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汉逊德巴利酵母汉逊变种

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汉逊德巴利酵母汉逊变种相关的论坛

  • 【原创】酵母葡聚糖

    β-葡聚糖的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖,它们大多数通过β-1,3结合,这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等,因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量,全面刺激机体的免疫系统。那么,机体就有更多的准备去抵抗微生物引起的疾病。β-葡聚糖能使受伤机体的淋巴细胞产生细胞因子(IL-1)的能力迅速恢复正常,有效调节机体免疫机能。大量实验表明,β-葡聚糖可促进体内IgM抗体的产生,以提高体液的免疫能力。这种葡聚糖活化的细胞会激发宿主非专一性防御机制,故应用在肿瘤、感染病和治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素的β-1,3-葡聚糖在美国FDA已认定是一种安全的物质,可添加在一般食品,许多报导显示老鼠口服酵母β-1,3-葡聚糖,可增加强腹膜细胞抗菌之吞噬作用。酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种具有增强免疫力活性的多糖——β-葡聚糖。β-葡聚糖广泛存在于各种真菌和植物,如香菇、灵芝、燕麦中,是它们发挥保健作用的主要功效物质。而酵母葡聚糖的免疫增强活性更强,并具有改善血脂、抗辐射、改善肠道功能的作用。

  • 草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试 (请大家抓紧时间报结果)

    草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试 (请大家抓紧时间报结果)

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646915_1618994_3.jpg 序:自2010年以来,我们已经组织了7期草根比对,此活动纯属交流切磋之使用。我们希望更多的版友参与进来,共同学习共同提高我们的仪器分析行业的水平。如果有想组织的,请与水中月联系(594695627@qq.com) http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20101101105747694_01_1618994_3.gif 草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试再次感谢下里巴人版友为本次活动提供样品,第八期草根能力比主要是针对“富硒酵母中总硒含量”进行分析测试,从事相关检测的版友或实验室,欢迎报名,请下载报名表发送到指定邮箱594695627@qq.com,欢迎有能力的实验室积极参加,本次活动样品邮寄到付。能力比对项目:富硒酵母中总硒含量测试参与人员费用:免费提供样品、邮费到付网上报名名额:100家报名截至时间:2012年5月5日样品发放时间:2012年5月6日--2012年5月10日结果反馈时间:2012年5月20日前http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110281511_327006_1622715_3.gif或者将下面的信息填好短信给我。申请单位: 联系人 : 地址: 邮编: 固定电话: 手机: email: QQ: 实验室通过哪些CNAS认证: 您对本次活动的意见、建议及要求:本次活动主要是针对富硒酵母中硒含量进行测试,热烈欢迎同行及各类有相关检测能力的实验室参加。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20101101105747694_01_1618994_3.gif参加比对注意事项特别说明:1、由于本次活动采取邮寄到付、样品免费提供的形式,欢迎大家积极参与,谢谢合作!2、以往有个别报名者未与实验室其他同事沟通,报名后拿到样品,未能在规定的时间内报出结果,浪费样品和大家的时间和精力,也失去了一次大家交流的机会,希望这次不会出现这样的情况。3、申请表填写:请认真填写申请表,特别是地址和联系方式,以方便快递及尽快接收到样品。4、样品邮寄:(1)本次比对纯属相互交流、学习,免费提供样品,样品到达时参加者只需要付快递费。 如果报名表填写完整正确,本人会根据报名表进行快递单填写。(2)样品邮寄时间:2012年5月7日-2012年5月10日(3)样品收到后请反馈样品已经收到:请发邮件至594695627@qq.com5、检测结果反馈:1) 样品结果反馈时间:请于2012年5月20日前将结果报告单以邮件的形式发送至594695627@qq.com。2) 本次比对纯属技术交流自查自纠,请认真对待不要对结果,比对结果不会对实验室产生负面影响。3) 请在能力验证版面(http://bbs.instrument.com.cn/forum_529.htm)发样品操作过程的话题,凡参与者可获得最多50分的奖励,优秀者还可获得仪器信息网提供的精美礼品一份。6、检测结果汇总报告: 本人会尽快将大家的结果以编号的形式进行汇总统计,并保证不会泄露大家的联系方式,请放心!如果有版友想策划草根能力比对,能提供测试样品,请与水中月联系(594695627@QQ.com)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20101101105747694_01_1618994_3.gif往期回顾:第七期:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120306/3905627/

  • 【每日一贴】饲料酵母

    【中文名称】饲料酵母【英文名称】feed yeast【性状】 黄色粉末。有特殊香味。【用途】 在饲料中作蛋白源,在鸡饲料中添加4%,相当鱼粉的效果。【制备或来源】 将黄粉(或味精废液)用酵母菌培养,制得的菌体与培养基混合,再经脱水,干燥制得。【其他】 含粗蛋白65%以上,并含有18种氨基酸,其中8种是动物必须氨基酸。另外含有磷、钾、钙、镁等微量元素及多种维生素。【生产单位】 浙江义乌糖厂;山东省科学院生物研究所;山东省莱州酵母厂;

  • 介绍酵母的营养需求

    ?酵母的营养需求酒精发酵过程中,可吸收氮是酵母必不可少的营养物质,?即铵盐(NH4?+?)和氨基酸(有机氮)。它们天然存在于葡萄果汁中且含量随时都在变化。往往,天然的氮源并不能满足酵母的发酵需求。

