阪崎肠杆菌质控样品定性

[b]阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，如果用SN标准检测肠杆菌科还需要再另检阪崎肠杆菌吗？谢谢！[/b]

2007年7月下旬，国家质量监督检验检疫 总局公布了今年4月入境的不合格食品、化妆品信息，其中全球最大的乳品原料供应商新西兰恒天然多个批次的全脂奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。这些有问题的全脂奶粉，总数达277.9吨，分别是今年1月和3月进口的。 恒天然公司表示，尊重中国政府的相关考虑和规定，已对被检验出阪崎肠杆菌的产品按规定做了处理。 阪崎肠杆菌是寄生于人和动物肠道的“条件性肠道致病菌”。也许，阪崎肠杆菌目前只引起了专业人员的高度重视，并未吸引普通公众的目光，原因在于它不仅对公众是陌生的，且现在造成的危害似乎并不算重。回顾近年来国内的食品安全问题，阪崎肠杆菌也确实被忽略了。 2004年安徽阜阳出现著名的“大头婴儿”事件。据该市县级以上医疗机构核查统计，从2003年5月以来，因食用劣质奶粉出现营养不良综合征共171例，死亡13例，病死率7.6%。婴儿发病和死亡的主因是由于劣质奶粉导致的营养不良，但是现在回过头来看，有一个可能的致病因素在当时被忽略了——这些劣质奶粉中含有阪崎肠杆菌。 阜阳劣质奶粉事件发生后，中国疾控中心营养与食品安全研究所的刘秀梅等人运用来自美国和加拿大的方法，建立了婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分离鉴定技术。从87份阜阳劣质奶粉样品中，他们检测到11份阪崎肠杆菌阳性样品，污染阳性率为12.6%。 这是国内首次从婴儿配方奶粉中分离到阪崎肠杆菌菌株。固然，劣质奶粉导致婴幼儿死亡是因其中蛋白质含量极低，不能满足婴儿的生长需要。比如，按照3-6个月婴儿的生长需要，蛋白质每日摄取量为3g / kg，而劣质奶粉每日只能提供0.07g / kg的蛋白质。所以，长期食用这种几乎没有营养的伪劣奶粉的婴儿，会产生四肢短小，身体瘦弱，头部尤显偏大的症状。 阪崎肠杆菌的污染是否会对当地婴幼儿造成雪上加霜的伤害呢？事过境迁，要得出确切的结论已经很难。不过事后查出阜阳劣质奶粉含有阪崎肠杆菌，对今天的食品安全不啻是敲响了一次警钟。 对婴幼儿最具杀伤力 早在2004年，广州检验检疫局就率先提出，在进口婴幼儿配方奶粉和奶制品中，对阪崎肠杆菌进行监测，并首次从进口奶粉中检查出阪崎肠杆菌。2007年以来，广州、中山、汕头检验检疫部门在进口奶粉中已多次检出阪崎肠杆菌。因此国内的专业人员多次呼吁，要重视阪崎肠杆菌对食品污染和对人健康的危害。

