粪大肠菌群质控样品定量

第一次买了瓶总大肠菌群冻干粉质控样，有点看不懂质控证书，证书上的特性值和特性值区间，是不是就是真值和真值范围，但特性值那栏又有个对数是什么意思，

检测大肠菌群质控样品时。按照厂家说明书进行准备以及检测，但是培养后原液与负1检测出的菌落数量不成比例，原液长几千的情况下。负1也就能长几十，求大神解惑

我是做水质检测的，想请教有经验人士，粪大肠菌群用多管发酵法检测的有什么质控措施？谢谢赐教

实验室刚刚开展了粪大肠菌群这个项目，请问有经验人士对于该项目有些什么质控的措施，如何判断其结果是可靠的。实验室使用多管发酵法。万分感谢！

我们实验室是做水质检测的 跪求粪大肠菌群检测的质控措施及质控指标，多管发酵法检测。谢谢

[table=100%][tr][td]最近实验室要CMA认证，本人负责了总大肠菌群和粪大肠菌群，是根据《水和废水监测分析方法（第四版）》来做的。但现在就只练了一般的水样，并不知道是否正确。平行也是感觉很杂乱。请问各位前辈，你们平时检测时或者之前经历过认证时，是有买标准菌株吗？比如质控菌株（ATCC25922）和产气肠杆菌(ATCC13048)这样的？据说CMA认证必考微生物，还是很忐忑的。很担心现场考察一个手抖就被毙了。如果前辈有什么好的经验，也请多多指教。谢谢！[/td][/tr][/table]

刚刚接触微生物，现在现在做347.2粪大肠菌群，微生物小白，希望大佬耐心，么么哒！！第一，培养基分装试管灭菌，里面的杜氏小管要不要排空气？灭菌后可以保存使用吗？怎么保存？第二培养的时候要不要每个试管继续把纱布缠上？还是直接去掉纱布，塞上瓶塞就放微生物培养箱？第三，这个标准的质控怎么做？空白，标准菌株，都要做吗？还有那些需要注意的细节，希望大佬多多提点，谢谢

水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液，以及其他行业(如餐饮业、食品加工等)排入地表水中的污水，快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。1．方法原理应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的甲臜(Formazane)产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。2．水样采集用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需加1．5％硫代硫酸钠5ml除去余氯。3．方法和步骤 每份预监测水样，接种水样总量为55．5ml，分别接种大纸片五张，小纸片10张。每张大纸片接种10ml水样，五张小纸片每张接种1ml，另五张小纸片接种1：10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上，用手轻轻压平，作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37℃±l℃培养18～24h观察结果，测粪大肠菌群44．5℃±l℃培养18～24h，观察结果。4．判定标准①纸片上出现紫红色菌落，周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。③纸片呈紫红色或紫色，菌落周围无黄圈者为阴性。④酸性水样接种后纸片变黄，经培养无紫红色菌落者为阴性。⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者，应作复发酵进行验证。5．报告结果根据阳性纸片张数，查MPN值表(如水样污染较重可采取适当稀释后接种，查表5-2-10 MPN表后乘以稀释倍数，报出结果)，报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。

做海水大肠杆菌的检测，可是只找到了粪大肠菌群的检测。三种检测方法有什么不一样的？好多文献大肠杆菌用的就是总大肠菌群的检测方法，不知对结果会有多少影响

各位大神好，最近刚接触大肠菌群和粪大肠菌群实验，遇到了一些问题，请各位指教，谢谢1. 大肠菌群测定中，需要取菌群的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。请问这里的镜检的意义是什么？就是看是阴性还是阳性吗？不需要数镜片上有多少个菌？2. 大肠菌群测定中，进行平板分离后革兰氏染色，阳性就不需要做复发酵了吗？那报告怎么出结果？革兰氏阴性的话，要做复发酵，然后根据检数表来计算每升水样中的大肠菌群群数，再换算成每克污泥的大肠菌群数？3. 称取污泥样品1g，最后是1：:10均匀菌液（100mL），每升水样中总大肠菌群数是170，从每升水样中的大肠菌群群数，换算成每克污泥的大肠菌群数是这样算吗：170*0.1/1=17 个/g

环境监测行业里，测水样的粪大肠菌群，是用HJ347.2-2018标准，测总大肠菌群，是用GB/T 5750.12-2006。 那假如同一个水样，测粪大肠菌群，也要测总大肠菌群。那是不是总大肠菌群的结果一定大于粪大肠的结果呢？是否像总氮氨氮一样有必然的从属关系呢？一直很困惑。

