牛血清白蛋白溶液标准物质

请问用高效液相色谱法检测牛血清白蛋白标准品（BSA），用什么柱子比较好？

最近在做公司产品含药量的释放情况，释放液是加了牛血清白蛋白的PBS液，释放后产品从释放液中取出，注射用水洗净后晾干。产品上残留药品再用乙酸乙酯超声洗脱，用UV测定乙酸乙酯中的药品浓度。因最近新换了牛血清白蛋白，后来实验数据与前比似乎有点偏低，怀疑产品上牛血清白蛋白没洗干净，对UV吸收有影响？牛血清白蛋白对UV吸光度值有什么影响呢？哪里有供应质量稳定的牛血清白蛋白？

[color=#444444]实验需要定量牛血清白蛋白（BSA）和溶菌酶（LYZ）混合溶液中各自的含量是多少，用的是安捷伦1260高效液相，色谱柱C-18，25cm，300A，流动相A 0.1%三氟乙酸水溶液。流动相B 0.1%三氟乙酸乙腈溶液，但是怎么走梯度都分不开啊，总是在间隔不到1分中出峰。求大神指点[/color]

有谁知道如何用牛血清白蛋白配制空白血浆？文献报道如下：Reconstituted plasma was prepared by dissolving 0.8 g of NaCl, 0.02 g of NaCl, 0.02 g of KH2PO4, 0.11 g Na2HPO4 and 4 g of bovine albumin (Sigma, St. Louis, MO, USA) in 100 ml of water.但是0.8 g of NaCl, 0.02 g of NaCl肯定有一个是重复的，哪位大侠知道如何配制啊