一、阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症，死亡率高达50％ 以上。目前，微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危害受到人们的关注并被报告。例如，味全配方奶粉2008年年10月份被检出含有致病菌阪崎肠杆菌。　　阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其引发的婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。多份研究报告表明婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道,在某些情况下，由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40％～80%。阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。据报道,国外乳业巨头曾因此被召回.在美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，阪崎肠杆菌从此成为世界瞩目的焦点。但是国内企业鲜有自查能力,原因是国内以前还没有专门的检测手段,而去买一套以前国内从未有过的检测设备也不是马上就可办到的。目前,国外 奶粉(乳)制品巨头却拥有检测手段,惠氏中国宣称保证在中国销售的每一个产品都经过了阪崎肠杆菌的检测才上市。同样宣称设有此检测设备的企业还有美赞臣中国公司。　　在国外发现的奶粉中的阪崎肠杆菌并非有其特定的区域局限性，中国奶粉企业又面临一项大难题。　　2005年5月20日，由中国检验检疫科学研究院和天津出入境检验检疫局牵头完成的《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准在京通过了审定。这项标准的出台，解决了我国检测婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌无标准、无检测方法的问题。10月该标准被实施。　　该标准建立了阪崎肠杆菌的改进的传统检测方法、普通[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法和荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法。　　据了解，阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的一种致病菌。它是存在自然环境中的一种“条件致病菌”，已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌，可导致任何年龄层人群的疾病，尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大，严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。　　继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，此后成为世界关注的焦点。我国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定，对奶粉严查此菌。　　今年以来，广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪歧肠杆菌。　　二、控制阪崎肠杆菌危险的几点建议 　　（1）制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准，建立有效控制措施，将其危险性降低到最低。　　（2）制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则，研究降低阪崎肠杆菌污染水平的方法，在生产环境和配方奶粉中降低阪崎肠杆菌的浓度和流行的危险性；为高危人群生产较大比例的商业无菌配方替代产品。　　（3）制定有效的环境监测计划，将肠杆菌科而不是大肠杆菌作为工业生产线的卫生指标菌。　　（4）建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径等进行调查研究；加强相关学科的基础研究，包括生态学、分类学、菌株毒力等。　　（5）用商业无菌液体或开水冲调配方食品，喂养婴幼儿后剩余的调配食品应放置冰箱保存，并在食用前再加热。我国应根据实际情况制定相应管理办法，加强对阪崎肠杆菌的检测技术及控制技术研究，进一步完善婴幼儿配方食品标准，以保证我国广大婴幼儿群体的健康与安全。　　三、阪崎肠杆菌检测必备仪器--荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪：　　实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统（英文全名是Real-time Quantitative [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Detection System），简称实时荧光q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]，q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]的核心是实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪及与其配套的检测分析软件系统。　　聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction简称[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势，因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快，成为分子生物学诊断的主流，至今仍处于学术和应用前沿，发展至今已有三代产品：第一代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]定性检测技术及设备由基因扩增热循环仪（DNA Thermal Cycler）+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂构成；第二代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-DNA终点定量技术及设备（End-point quantitative [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] detection）由基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂构成，其又分为终点酶免定量（End-point ELISA-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]）和终点荧光定量（End-point Flour-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]）两种；第三代产品为Real-time q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-DNA/RNA实时荧光定量检测。　　q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测灵敏度高，检测线性范围宽，检测精度和重复性好等突出优势，因此被公认为目前世界用于临床及科研的最先进核酸分子诊断技术，被美国FDA承认并推崇。检测项目包括：食物等病原菌以及疾病病毒等病原体如：乙肝病毒HBV DNA，丙肝病毒HCV RNA，艾滋病病毒HIV RNA，沙眼衣原体CT，淋病双球菌NG，巨细胞病毒CMV，结核分支杆菌Mtb、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等。　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪的应用范围广，几乎所有的生命科学领域都要涉及：食品检测、临床检验、疾病控制、检验检疫、科研实验室、食品安全、化妆品检测、环境卫生等。国内多家试剂厂商生产了包括肝炎、性病、优生优育、呼吸道疾病、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等在内的数十种荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒，购买方便，价格便宜，并获得了国家相关认证。　　值得一提的是鉴于当前流行病的频发以及实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术的实际应用，国内外已将实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及行业标准作为法律依据。例如：　　SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法　　GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测方法　　GB/T 19438.2-2004 H5 亚型禽流感病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测方法　　ISO22174-2005 食物病原体[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法　　相对于价格十分昂贵的进口仪器，选择质量性能与进口仪器相当而售价只有进口仪器三分之一甚至五分之一的优质国产荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪是国内绝大多数用户的必要选择，也是国家卫生主管部门、国家卫生部临床检验中心以及国家食品药品监督管理局提倡的；使用质量性能与进口仪器相当的国产荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪能为国家节省大量外汇，使更多的用户能够拥有先进的实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术和设备，同时还能促进国产仪器的技术进步、民族产业的发展，利国利民。　　西安天隆科技有限公司生产的TL988型实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪经过国家药监局指定的、具有国家质量检验检疫局认定的具有CNAL全球互认检测资质的检测中心检测合格，性能达到同类产品国际先进水平，并通过两家国家药物临床基地临床试验，获得了国家食品药品监督管理局SFDA核发的医疗器械注册证，并符合国家卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理规范》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》。　　2005年至今我国科研人员围绕着阪崎氏肠杆菌的分类、致病机理、危害评估、减少污染措施、检测方法仪器和标准等进行了研究，相关研究论文包括：　　阪崎肠杆菌的生物学性状与健康危害，裴晓燕，刘秀梅， 中国疾控制中心营养与食品安全所 　　乳制品中的阪崎肠杆菌可致婴儿死亡，中国食品产业网 2008年5月28日10:56 　　乳品检测中实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪的研制，彭年才，苏明权，张镇西，中国乳品工业，CN23-1177/TS200705：62-64；　　乳制品中阪崎肠杆菌的快速检测，彭年才，李明，食品安全导刊，CN11-5478/R 2008.07；　　婴儿奶粉中阪崎肠杆菌及其检测，彭年才，张镇西，苏明权，中国乳业，CN 11-4768/S，2008.08。　　浅析乳品中高危害食品源性致病菌阪崎肠杆菌的快速检测，彭年才 内蒙古乳业 P18-20, 2008，03

