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半乳糖苷酶来源于大肠杆

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半乳糖苷酶来源于大肠杆相关的论坛

  • 国家卫生计生委关于批准β－半乳糖苷酶为食品添加剂新品种等的公告（2015年 第1号）

    国家卫生计生委关于批准β－半乳糖苷酶为食品添加剂新品种等的公告（2015年 第1号）

    根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品添加剂新品种管理办法》，经审核，现批准β－半乳糖苷酶为食品添加剂新品种；6－甲基辛醛为食品用香料新品种；氧化亚氮、阿拉伯胶、红曲黄色素、抗坏血酸（维生素C）、迷迭香提取物、二甲基二碳酸盐（又名维果灵）、硫酸铝钾（又名钾明矾）/硫酸铝铵（又名铵明矾）、磷酸、焦磷酸钠、六偏磷酸钠、迷迭香提取物（超临界二氧化碳萃取法）等11种食品添加剂扩大使用范围、用量。 　　 特此公告。 　　 国家卫生计生委　　 2015年1月23日http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501301539_533609_1060664_3.png

  • 大肠杆菌指示菌的方法学定义

    总大肠菌群（Total Coliforms) 大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，具有指标菌的一般特征故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。耐热大肠菌群(Thermotolerant Coliforms) ，原名：粪大肠菌群（Fecal Coliforms ) 用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开，在44.5℃仍能生长的大肠菌群，称为粪大肠菌群。是水体受人畜粪便污染的比较直接指标。大肠埃希氏菌（大肠杆菌，E.Coli.) 大肠埃希氏菌是指能产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培养液呈黄色，能产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的细菌。大肠埃希氏菌是粪大肠菌群的组成部分，是水体受人畜粪便污染的最直接指标，水中含有大肠埃希氏菌提示有粪便污染。

  • 【求助】关于β-葡糖醛酸糖苷酶？

    本人对酶这种物质不甚了解http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif，特求助各位大侠？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif应用搜索引擎没有找到β-葡糖醛酸糖苷酶，想知道这种酶是否还有别的名字？目前有β-葡糖苷酶（cas：9001-22-3），是否同一种酶？

  • 【原创】半乳甘露聚糖

    半乳甘露聚糖是一种包含了甘露糖骨干与半乳糖旁基的多糖，更准确的一点来说，半乳甘露聚糖是直线状(1-4)-连结的β-D型甘露糖（(1-4)-linked beta-D-mannopyranose ）骨干于它们6-连接点连接到α-D型半乳糖（alpha-D-galactose）的多糖，即1-6-连结的α-D型吡喃半乳糖（1-6-linked alpha-D-galactopyranose）。部分的植物与真菌都含有半乳甘露聚糖的成分。目前主要有四种来源的半乳甘露聚糖，分别来源于胡芦巴胶（Fenugreek　Gum），瓜尔豆胶（Guar　Gum），长角豆胶（Locust　Bean　Gum）和他拉胶（Tara　Gum），它们具有不同支化度的半乳甘露聚糖。 这四种半乳甘露聚糖的结构都是以甘露糖为主链，半乳糖为侧链基团。更准确地说，它们是以主链为β（1，4）连接的D-甘露糖聚合物，每隔几个甘露糖残基有一个α-D-半乳糖以1，6键与主链相连。PS-FNG，-GG，-TG和–LBG都是半乳甘露聚糖，不同的仅仅是他们的半乳糖和甘露糖的比例，比例分别是1：1，1：2，1：2。5～3，和1：3.5～4。[size=4][color=#DC143C]请注意不要在技术论坛做广告,不显示公司名字[/color][/size]

  • 大肠杆菌乳糖发酵实验

    请问，乳糖发酵大肠杆菌，培养基颜色变黄导管产气，但是培养基是混浊的，请问这样的结果对吗，求大神指点，拜托拜托[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/01/201901180941516446_2797_3545162_3.png[/img]