小编为你解忧，采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。【工作原理】加入含有总大肠菌群细菌的水样，放入程控定量封口机中，目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养，总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现黄色。程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪（耐热）大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。· 通过9900Z sealer PLUS程控定量封口机自动将样品／试剂混合液分配到独立孔中。· 培养结束后，阳性孔数可以转化为 MPN 值。· 51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。· 97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。· 整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。【使用方法】定性测试：第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解，36℃培养24h；第二步、结果判读 无色=阴性 黄色=总大肠菌群阳性 黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性定量检测第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解；第二步、倒入51孔定量检测盘（定量孔板）或97孔定量检测盘（定量孔板）中；第三步、用程控定量封口机对定量检测盘（定量孔板）进行封装，36 ℃培养24h；第四步、51孔定量检测盘（定量孔板）结果判读： 无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数。97孔定量检测盘（定量孔板）结果判读无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数

请问大家，我需要检测 粪大肠菌群 大肠菌群 菌落总数 这些微生物指标，作为检测机构的话相应的实验室条件需要哪些呢？比如洁净室的级别，环境温湿度，及其他硬件设施呢？

大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍大肠菌群介绍总大肠菌群耐热大肠菌群粪大肠菌群大肠杆菌致病性大肠菌O517相互关系大肠菌群（总大肠菌群） 粪大肠菌群&耐热大肠菌群 大肠杆菌

请问水质中粪（总）大肠菌群在CMA评审中会被抽到盲样考核吗？网上能买到标准样品吗？是定性还是定量的？求解答啊

粪大肠菌群是GB3838-2002地表水环境质量标准表1中规定的监测指标，而耐热大肠菌群是GB5749-2006生活饮水卫生标准微生物指标中规定的检测指标，有人说这两项指标仅只是叫法不同，其实就是同一项指标。果真是这样的吗？