阪崎肠杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰阴性无芽孢杆菌。作为肠杆菌科的一种，一直被称为黄色阴沟肠杆菌，直到1980年才更名为阪崎肠杆菌。该菌是肠道正常菌丛中的一种，在一定条件下可引起人和动物致病，所以称为“条件致病菌”。 　　阪崎肠杆菌自然来源非常广泛，在水、土壤、植物根茎、动物肠道甚至加工食品都可存在，其中婴儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要渠道。阪崎肠杆菌的繁殖、宿主和感染途径一直是研究人员正在进行的课题。2002年，有研究人员从奶酪、碎牛肉、腊肠和蔬菜中分离到阪崎肠杆菌，但目前仍不能确定该菌的自然宿主到底是什么。 　　2003年又有研究人员从厩螫蝇中肠中分离到阪崎肠杆菌?熏因而认为厩螫蝇幼虫肠道是阪崎肠杆菌的环境宿主之一。而厩螫蝇在世界范围内广泛分布?熏以牛、马、狗、猪和人的血液为食?熏在牛、猪或马的养殖场所可见该蝇?熏在牛棚更常见?熏因而可能污染牛奶。流行病学研究发现厩螫蝇的地理分布和阪崎肠杆菌感染直接相关。 　　同时，美国一家疫情控制公司的技术报告中记载舍蝇中存在阪崎肠杆菌，但没有确切记录该菌究竟是在舍蝇体内还是体外。研究人员推测，昆虫很可能是阪崎肠杆菌的环境宿主。 　　阪崎肠杆菌感染并非是不治之症，用抗生素就可以有效控制。虽然阪崎肠杆菌的毒力因子和致病性现在还不太清楚，但已发现有些阪崎肠杆菌可能产生一种毒力因子——类肠毒素样化合物。而且，组织培养也发现一些菌株可产生细胞毒效应。 　　与肠杆菌属其他细菌相比?熏阪崎肠杆菌对常用的抗菌药更敏感。但是由于阪崎肠杆菌耐药性不断增强?熏近来一些专业人员建议采用碳青霉烯类或新一代头孢霉素和其他药物联合治疗阪崎肠杆菌。不过在临床上，需要根据临床诊断和细菌的药敏试验来找到合理的药物配伍治疗方案。

2014全年没做出来阪崎肠杆菌，食品中，主要是奶粉中

关于阪崎肠杆菌，新国标规定用缓冲蛋白胨水BPW，规定44℃下称量，但是在规定的温度下，我们不可能完全准确的在44℃下称量，因为如果检侧样品多的情况下没有那么多的条件，那么我们测出来的值会准确么？上传该标准更方便大家讨论