  • 关于体外α-葡萄糖苷酶抑制活性问题

    在做体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。具体的实验操作如下，110μLpbs（Ph6.8），各样品梯度100-200-400-800-1600-3200μg/mL各20μL，还原型谷胱甘肽（1mg/mL）10μL，20μL酶溶液，37℃反应15min后，加20μLPnpg（2.5mmol/L），继续37℃反应15min，80μL碳酸钠（0.2moL/L）终止反应。每次加完试剂后，谷胱甘肽、酶、pnpg保存在-4°的冰箱。样品组：样品+pbs+酶+底物+碳酸钠+谷胱甘肽 样品空白：不加底物 对照组：无样品 空白对照：无样品无底物。最终实验结果：大多数100-200-400分子比分母大，1减去后是一个负数，没抑制率。后面做了阿卡波糖阳性药物，在100-200-400也很难有抑制率，目前已经做了30次。认为操作没问题，是浓度太低没活性吗？

  • 44.4 82 HPLC-ELSD同时测定白英中延龄草苷和去半乳糖替告皂苷的含量

    44.4 82 HPLC-ELSD同时测定白英中延龄草苷和去半乳糖替告皂苷的含量

    【作者】 贾玉荣； 孙长山； 孙艳秀； 杨雯雯； 孙立新；【Author】 JIA Yurong,SUN Changshan,SUN Yanxiu,YANG Wenwen,SUN Lixin(College of Pharmacy,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110016)【机构】 沈阳药科大学药学院；【摘要】 目的:建立同时测定白英中延龄草苷(trillin)和去半乳糖替告皂苷(desgalactotigonin)含量的HPLC-ELSD法。方法:采用Diamonsil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-10 mmol.L-1醋酸铵溶液52∶48,柱温25℃,流速0.6mL.min-1,进样量20μL,检测器漂移管温度为95℃,氮气流速2.3 L.min-1。结果:延龄草苷和去半乳糖替告皂苷分别在20～200 mg.L-1(r=0.999 8)和10～100 mg.L-1(r=0.999 7)内线性关系良好。延龄草苷的平均回收率为99.4%,RSD为0.90%;去半乳糖替告皂苷的平均回收率为100.3%,RSD 1.1%。结论:该方法准确,重复性良好,适用于白英药材的质量控制。 更多还原http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131312_383451_2379123_3.jpg

  • 【玉虎笔记系列】牛乳中的乳糖

    [size=4][font=Times New Roman]1 [/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖的化学变化[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman]1.1[/font][/size][size=4][font=宋体]水解[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman]1.1.1 [/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖在稀酸条件下加热，则分解成葡萄糖和半乳糖。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman]1.1.2 [/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖可以被[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]B-D-[/font][/size][size=4][font=宋体]半乳糖苷酶水解为半乳糖和葡萄糖，副反应可生成多种寡糖类。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman][/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖在低浓度时生成的寡糖类是微量的，而高浓度时会生成相当量的寡糖类。多低？多高？[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman]1.2[/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖的异构反应[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman] [/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖在碱性溶液中，其中的葡萄糖分子将部分的异构化而生成异构乳糖，亦称为乳果糖或二蔗酮糖。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman] [/font][/size][size=4][font=宋体]乳果糖的熔点为[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]158[/font][/size][size=4][font=宋体]摄氏度，[/font][/size][size=4][font=Times New Roman][a][sub]d[/sub][sup]20[/sup]=-51.5[sup]o[/sup],[/font][/size][size=4][font=宋体]是一种新型的功能性物质。由于异构乳糖能促进人体肠道内双歧杆菌的增殖，所以亦称为双歧增殖因子，广泛应用于多种乳制品或其他食品中。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=宋体]乳糖经高温加热可生成异构乳糖，半乳糖，塔格糖等糖类，还可生成甲酸，乳酸等有机酸。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman][/font][/size][size=4][font=宋体]乳糖是还原性双糖，其本身及分解产物与乳中的蛋白质会发生美拉德反应，是乳制品褐变的主要原因。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman]1.3[/font][/size][size=4][font=宋体]褐变反应[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=宋体]牛乳经长时间高温加热则发生褐变反应。这类反应属于非酶褐变，主要是羰[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]-[/font][/size][size=4][font=宋体]氨反应，其次是乳糖的焦糖化反应。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=Times New Roman][/font][/size][size=4][font=宋体]牛乳的羰[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]-[/font][/size][size=4][font=宋体]氨反应即美拉德（[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]Maillard[/font][/size][size=4][font=宋体]）反应，是酪蛋白的末端氨基酸[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]-[/font][/size][size=4][font=宋体]赖氨酸的游离氨基与乳糖的羰基发生反应，最终生成褐色物质。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=宋体]当牛乳加热到[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]100[/font][/size][size=4][font=宋体]摄氏度以上，例如在[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]120[/font][/size][size=4][font=宋体]摄氏度，[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]7.5[/font][/size][size=4][font=宋体]分钟时，容易发生美拉德反应。[/font][/size][size=4]待续%%%%%%%%%[/size]