  • 酵母硒和纳米硒对乳鸽生产性能、肉中微量元素含量和血清抗氧化指标的影响

    【序号】:1【作者】:曲湘勇,陈继发,徐勋,等.【题名】:酵母硒和纳米硒对乳鸽生产性能、肉中微量元素含量和血清抗氧化指标的影响【期刊】:经济动物学报【年、卷、期、起止页码】:曲湘勇,陈继发,徐勋,等.酵母硒和纳米硒对乳鸽生产性能、肉中微量元素含量和血清抗氧化指标的影响[J].经济动物学报,2017,21(01):23-28.DOI:10.13326/j.jea.2017.1168.【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=wYgW8A8u9vqufTh-PbyjWbLJuxwA0cphkSQj5rZtbPke0n1UCIjcK06it2oVnigI5EWylRShWKbKYAu-LuBQm4GTdJVWJuvh373IMUIJUCCuf0ty_c-qhjGh8w45kHjfZGMo6j1th6LF6iOtM9Rq5Q==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

  • 关于啤酒酵母标示的内容

    [font=SimSun, STSong, &]可否提供国卫食品标便函[2014]141号,关于啤酒酵母标示的内容,找不到原文。谢谢[/font][font=SimSun, STSong, &]想知道酵母在啤酒的配料里是不是必须标注的[/font]

  • 【每日一贴】饲料酵母粉

    【中文名称】饲料酵母粉【英文名称】feed yeast powder【性状】 有浓香气味。【用途】 是一种蛋白质含量高,氨基酸齐全,且含有B族维生素、微量元素及各种酶,是一种营养价值高的单细胞蛋白。能促进禽畜的新陈代谢,可增强禽畜的抗病能力,提高禽畜的生长速度、繁殖能力、肉质和毛皮质量,特别适宜以气味觅食得鱼虾喂养。【制备或来源】 用酒糟液发酵而成。其工艺路线有三种:(1)酒糟经冷却、净化、增殖、浓缩、质壁分离后,再干燥、粉碎得产品;(2)将酒糟接种发酵后,经干燥,去杂质粉碎得产品;(3)将酒糟沉渣加营养盐液,以酵母为微生物源,发酵后,经分离、干燥、粉碎得产品。【生产单位】 杭州长征化工厂;河南南阳酒精总厂酵母厂;

  • 关于酵母抽提物

    [b][color=#646464][color=#1a1a1a]酵母抽提物,英文Yeast Extract,简称YE。[/color][/color][/b][color=#1a1a1a]酵母抽提物可以说是食物风味诱惑的原动力,让吃货们欲罢不能的味道,很多时候其实是YE在起作用。[/color][color=#1a1a1a][color=#1a1a1a]对于食品工业生产和餐饮门店,是非常熟悉的。家庭厨房中一般不会见到,其实他是隐藏的。[color=#1a1a1a]回家看看家里酱油瓶子的配料表上,不管是老抽、生抽、味极鲜,都能看到他的名字。[/color][/color][/color][color=#1a1a1a]它的神奇之处,在于包含了人体可直接吸收利用的可溶性营养及风味物质的浓缩物,[color=#1a1a1a]如20种氨基酸和多肽、核苷酸、维生素、有机酸和矿物质等等。[color=#1a1a1a]复杂成分带来多种丰富而饱满的味道。[/color][/color][/color][color=#1a1a1a]家用时,假如手抖放多了,除了味道太重,也没别的危害。[color=#1a1a1a]而且素食者也可以用,是难得的同时营养、调味和保健三大功能的食品调味料。[/color][/color][color=#1a1a1a]酵母抽提物的原料是啤酒酵母、葡萄酒酵母和面包酵母为原料。[color=#1a1a1a]主流产品是啤酒酵母,很大一部分产量是啤酒酿造的副产品。[color=#1a1a1a]这个以前是当做废弃物的,后来发现这个宝贝的味道太浓郁,再稍作加工大有可为。[/color][/color][/color]

  • 酵母类型和连续发酵对经典酒类酵母类型和连续发酵对经典酒类参数的影响

    酵母类型和连续发酵对经典酒类酵母类型和连续发酵对经典酒类参数的影响酒精发酵结束时,所有连续的S的乙醇浓度在9.0到11.5% (v/v)之间,糖浓度低于2.0g.L-1。与不完全酒精发酵的纯培养物相比,接种P的样品完成发酵的时间最长,至少12天。对于其他NS酵母来说,7天就足以完成酒精发酵,而对于S纯培养物来说,则需要5天。与NS纯培养发酵相比,顺序发酵有助于增加乙醇浓度,但也减少了发酵时间。与S纯培养物相比,来自连续发酵的葡萄酒酒精含量的降低证实了NS酵母用于降低乙醇含量的效用。由于所有形式的葡萄汁和发酵条件都是相同的,使用代谢组学在最终葡萄酒成分和亮点中检测到的差异是由酵母的类型、酵母之间的相互作用和添加S的时间引起的。数的影响酒精发酵结束时,所有连续的S的乙醇浓度在9.0到11.5% (v/v)之间,糖浓度低于2.0g.L-1。与不完全酒精发酵的纯培养物相比,接种P的样品完成发酵的时间最长,至少12天。对于其他NS酵母来说,7天就足以完成酒精发酵,而对于S纯培养物来说,则需要5天。与NS纯培养发酵相比,顺序发酵有助于增加乙醇浓度,但也减少了发酵时间。与S纯培养物相比,来自连续发酵的葡萄酒酒精含量的降低证实了NS酵母用于降低乙醇含量的效用。由于所有形式的葡萄汁和发酵条件都是相同的,使用代谢组学在最终葡萄酒成分和亮点中检测到的差异是由酵母的类型、酵母之间的相互作用和添加S的时间引起的。

