环境都会造成不良的影响,因此含有机锡化合物的产品被严格地限制。 决议2009/425/EC具体要求如下表:化合物范围要求生效日期(不可在产品或零部件中使用)生效日期(不允许在市场上销售)三丁基锡 所有物品0.1%(锡含量)2010年7月1日2010年7月1日三苯基锡所有物品0.1%(锡含量)2010年7月1日2010年7月1日二丁基锡所有物品0.1%(锡含量)2012年1月1日2012年1月1日二辛基锡物品包括:- 设计为皮肤接触的纺织品;- 手套;- 设计为与皮肤接触的鞋或 鞋的相应部位;- 儿童护理品;- 女性保洁产品; - 尿布; - 双组分室温硫化模具(RTV-2模具)。0.1%(锡含量)2012年1月1日2012年1月1日与欧盟等国家相比,我们在法规出台的时间和标准的严格程度上都存在滞后性,这与我们之前的技术落后有很大的关系,针对这样的行业局面,笔者曾就此问题拨打了国内最大的检测机构谱尼测试的全国客服电话400-819-5688,通过沟通,谱尼测试的检测专家建议,各大企业要增强在世界贸易中的适应性和实力,从中长期看必须加强技术的提升,适应各种法规和标准并逐步超越,但是在短期内,必须熟知法规和标准,密切关注动态,通过有实力的检测机构做好产品检测工作。
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=87706]薄层色谱法分离鱼藤中异黄酮类化合物 [/url]
自今年7月起,欧盟执行2009/425/EC指令,从而正式开始限制对消费产品中特定有机锡化合物的使用。指令2009/425/EC中规定:自2010年7月1日起,欧盟在所有消费品中限制使用三丁基锡和三苯基锡化合物,其限量要求为商品中锡含量的质量百分比浓度小于0.1%,如若检出超标,则该批消费品将遭到退货乃至严厉的召回处罚。 本项指令中关注的有机锡化合物包括三丁基锡、三苯基锡化合物及二丁基锡、二辛基锡化合物,其中前两者的正式开始限制时间为2010年7月1日,而后两者的时间则为2012年1月1日。以上四种有机锡化合物被广泛地应用于消费品中,例如鞋的内底,袜子和运动衣的抗菌整理,聚氨酯泡沫生产过程中的添加剂,PVC生产过程中的稳定剂或硅橡胶生产过程中的催化剂等。据统计,在现实生产过程中,全世界的锡产量中的10%~20%是用于合成有机锡化合物的,由此可见该物质应用的广泛程度。并且有机锡化合物对生物体的危害严重,会引起糖尿病和高血脂病等。 据统计,2010年上半年,宁波口岸出口至欧盟的商品共计62413批次,合15.72亿美元,相比2009年同期,分别提高了27.0%和26.6%,呈现出良好的上升态势,其中主打的拳头产品包括纺织品、玩具产品、食品接触类材料等,这些物品在生产加工过程中都有可能会添加有机锡化合物,如果这些潜在含有有机锡化合物的产品未通过检测贸然输往欧盟,可能会导致大规模的退货乃至召回的后果,这将会严重影响“中国制造”在欧盟的声誉,最终会对正处在逐渐回暖过程中的中欧贸易造成不可预计的恶性后果。 为此,检验检疫部门提醒:第一,输欧消费类产品的生产企业要加强原辅材料和生产过程的管理,要求原辅材料供应商提供不含有机锡化合物的检测报告,同时积极改进加工工艺,确保整个生产过程不添加有机锡化合物;第二,相关企业应积极通过与政府职能部门的配合,获取更多的有毒有害物质检测技术和检测标准知识,稳固企业技术储备工作;第三,检验检疫部门应加大对相关商品的有机锡化合物的抽样检测工作力度,以保证起到切实有效的监管作用;此外,检验检疫部门还可以考虑在国际层面上加强与欧盟在有毒有害物质管理方面的信息交换和有效配合,掌握国外有毒有害物质最新标准的发展趋势,以利于企业进行各项技术创新和管理变革。
山葡萄酒中多酚类化合物酚类化合物是葡萄酒中的重要生理活性物质,对人体的健康起着重要保健作用。山葡萄酒中的多酚类化合物主要有:花色苷:是一种红色素化合物,有花青素、甲基花青素、牵牛花素、锦葵花素、花翠素、芍药素、栎皮黄素等,其含量是一般葡萄酒的2倍。黄酮类:是一种黄色素化合物,有堪非醇、槲皮素、山奈酚、杨梅素等,其黄铜醇的含量为1.43g/L,是一般葡萄酒的5~10倍。儿茶素类:主要有儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素等,具有一定的苔味。原花色素类:主要有原花青素、原花翠素、原天竺葵素等。是葡萄籽与皮的主要成份,也是葡萄酒中多酚类化合物含量最多的一类。单宁类:是由花白素的多聚体组成的,有一定的涩味,具有重要的生理功能。山葡萄酒中单宁的含量是一般葡萄酒的2~3倍。白藜芦醇化合物:主要有顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇糖苷、反式白藜芦醇糖苷、顺式反式白藜芦醇异构体等。这些化合物主要来源于葡萄皮、籽中,是植物体具抗病毒的生理活性物质,也是对人体防治心脑血管疾病的重要药理成份。山葡萄酒中白藜芦醇的含量为5.86~8.20mg/L,高于国际标准,是一般葡萄酒的4~6倍。多酚类化合物是重要的保健功能成份,主要来源葡萄皮、籽中,因此吃葡萄带皮、籽一起吃掉是最有益身体健康的。酶类化合物:主要有超氧化物岐化酶(SOD),是一种自由基清除剂,具有破坏活性氧作用的自卫酶类化合物。山葡萄酒中含量为1.52×104—1.84×104mg/L,虽然含量极微小,但对人体健康有重要作用,也是其它葡萄中不具备的。