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即用型硫乙醇酸盐流体培养

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  • 微生物检测培养基质量控制问答
    微生物检测培养基质量控制问答1、培养基灭菌后成份会有所蒸发减少,如何处理这个问题?答:正常情况下蒸发量较少,可忽略不计。2、培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的?应如何避免?答:可能的情况有:1. 培养基配置用水不符合规定;2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢;3. 培养基储存不当;4. 融化时沸腾时间较长等。3、准备好的培养基有效期如何验证?答:定期取出培养基验证其无菌性,促生长能力等方面。4、培养基配制好灭菌后,在高压容器中保温降至50℃左右,可不可行?答:建议最-好不要,避免过度受热。5、脱水培养基对湿度是否有要求?多少适宜?答:按要求室温干燥环境储存即可。6、培养基pH值测定温度在25℃,这个温度应怎么控制?答:可水浴控制培养基温度。7、配制培养基过程中,按说明书称定量,加规定的纯化水,煮沸溶解,为了避免煮沸过程总减少水分,是否要在配制过程适当增加水?答:可适量增加,自己掌握。8、商品培养基一定要当天配当天用吗?可否在一周内用完?答:不是即配即用的培养基的话,储存的当,可以使用。9、称量培养基时,注意不要吸入粉末,这粉末是指何物?答:就是你所称量的干粉培养基 ,因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用,而且培养基中的某些成分,如亚硒-酸盐、叠氮-化钠、乙酰胺等,长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护,且最-好选择少粉尘环保型颗粒培养基。10、煮培养基,用不锈钢锅在电磁炉上煮可行?硫乙醇培养基是否要煮沸?如何煮沸?用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗?可不可以水浴煮沸呢?答:硫乙醇应煮沸,量大时,我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸,因为水浴煮沸琼脂粉很难溶,导致琼脂分装不均匀,前段分装的琼脂含量少,后段分装的琼脂含量高,导致有的管或瓶中的FT凝固。11、如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗?答:高温灭菌器有安全阀,温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却,各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。12、平板涂布和平板划线培养基表面水分过多,菌落蔓延如何解决?答:对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25℃~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
  • 赛默飞发布变性乙醇燃料中氯离子和硫酸根的测定方案
    2014年5月13日,上海 —— 科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)近日发布变性乙醇燃料中氯离子和硫酸根的测定方案。该方法选择性较好,氯离子和硫酸盐的分离不受样品基质的影响,其定量结果更加准确。 绿色能源的开发随着石油资源的逐渐枯竭越来越收到关注。乙醇由于其生产原料来源广、生产过程简单、燃烧释放能量高以及燃烧排污小等诸多优点而日益得到重视。众所周知,乙醇经过燃烧后转变为水和二氧化碳,但作为燃料的乙醇中如含有氯、硫等化合物时,将会腐蚀内燃机,降低发动机使用寿命。ASTMD4806对变性乙醇燃料中氯、硫化合物的含量进行了严格限制,并推荐以ASTM D7319或ASTM D7328为其含量检测方法。赛默飞离子色谱可实现对这些离子的有效检测,参照ASTM D7328对变性乙醇燃料样品进行前处理后,选用高容量IonPac AS22高效阴离子交换分离柱完成了样品中痕量游离氯化物和硫酸盐及总硫的含量测定。ICS-1600离子色谱系统 下载应用纪要请点击:http://www.thermo.com.cn/Resources/201404/3113151140.pdf 关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元,在50个国家拥有员工约50,000人。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于Thermo Scientific、Life Technologies、Fisher Scientific和Unity? Lab Services四个首要品牌,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com 赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司,员工人数超过3800名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站www.thermofisher.cn
  • 细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始!
    细胞体外培养用水中水的质量要求提起细胞体外培养实验,每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧,细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。明明小心翼翼的操作,细胞总会莫名其妙的被污染了!莫名其妙的挂掉啦!到底怎么回事呢?其实造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以生存的主要环境,营养物质和代谢产物都必须溶解在水中,才能为细胞吸收和排泄。对于体外培养的细胞来说,水是细胞培养液和试剂中简单而重要的组分。所以,细胞培养对水的质量要求较高,培养用水中如果含有一些杂质,即使含量极微,有时也会影响细胞的存活和生长,甚至导致细胞死亡。水中的杂质对水质有不同影响:1.离子——平衡渗透压;一些重金属 (Cadmium)对细胞毒害大,即便剂量很低 ( 0.1 ppb); 2.微生物——污染,改变微环境如pH,影响增殖,死后释放内毒素等;3.内毒素——改变细胞外形、活化细胞、促进或抑制细胞分裂、影响细胞附着等;4.有机物——影响细胞的生长状态。水质评价常用的指标:1. 电阻率(electrical resistivity)衡量实验室用水导电性能的指标,单位为MΩ• cm,随着水内无机离子的减少电阻数值逐渐变大。2. 异体菌落数(Heterotrophic bacteria count,HBC)衡量实验室用水微生物的指标,单位为cfu/mL。3. 有机物(Total Organic Carbon ,TOC)水中碳的浓度,反映水中可氧化的有机化合物的含量,可间接反映出水中细菌和内毒素含量的高低。单位为ug/L或ppb。4. 内毒素(Endotoxin)革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,又称之为“热原”,单位EU/mL。参考国际标准化组织的实验室纯水规范ISO3696,美国CLSI和ASTM D1193的试剂纯水规范,我国GBT6682和GBT 30301的试验用水指导,《实验细胞资源的描述标准与管理规范》用水指导,结合多年的实验操作经验,总结出细胞培养用水对水质的要求。细胞培养对水质的要求:1.一定要无菌:HBC 0.01 cfu/mL2.无蛋白及核酸酶和内毒素:无内毒素或无热源0.03EU/mL3.阻碍细胞生长的有机物含量要低:TOC5 ppb4.去除离子含量:电阻率≥18 MΩ• cm(@25℃)细胞体外培养用水中纯水机的配置要求细胞培养过程中,各种培养液和试剂的配制用水均需要经过严格的纯化处理,不含离子和其他的杂质,即使是储存试剂的玻璃器皿,在自来水冲洗过后也应用超纯水漂洗三次以上。目前,市场上供应的纯水装置种类较多,比如自来水进水同时制备二级纯水和超纯水的上海乐枫Genie一体化纯水装置,可以由自来水进水通过预处理柱P Pack、反渗透柱RO Pack及EDI(连续电流电去离子)模块等纯化后达到二级纯水,储存于水箱中以满足日常的清洗应用;水箱中的水再经过U Pack超纯化柱去离子,紫外灯照射杀菌并降低有机物含量,最后经终端滤器RephiBio过滤,以获得无菌、无热源、无核酸酶的超纯水。Genie G 水路图要想达到细胞培养用水的水质要求,纯水机的配置非常关键,带有消毒模块的纯水水箱、终端过滤器、取水水质的实时监测等配置都关系着产水水质是否达标。纯水的储存对保持纯水的质量是至关重要的,由于周围环境和空气中的二氧化碳更容易使水污染改变其pH,所以储存水的容器要尽量密封,避免和外界过多接触,抑制微生物生长。如Genie纯水设备可以提供的纯水水箱带有紫外消毒模块和去除二氧化碳的过滤器,能够尽量的保证水箱内的纯水水质。水箱空气过滤器(含CO2吸附剂)200/350L 水箱空气过滤器主控屏显示水箱水循环状态终端滤器可用于去除纯水中特定类型的污染物,满足不同实验的应用需求。对于细胞体外培养可以选用RephiBio Filter 纯水终端过滤器,安装在乐枫超纯水系统的出水口,可有效去除水中的热原(内毒素)、核酸酶、细菌等杂质,制备符合细胞培养用水要求的超纯水(无热原、无DNase、无RNase、无菌)。对于超纯水而言需要格外注意终端水质的TOC、电阻率、细菌和内毒素的含量,必须做到即取即用,因此取水的远程监控和水质实时监测就显得尤为重要。目前已有厂家可以提供与手柄通过无线连接的实验室纯水机(如上面提到的Genie),将水机和取水手柄分别放在洁净间的内外,通过无线控制取水手柄达到超纯水的取用和实时检测水的电阻率和TOC数值,非常适合无菌环境下的操作,尽量减少污染。无线 自由局域网无线通信技术 各单元摆脱信号线羁绊主机,主控屏,手柄摆放可自由组合 手柄触屏信息? 系统运行状态:待机,泄压,循环,产水? 水箱液位:0%或者L? 纯水(超纯水)水质参数:电阻率、TOC、温度 终 端 水 质 实 时 监 测结合上述用水要求,为大家推荐两款制备超纯水的水机,Genie G一体化纯水仪和Genie PURIST 超纯水仪。 Genie G一体化纯水仪以自来水为进水制备超纯水和 EDI 二级纯水性能指标Genie PURIST 超纯水仪以纯水(EDI 纯水,RO 水或蒸馏水等)为进水,制备实验室超纯水。性能指标【注意事项】1.超纯水应当注意使用时间,应该“即取即用”。防止超纯水吸收外界的杂质导致水质下降。2.在合适的环境使用超纯水。环境中的VOC(挥发性有机物),细菌等都会影响细胞培养。3.培养细胞的容器应当洁净无污染。 4.配制离散细胞用的消化液和细胞洗涤液时,宜采用钙、镁离子含量低的缓冲液,缓冲液用水可以选用装配乐枫低镁型纯化柱的纯水机,避免钙、镁离子促使细胞凝聚作用的产生。不同细胞体外培养用水选择指南细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养的整个流程中实验用水贯穿每一个环节:1.取材:组织的清洗和灌注试剂用水,如PBS缓冲液、Hanks液的配制;2.原代培养:1640、DMEM等培养基用水,明胶等支持物的配制,添加药物、检测试剂的配制;3.传代培养:胰酶等消化液的配制;4.冻存:细胞冻存液DMSO的配制。细胞体外培养的细胞类型一般分为动物细胞培养、植物细胞培养和微生物培养,其中极难的是动物细胞的培养。动物细胞的培养除了需要无菌、温度、气体、渗透压、pH等基本条件,它还需要血清、支持物等特殊物质,其中原代细胞的培养是很难的。植物细胞的培养需要光照和激素,而且培养条件和培养技术比较成熟。微生物培养多为单细胞生物,微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多,蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等培养基即可满足微生物的营养要求,其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂,需要维持CO2等非氧惰性气体的浓度。由于细胞的种类和培养条件不同,对培养环境中杂质的含量要求也不同,那么配制培养基或试剂用水的选择大有讲究,不同细胞体外培养用水的指标如下:细胞体外培养用水选择细胞类型纯水等级电阻率(MΩcm)TOC(ppb)微生物(cfu/mL)内毒素(Eu/mL)核酸酶(pg/mL)动物细胞超纯水181010.002?ND植物细胞超纯水181010.002?ND微生物实验室Ⅱ级纯水10501NANA从上表可以看出,动物细胞和植物细胞的培养对去除内毒素和核酸酶的要求很高,用于这两类细胞培养可以选择商品化的细胞培养用水,另外去除纯水中的内毒素和核酸酶可以通过在纯水机的取水口安装终端滤器达到。各种细胞培养用水的比较细胞培养用水制备方法优点缺点商品化细胞培养用水纯水或超纯水进行多效蒸馏制成,严格控制热源、无菌、内毒素、pH、渗透压等指标水质标准程度化高,可保证实验结果的重复性价格昂贵DEPC水DEPC处理过并经高温高压灭菌的MiliQ纯水,无RNase、DNAase和proteinase。完全去除核酸酶价格昂贵,未去除内毒素终端滤器过滤超纯水采用0.22μm的过滤膜,可有效去除水中的热原(内毒素)、核酸酶、细菌等杂质。性价比高,供水量大对取水环境要求高乐枫 RephiBio 终端过滤器采用0.22μm带正电荷的双层尼龙66过滤膜,可制备符合生物领域应用要求的超纯水(无热原、无DNase、无RNase、无菌),纯水中内毒素含量低于0.001 Eu/mL,核酸酶的含量低于可检测范围,微生物的含量低于0.1 cfu/mL,可以满足动物细胞和植物细胞的需求。Tips: 通常情况下乐枫RephiBio 终端过滤器的更换周期为3 个月,以达到好的使用效果。
  • 运动发酵单胞菌运动亚种的特点与优势及培养方法!