旧国标中阪崎肠杆菌检验的第二步是10ml增菌培养液+90mlEE肉汤培养---做的是十倍稀释培养；而新国标中的第二步是1ml的培养液+10ml的mlst-vt做的不是十倍培养，对这些有些迷惑，请前辈们指点谢谢。

味全食品的三类配方奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。 请问现在有高手测定这项目吗？难吗？有没有阳性对照的图片呢？

[size=16px]大肠杆菌检测仪可以进行定量分析。例如，云唐YT-W80大肠杆菌仪就具有定量分析的功能。该仪器通过MBS微生物快速检测仪进行检测，加入样本后的试剂瓶放入检测仪中，检测仪会自动调整孵育温度，各检测孔位独立控温，独立检测，并直接得出样本中微生物含量。此外，大肠杆菌检测仪器还包括培养皿法、酶法、免疫法、基因法等多种检测方法，可以对被测样品进行定性定量分析，操作简便、检测快速，灵敏性高。这种仪器可以检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本，在同一温度下可检测多个样品，并具备自动控制孵育温度和孵育时间的功能。同时，它还可以检测大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、李斯特菌、酵母菌等多种微生物，适用于餐厅、制水厂、农产品及相关加工公司、药厂、药房、化妆品厂、环境监测机构、水配送公司、工商管理机构等场所。以上信息仅供参考，具体使用方法和功能可能因不同品牌和型号的大肠杆菌检测仪而有所差异。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151050521262_269_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

有人说在EMB上带有金属光泽的典型菌落，做生化一定是大肠杆菌？真的吗？我们做的时候，在EMB上带有金属光泽的典型菌落，做生化时却不一定是大肠杆菌，请大家分享一下经验。

北京商报2月2日报道 日前，国家质检总局公布了去年8月至11月进境的852批不合格食品、化妆品名单。其中，味全食品的三类配方奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。 去年10月17日，产自台湾的9.624吨配方奶粉从香港进境时被检验出阪崎肠杆菌超标，进口商为深圳市恒利安贸易有限公司。不合格奶粉包括味全婴儿配方奶粉、味全幼儿成长配方奶粉和味全较大婴儿配方奶粉。　　据了解，阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症，死亡率高达50%以上，婴儿配方奶粉是目前发现的阪崎肠杆菌主要感染渠道。此外，检验出的不合格婴儿食品还包括产自澳大利亚的宝利氏牛奶菌落总数超标、百乐斯婴儿米粉霉菌超标等。　　此次公布的不合格食品、化妆品产地涉及美国、日本、西班牙等多个国家和地区，包括葡萄酒、冻鱼冻肉、饮用水、饼干等多种产品。如美国产莱萃美品牌叶酸营养素片霉菌数超标、强维牌氨基酸混合食品原料铅和砷超标，韩国的兰芝柔润凝亮修护眼霜和大长今牌黄土美面膜被检出细菌总数超标。 (本文来源：北京商报 作者：李雪)