  • 【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    维权声明:本文为gl19860312原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。 本实验室主要工作就是:微生物发酵与代谢调控 、蛋白的分离纯化 、生物材料的研发与生产( 化妆品 、面膜、人工血管 、人工骨................)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012061858_264950_2019107_3.jpg啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究摘要:研究了PH、温度、食盐浓度三个因素对啤酒酵母细胞破壁的影响,确定出最佳的自溶法破壁条件 。进而为分离啤酒废酵母中的有效活性成分奠定了基础。关键词:啤酒酵母;破壁;自溶The Research of Autolysis on the Beer Yeast Cells wallAbstract:This paper researched the condition of autolysis on the waste yeast cells wall with three factors (pH 、Temperature 、Salt density) and determined the best condition based on autolysis. And build basis for separating the activity forms from beer waste yeasts.Key words: The beer yeast; Breaking Cells wall; Autolysis引言啤酒酵母(S.csrsviside)属于真菌门酵母属,多数为单细胞微生物,细胞呈圆形或卵圆形,革兰氏染色呈阳性G+。啤酒酵母细胞是由细胞壁、细胞膜、液泡、颗粒和线粒体等部分组成,细胞年幼的时候细胞壁很薄,所以不明显;细胞年老时,细胞壁较厚。啤酒酵母细胞内不但含有丰富的蛋白质、维生素、葡聚糖及甘露聚糖等营养及保健成分,可作为食用单细胞蛋白,此外还含有辅酶I、细胞色素,卵磷脂、RNA,,这些物质或其降解产物及衍生物如氨基酸制剂和核苷酸及核酸制剂等在生物化学、医药及保健食品中最有重要的作用。由于啤酒废酵母价格便宜,因此可利用啤酒废酵母来提取、制备这些物质。啤酒废酵母(waste brewer's yeast)是啤酒生产的副产物,是指啤酒酿造后沉降的酵母泥,主要是由大量的弱细胞和死细胞组成。在啤酒生产过程中,每生产 100吨啤酒大约有1-1.5吨废酵母 (以干重计)产生。传统的处理方法,是弃置不用或作为饲料处理,直接排放到河流湖泊中,将造成环境污染,同时也是对财富的浪费;因其具有坚韧的细胞壁和特有的酵母臭,适口性差,不易消化和吸收,故烘干作为饲料用的经济效益不高。充分利用啤酒废酵母可以有效地减轻污染,实现资源的二次转化,也可产生巨大的经济效益,如开发酵母抽提物。 为了增加酵母抽提物产量国内外同行做出不同努力,开展了有些研究。目前关于啤酒酵母破壁的研究很多,大体可归纳为:化学破壁(酸解、碱解)、物理破壁(液体剪 切、固体剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。其中,化学破壁不仅会造成一些营养成分的破坏,而且为有效成分的提取增加困难;物理破壁虽然方法简单、成本低,能完好保存营养成分,但其破壁效果较差;生物破壁中的酶解法会增加提取成本,故均不能大规模广泛的应用。而采用自溶法进行细胞破壁是一种简便易行的操作过程,通过确定啤酒酵母细胞最适合的自溶条件,可以建立一套利用酵母细胞生产酵母抽提物的工艺和方法,旨在为啤酒酵母的综合利用寻求一种新的方法,为工业化生产提供理论基础和实践指导。1.4实验方法 工艺流程 啤酒废酵母(保藏)—— 活化、两次斜面培养—— 接种、平板划线——摇瓶培养——取对数期的酵母细胞——做稀释梯度——做影响因素(温度、食盐浓度、pH并固定时间60分钟)的实验-——做正交试验——镜检(血球计数法)——计算啤酒酵母细胞的破碎率——得到自溶的最佳工艺参数1.5啤酒废酵母自溶条件的确定酵母自溶的实质是酵母细胞内的蛋白质在自身蛋白酶的作用下,降解为游离的氨基酸,那么,一切影响酶促反应的因素均影响酵母细胞的自溶,如自溶温度、食盐浓度、pH值、自溶时间等。自溶法是以存在酶活性的新鲜活酵母为原料,利用酵母细胞本身的酶系,在一定条件下,将酵母体内的糖类物质、蛋白质和核酸分解为还原糖、氨基酸、肤类、核昔酸等小分子物质并从酵母细胞内抽提出来的一种方法。利用自溶法生产的酵母抽提物,蛋白质分解率高,游离氨基酸含量高,风味好,成本较低,但呈味核昔酸含量低.目前,欧美及我国所生产的酵母抽提物绝大部分都是采用这种方法。[font=仿宋_GB2

  • 【有奖征集】酵母之我见——积分轻松拿到手!!!

    酵母之我见:可以是图片(包括各种酵母的图片:电镜扫描的、培养基上的……),酵母的分类介绍、酵母的用途……只要是关于酵母您尽管畅所欲言~~~★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★(P.S:只要您的发言符合本主题内容,就可以轻轻松松得积分)视图片及发言内容,加2-10分,赶快来分享你的知识吧本期活动长期有效!!!