  • 【讨论】葡萄糖\甘露糖\半乳糖用液相分析的分离度

    本人最近在做糖方法分析时遇到一些困惑,求助各位高手赐教阿所用仪器为Agilent1290液相色谱，蒸发光散色检测器，prevail carbohydrate ES 5u 4.6mm*250mm,流动相为乙腈和水，调适了流动相各种比例，始终无法很好分离甘露糖、半乳糖、葡萄糖，不知你们做的时候能有多少分离度？

  • 【求助】为什么测定大肠杆菌时要用双倍和单倍的乳糖培养基进行除发酵呢？

    在GB/T 5750.12-2006微生物大肠杆菌测定中，先取10mL水样于10mL双料乳糖蛋白胨培养液中，取1mL水样接种到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中，在取稀释10倍的水样于10mL单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种管5管。那请教下大家， 为什么要先双倍再单倍、单倍，这样培养的区别在哪里？可不可以都用单倍或都用双倍或三倍？浓度高的培养基中为什么移取的水样要多点呢？请大家多多指教。我是新手。谢谢！

  • 细菌的转化与平板计数

    感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性]培养基[/url]中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型(如Amp[sup]r[/sup]等)得到表达，然后将此细菌培养物涂在含有氨苄青霉素的选择性[://]培养基[/url]上。重组质粒转化宿主细胞后，还需对转化菌落进行筛选鉴定。利用α互补现象进行筛选是最常用的一种鉴定方法。现在使用的许多载体都具有一段大肠杆菌β半乳糖苷酶的启动子及其编码α肽链的DNA序列，此结构称为[i]lac[/i]Z'基因。[i]lac[/i]Z'基因编码的α肽链是β半乳糖苷酶的氨基端的短片段(146个氨基酸)。任何携带着[i]lac[/i]Z'基因的质粒载体转化了染色体基因组存在着此种β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后，便会产生出有功能活性的半乳糖苷酶，在IPTG(异丙基β—D—硫代半乳糖苷)诱导后，在含有Xgal(5-溴-4-氯-3-吲哚-6-D-半乳糖苷)的培养基平板上形成蓝色菌落（半乳糖苷酶能将无色的化合物Xgal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4-靛蓝）。而当有外源DNA片段插入到位于[i]lac[/i]Z'中的多克隆位点后，就会破坏α肽链的阅读框，从而不能合成与受体菌内突变的β半乳糖苷酶相互补的活性α肽，而导致不能形成有功能活性的β半乳糖苷酶，也就不能分解Xgal而显蓝色，因此含有重组质粒载体的克隆往往是白色菌落。[仪器、材料与试剂](一) 仪器和材料 超净工作台、低温离心机、恒温摇床、恒温箱、恒温水浴、离心管、试管、培养皿、锥形瓶、接种针、玻璃涂棒、酒精灯、镊子、牙签、大肠杆菌DH5a 、质粒(二) 试剂0.1mol／L CaCl2溶液 LB液体培养基 LB固体培养基 氨苄青霉素(Amp)：用无菌水配制成100mg／mL溶液，置—20℃冰箱保存。Xgal：将Xgal溶于二甲基甲酰胺，配成20mg／mL，不需过滤灭菌，分装小包装，避光贮存于-20℃。IPTG：取2g IPTG溶于8mL双蒸水中，再用双蒸水补至10mL，用0.22um滤膜过滤除菌，每份1mL，贮存于-20℃。[实验步骤](一) 制备感受态细胞1、吸取15µl E.coil菌液，接种于20ml LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜，待OD600=0.5左右将该菌悬液以1：50接种量转于50ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20-30min测一次OD600，至OD600=0.6左右，停止培养。