    运动发酵单胞菌运动亚种的特点与优势及培养方法! 运动发酵单胞菌运动亚种是Zymomonas属的微生物,原产地为美国。G-,细胞具有圆端的短杆状,丛生鞭毛运动,单个或成对排列。主要用途为研究,具体用途为用于细菌发酵酒精的研究。 一、菌种简介平台编号:Bio-66722提供形式:冻干物拉丁属名:Zymomonas Mobilis Subsp. Mobilis中文名称:运动发酵单胞菌运动亚种属名:Zymomonas种名加词:mobilis subsp. mobilis其它中心编号:ATCC 31821来源历史:←北京工商大学化工学院(31821)收藏时间:2008.10.31原始编号:WAY资源归类编码:15131139101模式菌株:非模式菌株主要用途:研究具体用途:用于细菌发酵酒精的研究特征特性:G-,细胞具有圆端的短杆状,丛生鞭毛运动,单个或成对排列。利用葡萄糖、蔗糖或果糖产乙醇和CO2,利用山梨醇,不发酵麦芽糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖。不还原硝酸盐,不液化明胶,接触酶阳性。 生物危害程度:四类致病对象:无培养基:葡萄糖 100.0g,酵母膏 5.0g,(NH4)2SO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4?7H2O 0.5g,琼脂 20.0g,蒸馏水 1.0L, pH7.0。培养温度:30℃资源保藏类型:培养物保存方法:真空冷冻干燥法实物状态:有实物共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:研究;用于细菌发酵酒精的研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、产品特点1、菌种功能明确、品种稳定、应用 2、产品仅限用于科研本品芽孢含量高,稳定性好、耐高温和挤压 3、繁殖能力快、定植能力强、易存活、耐受低pH值环境 4、复活迅速,可在短期内成为优势种群 5、本品安全高效、无抗药性、不污染环境 6、对多数抗生素不敏感,可与低浓度抗革兰氏阴性菌抗生素同时使用。 三、产品优势1、产品质量稳定,是为科研和提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。2、国内首创封闭管包装,冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法,保证菌种的复苏质量。3、严格的质检程序,确保产品质量的稳定性。4、该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业,疾控中心、质检局、出入境、药检局等等,得到广泛好评。 四、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 五、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 干细胞分化成肝类器官并且进行串联培养
    干细胞分化成肝类器官并且进行串联培养方案1 实验目的 该 SOP 描述了由肝癌细胞系(HepaRG)和原代人肝星状细胞 (SteCs) 组成的肝球体的培养,形成肝脏类器官。此外,还描述了将肝脏类器官整合到 MOC 中,可以与其他类器官串联起来共培养。肝球体的生长大约需要 3 小时。从 384 孔微孔板中去除肝球体大约需要 2~5 小时,具体取决于所需的肝球体数量。将肝球体整合到 MOC 中至少需要 1 小时,这也取决于所需 MOC 的数量及所需的肝球体数量。应计算准备细胞培养的额外时间(约 1 周)以及 MOC 的交付时间。 本 SOP 深入描述了 Corning Spheroid Microplate 384 孔板(参考号 3830)的装载、这些肝球体的后续收集和计数以及它们与 MOC 的集成以进行进一步的动态培养。 所有描述的工作步骤都应在无菌操作条件下执行。应特别遵循正确洗手以及始终使用手套。 2 负责人 主要负责人:Alexandra Lorenz SOP 作者:Naomia Sisoli-Sambo、Juliane Hübner 与本 SOP 中描述的工作步骤的偏差必须立即报告给 Alexandra Lorenz 女士。如果更改获得批准,则必须相应地修改 SOP。 3 多器官芯片(MOC) 的无菌处理 为避免污染,必须遵守无菌实验室工作的通用准则。在将 MOC 放入生物安全柜之前,应先喷洒经批准的杀菌剂(例如 80% 乙醇)对其进行消毒,然后用无菌纸巾擦拭(建议使用浸泡在消毒剂中的市售纸巾)。必须特别注意引入的任何部件(注射器适配器、组织培养小室支架和泵连接端口)它们的连接和盖子。掉在地上的部件必须用无菌、高压灭菌的备件更换。因此,在运行 MOC 时,必须始终提供适当数量的无菌备件。 除离心、细胞计数和培养(37°C,5% CO2)外,所有工作步骤均应在超净工作台中进行。 4 所需材料 名称备注分化的HepaRG细胞8 mio cells/vial HPR116NS, Biopredic星状细胞 (SteCs)SC-5300 (Provitro)ScienCellSteCs培养基SC-5301 (Provitro)ScienCell80%乙醇消毒组织例如 Bode Chemie GmbH(德国)的 Bacillol AF 纸巾HepaRG 培养基Williams E基础培养基(500 ml) 不含酚红,含 2.24 g/L NaHCO3),例如PAN-Biotech P04-29510 或 HIMEDIA AL240-500ML 10% FCS (50 ml);5 x 10-5mol/L 氢化可的松半琥珀酸盐(500 µ l 来自 25 mg/ml 原液);5 µ g/ml 胰岛素(250 µ l 来自 10 mg/ml 储备液),例如PAN P07- 04300 2mM 谷氨酰胺(5 ml 来自 200 mM 原液);5 µ g/ml 硫酸庆大霉素(50 µ l 来自 50 mg/ml 原液);0.25 µ g/ml 两性霉素 B(500 µ l 来自 250 µ g/ml 原液);分化培养基含 2% DMSO 的 HepaRG 培养基Trypsin/EDTA 5x用于收集 HepaRGs0.25% 胰蛋白酶/2.21mM EDTA,例如康宁 25-053-CITrypsin/EDTA 1x用于收集 SteCs0.05% 胰蛋白酶/0.53mM EDTA,例如康宁 25-052-CIPBSw/o Ca 和 Mg,例如康宁 21-031-CVR Gilson Platemaster 96 道移液器用于 384 孔板的 Gilson Platemaster 适配器移液器吸头试剂容器灭菌Axygen RES-SW96-HP-SI 或 RES-SW12-HP-SI用于 15/50ml 管的离心机二氧化碳培养箱显微镜细胞计数装置泵控制单元TissUse 有限公司泵管2 毫米 x 1.6 毫米聚氨酯泵管,SMC(美国)扳手 1扳手尺寸 7 毫米 (ISO 272)扳手 2扳手尺寸 10 毫米 (ISO 3318)内六角扳手扳手尺寸 1.5 毫米 (ISO 4762)泵连接端口来自 SMC(美国)的 KJS02-M3 型,内六角,端口尺寸 M3微孔板384 孔黑色透明圆底超低吸附肝球体微孔板康宁 3830大口径提示康宁 TF-205-WB-R-S24孔超低吸附板康宁 3473细胞培养处理的培养瓶和培养皿例如康宁定轨振荡器PS-M3D Grant Instruments灰色和斜体字部分由 TissUse GmbH 提供 5 实验操作5.1 样品准备在肝球体形成前 5 天,根据实验需要解冻尽可能多的分化 HepaRG 细胞。一个循环需要 40 个肝球体(每个由 24,000 个 HepaRG 细胞和 1,000 个星状细胞组成)。每个接种满的 384 孔微孔板将提供大约 300 个肝球体。要完全接种满一个 384 孔微孔板,需要 921.6 万个分化的 HepaRG 细胞。由于一瓶分化的 HepaRG 细胞含有大约 800 万个活细胞,因此应计算每个接种满的 384 孔板需要两瓶。请注意:细胞是在完全融合时接种的,以避免去分化。因此,在接种过程可以丢掉一些细胞,因为准备有富余。 每个小瓶 500 µ l 分化的 HepaRG 细胞(订单号 116NS)应在 9.5 ml HepaRG 培养基中稀释,以将 DMSO 降低至0.5%的终浓度。以0.2 x 106/cm2的密度将活细胞计数后种到适当的细胞培养皿中(例如,800 万个细胞种到60 mm 2培养皿上,2个培养皿;或1600 万个细胞种到一个 T75 培养瓶上)。5-12 小时后必须在无菌条件下将培养基更换为 10 ml 分化培养基(2% DMSO)。随后,每两到三天将培养基更换为 10 ml 新鲜分化培养基。 SteCs 应在肝球体形成前约 2 天解冻并放入培养物中。一个装有 SteCs 的 T175 培养瓶将提供至少五个 384微孔板。首先需要预热SteCs 的培养基,一个小瓶约 1-2 x 106 SteCs 需用 9 ml 培养基,离心,重悬于 1 ml 新鲜培养基中,然后接种到含有 24 ml 温热的星状细胞培养基的 T175 细胞培养瓶中。第二天更换培养基以去除死细胞。 对于扩大培养,SteCs 可以生长到 70% 的融合,然后细胞开始增殖。无菌条件下的培养基更换必须每两到三天进行一次。不应使用通道数高于 P8 的 SteCs。 图 1 单层分化的 HepaRG 细胞和 HHSteC 的相差显微镜。 (A) HHSteC 在第 9 代的相差图像和(B) 在接种后 4 天分化的 HepaRG 细胞。比例尺 100 µ m。 5.2 细胞的收集准备 HepaRG 细胞进行收集,用 10 到 20 ml PBS 冲洗两次。洗涤后,使用胰蛋白酶/EDTA(5x;0.25% 胰蛋白酶/2.21mM EDTA;室温)从细胞培养瓶底部分离细胞。为此,将培养皿中的适量胰蛋白酶/EDTA 涂抹在细胞上,并在 37°C 下孵育 5 至 10 分钟。开始 HepaRGs 的胰蛋白酶消化后,使用胰蛋白酶/EDTA(1x;0.05% 胰蛋白酶/0.53 mM EDTA)收集星状细胞,并在 37°C 下孵育 5 至 10 分钟。通过这种方式,几乎可以同时收集细胞。用显微镜检查细胞的溶解情况并轻轻敲击细胞培养瓶的侧面以加速该过程并脱壁仍贴壁的细胞。一旦所有细胞从培养容器底部脱离,通过添加相同量的胰蛋白酶抑制剂或两倍量的培养基来抑制反应。将细胞溶液转移到 50 ml 离心管中, 然后用 10 ml PBS 冲洗培养容器两次,并将 PBS 添加到离心管中。细胞团块可以通过溶液的重复再悬浮来分散。此时可以合并来自多个培养容器的相同类型的细胞。 一旦进入溶液,将细胞以 300 x g 离心 5 分钟,然后吸出上清液并将细胞沉淀重悬于 1 至 2.5 ml 细胞培养基中。对 SteCs 和 HepaRG 细胞都使用 HepaRG 培养基(不含 DMSO)。用细胞计数跟踪细胞的再悬浮。请彻底混合细胞溶液(HepaRG 和 SteCs)。用 40 µ l HepaRG 培养基(1:5 稀释)稀释 10 µ l HepaRG 细胞溶液。彻底混合新溶液并用 10 µ l 台盼蓝工作溶液(1:2 稀释,总共 1:10 稀释)稀释 10 µ l HepaRG 溶液。彻底混匀 StesCs 细胞悬液,并用 10 µ l 台盼蓝工作溶液(1:2 稀释)稀释成 10 µ l 细胞悬液。在室温下孵育计数溶液 2 至 3 分钟。计数前充分混合。 将计数溶液加载到先前准备好的血细胞计数板中,并在计数室的四个大方格内对每种细胞类型的活细胞和死细胞进行计数。计算每个细胞类型的每个大方块的活细胞的算术平均值。 每毫升的细胞计数计算如下: 或者根据操作说明使用 SOL Counter (半导体式全自动细胞计数仪) 自动确定每毫升的细胞计数。 5.3 在384 孔微孔板中培养肝球体5.3.1 细胞悬液的制备每个肝球体需要 50 µ l 细胞悬液。这相当于每个微孔板 19.2 ml (50 µ l x 384)。由于移液过程中的波动,每板应制备至少 22 ml(最好是 23 ml)的细胞悬液。要在 50 µ l 的体积中生成具有 1,000个 SteCs 和 24,000 个HepaRGs(1:25 比例)的肝球体,细胞悬浮液的浓度应为 20,000个 SteCs/ml 和 480,000 HepaRGs/ml。 使用 (1) 中计算的每毫升细胞计数生成肝球体细胞悬液所需的收集 HepaRG 细胞和 SteCs 的确切体积,具体取决于所需的肝球体细胞悬液体积: HepaRG 和 SteCs 悬浮液的计算体积用于球状细胞悬浮液,添加培养基以达到所需的体积(例如,一个 384 孔球状板为 23 ml)。 5.3.2 将细胞种到 384 孔微孔板中移液器和所有其他设备需要用乙醇 (80%) 擦拭,并在使用前放置在无菌细胞培养工作台下。先前制备的肝球体细胞悬浮液应彻底混合,并将加载一个微孔板所需的大致量填充到试剂储液罐中(推荐储液罐:RES-SW12-HP-SI,Rillenreservoir)。使用 Gilson Platemaster 96 通道移液器和 384 孔板适配器将 50 µ l 细胞悬液种到 384 孔微孔板的每个孔中。 注意:- 将 50 µ l 细胞悬液直接放在每个孔的底部- 确保所有移液器吸头都牢固地推到 96 通道移液器上。- 对于没有气泡的精确移液,推荐使用反向移液技术。- 为确保细胞在悬浮液中均匀分布,在每次移液步骤前轻轻摇动悬液管。 应将接种满的微孔板短暂离心(250 g,1-2 分钟),以确保孔壁上没有细胞悬浮液,并将细胞收集在孔底。肝球体在 37 °C 和 5% CO2 条件下连续 3 天。图 2 肝球体形成的光学显微镜。 HepaRG 细胞和 SteCs 在肝球体形成的第 1 天和(B)第 3 天的 384 孔超低吸附板(A)的孔中。比例尺 100 µ m。5.4 从 384 孔微孔板中取出肝球体为了收集肝球体,将 384 孔微孔板放在层流罩下。使用 200 µ l 移液器和大口径移液器吸头,小心地将肝球体从 384 孔微孔板中取出。可以在一个移液器吸头中收集多个肝球体。在平底 24 孔低吸附板的每个孔中收集 40 个肝球体。计数肝球体,并将 40 个肝球体放入每个孔中。可用深色背景(例如黑色铝箔纸)更容易看到 24 孔低吸附板中的肝球体。将 40 个肝球体转移到一个孔中后,小心取出旧培养基并加入约 1.5 ml 新鲜 HepaRG 培养基。之后,在显微镜下对每个孔中的肝球体进行计数。丢弃任何看起来太小或聚合不良的肝球体,类似于薄层而不是肝球体。 注意:用移液器吸头收集肝球体时不要吸入任何空气。肝球体应始终悬浮在培养基中。空气的吸入会导致肝球体卡在移液器尖端。应该习惯于在拿起肝球体之前用培养基润湿移液器尖端。此外,使用移液器的时候使用超过所需的程量。这两点都可以降低肝球体粘附在内移液器吸头表面或肝球体漂浮在培养基表面上的风险。 为避免融合并进一步提高肝球体的圆度,将 24 孔低吸附板置于振荡器上,直到 MOC 实验开始(12 至 48 小时)。为此,用乙醇彻底消毒振荡器,并将其放入培养箱(37 °C;5 % CO2)中。将超低吸附板放在振荡器上,使用以下设置并确保培养基不会因摇晃而溢出: 轨道式往复式Vibrio循环式模式4030°5°00时间25OFF5ON 5.5 将肝球体转移到多器官芯片平台(MOC)在将肝球体转移到 MOC 之前,请确保 MOC 已做好充分准备(充满培养基、正确拧入、清洁、蠕动泵的功能已验证;有关详细信息,请参阅 SOP 1 或 6)。拧下所需培养小室的盖子,并通过将板保持在倾斜位置来收集超低吸附板孔底部边缘的肝球体。可用深色背景(例如黑色铝箔纸)更容易看到 24 孔低吸附板中的肝球体。 使用大口径移液器吸头吸取肝球体。握住移液器,尖端朝下,使肝球体沉淀在尖端。然后通过将移液器尖端放入培养基中,让肝球体沉入所需培养小室的底部。尝试在培养小室加入尽可能少的培养基。转移所有肝球体后,将盖子拧回培养小室上。 40 个肝球体用于 MOC 的一个循环(仅加载一个培养小室)。 图 3 2-OC(二联芯片) 培养小室中的 40 个肝球体。 (A) 融合1天的肝球体。 (B)融合14天后的肝球体。 5.6 MOC中的培养基更换要更换装有肝球体的培养小室中的培养基,请拧下相应培养小室的盖子。使用标准移液器吸头吸出所需量的旧培养基,并添加所需量的新鲜培养基(100% 培养基更换是可以的)。将盖子拧回培养小室上。 请注意以下事项:- 尽管肝球体应生长到培养小室的底部,但在去除旧培养基时,请确保不要绘制任何肝球体。如有必要,检查移液器吸头。- 去除旧培养基时,请勿将任何培养基从 MOC 的微流道中吸出,以免在流路内形成气泡。- 通过移液将其移到插入壁上,缓慢而小心地添加新鲜培养基,以避免插入可能干扰肝球体的湍流。- 用新鲜培养基填充培养小室时,不要超过培养小室内盖的螺纹。
  • 关于《GB 4789.28 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》等34项食品安全国家标准(征求意见稿)意见的函