如果说一个人一次献血200ml，一亩转基因水稻产出的血清白蛋白量约等于300人献的血——转基因水稻胚乳可提取血清白蛋白——转基因水稻胚乳可提取血清白蛋白2012年09月01日 来源： 中国科技网 关注转基因 白蛋白供应紧张一直困扰着人类。我国每年需求150—160吨，全球每年需求量则高达500吨，由于血浆来源紧张，我国目前从血浆中提取量仅可供应1/3，其中2/3依赖进口。 2011年10月31日，武汉大学生命科学学院教授杨代常撰写的论文《利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白》在《美国科学院院报》发表，吸引了世界的目光。 文章用翔实的科学数据证明，植物来源的重组人血清白蛋白与临床使用的血浆来源血清白蛋白，无论是在生理生化性质，还是功能用途等方面，都具有高度的等同性。 为何这项研究引发种种关注？稻米血清白蛋白是否会危及生态及人身安全？其何时能用于临床治疗？……带着这些问题，记者采访了杨代常和他的团队。 “借腹生子”：从水稻胚乳中提取血清白蛋白 植物种子生物反应器，是将植物种子作为一个蛋白质“生产车间”，利用植物作为合成蛋白质的“机器”来合成人类所需的蛋白质。“通俗地解释，便是‘借腹生子’。”杨代常说。 国外从1989年已开始利用DNA重组技术生产血清白蛋白，但由于血清白蛋白产量低、纯化工艺复杂、生产成本远高于市场成本，始终无法进入市场。 杨代常带领研究团队，从水稻基因组数据入手，根据水稻种子储藏蛋白与血清白蛋白的生化性质差异，设计出从提取到纯化的一整套工艺方案，最大限度地提取血清白蛋白，最低限度去除种子的内源蛋白，成为一项原始创新的科研成果。 “具体来说，是由表达元件组成的载体，通过遗传工程整合到水稻基因组内，在种子特异性调控元件的指导下，水稻种子在成熟过程中也不断地合成和积累人血清白蛋白，然后通过规模化种植获得原料，再经过提取、纯化等步骤获得高纯度的血清白蛋白。”杨代常介绍，目前大约每亩水稻可以产生1.5—2公斤血清白蛋白，如果说一个人一次能献血200ml，一亩转基因水稻产出的血清白蛋白量约等于300人献血。 “天然屏蔽”：可杜绝肝炎、艾滋病毒等风险 植物源重组血清白蛋白优势明显，它来源于非动物，避免了各种病毒和病原菌的污染，并由于不受血浆供应限制，可无限量供应。但是转基因农业作物安全性向来争议不断，植物源血清白蛋白有望未来直接应用于人体中，有人担心会危及生态及人身安全。 对此，杨代常解释，首先，就人血清白蛋白本身安全性而言，血清白蛋白本就是人体的蛋白质，占血浆中蛋白的30%，是一种安全的蛋白质。目前，根据获取的数据，植物来源的人血清白蛋白从生物活性、分子结构和理化性质与血浆来源的人血清白蛋白完全一致，从水稻胚乳中提取的血清白蛋白可杜绝携带如肝炎病毒、艾滋病毒等风险。研究发现，人体对植物蛋白的耐受能力大于对细菌和酵母的耐受能力。从安全性考虑，已建立高纯度符合医药级别纯度的血清白蛋白。其次，就转基因生物安全而言，由于采取地理和时间双重隔离方法，要求比美国更为严格。第三，为杜绝进入食物链，在研究中采取了专用收割机、烘干机、稻米加工设备以及专用仓库等措施，建立了严格的监管规范，能做到可管可控和可追溯。 未来预期：进入临床需4至5年 从2005年始，杨代常自主研发的水稻胚乳细胞蛋白质高效表达技术平台，填补了国际上此项技术规模化生产的空白，已获美、日、欧盟以及我国的多项专利。 杨代常说，目前，植物源重组血清白蛋白的质量已达到非临床应用标准，可替代血源人血白蛋白用于细胞培养基添加剂，成为细胞培养中血浆来源的血清白蛋白的替代品；可减少培养基中胎牛血清的使用量；还可用于高纯试剂、细胞冷冻保护剂、医疗器械包埋剂、药物载体、化妆品组分、体外诊断等。 国外已在疫苗及生物医药产品的细胞培养的稳定剂上使用。我国按照国家药监局的要求，要通过临床研究后才能进入临床应用。 通过治疗大鼠肝硬化腹水对比，进行植物源重组血清白蛋白的药效研究，发现大鼠肝硬化腹水的治疗效果在降低腹围、增加尿量和尿蛋白量等指标优于血浆来源的血清白蛋白。 “植物源重组血清白蛋白正在进行临床前研究，已完成大部分的药学研究，预计在2013年上半年可望完成临床前研究；预计进入临床研究至少需要2年时间，进入临床应用至少需要4—5年或更长的时间，这取决于临床研究的结果与进度以及国家的法规。”杨代常说。 从实验室走向产业化 去年年初，杨代常带着多年的研发成果，入驻武汉东湖国家自主创新示范区光谷生物城，一年内实现了项目产业化。 “这一过程我们走得很艰难。”杨代常说，为了让投资者更有信心，他在商业模式上从长中短期产品计划入手，将技术做好做精。在科技部转基因重大专项、国家863计划和武汉东湖国家自主创新示范区光谷生物城的支持下，加速了项目产业化进程。 “我国生物产业要走在世界前列，在心理上要打破‘奴性’思维，在政策上要突破传统观念，要敢做别人不能做或不敢做的事情。”杨代常说，“现在一谈到转基因，很多人就‘谈虎色变’。实际上，理解上存在很多误区。转基因技术是通过遗传工程的手段，将人类需要的基因（一段DNA片段）导入到植物或任何一种生物的一项高科技技术，是人类由必然王国走向自由王国的必由之路。” 近日，杨代常的科研团队又传出喜讯，在水稻中“种”出了“人抗胰蛋白酶”。目前，重组抗胰蛋白酶与重组血清白蛋白一样，有效地避免人血液中病毒病原菌感染的风险，但需要进行一系列的免疫原性、急性、毒性等相关实验和临床研究后，方能应用于临床。 杨代常透露，未来，其团队研发重心将着重原创性技术研究，建立单克隆抗体的表达平台，使我国的单克隆抗体药物的价格降到5万元左右，重组血清白蛋白进入临床应用。（记者 马爱平） 《科技日报》（2012-09-01 三版）

想通过HPLC建立牛血清白蛋白（BSA）的标准曲线，分别用了甲醇和水 1：1、乙腈和水 1：3， 两种流动相，但是出现奇怪的现象是两种情况出峰时间基本相同，都是在3min左右出的峰，峰高很低都是0.004左右，是不是流动相有问题，还是其他什么原因？ 用的柱子是waters 4.6*250mm ODS2请高人指点。