  • 【原创】瓶装葡萄酒中酵母菌的检查方法

    葡萄酒在瓶装时,必须认真考虑葡萄酒是否已经达到了除菌、灭菌的目的。为了准确达到这个目的,就要对瓶装的葡萄酒进行快速而可靠的检验。这里列举了3个检查方法,仅供同行朋友们在实际生产中,根据企业的实际条件进行参考。  一、格森海姆(Geisenheimer)检定法  将被检验的葡萄酒在无菌的条件下,接入与其等量的葡萄汁,便为酵母提供了良好的繁殖条件,酵母开始快速繁殖和发酵。酵母繁殖的速度和发酵的强度,是衡量被检样品染菌的程度。  具体操作如下:  取标准试管3支,分别注入10mL葡萄汁,并加棉塞封口,置于高压灭菌锅中灭菌;将吸管用纸包好,并在160℃下灭菌。然后小心的拔除葡萄酒瓶的软木塞,立即用火焰将瓶口附着的微生物灭除,再用无菌吸管从瓶底吸出10mL被检葡萄酒,移入已灭菌葡萄汁的试管内,每份样品做平行样3支。  若被检的样品活酵母较多,在3—5天内即可检定其发酵度;若酵母较少,发酵需要两倍于此的时间,由此可断定生产线是否处于受控状态,断定瓶装酒出厂后是否会发生浑浊等质量事故。  这个方法十分简便,不需要特别的仪器,对小型葡萄酒厂十分适用,这是其优点。缺点是只能检定出葡萄酒中是否存在酵母菌,无法进行定量分析。  二、薄膜过滤法  借助于不同孔径的过滤片(孔径一般为2微米以下),在无菌条件下过滤被检葡萄酒,分离出酵母及其它微生物,然后对滤片上的微生物进行生长培养,计算出现的菌落数,并进行其它各项必要的检查。  操作方法如下:  将所有参与过滤的仪器、器皿进行彻底消毒,在无菌的条件下进行过滤等操作。在每次分析之前,将过滤器及过滤片置于高压锅内灭菌,用经火焰烧过的镊子取已灭菌的过滤片放入过滤器中。  被检瓶酒在开启前,必须仔细用75%酒精擦拭瓶口,小心地拔除软木塞,勿使开瓶刀穿通软木塞。  开始时先将软木塞拔出四分之三,然后用手轻轻取下软木塞,瓶口在倒酒前先用火焰烧一下,再将葡萄酒一点一点地倒入过滤漏斗中。  过滤结束后,用火焰烧过的镊子在漏斗内取出滤片,置于培养皿中,并摆放平整,倒入适量的酵母培养基(约3mL),然后标明日期和试样编号,置于生物培养箱内,在25℃下培养3—5天。为避免凝结水影响菌落生长,将培养皿反扣于培养箱内。若过滤片上的酵母菌是活的,酵母即进行繁殖,在培养基上会出现菌落。  如果未发现菌落生长,说明被检的葡萄酒是稳定的,不会出现酵母菌引起的浑浊;如果每瓶样有5个以上的菌落出现,说明葡萄酒的除菌或杀菌操作不彻底,葡萄酒有不稳定的因素,应该严格检查生产过程中的每个环节,直到查出原因为止。  这一方法能对瓶装酒内各种微生物进行定量检定,但需要选择适当孔径的滤片和培养基,并由掌握基本微生物学的熟练人员操作。  三、快速检定法  薄膜过滤法可以用显微镜对滤片做仔细检查,迅速检出活酵母;快速检定法则可将死的和活的微生物区别开来,但要求瓶装酒内必须不含其他悬浮物。  在适宜的温度下,于8—14小时内,具有繁殖能力的菌体生长成为微小的菌落,用显微镜观察,可将死的、没有繁殖能力的菌落区别开来。活菌体在培养时会形成小的菌落,死菌体只有单个的存在。

  • 酸洗玻璃珠法提取酵母总蛋白相关

    请教各位大神,酸洗玻璃珠acid-washed glass beads与 un-washed glass beads 未洗玻璃珠有什么区别???玻璃珠法碎裂酿酒酵母,加入的buffer含有什么?两分别是多少?有没有配料表啊亲们???

  • 【资料】酵母菌:发酵之旅

    我们平常所吃的馒头、面包,都是面经过发酵而制成的,它们蓬松有弹性,口感很好,还带有特殊的香味。而用来发酵的无论是从前的酵头,还是现在的发酵粉,其实都是添加剂酵母菌。现在酵母菌的作用已经不仅仅只停留在发酵作用上了,由于其独特的品性,酵母菌的用途也越来越广,成为一种多功能的食品添加剂。 酵母菌功用之一发酵 发酵是酵母菌最主要的功用。人类很早就开始将酵母菌应用于食品生产中,例如酒精饮料、酱油、食醋、馒头和面包的发酵等等。在面包和馒头的生产中,酵母发酵产生大量二氧化碳.使面团膨胀,形成松软的组织。 在食品工业上常见的酵母菌有啤酒酵母,用于生产啤酒、白酒和酒精,以及制做面包;葡萄酒酵母,也称酿酒酵母,用于酿造葡萄酒和果酒,也用于啤酒和白酒的酿造。其中啤酒酵母是食品工业上应用最为广泛的微生物之一,啤酒酵母菌体内维生素、蛋白质含量很高,其药用价值也很高,还可以用于做饲料,提取核酸、麦角醇、谷胱甘肽、凝血质和三磷酸腺苷等。