    本次发布的34项标准中,包含微生物检验方法与规程、理化检验方法、生产经营规范和食品相关产品四个大类。具体信息如下:食品相关产品生产经营规范微生物检验方法与规程理化检验方法与规程1食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定理化检验方法与规程2食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定理化检验方法与规程3食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定理化检验方法与规程4食品安全国家标准 食品中膳食纤维的测定理化检验方法与规程5食品安全国家标准 食品中维生素A和E的测定理化检验方法与规程6食品安全国家标准 食品中维生素D的测定理化检验方法与规程7食品安全国家标准 化学分析方法验证通则理化检验方法与规程8食品安全国家标准 食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求微生物检验方法与规程9食品安全国家标准 食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定理化检验方法与规程10食品安全国家标准 食品中氯酸盐和高氯酸盐的测定理化检验方法与规程10食品安全国家标准 食品中N-亚硝胺类化合物的测定理化检验方法与规程12食品安全国家标准 食品中钼的测定理化检验方法与规程13食品安全国家标准 食品中铬的测定理化检验方法与规程14食品安全国家标准 食品中镉的测定理化检验方法与规程15食品安全国家标准 食品接触材料及制品 邻苯二甲酸酯的测定和迁移量的测定理化检验方法与规程16食品安全国家标准 食品中过氧化值的测定理化检验方法与规程17食品安全国家标准 酒和食用酒精中乙醇浓度的测定理化检验方法与规程18食品安全国家标准 食品接触材料及制品 多元素的测定和多元素迁移量的测定理化检验方法与规程19食品安全国家标准 食品接触材料及制品 9种抗氧化剂迁移量的测定理化检验方法与规程20食品安全国家标准 食品中淀粉的测定理化检验方法与规程21食品安全国家标准 食品接触材料及制品 纸、纸板及纸制品中荧光性物质的测定理化检验方法与规程22食品安全国家标准 食品接触材料及制品 异噻唑啉酮类化合物迁移量的测定理化检验方法与规程23食品安全国家标准 食品接触材料及制品方法验证通则理化检验方法与规程24食品安全国家标准 食品中酪蛋白磷酸肽的测定理化检验方法与规程下面,与大家一起对《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》征求意见稿编制说明进行梳理分析:本标准于2018年立项(项目编号spaq-2018-061),项目承担单位为中国食品药品检定研究院和厦门海关技术中心中心。2018年12月正式启动,2019年2月28日召开食品安全国家标准项目启动会,2019年7月12日至2020年10月19日在广泛调查研究和讨论的基础上,起草了本标准,并邀请10家以上专业技术机构进行方法标准实验室间验证工作,2020年11月30日形成草案,2020年12月1日至2020年12月25日进行行业内征求意见,期间未收到重大分歧意见,2021年2月22日形成《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》草稿。2021年6月24日经第二届食品安全国家标准审评委员会微生物检验方法与规程专业委员会第六次会议审查通过。具体修订情况如下:1.检验方法的整合: 现行国家标准 GB 4789.28-2013 存在两套验证的方法,一套方法针对生产商及实验室自制的培养基和试剂(附录 D),一套方法针对实验室使用商品化培养基和试剂(附录 E)。经研讨,确定该标准应作为实验室验收培养基的质控标准,明确了标准的使用对象。附录E 的划线半定量方法,操作上有很大的人为因素影响评价结果,同时由于附录D 包含的培养基评价方法更为全面,经研讨,删除了附录E,保留附录D 评价方法。即该标准为实验室使用商品化培养基和试剂评价标准,检验方法参照附录D。 2.新增了参比培养基的质控要求GB 4789.28-2013 规定用参比培养基为标尺对待测培养基的质量进行评价,但在标准未见参比培养基的质控方法和评价标准。经过咨询行业和专家意见,目前检验机构和生产企业随机选用培养基作为参比培养基进行培养基验证,没有质控标准可供执行。工作组在本次标准修订中,通过征求专家意见,结合培养 基的检验范围增加了参比培养基的质控菌株和评价方法。 3.增加了国内菌株:GB 4789.28-2013 中包含 21 株国外菌株,菌株购买时间长花费多,且随着生物制品的限制,国外菌株购买难度加剧。本次修订针对以上问题,选择国内CMCC和CICC菌种库 169 株菌和国外 21 株菌株进行 比对验证,经过13家验证机构验证筛选出21株国内菌株替代国外菌株。本次修订为确保实验室菌种替换 过渡,同时保留了ATCC菌种,原有菌种可以继续使用,但当两种菌种检测出现两种不同结果时,以国内2 菌株结果为最终判定依据。4.新增28套培养基评价方法针对 GB4789.28-2013 版未涵盖所有GB4789系列标准检验用培养基的情况,新增了28套培养基的评价方法。
  • 中国认证认可协会立项《食品中环氧乙烷及2-氯乙醇残留量的测定》等10项团体标准
    各有关单位:根据《中国认证认可协会团体标准管理办法》(以下简称“办法”)规定,经专家评审,中国认证认可协会决定对《环境、社会及治理(ESG)报告核查机构要求》等10 项团体标准项目予以立项(详见附件)。请各项目承担单位按照《办法》要求,及时组建标准起草组。标准起草组应按照市场化原则自筹项目工作经费,充分吸收有关行业学协会、认证认可检验检测机构、科研院所和相关企业等标准利益相关方广泛参与,并按照评审专家意见和建议完成工作。请协会会员单位积极参与有关团体标准制修订工作,共同推动认证认可检验检测等合格评定领域创新发展。附件:2024 年第二批团体标准制修订计划项目.pdf中国认证认可协会2024 年8 月5 日相关标准如下:环境、社会及治理(ESG)报告核查机构要求产品碳足迹审定与核查机构要求产品碳足迹核查方案制定指南鱼胶(花胶)及其制品中胶原蛋白的测定食品中环氧乙烷及2-氯乙醇残留量的测定食品中酒石酸的测定
  • 阿拉丁细胞培养总动员,一起快乐实验吧
    阿拉丁细胞培养总动员,一起快乐实验吧 Aladdin&i-Quip的优势细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术。细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的 技术。 细胞培养泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础科学之一。 阿拉丁为您提供全面的细胞培养技术,现货充足的各种培养所需试剂。芯硅谷作为阿拉丁的耗材品牌,为细胞培养实验准备了各系耗材,包括:细胞培养板,深孔板,各容积培养皿、培养管等。阿拉丁-芯硅谷是您细胞培养实验的首选。 产品列表&mdash &mdash 细胞培养专用试剂货号品名规格CAS号包装A103539抗坏血酸 用于细胞培养50-81-7500gA103540抗坏血酸 用于植物细胞培养50-81-7100g,500gP110425L-苯丙氨酸 非动物源,EP, JP, USP ;用于细胞培养,98.5 to 10163-91-225g,100g,500gT108222L-苏氨酸JP, USP ;用于细胞培养,99.0-101.0%72-19-525g,100gI115775L-异亮氨酸EP, JP, USP73-32-525g,100g,500gE103809乙醇胺 99%,细胞培养专用141-43-5100ml,500mlT100896噻唑蓝(MTT) 98%298-93-11g,5g,25g,250mgC114435矮壮素 植物细胞培养级,&ge 99%(HPLC)999-81-55g,25gG115554D-半乳糖胺盐酸盐 for cell culture,99%1772-03-81g,5g,250mgC111538氯化钠 用于细胞和昆虫细胞培养,&ge 99.5% (T)7647-14-52.5kg,1kg,500gP100088亚碲酸钾 99.5%7790-58-125g,100gC139524干酪素 suitable for insect cell culture9000-71-9500gC110500干酪素 technical grade9000-71-92.5kg,500g,500mlH104201肝素钠 185 USP units/mg9041-08-11g,5gH123383肝素钠 &ge 180 USP units/mg9041-08-1100KU,250KU,500KU,1000KUB111605硼酸 用于细胞培养和植物细胞培养, &ge 99.5%10043-35-3500gM112543氯化锰,四水 昆虫细胞培养级,&ge 99%13446-34-9100gS104205水合胆酸钠 98%206986-87-05g,25g,100gS104206水合胆酸钠 for cell culture,&ge 99.0%206986-87-025g,100g产品列表&mdash &mdash 细胞培养专用耗材货号包装品名详细参数B1559-03100EA三角形细胞涂布棒三角推边宽度:30mm 全长:208mm 颜色:蓝色 材料:PP 是否消毒:是 包装类型:热封袋B1559-05100EA三角形细胞涂布棒三角推边宽度:60mm 全长:235mm 颜色:蓝色 材料:PP 是否消毒:是 包装类型:热封袋C1623-0250EA6孔细胞培养板孔数:6 孔径:35mm 生长面积:9.61cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-0450EA24孔细胞培养板孔数:24 孔径:16mm 生长面积:1.91cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-0650EA96孔细胞培养板孔数:96 孔径:7mm 生长面积:0.35cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-1250EA6孔细胞培养板,TC处理孔数:6 孔径:35mm 生长面积:9.61cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1650EA12孔细胞培养板,TC处理孔数:12 孔径:22mm 生长面积:3.87cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1750EA12孔细胞培养板孔数:12 孔径:22mm 生长面积:3.87cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-1850EA24孔细胞培养板,TC处理孔数:24 孔径:16mm 生长面积:1.91cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1950EA96孔细胞培养板,TC处理孔数:96 孔径:7mm 生长面积:0.35cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C4219-0120EA细胞刮刀手柄长度:250mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C4219-0220EA细胞刮刀手柄长度:250mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C4219-0320EA细胞刮刀手柄长度:400mm 刀片长度:18mm 是否灭菌:是C4219-0420EA细胞刮刀手柄长度:400mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C6057-0150EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:蓝色 尺寸:40&mu m 是否灭菌:是C6057-0250EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:白色 尺寸:70&mu m 是否灭菌:是C6057-0350EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:黄色 尺寸:100&mu m 是否灭菌:是D3815-0110EA384孔深孔板,方形孔类型:普通型 材质:聚丙烯 容积:120&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否D3815-0310EA384孔深孔板,方形孔类型:低吸附型 材质:聚丙烯 容积:120&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否D3815-0510EA384孔深孔板,方形孔类型:普通型 材质:聚丙烯 容积:190&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否L1557-01100EAL型涂布棒长度:156× 38mm 颜色:蓝色 材质:ABS 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋M4939-011EA覆四氟涂层微量取样匙类型:海曼型 长度:150mmP4184-0160EA60mm细胞培养皿尺寸:60× 15mm 生长面积:26.17cm2 TC处理:否 灭菌:伽马 描述:普通型适合悬浮培养P4184-0260EA60mm细胞培养皿,TC处理尺寸:60× 15mm 生长面积:26.17cm2 TC处理:是 灭菌:伽马 描述:标准型适合贴壁培养P4184-0360EA100mm细胞培养皿尺寸:100× 20mm 生长面积:55.65cm2 TC处理:否 灭菌:伽马 描述:普通型适合悬浮培养P4184-0460EA100mm细胞培养皿,TC处理尺寸:100× 20mm 生长面积:55.65cm2 TC处理:是 灭菌:伽马 描述:标准型适合贴壁培养P4940-011EA外覆PTFE涂层取样匙,双平头类别:双平头,圆形平头和锥形平头 长度:200mm 刀片尺寸(最宽的部位):约44× 6mmP4941-011EA外覆PTFE涂层取样匙,平头和勺头类别:平头和勺头 长度:225mm 直径:4.7mmR1596-04500EAPP培养管,无边外径× 高:12× 75mm 容量:5ml 材质:PP 类型:无刻度 是否消毒:否 包装类型:热封袋R1596-05500EAPS培养管,无边外径× 高:13× 75mm 容量:5ml 材质:PS 类型:无刻度 是否消毒:否 包装类型:热封袋R1596-11250EAPS培养管,无边外径× 高:16× 100mm 容量:8ml 材质:PS 类型:无刻度 是否消毒:否 包装:热封袋T1558-01500EAT型细胞涂布棒,已灭菌长度:140mm 颜色:蓝色 材料:ABS 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋D1554-011000EA普通型接种环类型:1&mu L环形 材料:软性PP 全长:200mm 环直径:30mm 颜色:蓝色 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋更多产品请访问阿拉丁官网www.aladdin-e.com
  • 肿瘤治疗:利用多种测序技术系统性评估体外类器官培养体系
    结直肠癌是最多发的癌症之一,病死率高居全球第二。目前,利用患者肿瘤组织构建的类器官模型已成为研究肿瘤发生分子机制的常用研究手段。多种肿瘤类器官已被成功构建,包括结直肠癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、胃癌等。然而,这些研究大部分仅在大量细胞系综平均的水平评估了患者组织衍生的类器官的各种分子特征,如基因突变、基因组拷贝数变异以及基因表达等变化,并未在单细胞水平进行评估,从而无法系统地评估构建的类器官个体内部的肿瘤细胞异质性情况,特别是由于构建类器官的成功率常常不是很高,同时得到同一个患者的体内肿瘤单细胞组学数据以及在体外建成类器官后的配对单细胞组学数据非常困难。为了系统地评估结直肠癌类器官培养系统,解析类器官与对应的体内肿瘤上皮细胞之间的异同以及不同培养体系对类器官基因表达特征的影响,北京大学生物医学前沿创新中心(BIOPIC)汤富酬教授团队与北京大学第三医院普通外科付卫教授团队合作,对来自6名结直肠癌患者的体内肿瘤组织和癌旁正常组织,以及对它们进行体外培养建立的相应的类器官进行了高精度单细胞转录组测序,并结合全基因组甲基化测序、全基因组测序、全外显子组测序以及靶位点Sanger测序等,对两种常见结直肠类器官培养体系从转录组、基因组和DNA甲基化组三个层面进行了系统的比较和评估(图1)。该研究成果于2022年4月28日以“Systematic evaluation of colorectal cancer organoid system by single-cell RNA-Seq analysis”为题在线发表在 Genome Biology 上。图1 实验设计方案示意图该研究有以下3个主要发现:1、肿瘤组织来源的类器官能准确反映对应体内肿瘤上皮细胞(癌细胞)在基因表达、基因突变以及DNA甲基化等方面的关键特征。通过探索体内肿瘤特异性基因表达模式,该研究发现肿瘤来源的类器官高表达体内肿瘤上皮细胞(癌细胞)特异性表达的基因。并且,肿瘤组织来源的类器官也维持了体内肿瘤上皮细胞特异性的基因调控网络特征。另外,通过对全基因组(WGS)、全外显子组(WES)以及DNA甲基化组(PBAT)数据进行分析,该研究发现肿瘤类器官能非常好地维持体内肿瘤上皮细胞(癌细胞)在基因突变和DNA甲基化等方面的关键特征(图2)。这表明现有培养体系中的结直肠癌肿瘤类器官非常好地维持了对应患者体内癌细胞的关键生物学特征,因而使用肿瘤类器官筛选的癌症治疗候选药物应该对对应患者体内的癌细胞也会有类似的杀伤效果。现有的肿瘤类器官是肿瘤杀伤药物筛选的优秀平台。图2 体内外肿瘤细胞和正常肠上皮细胞的基因组拷贝数变异、DNA甲基化以及基因突变的比较2、癌旁正常组织来源的类器官在转录组水平上表现出部分肿瘤样特征,但保持正常的基因组和全局DNA甲基化组特征。首先该研究鉴定了体内肿瘤上皮细胞和癌旁正常肠上皮细胞的差异表达基因,并研究了这些差异基因在体外肿瘤类器官和正常肠上皮类器官的表达情况。结果显示,体外正常肠上皮类器官和肿瘤类器官均高表达体内肿瘤上皮细胞特异性表达的基因。为了进一步验证此结果,该研究对体内组织和体外类器官进行了肿瘤特异性表达基因CEACAM6的免疫荧光染色。与单细胞转录组数据一致,CEACAM6仅在体内肿瘤上皮细胞中高表达,而在体内癌旁正常肠上皮细胞中则不表达。然而,体外培养的肿瘤类器官和正常肠上皮类器官均高表达CEACAM6蛋白,此结果与单细胞转录组测序结果一致(图3)。该研究的癌旁正常组织都取自距离肿瘤组织边缘至少10厘米以外的区域,其正常组织内部混杂大量肿瘤细胞的可能性非常低,但为了进一步排除正常组织类器官有可能是混杂在癌旁正常组织中的肿瘤细胞体外扩增而导致这一现象,该研究进一步探究了体外肿瘤类器官和正常肠上皮类器官的基因突变和基因组拷贝数变异情况。结果显示只有肿瘤类器官呈现与对应患者体内肿瘤细胞相似的基因组拷贝数变异和基因突变,而正常肠上皮类器官的基因组与体内正常肠上皮细胞一致,没有肿瘤细胞特异性的基因突变和基因组拷贝数变异,从而排除了正常组织类器官起源于癌旁正常组织中混杂部分肿瘤上皮细胞的可能性。这些数据显示,在转录组和蛋白水平上,肿瘤上皮类器官和正常肠上皮类器官都表现出肿瘤样特征。这表明现有的培养体系使得正常肠上皮类器官也具有部分肿瘤细胞特征,因而用同一个患者得到的肿瘤类器官和癌旁正常肠上皮类器官进行配对药物筛选以筛选出特异性对肿瘤细胞有选择性杀伤效果(杀伤肿瘤类器官,但是不杀伤正常肠上皮类器官)的候选药物目前是无法实现的。图3 CEACAM6免疫染色荧光结果3、条件培养基在肿瘤类器官的长期培养方面优于化学成分确定培养基(分子培养基)。首先,该研究通过MKI67的表达情况对不同培养基中的细胞增殖情况进行了评估(图4)。在化学成分确定培养基(分子培养基)中,正常组织来源的类器官相比肿瘤来源的类器官具有更快的细胞增殖速度。而在条件培养基中,正常组织来源的类器官和肿瘤来源的类器官的细胞增殖速度相当。这说明化学成分确定培养基(分子培养基)更有利于正常肠上皮细胞的生长,而条件培养基对正常肠上皮细胞和肿瘤上皮细胞(癌细胞)的生长没有明显偏好性。而这一特点通过线粒体突变在不同培养基中培养的癌细胞的谱系追踪得到了进一步验证。图4 体内组织以及体外两种培养基中的类器官细胞表达MKI67的比例此外,该研究结果表明,条件培养基比化学成分确定培养基(分子培养基)更能真实地反映对应体内肿瘤上皮细胞(癌细胞)与正常肠上皮细胞的差异。与体内相应的癌细胞相似,在条件培养基中培养的肿瘤类器官呈现肠上皮干祖细胞标志基因OLFM4高表达和肠上皮分化成熟标志基因CA2低表达的特征,正常组织类器官呈现相反的OLFM4低表达和CA2高表达的模式(图5)。然而,在化学成分确定培养基(分子培养基)中,无论是正常组织类器官还是肿瘤类器官都具有相似的OLFM4高表达和CA2低表达的模式,无法准确模拟对应体内不同类型上皮细胞基因表达的不同特征。这表明现有的两种培养体系对维持对应体内肿瘤细胞关键生物学特征都有效,但是条件培养基要优于化学成分确定培养基(分子培养基),因而条件培养基是基于类器官的肿瘤发生分子机制研究和药物筛选的首选培养体系。图5 不同条件下的肿瘤细胞和正常上皮细胞的CA2和OLFM4的表达综上所述,该项研究对结直肠癌体内肿瘤组织、体内癌旁正常组织,以及配对的在两种不同培养体系中建立的肿瘤类器官、癌旁正常组织类器官进行了高精度单细胞转录组分析,并结合全基因组测序、全外显子组测序、DNA甲基化组测序以及靶位点Sanger测序的结果,系统地评估了类器官模型在研究结直肠癌肿瘤发生分子机制上的可靠性和局限性。该研究发现,现有的培养体系中的肿瘤类器官非常好地维持了对应结直肠癌患者体内癌细胞的关键生物学特征,现有的肿瘤类器官是肿瘤发生分子机制研究以及肿瘤杀伤药物筛选的优越平台。现有的培养体系使得正常肠上皮类器官也具有部分肿瘤细胞特征,因而无法用同一个患者得到的肿瘤类器官和正常肠上皮类器官进行配对筛选,以便得到对肿瘤细胞有选择性杀伤效果的候选药物。现有的两种培养体系对维持结直肠癌肿瘤细胞关键生物学特征都有效,但是条件培养基要优于化学成分确定培养基(分子培养基),因而条件培养基是结直肠癌肿瘤发生分子机制研究和药物筛选的首选培养体系。