荧光光谱研究阿司匹林键联金属卟啉与牛血清白蛋白的相互作用

[font=宋体][font=宋体]重组人血清白蛋白（[/font][font=Calibri]Recombinant Human Serum Albumin[/font][font=宋体]，简称[/font][font=Calibri]rHSA[/font][font=宋体]）是一种通过基因工程技术合成的白蛋白。其结构和功能与天然人血清白蛋白相似，因此可以作为血浆替代物，适用于临床治疗、细胞培养和生物技术领域的研究等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]人血清白蛋白是一种由[/font][font=Calibri]585[/font][font=宋体]个氨基酸组成的单链蛋白质，分子量为[/font][font=Calibri]66.5kDa[/font][font=宋体]，含有[/font][font=Calibri]17[/font][font=宋体]个二硫键和一个自由半胱氨酸。人血清白蛋白的结构包括三个结构上相似的功能域，而每个功能域又可分为包含两个相似的α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]螺旋结构的亚域，形成了一个心型分子。[/font][/font][b][font=宋体]人血清白蛋白在人体内负责许多细胞功能，如：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]维持胶体渗透压，调节体液平衡[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]结合和运输脂肪酸，胆红素和药物等各种物质[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]通过清除自由基和活性氧作为抗氧化剂[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]调节血液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和缓冲能力[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]调节免疫反应和炎症[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]提供配体代谢修饰，使潜在的毒素无害等[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]人血清白蛋白的用途与重要性[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]人血清白蛋白在医学领域的应用广泛，涉及治疗多种疾病和病症。其用途包括但不限于：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]治疗多种疾病：血容量不足、休克、烧伤、手术失血、外伤、出血、体外循环、急性呼吸窘迫综合征等。[/font][font=宋体]支持肝功能：急性与慢性肝病的治疗中，人血清白蛋白有助于肝功能恢复。[/font][font=宋体]营养支持：为患者提供必要的营养。[/font][font=宋体]蛋白质与肽的半衰期延长：有助于药物研发中延长蛋白质和肽的活性时间。[/font][font=宋体]细胞培养中的应用：在细胞培养中，人血清白蛋白的作用包括限制细胞聚集、保护蛋白质免于降解、结合与运输代谢物以及增加疏水分子溶解度。它还能增强培养中细胞的生长和活力，提高重组蛋白的产量和质量。[/font][font=宋体]生物反应器中的用途：在生物反应器中，人血清白蛋白用于减轻物理冲击和剪切，保护细胞。[/font][font=宋体]全球需求增长：随着其在生物学领域的广泛应用，全球对人血清白蛋白的需求逐年增加。[/font][font=宋体]人血清白蛋白的供应挑战与重组人血清白蛋白的发展[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]由于人血清白蛋白的多种重要用途，其全球需求持续增长，但供应却面临挑战：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]供应有限：传统上，人血清白蛋白是通过人类血浆分馏生产的，受限于血浆供应。[/font][font=宋体]原材料的不一致性：这可能影响患者安全、治疗效果，并存在潜在的血液来源病原体污染风险。[/font][font=宋体][font=宋体]重组人血清白蛋白的兴起：鉴于上述挑战，科学家们努力开发重组人血清白蛋白（[/font][font=Calibri]Recombinant Human Serum Albumin, rHSA[/font][font=宋体]）。多个宿主生物（如大肠杆菌、酵母等）被尝试用于生产重组蛋白，最终基于毕赤酵母和水稻的表达系统成为主要选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service][b]重组蛋白表达纯化服务[/b][/url]，[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-productio][b]重组蛋白生产[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队从2006年开始进行植物源替代血浆来源的医药蛋白的研究与开发，现已取得突破性进展并已跨入规模化生产的阶段，填补了国际上此项技术空白。相关论文“Large-scale production of functional human serum albumin from transgenic rice seeds ”(利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白)于2011年10月31日在线发表于《美国科学院院报》( PNAS ) 。该论文在线之际，受到国外Scientist ， Nature news , The Australian , Thomson Reuters, Fox News , Agence France Presse (AFP法新社) 等美国、英国、俄罗斯、德国、巴西、印度各专业杂志及媒体的广泛关注和报道。该研究表明由转基因水稻种子生产的重组人血清白蛋白(OsrHSA)在生理生化性质、物理结构，生物学功能、免疫原性与血浆来源的人血清白蛋白一致；并建立了大规模生产重组人血清白蛋白的生产工艺，获得了高纯度和高产量重组人血清白蛋白产品。利用大量数据证明了转基因水稻种子可取代现有基于发酵的表达技术来生产重组蛋白质是经济有效的。正如PNAS 审稿人对该文章的评价：“这篇文章解决了在科学上振奋人心、在经济上都非常重要的议题－－即用转基因植物生产血浆产品或其他蛋白产品的技术平台，可代替其他基于发酵的表达技术，其重要性也不言而喻……这篇文章近乎完美地证实了植物生产的医药蛋白和批准临床使用的血浆来源医药蛋白是完全相同的，并提供了翔实数据证明植物系统规模化容易和成本优势。”目前，人血清白蛋白(human serum albumin)广泛应用于临床治疗和细胞培养领域。常见的人血清白蛋白大多数从人的血浆中提取，这样的生产方式不仅受到血浆供应的限制，而且还具有携带病毒传播的高风险性。国际上以重组人血白蛋白替代血源产品的应用已成为趋势，国内市场需求也逐年扩大，2010年已达150吨。尽管市场广阔，但高纯度重组人血白蛋白的规模化生产技术和质量控制技术却是世界性难题。武汉禾元历经多年的技术攻关，利用水稻胚乳表达技术平台，研发出国际先进水平的重组人血白蛋白产品生产技术，并成功实现重组人血白蛋白规模化和产业化，完全摆脱了相关制约，具有纯度更高、无动物组分、安全、高效、绿色环保、廉价、无限量供应等优势。随着植物源重组人血清白蛋白的发展，我国人血清白蛋白日益紧张的局面必将得到缓解。详细论文，请点击下载：http://www.oryzogen.com/category/22/2011-11-01/93315359.html注：《美国科学院院报》(Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 缩写 PNAS，ISSN：0027-8424)是被引用次数最多的综合学科文献之一。它是美国科学院的院刊。自1914年创刊至今，PNAS提供具有高水平的前沿研究报告、学术评论、学科回顾及前瞻、学术论文以及美国国家科学学会学术动态的报道和出版。PNAS收录的文献涵盖生物、物理和社会科学，2008年的影响因子为9.38，2009年影响因子为9.432, 2010年影响因子为9.771。在SCI综合科学类排名第三位，因而已成为全球科研人不可缺少的科研资料。

