前提:所在行业是医疗器械方向的,平常检验会使用到[color=#ff0000]河北医科大学[/color]的抗A(IgM)、抗B(IgM)试剂。根据《医疗器械生产质量管理规范 体外诊断试剂现场检查指导原则》8.7.1应当建立校准品、参考品量值溯源程序。对每批生产的校准品、参考品进行赋值。目前[color=#ff0000]中检院[/color]有抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)参考品这个标准物质。领导意见要采购此类参考品,来与现有的抗体做比对实验,看现有抗体的凝集强度是否不低于中检院的标准。提问: 1、目前单位有一份《标准品管理制度》,参考品是否是属于标准品下的一类么?是要建立新的《参考品管理制度》,还是可以直接套用在《标准品管理制度》里啊?2、8.7.1的规定意思是外部采购的参考品都必须进行量值溯源或赋值么?抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)参考品并不能进行量值溯源和赋值啊。。。中检院提供的说明书也是寥寥几句。有木有大神能够帮我授业解惑啊[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif[/img]目前处于各种凌乱中。。。
国家卫健委5月29日通报,全国新冠病毒疫苗接种超过6亿剂次。自3月27日超过1亿剂次以来,每亿剂次所需时间为25天、16天、9天、7天、5天,间隔不断缩短,这就是疫苗接种的中国速度。接种新冠病毒疫苗后,理论上体内会产生IgM、IgG及中和抗体,这些抗体与新冠病毒结合后将使病毒失去感染性。因此新冠病毒疫苗接种后,检测IgM、IgG及中和抗体水平,对于评价疫苗的免疫效果至关重要,同时为常态化新冠疫情防护政策调整提供基础性的数据参考。
http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/03/201303061749_428839_2692016_3.jpgwww.wolsen.net生化试剂,DPPH,生物阻化抗体试剂【导语】生物诊断试剂的发展虽然还有很长的路要走,但在现今生物试剂市场中,除了我们熟悉的酶联诊试剂类,其他类它成倍数的需求,证明了它涵盖面越来越多,涵盖了很多曾经未涉及的领域。生物诊断试剂,现今分为四大类:酶联诊断试剂,抗体诊断试剂,生物传感器以及DNA探针。当然,它还有其他的小类,这里就不详细一一累赘。在生物诊断试剂里,大众最陌生的恐怕就是DNA探针。DNA探针是如今检测疾病的最快捷的方式。这种大众看似很新锐的东西,用处却是十分令人称赞的。用传统模式检测出病毒,得需要几天几周,甚至上月,而它却能短短一小时内检测出病毒。它生活的延展性:它的出现,让我们引用水中的病毒检测变更加快捷起来。当然,饮用水中病毒检测只是它的一个部分,其他的行业领域,也有它重要的作用,例如中种鉴定之类。
哪位专家高手了解ELISA试剂盒检测抗体的不确定度??看了几篇相关文献,跟我们的试剂盒不太一样,目前脑袋简直一团浆糊http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09512.gif,1.重复测定是为了计算不确定度而重复的吗?因为正常样品读数的时候只读一次啊。2.阳性对照、阴性对照的不确定度要单独考虑吗?3.操作过程中用了5-50ul和50-300ul2种量程的移液器,用了10ul,30ul,90ul,100ul 几个点,那么移液器的不确定度是要把这4个点的不确定度合并吗?盼解答~
国家卫健委5月29日通报,全国新冠病毒疫苗接种超过6亿剂次。自3月27日超过1亿剂次以来,每亿剂次所需时间为25天、16天、9天、7天、5天,间隔不断缩短,这就是疫苗接种的中国速度。接种新冠病毒疫苗后,理论上体内会产生IgM、IgG及中和抗体,这些抗体与新冠病毒结合后将使病毒失去感染性。因此新冠病毒疫苗接种后,检测IgM、IgG及中和抗体水平,对于评价疫苗的免疫效果至关重要,同时为常态化新冠疫情防护政策调整提供基础性的数据参考。
[b][font=inherit]一、项目基本情况[/font][/b]项目编号:KLXZC-G-H-240009项目名称:开鲁县2024年动物免疫疫苗(含抗体监测试剂盒)采购项目采购方式:公开招标预算金额:4,433,200.00元采购需求:合同包1(开鲁县2024年动物免疫疫苗(含抗体监测试剂盒)采购项目):合同包预算金额:4,433,200.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]1-1[/td][td]兽用疫苗[/td][td]免疫疫苗及抗体 监测试剂盒[/td][td]1(批)[/td][td]详见采购文件[/td][td]4,433,200.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:春季疫苗合同签订后15个工作日内交付秋季苗2024年9月交付[b][font=inherit]二、申请人的资格要求:[/font][/b]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定:(1)具有独立承担民事责任的能力;(2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度;(3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力;(4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录;(5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录;(6)法律、行政法规规定的其他条件。2.落实政府采购政策需满足的资格要求:合同包1(开鲁县2024年动物免疫疫苗(含抗体监测试剂盒)采购项目)落实政府采购政策需满足的资格要求如下:参与的供应商(联合体)提供的货物全部由符合政策要求的中小企业制造3.本项目的特定资格要求:合同包1(开鲁县2024年动物免疫疫苗(含抗体监测试剂盒)采购项目)特定资格要求如下:(1)投标供应商为生产厂家的须具有兽药GMP证书、生产许可证(含猪瘟活疫苗(兔源)、诊断制品生产线),投标供应商非所投产品生产厂家的须提供所投产品生产厂家兽药GMP证书、生产许可证(含猪瘟活疫苗(兔源)、诊断制品生产线)。[b][font=inherit]三、获取招标文件[/font][/b]时间: 2024年03月02日 至 2024年03月08日 ,每天上午 00:00:00 至 12:00:00 ,下午 12:00:00 至 23:59:59 (北京时间,法定节假日除外)地点:内蒙古自治区政府采购网方式:在线获取。获取采购文件时,需登录“政府采购云平台”,按照“执行交易→应标→项目应标→未参与项目”步骤,填写联系人相关信息确认参与后,即为成功“在线获取”。售价: 免费获取[b][font=inherit]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font][/b]2024年03月26日 08时30分00秒 (北京时间)地点: 内蒙古自治区政府采购网(政府采购云平台)[b][font=inherit]五、公告期限[/font][/b]自本公告发布之日起5个工作日。[b][font=inherit]六、其他补充事宜[/font][/b]本项目开标地点:内蒙古自治区通辽市开鲁县通辽市公共资源交易中心开鲁分中心开鲁县分中心开标室一[font=inherit]本项目采用“不见面开标”模式进行开标(投标人无需到达开标现场,开标当日在投标截止时间前登录“内蒙古自治区政府采购网--政府采购云平台”参加远程开标)。请投标人使用投标客户端严格按照招标文件的相关要求制作和上传电子投标文件,并按照相关要求参加开标。[/font][b][font=inherit]七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息[/b]名称:开鲁县动物疫病预防控制中心地址:开鲁镇胜利街农牧局院内联系方式:13848958528[b]2.采购代理机构信息[/b]名称:通辽市公共资源交易中心开鲁县分中心地址:内蒙古通辽市开鲁县开鲁镇南部新区政务服务中心办公楼联系方式:0475-2362696[b]3.项目联系方式[/b]项目联系人:孙世利电话:0475-2362696