关于[color=#000000]水质粪大肠菌群的测定多管发酵法[/color]标准菌株与标准样品选用解读 2018年12月26日，生态环境部发布了HJ/T 347.2-2018《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法》行业标准，该标准是对HJ/T 347-2007《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)》中多管发酵法的修订和取代，于2019年6月1日正式实施，适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。 与HJ/T 347-2007标准相比，新版标准新增了多管发酵法的精密度、准确度、阳性和阴性对照、培养基检验等相关内容。实验室需要购买阳性质控菌株大肠埃希氏菌和阴性质控菌株产气肠杆菌作为标准阳性和阴性对照，本中心根据标准对菌株特性要求，筛选了两株标准菌株，具体特性见下，供实验室参考。，满足客户在新标准应用过程中的方法验证、质量控制、人员考核等方面需求。[b]CICC 10389大肠埃希氏菌Escherichia coli[/b][color=#333333][/color][align=left]l [b]形态学：[/b][/align][color=#333333][/color][align=left]菌体形态：[/align][color=#333333][/color][align=left] [/align][color=#333333][/color][align=center][img=,650,]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201905/Original/bbb81e27e81a4fe6b95a2f6b38f24cd0.png[/img][/align][color=#333333][/color][align=left] [/align][color=#333333][/color][align=left]营养琼脂（NA）培养基，36℃±1℃培养18h，菌体短杆状，(0.6~0.7)μm×(1.0~1.7) μm，革兰氏阴性，单个、成对或成堆排列，不产芽胞。[/align][color=#333333][/color][align=left]菌落形态：[/align][color=#333333][/color][align=center][img=,650,]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201905/Original/06c202e5d6f142f688c4635350142324.png[/img][/align][color=#333333][/color][align=center]营养琼脂（NA）培养基，36℃±1℃培养18h，菌落乳白色，圆形，表面光滑、湿润，不透明，边缘整齐。[/align][color=#333333][/color][align=left]l [b]关键特性：[/b][/align][align=left][b][color=#000000]乳糖蛋白胨培养基[/color] [color=#000000]37℃±0.5℃，24h产酸产气[/color][/b][/align][align=left][b]EC肉汤培养基 44.5[color=#000000]℃±0.5℃，24h产酸产气[/color][/b][/align][color=#333333][/color][table][tr][td=1,1,189] [/td][td=1,1,236] [/td][/tr][tr=#001000][td=1,1,189] [/td][td=1,1,236]44.5℃±0.5℃，24h产气[/td][/tr][/table][color=#333333][/color] [b] [/b][color=#333333][/color][align=center][img=,650,]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201905/Original/deb19a8e14744abab2337586f58e154d.png[/img][/align][color=#333333][/color][align=center]A2. 乳糖蛋白胨培养基：产酸产气。B2. EC肉汤：发酵产气。[/align][color=#333333][/color][align=center]A1和B1.空白对照[/align][color=#333333][/color][align=center] [/align][color=#333333][/color][align=center][b]CICC 10293产气肠杆菌Enterobacter aerogenes[/b][/align][color=#333333][/color][align=left]l [b]形态学：[/b][/align][color=#333333][/color][align=left]菌体形态：[/align][color=#333333][/color][align=center][img=,650,]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201905/Original/3bba45fc867c4e7fab18b235505e33b7.png[/img][/align][color=#333333][/color][align=left]营养琼脂（NA）培养基，36℃±1℃培养18h，菌体短杆状，(0.5~0.6) μm×(0.7~1.7) μm，革兰氏阴性，单个、成对或成堆排列，不产芽胞。[/align][color=#333333][/color][align=left]菌落形态：[/align][color=#333333][/color][align=center][img=,650,]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201905/Original/68e14c8804574c96886ea82b0a5cc687.png[/img][/align][color=#333333][/color][align=left][b][/b][/align][color=#333333][/color]营养琼脂（NA）培养基，36℃±1℃培养18h，菌落灰白色或乳白色，圆形，表面光滑、湿润，不透明，边缘整齐关键特性：[color=#000000]乳糖蛋白胨培养基 [color=#000000]37℃±0.5℃,24h产酸产气；EC肉汤，[color=#000000]44.5[/color][color=#000000]℃±0.5℃，24h微弱生长，不产酸产气。[/color][/color][/color]有了对的标准菌株，实验室在做的过程中还有一道槛，那就是要做标准菌株的确认、保藏，还要制备成定量的菌悬液，在制备定量产品过程中，等计数结果出来，原来的菌悬液的浓度就又变了，要知道，大肠的菌悬液是非常不稳定的。根据HJ/T 347.2-2018《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法》标准要求，实验室在样品检测和培养基验证过程中，[color=#000000]可直接使用国家级菌种中心生产加工的定量[/color][url=http://www.china-cicc.org/summarize.html][b]标准菌株[/b][/url][color=#000000]产品。因此，实验室可以直接采用定量标准菌株，[color=#333333]中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)[/color][color=#333333]研制开发了大肠埃希氏菌定量[/color][url=http://www.china-cicc.org/summarize.html][b]标准菌株[/b][/url][color=#333333]CICC 10389-HQA和产气肠杆菌定量[/color][url=http://www.china-cicc.org/summarize.html][b]标准菌株[/b][/url][color=#333333]CICC 10293-HQA产品，浓度范围300～3000MPN/L，附带证书，实验室水化溶解后即可使用。[/color]产品是下面这样式儿滴，可以省实验室好多精力。[/color][color=#333333][/color][align=center][img=,,400]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201907/Small/3f6c2cf1ce594c82b8572a469352efa4.jpg[/img][img=,,400]http://www.china-cicc.org/UploadFiles/Photo/201907/Small/0b9fc686417340c8a4617fa3de5c27f1.png[/img][/align][color=#333333][/color][align=left]质控样品选择[/align][align=left][color=#000000] 目前市面上绝大多数粪大肠质控样品为食品检测用，切记，食品的粪大肠菌群样品不适用于水质的粪大肠检测，为什么？请看下面HJ 347.2和GB 4789.39-2013 《食品安全国家标准 粪大肠菌群计数》的 区别：[/color][color=#000000]序号 项目 HJ 347.2-2018 GB 4789.39-2013[/color][color=#000000]1 接种量不同 10mL, 1mL, 0.1mL 0.1mL, 0.01mL, 0.001mL[/color][color=#000000]2 计数方法不同 3?5管法 3?3管法[/color][color=#000000]3 初发酵培养基不同 乳糖蛋白胨培养基 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST肉汤）[/color][color=#000000]4 初发酵培养条件不同 37℃?0.5℃, 24h?2h 36℃?1℃, 48h?2h[/color][color=#000000]5 MPN表不同 [/color][color=#000000]6 MPN表中单位不同 MPN/100mL MPN/mL(g)[/color][color=#000000]7 结果报告不同 MPN/L MPN/mL(g)[/color][/align][align=left]因此，选择合适的质控样品对于实验室非常重要，主要看其赋值所采用的方法是否与HJ 347.2一致。中国工业微生物菌种保藏中心[color=#333333]研制的[/color][b]HJQC-001水质粪大肠菌群质控样品[/b][color=#333333]，完全适用于新标准应用过程中的方法验证、质量控制、人员考核等要求。[/color][/align][align=left][color=#001000]针对以上内容 欢迎留言交流！[/color][/align][color=#333333][/color][table][tr][td=1,1,158][color=#001000][/color][/td][td=1,1,312] [/td][/tr][tr=#001000][td=1,1,158]EC肉汤[/td][td=1,1,312][color=#000000]同时研制推出了[/color][color=#000000]HJQC-001水质粪大肠菌群质控样品[/color][color=#000000]，满足客户在新标准应用过程中的方法验证、质量控制、人员考核等方面需求。[/color]44.5℃±0.5℃,24h不产酸不产气[/td][/tr][/table]