【百度百科】牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。CAS：9048-46-8希望知道的板油介绍一下

各位前辈，大虾，小弟先***！我第一次做这种实验，目的是想把一种极低浓度的蛋白溶液中的蛋白浓度测出来。查了资料，认为folin-酚法比较适合。文献报道说该法的检查限最低能到5 μg/ml。按照中国药典第三部lowry法测蛋白含量，我拿牛血清白蛋白标准品配了一个50 μg/ml的浓度和5 μg/ml的浓度。50 μg/ml的浓度的样品，能显出蓝色，但不深。5 μg/ml的浓度基本都不显示，跟空白一样。可见光检测，5 μg/ml的浓度与空白的吸收值基本一致。且为负值。问题：1、请问该法，在5 μg/ml的浓度时，是否还能显出蓝色，至少肉眼能分辨出来。2、50 μg/ml的浓度时，显出的颜色淡还是深，可见光吸收大概是多少？3、我的操作可能出现哪些问题，影响实验结果。谢谢，前辈、大虾、学长们啦！小弟贵球！！！！！

稀土离子铈(Ⅳ)[color=red]分子荧光[/color]光谱法测定血清白蛋白的含量

各位前辈，大虾，小弟先***！我第一次做这种实验，目的是想把一种极低浓度的蛋白溶液中的蛋白浓度测出来。查了资料，认为folin-酚法比较适合。文献报道说该法的检查限最低能到5 μg/ml。按照中国药典第三部lowry法测蛋白含量，我拿牛血清白蛋白标准品配了一个50 μg/ml的浓度和5 μg/ml的浓度。50 μg/ml的浓度的样品，能显出蓝色，但不深。5 μg/ml的浓度基本都不显示，跟空白一样。可见光检测，5 μg/ml的浓度与空白的吸收值基本一致。且为负值。问题：1、请问该法，在5 μg/ml的浓度时，是否还能显出蓝色，至少肉眼能分辨出来。2、50 μg/ml的浓度时，显出的颜色淡还是深，可见光吸收大概是多少？3、我的操作可能出现哪些问题，影响实验结果。谢谢，前辈、大虾、学长们啦！小弟贵球！！！！！

[size=4]我正在做一种生物碱与[/size][size=3][font=宋体]牛血清白蛋白（BSA）结合作用的荧光光谱研究，需要求算[/font][/size][size=3][font=宋体]生物碱分子的紫外光谱与牛血清白蛋白（BSA）[/font][/size][size=3][font=宋体]荧光发射光谱的重叠积分，以便求算药物分子与BSA结合的距离，文献上说明可以采用矩形分割法求出两光谱重叠区域的积分值，但用何软件如何求算我还不会。肯请此间高人出手指点，不胜感激！最好能将方法发到我的邮箱[email]zhongming2613@163.com[/email] 谢谢！[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003121811_205351_1889038_3.gif[/img][/font][/size]

β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分？最近看到有两种版本，其一，说是属于乳白蛋白里面的一种成分，乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二，乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白，乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对，请各位指教！！！谢谢！！！