大肠杆菌发酵经验总结首先，补料速率与比生长速率直接影响着乙酸的生成速率和积累量（主要是补料速率与比生长速率影响发酵液中的残糖量，进而影响），所以适当的控制补料速率和比生长速率，对于控制乙酸的量有很好的效果。 其次，必须要保证充足的溶氧，并严格控制pH值，而且补酸碱的速率尽量缓和，不能太快；温度对于蛋白的表达也有很重要的影响，较低的发酵温度下所生产出的蛋白大多是有活性的，而较高的发酵温度下产生的蛋白大多一包涵体形式存在。第三，选取合理的诱导时间非常重要，一般的诱导时间选在指数生长后期，而且诱导时的比生长速率最好能控制在0.2之内，选在此时诱导，1.将菌体的快速生长期与蛋白合成期分开，使这两个阶段互不影响，有利于蛋白的高表达；2.已经得到了大量的菌体，而且菌体的生物量基本接近稳定，不论是从动力学角度，还是能耗，物料成本方面，都比较合理。第四，补料过程中的碳氮比也很重要。若氮源过高，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代谢产物的积累，氮源不足，则菌体繁殖量少从而影响产量；碳源过多，则容易刑场较低的pH，抑制菌体生长，碳源不足，则容易引起菌体的衰老和自溶。另外，碳氮比不当还会引起菌体按比例的吸收营养物质，从而直接影响菌体的生长和产物的合成。 根据自己的经验，一般情况下，对于一个稳定的发酵工艺下，如果总是在固定的发酵时间段出现溶菌现象，而且能排除噬菌体和染菌的可能性后，那就可能是因为碳氮比不合理造成的。可以适当调整碳氮比。 大家讨论得较多的是关于代谢副产物乙酸对大肠杆菌发酵的影响，针对我们论坛所发的帖，我先总结以下几点，并作出相应解决措施。一、代谢副产物-乙酸乙酸是大肠杆菌发酵过程中的代谢副产物，在多大的浓度下产生抑制作用各种说法不一，一般认为在好气性条件下，5～10g/L 的乙酸浓度就能对滞后期、最大比生长速率、菌体浓度以及最后蛋白收率等都产生可观测到的抑制作用。当乙酸浓度大于10或20g/L 时，细胞将会停止生长，当培养液中乙酸浓度大于12g/L 后外源蛋白的表达完全被抑制。预防乙酸产生的措施： 1、通过控制比生长速率来减少乙酸的产生：比生长速率越高，乙酸产生越多，当比生长速率超过某个值时，乙酸开始产生。可以通过降低温度，调节酸碱度，控制补料等方法来降低比生长速率。 2、透析培养： 在大肠杆菌的培养过程中可以用透析技术除去发酵液中的有害物质，降低乙酸含量从而实现重组菌的高密度发酵和产物的表达。3、 控制葡萄糖的浓度：葡萄糖是大肠杆菌发酵过程中重要的碳源之一，用其作碳源是要将其控制在一个较低的水平上，以减少乙酸的产生。 常用的控制方法主要有： 恒pH法：大肠杆菌会代谢葡萄等产生乙酸，使pH 值下降。因此可通过pH值的高低作为控制葡萄糖的指标，该法的缺点是pH 的变化不完全是由葡萄糖代谢的结果，容易造成补料体系出错。 恒溶氧法：菌体代谢时会消耗氧，使溶氧下降，当葡萄糖浓度低到一定程度时菌体代谢下降，消耗氧能力下降，溶氧上升。因此，根据溶氧曲线补加葡萄糖，保持溶氧恒定，可以控制葡萄糖在一定的水平。 二、温度大肠杆菌发酵最适温度是37 C，当温度最适菌体生长时，比增长速率将会增大。随温度上升细菌代谢加快，其产生代谢副产物也会增加。这些副产物会对菌体的生长产生一定的抑制作用。菌体生长过快也会影响质粒的稳定性。降低培养温度，菌体对营养物质的摄取和生长速率都会下降。同时也减少了有毒代谢副产物的产生和代谢热的产生。有时降低温度更有利于目的蛋白的正确折叠及表达。在重组大肠杆菌的发酵中不同发酵阶段其最适温度也不 同，为了能获得大量的目的蛋白，首先要保证菌体的量，因此在前期可优先考虑菌体的生长，到诱导阶段应将目的产物的表达放在首位。三、培养方式 微生物的培养方式主要有分批、连续和补料分批3种。大肠杆菌发酵大多采用补料分批培养，这是在现代发酵工艺得到优化的一种方式，能有效的优化微生物培养过程中的化学环境。使微生物处于最佳的生长环境。这种方式一方面可以避免某些营养成分初始浓度过高出现底物抑制现象，另一方面能够防止限制性营养成分被耗尽而影响细胞的生长和产物的形成。补料分批培养已广泛应用于各种各样的初级、次级生物产品和蛋白等的发酵生产中。