2、培养液转入离心管中，在冰浴10min，4℃下5000rpm离心10min。3、弃上清液，用4ml冰预冷的0.1M CaCl2溶液轻轻悬浮菌体至均匀，冰上放置30min。4、4℃下5000rpm离心6min。5、弃上清液，用2ml冰预冷的0.1M CaCl2溶液轻轻悬浮菌体至均匀，冰上放置片刻后即制成感受态细胞悬液。6、以上制好的感受态细胞悬液可在冰上放置，24小时内直接用于转化实验，也可加入15%高压灭菌过的甘油，混匀后，分装于1.5ml离心管中，每管100µ l感受态细胞悬液，置-70℃条件下保存。.(二) 质粒DNA转化大肠杆菌1、取100µl摇匀后的感受态细胞悬浮液（如是冷冻保存液，则需化冻后马上进行下面的操作），加入5µl连接产物，轻轻摇匀，冰上放置30min后，于42 IPTG水浴中保温90s，然后迅速在冰上冷却2min。2、加入900µl LB液体培养基，则总体积约1ml，混匀于37℃振荡培养90分钟使受体菌恢复正常生长状态并使转化体产生抗药性Amp[sup]r[/sup]。3、在预制的LB琼脂平板上，加40uL 20mg／mL的Xgal和4uL 200mg／mL的IPTG溶液，并用灭菌玻璃推子(酒精灯上烧后冷却)，均匀涂布于琼脂凝胶表面，37℃倒置吸收。4、将恢复培养的菌体4000rpm离心5min，移去上层900µl LB培养基，用余下的100µl重悬菌体至均匀。(四) α互补现象的检查将重悬菌体均匀涂布于含X-gal+IPTG+氨苄青霉素的LB平板上，37℃倒置培养12—24h，出现菌落。其中白色菌落从理论上讲为重组克隆。如果进一步验证，可挑取多个白色菌落分别接种到1ml含有氨苄青霉素的LB液体培养基中，37℃振荡培养6-8h，然后提取质粒酶切验证，或进行菌落PCR扩增鉴定。

  • 大肠菌群检测你现在还用传统方法吗？听说过酶底物法检测吗？

    不知道各位现在使用的是什么方法检测大肠总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌，还是传统的多管发酵还是滤膜法呢，下面我为大家推荐一种新的方法——酶底物法。水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2014程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌。序号指标名称技术指标1名称程控定量封口机2用途用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌，粪大肠菌群3可靠性无漏液,无破孔4稳定性可检测40,000个样品以上，使用寿命大于5年5方便性开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口6快捷性无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群7重量≤16kg8尺寸39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高9预热时间≤14min10噪音50dba11外罩温度40oC12封口速度 13工作电压AC 220V±10％,50HZ14封口速度51孔、97孔定量检测盘封口时间≤12秒/个15工作环境温度-10oC-50oC16检测范围配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml(水样不稀释）配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml(水样不稀释） 该检测方法是国际上发达国家普遍采用的检测方法,相比我国标准的检测方法,如多管发酵及滤膜法具简便快捷，其选择性培养基具有抑制杂菌的作用，假阳性低，定量准确。由于该方法的方便快速，在实验室日常检测中能提高效率，缩短检测时间，在应急监测中能及时报出数据，避免造成大的公共安全事故。