2 hours before use. (将重悬液在4 ℃ 静置2小时以上)第 3 步：该重悬液在 2-8 ℃ 最长可保存 1 周。用说明书上推荐的溶液将细胞因子或重组蛋白重悬到推荐的浓度后，细胞因子或重组蛋白可放置在2-8 ℃ ，即冰箱的冷藏室。在这种条件下，细胞因子或重组蛋白的活性最长可保持1周。这对一个周期为5-7天的实验，如DC(树突状细胞)的诱导成熟是足够的。在此期间，只要每次从冰箱里吸取一定量的细胞因子或重组蛋白溶液加入到培养体系内即可。其实，说明书上推荐的浓度对于一般的实验来讲是比较高的。所以用户通常会将该溶液进一步稀释后再放在4 ℃ 保存，待1周内用完。如进行稀释，必须遵照下面第4步的方法，即需用含载体蛋白的溶液进行稀释，否则稀释后的细胞因子或重组蛋白很容易会粘附在管壁或瓶壁上，使得溶液中的细胞因子或重组蛋白的浓度下降，细胞因子或重组蛋白的总活性则大为减弱。第 4 步：如要长期保存，则需用含载体蛋白 ( 如 0.1% BSA ，或 10% FBS ，或 5% HSA) 的溶液进一步稀释，然后分装冻存于 -20 ℃ 至 -80 ℃ 。如果一个实验周期长于一周，或配制的细胞因子或重组蛋白一次用不完，我们就需对细胞因子或重组蛋白进行长期保存。方法是：将已重悬的细胞因子或蛋白用含载体蛋白，如0.1% BSA(牛血清白蛋白)，10% FBS(胎牛血清)，5% HSA(人血清白蛋白)的溶液将重悬液进一步稀释，然后分装冻存于-20 ℃ 至-80 ℃ ，即常规冰箱的冷冻室或超低温冰箱中。问：经常有人会在细胞因子或重组蛋白冻干粉用推荐的溶液重悬后直接分装冻存于-20 ℃ 至-80 ℃ ，这样可以吗? 答：不行。我们知道，塑料管壁对多数蛋白均有很好的吸附作用，也就是说溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。粘附后，蛋白是很难与管壁分离的。做过ELISA实验的人都知道，ELISA的包被抗体(Capture antibody)就是通过这种粘附作用包被到酶标板上的。载体蛋白，如1% BSA，10% FBS (胎牛血清)和5% HSA等的主要作用是预先封

用纯水配制了溶液，含有30mg/L的海藻酸钠，5mg/L的牛血清蛋白，5mg/L的富里酸。测定了TOC为10左右，放置了一天，TOC降低1，再放一天，TOC又降低1，放置几天后，TOC值连续降低，想问问这个溶液中是哪种物质会引起TOC的改变?是不是因为水中滋生微生物导致水质变差，但是为什么TOC会升高呢？

各位大神，最近在册牛血清蛋白标准曲线，资料上显示说，牛血清蛋白与考马斯亮蓝结合之后在595 nm处显示最大吸收，可是为什么我用紫外扫谱发现在578 nm处才是最大吸收，但是测出来的不同浓度的吸光度线性关系也不好，排出紫外检测器的问题，到底是什么原因呢？？？？

《从稀释水溶液中萃取和浓缩蛋白质》（Extraction and Concentration of Protein from Dilute Aqueous Solution）应用领域：生物/生物科技目标分析物：牛血清白蛋白BSA样品基质：水萃取柱：BAKERBOND spe™ Wide-Pore Butyl (C4), 500 mg, 6 mL安全防护设备：护目镜和防护面罩，手套，实验服，B型灭火器，通风橱样品制备：配置20mL BSA溶液（1mg/1mL），以0.025M pH=7磷酸缓冲溶液为溶剂小柱活化：加入10mL甲醇活化，5mL 0.5M pH=7磷酸盐缓冲溶液活化，6mL 0.025M pH=7磷酸盐缓冲溶液平衡，保持过程中小柱始终处于润湿状态上样与清洗：关闭真空泵，加入5mL 0.025M pH=7磷酸盐缓冲溶液，装上75mL储液器，缓慢抽出20mL的样品，用4mL0.025M pH=7磷酸盐缓冲溶液淋洗，移去储液器洗脱：用2 X 0.5mL 异丙醇：水：三氟乙酸 60:40:0.1，收集洗脱液分析方法：UV您也可以点击下载英文原版应用文献：http://jtbaker.instrument.com.cn/down_172268.htm

最近采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺，不知各位有否这方面的经验，能否相互交流一下样品预处理条件和色谱条件，谢谢！我有以下两个问题，希望大家能分享经验，谢谢大家。1、 标准曲线的建立方面，目前报道的文献大多采用溶液直接进样的方式，对于这种方法我有一点疑问：临床实际样品在处理过程中会有一个提取回收率的问题，当待测物与内标的提取回收率相同的时候，采用溶液直接进样的方式制备标准曲线或许可行，但事实上两者的提取回收率很有可能不一样（因为空白血浆不易获得，这一点无从考证），那么采用这种方法制备标准曲线的话，得到的结果肯定是不可靠的。但是我查了很多文献，包括国外的，大都采用这种方法，希望各位专家能给予指点。此外，也有一篇文献采用牛血清白蛋白配制模拟血浆来当作空白血浆，在将标准品加入其中，按照实际血浆样品处理过程同法处理来制备标准曲线。另外有文献将实际血浆用氧化铝吸附处理后的血浆当作空白血浆来制备标准曲线，但是操作很繁琐。个人觉得可以用牛血清白蛋白配制模拟血浆比较可行，但是毕竟改基质与实际的血浆不一样，这种操作是否切实可行，希望各位专家给予指点。2、 稳定性方面：大部分文献表明儿茶酚胺在室温很不稳定（但也有文献说很稳定），目前配制储备液的方法主要有以下几种：1）直接用水配制2）加盐酸3）加高氯酸，关于稳定性方面，不知各位有何经验分享。