请问由美国Idexx公司提供的，并通过美国EPA认可的“压膜机”法，所测定出来的总大肠菌群再经过紫外灯照射呈蓝色的结果是总粪大肠菌群还是E氏大肠菌群？

我想问一下粪大肠菌群的阳性菌株和阴性菌株分别有哪些，还有定量标准菌株买的哪一种啊？

请教，制衣厂臭氧处理废水菌落总数和粪大肠菌群有直接关联吗，是不是菌落总数包括总大肠菌群，总大肠菌群包括粪大肠菌群？处理前，粪大肠菌群的数据和菌落总数数据比较，是20%，处理后，占1.7%，数据合理吗谢谢大家

最近粪大肠菌群的测定 多管发酵法要做方法变更，但是要不要做有证标准样品呢，因为标准中也没有明确指出要用标样。

环境标准《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》已编制完成，目前开始征求意见，附件是该标准的征求意见稿。

细菌总数hj1000-2018、大肠菌群、粪大肠菌群hj347.2-2018等水质采样，需要采集全程序空白吗？

我想问问，做粪大肠菌群加入小导管的目的是什么？小导管为什么会有汽泡产生？

不知道各位现在使用的是什么方法检测大肠总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌，还是传统的多管发酵还是滤膜法呢，下面我为大家推荐一种新的方法——酶底物法。水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2014程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌。序号指标名称技术指标1名称程控定量封口机2用途用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌，粪大肠菌群3可靠性无漏液,无破孔4稳定性可检测40,000个样品以上，使用寿命大于5年5方便性开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口6快捷性无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群7重量≤16kg8尺寸39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高9预热时间≤14min10噪音50dba11外罩温度40oC12封口速度 13工作电压AC 220V±10％,50HZ14封口速度51孔、97孔定量检测盘封口时间≤12秒/个15工作环境温度-10oC-50oC16检测范围配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml(水样不稀释）配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml(水样不稀释） 该检测方法是国际上发达国家普遍采用的检测方法,相比我国标准的检测方法,如多管发酵及滤膜法具简便快捷，其选择性培养基具有抑制杂菌的作用，假阳性低，定量准确。由于该方法的方便快速，在实验室日常检测中能提高效率，缩短检测时间，在应急监测中能及时报出数据，避免造成大的公共安全事故。

请问一下，大家在做粪大肠菌群时，检测报告结果是以MPN/L还是个/L为单位？

发帖人：[font=&][size=12px][color=#333333]啊恘[/color][/size][/font][font=宋体][color=black]链接：[/color][/font][url=https://bbs.instrument.com.cn/topic/6469521][color=black]https://bbs.instrument.com.cn/topic/6469521[/color][/url][b][font=宋体][color=black]问题描述：[/color][/font][/b][color=black] [/color][font=宋体][color=black]做海水大肠杆菌的检测，可是只找到了粪大肠菌群的检测。三种检测方法有什么不一样的？好多文献大肠杆菌用的就是总大肠菌群的检测方法，不知对结果会有多少影响？[/color][/font]

粪大肠菌群标准方法里的单位是MPN/L，排放标准确是个/L，报告结果里的单位怎么写呀？

来信：　　《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ 347.2-2018）和《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》（HJ347.1-2018）等两个方法规定的适用范围均为“本标准适用于地表水、 地下水、 生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。”请问这两个方法是否适用于医疗机构废水中粪大肠菌群的测定？ 回复：　　《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ 347.2-2018）方法与《医疗机构水污染物排放标准》（GB 18466-2005）规范性附录A多管发酵法的原理相同。HJ 347.2-2018是对GB 18466-2005附录A方法的进一步细化和完善，增加了样品采集和保存、生活饮用水等清洁水体的12管法操作步骤、对照试验、质量保证和质量控制、废物处理等内容。因此，《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ 347.2-2018）适用于医疗机构废水监测。 《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》（HJ 347.1-2018）的检测原理和结果表示与多管发酵法均不同，不能直接使用。如果检验检测机构拟采用滤膜法，应开展方法的等效性验证。