[quote][b]项目概况[/b]河北省血液中心不规则抗体及残余白细胞等试剂耗材采购项目 招标项目的潜在投标人应在河北省成套招标有限公司601室获取招标文件,并于2023年02月22日 09点30分(北京时间)前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:HBCT-230115项目名称:河北省血液中心不规则抗体及残余白细胞等试剂耗材采购项目预算金额:34.5100000 万元(人民币)采购需求:01包:不规则抗体检测细胞等试剂;02包:残余白细胞试剂耗材;03包ABO血型、RH血型室内质量控品合同履行期限:合同签订后一年本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称:河北省血液中心地址:石家庄市和平路299号联系方式:袁女士 0311-870443142.采购代理机构信息名 称:河北省成套招标有限公司地 址:石家庄市工农路486号联系方式:常女士 0311-830869303.项目联系方式项目联系人:常女士电 话: 0311-83086930
当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候,如何选择适合我们实验需要的抗体,并恰当保存使用,是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多,品牌众多,技术参数不一,价格和质量更是相差甚大,如何购买到高质量价格合适的抗体,并准确地做出我们想要的结果,其中有很多细节需要注意。一、怎样选择适合你实验需要的抗体1. 一抗选择要点(1)确定抗体的名字,注意中英文名字、它名、亚型等信息。(2)确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证,请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。(3)确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验,请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。(4)样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性,蛋白空间构象的改变,会影响抗体的免疫亲和反应。(5)单多克隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。2. 二抗选择要点(1)种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗,以与后面的SP结合反应,而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗,如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。二、抗体的稳定性1. 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果。抗体是免疫系统中最重要的分子之一,其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中,抗体分子形成了保守而稳定的结构。2. 抗体分子的高Tm值。在室温下,甚至短时间温度达到50-60℃,抗体分子都能维持正确折叠,保持应有的活性。3. 抗体的纯度。采用先进的抗体纯化技术,确保抗体产品的高纯度,保障其抗体产品的稳定性。4. 抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失,高浓度的抗体稳定性更好,抗体产品中93%的浓度大于0.5mg/ml。三、怎样确定抗体购买渠道和品牌国外著名抗体品牌的质量一般没问题,但价格较贵,而且很多抗体品牌本身不生产抗体,所以能找到OEM抗体生产商生产的原装进口抗体,如美国的ProSci公司,大部分常用抗体都可以在ProSci网站上查找到,同样一支抗体能少花费1000元,对于一个普通实验室来说,那将节约非常多的科研经费,而且ProSci会提供信号通路的小包装抗体作为一个试剂盒,这样极大方便了用户,特别是经费不是很充足的用户。随着网络技术的越来越普及,我们自己就可以通过国内外的相关网站来检索,国外最大的生物试剂查询网站:biocompare,国内最大的生物试剂查询网站:丁香通,来查找我们所需要的产品资料。四、怎样保存已获得的抗体
猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成,用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟,操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时,在检测区和对照区各形成一条色线,则视为阳性,抗体滴度越高,检测线颜色越深;当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时,只在对照区形成一条色线,则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图,将检测线的颜色深浅与参照图对照,便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1.打开包装袋,取出检测卡平放在桌面上,并做好标记;2.在检测卡的加样孔内加入2 滴(50-100ul)血液或血清样品;3.在20 分钟内观察和记录结果,超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性:在检测区(T)和对照区(C) 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深,表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性:在检测区(T)和对照区(C)各出现一条紫红色线,但检测线颜色很浅。阴性:只在对照区(C)出现一条紫红色线。无效:都不出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线,对照区(C)不出现紫红色线。