  • 还在为大肠菌群酶底物检测试剂烦恼么？

    小编为你解忧，采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。【工作原理】加入含有总大肠菌群细菌的水样，放入程控定量封口机中，目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养，总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现黄色。程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪（耐热）大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。· 通过9900Z sealer PLUS程控定量封口机自动将样品／试剂混合液分配到独立孔中。· 培养结束后，阳性孔数可以转化为 MPN 值。· 51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。· 97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。· 整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。【使用方法】定性测试：第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解，36℃培养24h；第二步、结果判读 无色=阴性 黄色=总大肠菌群阳性 黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性定量检测第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解；第二步、倒入51孔定量检测盘（定量孔板）或97孔定量检测盘（定量孔板）中；第三步、用程控定量封口机对定量检测盘（定量孔板）进行封装，36 ℃培养24h；第四步、51孔定量检测盘（定量孔板）结果判读： 无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数。97孔定量检测盘（定量孔板）结果判读无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数

  • 得没得肝癌，撒泡尿照照

    得没得肝癌，撒泡尿照照

    额。。。。看题目比较有趣，医学领域的，看着比较深奥，竟然使用的是分光光度计法，当课外知识读读吧~ 随着转基因技术的不断发展，转基因作物、转基因牲畜、转基因疫苗等相继出现，现在，科学家们又研制出了能够检测肿瘤的转基因细菌。小鼠口服这种转基因大肠杆菌后，细菌会经由肠道吸收进入肝脏，如果小鼠的肝脏内存在转移瘤，细菌就会开始大量繁殖并产生萤光素（luciferin）；最终，萤光素会随小鼠的尿液排出体外，只要尿液检测发现小鼠尿液中出现萤光素，就说明小鼠出现了肝转移瘤。研究论文于5月27日发表在《科学》子刊《科学转化医学》（Science Translational Medicine）上。在癌症致死的病例中，有90%都是因为癌症发生了扩散和转移。肝脏是肠癌、乳腺癌、胰腺癌等转移瘤发生的主要部位，而肝转移瘤由于体积小且数量多，对临床治疗上提出了很大挑战。虽然对肝转移瘤的治疗在近些年取得了一些进展，但由于诊断不及时，很多时候不能根治性切除肿瘤。因此，亟需一种能够在早期发现肝转移瘤存在的检测方法。由于肿瘤部位的免疫屏障受损，加上腐坏的肿瘤中心营养过剩，微生物通常会在此聚集繁殖。虽然人们过去也使用过细菌进行癌症治疗，但都是直接将高浓度细菌注射到血液系统中，而这样做会产生一定的安全隐患。为了让细菌选择性地只在肝脏内繁殖，并尽量减少其在全身的扩散，研究人员们希望用口服的方式，利用正常的生理消化过程，让细菌从肠道通过肝门静脉进入肝脏。研究者通过转基因手段制造了一种不会让小鼠致病的大肠杆菌——E. coli Nissle 1917（EcN）。在给小鼠喂食这种菌以后，通过核磁共振成像和病例组织分析，发现EcN仅在长有转移瘤的肝脏进行繁殖，在血液和其他健康器官上都基本检测不到，并且小鼠在服用EcN后没有出现不良反应。由于肝转移瘤的来源较多，研究者分别利用人卵巢癌、肠癌，以及小鼠结肠癌、肺癌和胰腺癌细胞在小鼠身上诱导出了肝转移瘤，结果发现EcN都可以在其中进行繁殖——这意味着，EcN可以用来探测各种原因引起的肝转移瘤。接下来就是这种转基因细菌最神奇的地方了。EcN会产生半乳糖苷酶，这种酶能够将LuGal（一种可溶的萤光素和半乳糖的结合体）分解产生萤光素。因此在给小鼠喂食EcN一定时间后，只需向小鼠血液中注入LuGal，收集尿液，然后利用试剂盒和分光光度计检测其中的萤光素就可以了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512221002_578955_2980891_3.jpg检测原理：转基因大肠杆菌EcN经小鼠口服后，会通过肝门静脉被吸收至肝脏，并在肝脏内进行增殖。之后给小鼠血液内注射酶切底物引入的底物被益生菌产生的酶剪切，生成萤光素，随尿液排除后即可进行检测。图片来源：研究论文随着患肝癌的病人越来越多，这种高敏感、无创、无放射性的方法可以用于长时间内的多次检测。这种检测方法不但有利于尽早发现肝转移瘤，同时还能减少治疗产生的毒副作用。一旦需要结束治疗，只需服用抗生素就能将EcN从体内清除。此外，其他消化道肿瘤如大肠癌和结肠癌，也可以利用这一方法进行检测。研究人员希望今后可以将这种方法应用于临床，不过在这之前，还需要进一步研究这种口服益生菌是否会对人肠道内的共生菌产生影响，以及是否会触发免疫反应。另外，如果能够开发出廉价的尿检试纸，将会让这种方法更加方便快捷。参考文献：Danino, Tal, et al. "Programmable probiotics for detection of cancer in urine."Science Translational Medicine 7.289 (2015): 289ra84-289ra84.PS：“萤光素尿”意味着你患了癌症，那下图这种呢？别担心，你只是甜菜根（也可能是红心火龙果或者红苋菜）吃多了而已。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512221003_578961_2980891_3.jpg文章转载自果壳网。