  • 干货分享~卡巴氧、喹乙醇及代谢物前处理方法
    喹噁啉类药物的危害及检测目的喹噁啉类药物是一类化学合成类的抗菌促生长剂,它们的基本结构是喹噁啉-1,4-二氧化物,即喹噁啉环。主要包括喹乙醇、卡巴氧、喹喔啉、喹赛多、喹多辛、西诺喹多、德那资多(肼多司)、乙酰甲喹和喹烯酮等药物。研究表明,喹噁啉类药物对DNA致突变、致损伤,破坏细胞抗氧化作用系统,可以引起细胞自由基的产生,导致细胞DNA发生氧化性损伤,还会引起细胞周期阻滞和细胞凋亡。传统喹噁啉类药物喹乙醇和卡巴氧,由于其对人体危害最/大,世界各国和国际组织对这两种兽药制定了严格的残留限量规定。欧盟1998年发文禁止喹乙醇和卡巴氧在食品动物生产中作为促生长添加剂使用。2020年我国生效实施的GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药zui/大残留限量》中规定了猪肌肉和猪肝脏组织中喹乙醇残留标志物的zui/大残留限量。同年我国农业农村部公告第250号规定卡巴氧及其盐、酯为食品动物中禁止使用的药品。但是,这些药物在生产实践中被大量地非法使用或滥用,其残留对消费者健康造成了巨大的潜在威胁。喹乙醇和卡巴氧进入动物体内后,能够在短时间内代谢成十多种产物,研究表明,3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)是喹乙醇在动物体内代谢后的主要产物,喹噁啉-2-羧酸(QCA)是卡巴氧在动物体内代谢后的主要产物,且该产物在动物体内滞留时间较长,因其含量与总残留关系稳定,所以将MQCA定为喹乙醇在动物体内代谢的残留标示物,将QCA定为卡巴氧在动物体内代谢的残留标示物。本文阐述了如何将卡巴氧、喹乙醇及代谢物从样品基质中分离提取出来,并经过净化后,转化成液质联用仪可以检测的形式。以提取、净化为重点,依据国标GB/T 20746-2006,为检测人员和相关领域研究人员提供一定的参考。检测项目:卡巴氧、脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸(QCA)、3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)应用范围:牛、猪肝脏和肌肉液相色谱-串联质谱法方法原理:卡巴氧:用乙腈+乙酸乙酯(1+1)溶液提取肌肉和肝脏组织中的卡巴氧,提取液经正己烷脱脂后,旋转蒸发至干,残渣用甲酸(0.1 %)+甲醇(19+1)溶液溶解。样液供液质测定,内标法定量。脱氧卡巴氧、QCA、MQCA:用甲酸溶液消化试样,使组织中天然存在的酶失活,然后加入蛋白酶水解,盐酸酸化,离心过滤后,过Oasis MAX固相萃取柱或相当者净化。先用二氯甲烷洗脱脱氧卡巴氧,再用2 %甲酸乙酸乙酯溶液洗脱QCA和MQCA,氮气吹干洗脱液,残渣用甲酸+甲醇(19+1)溶液溶解,样液供液质测定,内标法定量。 前处理仪器:固相萃取装置;氮气浓缩仪;液体混匀器;分析天平(感量0.1 mg和0.01 g);真空泵;均质器;移液器(10 μL~100 μL和100 μL~1000 μL);聚丙烯离心管(50 mL具塞);pH计(测量精度±0.02 pH单位);低温离心机(可制冷到4 ℃);玻璃离心管(15 mL)。检测仪器:HPLC-MS/MS+ESI源试样制备与保存将牛、猪肝脏和肌肉组织样品充分搅碎,均质,分出0.5 kg作为试样,置于清洁样品容器中,密封,并做上标记。将制备好的试样于-18 ℃以下保存。前处理方法1. 卡巴氧的前处理步骤称取5 g试样(精确至0.01 g),置于50 mL聚丙烯离心管中,加入5 g中性氧化铝,加入25 mL乙腈+乙酸乙酯(1+1)溶液,于液体混匀器上充分混合5 min,以5000 r/min离心5 min,将上清液移取至另一干净的50 mL离心管,加入10 mL正己烷到管中,振荡2 min,以5000 r/min离心5 min,弃去上层正己烷,将下层清液转移至150 mL鸡心瓶中。加入25 mL乙腈+乙酸乙酯(1+1)溶液,重复提取一次,正己烷除脂后合并两次提取液于同一鸡心瓶中,加入一定量的喹噁啉-2-羧酸-d4(QCA-d4)标准溶液,使其浓度为2.0 ng/g,40 ℃水浴减压旋转蒸发至干。准确加入1.0 mL 0.1 %甲酸-甲醇(19+1)溶液溶解残渣,过0.2 μm滤膜后,供液质测定。2. 脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸、3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的前处理步骤称取5 g试样(精确至0.01 g),置于50 mL聚丙烯离心管中,加入10 mL 0.6 %甲酸溶液,混匀后,置于(47±3)℃振荡水浴中振摇1 h;先加入3 mL1.0 mol/L Tris溶液混匀,再加入0.3 mL 0.01 g/mL蛋白酶水溶液,充分混匀后,置于(47±3)℃振荡水浴中酶解16 h~18 h。加入20 mL 0.3 mol/L盐酸溶液,振荡5 min,在10 ℃以5000 r/min离心15 min,上清液过滤。将滤液移入Oasis MAX固相萃取柱(3 mL甲醇和3 mL水活化)中,待样液全部流出后,用30 mL 0.05 mol/L乙酸钠-甲醇(19+1)溶液淋洗固相萃取柱,真空抽干15 min。在一支干净的玻璃管内加入一定量的喹噁啉-2-羧酸-d4(QCA-d4)标准溶液,使其浓度为2.0 ng/g,再用4×3 mL二氯甲烷将脱氧卡巴氧洗脱至管内,在45 ℃用氮气浓缩仪吹干。固相萃取柱再用3×3 mL甲醇、3 mL水、3×3 mL 0.1 mol/L盐酸溶液和2×3 mL甲醇-水(1+4)溶液分别淋洗,真空抽干15 min,然后用2 mL乙酸乙酯再淋洗固相萃取柱,弃去全部淋出液,最后用3 mL 2 %甲酸乙酸乙酯溶液洗脱喹噁啉-2-羧酸(QCA)和3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)到上述吹干的试管中,在45 ℃用氮气浓缩仪吹干。准确加入1.0 mL 0.1 %甲酸-甲醇(19+1)溶液溶解残渣,过0.2 μm滤膜后,供液质测定。注意事项1.标准物质分别用甲醇配制成100 mg/L的标准储备液,其中卡巴氧用二甲基甲酰胺配成100 mg/L的标准储备液,在-18 ℃保存,可使用1年。2.本方法使用了喹噁啉-2-羧酸-d4(QCA-d4)同位素内标进行回收率的校正,也可以配合使用各个化合物相对应的同位素内标。3.本方法各个化合物的提取净化方法不同,原药用乙腈+乙酸乙酯直接提取,代谢物需要酶解后过SPE小柱净化,根据检测需要选择方法,具体方法见流程图。4.MAX固相萃取柱用于酸性化合物的净化,过程是“碱上样、酸洗脱”。淋洗后一定抽干小柱,防止水相进入洗脱液。5.氮气浓缩过程中,吹至近干潮湿状态,定容后采取涡旋加超声的方式复溶,可以提高回收率。6.该方法化合物检出限为0.5 μg/kg,内标添加量为2.0 μg/kg。参考文献GB/T 20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱―串联质谱法图1 卡巴氧残留量测定的前处理流程图图2 脱氧卡巴氧残留量测定的前处理流程图图3 QCA和MQCA残留量测定的前处理流程图坛墨质检标准品推荐喹噁啉类药物信息表(标准溶液)坛墨质检标准品推荐喹噁啉类药物信息表(纯品)本文版权归坛墨质检-标准物质中心所有
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  • 国际首次!二氧化碳一步转化为乙醇
    记者16日从江南大学获悉,该校化学与材料工程学院刘小浩教授团队创新性地采用结构封装法,构筑了纳米“蓄水”膜反应器,在国际上首次实现了二氧化碳在温和条件下一步近100%转化为乙醇。相关研究成果发表于《美国化学会催化》。江南大学供图近年来,科学家已经开发了多种途径将二氧化碳转化为乙醇,比如光催化、电催化以及间歇釜热催化。相较于上述技术途径,在连续流固定床反应器中,由于便捷的物质流和能量流管理,更容易实现工业应用。但目前的技术无法实现可控精准增碳定向生成乙醇,易产生大量低价值的副产物。江南大学供图该科研团队构筑的纳米“蓄水”膜反应器,合成的催化剂结构类似于一个胶囊,内部封装了二氧化铈载体分散的双钯催化剂。刘小浩介绍,胶囊的壳层具有高选择性,疏水修饰后,保证内部生成的水富集而产物乙醇可以溢出。其中的水环境可以稳定双钯活性位点,该催化剂能够实现温和条件下(3MPa,240℃)二氧化碳近100%选择性高效稳定转化为乙醇。值得一提的是,这项研究构筑的双钯活性位点具有独特的几何和电子结构,可实现二氧化碳加氢定向生成单一高价值产物乙醇。“催化剂合成工艺和催化反应路线简单,有大规模工业化应用前景。”刘小浩表示。
  • ibidi解决方案|3D细胞培养与类器官模型的构建
    01、3D矩阵中的单细胞    在许多情况下,3D环境比2D细胞培养物更接近于体内情况。单细胞可以在3D凝胶中培养和成像,以分析各种生物学问题,例如细胞变形、迁移、管形成或ECM降解。除了只有一种细胞类型的培养物外,还可以通过在同一容器中共同培养两种不同细胞类型(例如癌症细胞和成纤维细胞)来研究它们的侵袭行为。    为了从凝胶基质中分离细胞,基质可以被酶降解(例如,胶原蛋白被胶原酶降解)。之后,细胞可以在新的凝胶基质中扩增,或者进一步处理以分离DNA、RNA或蛋白质。      在µ -Slide Chemotaxis中的I型胶原蛋白、鼠尾层中表达LifeAct的HT-1080细胞(绿色)    ibidi解决方案      ibidi I型胶原蛋白是一种非胃蛋白酶化的天然胶原蛋白,用于在凝胶基质中模拟生物ECM。其快速凝胶有助于在3D凝胶中实现最佳的细胞分布。      在µ -Slide III 3D Perfusion中,单个细胞嵌入3D矩阵中。特殊的通道几何形状允许以低流速进行灌流(例如,当使用ibidi Pump System泵系统/流体剪切力系统时)。与静态培养不同,灌流可确保最佳的氧气和营养供应。这种设置使得长达数周的长期培养成为可能。此外,超薄的盖玻片底部可实现高分辨率成像。      µ -Slide 15 Well 3D和µ -Plate 96 Well 3D可以在3D凝胶上或内部对单细胞和共培养物进行简单、经济高效的培养和显微镜检查。凝胶层直接连接到上方的培养基储存器,通过扩散实现快速、轻松的培养基交换。对于特殊应用,ibidi还可以提供带有1.5H玻璃底部的µ -Slide 15孔3D玻璃底细胞培养载玻片。      μ -Slide I Luer 3D设计用于在具有确定流量的3D凝胶基质上或其中培养细胞。三个孔中的每一个都可以填充凝胶,其中可以嵌入细胞。对于限定流量的应用,顶部的通道可以连接到泵(例如,连接到ibidi Pump System泵系统/流体剪切力系统),以确保最佳的氧气和营养供应。      µ -Slide Chemotaxis和Sticky-Slide Chemotaxis非常适合分析2D和3D中的单细胞迁移。在水基3D凝胶(例如Collagen I凝胶和 Matrigel )中可以轻松建立趋化梯度,因为凝胶结构不会阻碍通过扩散形成可溶梯度。      大多数ibidi实验室器具,例如µ -Dish 35mm, high 或µ -Slide 8 Well high,可用于在3D矩阵中培养单细胞,是高端显微镜的理想选择。    02、球体和类器官培养    球体是在3D非贴壁培养条件下相互粘附的细胞。它们缺乏干细胞,这意味着它们由完全分化的细胞组成。例如,可以通过使用悬滴或强制漂浮方法将它们放入无支架悬浮液中来生成它们。    球体不能自我更新和进一步分化。肿瘤细胞球体是一个例外,因为肿瘤细胞具有无限的增殖能力,它们能够分裂和更新。因此,球体是检查肿瘤细胞行为(例如大规模药物筛选)的有用模型。    在µ -Plate 96 Well 3D中球体生成实验方案可点击查看→AN 32: Generation of Spheroids      NIH-3T3细胞在ibidi µ -Pattern上形成明确的球体。将细胞接种在 µ -Slide VI 0.4中的200 µ m粘附点上,并在流动(3dyn/cm² )下保持14天。    类器官是培养的“微型器官”。它们可以由成体干细胞(ASC)或多能干细胞(PSC)产生。当在3D基质/支架(例如Matrigel 或胶原蛋白)中培养时,这些细胞分化成器官特异性细胞类型,从而构建小型功能器官。    Sato等人利用Lgr5 +干细胞创建了第一代肠道类器官,启动了许多从不同器官(如肠、肝脏、大脑、前列腺、肾、胰腺、肺和甲状腺)生成类器官的方案。重要的是,它们可以使用CRISPR等技术进行编辑,使其成为个人治疗、器官发生和药物筛选研究的强大工具。     球体是细胞聚集体,通常由癌细胞产生     类器官是由干细胞培育而成的微型器官    参考文献:    Sato T, et al. (2009) Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche. Nature 459(7244):262–265. 10.1038/nature07935.    Drost J, Clevers H (2018) Organoids in cancer research. Nat Rev Cancer 18:407–418. 10.1038/s41568-018-0007-6.    Tuveson D, Clevers H (2019) Cancer modeling meets human organoid technology. Science 364(6444):952–955. 10.1126/science.aaw6985.    ibidi解决方案      µ -Slide Spheroid Perfusion是用于长期球体培养的专用流动室。每个3 x 7孔形成自己的生态位,在其中培养标本。通过孔顶部通道进行灌注可确保整个实验过程中营养和氧气的最佳扩散,而不会使样本受到显着的剪切力。      µ -Slides With Multi-Cell µ -Pattern可实现空间定义的细胞粘附,用于球体和类器官的生成、长期培养和高分辨率成像。确定的粘附点能够从细胞悬浮液中捕获所有粘附的单细胞。周围的生物惰性表面完全不可细胞附着。这迫使所有细胞在粘附点处相互聚集,从而以明确且可控的方式形成球体。      生物惰性是一种稳定的生物惰性表面,适用于在非粘附表面上对球体、类器官和悬浮细胞进行长期培养和高分辨率显微镜观察,没有任何细胞或生物分子粘附。目前可提供µ -Dish 35 mm高壁生物惰性、µ -Slide 8孔高壁生物惰性、µ -Slide 4 孔生物惰性和µ -Slide VI 0.4生物惰性。      在µ -Slide III 3D Perfusion中,球体或类器官可以在凝胶层中或凝胶层上培养,或嵌入 3D 基质中。特殊的通道几何形状允许以低流速进行灌流(例如,当使用ibidi Pump System泵系统/流体剪切力系统时)。这种设置使得长达数周的长期培养成为可能。此外,超薄的盖玻片底部可实现高分辨率成像。      µ -Slide 15 Well 3D 和µ -Plate 96 Well 3D 可以在3D凝胶上或内部对单细胞和共培养物进行简单、经济高效的培养和显微镜检查。凝胶层直接连接到上方的培养基储存器,通过扩散实现快速、轻松的培养基交换。对于特殊应用,ibidi还可以提供带有1.5H玻璃底部的µ -Slide 15孔3D玻璃底细胞培养载玻片。      ibidi I型胶原蛋白是一种非胃蛋白酶化的天然胶原蛋白,用于在凝胶基质中模拟ECM。其快速凝胶有助于在3D凝胶中实现最佳的细胞分布。    03、流体状态下的3D细胞培养    间隙渗流      在体内,许多细胞类型不断暴露于液体流动中。当在体外3D基质中培养它们时,可以通过向它们灌注生长培养基或任何选择的试剂或药物来施加柔和的间隙渗流。通过这样做,可以建立接近细胞自然环境的条件。    灌流      3D矩阵内部的细胞和上面的通道的组合可以很容易地应用流体。该实验装置通过凝胶的扩散被动地给体外3D基质内的细胞提供营养,通过轻柔的流动为细胞提供氧气和营养物质。可调节的流速决定了营养水平,使长期活细胞实验成为可能。    ibidi解决方案      ibidi Channel Slides通道载玻片,包括µ -Slide III 3D Perfusion、µ -SlideI Luer 3D和µ -Slider VI系列产品,允许在3D基质中接种细胞并应用流体(例如,使用ibidi Pump System泵系统/流体剪切力系统)。
  • 小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法!