  • 【转帖】酵母双杂交系统的发展和应用

    随着对多种重要生物的大规模基因组测序工作的完成,基因工程领域又迎来了一个新的时代---功能基因组时代。它的任务就是对基因组中包含的全部基因的功能加以认识。生物体系的运作与蛋白质之间的互相作用密不可分,例如:DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及到蛋白质复合体的作用。能够发现和验证在生物体中相互作用的蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质是认识它们生物学功能的第一步。   酵母双杂交技术作为发现和研究在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术平台,在近几年来得到了广泛运用。酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。大量的研究文献表明,酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作,也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的互作。因此,它在许多的研究领域中有着广泛的应用。本文就酵母双杂交的技术平台和应用加以介绍。  酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转录激活因子的参与。反式转录激活因子,例如酵母转录因子GAL4在结构上是组件式的(modular),往往由两个或两个以上结构上可以分开,功能上相互独立的结构域(domain)构成,其中有DNA结合功能域(DNA binding domain,DNA-BD)和转录激活结构域(activation domain,DNA-AD)。这两个结合域将它们分开时仍分别具有功能,但不能激活转录,只有当被分开的两者通过适当的途径在空间上较为接近时,才能重新呈现完整的GAL4转录因子活性,并可激活上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)的下游启动子,使启动子下游基因得到转录。  根据这个特性,将编码DNA-BD的基因与已知蛋白质Bait protein的基因构建在同一个表达载体上,在酵母中表达两者的融合蛋白BD-Bait protein。将编码AD的基因和cDNA文库的基因构建在AD-LIBRARY表达载体上。同时将上述两种载体转化改造后的酵母,这种改造后的酵母细胞的基因组中既不能产生GAL4,又不能合成LEU、TRP、HIS、ADE,因此,酵母在缺乏这些营养的培养基上无法正常生长。当上述两种载体所表达的融合蛋白能够相互作用时,功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因HIS、ADE、LACZ、MEL1,从而通过功能互补和显色反应筛选到阳性菌落。将阳性反应的酵母菌株中的AD-LIBRARY载体提取分离出来,从而对载体中插入的文库基因进行测序和分析工作。在酵母双杂交的基础上,又发展出了  酵母单杂交、酵母三杂交和酵母的反向杂交技术。它们被分别用于核酸和文库蛋白之间的研究、三种不同蛋白之间的互作研究和两种蛋白相互作用的结构和位点。  基于酵母双杂交技术平台的特点,它已经被应用在许多研究工作当中。 1、利用酵母双杂交发现新的蛋白质和蛋白质的新功能  酵母双杂交技术已经成为发现新基因的主要途径。当我们将已知基因作为诱饵,在选定的cDNA文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白,从筛选到的阳性酵母菌株中可以分离得到AD-LIBRARY载体,并从载体中进一步克隆得到随机插入的cDNA片段,并对该片段的编码序列在GENEBANK中进行比较,研究与已知基因在生物学功能上的联系。另外,也可作为研究已知基因的新功能或多个筛选到的已知基因之间功能相关的主要方法。例如:Engelender等人以神经末端蛋白alpha-synuclein 蛋白为诱饵蛋白,利用酵母双杂交CLONTECH MATCHMARKER SYSTEM 3为操作平台,从成人脑cDNA文库中发现了与alpha-synuclein相互作用的新蛋白Synphilin-1,并证明了Synphilin-1与alpha-synuclein 之间的相互作用与帕金森病的发病有密切相关。为了研究两个蛋白之间的相互作用的结合位点,找到影响或抑制两个蛋白相互作用的因素,Michael等人又利用酵母双杂交技术和基因修饰证明了alpha-synuclein的1-65个氨基酸残基和Synphilin-1的349-555个氨基酸残基之间是相互作用的位点。研究它们之间的相互作用位点有利于基因治疗药物的开发。  2、利用酵母双杂交在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用  利用酶联免疫(ELISA)、免疫共沉淀(CO-IP)技术都是利用抗原和抗体间的免疫反应,可以研究抗原和抗体之间的相互作用,但是,它们都是基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用。而在细胞体内的抗原和抗体的聚积反应则可以通过酵母双杂交进行检测。例如:来源于矮牵牛的黄烷酮醇还原酶DFR与其抗体scFv的反应中,抗体的单链的三个可变区A4、G4、H3与抗原之间作用有强弱的差异。Geert等利用酵母双杂交技术,将DFR作为诱饵蛋白,编码抗体的三个可变区的基因分别被克隆在AD-LIBRARY载体上,将BD-BAIT载体和每种AD-LIBRARY载体分别转化改造后的酵母菌株中,并检测报告基因在克隆的菌落中的表达活性,从而在活细胞的水平上检测抗原和抗体的免疫反应。  3、利用酵母双杂交筛选药物的作用位点以及药 物对蛋白质之间相互作用的影响  酵母双杂交的报告基因能否表达在于诱饵蛋白与靶蛋白之间的相互作用。对于能够引发疾病反应的蛋白互作可以采取药物干扰的方法,阻止它们的相互作用以达到治疗疾病的目的。例如:Dengue病毒能引起黄热病、肝炎等疾病,研究发现它的病毒RNA复制与依赖于RNA的RNA聚合酶(NS5)与拓扑异构酶NS3,以及细胞核转运受体BETA-importin的相互作用有关。研究人员通过酵母双杂交技术找到了这些蛋白之间相互作用的氨基酸序列。如果能找到相应的基因药物阻断这些蛋白之间的相互作用,就可以阻止RNA病毒的复制,从而达到治疗这种疾病的目的。  4、利用酵母双杂交建立基因组蛋白连锁图(Genome Protein Linkage Map)众多的蛋白质之间在许多重要的生命活动中都是彼此协调和控制的。基因组中的编码蛋白质的基因之间存在着功能上的联系。通过基因组的测序和序列分析发现了很多新的基因和EST序列,HUA等人利用酵母双杂交技术,将所有已知基因和EST序列为诱饵,在表达文库中筛选与诱饵相互作用的蛋白,从而找到基因之间的联系,建立基因组蛋白连锁图。对于认识一些重要的生命活动:如信号传导、代谢途径等有重要意义。