【结果参考意义】1.强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高,暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫;2.弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,这时应该及时进行猪瘟疫苗接种,此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间;3.阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,如果动物群体健康,应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时,则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1.请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2.检测样品可以是猪血液或血清。3.检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用,尽量避免长时间放置在空气中,否则吸潮后将失效。4.检测环境应保持一定的湿度,避风和避免在过高温度下进行操作。5.检测卡在室温下保存,如在2-8℃冷藏,使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装(内含检测卡、吸管和干燥剂);50 头份/盒【贮藏和有效期】密封,在干燥处保存;在3-30℃下贮存,有效期为12 个月。
[b][font=inherit]项目概况[/font][/b]抗核抗体(ANA)检测试剂盒等试剂耗材招标项目的潜在投标人应在西安市高新区科技三路57号融城云谷B座1201室获取招标文件,并于 2023年02月02日 14时30分 (北京时间)前递交投标文件。[b][font=inherit]一、项目基本情况[/font][/b]项目编号:DXSY2022-068项目名称:抗核抗体(ANA)检测试剂盒等试剂耗材采购方式:公开招标预算金额:1,725,000.00元采购需求:合同包1(抗核抗体(ANA)检测试剂盒等试剂耗材):合同包预算金额:1,725,000.00元合同包最高限价:1,725,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]1-1[/td][td]诊断用生物试剂盒[/td][td]抗核抗体(ANA)检测试剂盒等试剂耗材[/td][td]1(批)[/td][td]详见采购文件[/td][td]1,725,000.00[/td][td]1,725,000.00[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:2023-03-01 00:00:00 至2024-02-28 00:00:00(具体服务起止日期可随合同签订时间相应顺延)
哪位专家高手了解ELISA试剂盒检测抗体的不确定度??看了几篇相关文献,跟我们的试剂盒不太一样,目前脑袋简直一团浆糊http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09512.gif,1.重复测定是为了计算不确定度而重复的吗?因为正常样品读数的时候只读一次啊。2.阳性对照、阴性对照的不确定度要单独考虑吗?3.操作过程中用了5-50ul和50-300ul2种量程的移液器,用了10ul,30ul,100ul 3个点,那么移液器的不确定度是要把这3个合并吗?移液器的不确定度又是怎么确定的呢?盼解答~
一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS 流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。(2)样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。4 一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。5 二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。6 双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
软件介绍: 只要能上网,就可以直接查找您所想要的试剂,抗体,仪器等,数量超全,超过50万种产品。(还不赶快试试??) 更关键的是纯绿色软件,绝对安全,解压缩即用,软件仅1M。而且[color=#00008B]完全免费![/color][URL=http://www.instrument.com.cn/download/shtml/042264.shtml]点击下载[/URL]
猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成,用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟,操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时,在检测区和对照区各形成一条色线,则视为阳性,抗体滴度越高,检测线颜色越深;当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时,只在对照区形成一条色线,则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图,将检测线的颜色深浅与参照图对照,便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1.打开包装袋,取出检测卡平放在桌面上,并做好标记;2.在检测卡的加样孔内加入2 滴(50-100ul)血液或血清样品;3.在20 分钟内观察和记录结果,超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性:在检测区(T)和对照区(C) 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深,表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性:在检测区(T)和对照区(C)各出现一条紫红色线,但检测线颜色很浅。阴性:只在对照区(C)出现一条紫红色线。无效:都不出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线,对照区(C)不出现紫红色线。【结果参考意义】1.强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高,暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫;2.弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,这时应该及时进行猪瘟疫苗接种,此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间;3.阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,如果动物群体健康,应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时,则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1.请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2.检测样品可以是猪血液或血清。3.检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用,尽量避免长时间放置在空气中,否则吸潮后将失效。4.检测环境应保持一定的湿度,避风和避免在过高温度下进行操作。5.检测卡在室温下保存,如在2-8℃冷藏,使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装(内含检测卡、吸管和干燥剂);50 头份/盒【贮藏和有效期】密封,在干燥处保存;在3-30℃下贮存,有效期为12 个月。
随着生命科学的发展,围绕蛋白进行的研究越来越多,抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。面临着纷呈复杂的抗体试剂市场,如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。一、关于特异性的选择:特异性的选择主要需要考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。1、蛋白特异性:针对需要检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达,则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式,特殊表型的蛋白需要进行序列比对,并结合抗体免疫原序列,查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点,不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在,不宜一概而论。2、种属特异性:同种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的,根据蛋白的同源性情况与其他种属发生交叉反应。需要参照说明书注明的可反应种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,可以通过蛋白的序列比对,选择同源序列免疫的抗体,不过一般这种情况生产商不会受理其关于质量的申诉,如果可以申请到免费的抗体样品,则利于抗体选择。3、实验方法特异性:目前使用抗体的实验方法有很多,不同的使用方法过程中,因为对蛋白样品的处理方式不一样,蛋白的含量有差异,对抗体的识别表位和效价要求都是不一样的。具体的根据说明书注明的产品应用方法进行选择。但是生产商一般不会将每个抗体都进行各种实验的检测,目前检测比较多的只是WB、IHC、IF等,如果针对具体的实验方法没有找到合适的抗体的,可以结合蛋白序列分析和抗体的抗原信息,选择尽可能有效果的抗体。同样,申请到免费的抗体样品是个很好的途径。4、标记物的特异性一般基于实验操作的实验方法不会使用带有标记的一抗,比如WB、IHC等,都是通过二抗类的试剂标记达到结果呈现的目的。但是基于仪器分析的一些实验,可能就会使用到直接标记的一抗,比如流式实验。那么需要了解到自己将要使用的仪器能检测到的荧光范围,针对不通的参数要求选择对应的标记物。在免疫荧光双标实验中,需要选配不同的荧光标记物。
实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体,也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
[b][font=inherit]项目概况[/font][/b]艾防所HCV抗体快速检测试剂采购项目采购项目的潜在供应商应在陕西省西安市碑林区红缨路南口6号均明拍卖广场4层获取采购文件,并于 2022年11月16日 15时00分 (北京时间)前提交响应文件。[b][font=inherit]一、项目基本情况[/font][/b]项目编号:ZX2022-11-23项目名称:艾防所HCV抗体快速检测试剂采购项目采购方式:竞争性谈判预算金额:700,000.00元采购需求:合同包1(艾防所HCV抗体快速检测试剂采购项目):合同包预算金额:700,000.00元合同包最高限价:700,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]1-1[/td][td]无衬背的诊断或实验用试剂[/td][td]HCV抗体快速检测试剂[/td][td]1(批)[/td][td]详见采购文件[/td][td]700,000.00[/td][td]700,000.00[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:交货期:接甲方通知后72小时内送至指定位置
质谱技术是抗体药物分析最重要的技术手段之一。本文简述了抗体药物的发展和质谱技术的原理。对于质谱技术在抗体药物的分析中应用进行了归类整理,主要分为在一级结构和高级结构分析中的应用。抗体类药物是指含有抗体片段的蛋白类药物,所以在恶性肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快速的发展,是当前生物药物领域增长最快的一类药物.1.抗体药物发展新趋势在生物药物领域,抗体药物占据着越来越重要的地位,全球销售排名前10位的药物中有6个为抗体药物,抗体药物按来源分类可以分为:鼠源单克隆抗体、人鼠嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。目前,批准的单克隆抗体药物中,人源化单抗和全人源单抗数量已占据大多数。1.1 抗体药物偶联物(ADC)抗体药物偶联物(ADC)由单克隆抗体和小分子化合物两部分组成。通过抗体的靶向作用,ADC 的抗体部分和肿瘤细胞表面抗原特异性识别并结合,通过细胞内吞作用,将抗体和小分子化合物一起带进肿瘤细胞内部,释放出小分子化合物。这样既可以降低小分子药物的毒性,同时具有靶向结合的作用。已经上市的两个ADC 是Kadyla 和Adcetris。1.2 双特异性抗体(BsAb)双特异性抗体(BsAb)是含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体,能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁,由于基因工程的发展,目前双特异性抗体已经研发出多种类型,主要类型有三功能双特异性抗体、IgG-scFv、三价双特异性分子、串联单链抗体(串联scFv)、DVD-Ig 等多种形式。2.质谱技术近年来质谱仪性能的显著改进主要基于开发出的两种离子化技术:一种是介质辅助的激光解吸/离子化技术。另一种是电喷雾离子化技术。由于这两种电离技术的出现,使原本只能检测小分子的质谱技术,可以运用于检测生物大分子。在过去质谱技术主要运用于对一级结构和序列的表征,而现在质谱技术越来越多地运用于高级结构的分析,而高级结构对于抗体药物的生物活性至关重要。