    小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法!海马体主要负责记忆和学习,日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起,由细胞体和细胞突起构成。小鼠海马神经元细胞的组织来源于实验小鼠的正常脑组织,因为海马神经元细胞类似于干细胞属于高分度分化的细胞特性,具有不能传代,不能增殖等特点,所有收到细胞后尽快使用。为了更好的服务于广大科研工作者,百欧博伟生物技术人员特提供了海马神经元细胞分离培养方法,技术因人而异仅供参考:1、试验所需仪器设备及试剂(1)仪器生物安全柜CO2细胞培养箱荧光倒置显微镜高速冷冻离心机电热恒温鼓风干燥箱(2)试剂耗材T25细胞培养瓶血球计数板细胞培养孔板红细胞裂解液神经元完全培养基0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)多聚甲醛(PFA)DAPITriton X-100山羊血清NSEGoat anti-Rabbit lgG(H+L)Cross-Adsorbed Secondary antibody,Alexa Fluor 594Fluoromount-G荧光封片剂2、分离培养方法1) 取1-10 d的新生小鼠。用75%的乙醇浸泡,2) 在冰浴的PBS中分离海马,PBS洗涤3次,剪碎,3) 用0.25% Trypsin + 0.1% Ⅰ型胶原酶37℃水浴振荡消化30min,4) 用FBS终止消化,轻轻吹打,5) 过100 μm 滤网,6) 收集滤液,300 g离心5 min,7) 用完全培养基重悬沉淀,铺瓶。3、免疫荧光3.1.实验步骤(1)细胞爬片取3片玻璃片于24孔板中,每孔加入培养基1mL,加入细胞0.02million个/孔。置培养箱2h或过夜。(2)固定细胞爬片后,吸出培养基,用PBS洗1遍,加入4% PFA于4℃固定30min。用PBS洗3×5min/次。也可最后一次不吸出PBS,放4℃过夜。(3)破膜封闭将玻片除去水分,置于培养皿支撑物上,玻璃片封闭液配置:0.5% Trition X-100与PBS 1:1混合,再加10% 血清,取50uL破膜封闭液滴于防水膜上,将玻片上有细胞的一面盖上2h。(4)一抗孵育一抗配制:抗体与PBS 1:100(200)稀释破膜封闭后,取50uL一抗于防水膜上(湿盒中),将玻片(有细胞的一面)盖上置于4℃(最多可放置一周)(5)二抗孵育室温避光孵育二抗(二抗:PBS=1:500)2h后,PBS洗3×5min/次,染DAPI(DAPI:PBS=1:1000)5min,PBS洗3×5min/次。(6)包埋玻片上各滴1滴Fluoromount-G,将有细胞的一面盖上。鉴定细胞为P1代细胞3.2.检测结果(1)细胞免疫荧光鉴定照片阴性100X-DAPINSE100X-DAPI(2)检验基本情况:经免疫荧光鉴定,该细胞纯度达到90%以上。除了上述的细胞分离方法以外,百欧博伟还有很多关于其他细胞的分离方法,想要学习的小伙伴可以来百欧博伟进行现场学习,如果想要其他原代分离培养方法,可打电话或咨询相关技术人员哦。
  • 细胞培养产品质量检测国家标准发布
    细胞培养产品质量有了标准保障,由中国计量大学教授陈春主持制定的国家标准《细胞培养液中苯乙烯、2-氯乙醇的测定 气相色谱-质谱(GC-MS)法》(GB/T 43778-2024)近日正式发布并实施。该标准有效填补了当前细胞培养过程中有毒有害物质残留检测方法的空白,为细胞培养产品的质量控制提供了更为科学可靠的依据。细胞(含体细胞、干细胞)制剂的质量控制及其潜在有毒有害物质检测限值是其开展临床应用的前提。随着细胞制剂在生命健康领域中应用的快速发展和不断扩大,其临床应用及科研实验相关标准的制定成为关注焦点。“在细胞的分离培养制备过程中,实验人员会大量使用和接触培养瓶、移液管,这些材料属于非医疗器械,使用过程中有毒有害物质可能残留、迁移到培养液中,而且目前尚无相应的检测标准。”陈春介绍说,已有医疗器械类材料中有毒有害物质的检测标准,并不适用于细胞制备过程中培养液里有毒有害残留物的检测,且缺乏相应的检测标准,风险难以得到有效控制,可能引起不同细胞(干细胞)的分化潜能改变和致突变等,给后续的临床应用带来不良影响。陈春团队联合中国测试技术研究院生物研究所、中国计量科学研究院等10家单位,历时30个月,建立了气相色谱-质谱法检测标准,为细胞培养液中苯乙烯、2-氯乙醇的残留量提供灵敏、快速、有效的检测方法,保证细胞制剂质量安全及临床应用安全。
  • 【新案例】产能700倍提升!不可不知的醇醛氧化新工艺!
    背景介绍酮类和醛类化合物在生物化学和香料工业中占有重要地位,通常是有机合成的关键中间体。最常见的是将醇直接氧化产生酮和酯。常用的氧化剂包括氯铬酸吡啶(PCC)、Jones试剂、重铬酸吡啶(PDC)、Swern、TEMPO、TPAP和Collins试剂。这些试剂或具有毒性或对环境不友好,与之相比,在相转移催化剂(PTC)作用下,使用次氯酸钠氧化醇类化合物具有以下优点:原料成本低;反应条件温和;能快速、高产地氧化伯、仲醇和醛;无重金属污染。应用该试剂氧化醇类的可行性很早之前就得到了证实,Lee和Freedman是最先利用次氯酸钠进行醇的两相催化氧化研究的人。该类反应使用间歇反应器进行放大有较多问题由于反应速率受反应器的大小、形状和搅拌速率等影响,通常收率较低;换热效率较低,局部的热量很容易导致氧化剂的热降解;氧化反应,存在安全隐患。缓解上述挑战的有效方法之一是使用连续流微反应器(图1a)连续流微反应器可以提供更好的传质和传热;无放大效应(康宁反应器具有);持液量相对较低,安全性高。Yanjie Zhang等人使用康宁微通道反应器,选择了三个PTC催化次氯酸盐氧化反应来验证该氧化反应从微量到中试级别的放大效果。结果显示:从流速每小时几微升的反应器放大到每分钟几十毫升的康宁反应器均能获得较好的反应效果;氧化反应的生产效率得到显著提高,得到一种安全有效的连续放大生产的方法 从螺旋微反应器优化条件通过康宁反应器放大通量提高了700倍,无明显放大效应。 一. 实验简介Yanjie Zhang等人使用康宁公司生产的低流量反应器(LFR)和高通量反应器G1(AFR)(图1b、c)进行实验.,选择了三个PTC催化次氯酸盐氧化反应来验证该氧化反应从微量到中试级别的放大效果。图1、 各种微反应结构(a)螺旋设计微反应器和螺旋反应器内丁醇/水的流动模式(b)康宁LFR套装(c)康宁AFR装置和AFR模块内正己烷/水的流动模式结果显示:在康宁微反应器中,从小试到中试其传质和传热效率并未发生明显改变 氧化反应的生产效率得到显著提高,得到一种安全有效的连续放大生产的方法  数据表明在从螺旋微反应器到LFR再到AFR的不同型号的反应器,生产效率提高了700倍,而没出现明显放大效应。关于传质传热的分析:在康宁微通道反应器独有的心形混合通道内反应物料快速流动,进行有效的非均相混合,有机相在水相中迅速分散成小液滴,从而产生较高的传质速率,所以其非均相流体的效率比螺旋盘管反应器更高(见图2)。图2、用水从正丁醇中提取丁二酸得到的液-液流动中单个模块停留时间与传质系数(kLa)的关系在这些反应模块中,反应区夹在两个玻璃传热板之间,传热路径变短,传热性能得到了很大的改善。图3. 康宁反应器反应模块结构 二、实验过程作者在小范围内进行了PTC催化的次氯酸钠溶液氧化反应的尝试(方案1),• 在螺旋微型反应器(图1a)中进行反应条件优化;• 随后将反应工艺条件在到康宁LFR和G1反应器中进行放大研究;图4. 方案1:(a)1-苯乙醇、(b)3-硝基苯甲醇、(c)苯甲醛氧化反应条件的优化1-苯基乙醇的氧化初步试验表明,最有效的加速反应的方法是将水相的pH值调整到9.3-9.5(图5a)。在该pH范围内,大多数次氯酸盐阴离子被质子化并形成次氯酸,然后用相转移催化剂将其萃取到含有次氯酸盐阴离子的有机相中,从而显著提高反应速率。使用14.6%次氯酸钠溶液与饱和碳酸氢钠,很容易获得pH 9.3~9.5的反应体系,这是一个比氢氯酸和乙酸效率更高的反应体系。饱和次氯酸钠溶液具有较高的离子强度,有助于有机盐从水相萃取到有机相 在相同的停留时间下,由于比表面积的增加,水相流速和有机相流速的比值(QA/QO)在控制整个反应速率方面也起着重要作用,因此随着QA/QO 的增加,传质速率有所提高(见图3b)。与螺旋反应器相比,康宁LFR系列具有更高的生产率,因为LRS持液体积较大,在相同的停留时间内,它的流量更高。图5. (a) 螺旋微反应器中1-苯乙醇在不同反应条件下的停留时间与转化率的关系(方案1a)。(b) 康宁AFR和螺旋微反应器中1-苯乙醇停留时间为1分钟的氧化转化率与流量比(QA/QO)的关系。1-苯乙醇浓度为0.8 M,NaOCl浓度为2 M。菱形,螺旋微反应器(pH 9,τ=1 M in);方块,康宁LFR(pH 9,τ=1 min)。3-硝基苄醇的氧化在甲醇存在下,3-硝基苄醇可以直接氧化成其甲酯(方案1b)。在此反应中,醇首先被氧化成相应的醛,醛与甲醇迅速形成半缩醛,并进一步氧化成相应的甲酯。 该反应受pH影响大,实验最优pH是9?9.5,最佳的水相与有机相比为2:1,浓度和停留时间分别为0.8M和1.5min。在康宁LRS和AFR反应器上,3-硝基苄醇氧化反应的停留时间在1min时产能达到最大,效率明显优于螺旋微反应器。图6. 不同反应物在康宁反应上的生产效率苯甲醛的氧化 在甲醇存在下,苯甲醛可以直接氧化为苯甲酸甲酯,而不需要经过酸的过渡态( 方案1c)。但Leduc和Jamison研究发现,一旦转化率达到60%,反应会停止。用甲醇取代乙酸乙酯作为溶剂,反应能够完全进行反应是均相,无需相转移催化剂苯甲醛的氧化在2.7min内在康宁反应器中可以100%转化,而在螺旋微反应器中3min后转化率仅为90%(图6c)图7. 螺旋微反应器与康宁LFR和AFR氧化(A)1-苯乙醇、(B)3-硝基苄醇和(C)苯甲醛的转化率和收率比较;蓝色,转化率(%);红色,产品收率(%)实验总结• 作者使用次氯酸钠溶液做了三种底物的氧化反应,从螺旋微反应器优化到康宁LFR和AFR系统均获得了较好的结果;• 这些物质的氧化反应为非均相反应,通过微反应器增强传质可以提高反应效果;• 工艺过程中替换溶剂或者使用传质更好的反应结构单元都可以起到提高传质的作用;• 和传统微反应器相比,康宁反应器可以实现更高的转化率且单台反应器可以获得更高的通量(生产效率);• 从螺旋微反应器到康宁G1反应器通量提高了700倍,同时保持了良好的传质传热效果。参考文献:dx.doi.org/10.1021/op500158h | Org. Process Res. Dev. 2014, 18, 1476?1481
  • 中国出入境检验检疫协会发布《食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定 气相色谱串联质谱法》团体标准征求意见稿
    CIQA/TC10各成员及专家、各有关单位:根据《中国出入境检验检疫协会团体标准管理办法》及实施细则的规定,《食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定 气相色谱串联质谱法》P/CIQA-130-2023团体标准征求意见稿已由中国出入境检验检疫协会进出口食品标准化技术委员会(CIQA/TC10)组织起草完毕,现进入征求意见阶段。请在30天内将意见和建议填写在《意见反馈表》中,于2024年3月18日前将书面意见以邮件形式反馈至CIQA/TC10秘书处。请务必留下您的姓名、单位名称及联系方式,便于联系。联系人:吴丽娜 13913973396刘旭 18253697871邮箱:fcc@ciq.org.cn附件.zip1.《食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定 气相色谱串联质谱法》团体标准征求意见稿2.《食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定 气相色谱串联质谱法》(征求意见稿)编制说明3. 意见反馈表中国出入境检验检疫协会2024年2月18日
  • 最新!Waters发布饲料中喹乙醇及其代谢物测定方案
    参考国标:农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定 液相色谱-串联质谱法前处理方法:Oasis HLB 200mg/6mL (P/N:WAT106202)1、 样品提取 — 参考国标准确称取饲料2g(预混合饲料1g)于50mL离心管中。加入0.1%甲酸-乙腈溶液10mL,涡旋1min,40度超声10min,9000rpm离心15min,收集上清液。残渣用0.1%甲酸-乙腈溶液10mL重复提取一次并合并提取液。精确量取5mL上述提取液在60度下氮吹至2mL,然后用4mL 0.1moL/L磷酸二氢钾充分溶解残余物,待净化。2、 样品净化 HLB (200mL/6CC)活化、平衡:3mL甲醇、3mL水上样:将上述备用液过柱淋洗:3mL 0.02mol/L 盐酸、3mL 5%甲醇洗脱:5mL 甲醇收集洗脱液后氮气吹干,用1mL 20%乙腈溶解后果0.22um 滤膜待上机色谱质谱条件色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18(150 mm,2.1 mm,1.7μm) (P/N:186002353)柱温:30℃;进样量:10 μL流动相及参考梯度洗脱程序见下表。时间(min)流速(mL/min)0.1%甲酸溶液(%)乙腈(%)00.39551.00.39552.00.360403.00.360403.10.39590质谱采用ESI+检测方式,多反应监测(MRM)。毛细管电压为3.4 Kv; 源温度为150℃;脱溶剂气温度为550℃;脱溶剂气流速为800L/hr;锥孔气流速为20 L/hr。脱溶剂气、锥孔气、均为高纯氮气。碰撞气为氩气。定性离子对、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见下表。 被测物名称定性离子对(m/z)定量离子对(m/z)锥孔电压(V)碰撞能量(eV)喹乙醇264.2212.3264.2212.21615264.2177.120饲料空白样品与喹乙醇标准品对比谱图 液相方法分析喹乙醇代谢物喹噁啉-2-羧酸(QCA)、3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)参考国标:农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定 高效液相色谱法前处理方法:使用Waters Oasis MAX 60mg/3mL (P/N:186001884)参考国标步骤1、 样品提取 — 参考国标称取肌肉样品5g于离心管中,加入8mL偏磷酸甲醇溶液,涡旋2min,在25度下6000rpm离心15min,取出上清液。然后重复提取一遍后合并两次上清液。向上清液中加入8mL乙酸乙酯,涡旋1min,4000rpm离心10min,取上层。再重复提取一遍后合并两次上清液。有机相中,加磷酸盐缓冲液6mL,涡旋1min,放置10min,使下层清晰,收集水相。然后再重复提取后合并,待净化。2、样品净化 (MAX 60mg/3CC)活化、平衡:3mL甲醇、3mL水上样:备用液过柱淋洗:3mL 0.05mol/L 氢氧化钠、3mL甲醇洗脱:3mL 2%甲酸甲醇收集洗脱液后氮气吹干,用500uL甲醇溶解后过0.45μm 滤膜待上机仪器: Waters Alliance e2695仪器方法:流动相:1%甲酸水溶液+甲醇=60:40色谱柱:XBrige C18 250mm×4.6mm,粒径5μm (P/N:186003117)流速:1 mL检测器:2998紫外波长:320nm进样量:20μL柱温:30℃3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸分离图谱
  • 血液中乙醇分析/血液中乙醇检测气相色谱仪大促销
    随着新《交通法》的实施,驾车者血醇含量的检测日趋普遍,气相色谱法定性及定量检测血醇含量是唯一司法认定的检测手段。 南京科捷公司血液中乙醇含量检测解决方案是参考国外同类检测方法,并基于《中华人民共和国公共安全行业标准》(GA/ 105-1995)而开发的用带自动顶空进样器并配有双柱双检测器的气相色谱法进行的血液中的乙醇含量的定性及定量检测分析。本方案检测方法先进,仪器配置合理,操作简单,适合各级公安部门及司法鉴定中心配备。血液中乙醇分析/血液中乙醇检测仪器配置方案:仪器设备仪器名称规格及说明产地分析仪器GC5890F气相色谱仪双FID、毛细管进样系统、填充柱进样系统、三阶程序升温、智能后开门南京科捷 DK300A自动顶空进样器定量管及六通阀进样,平衡温度、充压力均可设定变化。南京科捷 色谱工作站 南京科捷样品制备专用配件及消耗品顶空瓶、垫、盖10ml或20ml进口 顶空瓶封口钳 上海专用色谱柱填充柱Parapak S 2mm*2m 玻璃管柱南京科捷 毛细管柱PEG20M 30m*0.53mm 毛细管柱进口血液中乙醇分析/血液中乙醇检测气相色谱仪主要特点:大屏幕中英文两种显示,画面切换简单明了,外观时尚美观。完善的自动化,智能化,多功能化,多维色谱系统(ARM9-32位芯片和国外原版软件)宽幅的升温速率,快速的降温系统,高稳定性的温控技术,非常好的性能价格比。完善的自诊断功能,能使用户方便的检查故障部位和故障类型。完善的温度过热保护及铂丝电阻开,短路报警功能,保证温度不失控。可选配内置AD转换电路,可直接数字输出信号,实现在PC上完成控制与分析的全部工作。柱箱通过干冰或液氮可实现负温度操作。在180℃以内,柱箱控制精度高达± 0.01℃。可同时安装三个填充柱或两付毛细管柱,双放大器可同时工作。可同时安装三个检测器及甲烷转化炉。手动进样、自动启动进样装置、自动点火等功能任选,陶瓷或石英喷嘴任选。仪器具有断气自动停电保护功能。六路控温,七阶程序升温,毛细管和填充柱汽化室独立控温,智能双后开门。血液中乙醇分析/血液中乙醇检测气相色谱仪技术指标:柱箱控温范围:室温5℃-400℃(以0.1℃为增量任设)。温度精度:不大于± 0.1℃。温度梯度:± 1℃(100℃-360℃程序升温)。升温速率:0.1℃-40℃/min(以0.1℃为增量任设)。进样口、检测器控温范围:室温+10℃-400℃。电压220V± 10%,最大功率2200W。外型尺寸:长570× 宽480× 高500(mm)柱箱尺寸:长270× 宽248× 高260(mm)仪器重量:46kg欢迎来电咨询血液中乙醇分析/血液中乙醇检测气相色谱仪详情!联系方式如下:姓 名手机(南京)座 机负 责 区 域郑基斌13951984142021-54081115浙江、江苏卞啊峰15895820021025-83312752上海、安徽、山东李 双189254617930769-23361019广东、福建、湖南、江西尹俊荣13951792301010-61702619天津、内蒙古尹艳艳15150695512028-87522753云南李金15250968853028-87522753四川、重庆、贵州刘楚涵136051776110769-23361019广西、海南彭红媛18611025238010-61702619北京、新疆郑基萍13951691728025-84372482辽宁、吉林、黑龙江、宁夏、青海、陕西、甘肃、山西、河南、河北、湖北