坛墨质检-国家标准物质中心国内最大最专业的国家标准物质服务平台坛墨质检-国家标准物质中心http://www.gbw-china.com（坛墨质检-国家标准物质中心（北京坛墨质检科技有限公司））成立于2007年6月19日，公司前身是北京北化恒信生物技术有限公司，。坛墨质检-国家标准物质中心（北京坛墨质检科技有限公司），是国家质检总局指定的国家标准物质研制单位，是国内最大最专业的食品、环境、职业卫生标准物质生产商和服务商。GBW13120 氯化钾电导率标准物质,有证书 GBW13202 铟-热分析标准物质,有证书 GBW13203 摩尔热容a-Al2O3标准物质,有证书 GBW13204 复合固体推进剂燃速标准物质,有证书 GBW(E)080227 水中氮氧化物溶液标准物质,有证书 GBW(E)080229 水硬度标准物质,有证书 GBW(E)080332 水中氨氮纯度标准物质,有证书 GBW(E)080333 水中氨氮纯度标准物质,有证书 GBW(E)080335 水中钙镁纯度标准物质,有证书 GBW(E)080336 水中钙镁纯度标准物质,有证书 GBW(E)080337 水中钙镁纯度标准物质,有证书 GBW(E)080338 水中氟化物纯度标准物质,有证书 GBW(E)080339 水中氟化物纯度标准物质,有证书 GBW(E)080340 水中氟化物纯度标准物质,有证书 GBW(E)080445 全盐量标准物质,有证书 GBW(E)080446 全盐量标准物质,有证书 GBW07409 土壤成分标准物质,有证书 GBW07410 土壤成分标准物质,有证书 GBW07411 土壤成分标准物质,有证书 GBW08301 河流沉积物成分分析标准物质,有证书 GBW08303 污染农田土壤成分标准物质,有证书 GBW08306 模拟黄沙纯度标准物质,有证书 GBW08307 土壤中多氯联苯成分标准物质,有证书 GBW08401 煤飞灰成分分析标准物质,有证书 GBW08402 煤飞灰中氟成分标准物质,有证书 GBW08403 煤飞灰中多环芳烃成分标准物质,有证书 GBW08501 桃叶纯度标准物质,有证书 GBW08502 大米粉成分标准物质,有证书 GBW08505 茶叶成分标准物质,有证书 GBW08508 大米粉中汞成分标准物质,有证书 GBW08513 茶叶成分标准物质,有证书 BW3627-5 牛血清白蛋白溶液标准物质,有证书 GBW08624 化学需氧量（耗氧量）标准物质(COD Cr),有证书 BW3627-4 牛血清白蛋白溶液标准物质,有证书 BW3627-3 牛血清白蛋白溶液标准物质,有证书 需干冰运输GBW01107 生铁成分分析标准物质,有证书 GBW01428 钨铁成分分析标准物质,有证书 GBW01108 生铁成分分析标准物质,有证书 GBW(E)082087 化学需氧量（CODCr）测定仪检定用标准溶液,有证书 GBW08701 甲醇中苯并芘溶液标准物质 CAS:50-32-8GBW08702 甲醇中苯并芘纯度标准物质,有证书 CAS:50-32-8坛墨质检现有员工68人，办公室面积450平米，销售、客服、财务及行政人员35人，实验室650平米，标物制备、产品质检、国标文件管理共计21人，实验仪器设备：气相色谱、液相色谱、气质联用、液质联用、离子色谱、紫外分光光度计，原子吸收、ICP-OES和ICP-MS；库房面积450平米，库房工作人员12人，现货产品5万个，坛墨质检自主研发的产品近3000个，已申报国标256项，填补国内空白的产品达到65项。坛墨质检是国内唯一提供标准溶液定制服务的标准物质研制单位，定制范围：特殊浓度定制、特殊溶剂定制、混标定制。坛墨质检-国家标准物质中心 官网：http://www.gbw-china.com，http://www.gbw114.org全国免费客服：4008-099-669，直线电话：010-52889047/9048/9049，52833007/3008/3009公司地址:北京市亦庄开发区同济中路7号兴盛国际大厦B521，欢迎莅临指导！http://www.gbw-china.com/show_details.asp?ids=100265&nid=14

请教：双缩脲反应测定蛋白质含量时，绘制标准曲线时需要标准蛋白溶液，标准蛋白溶液要用什么蛋白质？我见有用酪蛋白的，可以用胶原蛋白吗？谢谢……

体积排阻色谱分离蛋白质，分子量范围100万~1万，其中有分子量47000的组份，要分析分子量68000的杂蛋白含量，采用TSK4000SW,长度为60厘米的色谱柱，分离分子量68000与47000的2个组份，分离度在0.9~1.0左右，分离度达不到1.5，有什么方法解决？