3.质谱技术在抗体药物一级结构分析中的应用3.1 完整抗体药物精确分子量测定当得到抗体药物时,可以直接通过高分辨率的MALDI-TOF或者ESI-MS进行分子量的检测。通过对于脱糖后分子量的检测,可以对于抗体药物进行初步定性分析,并将可以作为药物常规放行的分析方法。对于脱糖前的抗体药物进行分析,可以得到抗体药物的糖基化类型的信息及糖基化水平的分布,对于快速了解生产工艺与药物质量的关系具有十分重要的意义。3.2 药物抗体偶联比(DAR)对于赖氨酸链接的抗体偶联药物,采用C4色谱柱及联用的质谱对去糖基化样品进行分析,根据偶联不同数目药物分子的质量数增加判断偶联数目。对于质谱测定的结果,不仅可以给出确切的药物抗体偶联比值,更能够给出链接不同个小分子药物的分布情况,及反应过程副产物空链接头的分布情况。3.3 肽图谱分析蛋白被特异酶切后的蛋白酶水解后得到的肽片段质量图谱。由于不同的抗体药物具有不同的氨基酸序列,蛋白质被酶水解后,产生的肽片段也各不相同,肽混合物的质量数具有唯一特征。可以通过LC-ESI-MS进行肽片段的一级质量数的鉴定,也可以通过LC-ESI-MS/MS对于每个肽片段进行进一步确证,提高肽图谱的准确性。3.4 翻译后修饰研究蛋白质的翻译后修饰(PTM)对于抗体药物的生物学功能十分重要。常见的翻译后修饰有:磷酸化、脱酰胺、甲硫氨酸氧化、糖基化修饰、N端焦谷氨酸环化,C端赖氨酸切除等。质谱分析仪检测蛋白和肽片段的分子量偏差,可以实现高灵敏、高通量和高精确地鉴别蛋白质的翻译后修饰的种类。3.5 N端氨基酸序列检测常规N端氨基酸检测用Edman降解法进行检测,但是抗体药物有时候会出现N 端环化的现象,在这种情况下用Edman降解法需要先对抗体进行去封闭处理,而直接使用质谱可以直接测出N端的氨基酸序列,同时可以检测出N端环化的相对比例。4.质谱技术在抗体药物高级结构分析中的应用4.1 氢/氘交换质谱(HDX-MS)常规的质谱只能获得蛋白的一级结构信息。氢/氘交换质谱(HDX-MS)可以进行蛋白质构象,溶液动力学和表位映射进行分析。在能够调查的蛋白质的高阶结构和动态结构技术中,HDX-MS已经证明适合单克隆抗体和单克隆抗体-抗原复合物的构象分析。4.2 离子淌度质谱法(IM-MS)离子淌度是根据蛋白的电荷和形状选择性分离的方法,可以区分相同分子量的蛋白和肽段,可用于检测蛋白的简单高级结构。4.3 高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱(FTICR-MS)高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱(FTICR-MS)能够检测最高质量数的质谱仪器,并且有着很高的分辨率。FTICR-MS 是目前被公认为是蛋白质组学研究的有力工具,特别是和完整的蛋白质鉴定和上/下调翻译后修饰(PTM)蛋白质的鉴定。
罂粟壳为罂粟干燥成熟果壳,内含吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因等生物碱。罂粟壳检测方法有试剂盒快速定性法、气相色谱法、高效液相色谱法。 试剂盒快速定性法检测罂粟壳 1.原理 试剂盒(MOP)采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫技术,通过单克隆抗体竞争结合吗啡偶联物及含有的吗啡、可待因、海洛因等物质。 2.试剂 ①O.05mol·I.1 Pb(N03)2液。 ②吗啡标准品(中国药品生物制品检定所)。 ③吗啡胶体金法检测MOP(ACON公司)。 3.检测步骤 取5 mL样液于试管中,加O.05 tool·L叫Pb(NO。)2液6滴,混匀,2 min后过滤于试管中,加入该滤液5滴于MOP试剂盒的加样(S)孑L中,5 rain后观察,若为阳性则为罂粟壳。 4.说明 样品中的吗啡浓度为4。0 ng·mL~、可待因、海洛因、福尔可定等浓度≥300 ng/mI。时,均显示阳性反应。 更多相关知识请参考国家标准物质网资料中心
[font='calibri'][size=13px]什么是重组抗体?重组抗体的优势介绍[/size][/font]与传统抗体相比,重组抗体具有几个关键优势。这些包括良好的批次间一致性,持续供应以及对抗体工程的适应性. 因此,重组抗体在科学研究中的应用日益广泛,特别是作为解决持续存在的可重复性难题的一种手段。什么是重组抗体?传统的多克隆和单克隆抗体是正常 B 细胞发育和基因重组的产物。它们是通过用抗原免疫动物以引发免疫应答而产生的。多克隆抗体由许多不同的 B 细胞克隆分泌并识别多个抗原表位,而单克隆抗体则来自单个 B 细胞克隆,并且仅对单个表位具有特异性。重组抗体是单克隆抗体,但是其生产涉及体外遗传操纵。将抗体基因克隆到表达载体中后,将其转染到合适的宿主细胞系中进行抗体表达。哺乳动物细胞系最常用于重组抗体的生产,然而细菌、酵母或昆虫来源的细胞系也适用。①良好的批次间一致性由于重组抗体的生产涉及对抗体轻链和重链进行测序,因此这是一个高度可控且可靠的过程。相反,用于生产单克隆抗体的基于杂交瘤的系统容易发生遗传漂移和不稳定,从而增加了批次间变异或抗体表达缺失的可能性。重组抗体在批次之间高度一致,从而确保了可重复的实验结果。②可规模化体外生产抗体的方法适合大规模生产,这意味着抗体的可获得性不太可能成为限制因素。此外,由于重组抗体序列是已知的,因此确保了供应的连续性;如需将抗体用于大规模长期研究,这可能就是一个至关重要的因素。③顺应工程化了解抗体的肽序列为工程化提供了许多机会。这些包括同种型转换(也称为类转换)和种属转换,这两种方法都可以通过允许在实验中利用那个同种型或种属特定的二抗来增加多重实验的范围。工程学的进一步应用是使用体外抗体选择系统(例如抗体噬菌体展示)来改善抗体特异性。④无动物源性生产与传统的抗体生产方法不同,重组方法避免了使用动物的需要。多克隆抗体直接从免疫宿主血清中纯化,单克隆抗体从杂交瘤来源的组织培养上清液 (TCS) 或腹水中纯化,而重组抗体是从转染宿主细胞系的 TCS 中纯化。无论抗体是多克隆抗体、单克隆抗体还是重组抗体,在实验使用前都必须在预期应用中对其进行适当验证。在CST,我们遵守抗体验证标志,即在任何特定实验方法中的确定抗体特异性、敏感性和功能性的六个互补策略通过针对每种抗体产品精心定制这些策略,我们保证 CST 抗体适合用于帮助您获得可信赖的结果。[align=center][img=大规模重组抗体生产服务,690,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305241528536465_2058_5907840_3.png!w690x191.jpg[/img][/align]义翘神州已通过ISO9001认证,在规模化生产重组单克隆抗体方面积累了丰富的经验。我们拥有完善的大规模重组抗体表达生产平台,可提供从毫克级到公斤级重组抗体生产服务,满足客户高通量、大规模的生产要求。更多[url=https://cn.sinobiological.com/services/large-scale-antibody-production-service][b]大规模重组抗体生产服务[/b][/url]详情尽在:https://cn.sinobiological.com/services/large-scale-antibody-production-service
国家药监局:我国首家自主知识产权新冠病毒中和抗体联合治疗药物获批上市.