  • 岛津推出《细胞培养上清液及培养基组分分析应用文集》
    现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现的。正在倍受重视的基因治疗、细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了关键的核心作用。开发合适的培养基配方与优化细胞培养条件是保证产品质量、产量以及批次之间一致性的重要因素,尤其是抗体药物偶联物、双靶点/特异抗体类药物、抗体片段融合蛋白等相对分子量大、结构复杂的抗体类药物,对其重要性不言而喻。而对于生物类似药的研发与质量控制来说,尽可能通过优化工艺缩小差异,更有利于生物类似药与原研参比品的质量对比研究,提高生物类似药的质量研究结果与参比品之间的相似性,从而使各项质量属性达到预先设置的可接受范围。目前生物制品公司的生物过程工艺开发与优化偏重于监测常规的温度、搅拌、溶解气体、OD值等理化条件和少数培养基成分与代谢物等的变化,缺乏对于细胞培养上清液组分直接、全面且快速的客观动态数据分析,因此无法精准优化细胞培养工艺条件,甚至影响抗体类药物等的产品品质;而培养基生产商为了开发高效低成本培养基配方,并且要保证批次间一致性,则需要投入大量的人力物力,配备不同检测功能的仪器来实现培养基成分的全方位检测。 为满足快速全面分析细胞培养上清液组分和培养基组分,将基础碳源、氮源、核酸、维生素和其他主要代谢物同时检测分析的需求,我们开发出“细胞培养上清液方法包”。该技术平台采用超快速三重四极杆液质联用仪,仅需17分钟,即可同时监测95种细胞培养上清液营养成份和代谢物等的相对丰度变化 。无需用户自行开发方法,即装即用。所有目标化合物信息与实验方法全内置,且根据需要可增加,可拓展。为增进用户对“细胞培养上清液方法包”的深入了解和方便使用,岛津企业管理(中国)有限公司分析中心整理编写了本册《细胞培养上清液及培养基组分分析应用文集》。本册文集介绍了“细胞培养上清液方法包”在不同培养基组分分析以及细胞培养过程监控中的应用,共收录应用文章 10 篇,为相关领域的客户使用该系统提供参考。 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
  • 茂默新品:QuickChek SRB 硫酸盐还原菌快速检测试剂盒
    硫酸盐还原菌(srb)是石油和天然气行业中一个颇受关注的领域,主要是因为硫酸盐还原菌在管道等缺氧环境中能够将硫酸盐还原成硫化氢并在含铁环境中产生不溶性硫化亚铁,严重腐蚀金属表面,导致油气产量与产品品质下降,并增加了管路与系统维护成本。 modern water quickchek srb 检测试剂盒是一种采用酶免疫方法进行硫酸盐还原菌(srb)快速检测的设备。该方法采用了高纯度的抗体来探测腺苷-5’-磷酰磺酸酯酶(aps),这种还原酶是所有srb菌株拥有的共同特征。与传统的细菌培养检测方法相比,quickchek srb检测试剂盒具有很多优势,比如快速,准确等。该设备可以检测固态,半固体样品中的全部的srb含量,包括了在一些标准介质中无法存活的srb。测试结果不会被现场检测过程中常见的化学品或盐类所干扰。近的实验室测试结果表明quickchek srb测试结果与qpcr方法的结果具有高度相关性。
  • 霉菌培养箱的清洗消毒及使用标准
    霉菌培养箱的清洗消毒如何处理?作为一款毒菌培养箱,超温保护、传感器异常保护、掉电记忆、掉电时间自动补偿等基础性智能功能是必须要有的。毒菌培养箱的功能和用途比较多,其中温度传感器和湿度传感器是用来维持培养室内的温度和湿度稳定的,以满足毒菌生长的条件,快速培养出目标毒菌。1、培养箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的拉!2、我的经验是在补充水时最好把水加热一下,达到培养箱的温度3、这么早就养细胞了,我们这里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0。1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高猛酸钾加甲醛1:1比例重一遍。注意要是重的话千万注意混合之后马上离开,然后密闭细胞培养室,味道很刺激的。最好在养细胞前消毒,否则,确实没地方放细胞.4、我们的方法比较简单,先用75%酒精擦拭内壁,通风10分钟,紫外线照射30分钟即可。5、我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内,然后用甲醛+高酸钾蒸一个晚上,然后通风一整天(同时打开紫外线照射)。6、我们是把培养箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍 换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的请高手指教。熏蒸后吹一天是绝对不够的,最起码要一个星期才可以让甲醛散尽,要不细胞长不好的。霉菌培养箱的使用标准是?霉菌培养箱是一种重要的检测设备。它在高校、科研院所、化工、生物等领域发挥着重要作用。广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验等试验。它是水分析、COD/BOD测量、嗜热细菌、菌株和低温微生物培养和保存、植物培养、育种试验和生物培养的专用设备,1、接通电源,开启电源开关,黄色指示灯亮,表示电源已接通,加热器工作。2、当培养箱达到设置温度时,绿色指示灯亮,加热器断电。3、将调节器反复调整至黄绿灯自动继息点,即能自动控制所需温度,箱内温度按内置温度计所指示为准。4、按下温度按钮,此时数字显示即为设定值,旋转温度调至所需温度值,数字显示即为培养室内的实际温度。例如培养箱内的实际温度比设定温度小,加热指示灯亮,加热器开始加热,如毒菌培养箱内的实际温度比设定温度大,制冷指示灯亮,制冷系统开始制冷,如加热指示灯与制冷指示灯均暗,则培养箱处干恒温状态。当温度设定好之后,不要将控温旋来回多次旋转,压缩机启动频繁,则会造成压缩机出现过载现象,直接影响压缩机的使用寿命。在使用温度较低时,应定期清理掉箱内底部积水盘内的积水。湿度长期不用时,请将盒内水倒尽。5、试验物放置在箱内不宜过挤、使空气流动畅通,保持箱内受热均匀,内室底板因靠近电热器,故不宜放置试验物6、应定期检查温度调节器之银触头是否发毛或不平,如有,可用细砂布将触头砂平后再使用。并应经常用清洁布擦净,使之接触良好(注意必须切断电源)7、每次使用完毕后,须将电源全部切断,经常保持箱内清洁。如您对于霉菌培养箱有更多想了解的内容,欢迎咨询 https://www.instrument.com.cn/netshow/SH103298/C202516.htm
  • 二氧化碳培养箱使用指南(二):正确清洁和使用
    为了保证二氧化碳培养箱正常运行,避免细胞污染,定期清洁二氧化碳培养箱是必不可少的。按照以下步骤仔细清洁二氧化碳培养箱,有利于减少污染,保持细胞良好生长。 清洁程序NO.1在清洗过程中,操作人员应按实验室规定穿戴个人防护装备(PPE)。NO.2准备清洁过程所需的材料,如温和的肥皂溶液、洗涤瓶装蒸馏水、海绵、干净的布或纸巾、消毒剂和洗涤盘或桶(如果没有水槽)。使用不锈钢清洁剂清洁金属表面,使用玻璃清洁剂清洁玻璃内门表面,请勿使用含氯消毒剂。NO.3将所有样品转移至另一个二氧化碳培养箱或储存在安全的地方。NO.4关闭并拔下设备插头。如果需要,可标记该装置已停用或维修中。NO.5卸下搁板、搁板架、顶部通风系统和增湿盘。NO.6使用温和的肥皂水和海绵彻底清除腔体表面的污垢和残留物,或用合适的消毒剂喷洒到腔体表面和所有拆卸的部件上。按照说明书使用消毒剂,使其充分反应。NO.7请勿将消毒剂直接喷洒在传感器、控制面板和电气面板附近,以防止损坏电气部件。使用浸泡过消毒剂的抹布擦拭控制面板和机身外部。NO.8使用洗涤瓶中的蒸馏水冲洗掉肥皂水或消毒剂,重复两次。难以用洗涤瓶冲洗的部分,可使用湿海绵擦拭。NO.9用干净、无绒毛的布或纸巾擦干所有冲洗过的部件。NO.10用70%乙醇擦拭内部部件和外部表面,并充分干燥。NO.11重新组装设备,并确保设备完全干燥后再进行常规操作。NO.12启动去污/灭菌循环程序。 除了定期清洁二氧化碳培养箱,如何安全地使用二氧化碳培养箱也是很多人心中的一大问题。益世科生物提供专业的售后服务,若您在使用过程中遇到无法自行解决的问题请尽快联系我们,避免不当操作给您的细胞培养工作造成影响。
  • 中石化汽油再曝质量门 或因甲醇代乙醇
    中石化再一次陷入汽油“质量门”,不过,这次“受害者”由香港车主变为河南车主。  昨日,中石化办公厅有关负责人接受《每日经济新闻》采访时表示,中石化总部正在等待河南安阳当地工商局和技术监督局对油品进行抽样检验的报告。而中石化安阳公司有关人士也称,目前已停止出售这批疑因导致部分车辆故障的93#汽油。  各方等待抽样检验报告  据报道,2010年3月中下旬开始,河南省安阳市内许多4S店突然接到大批送修车辆。这些故障车辆都有着同样的“病症”:轻则会出现加油不顺、冒黑烟、尾气刺鼻的情况,重则排气管不断喷出红或黑色液体、无法启动,最严重的会出现一些零件损坏的情况。  对此,《每日经济新闻》向中石化方面进行了求证。  中石化办公厅有关负责人士说:”此事件还没有上升到中石化北京总部这个层面解决,具体情况要问中石化河南安阳分公司,由他们具体负责处理,中石化总部也在等待检测报告的出来。估计就这几天会出来,到时会对外公布。”  “对不起,我只是一个负责加油的员工,关于车辆故障的问题我不太清楚。”中石化河南安阳分公司旗下加油站的一位员工在电话中说道。  安阳分公司负责油品零售业务有关人士也对《每日经济新闻》表示,4月1日起,当地加油站已经全部更换了一批新的93#汽油,上批油已经停止销售了。4月初,中石化河南安阳分公司在安阳市电视台也发表了公开声明,表示将对车主损失的油费和清洗费进行理赔。  中石化河南石油分公司目前也声明表示,已组成调查组,在前期组织有关专家赴现场进行调查的基础上,责成安阳石油分公司主动邀请当地工商局和技术监督局对油品进行抽样检验,同时将邀请车友代表和关注此事的网友、媒体记者对抽检过程进行监督,最终调查结果待专家及权威机构拿出意见后及时公布。如果调查证实下属企业确实存在内部管理问题,其将对有关责任人问责。  甲醇代替乙醇所导致?  一位不愿署名的汽车业内专家称在最终抽样检验没有出来之前,无法确定事故的最终原因。不过,他担心或许是汽油中加入甲醇代替乙醇导致。  国家发改委和财政部之前曾联合下发紧急通知,要求各地暂停核准玉米加工乙醇项目。乙醇汽油最大的问题就是会占用耕地和粮食,而且发酵乙醇价格高。上述专家说,国内乙醇限产,没那么多已乙醇添加,一些加油站为了追求利润,甲醇代替乙醇。而全国每年有几十万吨甲醇不知去向,特别是在山西、河南地区。  与乙醇汽油相比,甲醇汽油的生产成本具有绝对优势。甲醇生产成本在每吨1000元左右,而每吨乙醇的生产成本在4500元左右。  据专业人士介绍,甲醇汽油M15标准,是汽油里面加入15%左右的甲醇,以及一定量的添加剂,以此类推M30和M50则是分别加入30%和50%的甲醇。目前,只有山西省在全面推广甲醇汽油。
  • 鄂尔多斯市第一中学109.74万元采购高压灭菌器,火焰光度计,离心机,照度计,培养箱,PCR,立体显...
    详细信息 鄂尔多斯市第一中学采购实验仪器竞争性谈判公告 内蒙古自治区-鄂尔多斯市-康巴什区 状态:公告 更新时间: 2022-08-22 招标文件: 附件1 鄂尔多斯市第一中学采购实验仪器竞争性谈判公告 项目概况 采购实验仪器采购项目的潜在供应商应在内蒙古自治区政府采购网获取采购文件,并于 2022年08月30日 09时30分 (北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:ESZC-J-H-220092 项目名称:采购实验仪器 采购方式:竞争性谈判 预算金额:1,097,400.00元 采购需求: 合同包1(采购实验仪器): 合同包预算金额:1,097,400.00元 品目号 品目名称 采购标的 数量(单位) 技术规格、参数及要求 品目预算(元) 最高限价(元) 1-1 教学专用仪器 数码体视显微镜(教师用) 1(台) 详见采购文件 30,000.00 - 1-2 教学专用仪器 体视显微镜(学生用) 10(台) 详见采购文件 210,000.00 - 1-3 教学专用仪器 高速离心机 1(台) 详见采购文件 22,000.00 - 1-4 教学专用仪器 精油提取器 2(台) 详见采购文件 7,000.00 - 1-5 教学专用仪器 自动高压蒸汽灭菌锅 1(台) 详见采购文件 36,800.00 - 1-6 教学专用仪器 台式恒温振荡器 1(台) 详见采购文件 26,680.00 - 1-7 教学专用仪器 光照培养箱 2(台) 详见采购文件 51,000.00 - 1-8 教学专用仪器 紫外灯消毒车 1(台) 详见采购文件 700.00 - 1-9 教学专用仪器 PCR扩增仪 1(台) 详见采购文件 35,000.00 - 1-10 教学专用仪器 试管苗培养架 2(台) 详见采购文件 34,000.00 - 1-11 教学专用仪器 电泳仪 1(台) 详见采购文件 5,250.00 - 1-12 教学专用仪器 水平电泳槽 4(台) 详见采购文件 9,120.00 - 1-13 教学专用仪器 垂直电泳槽 2(台) 详见采购文件 7,360.00 - 1-14 教学专用仪器 植物补光灯全光谱LED灯 2(个) 详见采购文件 440.00 - 1-15 教学专用仪器 植物补光灯全红光LED灯 1(个) 详见采购文件 130.00 - 1-16 教学专用仪器 植物补光灯全黄光LED灯 1(个) 详见采购文件 130.00 - 1-17 教学专用仪器 智能定时器插座 3(个) 详见采购文件 120.00 - 1-18 教学专用仪器 实验用计时器 15(个) 详见采购文件 600.00 - 1-19 教学专用仪器 数显实验用电炉 3(台) 详见采购文件 1,155.00 - 1-20 教学专用仪器 干浴器 2(台) 详见采购文件 6,000.00 - 1-21 教学专用仪器 Ph计 2(台) 详见采购文件 5,200.00 - 1-22 教学专用仪器 动物解剖器械 20(套) 详见采购文件 3,000.00 - 1-23 教学专用仪器 水晶滴胶套装 1(套) 详见采购文件 1,500.00 - 1-24 教学专用仪器 生物实验试剂盒 100(个) 详见采购文件 29,000.00 - 1-25 教学专用仪器 试管 300(包) 详见采购文件 3,000.00 - 1-26 教学专用仪器 石墨管 10(个) 详见采购文件 6,500.00 - 1-27 教学专用仪器 照度计 20(个) 详见采购文件 19,800.00 - 1-28 教学专用仪器 异形塞大 200(个) 详见采购文件 4,200.00 - 1-29 教学专用仪器 异形塞小 200(个) 详见采购文件 3,000.00 - 1-30 教学专用仪器 烧杯 400(个) 详见采购文件 4,000.00 - 1-31 教学专用仪器 烧杯 500(个) 详见采购文件 3,500.00 - 1-32 教学专用仪器 试剂 100(瓶) 详见采购文件 13,000.00 - 1-33 教学专用仪器 滤芯 5(个) 详见采购文件 4,500.00 - 1-34 教学专用仪器 危险化学品柜 1(台) 详见采购文件 11,000.00 - 1-35 教学专用仪器 无水乙醇 150(瓶) 详见采购文件 3,300.00 - 1-36 教学专用仪器 标液 100(个) 详见采购文件 9,500.00 - 1-37 教学专用仪器 标液2 100(个) 详见采购文件 12,500.00 - 1-38 教学专用仪器 离心管 300(个) 详见采购文件 2,700.00 - 1-39 教学专用仪器 火焰光度检测器 1(套) 详见采购文件 149,000.00 - 1-40 教学专用仪器 色谱柱 4(支) 详见采购文件 36,000.00 - 1-41 教学专用仪器 色谱柱 4(支) 详见采购文件 56,000.00 - 1-42 教学专用仪器 元素灯 12(个) 详见采购文件 82,800.00 - 1-43 教学专用仪器 顶空瓶 200(个) 详见采购文件 4,000.00 - 1-44 教学专用仪器 顶空瓶盖 200(个) 详见采购文件 3,000.00 - 1-45 教学专用仪器 监测头 1(套) 详见采购文件 38,000.00 - 1-46 教学专用仪器 燃烧头 1(套) 详见采购文件 45,000.00 - 1-47 教学专用仪器 进样瓶 300(套) 详见采购文件 6,000.00 - 1-48 教学专用仪器 喷淋器 7(个) 详见采购文件 6,300.00 - 1-49 教学专用仪器 窥视无穷 2(件) 详见采购文件 520.00 - 1-50 教学专用仪器 彩色偏振片 2(件) 详见采购文件 860.00 - 1-51 教学专用仪器 光影魔术盒 2(件) 详见采购文件 1,000.00 - 1-52 教学专用仪器 神奇的彩虹 2(件) 详见采购文件 400.00 - 1-53 教学专用仪器 编钟 2(件) 详见采购文件 460.00 - 1-54 教学专用仪器 蛇摆 2(件) 详见采购文件 1,900.00 - 1-55 教学专用仪器 混沌摆 2(件) 详见采购文件 1,460.00 - 1-56 教学专用仪器 伽利略温度计 (10球) 2(件) 详见采购文件 1,180.00 - 1-57 教学专用仪器 碎片灯 2(件) 详见采购文件 520.00 - 1-58 教学专用仪器 蜡灯 2(件) 详见采购文件 520.00 - 1-59 教学专用仪器 斯特林发动机模型(低温热机) 2(件) 详见采购文件 700.00 - 1-60 教学专用仪器 斯特林发动机模型 2(件) 详见采购文件 1,140.00 - 1-61 教学专用仪器 克劳克斯辐射计 2(件) 详见采购文件 700.00 - 1-62 教学专用仪器 时空弯曲 2(件) 详见采购文件 280.00 - 1-63 教学专用仪器 激光内刻画 2(件) 详见采购文件 660.00 - 1-64 教学专用仪器 滴水视觉暂留 2(件) 详见采购文件 4,400.00 - 1-65 教学专用仪器 伽利略理想斜面演示器 5(套) 详见采购文件 820.00 - 1-66 教学专用仪器 电机原理说明器 5(套) 详见采购文件 970.00 - 1-67 教学专用仪器 克罗克斯辐射计 5(套) 详见采购文件 590.00 - 1-68 教学专用仪器 急救包 5(套) 详见采购文件 245.00 - 1-69 教学专用仪器 翻转环实验 5(套) 详见采购文件 1,140.00 - 1-70 教学专用仪器 纵横波演示器 5(台) 详见采购文件 650.00 - 1-71 教学专用仪器 音叉振动演示器 5(台) 详见采购文件 2,700.00 - 1-72 教学专用仪器 电源配线 200(根) 详见采购文件 2,000.00 - 1-73 教学专用仪器 热学实验室地板 100(平米) 详见采购文件 22,800.00 - 本合同包不接受联合体投标 合同履行期限:自合同签订之日起90日 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定: (1)具有独立承担民事责任的能力; (2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度; (3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力; (4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录; (5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录; (6)法律、行政法规规定的其他条件。