没有做过GCMS，求问各位大佬大肠杆菌在m9培养基中的发酵液，高速离心过0.22μm滤膜后可不可以作为样品用以检测发酵液中的组分，如果不行的话要怎么制备样品呀，求教(仪器是安捷伦7890a-7000B*

威化产品，我们自检到大肠杆菌。然后抽了一些全部混匀揉碎，一半再做，还是测到大肠杆菌，另一半送到第三方，但第三方没捡到，说的合格，这是怎么回事

日前，中国CDC（疾病预防控制中心）发布《肠出血性大肠杆菌O104H4感染防控方案（试行）》（点击此处下载全文pdf），对肠出血性大肠杆菌（EHEC）O104H4规定了严格的防范与控制措施。根据方案要求，临床诊断病例、确诊病例、疑似病例均应及时予以报告，并原则上要求其住院治疗。 　　明确3种病例诊断标准 　　各地首例确诊病例须经复核 　　根据中国CDC确定的定义，EHEC-O104H4疑似病例为，发病前10天内曾在该病流行地区旅行或居住，或发病前10天内与该病临床诊断/确诊病例有密切接触，且符合下列条件之一者（1）有血性腹泻或腹部痉挛性疼痛等症状，无实验室证据诊断为其他非EHEC-O104H4感染者；（2）有微血管病性溶血性贫血（外周血涂片破碎红细胞≥2%）、血小板减少、肾脏受累（血尿、蛋白尿、急性肾损伤）等溶血性尿毒综合征临床表现者。确诊病例为，疑似病例具备下列之一者：从粪便标本中分离到EHEC-O104H4菌株，stx1和/或stx2基因检测阳性；从粪便标本中检测到stx1和/或stx2基因阳性，同时aggR、wzy（O104）和fliC（H4）基因检测全部阳性。 　　临床诊断病例为，在同一起暴发疫情中，与确诊病例流行病学密切相关，并排除其他疾病的疑似病例。 　　根据该方案，医疗机构发现疑似病例、临床诊断病例或确诊病例时，应按照感染性腹泻报告要求上报，并在传染病报告卡中注明疑似、临床诊断或确诊EHEC-O104H4感染；及时采集粪便和其他相关标本，以备检测。 　　该方案要求，各省（区、市）首例确诊病例须经中国CDC复核。

鉴于目前恒天然奶粉出肉毒杆菌一事，一起学习一下肉毒杆菌和肉毒素。肉毒杆菌的全名叫肉毒梭状杆菌（也叫肉毒梭菌Clostridium botulinum），是一种革兰氏阳性厌氧杆菌，其生长繁殖及产毒的最适温度为18～30℃。肉毒杆菌广泛分布于土壤、淤泥及动物粪便中，其中土壤是重要污染源，它可借助食品、农作物、水果、海产品、昆虫、禽类等传播到各处。肉毒杆菌家族一共兄弟7个，本身其实没有毒性，但其中有4个能在厌氧环境下（比如肠道、密闭发酵食品）产生肉毒毒素。食品在加工、贮藏过程中被肉毒杆菌污染，食前对带有毒素的食品又未加热或未充分加热，就易引起中毒。在我国的新疆、青海等少数民族地区几乎每年都会出现自制发酵肉制品导致的肉毒中毒、甚至死亡。肉毒毒素（botulinum toxin，AX）是肉毒杆菌产生的含有高分子蛋白的神经毒素，是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强烈的生物毒素，它主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱，引起肌肉松弛麻痹，特别是呼吸肌麻痹是致死的主要原因。肉毒毒素真正被大众了解，是因为一些明星注射肉毒来除皱。虽然这个毒素的毒性比较大，一点点就能毒死人，但它本身对热不稳定，煮开几分钟就破坏掉了，真正难解决的是它的芽孢。肉毒杆菌在感觉不舒服的时候就像作茧一样用一些蛋白和糖类物质把自己包起来，然后就能“刀枪不入”，一般的加工手段都杀不死它。等它重新进入合适的环境，比如人的肠道，它又能苏醒过来继续干坏事。成人由于肠道里面的菌群早已站稳了脚跟，少量的肉毒杆菌是斗不过这些“地头蛇”的，因此对成人的危险性相对较小。但婴儿尤其是1岁以下的小宝宝，正常菌群还处于建设阶段，这个时候肉毒杆菌来捣乱的话，有可能对宝宝造成较大影响。　　我国乃至全世界都没有乳粉中肉毒杆菌的限量标准，因为肉毒杆菌在乳品中并不是常见的污染物，而标准的管理是要考虑成本的，正因如此，各国都不把它写入标准。但这并不意味着根本不管，比如这次恒天然是在企业的质量控制中发现的问题。用标准管理有限的问题，用过程的控制实现更全面的安全保障，这才是科学的食品安全管理理念。对于负责任的大企业，其质控项目数量和质控要求都是远远高于国家标准要求的。