影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面,一是反应物自身的因素;二是反应环境条件。 (一)反应物自身的因素 1.抗体:不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应。 2.抗原:抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。 (二)反应环境条件 1.电解质:抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。 2.酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6~9进行,有补体参与的反应pH为7.2~7.4,pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。 3.温度:在一定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速。一般为15℃~40℃,常用的抗原抗体反应温度为37℃,温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏。此外,适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应。
80%)的提取方法。Ø 高灵敏度(0.25 ppb)。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到2小时。试剂盒原理REAGEN™替米考星酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联免疫反应原理,含有替米考星的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争一抗,抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗,形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。检测过程以下为计算份量的表格,用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。 试剂每个反应需要的体积24次反应的体积一抗100 mL2.4mL二抗工作液150 mL3.6 mL工作洗液2 mL48 mL终止液100 mL2.4 mL底物100 mL2.4 mL (1) 加入50mL的标准品或样品于所设定的孔中;(2) 在每孔中加入100mL一抗,轻轻摇动微孔板混匀1分钟;(3) 室温(22.5±2.5)°C避光孵育30分钟;(4) 洗板3次,每次加入250mL
[font=宋体]什么是抗体开发?抗体开发包含了抗体生成和表征的全过程。首先,将目的抗原注射入实验动物体内,使其免疫系统生成大量抗体。[/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发[/b][/url]的方法各有不同。例如,多克隆抗体可直接从血清中纯化,而单克隆抗体则需要先培养杂交瘤或先构建噬菌体展示抗体库。[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州作为行业领先的抗体研发公司,提供从抗原合成、研发和生产的一站式[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务。通过我们的抗体制备平台,我们随时准备帮助您应对研究中遇到的严峻挑战。[/font][/font][b][font=宋体]义翘神州提供抗体定制开发服务:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]快速单克隆抗体开发、[url=https://cn.sinobiological.com/services/fast-antibody-service][b]快速多克隆抗体开发[/b][/url]、磷酸化抗体定制服务、[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体服务[/b][/url][/font][b][font=宋体]抗体开发技术平台:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的定制抗体开发服务,包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发,以及针对特定应用的抗体开发,例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来,从抗原设计到抗体纯化和鉴定,我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势,为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制,开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质,可线上购买,作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术,极大程度提高抗体质量和成功率。因此,义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台,该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品,还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品,并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体,作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发,义翘神州已建立四种抗体生产平台,可用于快速高通量抗体生产和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体([/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克),只需几周时间,即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术,极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里,我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率,生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台,包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])检测平台、流式([/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体])检测平台、免疫荧光([/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体])检测平台以及免疫沉淀([/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体])检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]详情可以关注义翘神州抗体开发页面。[/font][font=宋体][font=宋体]文章来源:抗体开发[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体][b]一、引言[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体药物已成为生物医药领域的重要组成部分,并在肿瘤、自身免疫性疾病等多种疾病的治疗中发挥着关键作用。随着抗体技术的不断发展,抗体开发技术路线也在不断演进和优化。本文将探讨抗体开发的全过程,从靶点发现到临床应用,为相关领域的研究者提供参考。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]二、靶点发现与验证[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]靶点发现是抗体药物开发的首要步骤,涉及对疾病相关抗原的识别和验证。这一阶段的关键技术包括基因组学、蛋白质组学和免疫学方法,旨在识别与疾病相关的靶点,并验证其功能和特异性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、抗体生成与筛选[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在靶点验证的基础上,通过[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology][b]杂交瘤技术[/b][/url]、转基因动物技术、噬菌体展示技术等手段,生成一系列针对靶点的单克隆抗体。随后,通过亲和力筛选、功能性筛选等手段,选择具有良好特异性和活性的抗体进行进一步开发。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]四、抗体优化与工程化[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了提高抗体的稳定性、亲和力以及减少潜在的不良反应,需要对筛选得到的抗体进行优化和工程化改造。这一过程涉及抗体的基因突变、人源化、亲和力成熟等策略,旨在提高抗体的药效和降低潜在的免疫原性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]五、临床前研究与评价[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在抗体优化后,进入临床前研究阶段,对抗体进行系统的药理学、毒理学和药代动力学研究。