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 无。 三、获取采购文件 时间: 2022年08月22日 至 2022年08月29日 ,每天上午 00:00:00 至 12:00:00 ,下午 12:00:00 至 23:59:59 (北京时间,法定节假日除外) 地点:内蒙古自治区政府采购网 方式:在线获取。获取采购文件时,需登录“政府采购云平台”,按照“执行交易→应标→项目应标→未参与项目”步骤,填写联系人相关信息确认参与后,即为成功“在线获取”。 售价: 免费获取 四、响应文件提交 截止时间: 2022年08月30日 09时30分00秒 (北京时间) 地点: 内蒙古自治区政府采购网(政府采购云平台) 五、开启 时间: 2022年08月30日 09时30分00秒 (北京时间) 地点:内蒙古自治区鄂尔多斯市康巴什区鄂尔多斯市公共资源交易中心政府采购不见面开标大厅(五楼开标八室) 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 无 八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称:鄂尔多斯市第一中学 地址:鄂尔多斯市康巴什区 联系方式:18647797875 2.采购代理机构信息 名称:鄂尔多斯市政府采购中心 地址:内蒙古自治区鄂尔多斯市康巴什区湖滨路(鄂尔多斯市公共资源交易大厦) 联系方式:8398694 3.项目联系方式 项目联系人:郝雯 电话:8398694 鄂尔多斯市政府采购中心 2022年08月22日 相关附件: 采购实验仪器谈判文件(2022081801).pdf × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容:高压灭菌器,火焰光度计,离心机,照度计,培养箱,PCR,立体显微镜 开标时间:2022-08-18 00:00 预算金额:109.74万元 采购单位:鄂尔多斯市第一中学 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:鄂尔多斯市政府采购中心 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 鄂尔多斯市第一中学采购实验仪器竞争性谈判公告 内蒙古自治区-鄂尔多斯市-康巴什区 状态:公告 更新时间: 2022-08-22 招标文件: 附件1 鄂尔多斯市第一中学采购实验仪器竞争性谈判公告 项目概况 采购实验仪器采购项目的潜在供应商应在内蒙古自治区政府采购网获取采购文件,并于 2022年08月30日 09时30分 (北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:ESZC-J-H-220092 项目名称:采购实验仪器 采购方式:竞争性谈判 预算金额:1,097,400.00元 采购需求: 合同包1(采购实验仪器): 合同包预算金额:1,097,400.00元 品目号 品目名称 采购标的 数量(单位) 技术规格、参数及要求 品目预算(元) 最高限价(元) 1-1 教学专用仪器 数码体视显微镜(教师用) 1(台) 详见采购文件 30,000.00 - 1-2 教学专用仪器 体视显微镜(学生用) 10(台) 详见采购文件 210,000.00 - 1-3 教学专用仪器 高速离心机 1(台) 详见采购文件 22,000.00 - 1-4 教学专用仪器 精油提取器 2(台) 详见采购文件 7,000.00 - 1-5 教学专用仪器 自动高压蒸汽灭菌锅 1(台) 详见采购文件 36,800.00 - 1-6 教学专用仪器 台式恒温振荡器 1(台) 详见采购文件 26,680.00 - 1-7 教学专用仪器 光照培养箱 2(台) 详见采购文件 51,000.00 - 1-8 教学专用仪器 紫外灯消毒车 1(台) 详见采购文件 700.00 - 1-9 教学专用仪器 PCR扩增仪 1(台) 详见采购文件 35,000.00 - 1-10 教学专用仪器 试管苗培养架 2(台) 详见采购文件 34,000.00 - 1-11 教学专用仪器 电泳仪 1(台) 详见采购文件 5,250.00 - 1-12 教学专用仪器 水平电泳槽 4(台) 详见采购文件 9,120.00 - 1-13 教学专用仪器 垂直电泳槽 2(台) 详见采购文件 7,360.00 - 1-14 教学专用仪器 植物补光灯全光谱LED灯 2(个) 详见采购文件 440.00 - 1-15 教学专用仪器 植物补光灯全红光LED灯 1(个) 详见采购文件 130.00 - 1-16 教学专用仪器 植物补光灯全黄光LED灯 1(个) 详见采购文件 130.00 - 1-17 教学专用仪器 智能定时器插座 3(个) 详见采购文件 120.00 - 1-18 教学专用仪器 实验用计时器 15(个) 详见采购文件 600.00 - 1-19 教学专用仪器 数显实验用电炉 3(台) 详见采购文件 1,155.00 - 1-20 教学专用仪器 干浴器 2(台) 详见采购文件 6,000.00 - 1-21 教学专用仪器 Ph计 2(台) 详见采购文件 5,200.00 - 1-22 教学专用仪器 动物解剖器械 20(套) 详见采购文件 3,000.00 - 1-23 教学专用仪器 水晶滴胶套装 1(套) 详见采购文件 1,500.00 - 1-24 教学专用仪器 生物实验试剂盒 100(个) 详见采购文件 29,000.00 - 1-25 教学专用仪器 试管 300(包) 详见采购文件 3,000.00 - 1-26 教学专用仪器 石墨管 10(个) 详见采购文件 6,500.00 - 1-27 教学专用仪器 照度计 20(个) 详见采购文件 19,800.00 - 1-28 教学专用仪器 异形塞大 200(个) 详见采购文件 4,200.00 - 1-29 教学专用仪器 异形塞小 200(个) 详见采购文件 3,000.00 - 1-30 教学专用仪器 烧杯 400(个) 详见采购文件 4,000.00 - 1-31 教学专用仪器 烧杯 500(个) 详见采购文件 3,500.00 - 1-32 教学专用仪器 试剂 100(瓶) 详见采购文件 13,000.00 - 1-33 教学专用仪器 滤芯 5(个) 详见采购文件 4,500.00 - 1-34 教学专用仪器 危险化学品柜 1(台) 详见采购文件 11,000.00 - 1-35 教学专用仪器 无水乙醇 150(瓶) 详见采购文件 3,300.00 - 1-36 教学专用仪器 标液 100(个) 详见采购文件 9,500.00 - 1-37 教学专用仪器 标液2 100(个) 详见采购文件 12,500.00 - 1-38 教学专用仪器 离心管 300(个) 详见采购文件 2,700.00 - 1-39 教学专用仪器 火焰光度检测器 1(套) 详见采购文件 149,000.00 - 1-40 教学专用仪器 色谱柱 4(支) 详见采购文件 36,000.00 - 1-41 教学专用仪器 色谱柱 4(支) 详见采购文件 56,000.00 - 1-42 教学专用仪器 元素灯 12(个) 详见采购文件 82,800.00 - 1-43 教学专用仪器 顶空瓶 200(个) 详见采购文件 4,000.00 - 1-44 教学专用仪器 顶空瓶盖 200(个) 详见采购文件 3,000.00 - 1-45 教学专用仪器 监测头 1(套) 详见采购文件 38,000.00 - 1-46 教学专用仪器 燃烧头 1(套) 详见采购文件 45,000.00 - 1-47 教学专用仪器 进样瓶 300(套) 详见采购文件 6,000.00 - 1-48 教学专用仪器 喷淋器 7(个) 详见采购文件 6,300.00 - 1-49 教学专用仪器 窥视无穷 2(件) 详见采购文件 520.00 - 1-50 教学专用仪器 彩色偏振片 2(件) 详见采购文件 860.00 - 1-51 教学专用仪器 光影魔术盒 2(件) 详见采购文件 1,000.00 - 1-52 教学专用仪器 神奇的彩虹 2(件) 详见采购文件 400.00 - 1-53 教学专用仪器 编钟 2(件) 详见采购文件 460.00 - 1-54 教学专用仪器 蛇摆 2(件) 详见采购文件 1,900.00 - 1-55 教学专用仪器 混沌摆 2(件) 详见采购文件 1,460.00 - 1-56 教学专用仪器 伽利略温度计 (10球) 2(件) 详见采购文件 1,180.00 - 1-57 教学专用仪器 碎片灯 2(件) 详见采购文件 520.00 - 1-58 教学专用仪器 蜡灯 2(件) 详见采购文件 520.00 - 1-59 教学专用仪器 斯特林发动机模型(低温热机) 2(件) 详见采购文件 700.00 - 1-60 教学专用仪器 斯特林发动机模型 2(件) 详见采购文件 1,140.00 - 1-61 教学专用仪器 克劳克斯辐射计 2(件) 详见采购文件 700.00 - 1-62 教学专用仪器 时空弯曲 2(件) 详见采购文件 280.00 - 1-63 教学专用仪器 激光内刻画 2(件) 详见采购文件 660.00 - 1-64 教学专用仪器 滴水视觉暂留 2(件) 详见采购文件 4,400.00 - 1-65 教学专用仪器 伽利略理想斜面演示器 5(套) 详见采购文件 820.00 - 1-66 教学专用仪器 电机原理说明器 5(套) 详见采购文件 970.00 - 1-67 教学专用仪器 克罗克斯辐射计 5(套) 详见采购文件 590.00 - 1-68 教学专用仪器 急救包 5(套) 详见采购文件 245.00 - 1-69 教学专用仪器 翻转环实验 5(套) 详见采购文件 1,140.00 - 1-70 教学专用仪器 纵横波演示器 5(台) 详见采购文件 650.00 - 1-71 教学专用仪器 音叉振动演示器 5(台) 详见采购文件 2,700.00 - 1-72 教学专用仪器 电源配线 200(根) 详见采购文件 2,000.00 - 1-73 教学专用仪器 热学实验室地板 100(平米) 详见采购文件 22,800.00 - 本合同包不接受联合体投标 合同履行期限:自合同签订之日起90日 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定: (1)具有独立承担民事责任的能力; (2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度; (3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力; (4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录; (5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录; (6)法律、行政法规规定的其他条件。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 无。 三、获取采购文件 时间: 2022年08月22日 至 2022年08月29日 ,每天上午 00:00:00 至 12:00:00 ,下午 12:00:00 至 23:59:59 (北京时间,法定节假日除外) 地点:内蒙古自治区政府采购网 方式:在线获取。获取采购文件时,需登录“政府采购云平台”,按照“执行交易→应标→项目应标→未参与项目”步骤,填写联系人相关信息确认参与后,即为成功“在线获取”。 售价: 免费获取 四、响应文件提交 截止时间: 2022年08月30日 09时30分00秒 (北京时间) 地点: 内蒙古自治区政府采购网(政府采购云平台) 五、开启 时间: 2022年08月30日 09时30分00秒 (北京时间) 地点:内蒙古自治区鄂尔多斯市康巴什区鄂尔多斯市公共资源交易中心政府采购不见面开标大厅(五楼开标八室) 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 无 八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称:鄂尔多斯市第一中学 地址:鄂尔多斯市康巴什区 联系方式:18647797875 2.采购代理机构信息 名称:鄂尔多斯市政府采购中心 地址:内蒙古自治区鄂尔多斯市康巴什区湖滨路(鄂尔多斯市公共资源交易大厦) 联系方式:8398694 3.项目联系方式 项目联系人:郝雯 电话:8398694 鄂尔多斯市政府采购中心 2022年08月22日 相关附件: 采购实验仪器谈判文件(2022081801).pdf
  • 细胞培养体系与培养条件
    细胞培养也叫细胞克隆技术,在整个生物工程技术领域,细胞培养都是一个必不可少的过程。目前主要有两种基本的细胞培养体系,一种是细胞在人工基质上单层生长(贴壁培养),另一种是细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。贴壁培养和悬浮培养的细胞无论在细胞形态和培养条件上有诸多不同。第一来源和形态不同: 悬浮细胞的生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,细胞大体呈球形或椭球型(见下图)。这类细胞一般为淋巴细胞等血液系统来源的细胞。悬浮细胞 贴壁细胞生长必须有可以贴附的支持物表面,依靠自身分泌的或培养基中提供的黏附因子才能爱表面生长和繁殖。细胞在未贴附于底物之前一般似球体样,当与底物贴附后,细胞将逐渐延伸展形成一定的形态(见下图)。贴壁培养细胞主要包括正常细胞和肿瘤细胞,比如成纤维细胞,骨骼组织(骨及软骨),心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞,内分泌细胞,黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。 上皮细胞型 成纤维细胞型 贴壁细胞与悬浮细胞在显微镜下的区别贴壁细胞分为两种,上皮细胞型和成纤维细胞型,在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形,而且晃动培养液时,细胞不动。悬浮细胞漂在培养液中,呈圆形,晃动培养液时细胞也随着漂动。 第二培养条件和方式不同: 贴壁细胞一般使用滚屏或T瓶进行培养。如果使用微载体,也可以用微载体培养瓶或生物反应器进行培养。 培养过程中的温度/湿度/CO2的环境条件控制,可由培养箱提供。 滚瓶机 微载体培养瓶 T瓶 悬浮细胞培养,可以使用小型细胞工厂、飞旋瓶、生物反应器进行培养。 细胞工厂和飞旋瓶培养中需要的温度/湿度/CO2的环境条件控制,可由培养箱提供。生物反应器自带条件控制功能。 小型细胞工厂Celline 飞旋瓶生物反应器 WIGGNS培养箱在设计之初就考虑了培养箱内部兼容用电设备。在具有传统培养箱的所有功能之外,WIGGENS CO2培养箱系列,采用了高效的循环系统保证了温度、CO2、湿度的均匀性。内置电源插孔设计,箱体内可以直接使用磁力搅拌器,摇床等用电设备。箱体右侧中部开孔,带硅胶塞,方便培养过程监控及对设备进行验证。箱体底部的导轨设计,可用于大型滚平机的推进和推出操作。加固隔板设计,实现了一机多能,灵活使用的特点。WIGGENS 二氧化碳培养箱
  • 全自动3D细胞培养的新标准
    自动化3D细胞培养、简化BIO CELLXCELLINK最新推出的自动化3D细胞生物学流程可促进肿瘤研究与药物研发的进展。▍升级自动化高通量、全自动的生物分配解决方案利用BIOPOD(按需生物打印)技术和预先设定和预先验证的协议,将 3D 细胞生物学的力量带到您的工作台上。▍易于操作该平台利用 BIOPOD 技术,将最先进的仪器与预先验证的内置协议和材料混合盒相结合,提供比市场上任何其他系统更易于使用的解决方案:即插即用-play用户体验。▍无细胞沉淀只需按一下按钮,墨盒就可以自动将细胞与水凝胶混合均匀。这种新方法可确保高细胞活力并自动中和胶原蛋白。▍轻松挤出水凝胶三个墨盒站中的每一个都提供从 0°C 到 60°C 的精确温度控制,可以轻松打印 ECM 水凝胶和胶原蛋白、GelMA 和 GelXA 等生物墨水。▍精确且可重复无论分配的材料如何,高精度正位移挤出系统每次都能提供可重复的结果。▍预先验证的协议,易于使用由科学家,为科学家使用预先验证的协议可以让您轻松制作 3D 细胞模型。预加载的详细计划涵盖从构造几何形状到生物材料选择再到分配设置的所有内容。此外,每个协议都包含上游和下游分析的分步说明,因此在您过渡到 3D 细胞培养时,您的工作流程中没有瓶颈。从系统上预加载的协议或作为基于云的更新提供的不断增长的协议数据库中进行选择。
  • 细胞培养,血清VS无血清!