实验室常用来破碎大肠杆菌，用于提取表达外源蛋白等试验，在超声波破碎大肠杆菌过程中常常温度探头测得大肠杆菌菌液中温度逐渐升高，有可能会致使热敏物质失活，该怎么解决呢？今天来谈谈在超声波细胞破碎仪处理大肠杆菌过程中降低温度的解决措施。 超声波细胞破碎仪在处理大肠杆菌过程中，由于超声波的空化效应会产生大量的热使菌液的温度逐渐升高，所以我们在处理样品的时候一定要采用冰浴或者其他降温方法，在这您提供两点建议，一种是用实验室的碎冰来做冰浴，示意图如下：（同学们的智慧是无穷的，此图来自于中国药科大学某实验室正在处理大肠杆菌） http://www.shunmayq.com/Upload/image/dachangganjun.jpg （图中液体为冰水混合物，也可以用碎冰） 另外一种方法一般适用于50或者50毫升以上超声细胞破碎仪处理大肠杆菌时使用。图片中超声波细胞破碎仪，。您可以将菌液放置于我们特制的双层夹套反应杯中，在冷却水循环系统上设置好您需要的温度，就可以放心实验不必担心菌液的温度升高啦 http://www.shunmayq.com/Upload/image/1234.jpg 与此同时，在处理大肠杆菌过程中实验条件摸索也来得尤为重要。功率是根据您的处理量多少来调节的，我们建议如果可以用小功率来处理样品切忌用大功率，功率越小对应的超声波的热效应也会相对降低，另外超声时间尽量放短，间隙时间尽量放长，例如超声1秒停2-3秒。

[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]大肠杆菌检测仪的检测范围是多少[/color][/font]大肠杆菌检测仪的检测范围相当广泛，它可以检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本中的大肠杆菌含量。此外，一些高级的大肠杆菌检测仪不仅可以检测大肠杆菌，还可以检测其他相关的细菌，如大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、李斯特菌、酵母菌等。同时，这些仪器具有操作简单、无需前处理过程的特点，只需将样本直接放入检测瓶即可进行检测。而且，这些仪器通常具有自动控制孵育温度和孵育时间的功能，并能在同一温度下检测多个样品。特别地，有些大肠杆菌检测仪是便携式快检仪器，可以随时随地进行检测，并且能直接连接电脑得出定量分析检测报告。因此，它们在餐厅、制水厂、农产品及相关加工公司、药厂、药房、化妆品厂、环境监测机构、水配送公司、工商管理机构等场所中有广泛的应用。对于特定的水质大肠杆菌检测仪，它们通常用于水样中的绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群和粪大肠杆菌、大肠埃希菌、菌落总数的快速检测。这些仪器可以检测饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等各类水样。综上，大肠杆菌检测仪的检测范围非常广泛，但具体范围可能因不同型号和品牌的仪器而有所差异。在选择和使用时，建议根据具体需求和场景进行选择，并参考仪器的使用说明和操作指南进行操作。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404031003041588_3376_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