这一阶段主要评估抗体的安全性和有效性,为后续的临床试验提供依据。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]六、临床试验与上市申请[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]经过临床前研究的验证,抗体药物进入临床试验阶段。按照药物临床试验的规范,对抗体药物进行多阶段、多中心的临床试验,评估其在人体内的安全性和疗效。经过严格的审批程序后,可向药品监管部门提交上市申请。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]七、总结与展望[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体开发技术路线是一个复杂而系统的过程,涵盖了从靶点发现到临床应用的各个环节。随着生物技术的不断进步和新型抗体的不断涌现,抗体药物的开发将更加高效和精准。未来,随着人工智能、基因编辑等新技术的应用,抗体药物的开发将迎来更多的创新和突破。同时,随着免疫疗法的发展,抗体与其他免疫细胞的联合治疗将为疾病治疗提供更多的可能性。我们期待着更多高效、安全、个性化的抗体药物问世,为人类健康事业做出更大的贡献。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的[url=https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services][b]定制抗体开发服务[/b][/url],包括[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-development][b]多克隆抗体开发[/b][/url]、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-development][b]单克隆抗体开发[/b][/url],以及针对特定应用的抗体开发,例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来,从抗原设计到抗体纯化和鉴定,我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势,为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇([/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体])组成,每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区,也可存在于轻链可变区,或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体三种类型:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原非中和型[/font][font=宋体]不具有抗体结合区特异性,治疗性抗体仍可与其目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体可用于检测抗体药物总量。[/font][font=宋体]②抗原中和型[/font][font=宋体]具有抗体结合区特异性,与其目标抗原相互竞争,因此,此类型可用于检测游离型抗体药物。[/font][font=宋体]③药物靶标复合物型[/font][font=宋体][font=宋体]仅特异性地识别抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]靶标复合物,不与未结合的抗体或未结合的目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体仅能检测结合型抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体]①免疫原性分析[/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性分析对于生物药物开发具有重要的意义。几乎所有的生物制药产品(如蛋白、抗体、多肽偶联药物或寡核苷酸等)都会诱导机体内免疫应答,从而导致抗药抗体([/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体])的产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体属于高度特异性[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]。多克隆抗体能较大限度地模拟血样中的真实情况,还具有制备周期较短和成本低的优势。因此,大多数情况下,在分析患者样本中是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]时,抗独特型多克隆抗体通常用作阳性对照。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体也是药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析的关键工具试剂之一。 在临床前研究和临床研究中,[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析可用于评估抗体药物的用药剂量和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型单克隆抗体特异性强,可作为[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析的检测试剂,用于检测人或动物血清中的抗体药物含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备服务[/b][/url],同时拥有综合性的抗独特型抗体开发平台,涵盖兔多抗、杂交瘤、噬菌体、流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术,为客户提供更多选择。详情可以关注抗独特型抗体制备服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service[/font][/font]
[font=宋体]什么是抗体结合?抗体结合也被称为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url],是一种可将特定标记物共价连接到抗体分子上的抗体修饰技术。这些标记抗体可用于从细胞,组织,或者整个个体的混合物中分离和纯化的目的蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]辣根过氧化酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])是最常见的抗体酶标记类型。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]上仅有[/font][font=Calibri]6[/font][font=宋体]个赖氨酸,而且它们的修饰并没有较多的影响酶活性。常见的荧光染料有[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]等,均可用于标记抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发,义翘神州还可以提供抗体标记服务,可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]标记方法:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体])标记抗体、抗原:常用于标记抗体的活化生物是[/font][font=Calibri]BNHS[/font][font=宋体];对于偏酸性的抗原,标记时多采用[/font][font=Calibri]BHZ[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体])标记酶:以生物素标记[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]为例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]标记注意事项:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]待标记物的蛋白浓度不能过低,如若浓度过低需经超滤浓缩等手段提高浓度至[/font][font=Calibri]0.1mg/mL[/font][font=宋体]以上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]一个蛋白质可能被多个生物素标记,标记时,生物素与待标记物应有合适的比例,确保标记后不影响待标记物的活性。推荐生物素:抗原蛋白比例为[/font][font=Calibri]1~3[/font][font=宋体]:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体],生物素:抗体比例为[/font][font=Calibri]5~20[/font][font=宋体]:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]或根据标记试剂盒说明书推荐比例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]为减少空间位阻影响,基于检测灵敏度特异性等要求,可在生物素与被标记物之间加入交联臂结构。