人血白蛋白多聚体测定法本法系用分子排阻色谱法测定人血白蛋白多聚体含量。照分子排阻色谱法（附录Ⅲ D）测定。色谱条件与系统适用性试验 用亲水硅胶高效体积排阻色谱柱（SEC，排阻极限300kD，粒度10μm），柱直径7.5mm,长60cm；以含1％异丙醇的pH7.0 0.2mol/L磷酸盐缓冲液为流动相；检测波长为280nm ；流速为每分钟0.6ml。取每1ml含蛋白质为12mg 的人血白蛋白溶液20μl，注入色谱柱，记录色谱图,人血白蛋白单体峰与二聚体峰间的分离度应大于1.5，拖尾因子按人血白蛋白单体峰计算应为0.95～1.40。测定法 取供试品适量，用流动相稀释成每1ml约含蛋白质12mg的溶液,取20μl，注入色谱柱，记录色谱图60分钟（色谱柱长60cm）。按面积归一法计算，色谱图中未保留（全排阻）峰的含量(%)除以2，即为人血白蛋白多聚体含量请教：为何除以2呢？很奇怪呀

坛墨质检-国家标准物质中心国内最大最专业的国家标准物质服务平台坛墨质检-国家标准物质中心www.gbw-china.com（坛墨质检-国家标准物质中心（北京坛墨质检科技有限公司））成立于2007年6月19日，公司前身是北京北化恒信生物技术有限公司，。 坛墨质检-国家标准物质中心（北京坛墨质检科技有限公司），是国家质检总局指定的国家标准物质研制单位，是国内最大最专业的食品、环境、职业卫生标准物质生产商和服务商。BW3711 金枪鱼中14种有机氯农药标准物质,有证书GBW10042 鱼油中7种PCBs标准物质,有证书GBW10040 三文鱼中7种PCBs标准物质,有证书BW3714 土壤中7种PCBs标准物质（低含量）,有证书BW3715 土壤中7种PCBs标准物质（高含量）,有证书GBW10041 金枪鱼中7种PCBs标准物质,有证书BW3719 乙酸乙酯中3-氯-1,2-丙二醇溶液标准物质,有证书BW3720-1 甲醇中多氯联苯溶液,有证书 52663-68-0BW3819 异辛烷中PCB118溶液，有证书BW3820 异辛烷/甲苯中PCB103溶液标准物质，有证书BW3821 异辛烷/甲苯中PCB52溶液标准物质，有证书BW3822 异辛烷中PCB15溶液标准物质，有证书BW3823 异辛烷中PCB28溶液标准物质，有证书BW3824 异辛烷/甲苯中PCB209溶液标准物质，有证书BW3825 异辛烷/甲苯中PCB101溶液标准物质，有证书BW3826 异辛烷中PCB204溶液标准物质，有证书BW3827 甲苯/异辛烷中PCB180溶液标准物质,有证书BW3828 异辛烷中PCB138溶液标准物质,有证书BW3829 异辛烷中PCB153溶液标准物质,有证书BW3830 异辛烷中PCB105 溶液标准物质,有证书CNAST0399 RoHs检测用聚丙烯中PbHgCdCr,有证书CNCA-2007-B11 果珍中的除虫菊酯检测标物,有证书CNCA-2007-B1-2 果珍中的除虫菊酯检测样品,有证书SJ002 窄分布聚苯乙烯标物试用样,有证书SNH001 扩散管标准物质,有证书GBW08607-1 水中镉、铬、铜、镍、铅、锌纯度标准物质,有证书SNH003 挥发性有机物吸收管标准物质,有证书BW3627-1 牛血清白蛋白溶液标准物质,有证书BW3627-2 牛血清白蛋白溶液标准物质,有证书GBW(E)130246 气相色谱\质谱联用仪校准用标准物质(异辛烷中六氯苯溶液),有证书 118-74-1GBW08551 猪肝成分标准物质,有证书GBW(E)081059 甲醇中三氯乙烯溶液标准物质,有证书 1979-1-6GBW(E)081057 甲醇中一溴二氯甲烷溶液标准物质,有证书 75-27-4GBW(E)081058 甲醇中二溴一氯甲烷溶液标准物质,有证书 124-48-1GBW(E)081056 甲醇中1,2-二氯乙烷溶液标准物质,有证书 107-06-2BW3434 异辛烷中六氯苯溶液标准物质,有证书 118-74-1BW3433 异辛烷中1,2,4-三氯苯溶液标准物质,有证书 120-82-1GBW(E)130367 渗透压摩尔浓度标准物质,有证书GBW12024-GBW12026 二氧化铈微球粒度标准物质,有证书GBW09170 冰冻人血清肌酐成分标准物质,有证书GBW09168 BSA基质中乳酸脱氢酶标准物质,有证书GBW09167 BSA基质中肌酸激酶标准物质,有证书GBW(E)081879 食品包装材料检测用重金属溶液标准物质,有证书GBW(E)081878 食品包装材料检测用重金属溶液标准物质,有证书GBW(E)081877 食品包装材料检测用重金属溶液标准物质,有证书GBW(E)081876 食品包装材料检测用重金属溶液标准物质,有证书GBW(E)081875 食品包装材料检测用重金属溶液标准物质,有证书GBW(E)081874 食品包装材料检测用重金属溶液标准物质,有证书坛墨质检现有员工79人，办公室面积450平米，实验室650平米；销售、客服、财务及行政人员35人，实验室工作人员21人，库房14人，市场部8人。实验仪器设备：气相色谱、液相色谱、气质联用、液质联用、离子色谱、紫外分光光度计，原子吸收、ICP-OES和ICP-MS；库房面积450平米，库房工作人员12人，现货产品5万个，坛墨质检自主研发的产品近3000个，已申报国标345项，填补国内空白的产品达到65项。坛墨质检是国内唯一提供标准溶液定制服务的标准物质研制单位，定制范围：特殊浓度定制、特殊溶剂定制、混标定制。坛墨质检-国家标准物质中心 官网：www.gbw-china.com，www.gbw114.org全国免费客服：4008-099-669，直线电话：010-52889047/9048/9049，52833007/3008/3009公司地址:北京市亦庄开发区同济中路7号兴盛国际大厦B521，欢迎莅临指导！