  • 【每日一贴】脱核酵母

    【中文名称】脱核酵母【英文名称】yeast;as a by-product of RNA production【用途】 可代替鱼粉饲养水貂、鳗鱼、对虾等。【制备或来源】 将蜜糖经澄清、稀释后,成为清糖水,再加入营养盐类,经发酵,离心分离,弃去轻相,重相溶解,再离心分离,轻相用以制取核糖核酸,重相经烘干、粉碎即得成品。【其他】 含蛋白质≥50%,含赖氨酸核蛋氨酸分别≥和≥2.4%,营养价值高。【生产单位】 福建莆田糖厂

  • 面包里的酵母

    最近遇到一个问题,我们面包产品(冷加工)做霉菌检测时平板上会培养出很多酵母菌,正常吗,看到贴的朋友,可以交流一下

  • 【转帖】“维维”天山雪乳饮料酵母菌超标24倍

    上海市质量技术监督局昨日公布的监督抽查结果表明,本市生产、销售的各类饮料和冷冻饮品总体质量状况良好,合格率在九成以上。但是,“维维”牌天山雪活性乳饮料酵母菌数超标24倍,而北京信远斋饮料公司生产的鲜桔汁饮料的果汁含量不足标准的0.07%,甜蜜素超标2倍多。本次抽查不合格项目集中在酵母菌、甜蜜素超标以及果汁含量不足等问题。少数企业的环境卫生和操作人员个人卫生未达到要求,造成产品中酵母菌超标;个别企业在生产过程中未能对果汁原浆质量和甜蜜素用量进行有效控制,导致果汁含量不足和甜蜜素超标。国家标准规定,酵母菌含量必须小于等于50cfu/mL,然而本次在上海浦东好又多超市有限公司抽取的,由徐州维维乳业有限公司生产的“维维”牌天山雪活性乳饮料酵母菌数竟然达到1200cfu/mL,超标24倍。国家标准规定,果汁饮料的果汁含量≥20%,甜蜜素≤0.65g/kg,但是在上海世纪联华超市宝山有限公司抽取的,由北京信远斋饮料公司生产的鲜桔汁饮料(生产日期:2005年4月29日,规格:780mL/瓶)果汁含量只有1.41%,不足标准的0.07%,而甜蜜素含量达1.8g/kg,超标2倍多。此外,该产品的标签也不规范。

  • 不使用kit:手工提取酵母DNA的方法

    1) 使用YPD培养基10ml酵母菌30℃培养过夜;2) 离心收集细胞,离心管放置冰上,轻轻倒出上清液,用0.5ml水重悬沉淀。转移细胞悬液至1.5ml罗盖管内,再次离心收集细胞沉淀;3) 轻轻倒出上清液,在振荡器上剧烈震荡使残余的液体重悬细胞沉淀;4)加入 0.3 ml Solution C: 2% TritonX-100, 1% SDS, 100 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl (pH 8), 1mM EDTA;5) 加入 0.3 ml 酚:氯仿;6) 加入酸化玻璃粉或锆珠,液体会高于玻璃粉2-3mm处,使用漩涡振荡器破碎细胞;7) 加入0.2 ml TE (pH 8.0)溶液,震荡15秒,确保混合均匀;8) 13,000 rpm 离心5分钟,转移上层液体至新离心管(原离心管应弃置于苯酚中);9) 吸取水状层至新离心管,加入1ml 100%乙醇,反复颠倒混匀,于-20°C 放置30 分钟;10) 13,000 rpm离心10 min, 弃去上清,用0.4ml TE重悬沉淀(此时含有大量的RNA,TE溶液中加入3µl 10mg/ml RNAse A溶液;11) 于37°C孵育15分钟,加入10µl 3M 醋酸盐(pH 5.2),混合均匀,加入1ml100%乙醇,反复颠倒混匀12) 13,000 rpm 离心10 min,弃上清,风干沉淀,用70%乙醇洗涤,再次离心去除乙醇,风干用 50 µl 水重悬。至此结束,最终DNA浓度能达0.5 µg/µl。作者后记:本秘籍迅速在本实验室以及其他酵母小组流传开来,从此江湖上又多了一个方便、强大、回收率高的DIY传说!

  • 酵母葡聚糖的检测

    在看到Q B/T4572-2013中的酵母葡聚糖的含量检测中,用到的杜氏瓶是什么样子的,有图片的能发一张图吗?

  • 草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试(ICPMS法)

    草根能力比对之八:富硒酵母中总硒含量测试(ICPMS法)

    1 样品处理1.1 秤样分别称取2份富硒酵母样品各0.1g(m1=0.1183,m2=0.1206),小麦粉标品1份0.1574g于消解罐中。1.2 溶样在各消解罐中加入5mL事先混合好的消解液(高纯HNO3+H2O2)1.3 微波消解样品室温——(23min)——180度(保持10min)——降至50度,取出。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205211028_367886_1742445_3.jpg1.4 样品定容用超纯水定容至50mLhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205211029_367887_1742445_3.jpg1.5 样品稀释富硒酵母2样品用5%HNO3稀释100倍待用2 标曲确定5%HNO3将1ppmSe标准母液稀释成10ppb、50ppb、100ppb浓度系列3 测定方法标准模式、跳峰、检测Se78和Se82,Ge做内标在线加入http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205211030_367888_1742445_3.jpg4 测定结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205211031_367889_1742445_3.jpg5 结果讨论小麦粉标品的回收率分别是1.0503和1.0307,准确度符合要求。两样品求平均值结果应为2156mg/kg 。 请大家批评指正。

  • 酵母酶解粉

    请问谁知道酵母酶解粉是什么?它和酵母粉之间有什么区别吗?