  • 【天瑞论文奖+第三届原创】糖酶的新近发展

    糖酶的新近发展摘要：简要介绍了糖酶中淀粉酶、乳糖酶、纤维素酶作用机理和应用前景；详细介绍了α-葡萄糖苷酶的理化性质、作用机理、研究现状以及展望了其应用前景。关键词：糖酶；α-葡萄糖苷酶；研究现状；应用前景酶制剂作为一类绿色食品添加剂，用于改善食品品质和食品制造工艺，其应用已越来越普遍，品种也不断增多。其中，糖酶（carbohydrases）是一种应用相当广泛的酶类。它通过裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成较小的分子；也能催化糖单位结构重排，形成新的糖类化合物，这类反应被称为转糖苷作用；此外，一些酯酶能作用于酯化的糖类，这类反应在改变果胶物质的功能性质上是很重要的。 本文大致介绍了糖酶中淀粉酶（amylase）、乳糖酶(lactase)、纤维素酶(cellulose)。主要介绍了α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)，一种新型的糖苷酶。1.淀粉酶淀粉是由葡萄糖通过α-1 ,4糖苷键和α-1,6糖苷键连接而成的高分子化合物，而糖酶广泛分布于自然界，能裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成为较小的分子，两者具体作用方式如下图所示。 淀粉工业中常用的糖酶有以下四类:（1）α-淀粉酶(液化酶，α-Amylase，α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶，EC3.2.1.1)，主要来自芽胞杆菌和曲霉，它是一种内切型淀粉酶，作用于淀粉是从淀粉分子的内部任意切开α-1,4-糖苷键，使淀粉分子迅速降解，失去粘性和碘的呈色反应，同时使降解物的还原力增强。(2)β-淀粉酶(β-Amylase，α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶，EC3.2.1.2)，在工业上应用的酶制剂主要来自植物(如大麦)和微生物(芽孢杆菌)。作为外切型淀粉酶，它作用于淀粉时从还原端以麦芽糖为单位切断α-1,4-糖苷键，但产物不是α型的麦芽糖，而是[font

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