    细胞在体外能够成功生长,培养基的选择及培养方法的优化十分关键。细胞在单纯的培养基中不能存活,各种类型的细胞培养中必须提供某些生长因子、黏附和伸展因子、微量元素等营养物质。传统培养基中一般会添加动物血清如牛血清等。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。其中胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。 血清培养的优势与局限采用天然来源的血清作为细胞培养添加物,优势在于提供丰富全面的细胞生长必需的营养,并且提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,调节其活性。结合蛋白还能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。血清还是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。但血清的使用也存在一定局限性。(1)血清可能含有细胞生长抑制因子和毒性因子,存在潜在毒性;(2)血清的获取成本高,价格较为昂贵;(3)血清由于成分不完全明确,给细胞培养的标准化带来困难,同时也给细胞表达目的产物纯化等下游操作带来困难。 无血清培养优势由于常规血清培养基存在上述问题,近年来无血清培养基越来越受到重视,其开发和应用渐成趋势。无血清培养基不含动物血清或其他生物提取液,仍可使细胞在体外较长时间生长、增殖或维持。无血清培养基可以针对特定的细胞类型配制专用的培养基,如爱必信生物研发推出的人间充质干细胞培养基,可以帮助精确地控制细胞的增殖和分化过程等。无血清培养基尤其应用于哺乳动物细胞的大规模工业培养。同时,它也是研究细胞生长、增殖、分化及基因表达调控的有力工具。无血清培养基具有以下优点:(1)其组成明确,可避免血清不同批次带来的质量变动,提高可重复性。(2)避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染风险。(3)避免血清不明组分对实验研究的影响。(4)有利于体外培养细胞的分化。(5)可提高细胞产物的表达水平并易于纯化。 所以,说了这么多,您是在进行细胞的常规有血清培养还是无血清培养呢?您更看好哪一方呢?爱必信生物提供优质、高性价比的血清产品,降低您的常规细胞培养成本! 货号 品名 规格 价格 abs972 胎牛血清(优级) 500ml 3465 abs973 胎牛血清(优级),辐照 500ml 3675 abs974 胎牛血清(标准级) 500ml 2541 abs975 胎牛血清(标准级),辐照 500ml 2751 abs993 无外泌体胎牛血清 50ml 2478 abs976 新生牛血清(超级) 500ml 2268 abs980 澳洲新生牛血清 500ml 1155 abs981 BHK细胞专用新生牛血清(特级) 500ml 1685 abs983 Vero细胞专用新生牛血清(特级) 500ml 1685 abs985 二倍体细胞专用新生牛血清(特级) 500ml 1685 abs987 CHO细胞专用新生牛血清(特级) 500ml 1685针对现今越来越旺盛的无血清培养需求,爱必信生物特研发推出无血清干细胞培养的全面解决方案:! 产品用途 货号 品名培养基 abs9401 Xeno-Free人间充质干细胞培养基(无酚红) abs9402 Xeno-Free人间充质干细胞培养基 abs9403 人多能干细胞条件培养基 abs9404 人多能干细胞完全培养基 abs9405 人多能干细胞分化培养基 abs9419 人脐带间充质干细胞无血清培养基(无酚红) abs9420 人脂肪干细胞无血清培养基(无酚红)基质胶 abs9410 即用型基质胶潜能分化 abs9406 人间充质干细胞成软骨分化试剂盒 abs9407 人间充质干细胞成脂分化试剂盒 abs9408 人间充质干细胞成骨分化试剂盒分化鉴定 abs9414 成脂检测染液 abs9415 成骨检测染液 abs9416 成软骨检测染液消化液 abs9409 人多能干细胞消化液 abs9411 Xeno-Free细胞消化液冻存液 abs9417 无血清细胞冻存液(科研级) abs9412 ES/iPS细胞冻存液 abs9413 无血清细胞冻存液(治疗级)添加物 abs9120 B27 NeuroMix (50x) abs44077956 Recombinant Human Transferrin重组人转铁蛋白更多细胞培养产品: 产品用途 货号 品名血清 abs972 胎牛血清(优级) abs973 胎牛血清(优级),辐照 abs974 胎牛血清(标准级) abs975 胎牛血清(标准级),辐照 abs976 新生牛血清(超级) abs980 澳洲新生牛血清 abs993 无外泌体胎牛血清抗生素 abs9245 青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗) abs9246 青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液(100×三抗) abs9244 青霉素-链霉素溶液(100×双抗) abs47014828 Hygromycin B(潮霉素B)消化液 abs47047375 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红 abs47014935 Accutase Cell Detachment Solution abs47014937 Trypsin (0.25%), Phenol Red abs47014938 Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol RedDMSO abs9187 二甲基亚砜(DMSO)(细胞培养级)添加物 abs9156 BSA(细胞培养级) abs42019847 Insulin重组人胰岛素 abs9169 Insulin, from Bovine Pancreas abs9119 Bovine Pituitary Extract (BPE) abs80002 鸡胚提取物Absin特色产品线(全部现货):WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)... 爱必信(上海)生物科技有限公司联系邮箱:info@absin.cn公众平台:爱必信生物
  • 气相分子吸收光谱法快速测定水中高锰酸盐指数
    第3 期2 0 1 1 年6 月N o . 3 J u n . 2 0 1 1 95 气相分子吸收光谱法快速测定水中高锰酸盐指数 赵建平 沈璧君 赵洋甬 胡建林 宁波市环境监测中心 浙江宁波 315010)摘 要 以亚硝酸盐作为还原剂,通过间接测定亚硝酸盐的方式,建立了水中的高锰酸盐指数的快速定量分析方法。水样中的高锰酸盐加硫酸氧化后,用亚硝酸盐进行还原,再用分子光谱吸收法测定亚硝酸盐,从而间接测定高锰酸盐指数。结果表明,方法的检出范围为0 ~ 9mg/L,检出限0.29mg/L, 平均回收率93.2 ~ 103.1%,相对标准偏差3.8 ~ 5.8% 不高于10%。该方法具有测定快速、准确度高、浊度影响少、所用试剂安全环保的特点,特别适合于应急、在线监测、流动注射领域的仪器的开发与使用。关键词 亚硝酸盐 高锰酸盐 气相分子吸收光谱法中图分类号 O657.3Rapid Determination of CODMn by Molecular Absorption SpectrometryZhao Jianping Shen Bijun,Zhao Yangyong,Hu Jianlin(Ningbo environmental monitoring center Ningbo Zhejiang 315010)Abstract This study describes a novel fast quantitative analysis method used nitrite as reductive agent for the detectionof Potassium Permanganate Index (CODMn). The acidulated permanganate in water was fi rstly deoxidized by nitrite.Subsequently, the concentration of nitrite was detected by molecular absorption spectrometry. Due to the reaction betweenpermanganate and nitrite, the readout signals were related to the concentration of potassium Permanganate Index. The resultsindicated a high sensitivity and stability with a detection limit of 0.29 mg/l (R.S.D.% was 3.8%~5.8%) and the recoverywas 93.2%~103.1% ranging from 0 to 9mg/l. The proposed method is rapid and accurate, few disturbances fr om theturbidity of the water and environm entally friendly. Taking into account these advantages, this method represents a promisingplatform for environmental emergency monitoring, on-line analysis and fl ow injection instrument exploitation and application.Key words Nitrite CODMn Molecular absorption spectrometry高锰酸盐指数为地表水体受有机污染物和还原性无机污染物污染程度的综合指标,是指在酸性或碱性的介质中以高锰酸盐为氧化剂处理水样时所消耗的氧,以氧的mg/L 来表示[1],一般采用水样被高锰酸盐氧化后用草酸钠还原,再用高锰酸盐滴定多余草酸钠的方法进行测定,对还原反应和加热氧化后高锰酸盐残留量有较高要求。采用本方法可以在常温的条件下进行多余的亚硝酸盐测定,由于浊度等对分子光谱吸收法影响极少[2],本方法特别适用浊度较大水体的高锰酸盐指数测定。1 检测原理水样加入硫酸呈酸性后,加入一定量的高锰酸盐溶液并在沸水浴(100℃)加热一定时间,剩余的高锰酸盐用亚硝酸钠还原并加入过量,再加入柠檬酸-乙醇溶液,在柠檬酸的介质中,加入乙醇为催化剂,将亚硝酸盐瞬间转化为NO2, 用载气载入气相分子吸收光管中,在213.9 纳米波长处测定吸光值。2 实验部分2.1 仪器与试剂分子吸收光谱仪(上海北裕公司),DG200 加热反应器(哈希公司)、高锰酸钾1/5KMnO4=0.01mol/L、1+3 硫酸、柠檬酸- 乙醇溶液,C=0.5mol/L 柠檬酸+10% 乙醇、以上试剂均为分析纯。2.2 试验方法取10mL 比色管,抽取样品5mL,加入0.5mL高锰酸钾,3mL 硫酸(1+3)于100° 温度DG200 加热反应器加热30 分钟,冷却后加入100mg/L 亚硝酸钠0.7mL, 反应3 ~ 5 分定容至25mL,波长收稿日期:2011-03-08基金资助:国家水专项水污染源应急监测技术体系研究(2009ZX07527-002-06)作者简介:赵建平(1971-),男,浙江宁波人,高级工程师96 Modern Scientific Instruments No . 3 Ap r . 2 0 1 0213.9nm 处,测定吸光度。2.3 工作条件锌空心阴极灯电流:2.5mA;工作波长213.9nm;氮气输入压力为0.2MPa;测量方法:峰高;积分时间2.0min3 结果与讨论3.1 还原剂的选择亚硝酸盐同高锰酸盐反应为无机反应中间产物少。分子吸收光谱法适用于海水地表水工业污水等各类水的测定,检出范围大[1]。3.2 酸度的选择消解完成后,按化学方程平衡计算,加入等摩尔亚硝酸盐(100mg/L)0.7mL 还原。经试验,消解后可直接进分子吸收光谱仪进行检测,高酸性对测定无明显影响。3.3 干扰的消除由于水样消解后水样中原有亚硫酸盐等还原性物质已被氧化,不影响测定;高锰酸盐等被亚硝酸盐等还原,浓度较低亦已不影响测定。3.4 工作曲线的制作取新配9.60 mg/L 高锰酸盐标准溶液0.0、0.5、1.0、1.5̷ 5.0,分别按实验步骤操作,测定吸光度并制作标准曲线,标准曲线为Y=0.0364x+5E-5,高锰酸盐指数的线性范围为0.0 ~ 9mg/L, 相关系数为0.999,检出限为0.29 mg/L,低于国标0.5mg/L。3.5 样品的检测及回收率与精密度取不同浓度标准溶液及样品各2 个,按实验方法进行检测,用标准曲线法求得高锰酸盐指数,结果见表1。表1 高锰酸盐指数的测定样品均值*/ug 加标量/ug 测定/ug 加标回收率*/% 相对标准偏差/%标准1(203138) 7.44 3.72 11.05 98.5 4.7标准2(203137) 2.38 2.38 4.79 101.3 3.8样品1 8.44 5.21 13.08 93.2 5.8样品2 3.20 4.22 7.52 103.1 4.2* 均平行测定5 次。3.6 不同分析方法的比较不同分析方法的比较,见表2。表2 不同分析方法的比较样品国标GB11892-89/(μ g/mL) 本法/(μ g/mL)标准1(203136)5 . 2 4 、5 . 6 2 、4 . 8 8 、5 . 5 8 、4.91、4.99、5.10、5.225.02、5.32、4.97、5.12、5.21、5.19、4.98、5.26标准2(203135)3 . 7 0 、3 . 6 9 、3 . 8 5 、3 . 9 2 、3.51、3.48、3.65、3.813.51、3.81、3.66、3.72、3.64、3.55、3.71、3.90样品18 . 3 0 、8 . 4 5 、8 . 4 6 、7 . 9 0 、7.96、8.01、8.25、8.468.34、8.47、8.20、7.96、8.02、8.41、8.12、8.26经t 检验,本法与国标监测结果无明显区别。4 结论采用DG200 加热反应器消解,用亚硝酸盐还原后,直接用分子吸收原子吸收光谱法进行测定的方法。具有测定快速、准确度高、浊度影响少、所用试剂安全环保的特点,特别适合于应急、在线监测、流动注射领域的仪器的开发与使用。参考文献[1]  国家环境保护总局等编. 水和废水监测分析方法(第四版),2002.223-224[2] 魏复盛,等. 水与废水监测分析方法指南(上册)[M]1997:225-240[3]  周天泽编著.化学分析测试中的干扰消除[M]. 首都师范大学出版社,1996,50[4]  海洋监测规范. 第四部分, 海水分析.GB/T17378.4-2007,101[5]  华东师范大学无机化学教研组等编著. 无机化学. 华东师范大学出版社,1997[6] 水质亚硝酸盐氮的测定. 分光光度法,GB/T 7493-1987
  • Science:仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面流体自主择向
    流体可控输运广泛存在于各种自然系统和实际工程中,在微流控、冷凝换热、抗结冰和界面减阻等领域具有广阔的应用前景。自从表/界面科学润湿性基础理论建立以来,国内外学者普遍认为,液体倾向于自发向系统能量降低的方向运动,其运动方向主要取决于表面结构特征和化学组成,与液体的性质无关。然而,液体能否决定其命运,在不改变表面结构和无能量输入的前提下实现运动方向的自主选择是长期以来困扰学者们的科学难题。近日,香港城市大学王钻开教授及其合作者借鉴南洋杉叶片多重悬臂结构特征,制备了仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面,通过建立3D固/液界面交互作用,实现流体运动方向的自主选择。该研究以“3D capillary ratchet-induced liquid directional steering”为题发表在国际顶级期刊Science上。大连理工大学冯诗乐副教授和香港城市大学朱平安助理教授为该论文共同第一作者,香港城市大学王钻开教授为该论文通讯作者。图1 南洋杉叶片及其仿生表面多悬臂结构特征。A 南洋杉叶片表面双重曲率结构特征,包括横向和纵向曲率。B仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面双重悬臂结构特征,单个锯齿厚度80 μm。要点:研究者借鉴南洋杉叶片结构特征,使用PμSL 3D打印技术(nanoArch S140,摩方精密),设计并制备了由平行排列的具有横向和纵向曲率的双重悬臂结构的锯齿阵列组成的仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面、具有对称垂直平面叶片结构的表面、具有倾斜平面叶片结构的表面和具有平行沟槽结构的表面。3D打印技术所使用树脂为丙烯酸光敏树脂,固化紫外光波长为405 nm,能量密度、曝光时间、曝光分辨率、打印层厚分别30 mW/cm²,1 s,10 μm,10 μm。叶片间距p为750 μm,列间距w为1000 μm,叶片倾斜角度为15 – 90°,纵向和横向的曲率半径R1和R2分别为~400 μm和~650 μm。图2南洋杉叶片及仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面流体输运性能。A酒精(红色)和水(蓝色)在南洋杉叶片上的运动行为。其中,酒精沿着锯齿结构倾斜的方向运动,而水沿着相反的方向运动。B低表面能液体和高表面能液体在仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面运动行为。要点:研究者发现,乙醇沿着南洋杉叶片表面锯齿结构倾斜的方向运动,而水沿着反方向运动,这种通过调控液体性质来控制其输运方向的现象尚未报道。受此启发,研究者研究了不同表面张力流体在仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面的输运性能。研究表明,该仿生功能表面展现出和南洋杉叶片相似的流体择向性能:低表面能流体沿着锯齿结构倾斜的方向运动,而高表面能流体沿着与锯齿结构倾斜相反的方向的运动。即使在长程输运和圆形表面上,流体依然保持良好的单向输运性能。图3 仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面流体自主择向机理。A/B低表面能液体和高表面能液体在仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面的铺展行为。C横向曲率结构悬臂效应力学分析模型。D流体打破结构扎钉效应的临界状态。E纵向曲率结构悬臂效应力学分析模型。F流体自主择向现象和表面结构及流体表面张力的关系。要点:研究者观察发现,液体在仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面铺展过程中,低表面能液体固/液界面展现自下而上的铺展模式,而高表面能液体展现自上而下的铺展模式。实际上,流体沿着特定方向的自发铺展需要满足两个临界条件:第一,流体能接触到相邻的锯齿结构;第二,流体前端受到的驱动力足够克服结构的扎钉效应。3D毛细锯齿结构的亚毫米尺度双重悬臂结构特征,能够调控不同表面张力流体两个临界条件的阈值,建立3D空间上非对称固/液界面相互作用,进而选择流体的铺展模式和铺展方向,实现液体运动方向的有效控制。这是仿南洋杉3D毛细锯齿结构表面流体自主择向的本质。该论文合作者包括香港城市大学机械工程系郑焕玺、李加乾,大连理工大学机械工程学院詹海洋、陈琛、刘亚华教授,香港城市大学生物医学科学系姚希副教授和香港大学机械工程系王立秋教授。论文链接: https://www.science.org/doi/10.1126/science.abg7552
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