  • 向您介绍葡萄酿酒酵母CEC

    向您介绍葡萄酿酒酵母CEC 目前CEC系列酵母酿造的酒,已经多次在国内外各大赛事中获得金奖、大金奖,相信以后会有更多本土酵母酿制的酒在各大赛事中脱颖而出!

  • 【“仪”起享奥运】酵母蛋白---素食者的蛋白新思路

    [size=16px]素食者在蛋白质摄入上一直面临着挑战,尽管素食食品富含多种营养成分,但素食者在蛋白质摄入方面存在不足。首先,植物性食品中的蛋白质含量相对较低,且氨基酸组成不如动物性蛋白完整,素食者需要摄入更多的植物性食品才能满足蛋白质的需求。然而,过多的植物性食品摄入可能导致热量过剩、膳食纤维过多等问题。其次,一些素食者可能存在对某些植物性食品的过敏或不耐受情况,例如大豆、坚果等食品中的蛋白质可能引发人体过敏反应,而谷物中的麸质[i][/i]则可能引起不耐受反应等。此外,植物性蛋白质的生物利用率较低,需要素食者通过合理搭配食物来提高蛋白质的摄入效率。[/size][size=16px]在传统素食者蛋白质摄入不足的背景下,素食蛋白棒产品正逐渐在素食者中普及起来。[/size][size=16px]素食蛋白棒是一种高蛋白、低脂肪、便携的零食,能够方便素食者在日常饮食中补充蛋白质,满足素食者对蛋白质的需求。素食蛋白棒的热量和脂肪含量相对较低,使得素食者可以在控制热量摄入的同时,获得足够的蛋白质补充。[b]一是丰富的营养价值[/b]:作为素食蛋白棒中重要蛋白来源的酵母蛋白,是一种来源于酿酒酵母的优质完全蛋白,拥有高蛋白质含量与优质氨基酸配比,其蛋白质含量高达80%以上,富含人体所需的全部8种必需氨基酸,且其氨基酸配比合理,易被人体吸收利用。酵母蛋白除了赋予素食蛋白棒高蛋白质含量外,还提供B族维生素和矿物质等多种营养成分,有助于维持身体的正常代谢和健康状态。研究表明,酵母蛋白中的活性成分能够调节肠道菌群平衡,促进有益菌的增殖,抑制有害菌的生长,从而改善肠道环境,提高肠道健康水平。[b]二是环保与可持续性和性价比优势[/b]:酵母蛋白来源于微生物发酵,相比动物源蛋白和植物源蛋白更加环保和可持续,它不需要大量的土地、水和饲料资源,也不产生温室气体排放。目前,酵母蛋白的生产已完全工业化,生产效率高、成本低,使得酵母蛋白与乳清蛋白等动物蛋白相比在价格上具有一定的优势,同时避免了动物源蛋白和植物源蛋白可能带来的过敏源问题。[/size]

  • 霉菌酵母计数

    求大神解释一下,食品国标4789.15中,霉菌和酵母测定,计数怎么计,标准是小于或等于50cfu/g,测得,霉菌1cfu,酵母7cfu(稀释10倍),是总得计数40cfu/g合格,还是霉菌5cfu/g,酵母35cfu/g不合格。标准50是总和50,还是各25的意思。急急急!

  • 安琪酵母活化

    我想做一个酵母菌阳性样本,不知道如何活化安琪干酵母,请馈赠详细的活化步骤,操作越简单越好。在网上看到有说直接用温水活化即可,是否可行?

  • 毕氏酵母氯化锂转化法

    试剂1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,对酿酒酵母有效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用。感受态毕氏酵母的制备1. 接种Pachia pastoris到50ml YPD培养基中,30℃摇菌过夜(约24~28h)培养到OD值为0.8~1.0(约108 Cells/ml);培养基里有流沙样的菌体在流动2. 收获细胞,用25ml无菌水洗涤一次,室温下1500g离心10min;3. 重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液中,将悬液转入1.5ml离心管;4. 离心机最大速度离心15秒沉淀菌体,重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液中;5. 按50ul/管分装,立即进行转化;注:不要将感受态酵母菌冰浴;

  • 面包酵母问题

    面包制作中添加了酵母,出厂检验还是以7099的微生物标准执行或不执行,酵母属不属于7099中的未熟制的发酵配料,要是按7099执行,出厂检验菌落总数不合格,大概率就是酵母在熟制过程中未杀死了是不是