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]如果偶联基团为氨基,待标记物的系统不得含有游离的氨基([/font][font=Calibri]Tris,[/font][font=宋体]氨基酸)、载体蛋白([/font][font=Calibri]BSA[/font][font=宋体])或者其他干扰物,若有干扰物需要用标记缓冲液反复超滤确保其去除干净,若采用其他基团偶联试剂,待标记物系统亦不能有含对应的游离基团的物质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]如果待标记物为分子量较小的物质,在纯化过程中注意超滤管、脱盐柱、透析袋的截留分子量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]标记反应后的体积量至少在[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]μ[/font][font=Calibri]L[/font][font=宋体]以上,以达到纯化时的最小上样量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7. [/font][font=宋体]标记反应完成后(氨基偶联体系),可在体系中加入适量的含游离含氨基小分子物质,中和游离的生物素活化试剂,提高纯化效率,减少后续反应的假阳性和高背景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8. [/font][font=宋体]纯化后的标记蛋白可采用[/font][font=Calibri]A280[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]法测定蛋白含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]9. [/font][font=宋体]标记纯化后的蛋白可根据蛋白性质进行分装长期保存,减少冻融次数。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多抗体标记详情可以参考:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体]主流的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发平台[/b][/url]有多个,其中最常用的是基于杂交瘤技术的平台。该技术通过将免疫细胞与肿瘤细胞融合,产生能够产生抗体的杂交瘤细胞,从而制备出单克隆抗体。随着技术的发展,基于噬菌体展示技术的平台也逐渐成为主流。该技术通过将抗体片段与噬菌体蛋白融合,展示在噬菌体表面,从而筛选出具有所需特性的抗体。此外,基于转基因小鼠技术的平台也是常用的抗体开发平台之一。这些平台为抗体开发提供了强大的技术支持,使得研究人员能够快速、高效地开发出针对特定抗原的抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的[url=https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services][b]定制抗体开发服务[/b][/url],包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发,以及针对特定应用的抗体开发,例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来,从抗原设计到抗体纯化和鉴定,我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势,为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。下面是义翘神州抗体开发平台:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制,开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质,可线上购买,作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术,极大程度提高抗体质量和成功率。因此,义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台,该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品,还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品,并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体,作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发,义翘神州已建立四种抗体生产平台,可用于快速[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量抗体生产[/b][/url]和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体([/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克),只需几周时间,即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术,极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里,我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率,生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台,包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])检测平台、流式([/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体])检测平台、免疫荧光([/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体])检测平台以及免疫沉淀([/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体])检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font]
美国科学家近日鉴别出一种小型抗体片段,能够高效地抑制HIV的感染。这一发现将有助于研发抗HIV和其它病毒的新疗法。相关论文在线发表于美国《国家科学院院刊》(PNAS)上。 HIV感染很难治疗,因为它会发生突变,并对抗逆转录病毒药物产生抗性。虽然所有抗体的总体结构都非常相似,但它们末端的一小段区域变化极大,使得它们能够绑定到不同的抗原。之前的研究显示,将抗体缩小至最小的独立功能片段,称作可变域,能够扩展它们的作用。名为域抗体(dAbs)的这些片段保留着可变末端结构,以及母本抗体的抗原绑定特异性。因为尺寸小,它们能够接近大型完整抗体无法达到的标靶。 在早先的研究中,科学家在巡检抗HIV蛋白Env的大型抗体库时,发现了名为m0的独特抗体。论文作者之一、美国国立癌症研究所的Dimiter S. Dimitrov说:“我们发现的抗体展现了抑制HIV的能力,并且具有能让我们建立新型文库的特性,这一文库包含了能直接抵抗HIV的dAbs。” 在最新研究中,基于m0的框架,科学家建立了一个大型的dAbs库(250亿中不同的dAbs),从中鉴别出了名为m36的dAb,它能够强力地绑定到不同的Env蛋白,并能广泛地阻止HIV菌株的感染。研究人员认为,m36是已报告的人类首个抗HIV的dAb。 Dimitrov说:“我们鉴别出的抗体片段m36,在抑制HIV的治疗药物的研发中可能具有潜力。对它的进一步研究可能揭示HIV怎样感染细胞,以及它怎样逃避免疫系统的中和。” 研究人员目前正在测试m36与其它抑制剂多种不同的联合,这种联合可能对抗HIV有效。研究人员也在尝试构造更强力的m36版本。与产业界的合作也将加速评价m36作为HIV潜在疗法的能力。同时,研究人员也正在利用此次方法鉴别抗癌和抗其它疾病相关抗原的dAbs。
1891年10月,抗体(antibody)一词首次出现在保罗·埃尔利希公布的《免疫力的试验性研究》这篇文章中,德语的抗体"Antikörper"出现在该文章的结论部分。从此,科学家们开始了对抗体的探索和研究。二十世纪三四十年代,人们已经认识到抗体是一种蛋白质,并且可以识别抗原的空间结构。六十年代,罗德尼·罗伯特·波特和杰拉尔德·埃德尔曼揭示了抗体的化学结构,并因此获得1972年的诺贝尔生理学或医学奖。同一时期,人们发现了IgA, IgD, IgE等亚型的抗体。1975年,分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦建立杂交瘤技术,这是第一代单克隆抗体技术。他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。基于杂交瘤的单克隆抗体技术一经问世,迅速被应用于疾病诊断,治疗等用途中,使用中人们发现,鼠源的单克隆抗体很容易在人体内产生免疫反应,随后,1988年,Greg Winter等人率先提出了人源化抗体的方法,解决了这一问题。这是第二代单克隆抗体技术。而近来流行的兔单克隆抗体,是一种新型的技术,它基于杂交瘤或者噬菌体展示技术,这种方法产生的抗体在保持特异性的同时,具有更高的亲和力和灵敏度,实际使用时,工作浓度更低,背景更低,用作免疫组化等用途时,有时甚至可以免去抗原修复的步骤。时至今日,抗体的生产技术已经非常成熟。单克隆抗体已经应用于临床诊断,肿瘤治疗,自身免疫病治疗等诸多方面,日渐成为治疗各种顽疾的终极武器。