一、原理：本法系依据特异性抗体（免疫球蛋白）F a b段与红细胞上已包被的相应抗原结合，抗体暴露出F c段补体Clq的结合位点，从而激活后续的补体各成分，最终导致红细胞的细胞膜受到攻击、破裂，释放出血红蛋白。通过溶血反应动力学曲线，计算人免疫球蛋白激活补体活性的功能指数（4 ) ，以此测定供试品F c段生物学活性。二、试剂（1) P B S (pH7.2) 称取无水磷酸氢二钠1.02g,无水磷酸二氢钠0.34g、氣化钠8.77g，加适量水溶解，用lmol/L氢氧化钠溶液或盐酸溶液调p H 值至7.2，再加水稀释至1000ml。( 2 )钙-镁贮备液 称取氯化钙1.10g、氯化镁5. 0 8 g ,加水25ml使溶解。( 3 )巴比妥-钙镁贮备液称取氯化钠51.85g、巴比妥钠6.37g，加水1000ml使溶解，加人钙-镁贮备液3.125ml，用lmol/L盐酸溶液调p H 值至7. 3，再加水稀释至1250ml。除菌过滤后4°C保存备用。( 4 )牛白蛋白-巴比妥缓冲液称取牛血清白蛋白0. 15g加入巴比妥-钙镁贮备液20 m l中，加水溶解并稀释至100ml。临用前配制。(5) 1. 3mg/L 鞣酸 P B S (pH7. 2) 溶液A 液称取鞣酸l m g ,加PBS (pH7.2) 10ml，使溶解。B 液量取 A 液 0.1ml，加 F*BS (pH7. 2) 7.5ml，混匀，即得，临用前配制。(6) 10%氯化铬溶液称取氯化铬5g，加生理氯化钠溶液50ml使溶解。4°C保存（可保存半年）。(7) 1 % 氯化铬溶液取1 0 %氯化铬溶液0. lml，加生理氯化钠溶液0.9ml，混匀。临用前配制。（8）敏化红细胞的制备A 液取健康人抗凝的O 型血3 人份以上混合，用P B S 洗涤3 次，最后一次以每分钟2 0 0 0转离心1 0分钟分离红细胞。取适量压积红细胞悬浮于1 . 3 m g / L鞣酸P B S(1 : 4 0 ) , 置3 7 ° C水浴中轻摇3 0分钟后再用P B S 洗涤3次，最后用P B S 制备成2. 5 % 红细胞悬浮液。B 液用P B S适当稀释的白喉类毒素或腮腺炎病毒与1 % 氯化铬溶液0.25ml混合（1 0 : 1 ) 后，置37°C水浴中轻摇1 5分钟。将A 液、B 液按1 : 4 混合，置37°C水浴中轻摇3 0分钟。离心，去上清液，用P B S将沉淀（敏化红细胞）洗涤3 次，用牛白蛋白-巴比妥缓冲液悬浮红细胞，调节至适宜浓度，使其在波长5 4 1 n m处的吸光度为1.0土0. 1。

谁有三羟甲基氨基甲烷、人血白蛋白的质量标准啊，最好是国家标准PDF。谢谢

测蛋白时，用盐酸标准溶液滴定好，还是选择硫酸标准溶液合理？