  • 毕赤酵母蛋白不表达的原因

    很多朋友问这样一个问题:为什么毕赤酵母表达困难?他们自己也很纳闷,重组酵母pcr检测也证明目的基因重组了,但是诱导之后就是在表达上清中检测不到目的蛋白,仔细研究操作手册后仍然不知道原因。本人,根据自己的经验,采用倒推的方法,按实验过程从后向前分析,供大家参考:1、诱导之后表达上清中检测不到目的蛋白:分析1:检测的方法是否有问题,要考虑是不是蛋白表达量低而没有检测到? 如果是蛋白表达低,可以选择浓缩蛋白,具体的方法很多,有TCA、丙酮、浓缩柱等等方法,之前在本版已经发过帖,在此不赘述。 2、如果蛋白浓缩N倍之后仍然检测不到,那基本可以确证蛋白并不在上清中。那么蛋白到哪里去了,考虑是否没有分泌出来,而是在胞内,那就需要通过裂解酵母来检 测胞内蛋白,具体的方法很多,在此也不赘述,曾整理过相关破碎的帖子。 3、如果胞内也没有目的蛋白表达,那么基本可以确定蛋白并没有表达。 4、为什么没有表达呢?倒推回来就是诱导的过程了,诱导体系是什么?甲醇浓度是多少?培养问题是多少,转速是多少?这些都要注意。甲醇一般是0.5%-1.0%,本人用的 是0.5%,也有很多人也用1.0%,曾见过一个帖子,说超过1.5%反而会抑制表达,没有验证过,供大家参考。培养问题28-30度比较合适,转速250rpm比较合适,诱导 体系没有固定的体系,说明书上推荐的是BMGY到OD600 2~6,换到BMMY中OD600 为1左右。 5、如果诱导的过程也没有问题,那问题就复杂了,特别是重组酵母PCR检测证明目的基因确实已经发生了重组。这个时候是最郁闷的了,但是郁闷怎么办,还是要找原 因,在此我给的建议是先做RT-PCR证明mRNA水平的情况,也就是说有没有转录。如果转录了,后续的操作也没有问题(本帖的1、2、3、4项),那么只有重新设计实 验,比如换酵母株,有文章上说:用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆能表达。 6、有个帖子说的很好,在此和大家分享一下。 1、 菌株:用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆能表达。 2、温度: 在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。 3、pH:手册上用6.0,pH提高到6.8,不表达的蛋白可能就表达出来。BMMY的pH7.0-7.5比较合适。国内外做的最好的rHSA,最适pH大概5-6左右。pH3的时 候yeast和peptone好像会沉淀的,可以用磷酸和磷酸二氢钾调,具体比例自己去试试。 4、偏爱密码子: codon bias一般不是主要的问题,你要表达的蛋白特性才是主要问题,酵母对分子量大(30KD以上),结构复杂(如一些蛋白酶),二硫键含量多的 蛋白往往不能有效表达,尤其是分泌表达。密码子改造对一些较小的而且结构简单的蛋白表达量的提高可能有一些作用。比如一位战友用Pichia酵母表达一个单链 抗体,29KD,含有2对二硫键,表达量约几毫克每升,选用酵母偏好密码子全基因合成后,表达量没有什么提高。 5、表达时间与空质粒转化对照:诱导时间长了以后,是会有很多蛋白分泌出来的,时间越长杂蛋白就越多,且分子量都比较大。最好做一个空质粒转化的对照, 这样就会比较肯定到底是不是自身的蛋白分泌的结果。 6、污染:每个样品从G418板上挑10个左右单克隆于2ml BMGY摇菌(30ml玻璃管,比LB管大一点),纱布一般用8层,一天左右看着比较浑离心,留样1ml,余 1ml换2ml BMMY诱导表达,3,4层纱布足够了。 污染一般都是跟瓶口覆盖有关的原因造成的,只盖纱布肯定会污染。加盖报纸后,就再没遇到过污染。如果只用6层纱布,污染的可能当然很大,100ml三角瓶, 装量10ml培养液,用橡筋把8层纱布和2层报纸拴紧封口,空气浴摇床。 7、不表达:蛋白有没有表达就要看你的运气了,一般重复2-3次实验都没有表达菌株,这个蛋白就放弃表达了。 8、表达量: 30KD,10mg/L表达量已经很高,最直接的方法是发酵,一般提高5-10倍。大肠杆菌一样出现大团的超表达蛋白。 9、糖基化:酵母分泌表达的N糖基化是可以预测的,有如下序列:N X S/T就是潜在的糖基化位点,X为任意氨基酸,1个糖基化位点会加上1-3KD左右的糖基。另外可 能还有O糖基化话,但是无法预测其位点,不过很少听说表达蛋白有O糖基化的。如果胞内表达,不存在糖基化的问题。 10、表型与表达:重组SalI和BglII酶切产生单交换和双交换,结果就是产生Mut+和Muts表型的菌株;前者在甲醇诱导表达时生长快,消耗的甲醇多,后者生长慢,消耗 的甲醇少,所以诱导表达时Muts表型要求更高的菌体浓度。一般用Mut+表型的较多,但是对某些蛋白Muts菌株可能表达的更好,只有试试才知道你的蛋白用那种菌 株表达较好。 11、培养基 YPD:最基本的培养用;BMGY:诱导表达前培养用;BMMY:诱导表达用;MD:电转化后筛选his+用。 YEPD是不能代替BMGY的,因为有葡萄糖,这样残留的葡萄糖会影响下一步的诱导表达。不过有一种方法是可行的,就是用YPG培养基代替,只是把YEPD中的葡萄糖 用3%的甘油代替,也可以降低成本。摇瓶毕竟不能和发酵罐比,甘油残余会抑制甲醇利用。 BMGY、BMMY灭菌后才能加甲醇、磷酸钾、生物素。配制BMMY时也没必要用5%过滤除菌的甲醇,在灭菌后使用前加100%甲醇至你要的浓度。 YNB可以高压灭菌,没问题的,也可以0.22um过滤处理,天冬氨酸和苏氨酸要待培养基高压灭菌后加入;配YPD时可以加入YPD一起灭菌,但时间不能太长,温度不能 太高,一般121-125度12-15分钟足够了。若时间过长,温度过高,可能导致YPD焦化。glucose和含氮化合物在一起容易产生美拉德反应,这是配制培养基中的禁忌。 颜色很深的话,基本不能使用了。或者含有葡萄糖和/或YNB的培养基108度35min高压灭菌。 小量发酵其实可以把培养基成分中的YNB和生物素去除,培养基价格便宜,操作又方便,可以直接灭菌,效果也很好(效果不比含YNB的差)。 如果是用自己配置的培养基,如玉米浸提液、麦芽浸提液、麦麸浸提液等等,可以不用换液,采取添料来维持酵母对培养基的营养需要。 用无机盐进行大规模发酵,更省钱。更多有关蛋白表达纯化的相关资料,请点击:资料专区

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