分享标准，均自网络收集，上传者不保证资料完整性以及版权。下载仅供研究，请勿用于其他用途。研究完毕请及时删除，若有正版需求，请联系出版单位。GB 4789.40-2010 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

美国:奶酪染大肠杆菌致25人染病来源：食品伙伴网 日期：2010年11月6日 技术支持:PONY TEST近日美国发生一起感染大肠杆菌O157:H7的食物中毒事件，中毒的25人均食用了美国第一大会员制连锁仓储式超市好事多（Costco）销售或者免费赠予样品的方式得到的一种奶酪。涉嫌奶酪是布拉沃农场（Bravo Farms）公司生产的荷兰豪达式奶酪（Dutch Style Gouda cheese）。美国FDA和亚特兰大疾控中心等部门警告消费者不要食用该产品。消费者在食用该奶酪后出现了一些不适症状，其中有9人住院，1人可能感染溶血性尿毒症，无死亡病例。FDA认为，购买该高达奶酪的消费者应该将产品装在密封塑料袋中回收或者将其丢进密封的垃圾桶内以防止被其他人和动物食用。大肠杆菌O157:H7的症状表现为腹痛和腹部痛性痉挛。有些相关疾病较为严重而且持续较长时间。由它造成的溶血性尿毒症出现的几率很小，一般发生在5岁以下的儿童和老年人身上。患有溶血性尿毒症的人应该尽快到医院就医，因为可能损害肾脏以及可能导致更严重的疾病。

目前，我国的食品标准对大肠杆菌、菌落总数作为监控指标，而部分国家却没有将其纳入监控范围，食品界的朋友，你们认为如何控制微生物指标比较有效。[em09512]

毒黄瓜源头至今还是一个谜，排除了西班牙的黄瓜这一头号传染源，真正引起恐慌的感染源在哪里呢？过去两天来，汉堡肠出血性大肠杆菌感染人数继续攀升，因而此前关于感染高峰可能已过的判断不再有效。被形容为本次感染“震中”的汉堡当天确诊或疑似病例总数已增至569人，其中110人为重症患者。德国卫生部门官员5月31日说，实验室检测结果显示，从西班牙进口的黄瓜确实含有肠出血性大肠杆菌(EHEC)菌株，但与在德国流行的菌株不同，因此污染源仍没有得到确认。此外，在西班牙黄瓜“洗冤”之后，德国明斯特大学研究指出，人和其他一些动物都有可能是这类病菌的传染源。该校还指出，导致这次疫情的特殊病菌在过去10年间毒性增加了两至三倍。而我国卫生部6月1日也发布通知，要求做好我国可能出现的输入性肠出血性大肠杆菌感染防治。德国北部汉堡市卫生官员科尔内利娅·普鲁弗-施特克斯在5月31日的新闻发布会上说，初步检测没有在样品黄瓜中找到当前流行的肠出血性大肠杆菌菌株。随后，对其中两根西班牙黄瓜的检测结果显示，它们确实携带肠出血性大肠杆菌，但菌株与当前流行的菌株不同。感染高峰仍未过“就像先前一样，污染源仍没有得到确认，”普鲁弗-施特克斯说。一些分析师说，这项检测结果对疫情而言可谓“雪上加霜”，意味着可能流行着两种不同的肠出血性大肠杆菌，并且都有致病危险。普吕弗-施托克斯还说，过去两天来，汉堡肠出血性大肠杆菌感染人数继续攀升，因而此前关于感染高峰可能已过的判断不再有效。被形容为本次感染“震中”的汉堡当天确诊或疑似病例总数已增至569人，其中110人为重症患者。不过，汉堡卫生部门负责人强调，德方为维护公众健康而第一时间公布对西班牙黄瓜的化验结果并没有错，“保护生命应该比经济利益更重要。”

阪崎肠杆菌、沙门氏菌、金葡菌能在同一个实验室做实验里培养吗？ 这些相互之间有没有影响呢？

有没有朋友用平板计数方法测大肠杆菌的啊？如计数结果小于30是不是就是合格呢